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新德里金属β-内酰胺酶-4的原核表达及酶活性研究
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作者 沈秉正 张玲莉 +3 位作者 祝成亮 彭燕 熊远果 喻研 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2019年第1期1-6,共6页
目的利用生物工程技术原核表达新德里金属β-内酰胺酶-4(NDM-4),测定其水解底物的酶促反应动力学参数,并研究pH值及温度对酶活性的影响。方法利用聚合酶链式反应技术扩增临床分离的携带blaNDM-4基因,扩增后克隆至pET30a载体,构建原核表... 目的利用生物工程技术原核表达新德里金属β-内酰胺酶-4(NDM-4),测定其水解底物的酶促反应动力学参数,并研究pH值及温度对酶活性的影响。方法利用聚合酶链式反应技术扩增临床分离的携带blaNDM-4基因,扩增后克隆至pET30a载体,构建原核表达重组质粒,转化至E. coli BL21(DE3)中,测定工程菌对各类β-内酰胺类抗生素抗性后,利用工程菌E. coli BL21(DE3)-pET30a-NDM-4诱导表达NDM-4酶。过表达的重组酶用Ni2+柱纯化,经蛋白电泳及质谱鉴定后,测定其水解底物的酶促反应动力学参数及最适pH值和温度。结果通过测序确定重组质粒pET30a-NDM-4序列正确,获得blaNDM-4基因的工程菌具对β-内酰胺类抗生素的抗性,过表达的重组酶相对分子质量约为28 400,纯化后蛋白浓度为0.4 g/L,该酶对包括碳青霉烯类几乎所有β-内酰胺类抗生素均具有较高水解活性,其最适pH值为7.5,最适温度为35 ℃。结论利用原核表达系统成功过表达并获得具有高效水解β-内酰胺环活性的NMD-4酶,为深入研究其作用机制及酶学特性提供了物质基础。 展开更多
关键词 新德里金属β-内酰胺-4 原核表达 促反应动力学 活性
青稞幼苗期叶片中SBEⅡa基因的克隆及其表达分析 预览
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作者 付国勇 张永永 +5 位作者 刘新春 李东梅 蔡羽 时丽洁 王丹丹 冯宗云 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期645-652,共8页
为进一步研究淀粉分支酶(Starch branching enzyme,SBE)在青稞叶片淀粉代谢中的作用,以青稞品种喜马拉雅2号和康青1号为材料,通过同源克隆技术分离SBEⅡa基因,并对分离得到的SBEⅡa基因进行生物信息学分析,同时利用实时荧光定量PCR(qRT-... 为进一步研究淀粉分支酶(Starch branching enzyme,SBE)在青稞叶片淀粉代谢中的作用,以青稞品种喜马拉雅2号和康青1号为材料,通过同源克隆技术分离SBEⅡa基因,并对分离得到的SBEⅡa基因进行生物信息学分析,同时利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术和淀粉分支酶活性测定试剂盒分析了在高温、低温和盐胁迫条件下SBEⅡa基因的表达情况和SBEⅡa蛋白酶活性的变化情况。结果表明,从喜马拉雅2号和康青1号克隆得到的SBEⅡa基因ORF区为2466bp,编码821个氨基酸。生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白质分子量为92.09kDa,预测等电点(pI)为5.4,是酸性蛋白;该蛋白酶的不稳定系数为38.03,属于稳定蛋白;参试材料与大麦的亲缘关系最近,与细江蓠的亲缘关系最远。qRT-PCR和蛋白酶活性测定结果表明,SBEⅡa基因在不同环境下表达水平和SBEⅡa蛋白酶活性变异具有高度的正相关性,在不同环境和不同材料之间没有明显差异。 展开更多
关键词 青稞 淀粉分支 实时荧光定量PCR 活性
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高山鼠兔消化系统中酶的分布和活性分析Ⅱ
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作者 杨爽 倪秀珍 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第3期141-144,共4页
