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基于实时荧光定量监测逆转录病毒MuLV/Friend感染方法的建立与评价 预览
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作者 宋姝庭 孙丽 +2 位作者 蒋金凤 黄海 王建华 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2018年第8期1175-1178,共4页
目的 建立基于实时荧光定量PCR的病毒复制检测方法,监测MuLV/Friend急性感染小鼠病毒复制动力学。方法 提取MuLV/Friend病毒基因组RNA,逆转录为cDNA,扩增病毒gag片段,连接入PMD-19T载体,构建标准品,并合成特异性荧光探针,建立病毒复制... 目的 建立基于实时荧光定量PCR的病毒复制检测方法,监测MuLV/Friend急性感染小鼠病毒复制动力学。方法 提取MuLV/Friend病毒基因组RNA,逆转录为cDNA,扩增病毒gag片段,连接入PMD-19T载体,构建标准品,并合成特异性荧光探针,建立病毒复制定量的标准曲线;BALB/c小鼠腹腔接种MuLV/Friend病毒,在急性感染不同时期,实时监测小鼠组织内病毒复制动力学。结果 成功构建基于实时荧光定量PCR的MuLV/Friend复制检测方法,可分析小鼠各组织内病毒复制动力学,为利用MuLV/Friend小鼠感染模型研究抗病毒策略或宿主免疫等,提供了一种有效、快速、灵敏的实时监测病毒复制的手段。结论 该实时荧光定量PCR的病毒复制检测方法具有较高的灵敏度,改善了之前利用脾肿大指数检测病毒体内复制的传统方法。 展开更多
关键词 MuLV/Friend病毒 逆转录病毒 急性感染 病毒复制 实时荧光核酸定量 动物模型
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白血病病毒病因的现代观
2
作者 吴克复 郑国光 +1 位作者 马小彤 宋玉华 《中国肿瘤临床》 CSCD 北大核心 2018年第7期325-330,共6页
20世纪70年代,已有研究证明逆转录病毒可诱发动物白血病,后续研究发现人类基因组有大量内源性逆转录病毒,但是仅在局部地区有逆转录病毒相关的成人T细胞白血病(adult T-cell leukemia,ATL)流行。近年来,对APOBEC3(apolipoprotein B m... 20世纪70年代,已有研究证明逆转录病毒可诱发动物白血病,后续研究发现人类基因组有大量内源性逆转录病毒,但是仅在局部地区有逆转录病毒相关的成人T细胞白血病(adult T-cell leukemia,ATL)流行。近年来,对APOBEC3(apolipoprotein B mRNA editing enzyme catalytic polypeptide 3)成员的深入研究阐释了人类对逆转录病毒诱发白血病的抵御机制。EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)在人群中广泛传播,以隐性感染形式长期存在于体内,与部分淋巴瘤的发生、发展密切相关,部分实体瘤也与EBV相关,表明其致瘤性。其他病毒感染与人类白血病/淋巴瘤发生、发展的关系,部分可能通过复杂、曲折的网络关系间接相关,大部分还有待于进一步的深入研究。 展开更多
关键词 白血病 病毒 病因学 肿瘤病毒 逆转录病毒
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让转基因动物造福人类 预览
3
作者 刘宇 赵春江 《百科知识》 2018年第24期23-26,共4页
转基因动物是指基因组中整合有外源基因的动物.每个生物个体都有一套自己的基因组,不是自己的那就是外源了.那么,外源基因是怎么整合到动物体内的呢?显微注射是很常用的一个方法,操作者利用极细的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注... 转基因动物是指基因组中整合有外源基因的动物.每个生物个体都有一套自己的基因组,不是自己的那就是外源了.那么,外源基因是怎么整合到动物体内的呢?显微注射是很常用的一个方法,操作者利用极细的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到受精卵、原核期胚胎或培养的细胞中,通过基因重组等过程使外源基因嵌入到宿主的染色体内.除此之外,精子载体法、逆转录病毒介导法和转基因克隆技术也是会用到的方法. 展开更多
关键词 转基因动物 人类 外源基因 基因克隆技术 动物体内 精子载体法 逆转录病毒 生物个体
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山羊地方性鼻内腺瘤流行现状及防制 预览
4
作者 李伟豪 《河南畜牧兽医:综合版》 2018年第4期18-19,共2页
羊地方性鼻内腺瘤(ENA)是由逆转录病毒绵羊鼻内肿瘤病毒ENTV-1)和山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)引起鼻甲骨筛骨上皮细胞恶性转化而导致的慢性、进行性、接触性、肿瘤性传染病。
