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足细胞内陷性肾小球病合并系统性红斑狼疮一例
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作者 黄文文 潘殊方 +1 位作者 陈琰 郑育 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期858-860,共3页
足细胞内陷性肾小球病(podocytic infolding glomerulopathy,PIG)是一类罕见的肾小球病,近年来逐渐被认为是一类新的疾病类型.PIG的诊断依赖于电镜下的特殊表现,其发病机制仍不清楚,治疗方案尚无共识.本院收治一例PIG合并系统性红斑狼疮... 足细胞内陷性肾小球病(podocytic infolding glomerulopathy,PIG)是一类罕见的肾小球病,近年来逐渐被认为是一类新的疾病类型.PIG的诊断依赖于电镜下的特殊表现,其发病机制仍不清楚,治疗方案尚无共识.本院收治一例PIG合并系统性红斑狼疮(SLE)患者,经激素联合吗替麦考酚酯治疗,患者临床症状缓解,尿蛋白量减少.目前,此类病例报道多见于日本,国内类似病例报道极少. 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 足细胞 肾小球 足细胞内陷性肾小球病
肾脏足细胞B7-1抗原呈递与CTLA4-Ig研究进展
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作者 程金波 熊加川(综述) 赵景宏(审校) 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期68-72,42共6页
作为肾小球滤过屏障主要组成部分的足细胞,在特定致炎因素诱导下,可具有抗原呈递的特性,扮演非专职抗原呈递细胞的角色,并启动自身免疫反应,从而导致足细胞损伤和蛋白尿,可能在糖尿病肾病、狼疮性肾炎、微小病变肾病、局灶节段性肾小球... 作为肾小球滤过屏障主要组成部分的足细胞,在特定致炎因素诱导下,可具有抗原呈递的特性,扮演非专职抗原呈递细胞的角色,并启动自身免疫反应,从而导致足细胞损伤和蛋白尿,可能在糖尿病肾病、狼疮性肾炎、微小病变肾病、局灶节段性肾小球硬化及膜性肾病等肾小球足细胞疾病的发病中起作用。因此,阻断由足细胞启动的抗原呈递过程,有望为治疗此类疾病的新的途径。近年来,抗原呈递阻断剂CTLA4-Ig融合蛋白制剂在肾小球疾病的临床实践证实了这种可能,本文就肾脏足细胞B7-1抗原呈递与CTLA4-Ig的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 足细胞 抗原呈递 B7-1 足细胞 CTLA4-IG
基于RANK/RANKL通路对非诺贝特在高糖诱导足细胞损伤中保护机制的研究
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作者 付强 刘丽秋 杨鹏鹏 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期539-544,共6页
目的观察小鼠足细胞中细胞核因子κB(NF-κB)受体活化因子(RANK)及其配基(RANKL)在高糖刺激下的表达,并探讨非诺贝特的肾脏保护作用机制。方法以条件永生化小鼠足细胞为研究对象,足细胞分化成熟后随机分为对照组(Con)(5.5 mmol/L葡萄糖... 目的观察小鼠足细胞中细胞核因子κB(NF-κB)受体活化因子(RANK)及其配基(RANKL)在高糖刺激下的表达,并探讨非诺贝特的肾脏保护作用机制。方法以条件永生化小鼠足细胞为研究对象,足细胞分化成熟后随机分为对照组(Con)(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG)(30mmol/L葡萄糖)、高渗组(MA)(5.5 mmol/L葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇)、非诺贝特组(DF组)(30mmol/L葡萄糖+非诺贝特50μmol/L)。培养48 h后,噻唑蓝(MTT)法检测各组足细胞存活率;Western blot及RT-PCR检测各组足细胞标志蛋白及足细胞上RANK、RANKL蛋白和mRNA表达的变化。结果与Con组比较,HG组足细胞存活率明显降低(P<0.01),而DF组足细胞存活率较HG组升高(P<0.05)。与Con组比较,HG组RANK和RANKL蛋白及mRNA表达升高[(0.95±0.05)vs(0.18±0.03);(0.98±0.08)vs(0.28±0.03);(0.96±0.04)vs(0.17±0.02);(0.97±0.06)vs(0.25±0.02),P<0.05]。与HG组比较,DF组RANK和RANKL蛋白及mRNA表达降低[(0.55±0.04)vs(0.95±0.05);(0.53±0.03)vs(0.98±0.08);(0.51±0.05)vs(0.96±0.04);(0.49±0.05)vs(0.97±0.06),P<0.05]。结论高糖刺激下足细胞损伤可能与足细胞表达RANK及RANKL增多有关;在高糖环境下,非诺贝特可能通过抑制RANK及RANK的表达发挥保护足细胞的作用。 展开更多
关键词 足细胞 高糖 糖尿病肾脏疾病 核因子ΚB受体活化因子 非诺贝特
姜黄素对小鼠肾足细胞系(MPC5)自噬作用的影响