为了掌握高山鼠兔消化系统中酶的分布和活性,试验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳方法,对高山鼠兔消化系统(食道、胃、小肠、大肠、盲肠、肝脏、胰脏)中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)同工酶进行分离、分析。结果表明:在高山鼠兔7... 为了掌握高山鼠兔消化系统中酶的分布和活性,试验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳方法,对高山鼠兔消化系统(食道、胃、小肠、大肠、盲肠、肝脏、胰脏)中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)同工酶进行分离、分析。结果表明:在高山鼠兔7种组织器官中,分离出SOD1~SOD25、电泳迁移率为0.809~0.033的25条谱带,酶活性顺序为肝脏>胰脏>小肠>食道>胃>大肠>盲肠;分离出POD1~POD21、电泳迁移率为0.647~0.088的21条谱带,酶活性顺序为肝脏>胰脏>食道>小肠>胃>大肠>盲肠。说明7种组织器官中SOD和POD同工酶的表达强度、谱带分布有所不同,存在明显的组织特异性。 展开更多
关键词 高山鼠兔 消化系统 超氧化物歧化 过氧化物 同工 活性 电泳
秉前环毛蚓蚓激酶的提取及活性研究初报 预览
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作者 林佳艳 王文文 唐梅 《南方农业》 2019年第19期66-68,78共4页
蚓激酶是从蚯蚓体内提取的一组具有激酶和纤溶酶活性的蛋白质,能够溶解血栓,具有很好的临床应用价值。试验采用硫酸铵粗提取的方法,从峨眉山大蚯蚓(秉前环毛蚓)体内提取蚓激酶粗提取物,测定其生物活性,并探讨pH值、金属离子及温度对粗... 蚓激酶是从蚯蚓体内提取的一组具有激酶和纤溶酶活性的蛋白质,能够溶解血栓,具有很好的临床应用价值。试验采用硫酸铵粗提取的方法,从峨眉山大蚯蚓(秉前环毛蚓)体内提取蚓激酶粗提取物,测定其生物活性,并探讨pH值、金属离子及温度对粗提物酶活性的影响。试验结果表明:1)pH值、金属离子及温度对粗提物酶活性有影响。2)pH值在5~12,蚓激酶活性相对比较稳定,当pH=8时,酶活性达到最大值;3)Pb^2+、Hg^2+抑制酶活性;K^+、Ca^2+和Fe^2+促进酶活性;4)当温度在60℃以下时,酶活性较高且稳定性好;大于80℃时几乎完全失活。 展开更多
关键词 峨眉山大蚯蚓 秉前环毛蚓 蚓激 活性 纤溶
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链球菌神经氨酸酶的作用机制及酶活性的测定技术
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作者 范玉凤 刘广锦 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期433-441,共9页
神经氨酸酶不仅存在于流感病毒,在细菌中也有分布。细菌的神经氨酸酶可裂解宿主体内糖结合物末端的神经氨酸残基,有助于细菌实现在宿主体内的定殖、穿透和扩散,是细菌重要的毒力因子之一。链球菌是自然界广泛存在的人畜共患的病原菌,在... 神经氨酸酶不仅存在于流感病毒,在细菌中也有分布。细菌的神经氨酸酶可裂解宿主体内糖结合物末端的神经氨酸残基,有助于细菌实现在宿主体内的定殖、穿透和扩散,是细菌重要的毒力因子之一。链球菌是自然界广泛存在的人畜共患的病原菌,在多种链球菌中均可检测出神经氨酸酶。肺炎链球菌的神经氨酸酶研究最为透彻,该菌可产生3种神经氨酸酶(NanA,NanB,NanC),NanA不但可以发挥酶的催化作用,分解唾液酸残基,暴露细菌的黏附受体,还能不依赖酶活基团,辅助细菌感染宿主细胞;NanB催化后产物可作为细菌的碳源;NanC可辅助细菌入侵脑部。在无乳链球菌和猪链球菌中,神经氨酸酶的活性一直未得到确切的验证,可能是由于它们的荚膜均含有神经氨酸,所以其神经氨酸酶的活性逐渐在进化中丧失。另外一些链球菌,例如化脓链球菌和C、G、L群链球菌,其神经氨酸酶的底物偏好相近,均对唾液类黏蛋白的催化活性较强,利于链球菌在含唾液类黏蛋白的组织中扩散。在口腔链球菌和血链球菌中,神经氨酸酶破坏血液成分中的神经氨酸链。由此可见,神经氨酸酶的特异性催化作用与链球菌在宿主体内的定植部位密切相关。此外,随着科技的发展,对神经氨酸酶的活性检测,也由早期的硫代巴比妥法,转为现在的荧光值和吸光度的测定,更为便捷和敏感。本文旨在对链球菌的神经氨酸酶的作用机制、与毒力关系及酶活测定方法等研究进展作一综述,为从事相关研究的科学工作者提供参考。 展开更多
关键词 链球菌 神经氨酸 致病性 活性
四种植物精油成分对枸杞棉蚜的生物活性 预览
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作者 陈新华 万炜 +3 位作者 冯淑军 许胜利 杨建军 段立清 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期453-460,共8页