关键词 地方性 流行现状 山羊 逆转录病毒 防制 细胞恶性转化 肿瘤
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逆转录病毒介导的稳定表达E4orf1和绿色荧光蛋白的胎肝窦内皮细胞株的建立
5
作者 李慧琳 谢小燕 +8 位作者 王思涵 韩毅 范增 白云 何丽娟 南雪 裴海云 岳文 裴雪涛 《生物技术通讯》 CAS 2018年第4期451-458,共8页
目的:为构建优化的内皮细胞用于造血干细胞(HSCs)的支持培养,通过逆转录病毒载体系统建立稳定表达腺病毒E4区开放读框1(E4orf1)和绿色荧光蛋白(GFP)的人胎肝窦内皮细胞(HFLSECs)株。方法:利用Plat-A细胞将质粒MSCV-N E4orf1和... 目的:为构建优化的内皮细胞用于造血干细胞(HSCs)的支持培养,通过逆转录病毒载体系统建立稳定表达腺病毒E4区开放读框1(E4orf1)和绿色荧光蛋白(GFP)的人胎肝窦内皮细胞(HFLSECs)株。方法:利用Plat-A细胞将质粒MSCV-N E4orf1和p MX-GFP分别包装为逆转录病毒,共同感染HFLSECs,将原代培养的HFLSECs和转基因的HFLSECs分别在含有0.5、1、2、4μg/m L嘌呤霉素的EGM-2培养基中培养,以测试最适药物筛选浓度,药筛1周后通过流式细胞分选获得稳定转染E4orf1的GFP+HFLSECs(E4orf1-GFP/HFLSECs)。通过密度梯度离心法从脐带血中分离单个核细胞,利用免疫磁柱分选获得CD34+造血干/祖细胞(HSPCs),以E4orf1-GFP/HFLSECs作为饲养层联合SCF、TPO、Flt-3L等3种基础造血相关因子进行体外扩增和半固体造血细胞集落培养。结果:0.5μg/m L嘌呤霉素在5 d内即能完全杀死HFLSECs,而转基因的HFLSECs可以正常存活,以此药物浓度加压筛选1周,后续通过流式分选GFP阳性细胞,阳性率为90.5%,在E4orf1-GFP/HFLSECs饲养层支持下,人脐带血来源的CD34+细胞15 d扩增了360倍,是单纯细胞因子悬浮培养组的2.2倍,且扩增后的HSPCs在体外仍具有多种造血集落形成能力。结论:该细胞株的建立将为构建造血干细胞体外培养体系及研究造血细胞的发育分化提供适宜的微环境。 展开更多
关键词 肝窦内皮细胞 逆转录病毒 病毒E4区开放读框1(E4orf1) 造血干细胞
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芪灵汤联合高效抗逆转录病毒疗法对HIV/AIDS炎性因子和免疫功能的影响研究
6
作者 孙续禄 马骁 +1 位作者 敬小莉 张杰 《中华中医药学刊》 北大核心 2018年第7期1756-1759,共4页
目的:探讨芪灵汤联合高效抗逆转录病毒疗法(HAART)对HIV/AIDS患者炎性因子和免疫功能的影响。方法:58例艾滋病患者,按照随机数字的方法分为对照组和观察组,每组29例患者,对照组患者使用经典的HAART治疗方案,观察组患者在对照组患者... 目的:探讨芪灵汤联合高效抗逆转录病毒疗法(HAART)对HIV/AIDS患者炎性因子和免疫功能的影响。方法:58例艾滋病患者,按照随机数字的方法分为对照组和观察组,每组29例患者,对照组患者使用经典的HAART治疗方案,观察组患者在对照组患者治疗方法的基础上,同时服用芪灵汤,对治疗的效果进行比较。结果:进行治疗后,两组患者的CD4+T细胞,Th17细胞含量,白介素-17,白介素-23的数据均出现增高,而且观察组数据高于对照组,CD8+T细胞,Treg细胞含量,C反应蛋白数据均出现降低,而且观察组数据低于对照组,以上数据差异均具有统计学意义(P〈0.05),对照组的治疗有效率为86.21%,观察组的治疗有效率为100.00%,两组数据差异具有统计学意义(x2=4.296,P〈0.05),观察组的治疗有效率显著高于对照组,从两组的治疗效果看,数据差异也具有统计学意义(z=2.330,P〈0.05),观察组的治疗效果显著优于对照组,两组患者各项不良反应发生率的数据差异均不具有统计学意义(P〉0.05),但是各种机会性感染发生情况数据均为观察组低于对照组,数据差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:芪灵汤联合高效抗逆转录病毒疗法对HIV/AIDS患者进行治疗,能够有效的对患者免疫功能进行调节,提高患者的免疫力,改善治疗效果,值得在临床范围内进行推广。 展开更多
关键词 芪灵汤 逆转录病毒 炎性因子
科学抗艾,合理用药 预览
7
作者 张雪 《肝博士》 2018年第5期47-48,共2页
艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的具有极大危害性的传染性疾病.HIV属逆转录病毒,主要攻击人体的T淋巴细胞,破坏人体免疫系统,当人体免疫系统被HIV破坏后,人体逐渐丧失对各种病原体的抵抗力,易感染其他的疾病从而导致死亡.
