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磨损颗粒诱导骨溶解的两种动物模型形态学比较研究 预览
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作者 赵江博 李燕 +5 位作者 田佳宁 郭凤英 王硕 杨超 席向东 陈德胜 《实用骨科杂志》 2019年第1期44-47,共4页
目的建立两种磨损颗粒诱导骨溶解模型,比较炎症水平、骨溶解情况以及破骨细胞计数等指标,为骨溶解相关实验动物模型的选择提供依据。方法分别采用小鼠颅骨模型、小鼠气囊植骨模型制备两组磨损颗粒诱导骨溶解模型。通过HE染色法进行形态... 目的建立两种磨损颗粒诱导骨溶解模型,比较炎症水平、骨溶解情况以及破骨细胞计数等指标,为骨溶解相关实验动物模型的选择提供依据。方法分别采用小鼠颅骨模型、小鼠气囊植骨模型制备两组磨损颗粒诱导骨溶解模型。通过HE染色法进行形态学观察;利用扫描电子显微镜观察骨溶解情况;采用TRAP染色法进行破骨细胞计数。结果小鼠气囊植骨模型组骨吸收面积为(385.30±5.11)nm^2,明显高于小鼠颅骨模型组的(288.60±4.89)nm^2(P<0.05);小鼠气囊植骨模型组破骨细胞数目为(16.75±0.53)个,明显高于小鼠颅骨模型组的(9.55±0.48)个(P<0.05)。结论两种动物模型均构建成功;小鼠气囊植骨模型在炎症水平、骨溶解情况及破骨细胞计数等方面均优于小鼠颅骨模型,因此在模拟磨损颗粒诱导的骨溶解病理过程中小鼠气囊植骨模型模拟度更高。 展开更多
关键词 动物模型 骨溶解 破骨细胞 颗粒
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纳米级钛颗粒对牙周组织细胞的影响 预览
2
作者 王变红 刘长营 +2 位作者 呼峰 王晓颖 李钧 《北京口腔医学》 CAS 2019年第3期137-142,共6页
目的通过研究纳米级钛颗粒对牙周膜细胞和牙槽骨细胞增值、分化的影响,探讨种植体脱落纳米级钛颗粒在种植体周围炎的发生、发展过程中的作用与机理。方法 利用透射电子显微镜观察实验所用纳米级钛颗粒的大小与表面形貌;分离培养12月龄 ... 目的通过研究纳米级钛颗粒对牙周膜细胞和牙槽骨细胞增值、分化的影响,探讨种植体脱落纳米级钛颗粒在种植体周围炎的发生、发展过程中的作用与机理。方法 利用透射电子显微镜观察实验所用纳米级钛颗粒的大小与表面形貌;分离培养12月龄 SPF级大鼠下颌第一磨牙牙周膜细胞和牙槽骨细胞,加入5×10 6粒/ml纳米级钛颗粒处理细胞,取该培养液为条件培养基,未加入纳米级钛颗粒的细胞和培养液作为对照组。培养2、4、6、8天后,倒置显微镜下观察细胞形态并计数;利用real-time PCR检测细胞培养24h后TNF-α和IL-1基因表达情况;当培养细胞发生接触抑制时,更换培养液并进行von Kossa染色后,观测钙化基质的沉积;利用real-time PCR 检测细胞成骨标志基因的表达。分离大鼠胫骨和腓骨骨髓单核细胞,阳性对照加入20ng/ml MCSF和50ng/ml RANKL处理,实验组加入纳米级钛颗粒处理的或未处理的条件培养基,培养1周后,进行TRAP染色并计破骨细胞数。结果 透射电子显微镜下,纳米级钛颗粒大小均一,直径约50~100nm,表面光滑;纳米级钛颗粒对牙周膜细胞和牙槽骨细胞增值具有微弱抑制作用,但无统计学差异( P ﹥0.05);Real-time PCR结果显示,细胞培养24h后,实验组牙周膜细胞和牙槽骨细胞TNF-α和IL-1基因表达明显增高;von Kossa染色可见,纳米级钛颗粒处理的实验组牙周膜细胞和牙槽骨细胞成骨分化能力低于对照组;纳米级钛颗粒促进牙周膜细胞和牙槽骨细胞分泌RANKL( P< 0.05),其中牙周膜细胞分泌较为显著;用含纳米级钛颗粒的条件培养基来处理大鼠骨髓单核细胞时,破骨细胞生成增多。结论 纳米级钛颗粒对体外培养牙周膜细胞和牙槽骨细胞增值无明显作用,但是对其成骨分化有明显的抑制作用;同时促进牙周膜细胞和牙周骨细胞TNF-α、IL-1及RANKL的分泌;并可促进单核细胞分化为破骨细胞。 展开更多
关键词 种植体 颗粒 牙周膜细胞 种植体周围炎
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雷帕霉素激活自噬对钛颗粒诱导下骨髓间充质干细胞成骨能力的影响 预览
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作者 刘强 陈曦 +2 位作者 刘亦斌 李晓军 金群华 《宁夏医科大学学报》 2019年第3期230-235,共6页
目的探讨雷帕霉素激活细胞自噬对钛颗粒诱导下骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨能力的影响。方法常规培养C57小鼠BMSCs,经0、1、5、10、20、50、100nM雷帕霉素分别处理12、24、36、48h后采用CCK-8法检测细胞活力,筛选雷帕霉素最佳的实验条件... 目的探讨雷帕霉素激活细胞自噬对钛颗粒诱导下骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨能力的影响。方法常规培养C57小鼠BMSCs,经0、1、5、10、20、50、100nM雷帕霉素分别处理12、24、36、48h后采用CCK-8法检测细胞活力,筛选雷帕霉素最佳的实验条件;Westernblot检测最佳条件下雷帕霉素对自噬相关蛋白5(Atg5)、微管相关蛋白轻链3(LC3)表达的影响。