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作者 聂春迎 孙丽娜 +2 位作者 周忠启 张倩 李想 《中医药导报》 2019年第12期39-42,47共5页
目的:通过研究姜黄素(curcumin)对小鼠肾足细胞系(MPC5)自噬作用的影响,探讨姜黄素对糖尿病肾病足细胞保护作用的可能机制。方法:将足细胞分为6组:正常对照组(5.5 mmol/L)、高糖组(30 mmol/L)、姜黄素低、中、高浓度组(1μmol/L、5μmo... 目的:通过研究姜黄素(curcumin)对小鼠肾足细胞系(MPC5)自噬作用的影响,探讨姜黄素对糖尿病肾病足细胞保护作用的可能机制。方法:将足细胞分为6组:正常对照组(5.5 mmol/L)、高糖组(30 mmol/L)、姜黄素低、中、高浓度组(1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L)、雷帕霉素组(10 nmol/L)。Western blot分别检测LC3B、Beclin-1、Synaptopodin及Nephrin蛋白表达。将足细胞分为6组:正常对照组(5.5 mmol/L)、高糖组(30 mmol/L)、姜黄素低、中、高浓度组(1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L)、LY294002组(10μmol/L)。Western blot检测PI3K/Akt/mTOR信号通路中p-mTOR、p-Akt蛋白表达水平。结果:高糖组自噬相关蛋白LC3II/I比值及Beclin-1蛋白表达明显低于正常对照组(P<0.05);姜黄素组LC3B、Beclin-1等自噬标志性蛋白表达均高于高糖组(P<0.05);姜黄素组足细胞功能性标志蛋白表达水平明显高于高糖组(P<0.05);姜黄素组p-mTOR、p-Akt蛋白表达水平均低于高糖组(P<0.05)。结论:姜黄素能明显改善高糖刺激对小鼠肾足细胞的自噬抑制作用,并且通过抑制P13K/Akt/mTOR信号途径减轻足细胞损伤。 展开更多
关键词 姜黄素 自噬 足细胞 LC3B 糖尿病肾病
黄芪甲苷孵育的脂肪干细胞治疗糖尿病肾病 预览
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作者 高俊丽 朱赟洁 +2 位作者 刘国香 王巍巍 张金元 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第29期4629-4636,共8页
背景:研究表明,蛋白尿是糖尿病肾病进展的独立性危险因素,而蛋白尿的发生发展与足细胞的损伤密切相关。目的:观察移植黄芪甲苷孵育的人脂肪源性干细胞(astragaloside-incubated adipose stem cells,Ast-hADSCs)对糖尿病肾病模型大鼠肾... 背景:研究表明,蛋白尿是糖尿病肾病进展的独立性危险因素,而蛋白尿的发生发展与足细胞的损伤密切相关。目的:观察移植黄芪甲苷孵育的人脂肪源性干细胞(astragaloside-incubated adipose stem cells,Ast-hADSCs)对糖尿病肾病模型大鼠肾损伤的修复作用。方法:人脂肪源性干细胞购自美国ATCC公司,雄性SD大鼠购自上海中医药大学动物实验中心,实验方案经上海中医药大学动物实验伦理委员会批准。将SD大鼠随机分为正常组、模型组、人脂肪源性干细胞组及Ast-hADSCs组,后3组应用左肾摘除联合链脲佐菌素注射法建立糖尿病肾病大鼠模型,2个干细胞干预组经尾静脉输注人脂肪源性干细胞或Ast-hADSCs悬液,2周1次,共6次,模型组予等量生理盐水。实验结束(23周)取材,检测肾功能、血脂、尿微量白蛋白及尿蛋白定量,苏木精-伊红及MASSON染色观察肾脏病理变化及肾小球面积,WT-1染色检测足细胞密度,激光共聚焦观察干细胞在肾脏的分布情况。结果与结论:①与模型组比较,2个干细胞干预组总胆固醇、尿微量白蛋白及尿蛋白定量均下降,但Ast-hADSCs组下降更显著(P<0.05);②与模型组比较,2个干细胞干预组模型大鼠的三酰甘油、低密度脂蛋白、尿素氮、高密度脂蛋白水平无统计学意义(P>0.05);③肾脏病理提示:2个干细胞干预组的肾脏损伤减轻,肾脏指数及肾小球截面积显著缩小,足细胞密度显著增加(P<0.01);Ast-hADSCs组模型大鼠肾脏病理改善明显(P<0.05);④激光共聚焦显示:干细胞干预两组模型大鼠肾组织内可见少量红色荧光表达。结果说明:经尾静脉移植人脂肪源性干细胞可提高糖尿病肾病模型大鼠足细胞的密度,减轻肾脏损伤,从而改善蛋白尿;经黄芪甲苷孵育48h后,可在一定程度上提高人脂肪源性干细胞对糖尿病肾病模型大鼠受损肾组织的修复作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 人脂肪源性干细胞 黄芪甲苷 PKH26 细胞移植 足细胞 蛋白尿 肾功能
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他克莫司对嘌呤霉素损伤的足细胞中α-辅肌动蛋白-4表达的影响
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作者 冯洁莹 于力 +1 位作者 郝志宏 于生友 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2019年第13期1006-1010,共5页