关键词 合理用药 人类免疫缺陷病毒 人体免疫系统 传染性疾病 科学 逆转录病毒 T淋巴细胞 艾滋病
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鳜胚胎细胞系的建立与应用 预览
8
作者 陈晓武 申亚伟 +1 位作者 赵金良 吴明林 《水产学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期1626-1634,共9页
为更好地开展鳜基因功能研究和药物筛选工作,提高基因转染效率,本研究以鳜囊胚期胚胎为材料,采用含有20%胎牛血清的DMEM培养基进行培养,建立了生长稳定的鳜胚胎细胞系MFE。在此基础上,采用绿色荧光蛋白(GFP)作为标记物,在HEK293T细胞中... 为更好地开展鳜基因功能研究和药物筛选工作,提高基因转染效率,本研究以鳜囊胚期胚胎为材料,采用含有20%胎牛血清的DMEM培养基进行培养,建立了生长稳定的鳜胚胎细胞系MFE。在此基础上,采用绿色荧光蛋白(GFP)作为标记物,在HEK293T细胞中体外包装逆转录病毒,再感染MFE细胞系。MTT法分析表明传代后细胞培养96 h内,细胞生长率变化也经历增殖、降低到达稳定期。而且MFE细胞能稳定表达GFP基因,感染效率为20%±5%,而脂质体转染效率为3%±2%。可见包装病毒感染细胞不仅能获得稳转细胞系,效率也远高于脂质体瞬时转染。荧光定量PCR分析表明,MFE细胞系能表达Irf1、Irf3和Irf7基因,Irf1基因表达量最高。MFE细胞系受到poly I:C刺激后,Irf1、Irf3和Irf7的表达量分别升高3.5,2.3和2.1倍。因此,MFE细胞通过病毒感染可以获得较高的转染效率,该细胞可作为鳜免疫相关基因功能研究的工具。 展开更多
关键词 细胞培养 逆转录病毒 干扰素调节因子
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CAR-T细胞产品中病毒载体生产的研发进展和审评考虑
9
作者 徐隆昌 韦薇 罗建辉 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期1218-1222,共5页
嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptorT,CAR-T)细胞疗法因在血液肿瘤中的突出疗效已成为肿瘤细胞免疫治疗领域中新的研发热点。作为CAR-T细胞生产关键原材料的病毒载体,在CAR基因结构设计、生产工艺的精细化、质量控制和标准的设定... 嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptorT,CAR-T)细胞疗法因在血液肿瘤中的突出疗效已成为肿瘤细胞免疫治疗领域中新的研发热点。作为CAR-T细胞生产关键原材料的病毒载体,在CAR基因结构设计、生产工艺的精细化、质量控制和标准的设定等方面与CAR-T细胞产品的安全性、有效性和质量的可控性密切相关。本文根据慢病毒和γ-逆转录病毒载体的研发进展,结合审评体会,对病毒载体研发和生产过程中需要重点关注的几个常见问题进行讨论,希望能为未来国内相关产品的研发、上市提供参考。 展开更多
关键词 CAR-T细胞 病毒载体 病毒 逆转录病毒 研发 审评
抗艾滋病药物遭遇专利战 预览 被引量:1
10
作者 娄宁 《河南科技》 2017年第16期34-36,共3页
利托那韦和洛匹那韦同属于HIV蛋白酶抑制剂,都是由雅培制药有限公司(下称雅培公司)开发的艾滋病治疗药物,是全球公认的一线抗逆转录病毒治疗专利药物,曾经位列年度全球抗感染药销量之首。2004年,雅培公司在我国提交了含有利托那... 利托那韦和洛匹那韦同属于HIV蛋白酶抑制剂,都是由雅培制药有限公司(下称雅培公司)开发的艾滋病治疗药物,是全球公认的一线抗逆转录病毒治疗专利药物,曾经位列年度全球抗感染药销量之首。2004年,雅培公司在我国提交了含有利托那韦或利托那韦与洛匹那韦联用的固体分散体剂型的发明专利申请,名为“固体药物剂型”,该申请于2012年被授予专利权(专利号:ZL200480024748.X),2013年,该专利的权利人变更ABBVIE公司(艾伯维公司,又称雅培生命,自雅培公司拆分)。由于雅培公司的专利几乎覆盖了利托那韦与几乎所有已知的HIV蛋白酶抑制剂的所有可能的组合,该专利的同族专利在欧洲引发多起专利权异议案件。 展开更多
关键词 发明专利申请 抗艾滋病药物 蛋白酶抑制剂 固体分散体 治疗药物 药物剂型 逆转录病毒 抗感染药
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抗病毒药物的发展和研发策略 预览
11
作者 郭会芳 李卓荣 《中国医药生物技术》 2017年第6期496-504,共9页
病毒感染是目前世界上主要的传染性疾病,占传染性疾病病种的四分之三以上,如DNA病毒引起的疾病包括乙型肝炎(HBV)、疱疹(HSV)、人乳头瘤(HPV)、天花、水痘等;RNA病毒造成的疾病包括小儿麻痹、甲型肝炎、丙型肝炎(HCV)、乙型脑... 病毒感染是目前世界上主要的传染性疾病,占传染性疾病病种的四分之三以上,如DNA病毒引起的疾病包括乙型肝炎(HBV)、疱疹(HSV)、人乳头瘤(HPV)、天花、水痘等;RNA病毒造成的疾病包括小儿麻痹、甲型肝炎、丙型肝炎(HCV)、乙型脑炎、严重急性呼吸系统综合征(SARS)、中东呼吸道综合征(MERS)、狂犬病、麻疹病、呼吸道病毒感染(流感)、肠道病毒感染(手足口病)、艾滋病(AIDS,HIV感染,逆转录病毒)、 展开更多
关键词 病毒药物 病毒基因组 肠道病毒感染 呼吸道病毒感染 手足口病 小儿麻痹 丙型肝炎 研发策略 逆转录病毒 呼吸道综合征