实验分为A组:空白对照组(单纯诱导成骨分化),B组:钛颗粒处理组(150mg·L^-1),C组:雷帕霉素处理组(10nM),D组:钛颗粒+雷帕霉素处理组,各组均诱导分化培养21d。分别于诱导第7、14和21天采用比色法检测各组碱性磷酸酶(ALP)活性。诱导分化结束后采用茜素红染色法检测各组的成骨分化能力并定量分析细胞钙沉积量,Westernblot检测成骨细胞标志物Runt相关转录因子2(Runx2)和骨钙蛋白(OCN)的表达变化。结果1)10nM的雷帕霉素处理C57小鼠BMSCs24h时,细胞活力最佳,该条件下细胞Atg5、LC-3Ⅰ/Ⅱ表达量较处理前增高(P均<0.05)。2)与A组相比,B组ALP活性、钙沉积量、Runx2和OCN表达水平降低(P<0.05);联合雷帕霉素后,D组细胞ALP活性、钙沉积量、Runx2和OCN表达水平较B组升高(P均<0.05)。C组ALP活性、钙沉积量、Runx2和OCN表达水平高于A、B、D组(P均<0.05)。结论钛颗粒可抑制BMSCs向成骨的分化能力,雷帕霉素可有效减轻钛颗粒对BMSCs成骨能力的抑制,这可能与其增强干细胞自噬水平有关。 展开更多
关键词 雷帕霉素 自噬 骨髓间充质干细胞 颗粒 成骨能力
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白藜芦醇调节氧化应激减少磨损颗粒诱导巨噬细胞肿瘤坏死因子α的表达 预览
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作者 刘文华 梁锦峰 邓少杰 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第26期4115-4120,共6页
背景:大量体外细胞实验和动物实验表明,白藜芦醇不仅具有抗氧化应激、抗炎、抗病毒、抗肿瘤和延缓衰老等生理活性,还具有骨保护作用。目的:观察白藜芦醇对钛磨损颗粒诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞氧化应激水平与炎症反应的调节作用。方法:... 背景:大量体外细胞实验和动物实验表明,白藜芦醇不仅具有抗氧化应激、抗炎、抗病毒、抗肿瘤和延缓衰老等生理活性,还具有骨保护作用。目的:观察白藜芦醇对钛磨损颗粒诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞氧化应激水平与炎症反应的调节作用。方法:以不同浓度(0,10,20,40,80,160μmol/L)的白藜芦醇溶液干预小鼠RAW264.7巨噬细胞,培养24h后,WST-1法检测细胞存活率,选择对细胞活性影响较小的浓度进行后续实验。将小鼠RAW264.7巨噬细胞分5组干预:对照组常规培养;钛颗粒组加入钛颗粒刺激细胞12 h;低、中、高浓度白藜芦醇组分别加入10,20,40μmol/L的白藜芦醇溶液预刺激细胞4 h,随后各组加入钛颗粒刺激细胞12 h。钛颗粒刺激12h后,收集细胞与细胞培养上清,利用流式细胞仪检测细胞内活性氧水平,荧光定量PCR检测抗氧化应激相关酶(铜/锌超氧化物歧化酶、锰超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽还原酶、过氧化氢酶)和肿瘤坏死因子αm RNA水平,利用ELISA检测肿瘤坏死因子α质量浓度。结果与结论:(1)10,20,40μmol/L白藜芦醇对小鼠RAW264.7巨噬细胞活性无明显抑制作用,故选择此3组浓度进行后续实验;(2)与对照组比较,钛颗粒组细胞内活性氧水平升高(P <0.05);与钛颗粒组比较,白藜芦醇呈浓度依赖性降低细胞内活性氧水平(P <0.05);(3)与对照组比较,钛颗粒组锰超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶m RNA表达下降(P <0.05),谷胱甘肽还原酶、过氧化氢酶m RNA表达升高(P <0.05);与钛颗粒组比较,中、高浓度白藜芦醇组锰超氧化物歧化酶、铜/锌超氧化物歧化酶m RNA表达升高(P <0.05),低、中、高浓度白藜芦醇组过氧化氢酶m RNA表达升高(P<0.05);(4)与对照组比较,钛颗粒组肿瘤坏死因子αm RNA水平与肿瘤坏死因子α的分泌均升高(P <0.05);与钛颗粒组比较,低、中、高浓度白藜芦醇呈浓度依赖性降低肿瘤� 展开更多
关键词 白藜芦醇 颗粒 巨噬细胞 氧化应激 假体松动 骨溶解 肿瘤坏死因子α 活性氧
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扫描电子显微镜下观察磨损颗粒刺激小鼠气囊植骨模型诱导骨溶解的超微病理改变 预览
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作者 赵江博 李燕 +5 位作者 田佳宁 张焱 王硕 杨超 席向东 陈德胜 《宁夏医学杂志》 CAS 2019年第3期211-213,192共4页
目的观察小鼠气囊植骨模型中颅骨组织的超微病理改变。方法将30只BALB/c小鼠随机分为对照组、钛颗粒刺激组和颅骨骨片供体组,每组各10只。采用Ran等人的方法建立小鼠气囊植骨模型,建模完成后取出植入颅骨组织,通过扫描电子显微镜观察骨... 目的观察小鼠气囊植骨模型中颅骨组织的超微病理改变。方法将30只BALB/c小鼠随机分为对照组、钛颗粒刺激组和颅骨骨片供体组,每组各10只。采用Ran等人的方法建立小鼠气囊植骨模型,建模完成后取出植入颅骨组织,通过扫描电子显微镜观察骨溶解的超微病理改变。结果与对照组相比,钛颗粒刺激组的颅骨组织表面骨吸收面积明显增加(P<0.05),破骨细胞数目明显增加(P<0.05)。结论应用扫描电子显微镜观察小鼠气囊植骨模型的超微病理改变,可为研究人工关节置换术后假体周围骨溶解提供相关的实验依据。 展开更多