目的研究他克莫司( FK506)和嘌呤霉素( PAN)对肾小球足细胞凋亡和α-辅肌动蛋白-4(α-actinin-4)mRNA及蛋白表达的影响,探讨FK506对足细胞的保护作用.方法体外培养小鼠肾小球足细胞,设置对照组、PAN组和FK506组,处理8 h、24 h、48 h后... 目的研究他克莫司( FK506)和嘌呤霉素( PAN)对肾小球足细胞凋亡和α-辅肌动蛋白-4(α-actinin-4)mRNA及蛋白表达的影响,探讨FK506对足细胞的保护作用.方法体外培养小鼠肾小球足细胞,设置对照组、PAN组和FK506组,处理8 h、24 h、48 h后观察细胞形态,检测细胞凋亡率,并收集细胞进行实时荧光定量-PCR、Western blot检测α-actinin-4的mRNA及蛋白表达情况.结果 PAN组各时间段胞体面积较对照组明显缩小,FK506组胞体面积较PAN组增大.8 h时各组间足细胞凋亡率无明显差异(均P>0. 05);24 h及48 h时PAN组足细胞凋亡率[(8. 21 ± 0. 41)%、(16. 32 ± 0. 17)%]较对照组[(4. 28 ± 0. 35)%、(6. 27 ± 0. 28)%]明显升高,差异均有统计学意义(均P<0. 05),FK506组足细胞凋亡率[(6. 26 ± 0. 24)%、(13. 32 ± 0. 24)%]均明显低于PAN组,差异均有统计学意义(均P<0. 05).8 h时各组α-actinin-4 mRNA和蛋白表达无明显差异(均P>0. 05),24 h、48 h 时PAN组mRNA(2. 42 ± 0. 21、3. 78 ± 0. 25)和蛋白(0. 77 ± 0. 04、1. 22 ± 0. 10)表达量较对照组mRNA(1. 50 ± 0. 22、2. 15 ± 0. 15)和蛋白(0. 44 ± 0. 03、0. 83 ± 0. 07)显著增高,差异均有统计学意义(均P<0. 01);FK506组mRNA(1. 65 ± 0. 24、1. 70 ± 0. 32)和蛋白(0. 52 ± 0. 05、0. 56 ± 0. 07)表达量均明显低于PAN组,差异均有统计学意义(均P<0. 05).结论 FK506可有效抑制PAN对足细胞的损伤作用,稳定α-actinin-4的表达,为临床应用FK506治疗肾小球疾病提供依据. 展开更多
关键词 α-辅肌动蛋白-4 他克莫司 足细胞 嘌呤霉素
芪地糖肾颗粒通过调节ERK信号通路减轻2型糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的作用研究 预览
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作者 高雪 柳红芳 +1 位作者 安至超 何其英 《中国中西医结合肾病杂志》 2019年第7期568-572,共5页
目的:观察芪地糖肾颗粒(QDTS)对2型糖尿病肾病(DN)大鼠蛋白尿的治疗作用,并通过对足细胞标志性蛋白nephrin、PCX的表达及细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路活化水平的检测探讨QDTS可能的作用机制。方法:建立2型DN大鼠模型,采用缬沙坦和Q... 目的:观察芪地糖肾颗粒(QDTS)对2型糖尿病肾病(DN)大鼠蛋白尿的治疗作用,并通过对足细胞标志性蛋白nephrin、PCX的表达及细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路活化水平的检测探讨QDTS可能的作用机制。方法:建立2型DN大鼠模型,采用缬沙坦和QDTS干预4周,通过比较各组大鼠的尿微量白蛋白水平来判定疗效。采用WB法检测各组大鼠肾组织中足细胞标志性蛋白nephrin、PCX及ERK、p-ERK的表达水平。结果:与正常组相比,DN模型组的血糖及尿微量白蛋白水平均有显著升高(P <0. 01)。肾组织中nephrin、PCX的表达水平显著降低(P <0. 05),并伴有ERK磷酸化水平的升高(P <0. 01)。干预后,缬沙坦组及QDTS组大鼠的尿白蛋白水平明显降低(P <0. 05)。QDTS还能够提高DN大鼠肾组织中nephrin、PCX的表达(P <0. 05),并且降低ERK的磷酸化水平(P <0. 01)。结论:QDTS可以通过抑制ERK信号通路的过度活化来缓解DN足细胞损伤。 展开更多
关键词 芪地糖肾颗粒 糖尿病肾病 细胞外信号调节激酶 足细胞
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基于“肾藏精”理论探讨局灶节段性肾小球硬化中足细胞与蛋白尿的关系 预览
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作者 陈威辛 戴恩来 《中医研究》 2019年第8期1-3,共3页
足细胞防止清蛋白等精微物质滤过的功能与“肾藏精”理论相通,足细胞代肾用事,尽封藏之职。局灶节段性肾小球硬化以足细胞损伤为中心,足细胞数量越少,肾气越虚,藏精功能越差,病机以肾虚为本。中医药从不同机制保护足细胞,减少尿蛋白,力... 足细胞防止清蛋白等精微物质滤过的功能与“肾藏精”理论相通,足细胞代肾用事,尽封藏之职。局灶节段性肾小球硬化以足细胞损伤为中心,足细胞数量越少,肾气越虚,藏精功能越差,病机以肾虚为本。中医药从不同机制保护足细胞,减少尿蛋白,力图补充肾气,恢复肾的藏精功能。 展开更多
关键词 局灶节段性肾小球硬化 足细胞 蛋白尿 肾藏精
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黄葵浸膏粉对高糖环境下小鼠足细胞增殖与凋亡和细胞周期的影响 预览