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转录因子在诱导多能干细胞神经分化中的作用研究 预览
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作者 胡传钦 周丽萍 +1 位作者 林德菊 余勤 《浙江临床医学》 2017年第10期1963-1965,共3页
2006年,Takahashi等通过逆转录病毒为载体,将四种转录因子(Oct3/4、Sox^2、Klf4和c—Myc)转染至小鼠成纤维细胞中,得到一种具有多能特性的细胞,被称为诱导多能干细胞(iPSCs)。
关键词 多能干细胞 转录因子 神经分化 鼠成纤维细胞 逆转录病毒
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Impact of Antiretroviral Therapy on the Spread of Human Immunodeficiency Virus in Chaoyang District, Beijing, China: Using the Asian Epidemic Model
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作者 Li-Li Tao Min Liu +5 位作者 Shu-Ming Li Jue Liu Shu-Lin Jiang Li-Juan Wang Feng-Ji Luo Ning Wang 《中华医学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第1期32-38,共7页
关键词 人类免疫缺陷病毒 逆转录病毒 流行模型 朝阳区 治疗 北京 亚洲 中国
Factors Associated with the Size of HIV DNA Reservoir 被引量:1
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作者 Ni-Dan Wang Tai-Sheng Li 《中华医学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第2期224-230,共7页
关键词 HIV-1 DNA库 临床治疗 PUBMED 病毒特性 免疫系统 逆转录病毒 临床意义
逆转录病毒载体构建过程中的“LTR”和“Ψ”——谈对南通市2014届高三第一次调研测试第33题的补充 预览
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作者 王丽芬 《中学教学参考》 2017年第5期107-108,共2页
以剖析逆转录病毒载体构建的一道试题为起点,分析了逆转录病毒基因组中"LTR"和"Ψ"的作用,奠定了逆转录病毒载体构建过程中"LTR"和"Ψ"操作要求的理论基础,这是对试题的必要补充,同时有利于学生对逆转录病毒载体构建过程的全面... 以剖析逆转录病毒载体构建的一道试题为起点,分析了逆转录病毒基因组中"LTR"和"Ψ"的作用,奠定了逆转录病毒载体构建过程中"LTR"和"Ψ"操作要求的理论基础,这是对试题的必要补充,同时有利于学生对逆转录病毒载体构建过程的全面理解。 展开更多
关键词 LTR Ψ 逆转录病毒 载体 构建
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Baseline HBV Load Increases the Risk of Anti-tuberculous Drug-induced Hepatitis Flares in Patients with Tuberculosis 预览
16
作者 朱春晖 赵满芝 +4 位作者 陈广 齐俊英 宋建新 宁琴 许东 《华中科技大学学报:医学英德文版》 SCIE CAS 2017年第1期105-109,共5页
Hepatitis associated anti-tuberculous treatment(HATT) has been a main obstacle in managing patients co-infected with Mycobacterium tuberculosis and hepatitis B virus(HBV). Therefore, we evaluated the factors related t... Hepatitis associated anti-tuberculous treatment(HATT) has been a main obstacle in managing patients co-infected with Mycobacterium tuberculosis and hepatitis B virus(HBV). Therefore, we evaluated the factors related to the severity of adverse effects during HATT, especially those associated with liver failure. A retrospective study was carried out at Tongji Hospital from 2007 to 2012. Increases in serum transaminase levels of >3, 5, and 10 times the upper limit of