关键词 颗粒 骨溶解 破骨细胞 动物模型
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健骨颗粒对钛颗粒诱导的骨溶解模型大鼠OPG/RANKL/RANK mRNA的调控作用
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作者 林丽琼 林煜 +3 位作者 肖莉莉 冯尔宥 王武炼 张怡元 《福建中医药》 2018年第3期35-37,41共4页
目的研究健骨颗粒对钛颗粒诱导的骨溶解模型大鼠OPG/RANKL/RANK系统相关因子的影响,探讨其防治人工关节假体无菌性松动发病机制。方法40只SD大鼠随机取10只将其颅骨骨片作为供体,其余30只制备植骨气囊模型后随机分为对照组、模型组... 目的研究健骨颗粒对钛颗粒诱导的骨溶解模型大鼠OPG/RANKL/RANK系统相关因子的影响,探讨其防治人工关节假体无菌性松动发病机制。方法40只SD大鼠随机取10只将其颅骨骨片作为供体,其余30只制备植骨气囊模型后随机分为对照组、模型组和健骨颗粒组各10只,其中模型组和健骨颗粒组建立肽颗粒诱导的骨溶解病理模型。造模后健骨颗粒组予健骨颗粒混悬液灌胃,对照组和模型组予等量生理盐水灌胃,连续灌胃2周。灌胃结束后取出完整气囊,HE染色观察植骨气囊壁形态变化,ELISA法检测IL-1β、TNF-α含量,Real-time PCR法检测OPG、RANKL mRNA表达。结果HE染色中对照组气囊壁炎症反应较轻、无明显骨溶解,模型组气囊壁厚度增加、炎细胞浸润以及骨溶解,健骨颗粒纽炎细胞浸润、骨溶解程度较模型组低。与对照组比较,模型组IL-1B、TNF-α含量及RANKL mRNA表达明显升高(P〈0.05),OPG mRNA表达及OPG/RANKL明显降低(P〈0.05);与模型组比较,健骨颗粒组IL-1β、TNF-α含量及RANKL mRNA表达明显降低(P〈0.05),OPG mRNA表达及OPG/RANKL明显升高(P〈0.05)。结论健骨颗粒可能通过降低炎性反应、上调OPG/RANKL mRNA比值来抑制钛颗粒诱导骨溶解。这可能是其防治人工关节无菌性松动的作用机制之一。 展开更多
关键词 骨溶解 健骨颗粒 颗粒 OPG RANKL
二氢杨梅素防治磨损颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解的实验研究 预览
7
作者 黄东辉 郑杭生 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2018年第7期721-727,共7页
目的:探讨二氢杨梅素(DMY)对磨损颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解的作用。方法:选用30只8周龄雄性C57BL/J6小鼠,随机分成3组,每组10只。分别为假手术组(Sham)、阳性对照组(Control)和二氢杨梅素组(DMY)。假手术组手术不加钛颗粒,阳... 目的:探讨二氢杨梅素(DMY)对磨损颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解的作用。方法:选用30只8周龄雄性C57BL/J6小鼠,随机分成3组,每组10只。分别为假手术组(Sham)、阳性对照组(Control)和二氢杨梅素组(DMY)。假手术组手术不加钛颗粒,阳性对照组和DMY组手术时颅骨部位注入30 mg钛颗粒构建小鼠颅骨骨溶解模型。术后DMY组每天连续予500 mg/kg DMY灌胃;假手术组和阳性对照组给予相应体积的生理盐水灌胃。14 d后取眼眶静脉血,随后处死所有实验动物并收集颅骨标本。所有标本行Micro-CT扫描、采集计算机3D重建图像并进行定量分析,随后标本脱钙后以石蜡包埋,进行病理学分析。结果:Micro-CT扫描3D重建图像显示DMY组小鼠颅骨表面骨溶解严重程度显著低于阳性对照组;Micro-CT扫描显示DMY组小鼠颅骨骨密度明显高于阳性对照组(P〈0.05)。HE染色及TRAP染色分析显示,与阳性对照组相比,DMY组小鼠颅骨骨溶解区域破骨细胞数明显减少。DMY组小鼠血清IL-1β、TNF-α、NF-κB受体激活剂配体(RANKL)水平显著低于阳性对照组(P〈0.05);骨保护素(OPG)水平显著高于阳性对照组(P〈0.05)。体外细胞培养实验显示,DMY可在体外显著抑制RANKL诱导的破骨细胞分化。结论:DMY可有效抑制磨损颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解。 展开更多
关键词 小鼠 二氢杨梅素 颗粒 破骨细胞 骨溶解
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钛颗粒刺激小鼠颅骨诱导骨溶解的动物模型建立 预览
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作者 陈德胜 李燕 +4 位作者 郭凤英 赵江博 田佳宁 夏根 朱禧 《宁夏医学杂志》 CAS 2018年第8期677-680,I0001共5页