【目的】研究植物精油4种成分丁香酚(eugenol)、α-松油醇(α-terpineol)、肉桂油(cinnamon oil)和香茅油(citronella oil)对枸杞棉蚜Aphis gossypii的生物活性以及马来酸二乙酯和水杨酸乙酯对这些化合物对枸杞棉蚜毒力的影响,为无公害... 【目的】研究植物精油4种成分丁香酚(eugenol)、α-松油醇(α-terpineol)、肉桂油(cinnamon oil)和香茅油(citronella oil)对枸杞棉蚜Aphis gossypii的生物活性以及马来酸二乙酯和水杨酸乙酯对这些化合物对枸杞棉蚜毒力的影响,为无公害防治枸杞(Lyciumspp.)害虫奠定科学基础。【方法】采用二项选择法测定上述4种精油成分(1%)对枸杞棉蚜无翅成蚜的驱避作用;玻璃管药膜法进行生物测定,评估这4种化合物及其与马来酸二乙酯或水杨酸乙酯的混合液对枸杞棉蚜成蚜的毒力;采用生物化学方法分析这些化合物处理后枸杞棉蚜成蚜乙酰胆碱酯酶(AChE)和三磷酸腺苷酶(ATPase)的离体活性。【结果】α-松油醇(1%)对枸杞棉蚜无翅成蚜的驱避作用明显,1,2和3h的驱避率分别为58.1%,58.6%和55.7%;3h时测试的4种化合物对枸杞棉蚜成蚜的驱避率由大到小依次为α-松油醇>香茅油>肉桂油>丁香酚。丁香酚对枸杞棉蚜成蚜的毒杀作用最强,处理4h时的LC50值为0.48mL/L,肉桂油、α-松油醇、香茅油对枸杞棉蚜成蚜的LC50值分别为1.23,6.24和11.97mL/L。对枸杞棉蚜成蚜的生物测定结果表明,马来酸二乙酯对香茅油、肉桂油、丁香酚和α-松油醇的增效比分别为2.75,2.86,1.78和1.56;水杨酸乙酯对香茅油、肉桂油、丁香酚和α-松油醇的增效比分别为3.41,2.67,2.00和1.89。毒力比结果表明,所测定的4种化合物对枸杞棉蚜的毒力相差49.9倍,丁香酚与马来酸二乙酯或水杨酸乙酯的混合液对枸杞棉蚜的触杀毒力最高。4种精油成分对枸杞棉蚜成蚜AChE和ATPase活性有不同的作用,丁香酚对AChE活性的抑制作用最强,但对ATPase活性表现为低浓度促进,高浓度抑制。【结论】α-松油醇对枸杞棉蚜驱避作用最好;丁香酚、α-松油醇、肉桂油和香茅油这4种精油成分对枸杞棉蚜的毒力相差很大;丁香酚与马来酸二乙酯或水杨酸乙酯混合后对枸杞棉蚜的� 展开更多
关键词 枸杞棉蚜 精油 成分 毒力 驱避活性 活性 增效剂
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漆酶品质提升的新技术及其在纺织中的应用 预览
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作者 付博 王家哲 +2 位作者 陈卫锋 任平 赵文娟 《纺织导报》 CAS 2019年第5期91-94,共4页
文章详细阐述了分子定向进化技术、采用离子液作为催化新反应介质、基于纳米材料与微反应器的固定化技术等提高漆酶产量、活性和稳定性的新技术在改造漆酶中的重要作用;对当前漆酶在纺织纤维改性、增强棉织物的漂白效果、对纺织染料进... 文章详细阐述了分子定向进化技术、采用离子液作为催化新反应介质、基于纳米材料与微反应器的固定化技术等提高漆酶产量、活性和稳定性的新技术在改造漆酶中的重要作用;对当前漆酶在纺织纤维改性、增强棉织物的漂白效果、对纺织染料进行脱色和解毒、纺织品生物染色、作为可穿戴医疗监护服装的生物传感器等方面的研究进展进行了综述;对漆酶未来在纺织领域的研究重点进行了分析,对降低漆酶生产成本、加快漆酶在纺织领域的无污染处理、结合时代发展推进创新应用等前景进行了展望。 展开更多
关键词 产量 活性 新技术 纺织应用
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沙地樟子松人工林土壤酶活性及其影响因子
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作者 于德良 雷泽勇 +3 位作者 张岩松 于东伟 周晏平 姜吉文 《干旱区研究》 CSCD 北大核心 2019年第3期621-629,共9页
采用通径分析的方法对辽宁省章古台地区10~60 a沙地樟子松人工林的多种土壤理化因子与5种土壤酶活性进行分析。结果表明:5种土壤酶活性与多数土壤理化因子相关性显著,土壤酶活性能够表征该区域土壤综合肥力状况。不同土壤酶活性主要影... 采用通径分析的方法对辽宁省章古台地区10~60 a沙地樟子松人工林的多种土壤理化因子与5种土壤酶活性进行分析。结果表明:5种土壤酶活性与多数土壤理化因子相关性显著,土壤酶活性能够表征该区域土壤综合肥力状况。不同土壤酶活性主要影响因子不同,蔗糖酶主要影响因子综合作用排序为:有机质>黏粒>速效磷> p H;蛋白酶主要影响因子综合作用排序为:碱解氮>速效钾>含水率;磷酸酶主要影响因子综合作用排序为:全磷>速效钾>粉粒;过氧化氢酶主要影响因子综合作用排序为:p H>容重>全磷>全钾;脲酶主要影响因子综合作用排序为:p H>黏粒>全氮>含水率。与简单相关分析相比,通径分析方法能更深入地了解土壤酶活性和土壤理化因子的关系,期望通过对土壤酶活性主要影响因子的研究为樟子松人工林的抚育和土壤改良提供依据。 展开更多