normal(ULN) were used to define liver damage as mild, moderate, and severe, respectively. Patients with elevated total bilirubin(TBil) levels that were more than 10 times the ULN(>171 μmol/L) with or without decreased(<40%) prothrombin activity(PTA) were diagnosed with liver failure. A cohort of 87 patients was analyzed. The incidence of liver damage and liver failure was 59.8%(n=52) and 25.3%(n=22), respectively. The following variables were correlated with the severity of hepatotoxicity: albumin(ALB) levels, PTA, platelet counts(PLT), and the use of antiretroviral therapies(P<0.05). Hypo-proteinemia and antiretroviral therapy were significantly associated with liver failure, and high viral loads were a significant risk factor with an odds ratio(OR) of 2.066. Judicious follow-up of clinical conditions, liver function tests, and coagulation function, especially in patients with high HBV loads and hypoalbuminemia is recommended. It may be advisable to reconsider the use of antiviral drugs failure during the course of anti-tuberculous treatment of HBV infection patients to avoid the occurrence of furious liver failure. 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 抗结核药物 HBV 患者 负荷 肝功能衰竭 逆转录病毒 低蛋白血症
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艾滋病抗病毒治疗新进展 被引量:2
17
作者 吴昊 宋爱新 黄晓婕 《北京医学》 CAS 2017年第12期1191-1193,共3页
联合抗逆转录病毒疗法(combination antiretroviral therapy,cART)的兴起和发展改变了艾滋病的预后,控制了人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)的病毒复制,使得HIV感染已经从致命性疾病转变为可治疗的慢性感染。
关键词 病毒治疗 ART 病毒药物 治疗方案 艾滋病 逆转录病毒 HIV 功能性治愈
Over Exposure to Efavirenz Plasma Concentrations among Beninese HIV Patients Treated by A 600 mg Daily Dose 预览
18
作者 Allabi Aurel Constant Kiki Mikal +2 位作者 Zannou Marcel Onifade El-Fatai Alvarez Jean Claude 《药剂与药理学:英文版》 2017年第9期628-635,共8页
关键词 血浆浓度 药物治疗 Plasma HIV 患者 剂量 逆转录病毒 不良反应
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艾滋病是怎么引起的
19
《家庭医学:下半月》 2017年第8期62-63,共2页
HIV是核糖核酸(RNA)的逆转录病毒,目前认为感染HIV的人为本病的唯一传染源,包括AIDS患者和无症状HIV感染者。AIDS患者和无症状HIV感染者的各种体液均有传染性,
关键词 无症状HIV感染者 艾滋病 AIDS患者 逆转录病毒 核糖核酸 传染源 传染性
An Assessment of the Level of Knowledge of HIV-Infected Patients about Highly Active Antireteroviral Therapy and Waiting Times and Their Influence on Antiretroviral Therapy Adherence at a Primary Healthcare Centre of South Africa 预览
20
作者 N L Katende-Kyenda 《药剂与药理学:英文版》 2017年第7期467-477,共11页
关键词 HIV感染者 病毒治疗 逆转录病毒 知识水平 等待时间 卫生保健 依从性 南非
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