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作者 余春丽 戴思思 +1 位作者 高俊丽 刘琨 《中国中西医结合肾病杂志》 2019年第7期573-576,共4页
目的:本研究旨在通过探讨黄葵浸膏粉对高糖浓度下足细胞的增殖、凋亡和周期的影响及其对足细胞的保护作用。方法:以小鼠足细胞系(MPC5)作为研究对象,将培养好的足细胞置于高糖浓度(HG,25 mmol/L)和不同处理浓度的黄葵浸膏粉HK(0 g/L,0. ... 目的:本研究旨在通过探讨黄葵浸膏粉对高糖浓度下足细胞的增殖、凋亡和周期的影响及其对足细胞的保护作用。方法:以小鼠足细胞系(MPC5)作为研究对象,将培养好的足细胞置于高糖浓度(HG,25 mmol/L)和不同处理浓度的黄葵浸膏粉HK(0 g/L,0. 45 g/L)的培养液中培养24 h,将其分为以下四组:5. 6 mmol/L NG、5. 6 mmol/L NG+0. 45 g/L HK、25 mmol/L HG、25 mmol/L HG+0. 45 g/L HK,其中以5. 6 mmol/L NG作为正常对照。观察黄葵浸膏粉对高糖浓度处理下足细胞形态的影响,并通过MTT法检测足细胞的增殖能力,Annexin-V FITC/PI检测细胞凋亡,流式细胞仪进行检测细胞周期。结果:(1)与5. 6 mmol/L NG相比,25 mmol/L HG高糖浓度处理的足细胞,形态发生变化,部分呈椭圆形,足突减少和融合;同时,高糖浓度可抑制足细胞增殖,促进细胞凋亡和导致细胞周期阻滞。(2)与25 mmol/L HG,25 mmol/L HG+0.45 g/L HK处理组中的足细胞活力明显增加(P <0. 05),凋亡率下降;此外,在黄葵浸膏粉组中,细胞周期的G1期细胞比例极显著下降,S期及G2期细胞比例明显增加,且具有剂量依赖性(P <0. 01)。结论:适当剂量的黄葵浸膏粉可以加快高糖环境下足细胞的细胞周期,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,减轻足细胞损伤,从而对足细胞起着重要的保护作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 足细胞 凋亡 增殖 细胞周期
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血清同型半胱氨酸、胱抑素C和尿足细胞检测在Ⅱ型糖尿病肾病的早期诊断中的作用分析
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作者 喻敏 刘春雅 +1 位作者 罗林峰 陈忆琳 《中国卫生检验杂志》 CAS 2019年第16期1984-1986,共3页
目的分析联合血清同型半胱氨酸(Hcy)、胱抑素C(Cys C)和尿足细胞检测在Ⅱ型糖尿病肾病(DN)诊断中的作用。方法选取2017年5月-2018年5月于本院就诊的145位Ⅱ型DM患者为研究对象,依尿白蛋白/肌酐比值将其分为正常白蛋白尿组42例(n=40)、... 目的分析联合血清同型半胱氨酸(Hcy)、胱抑素C(Cys C)和尿足细胞检测在Ⅱ型糖尿病肾病(DN)诊断中的作用。方法选取2017年5月-2018年5月于本院就诊的145位Ⅱ型DM患者为研究对象,依尿白蛋白/肌酐比值将其分为正常白蛋白尿组42例(n=40)、微量白蛋白尿组(n=58)、大量白蛋白尿组(n=47);同时选取50例健康体检者为对照组。检测各组的Hcy、Cys C和尿足细胞的检测水平,并计算各指标的检测敏感性和特异性,并使用AOC曲线进行相关分析。结果对照组、正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组的Hcy、Cys C水平和尿足细胞数差异有统计学意义(P均<0.05),并随着患者DN的进展而升高;联合检测的敏感性、特异性、阳性预测值显著高于单独Hcy、Cys C、尿足细胞的检测方法,差异有统计学意义(P均<0.05);单独血清Hcy、Cys C、尿足细胞数和联合检测诊断DN的最佳的切点分别为12.48μml/L、1.18 mg/L、0.88个/μl、84%,其曲线下的面积分别为0.72、0.78、0.76、0.92。结论血清Hcy、Cys C和尿足细胞检测在诊断Ⅱ型糖尿DN中具有较好的参考价值,值得在临床上进一步探讨使用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 同型半胱氨酸 胱抑素C 足细胞 诊断
lncRNA TUG1对高糖诱导的小鼠足细胞MPC5凋亡的影响 预览
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作者 马媛 张大鹏 +1 位作者 王想 任蕾 《郑州大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2019年第6期863-866,共4页