关键词 樟子松 人工林 土壤 活性 影响因子 通径分析 辽宁
牛支原体武威分离株eno基因的克隆、表达及酶活测定
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作者 高翔 王昱茜 +2 位作者 邢小勇 魏彦明 包世俊 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期936-942,共7页
牛支原体(Mycoplasma bovis, Mb)是引起肉牛(Bos taurus)和奶牛疾病的重要病原之一,给养牛业造成了重大的经济损失。烯醇化酶(enolase, eno)为糖酵解途径的关键限速酶,主要催化2-磷酸甘油酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸。为研究Mb eno酶促活... 牛支原体(Mycoplasma bovis, Mb)是引起肉牛(Bos taurus)和奶牛疾病的重要病原之一,给养牛业造成了重大的经济损失。烯醇化酶(enolase, eno)为糖酵解途径的关键限速酶,主要催化2-磷酸甘油酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸。为研究Mb eno酶促活性及其动力学参数,本研究参照GenBank中Mb PG45株eno基因(NC_014760.1)序列设计特异性引物,应用PCR扩增获得Mb武威分离株的eno基因。在序列分析及基因优化的基础上,构建其原核表达载体pET-eno并转化大肠杆菌(Escherichia coli)表达菌Transetta (DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导表达,在十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl dulfate polyacrylamide gel electropheresis, SDS-PAGE)分析的基础上,纯化表达产物对其酶促活性进行分析。结果表明,优化后的Mb武威株eno基因在大肠杆菌中成功获得表达,重组蛋白His-eno大小约为53 kD,且主要以可溶性蛋白形式存在;酶活分析结果显示:纯化产物His-eno的催化活性略高于兔肌肉烯醇化酶,且其最适温度为42 ℃,最适pH为8.0。双倒数作图所得His-eno米氏常数(Km)和最大反应速率(Vmax)分别为4.1×10^-3 mol/L和3.4 μmol/(L·min)。本研究结果为进一步研究Mb eno的生物学功能提供基础资料。 展开更多
关键词 牛支原体 烯醇化 原核表达 活性
伊犁河谷不同类型湿地土壤活性有机碳组分及其含量差异
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作者 崔东 闫俊杰 +1 位作者 刘海军 陈晨 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期2087-2093,共7页
土壤活性有机碳对环境变化反应敏感,为探讨伊犁河谷不同类型湿地土壤活性有机碳组分含量及其影响因素,本研究以伊犁河谷常年水淹的芦苇湿地、极少水淹的雀稗湿地以及季节性水淹的拂子茅湿地为对象,测定0~40 cm土层内土壤易氧化有机碳(E... 土壤活性有机碳对环境变化反应敏感,为探讨伊犁河谷不同类型湿地土壤活性有机碳组分含量及其影响因素,本研究以伊犁河谷常年水淹的芦苇湿地、极少水淹的雀稗湿地以及季节性水淹的拂子茅湿地为对象,测定0~40 cm土层内土壤易氧化有机碳(EOC)、可溶性有机碳(DOC)、微生物生物量碳(MBC)的含量,分析不同类型湿地EOC、DOC和MBC之间的相关性及其与土壤酶活性(蔗糖酶、脲酶、过氧化氢酶)、土壤养分(铵态氮、全磷)和土壤有机碳(SOC)之间的关系。结果表明:3种不同类型湿地土壤活性有机碳组分在0~40 cm土层内的垂直分异规律一致,均随土壤剖面的加深而递减,而土壤MBC、EOC和DOC含量差异性显著(P<0.05),其中芦苇湿地的土壤MBC、EOC和DOC含量均最低;3种类型湿地中,MBC、EOC和DOC所占SOC的比例分别在4.33%~18.02%、28.85%~66.06%、0.73%~1.36%;除DOC所占SOC比例在0~40 cm土层内呈现先增大后减小规律外,MBC和EOC占SOC比例未呈现一致的变化规律;3种土壤活性有机碳组分所占土壤有机碳的比例以EOC所占比例最大,DOC所占比例最小;MBC、EOC占SOC的比例均以雀稗湿地最高,DOC所占比例以拂子茅湿地最高,而芦苇湿地MBC、EOC和DOC比例均较低;3种类型湿地MBC、EOC和DOC彼此之间相关性均达到显著水平,DOC与土壤全磷相关性不显著,而3种土壤活性有机碳组分与土壤养分、土壤酶活性相关性均达到显著水平。本研究表明,土壤酶活性和土壤养分是影响土壤活性有机碳含量的重要因子。 展开更多