目的采用钛颗粒刺激小鼠颅骨诱导并建立骨溶解动物模型。方法将30只雌性BALB/e小鼠分为对照组和模型组,每组15只。模型组在小鼠颅顶部切开显露骨膜,将钛颗粒混合液0.3mL注入骨膜缺损区;对照组切开显露颅骨骨膜,将0.3mL无菌PBS液... 目的采用钛颗粒刺激小鼠颅骨诱导并建立骨溶解动物模型。方法将30只雌性BALB/e小鼠分为对照组和模型组,每组15只。模型组在小鼠颅顶部切开显露骨膜,将钛颗粒混合液0.3mL注入骨膜缺损区;对照组切开显露颅骨骨膜,将0.3mL无菌PBS液注入骨膜缺损区。14d后分别进行大体下、组织病理学及抗酒石酸酸性染色观察。结果大体下观察小鼠颅骨骨面,对照组完整,色泽光润;模型组可见钛颗粒侵袭骨面,色泽灰暗,并有骨吸收表现。H-E染色观察,对照组小鼠颅骨骨吸收不显著,骨小梁分布均匀,排列规律,骨小梁宽厚稠密,未见有钛颗粒;模型组颅骨骨吸收明显,细胞形态不规则,骨小梁稀疏紊乱,问距增宽,有中断现象。骨吸收面积,对照组为(0.098±0.012)mm2,模型组为(0.365±0.113)mm2,2组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。TRAP染色,观察对照组小鼠染色较浅,阳性染色区域面积较小,细胞数目不多;模型组染色较深,阳性染色区域面积较大,细胞数目明显增多,有骨吸收的表现。TRAP染色阳性细胞计数,对照组小鼠为(11.42±1.21)个/视野,模型组为(27.82±0.24)个/视野,2组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论钛颗粒刺激小鼠颅骨诱导并建立骨溶解模型,操作简单、经济实用、可重复性强,是无菌性松动深入研究值得推荐的实验方法。 展开更多
关键词 颗粒 颅骨 骨溶解 动物模型
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Axitinib抑制钛颗粒诱导小鼠air pouch组织炎性骨溶解中VEGF表达 预览
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作者 陈德胜 李燕 +3 位作者 郭凤英 张佳林 赵江博 田佳宁 《宁夏医科大学学报》 2018年第12期1375-1379,共5页
目的探讨阿帕替尼(Axitinib)减轻磨损颗粒诱导骨溶解的作用及其机制。方法45只雄性BALB/C小鼠,随机分为对照组、模型组和Axitinib治疗组,每组15只,建立airpouch,模型组和Axitinib治疗组airpouch中注射0.3mL钛颗粒,对照组airpouch中注射0... 目的探讨阿帕替尼(Axitinib)减轻磨损颗粒诱导骨溶解的作用及其机制。方法45只雄性BALB/C小鼠,随机分为对照组、模型组和Axitinib治疗组,每组15只,建立airpouch,模型组和Axitinib治疗组airpouch中注射0.3mL钛颗粒,对照组airpouch中注射0.3mLPBS液。Axitinib治疗组7d予以Axitinib(30mg·kg^-1,Bid)灌胃;给药7d后处死小鼠,对各组小鼠airpouch组织行苏木素-伊红(HE)染色观察airpouch组织炎性反应等情况;免疫组化染色检测血管内皮生长因子(VEGF)蛋白质表达。结果Axitinib治疗组airpouch组织炎症反应明显低于模型组,免疫组化染色结果显示,Axitinib能降低小鼠airpouch组织VEGF蛋白质表达。结论Axitinib可以缓解磨损颗粒刺激小鼠airpouch诱导骨溶解中airpouch组织的炎症反应,并且抑制airpouch组织VEGF表达的作用。 展开更多
关键词 阿帕替尼 小鼠 颗粒 骨溶解 血管内皮生长因子
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汉防己甲素对钛颗粒诱导PBMC免疫成熟的影响
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作者 田节印 赵丽 《智慧健康》 2018年第1期188-189,共2页
目的探讨汉防己甲素对钛颗粒诱导PBMC免疫成熟的影响,为临床防治关节假体松动提供依据。方法将按照Ficoll方法分离的人外周血单个核细胞分为4组,1组为阴性对照组,分离PBMC+培养基;2组为空白对照组,分离PBMC+生理盐水;3组阳性对照组,分... 目的探讨汉防己甲素对钛颗粒诱导PBMC免疫成熟的影响,为临床防治关节假体松动提供依据。方法将按照Ficoll方法分离的人外周血单个核细胞分为4组,1组为阴性对照组,分离PBMC+培养基;2组为空白对照组,分离PBMC+生理盐水;3组阳性对照组,分离PBMC+0.1%钛颗粒;4组为汉防己甲素组,分离PBMC+0.1%钛颗粒+1g/m L汉防己甲素;采用ELISA方法检测48h后4组上清液中IL-12、干扰素-g表达情况。结果 INF-g含量、IL-12比较,1组与2组比较,无统计学意义(P〉0.05),3组与1组、3组与4组比较,均存在统计学差异(P〈0.05)。结论汉防己甲素可抑制钛颗粒刺激单个核细胞释放IL-12、干扰素-g等炎性因子,发挥抑制炎性因子释放,从而有效防控关节假体松动。 展开更多
关键词 汉防己甲素 颗粒 PBMC 免疫成熟
钛颗粒诱导松动界膜中滑膜成纤维细胞HIF-1α的表达抑制其对RANKL/OPG信号通路的活化作用 预览 被引量:2
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作者 王成强 何盛茂 +1 位作者 谢小波 李奇 《实用医学杂志》 北大核心 2017年第10期1580-1583,共4页
