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呋喃西林代谢物单克隆抗体及荧光免疫层析试纸条的制备 预览
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作者 郭会灿 崔海波 徐冬梅 《肉类研究》 北大核心 2019年第3期46-51,共6页
为建立一种基于荧光免疫层析技术的呋喃西林代谢物的快速检测方法,采用活性酯法合成呋喃西林代谢物(氨基脲盐酸盐)(semicarbazide hydrochloride,SEM)人工抗原,并获得SEM的单克隆抗体,通过将量子点微球(quantumdot submicrobeads,QBs)与... 为建立一种基于荧光免疫层析技术的呋喃西林代谢物的快速检测方法,采用活性酯法合成呋喃西林代谢物(氨基脲盐酸盐)(semicarbazide hydrochloride,SEM)人工抗原,并获得SEM的单克隆抗体,通过将量子点微球(quantumdot submicrobeads,QBs)与SEM偶联,得到QBs探针,制备荧光免疫层析试纸条。结果表明:SEM免疫荧光层析试纸条检测鱼肉组织的检测限为0.247μg/L,不同添加质量浓度的回收率均在70%~120%之间,批内、批间变异系数均在15%以下,符合我国动物源食品中兽药残留检测方法相关指导文件的规定,且在2~8℃条件下可以保存6个月以上,稳定性良好。 展开更多
关键词 呋喃西林代谢物 荧光免疫层析 免疫抗原 样品预处理 量子
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苯乙醇胺A荧光免疫层析试纸条的制备及特性 预览
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作者 郭会灿 李君华 +1 位作者 王丽君 李春生 《肉类研究》 北大核心 2019年第1期55-59,共5页
为通过荧光免疫层析技术制备一种快速、灵敏、特异性强的尿液中苯乙醇胺A(phenylethanolamine A,PEAA)的检测方法,采用重氮化法合成PEAA人工抗原,并通过免疫、融合、有限稀释法获得特异性抗PEAA的单克隆抗体,通过将量子点微球与PEAA偶联... 为通过荧光免疫层析技术制备一种快速、灵敏、特异性强的尿液中苯乙醇胺A(phenylethanolamine A,PEAA)的检测方法,采用重氮化法合成PEAA人工抗原,并通过免疫、融合、有限稀释法获得特异性抗PEAA的单克隆抗体,通过将量子点微球与PEAA偶联,制备荧光免疫层析试纸条。结果表明:PEAA免疫荧光层析试纸条的检测限为0.496μg/L,回收率在80%~120%之间,批内、批间变异系数均小于10%,与其他类似物的交叉反应率小于5%,特异性良好。说明将荧光免疫层析技术应用到PEAA检测中是可行的,且制备的PEAA荧光免疫层析试纸条灵敏度高、准确性好、特异性好,应用前景广阔。 展开更多
关键词 苯乙醇胺A 荧光免疫层析 免疫抗原 偶联比 量子
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4种硝基呋喃代谢物复合荧光免疫层析试纸条的制备 预览
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作者 郭会灿 《肉类研究》 北大核心 2019年第4期29-35,共7页
为建立一种基于量子点荧光免疫层析技术快速检测4 种硝基呋喃类代谢物的方法,采用N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochlorid... 为建立一种基于量子点荧光免疫层析技术快速检测4 种硝基呋喃类代谢物的方法,采用N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride,EDC)法合成4 种硝基呋喃类代谢物的人工抗原,并融合制备对应的单克隆抗体,通过EDC-NHS一步法将量子点微球(quantum dot submicrobeads,QBs)分别与3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(5-morpholine-methyl-3-amino-2-oxazolidinone,AMOZ)、1-氨基-2-乙内酰(1-aminohydantoin,AHD)和氨基脲(semicarbazid,SEM)偶联,得到相应的QBs探针,在此基础上制备复合荧光免疫层析试纸条。结果表明:AOZ、AHD、SEM和AMOZ的检出限分别为0.4、0.4、0.5、0.5 μg/L;通过加标回收实验对批内和批间的重复性和准确度进行评价,得出该试纸条的批内检测回收率为80%~110%,批内变异系数在15%以内,批间回收率为80%~100%,批间变异系数在15%以内;且AOZ、AHD、SEM和AMOZ之间的交叉反应率小于0.1%,说明成功将荧光免疫层析技术和多元检测技术相结合,应用于同时检测4 种硝基呋喃类代谢物,且试纸条的灵敏度和准确性高、特异性好。 展开更多
关键词 硝基呋喃代谢物 荧光免疫层析 免疫抗原 量子
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基于新型量子点荧光微球的氯霉素免疫层析试纸条的制备和应用 预览 被引量:3
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作者 丁乔棋 李丽 +4 位作者 范文韬 吕亚楠 胡建华 闫丽萍 宋素泉 《分析化学》 CSCD 北大核心 2017年第11期1686-1693,共8页