关键词 伊犁河谷 湿地 活性 土壤活性有机碳组分 土壤养分
烟草不同叶位多酚含量及相关酶活性变化的研究 预览
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作者 李晓宁 徐兴阳 +2 位作者 范茂攀 杨青松 赵艳 《湖北农业科学》 2019年第9期80-85,106共7页
为分析烟叶在生长过程中的次生代谢物质动态变化特征、相关酶的活性变化规律,以3个烤烟种植试验点的烤烟为研究对象,研究不同叶位烟草叶片多酚类物质含量、抗氧化活性和表达量。结果表明,同一个采样点中,不同叶位烟叶多酚类物质含量表... 为分析烟叶在生长过程中的次生代谢物质动态变化特征、相关酶的活性变化规律,以3个烤烟种植试验点的烤烟为研究对象,研究不同叶位烟草叶片多酚类物质含量、抗氧化活性和表达量。结果表明,同一个采样点中,不同叶位烟叶多酚类物质含量表现为上叶位>中叶位>下叶位。不同叶位烟草叶片PAL、PPO、C4H和4CL活性以上叶位最高。通过多酚体外抗氧化测定,表明不同叶位多酚对DPPH和羟基自由基有一定的清除能力。荧光定量PCR检测发现,PAL基因和PPO基因在上叶位中的表达显著高于其他叶位。烤烟生长过程中的次生代谢物质动态变化,相关酶的活性变化及基因表达水平与烟叶成熟度存在一定的关联。 展开更多
关键词 烟草 不同叶位 多酚 活性 抗氧化活性
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不同砧木对‘赤霞珠’葡萄果实白藜芦醇含量及其相关酶活性的影响 预览
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作者 何旺 孙军利 +4 位作者 赵宝龙 章智钧 刘连玲 潘立忠 常心怡 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期738-747,共10页
【目的】研究不同砧木的‘赤霞珠’葡萄果实中白藜芦醇(resveratrol,Res)含量及相关酶活性,为北疆地区筛选Res含量较高的赤霞珠砧穗组合提供理论依据。【方法】采用‘赤霞珠’(Cabernet Sauvignon,CS)自根苗(CK)为对照,以‘3309C‘’11... 【目的】研究不同砧木的‘赤霞珠’葡萄果实中白藜芦醇(resveratrol,Res)含量及相关酶活性,为北疆地区筛选Res含量较高的赤霞珠砧穗组合提供理论依据。【方法】采用‘赤霞珠’(Cabernet Sauvignon,CS)自根苗(CK)为对照,以‘3309C‘’1103P‘’140R‘’SO4‘’5C’5种抗性砧木嫁接‘赤霞珠’为处理组合。对‘赤霞珠’葡萄转色期至成熟期果皮和种子中Res含量及相关酶活性进行动态测定,相关酶包括苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)、肉桂酸-4-羟化酶(cinnamic acid 4-hydroxylase,C4H)、4-香豆酸-辅酶A连接酶(4-coumarate CoA ligase,4CL)、丙二酰辅酶A(Malonly-CoA,COA)和4-香豆酰辅酶A(4-coumaroyl-CoA,4CA)。【结果】砧木对砧穗葡萄果实中Res含量及其相关酶活性会产生一定影响,在各砧穗组合中,CS/140R、CS/SO4、CS/5C果皮与种子中Res含量与对照相比均显著增加,其中CS/140R组合在种子与果皮中Res含量均最高;而CS/1103P和CS/3309C组合与对照相比则无显著性差异;各砧木均不同程度地提高赤霞珠葡萄果实内PAL、C4H、4CL、COA、4CA活性,其中‘140R’可显著提高各个酶活性,并在种子与果皮中其活性均显著高于其他砧穗组合;对5种酶活性与Res含量相关性分析后发现,这5种酶活性与Res含量均呈正显著相关水平,其中COA、4CA活性与Res含量相关系数最大。【结论】与自根苗相比,抗性砧木可以提高‘赤霞珠’葡萄种子与果皮内Res含量及其合成相关酶活性,CS/140R组合对提高‘赤霞珠’葡萄种子和果皮中Res含量和PAL、C4H、4CL、COA、4CA活性明显优于其他处理。 展开更多
关键词 '赤霞珠’葡萄 抗性砧木 白藜芦醇 活性 果皮和种子
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锑胁迫对斑马鱼酶活性的影响研究 预览
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作者 岳鑫 杨爱江 +3 位作者 徐鹏 胡霞 朱桓毅 包欣 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期107-113,共7页