目的:研究钛颗粒诱导松动界膜中滑膜成纤维样细胞(FLSs)HIF-1α表达和RANKL—OPG信号通路活化的相关性。方法:分离提取人滑膜成纤维样细胞并与钛颗粒共培养,qRT—PCR、WestemB10t检测浓度和时间梯度刺激下,FLSs RANKL、OPG、HIF-... 目的:研究钛颗粒诱导松动界膜中滑膜成纤维样细胞(FLSs)HIF-1α表达和RANKL—OPG信号通路活化的相关性。方法:分离提取人滑膜成纤维样细胞并与钛颗粒共培养,qRT—PCR、WestemB10t检测浓度和时间梯度刺激下,FLSs RANKL、OPG、HIF-1α的mRNA和蛋白表达情况。结果:随钛颗粒浓度增加,RANKL/OPG和HIF-1α的蛋白和mRNA水平均呈递增趋势;随钛颗粒刺激时间增加,RANKL/OPG的蛋白和mRNA水平先增高后降低,HIF-1α则呈递增趋势。结论:钛颗粒可以诱导界膜中FLSsHIF-1α表达增高和RANKL/OPG信号通路的活化。HIF-1α的表达增高可能对钛颗粒介导的界膜中FLSsRANKL/OPG信号通路活化存在抑制效应。 展开更多
关键词 无菌性松动 滑膜成纤维细胞 HIF—1α 颗粒
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盐酸小檗碱缓解钛颗粒诱导的炎症性骨破坏
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作者 史佳伟 柏家祥 +6 位作者 郁彬清 郭晓斌 王亮亮 周伟 耿德春 杨惠林 徐耀增 《中国血液流变学杂志》 CAS 2017年第4期364-366,共3页
目的 研究盐酸小檗碱对钛颗粒诱导炎症性骨破坏的作用.方法 取48只雄性C57BL/6J小鼠,随机分成4组:对照组,模型组,低剂量治疗组、高剂量治疗组.从造模后第一天开始,对照组不予处理,治疗组分别予颅骨局部注射2 mg·kg-1·d-1和10... 目的 研究盐酸小檗碱对钛颗粒诱导炎症性骨破坏的作用.方法 取48只雄性C57BL/6J小鼠,随机分成4组:对照组,模型组,低剂量治疗组、高剂量治疗组.从造模后第一天开始,对照组不予处理,治疗组分别予颅骨局部注射2 mg·kg-1·d-1和10 mg·kg-1·d-1盐酸小檗碱,模型组则每天予同等体积的磷酸盐缓冲溶液.治疗2周后取颅骨培养液上清液行ELISA分析,颅骨行H&E染色探索盐酸小檗碱对小鼠颅骨骨溶解和局部炎症反应的作用,以及免疫组化染色探究盐酸小檗碱对颅骨局部炎症因子表达的影响.结果 ELISA分析表明炎症因子IL-1β,IL-6,TNF-α在模型组是(192.2±11.7)pg/mL,(276.4±14.1)pg/mL,(207.7±12.2)pg/mL,而两种剂量盐酸小檗碱治疗组的IL-1β,IL-6,TNF-α表达量均比模型组明显降低,差异有统计学意义.此外,H&E染色可见盐酸小檗碱治疗组的骨丢失明显被抑制,而骨膜厚度明显降低;免疫组化染色进一步证实盐酸小檗碱抑制了骨侵蚀周围IL-1β,IL-6,TNF-α的表达.结论 盐酸小檗碱抑制了钛颗粒诱导的颅骨炎症性骨质丢失. 展开更多
关键词 假体周围骨溶解 盐酸小檗碱 炎症反应 颗粒
大叶茜草素抑制钛颗粒诱导的人工关节无菌性松动的实验研究 预览
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作者 陈金财 曾文添 +3 位作者 钟艳春 朱文清 温煦 姬广林 《赣南医学院学报》 2017年第1期50-54,65共6页
目的:通过大叶茜草素干预小鼠air-pouch模型,探讨大叶茜草素对钛颗粒诱导的人工关节无菌性松动的抑制作用及其发生机制。方法:体重25~30 g BALB/c小鼠72只,随机分为6组,分别为空白组(A组)、颗粒组(B组)、低剂量组(C组)、中剂量... 目的:通过大叶茜草素干预小鼠air-pouch模型,探讨大叶茜草素对钛颗粒诱导的人工关节无菌性松动的抑制作用及其发生机制。方法:体重25~30 g BALB/c小鼠72只,随机分为6组,分别为空白组(A组)、颗粒组(B组)、低剂量组(C组)、中剂量组(D组)、高剂量组(E组)、溶液对照组(F组),小鼠air-pouch模型构建成功后,运用大叶茜草素对实验各组进行干预,连续14天后,收集气囊囊壁进行大体观察、HE染色、RT-PCR及ELISA检测。结果:小鼠都存活至实验结束,大体观察见A组气囊炎症反应轻,B、C、D、E、F组气囊炎症反应较重,其中B、F组最重,C、D、E组较弱,且D组较C、E组最弱。实验室检测发现,B、F组囊壁炎性细胞密度及TNF-α、IL-1β表达无差异(P〉0.05);B、F组囊壁炎性细胞密度及TNF-α、IL-1β表达均较A组明显增加(P〈0.05);C、D、E组囊壁炎性细胞密度及TNF-α、IL-1β表达均低于B、F组(P〈0.05),其中D组最低,且均高于A组(P〈0.05)。结论:钛颗粒能在小鼠air-pouch模型中造成和人工关节无菌性松动类似的炎症反应,大叶茜草素能有效抑制这种炎症反应,从而为临床运用药物抑制人工关节无菌性松动的发生及发展带来新的曙光。 展开更多
关键词 大叶茜草素 人工关节 颗粒 无菌性松动 炎症反应
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安石榴苷对钛颗粒诱导破骨细胞活化的作用 预览
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作者 褚耿磊 刘思含 +2 位作者 李东亚 李洪伟 郭开今 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第12期1759-1765,共7页