目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸调节基因1(lncRNA TUG1)对高糖诱导的足细胞MPC5凋亡的影响。方法:小鼠足细胞MPC5分成对照组、高糖组、阴性对照高糖组、TUG1过表达高糖组,培养48 h后采用qRT-PCR检测TUG1表达变化,PI及Annexin V-FITC染色... 目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸调节基因1(lncRNA TUG1)对高糖诱导的足细胞MPC5凋亡的影响。方法:小鼠足细胞MPC5分成对照组、高糖组、阴性对照高糖组、TUG1过表达高糖组,培养48 h后采用qRT-PCR检测TUG1表达变化,PI及Annexin V-FITC染色后采用流式细胞术测定细胞凋亡率,Western blot法检测细胞中Cleaved-Caspase-12、Cleaved-PARP、CHOP、p-eIF2α、GRP78蛋白表达水平。结果:与对照组比较,高糖组细胞中TUG1表达水平降低,细胞凋亡率和Cleaved-Caspase-12、Cleaved-PARP、CHOP、p-eIF2α、GRP78蛋白表达水平增加(P<0.05)。与阴性对照高糖组比较,TUG1过表达高糖组细胞中TUG1表达水平升高,细胞凋亡率和Cleaved-Caspase-12、Cleaved-PARP、CHOP、p-eIF2α、GRP78蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论:lncRNA TUG1可抑制高糖诱导的足细胞MPC5凋亡,作用机制可能与降低内质网应激有关。 展开更多
关键词 lncRNA TUG1 足细胞 糖尿病 凋亡 MPC5细胞 小鼠
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nephrin表达与糖尿病肾病预后相关性研究 预览
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作者 王荣珍 姚灿 刘沨 《临床荟萃》 CAS 2019年第5期431-435,共5页
目的分析糖尿病肾病患者肾脏组织及尿液中nephrin表达与临床预后的相关性。方法经肾活检诊断为2型糖尿病肾病患者32例,用直接免疫荧光法检测肾脏组织nephrin表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测尿液nephrin表达水平,观察nephrin表达与... 目的分析糖尿病肾病患者肾脏组织及尿液中nephrin表达与临床预后的相关性。方法经肾活检诊断为2型糖尿病肾病患者32例,用直接免疫荧光法检测肾脏组织nephrin表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测尿液nephrin表达水平,观察nephrin表达与临床预后的关系。结果糖尿病肾病组肾脏nephrin表达较正常对照组明显减少,尿nephrin/尿肌酐比值较正常对照组明显升高。根据肾脏nephrin表达水平分成高表达组和低表达组,低表达组糖尿病病程较长、糖化血红蛋白更高、白蛋白及eGFR较低、24小时尿蛋白定量及血肌酐较高,尿nephrin/肌酐值比值较高(P均<0.01)。同时也发现低表达组肾脏肾小球、肾小管间质、间质炎症及动脉硬化病变均较高表达组严重(P<0.01)。糖化血红蛋白升高与nephrin损伤有相关性,nephrin损伤与尿蛋白增多、eGFR下降有显著相关性。两组间肾脏生存率差异有统计学意义(P<0.01)。采用单因素COX相关回归分析提示肾脏nephrin表达量下降,尿液nephrin排泄增加是肾脏预后不良的影响因素。结论糖尿病肾病患者肾脏nephrin蛋白及尿液nephrin蛋白检测有助于糖尿病病情及预后判断。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 足细胞 酶联免疫吸附测定 预后
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沉默信息调节因子1对高糖诱导的足细胞凋亡的影响及机制研究 预览
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作者 段荣 蒋健 +1 位作者 杨志忠 郑晓玉 《临床肾脏病杂志》 2019年第9期689-693,共5页
目的研究沉默信息调节因子1(silence information regulator 1,SIRT1)对高糖诱导的足细胞凋亡的影响和机制。方法取足细胞分别给予不同处理,分为5组:Control组(5.6 mmol/L葡萄糖培养液培养)、Osmotic-NC组(葡萄糖5.6 mmol/L+甘露醇25 mm... 目的研究沉默信息调节因子1(silence information regulator 1,SIRT1)对高糖诱导的足细胞凋亡的影响和机制。方法取足细胞分别给予不同处理,分为5组:Control组(5.6 mmol/L葡萄糖培养液培养)、Osmotic-NC组(葡萄糖5.6 mmol/L+甘露醇25 mmol/L培养液培养)、HG组(30 mmol/L葡萄糖培养液培养)、HG+SIRT1组[SIRT1过表达载体(pcDNA3.1-SIRT1)转染+30 mmol/L葡萄糖培养液培养]、HG+NC组[阴性对照载体(pcDNA3.1)转染+30 mmol/L葡萄糖培养液培养],采用qRT-PCR和Western blot技术检测各组SIRT1表达效果,以试剂盒分别检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)、活性氧簇(ROS)水平,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡,采用Western blot检测各组细胞中Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9蛋白表达变化。结果高糖培养后的足细胞中SIRT1 mRNA及蛋白水平均降低。转染SIRT1过表达载体后的足细胞经过高糖处理以后,细胞中的SIRT1 mRNA及蛋白水平升高。高糖处理后的足细胞中SOD、CAT、GSH-Px活性降低,MDA和ROS水平升高,细胞凋亡率升高,细胞中Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9蛋白水平升高。上调SIRT1可以提高高糖条件下足细胞SOD、CAT、GSH-Px活性,减少细胞中MDA和ROS水平,减少细胞凋亡率和Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达。结论上调SIRT1可以降低高糖诱导的足细胞凋亡,其作用机制可能与降低氧化损伤有关。 展开更多