研究重金属锑胁迫下,分析生物体内各类酶活性的变化,了解生物对锑胁迫的响应机制。以斑马鱼为受体研究对象,探究不同浓度锑溶液(0、10、20、30 和40 mg/L)和不同时间(24、48、96 和144 h)培养下,斑马鱼体内不同酶活性的变化情况。研究... 研究重金属锑胁迫下,分析生物体内各类酶活性的变化,了解生物对锑胁迫的响应机制。以斑马鱼为受体研究对象,探究不同浓度锑溶液(0、10、20、30 和40 mg/L)和不同时间(24、48、96 和144 h)培养下,斑马鱼体内不同酶活性的变化情况。研究结果表明,培养24 h 时,不同浓度锑对斑马鱼体内除碱性磷酸酶以外的7 种酶活性均有明显的抑制作用。随着锑胁迫时间增加,斑马鱼体内三磷酸腺苷酶、过氧化氢酶活性呈现先降低后增加的变化趋势;过氧化物酶、超氧化物歧化酶、乙酰胆碱酯酶、乳酸脱氢酶和酸性磷酸酶活性呈现“锯齿形”变化趋势;碱性磷酸酶酶活性呈现先增加后降低的变化趋势。综上分析表明锑对斑马鱼体内自由基调节、兴奋传导、能量代谢、物质运输、机体生长和免疫防御等生命过程都有明显的影响。 展开更多
关键词 斑马鱼 毒理性 活性
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中间球海胆乳酸脱氢酶基因克隆及其对海水酸化的响应 预览
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作者 崔东遥 任丽媛 +4 位作者 邢冬飞 孙景贤 李莹莹 常亚青 湛垚垚 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1423-1437,共15页
为明确中间球海胆乳酸脱氢酶(LDH)基因序列及表达特征,研究其对海水酸化胁迫的响应,实验利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得中间球海胆LDH基因(命名为SiLDH)的全长cDNA,并且比较了海水酸化胁迫下,中间球海胆不同组织SiLDH基因表达及总... 为明确中间球海胆乳酸脱氢酶(LDH)基因序列及表达特征,研究其对海水酸化胁迫的响应,实验利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得中间球海胆LDH基因(命名为SiLDH)的全长cDNA,并且比较了海水酸化胁迫下,中间球海胆不同组织SiLDH基因表达及总LDH活性的变化情况。结果显示:①SiLDH基因的cDNA全长为1 499 bp,包含133 bp的5′非编码区,349 bp的3′非编码区和1 017 bp编码338个氨基酸的开放阅读框(ORF)。SiLDH编码蛋白的相对分子量为36.40 ku,理论等电点为6.55,属于无信号肽的非跨膜、温和疏水蛋白。②生物信息学分析显示,SiLDH蛋白序列与紫球海胆LDH X4蛋白序列一致性最高(90.88%)。③实时荧光定量PCR(qRT-PCR)发现,SiLDH基因在检测的4种组织中均有表达,相对表达量从高到低为性腺>管足>肠>体腔液;总LDH活性检测显示,中间球海胆总LDH活性从高到低为性腺>管足>体腔液>肠;④海水酸化处理60 d后发现,与自然海水组(pH 8.06±0.01)相比,SiLDH基因在中间球海胆性腺、管足和肠道中呈现总体降低趋势,在体腔液中则呈现随海水pH降低先降低后显著升高的趋势;总LDH活性在性腺、管足和体腔液中呈现随海水pH降低而降低的趋势,在肠道中则呈现随海水pH降低先降低后显著升高的趋势。研究表明,中间球海胆面对海水酸化时可能通过调节SiLDH基因的表达和LDH活性来缓解海水酸化带来的负面影响。 展开更多
关键词 中间球海胆 乳酸脱氢 海水酸化 基因克隆 基因表达 活性
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外源喷施FeSO4对‘黄金梨’黄化叶片氮代谢相关酶活性及基因表达量的影响
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作者 叶振风 刘超 +2 位作者 衡伟 朱立武 贾兵 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2019年第2期337-341,共5页
为了探寻供铁水平对梨叶片氮代谢相关酶活性及基因表达量的影响,利用不同浓度FeSO4喷施‘黄金梨’,分析处理3、6、9和12d后‘黄金梨’叶片中N含量,硝酸还原酶(NR)、亚硝酸还原酶(NiR)、谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸合酶(GOGAT)的酶活性... 为了探寻供铁水平对梨叶片氮代谢相关酶活性及基因表达量的影响,利用不同浓度FeSO4喷施‘黄金梨’,分析处理3、6、9和12d后‘黄金梨’叶片中N含量,硝酸还原酶(NR)、亚硝酸还原酶(NiR)、谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸合酶(GOGAT)的酶活性及其基因表达量差异。结果表明,通过不同浓度FeSO4处理,‘黄金梨’叶片中N含量均显著性增加,达到正常叶片中含量水平。黄化‘黄金梨’叶片中4种酶活性显著低于正常叶片,供铁显著增强了黄化‘黄金梨’叶片中NR、NiR、GS和GOGAT酶活性。黄化‘黄金梨’叶片4种酶基因表达量显著低于正常叶片;随着喷施水平的提高,NR、Fd-GOGAT和GS基因表达量较黄化叶片有显著性上升;0.10%和0.15%的FeSO4处理的NiR基因表达量显著高于未处理黄化叶片。该结果说明叶片施Fe增强相关酶活性,提高相关基因表达水平,有效的促进N含量的增加;叶面喷施外源FeSO4可有效恢复黄金梨叶片黄化的症状,以0.10%~0.15%浓度处理效果最好。 展开更多