背景:有关安石榴苷对破骨细胞形成分化方面的研究很少,对磨损颗粒引起骨吸收类疾病影响的研究更少。目的:建立钛颗粒诱导的小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7向破骨细胞分化模型,观察不同浓度安石榴苷对破骨细胞增殖分化的影响。方法:将... 背景:有关安石榴苷对破骨细胞形成分化方面的研究很少,对磨损颗粒引起骨吸收类疾病影响的研究更少。目的:建立钛颗粒诱导的小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7向破骨细胞分化模型,观察不同浓度安石榴苷对破骨细胞增殖分化的影响。方法:将小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7分5组培养,分别加入培养基(空白组)、含0.1 g/L钛颗粒悬液的培养基、含0.1 g/L钛颗粒悬液+25μmol/L安石榴苷的培养基、含0.1 g/L钛颗粒悬液+50μmol/L安石榴苷的培养基、含0.1 g/L钛颗粒悬液+100μmol/L安石榴苷的培养基。CCK-8法检测培养1,3,5 d的细胞增殖活性;培养5 d后,抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测成熟破骨细胞数量,Western blot法检测IκBα及核转录因子κB p65磷酸化水平,RT-PCR测量活化T细胞核因子c1、抗酒石酸酸性磷酸酶和基质金属蛋白酶9 mR NA的表达。结果与结论:与空白组比较,钛颗粒和不同浓度安石榴苷对RAW264.7细胞的增殖能力均无影响(P〉0.05)。与空白组比较,钛颗粒组成熟破骨细胞数量、IκBα及核转录因子κB p65磷酸化水平、活化T细胞核因子c1mR NA、抗酒石酸酸性磷酸酶mR NA和基质金属蛋白酶9 mR NA表达显著升高(P〈0.05,P〈0.01),安石榴苷呈浓度依赖性降低上述指标表达。结果表明安石榴苷可抑制破骨细胞的形成与活化。 展开更多
关键词 骨质吸收 骨生物材料 破骨细胞 石榴科 金属纳米粒子 组织工程 生物材料 骨组织工程 安石榴苷 颗粒 核转录因子κB 无菌性松动 活化T细胞核因子c1 骨溶解
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亚油酸乙酯抑制钛颗粒诱导的炎症反应及其作用机制 预览 被引量:1
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作者 刘国栋 辛兵 +3 位作者 黄栋 郑柏 孙柏寒 郭开今 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第52期7836-7843,共8页
背景:有研究证实,亚油酸乙酯可减轻细菌脂多糖诱导的炎性因子释放,但其能否抑制钛颗粒诱导的炎性骨溶解及其作用机制尚不清楚。目的:观察亚油酸乙酯对钛颗粒诱导炎性因子表达的影响及其作用机制。方法:将48只昆明小鼠随机分为正常组... 背景:有研究证实,亚油酸乙酯可减轻细菌脂多糖诱导的炎性因子释放,但其能否抑制钛颗粒诱导的炎性骨溶解及其作用机制尚不清楚。目的:观察亚油酸乙酯对钛颗粒诱导炎性因子表达的影响及其作用机制。方法:将48只昆明小鼠随机分为正常组、钛颗粒组、DMSO组及实验组,正常组不做任何处理;其余3组均建立小鼠钛颗粒背部气囊炎症模型,12 h后,DMSO组向气囊中注入溶媒0.5%二甲基亚砜200μL;实验组向气囊中注入5%亚油酸乙酯200μL。14 d后,苏木精-伊红染色观察各组皮肤组织炎症细胞浸润程度,采用Western blot检测各组抑制性卡巴蛋白、核转录因子κB、诱导型一氧化氮合酶、环氧化酶2、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的表达,以及MAPK通路中ERK、p-erk、JNK、p-JNK、p38与p-p38的表达。结果与结论:(1)皮肤组织炎症细胞浸润:钛颗粒组真皮层毛囊陷窝处与皮下疏松结缔组织可见大量炎性细胞浸润及空泡坏死组织;DMSO组与钛颗粒组基本相似;与钛颗粒组比较,实验组真皮层毛囊陷窝处及皮下疏松结缔组织炎性细胞浸润明显减少,空泡坏死组织也有所减少;(2)Western blot检测结果:与正常组比较,钛颗粒组、DMSO组诱导型一氧化氮合酶、环氧化酶2、核转录因子κB、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、p38、JNK及ERK表达升高(P〈0.05),抑制性卡巴蛋白降低(P〈0.05);与钛颗粒组及DMSO组比较,实验组诱导型一氧化氮合酶、环氧化酶2、核转录因子κB、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、p38、JNK及ERK表达降低(P〈0.05),抑制性卡巴蛋白表达升高(P〈0.05);(3)结果表明:亚油酸乙酯可能通过抑制MAPK和核转录因子κB信号通路的激活,显著抑制钛颗粒诱导下炎性因子的表达。 展开更多
关键词 炎症 NF-κB 组织工程 生物材料 材料相容性 亚油酸乙酯 颗粒 炎症反应 核转录因子ΚB MAPK
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大麻素2型受体激活对钛颗粒诱导成骨细胞凋亡的干预作用 预览
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作者 裴方 周冰 +4 位作者 郑伟 沈振宇 王琛 仇尚 郭开今 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第43期6431-6437,共7页