关键词 高糖 足细胞 凋亡 沉默信息调节因子1
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基于“通肾络、益脾肾”治法研究足细胞凋亡及自噬 预览
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作者 范增慧 马锋锋 +2 位作者 李小会 陈丽名 谷浩荣 《天津中医药》 CAS 2019年第7期691-696,共6页
[目的]基于中医"通肾络、益脾肾"治法,探讨通络益肾方对体外高糖培养的小鼠肾小球足细胞自噬和凋亡蛋白SIRT1、BNIP3、P62、Bax表达的调控影响。[方法]成熟无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠40只,随机分为正常组、中药高、中、... [目的]基于中医"通肾络、益脾肾"治法,探讨通络益肾方对体外高糖培养的小鼠肾小球足细胞自噬和凋亡蛋白SIRT1、BNIP3、P62、Bax表达的调控影响。[方法]成熟无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠40只,随机分为正常组、中药高、中、低剂量组各10只。按照人与大鼠体表面积折算方法计算出大鼠所需中药灌胃浓度:高剂量浓度4.76 g/mL、中剂量浓度2.38 g/mL、低剂量浓度1.19 g/m L,灌胃10 d取含药血清备用。足细胞分6组,正常组5.6 mmol/L葡萄糖+10%正常大鼠血清、高糖组30mmol/L葡萄糖+10%正常大鼠血清、通络益肾方含药血清高、中、低干预组30 mmol/L葡萄糖+10%高、中、低剂量大鼠血清、高渗组甘露醇24.5 mmol/L+10%正常大鼠血清。细胞培养48 h后收集,Hoechst33342荧光染色,观察各组足细胞凋亡状况及形态变化;流式细胞仪检测足细胞凋亡率;Western Blot检测细胞内自噬标志蛋白SIRT1、P62及促凋亡蛋白BNIP3、Bax表达水平。[结果]流式细胞仪检测结果显示通络益肾方中、低剂量组可降低高糖诱导的足细胞凋亡率(P<0.01或P<0.05),高剂量组不能改善凋亡情况(P>0.05);Hoechst33342荧光染色观察结果也证实通络益肾方中、低剂量组可降低高糖诱导的足细胞凋亡率;蛋白印迹结果显示,与高糖组相比,通络益肾方中、低剂量组自噬标志蛋白SIRT1表达升高,自噬标志蛋白P62及促凋亡蛋白BNIP3、Bax蛋白表达下降(P<0.05或P<0.01),高剂量组SIRT1、BNIP3、P62、Bax蛋白表达未见明显改变(P>0.05)。[结论]中剂量、低剂量通络益肾方能够启动细胞自噬减少高糖刺激下体外培养足细胞凋亡,降低细胞凋亡率及凋亡蛋白的表达。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 通络益肾方 足细胞 凋亡 自噬 相互关系
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线粒体分裂/融合在高糖诱导足细胞损伤中的作用 预览
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作者 廖奕娇 陈奕君 +2 位作者 何日明 刘新辉 杨曙东 《重庆医学》 CAS 2019年第8期1267-1269,1274共4页
目的基于线粒体分裂/融合探讨高糖刺激对足细胞的损伤作用及可能机制。方法分别采用30、45、60mmol/L的葡萄糖刺激永生化的人足细胞AB8/1348h。光镜下观察细胞形态变化。采用Westernblot法检测足细胞标志蛋白足突蛋白(podocin),线粒体... 目的基于线粒体分裂/融合探讨高糖刺激对足细胞的损伤作用及可能机制。方法分别采用30、45、60mmol/L的葡萄糖刺激永生化的人足细胞AB8/1348h。光镜下观察细胞形态变化。采用Westernblot法检测足细胞标志蛋白足突蛋白(podocin),线粒体分裂因子(Mff)、线粒体动力蛋白(MiD49)及线粒体融合蛋白1(Mfn1)、Mfn2、视神经萎缩症蛋白1(OPA1)表达。结果将足细胞置于37℃培养箱10d后可以分化为成熟的足细胞,表现为足突的出现,而60mmol/L高糖刺激48h后足细胞足突明显减少。高糖刺激呈浓度依赖性下调podocin表达,其中以60mmol/L刺激组差异有统计学意义(P<0.05)。此外高糖刺激可以上调线粒体分裂相关蛋白MiD49、Mff表达,而下调Mfn1、Mfn2、OPA1表达。结论高糖刺激可诱导足细胞形态异常、下调podocin表达,其机制可能与线粒体分裂增加、融合减少有关。 展开更多
关键词 足细胞 高糖 线粒体分裂 线粒体融合
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miR-155在TGF-β1诱导足细胞损伤中的表达及其与synaptopodin、CD2AP表达的相关性 预览