关键词 叶片施铁 N代谢 活性 基因表达
耕作模式对东北风沙土酶活性的影响 预览
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作者 乔云发 钟鑫 +2 位作者 苗淑杰 陆欣春 李琪 《安徽农业科学》 CAS 2019年第15期68-71,共4页
[目的]探讨不同集成耕作模式对东北风沙土土壤酶活性的影响。[方法]在东北风沙土区开展耕作模式的田间对比试验,以传统耕作模式(CT)为对照,研究3种集成耕作模式(ITP1、ITP2和ITP3)对风沙土土壤酶(脲酶、磷酸酶、蔗糖酶、过氧化氢酶)活... [目的]探讨不同集成耕作模式对东北风沙土土壤酶活性的影响。[方法]在东北风沙土区开展耕作模式的田间对比试验,以传统耕作模式(CT)为对照,研究3种集成耕作模式(ITP1、ITP2和ITP3)对风沙土土壤酶(脲酶、磷酸酶、蔗糖酶、过氧化氢酶)活性、速效养分、有机质的影响及其相互之间的关系。[结果]与传统种植CT模式相比,ITP1模式显著增加脲酶、磷酸酶、蔗糖酶和过氧化氢酶活性,分别增加了68.57%、74.04%、31.44%和20.44%;ITP2模式增加脲酶、磷酸酶和蔗糖酶活性,但是降低过氧化氢酶活性;ITP3模式脲酶和蔗糖酶活性增加,过氧化氢酶活性降低。与传统种植CT模式相比,ITP1模式增加土壤速效养分(N、P、K)和有机质含量,ITP2模式显著增加土壤速效K和有机质含量,ITP3模式差异不显著。脲酶活性与土壤碱解氮、速效钾、有机质含量呈显著正相关;磷酸酶活性与土壤速效磷、有机质、碱解氮含量呈显著正相关。[结论]从耕作模式对土壤有机质含量、速效养分含量及酶活性影响的角度分析,ITP1模式最适合风沙土区玉米种植,ITP2模式次之,而ITP3模式不适合。 展开更多
关键词 活性 耕作 风沙土 玉米
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模拟破坏苦杏仁和桃仁品质及酶活性变化研究 预览
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作者 林史珍 杜方敏 +1 位作者 林良静 高向阳 《中国药业》 CAS 2019年第15期5-8,共4页
目的探讨贮存过程中苦杏仁和桃仁品质的变化规律。方法在温度为35℃、相对湿度为80%的环境中放置1,3,4 d,测定油脂含量、酸价、过氧化值、β-葡萄糖苷酶和多酚氧化酶活性。结果放置4 d后,苦杏仁、桃仁油脂含量分别从原来的59%降至47%和3... 目的探讨贮存过程中苦杏仁和桃仁品质的变化规律。方法在温度为35℃、相对湿度为80%的环境中放置1,3,4 d,测定油脂含量、酸价、过氧化值、β-葡萄糖苷酶和多酚氧化酶活性。结果放置4 d后,苦杏仁、桃仁油脂含量分别从原来的59%降至47%和37%;油脂氧化程度不断升高;苦杏仁和桃仁的苦杏仁苷含量分别从67,58mg/g降至55,55mg/g;β-葡萄糖苷酶和多酚氧化酶活力均呈上升趋势。结论模拟苦杏仁和桃仁实际贮存条件的加速破坏试验,可为探讨其品质的变化规律和变质预测提供参考,从控制酶的活性来保障苦杏仁、桃仁和其他富油果仁贮存品质值得进一步研究。 展开更多
关键词 苦杏仁 桃仁 品质 高温高湿加速破坏 活性
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绿茶可以减肥吗 预览
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作者 金喆雯 张俊宇 冷春波 《发明与创新:中学生(B)》 2019年第6期28-30,共3页
绿茶是饮用较广泛的一种茶,茶叶中的茶多酚可以降血脂,其主要机制是:通过抑制肠道内外源性胆固醇的吸收、提高卵磷酸脂胆固醇脂酰基转移酶活性和高密度脂蛋白胆固醇水平、调节载脂蛋白和脂蛋白水平、加速胆固醇代谢及促进胆固醇的排泄... 绿茶是饮用较广泛的一种茶,茶叶中的茶多酚可以降血脂,其主要机制是:通过抑制肠道内外源性胆固醇的吸收、提高卵磷酸脂胆固醇脂酰基转移酶活性和高密度脂蛋白胆固醇水平、调节载脂蛋白和脂蛋白水平、加速胆固醇代谢及促进胆固醇的排泄等机制调节血清中总胆固醇和LDL胆固醇的含量。通过抑制胰脂肪酶的活性降低对外源性三酰甘油(TG)的吸收、降低脂肪酸合成酶(FAS)的活性而减少脂肪的合成、增强肝脂酶活性加速TG的代谢及促进脂肪酸的排泄来调节TG代谢。 展开更多