背景:成骨细胞凋亡而导致的成骨减少是最终假体松动的重要原因,大麻素2型受体的激活可促进成骨细胞的增殖,减少细胞凋亡率的发生。目的:探讨钛颗粒负荷下,大麻素2型受体激动剂HU-308对成骨细胞株MC3T3-E1凋亡的抑制作用及保护机制。... 背景:成骨细胞凋亡而导致的成骨减少是最终假体松动的重要原因,大麻素2型受体的激活可促进成骨细胞的增殖,减少细胞凋亡率的发生。目的:探讨钛颗粒负荷下,大麻素2型受体激动剂HU-308对成骨细胞株MC3T3-E1凋亡的抑制作用及保护机制。方法:将体外培养的小鼠成骨细胞MC3T3-E1分5组培养,空白对照组以常规细胞培养基培养;钛颗粒组以含2.5 g/L钛颗粒的细胞培养基培养;低浓度药物组以含2.5 g/L钛颗粒+10-9 mol/L HU-308的细胞培养基培养;中浓度药物组以含2.5 g/L钛颗粒+10-8 mol/L HU-308的细胞培养基培养;高浓度药物组以含2.5 g/L钛颗粒+10-7mol/L HU-308的细胞培养基培养。培养48 h,检测各组细胞增殖活性、凋亡、细胞内活性氧水平、线粒体膜电位水平及Caspase-3活性。结果与结论:(1)与空白对照组比较,钛颗粒组细胞增殖活性、线粒体膜电位水平明显下降(P〈0.01或P〈0.05),凋亡率、细胞内活性氧水平、Caspase-3活性明显升高(P〈0.01或P〈0.05);(2)与钛颗粒组比较,高浓度药物组细胞增殖活性、线粒体膜电位水平升高(P〈0.05),中、高浓度药物组细胞凋亡率、细胞内活性氧水平、Caspase-3活性降低(P〈0.01或P〈0.05);(3)结果表明,HU-308能有效逆转钛颗粒对MC3T3-E1成骨细胞活性的抑制及促凋亡作用,而这些保护作用可能是HU-308通过调节细胞内活性氧水平、提升线粒体膜电位水平及Caspase-3活性来实现的。 展开更多
关键词 成骨细胞 细胞凋亡 组织工程 生物材料 骨生物材料 大麻素2型受体 颗粒 MC3T3-E1细胞 细胞内活性氧水平 线粒体膜电位 CASPASE-3活性 流式细胞 酶联免疫吸附实验
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钛颗粒诱导小鼠植骨气囊骨溶解模型的构建 预览 被引量:6
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作者 陈德胜 李燕 +3 位作者 郭凤英 朱禧 杨旭 张佳林 《宁夏医科大学学报》 2016年第11期共5页
目的 建立小鼠钛颗粒诱导骨溶解动物模型.方法 30只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组和钛颗粒刺激组,每组15只.采用手术方法建立植骨气囊的动物模型,钛颗粒刺激组注射0.3 mL钛颗粒,对照组注射0.3 mL PBS液.气囊植入颅骨骨块14d后取出颅骨... 目的 建立小鼠钛颗粒诱导骨溶解动物模型.方法 30只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组和钛颗粒刺激组,每组15只.采用手术方法建立植骨气囊的动物模型,钛颗粒刺激组注射0.3 mL钛颗粒,对照组注射0.3 mL PBS液.气囊植入颅骨骨块14d后取出颅骨及其周围囊壁组织,分别进行大体、组织病理学及超微结构观察.结果 大体观察钛颗粒刺激组小鼠植骨骨块与气囊组织之间出现红肿、渗出并伴有新生血管增生,炎性反应明显;对照组的炎性反应较轻.组织病理学见钛颗粒刺激组植入气囊内的骨块表面出现骨吸收现象,并且有明显的炎性反应;对照组无明显骨表面骨吸收的改变,炎性反应较轻.超微结构观察钛颗粒刺激组细胞胞浆内出现钛颗粒浸润,细胞胞浆内高尔基体生长活跃,植骨气囊周围可见增生活跃的破骨细胞前体细胞;对照组破骨细胞内细胞器完整,基质比较丰富.结论 在钛颗粒刺激下建立磨损颗粒诱导骨溶解动物模型,可为人工关节无菌性松动导致的假体周围骨溶解的研究提供有效的实验基础. 展开更多
关键词 骨溶解 动物模型 磨损颗粒 颗粒
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淫羊藿苷活化β-连环蛋白信号通路促进钛颗粒诱导的小鼠骨髓基质干细胞成骨分化 被引量:1
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作者 陶云霞 胡宣洋 +8 位作者 平子川 王骏骅 王亮亮 史佳伟 吴勰星 郭晓斌 徐耀增 杨惠林 耿德春 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期2179-2182,共4页
目的 观察淫羊藿苷(icariin)对钛颗粒(Ti)诱导小鼠骨髓基质干细胞(MSCs)成骨分化的影响.方法 实验分为4组,即对照组、Ti组、icariin组和ICG-001组.MSCs成骨诱导培养.Western blot法检测β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平;碱性... 目的 观察淫羊藿苷(icariin)对钛颗粒(Ti)诱导小鼠骨髓基质干细胞(MSCs)成骨分化的影响.方法 实验分为4组,即对照组、Ti组、icariin组和ICG-001组.MSCs成骨诱导培养.Western blot法检测β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平;碱性磷酸酶(ALP)活性检测、茜素红染色及定量分析观察细胞向成骨分化及细胞外基质矿化程度;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Runt相关基因2(Runx2)、Osterix和骨钙素(OCN)基因mRNA的相对表达水平.结果 Western blot结果显示Ti能抑制β-catenin的表达,icariin(10^-8mol/L)加入后Ti的抑制效应不明显.ALP活性检测结果显示icariin组ALP活性为(27.76±5.26) nmol PNP/(min·μg protein),与Ti组[(19.72±3.28) nmol PNP/(min· μg protein)]比较,差异有统计学意义(P<0.05).