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作者 郑心彤 凌霄雁 +6 位作者 古贤君 林栩 黄海庭 吴好好 钟秋红 尤燕舞 唐奇燎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期786-791,共6页
目的:探讨TGF-β1诱导的足细胞损伤中miR-155的表达变化及其与足细胞损伤的关系。方法:体外培养小鼠肾小球足细胞,用TGF-β1刺激足细胞构建足细胞损伤模型,用CCK8法检测各浓度梯度(0、4、8、12 ng/ml)、时间梯度(0、24、48、72 h)的细... 目的:探讨TGF-β1诱导的足细胞损伤中miR-155的表达变化及其与足细胞损伤的关系。方法:体外培养小鼠肾小球足细胞,用TGF-β1刺激足细胞构建足细胞损伤模型,用CCK8法检测各浓度梯度(0、4、8、12 ng/ml)、时间梯度(0、24、48、72 h)的细胞增殖活性。实时荧光定量PCR技术检测足细胞损伤模型中synaptpotodin、CD2AP mRNA及miR-155的表达。Western blot法检测足细胞损伤模型中synaptpotodin、CD2AP蛋白的表达。结果:一定浓度的TGF-β1可抑制足细胞增殖,降低细胞存活率(P <0.05)。TGF-β1诱导的足细胞损伤模型中miR-155表达水平上调(P <0.05),TGF-β1诱导足细胞损伤后,可引起synaptpotodin、CD2AP mRNA和蛋白表达水平下调,且与miR-155表达水平呈负相关(P <0.05)。结论:miR-155表达上调与TGF-β1诱导的足细胞损伤有关,可能作为足细胞损伤诊断和治疗的靶点。 展开更多
关键词 足细胞 MIR-155 TGF-Β1 SYNAPTOPODIN CD2AP
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加味升降散对糖尿病大鼠足细胞nephrin、podocin蛋白表达的影响
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作者 张社峰 杨辰华 王沛人 《新中医》 CAS 2019年第3期71-75,共5页
目的:加味升降散对糖尿病大鼠足细胞肾小球细胞黏附分子受体抗原(nephrin)、肾小球足细胞跨膜蛋白(podocin表达的影响,探讨其肾脏保护机制。方法:60只雄性成年SD大鼠随机分为空白组、模型组、培哚普利组、低剂量中药组和高剂量中药组。... 目的:加味升降散对糖尿病大鼠足细胞肾小球细胞黏附分子受体抗原(nephrin)、肾小球足细胞跨膜蛋白(podocin表达的影响,探讨其肾脏保护机制。方法:60只雄性成年SD大鼠随机分为空白组、模型组、培哚普利组、低剂量中药组和高剂量中药组。采用大鼠左侧切除左肾手术+高脂高糖饲料+链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)法制备糖尿病大鼠模型。高剂量中药组大鼠给予27 g/(kg·d)加味升降散灌胃,低量中药组大鼠给予9 g/(kg·d)加味升降散灌胃,培哚普利组大鼠给予0.48 mg/(kg·d)(溶于2 mL的CMC-Na溶液)培哚普利灌胃。空白组和模型组给予等体积生理盐水灌胃。观察大鼠一般状况,应用考马斯亮蓝法监测24 h尿蛋白定量,应用全自动生化分析仪检测肾功能、血糖。光镜下观察大鼠肾脏病理学变化,免疫组织化法观察nephrin、podocin蛋白在肾脏组织的分布及表达情况。结果:与空白组比较,模型组血糖、血肌酐(Serum creatinine,SCr)、血尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、24 h尿蛋白均升高(P <0.01),nephrin、podocin蛋白表达均下降(P <0.01);与模型组比较,培哚普利组及低、高剂量加味升降散血糖、SCr、BUN、24 h尿蛋白均下降(P <0.01);培哚普利组、低剂量中药组、高剂量中药组nephrin、podocin蛋白表达水平均有不同程度上调(P <0.05),其中高剂量中药组nephrin、podocin蛋白表达水平上调最为显著。结论:加味升降散能有效改善糖尿病大鼠肾功能,减少蛋白尿,改善肾小球硬化等,其途径可能与加味升降散上调大鼠足细胞nephrin、podocin蛋白表达水平,减轻大鼠足细胞损伤有关。 展开更多
关键词 糖尿病 加味升降散 足细胞 NEPHRIN PODOCIN 动物实验 大鼠
乙肝病毒X蛋白抑制小鼠足细胞系MPC5增殖并促进其凋亡 预览 被引量:1
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作者 雷晓燕 孙永红 +2 位作者 陈星星 崔维静 刘璟 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第5期617-622,共6页