关键词 高密度脂蛋白胆固醇 绿茶 减肥 活性 载脂蛋白 总胆固醇 外源性 脂肪
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常规籼稻黄华占籽粒淀粉和蔗糖代谢相关酶活性对夜温升高的响应 预览
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作者 张文倩 王亚梁 +7 位作者 朱德峰 陈惠哲 向镜 张义凯 武辉 胡国辉 易子豪 张玉屏 《生物技术进展》 2019年第3期283-289,共7页
为了揭示夜间温度升高对灌浆过程中籽粒灌浆生理过程的影响规律,采用人工气候箱模拟自然环境的温度变化,在水稻灌浆的3个时期P1(水稻开花后的前10d)、P2(水稻开花后11~20d)和P3(水稻开花后21~30d),均设置21℃(T1)、25℃(T2)和29℃(T3)3... 为了揭示夜间温度升高对灌浆过程中籽粒灌浆生理过程的影响规律,采用人工气候箱模拟自然环境的温度变化,在水稻灌浆的3个时期P1(水稻开花后的前10d)、P2(水稻开花后11~20d)和P3(水稻开花后21~30d),均设置21℃(T1)、25℃(T2)和29℃(T3)3种不同的夜间温度处理,日间最高温度为32℃,研究水稻灌浆期间,不同灌浆时段夜温升高对水稻籽粒淀粉和蔗糖含量及其代谢相关酶活性的影响。结果表明,水稻开花后的P1时期和P2时期籽粒淀粉和蔗糖代谢相关酶活性受夜温升高的影响较大,其中P1时期是淀粉代谢对夜温变化最敏感的时期。灌浆初期(P1),夜温升高,淀粉含量显著上升,直链淀粉和支链淀粉的含量也随之上升,蔗糖含量下降;蔗糖合成酶、可溶性淀粉合成酶和淀粉分支酶活性下降,蔗糖磷酸合成酶日间酶活性上升而夜间下降,这说明夜温升高对酶活性的影响具有持续效应,即日间酶活性也会受到夜温升高的影响。研究结果为明确水稻籽粒灌浆过程中气候变化对籽粒物质积累的影响机制提供了参考。 展开更多
关键词 水稻 夜温升高 籽粒灌浆 淀粉 活性
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GA3与ABA对黑穗醋栗二次萌芽总酚含量及代谢酶活性的影响 预览
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作者 员盎然 孙小娟 +5 位作者 马小雯 高静 谢禛名 张妍 秦栋 霍俊伟 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1263-1270,共8页
【目的】了解黑穗醋栗发生二次萌芽过程中总酚含量及其合成代谢关键酶活性的变化规律,为揭示黑穗醋栗发生二次萌芽的内在机理及其人工调控提供科学依据。【方法】以易发生二次萌芽的黑穗醋栗品种亚德和不易发生二次萌芽的黑穗醋栗品种... 【目的】了解黑穗醋栗发生二次萌芽过程中总酚含量及其合成代谢关键酶活性的变化规律,为揭示黑穗醋栗发生二次萌芽的内在机理及其人工调控提供科学依据。【方法】以易发生二次萌芽的黑穗醋栗品种亚德和不易发生二次萌芽的黑穗醋栗品种布劳德为试材,使用30.0mg/L赤霉素(GA3)和50.0mg/L脱落酸(ABA)进行叶面喷施处理,以喷清水为对照(CK1和CK2),利用Folin-酚比色法和酶联免疫分析试剂盒测定各处理黑穗醋栗品种二次萌芽的总酚含量及关键酶活性。【结果】在黑穗醋栗品种亚德和布劳德发生二次萌芽过程中,总酚含量及苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮异构酶(CHI)和肉桂酸-4-羟化酶(C4H)活性降低,多酚氧化酶(PPO)活性升高;经30.0mg/LGA3处理后亚德和布劳德二次萌芽的总酚含量明显低于CK1和CK2,PAL和CHI活性明显低于CK1和CK2,PPO活性明显高于CK1和CK2,C4H活性总体上低于CK1和CK2;经50.0mg/LABA处理后亚德二次萌芽的总酚含量显著高于GA3处理和CK1(P<0.05,下同),经50.0mg/LABA处理亚德各测定日期(除8月17日外)的总酚含量均显著高于GA3处理,且明显高于CK2;50.0mg/LABA处理的亚德和布劳德PAL活性明显高于GA3处理及CK1和CK2,PPO活性除8月17日外均显著低于GA3处理,且明显低于CK1和CK2,CHI和C4H活性总体上明显高于GA3处理及CK1和CK2。【结论】叶面喷施50.0mg/LABA可提高黑穗醋栗品种亚德和布劳德二次萌芽的代谢关键酶PAL、CHI和C4H活性,降低PPO活性,促进总酚合成并抑制其氧化分解,从而抑制黑穗醋栗品种亚德和布劳德发生二次萌芽。 展开更多
关键词 黑穗醋栗 二次萌芽 赤霉素(GA3) 脱落酸(ABA) 酚类物质含量 活性
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