茜素红染色结果显示,对照组、icariin组细胞外基质矿化程度高,Ti、ICG-001组矿化结节少,定量结果显示icariin组吸光度(A)值为0.52 ±0.06,与Ti组(0.22±0.03)和ICG-001组(0.39±0.07)比较,差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR结果显示Ti组Runx2、Osterix和OCN基因mRNA的相对表达量分别为0.65±0.05、0.57 ±0.07和0.60 ±0.07;icariin组上述基因的相对表达量分别为0.95 ±0.03、0.98 ±0.09和0.96 ±0.06,差异有统计学意义(P<0.05);ICG-001加入后能抑制icariin对Runx2、Osterix和OCN基因表达的促进作用.结论 Icariin通过活化β-catenin信号通路促进Ti诱导的MSCs成骨分化。 展开更多
关键词 假体周围骨溶解 颗粒 骨髓基质干细胞 成骨分化 Β-连环蛋白
不同浓度的淫羊藿苷治疗人工关节周围骨溶解的体外测试 预览 被引量:2
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作者 孙闯 杨大威 +3 位作者 姜明久 廉永云 逯代锋 张志涛 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2015年第3期214-218,共5页
目的通过体外研究探索中药淫羊藿苷治疗关节置换假体周围骨溶解的有效浓度。方法将无菌性钛颗粒、含有不同浓度的淫羊藿苷培养液(低浓度、中浓度、高浓度)、小鼠成骨细胞放在一起共同培养。每个浓度对应的用药时间分别设定为6 h、12 h... 目的通过体外研究探索中药淫羊藿苷治疗关节置换假体周围骨溶解的有效浓度。方法将无菌性钛颗粒、含有不同浓度的淫羊藿苷培养液(低浓度、中浓度、高浓度)、小鼠成骨细胞放在一起共同培养。每个浓度对应的用药时间分别设定为6 h、12 h、24 h、48 h,从成骨细胞提取总RNA和mRNA后,采用实时荧光定量PCR方法检测成骨细胞的RANKL-RANK OPG系统的表达变化。结果 RANKL:淫羊藿苷低中高浓度组表达均不同程度下降,中浓度组更显著;OPG:各组均提高了mRNA的表达,中浓度组较明显;OPG/RANKL比率:高浓度组比率增大较明显。结论低中高浓度的淫羊藿苷对钛颗粒引起的成骨细胞的骨溶解作用均有抑制作用,且中高浓度明显。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 人工关节 颗粒 骨溶解
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钛颗粒对OPG—RANKL—RANK通路干预的时间依赖性研究 预览
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作者 吴垠 王杨 +2 位作者 勾旭升 刘立冰 赵承斌 《医学研究杂志》 2015年第8期99-102,共4页
目的探讨钛颗粒在体外不同时间点对核因子-kB受体活化因子配体一核因子-kB受体活化因子-骨保护素(RANKL~RANK—OPG)通路的干预作用。方法MC3T3一E1细胞培养传5代后,移入4个6孔板中进行培养,随机分为A、B、c、D4组,每板上3孔均加入... 目的探讨钛颗粒在体外不同时间点对核因子-kB受体活化因子配体一核因子-kB受体活化因子-骨保护素(RANKL~RANK—OPG)通路的干预作用。方法MC3T3一E1细胞培养传5代后,移入4个6孔板中进行培养,随机分为A、B、c、D4组,每板上3孔均加入含0.1mg/L钛颗粒培养液作为实验组,下3孔加入普通培养液作为对照组。A、B、c、D4组分别在培养后12、24、36、48h提取培养液进行OPG和RANKL蛋白的ELISA检测,同时提取贴壁细胞进行real—timePCR检测,观察OPG和RANKL的mRNA表达水平变化。结果MC3T3-E1细胞连续传代后生长良好,形态稳定,经ELISA检测OPG蛋白吸光度(A)值A组10.33±2.44,B组8.96±2.02,C组7.84±1.30,D组7.66±O.63,B、C、D组与对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.05);RANKL蛋白A值A组6.04±1.60,B组7.51±0.57,C组8.91±0.59,D组10.94±0.58,4组与对照组相比,差异均有统计学意义(P〈0.05)。经PCR检测OPGmRNA表达A组0.89±0.07,B组0.81±0.11,C组0.74±0.15,D组O.72±0.16,B、C、D组与对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.05);RANKLmRNA表达A组1.21±0.21,B组1.22±0.33,C组1.24±0.09。D组1.24±0.04,4组与对照组相比,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论钛颗粒既能够上调RANKL的表达水平,又会抑制OPG的形成,从而加速假体周围的骨溶解作用。 展开更多
关键词 颗粒 RANKL—RANK—OPG 时间点 假体松动 骨溶解
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