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小反刍兽疫病毒N蛋白阻断ELISA方法的建立
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作者 毛立 张纹纹 +5 位作者 李文良 杨蕾蕾 李基棕 郝飞 刘茂军 江杰元 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第5期114-120,共7页
小反刍兽疫(PPR)是一种跨国传播的重大烈性传染病,主要发生于山羊和绵羊等小反刍动物,具有高发病率和死亡率。小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白是抗体检测的主要靶蛋白,本研究将PPRV Nigeria 75/1毒株的N蛋白进行原核表达,重组蛋白经鉴定和纯... 小反刍兽疫(PPR)是一种跨国传播的重大烈性传染病,主要发生于山羊和绵羊等小反刍动物,具有高发病率和死亡率。小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白是抗体检测的主要靶蛋白,本研究将PPRV Nigeria 75/1毒株的N蛋白进行原核表达,重组蛋白经鉴定和纯化后免疫BALB/c小鼠。取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选针对PPRV N蛋白的阳性单克隆细胞株,获得了具有阻断效果的单克隆抗体1B11株。经免疫荧光方法鉴定该单克隆抗体与PPRV Nigeria 75/1毒株发生特异性反应。用纯化的重组N蛋白作为包被抗原,辣根过氧化物酶标记1B11抗体作为阻断抗体,建立了检测PPRV抗体的阻断ELISA方法。经优化反应条件,抗原的最佳包被浓度为2.5μg/mL,阻断抗体的最佳浓度为1μg/mL,待检血清1∶2稀释反应1 h,底物反应时间为10 min,阴阳性检测临界值为阻断率为58.5%。特异性试验证明该方法与山羊副流感病毒3型(CPIV3)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、边界病病毒(BDV)等阳性血清不发生交叉反应。通过对234份血清样品进行检测,该方法与商品化试剂盒符合率为91%(213/234)。由此表明,建立的阻断ELISA方法可用于PPRV临床样品的抗体水平检测,为PPRV疫苗免疫效果检验及PPRV根除提供了基础。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 N蛋白 单克隆抗体 阻断ELISA
羊乳中牛α酪蛋白检测方法的建立 预览
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作者 王毅 刘阿华 +4 位作者 李言言 高洋 宁梦夏 马文涛 陈德坤 《动物医学进展》 北大核心 2019年第9期19-23,共5页
为建立羊乳中牛乳成分的检测方法,采用西北农林科技大学动物医学院免疫学实验室制备并保存的牛α酪蛋白单克隆抗体,分别建立间接ELISA和间接阻断ELISA检测方法,并对两种方法的灵敏度及重复性进行试验。结果显示,建立的间接ELISA方法测... 为建立羊乳中牛乳成分的检测方法,采用西北农林科技大学动物医学院免疫学实验室制备并保存的牛α酪蛋白单克隆抗体,分别建立间接ELISA和间接阻断ELISA检测方法,并对两种方法的灵敏度及重复性进行试验。结果显示,建立的间接ELISA方法测定羊乳中牛α酪蛋白的检测灵敏度为1.3μg/mL,变异系数为2.7%;建立的间接阻断ELISA方法测定羊乳中牛α酪蛋白标准曲线的灵敏度为13.7 ng/mL,变异系数为2.9%。表明间接阻断ELISA标准曲线具有更高的检测灵敏度,对羊乳中牛乳成分的检测更准确。 展开更多
关键词 羊乳 牛α酪蛋白 阻断ELISA 标准曲线
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鸭生长迟缓病毒抗体检测方法的建立 预览
3
作者 池秋燕 宿鑫 +6 位作者 李雪松 硕盾 滕巧泱 杨健美 刘芹防 陈鸿军 李泽君 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第2期6-11,共6页
近年来,从鸭群中分离到一种造成鸭生长迟缓的新病毒,命名为鸭生长迟缓病毒(Duck growth retardation virus)。本研究以鸭生长迟缓病毒Anhui2株为抗原免疫小鼠,筛选获得2株能够稳定分泌抗该病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1-5和3-6G),在... 近年来,从鸭群中分离到一种造成鸭生长迟缓的新病毒,命名为鸭生长迟缓病毒(Duck growth retardation virus)。本研究以鸭生长迟缓病毒Anhui2株为抗原免疫小鼠,筛选获得2株能够稳定分泌抗该病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1-5和3-6G),在此基础上,利用特异性单抗1-5和鸭生长迟缓病毒Anhui2毒株抗原建立了检测该病毒抗体的阻断ELISA方法,并确定了抗原和抗体的最适条件。对316份阴性血清检测结果进行统计学分析,确定建立的阻断ELISA方法的判定标准:当阻断率PI≥26.0%时判为抗体阳性,PI≤17.9%时判定抗体阴性,17.9%<PI<26.0%时判为可疑,需重复检测1次,如果仍低于26.0%,则判为抗体阴性。该方法具有良好的特异性和敏感性,可用于鸭生长迟缓病毒病流行病学调查和疾病诊断。 展开更多