以羧基化CdTe/ZnSe量子点荧光微球为标记物,通过1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)活化法将氯霉素(CAP)单克隆抗体与量子点荧光微球偶联制备荧光探针。氯霉素全抗原(CAP-HS-BSA)及羊抗鼠二抗分别喷... 以羧基化CdTe/ZnSe量子点荧光微球为标记物,通过1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)活化法将氯霉素(CAP)单克隆抗体与量子点荧光微球偶联制备荧光探针。氯霉素全抗原(CAP-HS-BSA)及羊抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维素膜,形成检测线(T线)和质控线(C线),组装成新型氯霉素量子点荧光微球免疫层析试纸条,建立了快速、定量检测牛奶中CAP的方法。本研究开发的量子点荧光微球试纸条可在15min内完成牛奶样品中CAP的定量检测,线性范围为0.1~100.0μg/L,检出限为0.1μg/L。牛奶样品CAP的加标回收率为93.3%~97.9%,相对标准偏差在4.9%~6.9%之间。 展开更多
关键词 氯霉素 量子 免疫层析试纸条
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基于万古霉素建立荧光酶联免疫吸附法检测金黄色葡萄球菌
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作者 李双 陈超超 陈雪岚 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2018年第9期1510-1517,共8页
以猪IgG作为捕获抗体固定金黄色葡萄球菌,修饰有万古霉素的量子点荧光微球作为"检测抗体",建立荧光酶联免疫吸附法检测金黄色葡萄球菌。文中制备了平均粒径为100 nm的量子点荧光微球并与万古霉素偶联;摸索了反应最佳盐离子浓度为0.01 ... 以猪IgG作为捕获抗体固定金黄色葡萄球菌,修饰有万古霉素的量子点荧光微球作为"检测抗体",建立荧光酶联免疫吸附法检测金黄色葡萄球菌。文中制备了平均粒径为100 nm的量子点荧光微球并与万古霉素偶联;摸索了反应最佳盐离子浓度为0.01 mol/L,反应最佳pH为6.0。在该实验条件下,金黄色葡萄球菌的检测灵敏度为10^4 CFU/mL,与其他致病菌无交叉反应。以上结果表明,该方法可用于快速检测金黄色葡萄球菌,为金黄色葡萄球菌的临床监控和食品检测提供参考。 展开更多
关键词 金黄色葡萄 万古霉素 量子荧光 荧光酶联免疫吸附法 猪IgG
量子点荧光微球免疫层析试纸条定量检测恶性疟原虫 预览 被引量:18
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作者 段宏 陈雪岚 +4 位作者 江湖 沈骏 董胜明 熊勇华 Andrew Wang 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第3期338-343,共6页
以羧基化Cd Te/Zn Se量子点荧光微球为荧光标记物,采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)法偶联抗恶性疟原虫富组氨酸蛋白(Pf)单克隆抗体制备荧光探针;以羊抗恶性疟原虫组氨酸多克隆抗体和驴抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维膜,... 以羧基化Cd Te/Zn Se量子点荧光微球为荧光标记物,采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)法偶联抗恶性疟原虫富组氨酸蛋白(Pf)单克隆抗体制备荧光探针;以羊抗恶性疟原虫组氨酸多克隆抗体和驴抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维膜,形成试纸条检测线和质控线,建立了免疫层析试纸条定量检测血清中恶性疟原虫的方法。所使用的羧基化量子点荧光微球的荧光强度为单个量子点的2800倍。实验结果表明,该荧光试纸条定量检测血清中恶性疟原虫线性范围为5.8-8010 Parasite/μL,最低灵敏度达到5.8 Parasite/μL,单个样品检测时间只需15 min。加标回收实验显示,试纸条批内回收率为93.0%-111.8%,批间回收率为98.3%-115.1%,且批内、批间的相对标准偏差均小于5%。 展开更多
关键词 量子荧光 免疫层析试纸条 恶性疟原虫 定量检测
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量子点荧光微球免疫层析试纸条定量检测玉米中赭曲霉毒素A 预览 被引量:7
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作者 周耀锋 熊斯诚 +3 位作者 江湖 段宏 熊勇华 Andrew Wang 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1837-1843,共7页
采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)法将抗赭曲霉毒素A(OTA)腹水与量子点荧光微球偶联制备荧光探针,以牛血清白蛋白-OTA偶联物及驴抗鼠二抗喷涂硝酸纤维膜形成试纸条检测线(T线)和质控线(C线),建立了基于T/C荧光强度... 采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)法将抗赭曲霉毒素A(OTA)腹水与量子点荧光微球偶联制备荧光探针,以牛血清白蛋白-OTA偶联物及驴抗鼠二抗喷涂硝酸纤维膜形成试纸条检测线(T线)和质控线(C线),建立了基于T/C荧光强度(FI_T/FI_C)比值法免疫层析试纸条高灵敏度、快速定量检测玉米中OTA的新方法。量子点荧光微球试纸条定量检测OTA线性范围为0.05~1.0ng/mL(Y=0.259lnX+0.897,R~2=0.995),半数抑制浓度(IC_(50))为(0.215±0.023)ng/mL(n=5),玉米提取液中OTA的检出限为0.05 ng/mL,单个样品检测时间10min。加标回收实验表明,3个OTA加标浓度的平均回收率为107.2%-125.5%,相对标准偏差均小于10%。40个实际玉米样品检测结果表明,量子点荧光微球试纸条与酶联免疫吸附分析方法检测OTA的结果具有良好的相关性(R~2=0.975)。 展开更多
关键词 量子荧光 免疫层析试纸条 赭曲霉毒素A 定量检测
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