目的探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)对条件永生型小鼠足细胞系(MPC5)增殖与凋亡的影响。方法用携带HBx基因的pEX质粒转染MPC5细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证转染效率。实验分空白对照组(MPC5 group)、阴性对照组(MPC5-pEX-neo group)、HBx... 目的探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)对条件永生型小鼠足细胞系(MPC5)增殖与凋亡的影响。方法用携带HBx基因的pEX质粒转染MPC5细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证转染效率。实验分空白对照组(MPC5 group)、阴性对照组(MPC5-pEX-neo group)、HBx转染组(MPC5-pEX-HBx group)。MTT法检测足细胞存活率;流式细胞计量术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞中nephrin、STAT3、JAK2、p-STAT3和p-JAK2、caspase-3蛋白表达。结果 HBx转染MPC5细胞48 h后HBx表达最高。HBx转染组中nephrin蛋白表达水平显著低于空白对照及阴性对照(均 P <0.01)。转染HBx基因后足细胞增殖明显受抑,同时凋亡率显著增高(均 P <0.01)。此外,HBx转染组STAT3、p-STAT3、JAK2和p-JAK2蛋白表达较空白对照及阴性对照组均显著增高(均 P <0.01), caspase-3在HBx转染组中的表达也显著增高(均 P <0.01)。结论 HBx可下调足细胞中nephrin蛋白表达,抑制足细胞增殖,并促进其凋亡的发生。其作用机制可能与STAT3/JAK2信号通路活化有关。 展开更多
关键词 乙肝病毒X蛋白 足细胞 增殖 凋亡
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扶正祛风方对膜性肾病大鼠肾组织nephrin和TGF-β1表达的影响 预览
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作者 郭晓媛 王暴魁 +5 位作者 谢璇 蔡倩 孙广宇 雷明 宋子威 王健 《中国中西医结合肾病杂志》 2019年第4期290-292,共3页
目的:探究扶正祛风方对膜性肾病大鼠肾组织nephrin、TGF-β1表达的影响。方法:实验大鼠随机分为正常组和造模组,建立阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)肾炎模型,造模组分为模型组、扶正祛风方组,连续给药4周。免疫组化检测肾小球nephrin、TGF... 目的:探究扶正祛风方对膜性肾病大鼠肾组织nephrin、TGF-β1表达的影响。方法:实验大鼠随机分为正常组和造模组,建立阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)肾炎模型,造模组分为模型组、扶正祛风方组,连续给药4周。免疫组化检测肾小球nephrin、TGF-β1的分布及表达强度;Westernblot检测肾组织nephrin、TGF-β1的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组nephrin沿肾小球毛细血管袢分布减少,蛋白表达有所降低(P<0.05),TGF-β1沿肾小球毛细血管袢分布增加,蛋白表达有所升高(P<0.05);与模型组比较,扶正祛风方组nephrin沿肾小球毛细血管袢分布增加,蛋白表达有所升高(P<0.05),TGF-β1沿肾小球毛细血管袢分布减少,蛋白表达有所降低(P<0.05)。结论:扶正祛风方可调控膜性肾病大鼠肾组织nephrin、TGF-β1的表达。 展开更多
关键词 膜性肾病 足细胞 扶正祛风
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小檗碱对高糖培养足细胞黏附功能的影响及机制研究
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作者 郭维文 李佑生 《上海中医药杂志》 2019年第9期80-84,共5页
目的观察小檗碱对高糖培养足细胞黏附功能的影响,并探讨其改善高糖所致足细胞损伤的作用途径和分子机制。方法采用温度选择法体外进行永生化小鼠足细胞株的分化培养、诱导成熟,分为正常糖对照组(5 mmol/L葡萄糖)、高糖模型组(30 mmol/L... 目的观察小檗碱对高糖培养足细胞黏附功能的影响,并探讨其改善高糖所致足细胞损伤的作用途径和分子机制。方法采用温度选择法体外进行永生化小鼠足细胞株的分化培养、诱导成熟,分为正常糖对照组(5 mmol/L葡萄糖)、高糖模型组(30 mmol/L葡萄糖)、甘露醇高渗对照组(30 mmol/L甘露醇)、高糖+小檗碱治疗组(30 mmol/L葡萄糖+1.25μmol/L小檗碱)。干预24 h、48 h、72 h后收集细胞,采用MTT法检测足细胞活力,离心法检测细胞黏附力,并采用Q-PCR法检测黏附分子α3、β1的mRNA表达水平。结果与正常糖对照组和甘露醇高渗对照组比较,高糖模型组在3个时间点的足细胞活力、黏附力和α3、β1的mRNA表达水平都明显下降(P<0.01),且随着作用时间的延长足细胞活力和黏附力降低越明显,黏附分子α3、β1的mRNA表达水平越低下(P<0.05);与高糖模型组比较,高糖+小檗碱治疗组的足细胞活力和黏附力明显增强(P<0.01),黏附分子α3、β1的mRNA表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论高浓度葡萄糖环境可降低足细胞活力和黏附力,改变足细胞黏附分子的mRNA表达水平;小檗碱可抑制和减轻高浓度葡萄糖对足细胞的损伤作用,可提升高浓度葡萄糖培养的足细胞的细胞活力和黏附力,对高浓度葡萄糖培养的足细胞具有明显的保护作用。 展开更多
关键词 小檗碱 足细胞 细胞活力 黏附力
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