关键词 鸭生长迟缓病毒 单克隆抗体 中和 阻断ELISA
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猪源伪狂犬病病毒gB蛋白抗体阻断ELISA的建立与应用
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作者 孙海凤 徐旋 +3 位作者 董静 孙涛 白娟 姜平 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2018年第6期712-716,共5页
利用伪狂犬病病毒(PRV)ZJ01毒株重组gB蛋白及其对应的HRP标记的单克隆抗体,旨在建立一种检测伪狂犬病病毒gB抗体的阻断ELISA。对ELISA反应条件进行了优化,具体为:包被抗原的质量浓度为0.5 g/mL;待检血清的稀释比例为1∶1,孵育条件是3... 利用伪狂犬病病毒(PRV)ZJ01毒株重组gB蛋白及其对应的HRP标记的单克隆抗体,旨在建立一种检测伪狂犬病病毒gB抗体的阻断ELISA。对ELISA反应条件进行了优化,具体为:包被抗原的质量浓度为0.5 g/mL;待检血清的稀释比例为1∶1,孵育条件是37℃作用1 h;酶标单抗的稀释度为1∶15 000,作用时间为37℃0.5 h。ELISA结果的判定标准为:血清样品阻断率PI≥28.67%时判为阳性;PI≤18.27%时判为阴性;18.27%〈PI〈28.67%时判为可疑。该ELISA能特异性地识别PRV阳性血清,而与PRRSV、PCV2、CSFV和FMDV阳性血清无交叉反应性。ELISA的重复性试验表明,批间和批内的变异系数均小于10%。比较试验结果表明,该ELISA的相对敏感性和特异性分别为80.9%和96.4%,与IDEXX PRV gB ELISA试剂盒的符合率为85.1%。用建立的此ELISA对田间采集的535份猪临床血清样品进行了检测,结果显示,PRV抗体阳性率达61.87%。综上所述,本试验建立的猪源伪狂犬病病毒gB蛋白抗体阻断ELISA具有特异、简单、快速的优点,为建立标准化的检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 gB蛋白 阻断ELISA
T-2毒素单抗制备及免疫学检测方法的建立
5
作者 邢云瑞 孙亚宁 +4 位作者 姚静静 王英华 王方雨 闫文朝 胡骁飞 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1338-1345,共8页
拟制备灵敏度高、特异性强的抗T-2毒素单克隆抗体,并初步建立T-2毒素阻断ELISA检测方法。采用N,N,-羰基二咪唑(CDI)法合成免疫原T-2-BSA和包被原T-2-OVA,经小鼠免疫、细胞融合、利用ELISA筛选技术筛选出分泌抗T-2毒素单克隆抗体... 拟制备灵敏度高、特异性强的抗T-2毒素单克隆抗体,并初步建立T-2毒素阻断ELISA检测方法。采用N,N,-羰基二咪唑(CDI)法合成免疫原T-2-BSA和包被原T-2-OVA,经小鼠免疫、细胞融合、利用ELISA筛选技术筛选出分泌抗T-2毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,采用腹腔注射细胞株制备腹水,并进行免疫学特性鉴定,初步建立T2毒素阻断ELISA检测方法。结果显示,筛选出能稳定分泌抗T-2毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株l株命名为4F7,经鉴定该细胞株分泌的单克隆抗体(iTIAb)效价高达1.024×10^6,亚型为IgG1型,亲和力常数为1.49×10^14mol/L,IC50为2.19μg/L,检测限LOD为0.07μg/L,与其他霉菌毒素及载体蛋白BSA和OVA交叉反应率均小于0.01%。样品回收率为83.8%-94.3%,变异系数小于15%。本试验制备出了灵敏度高、特异性强、亲和力高的T-2毒素单克隆抗体,并建立了T-2毒素的阻断ELISA快速检测方法,为T-2毒素检测提供了技术支撑。 展开更多
关键词 T-2毒素 人工抗原 单克隆抗体 阻断ELISA
一种检测乙型脑炎病毒抗体阻断ELISA的建立及其初步应用 预览
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作者 江雅 牛季琛 +3 位作者 倪慧 韦冬妹 周国栋 曹瑞兵 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第9期1961-1968,共8页
流行性乙型脑炎是由日本脑炎病毒(JEV)引起的蚊媒传播人畜共患传染病,严重危害人类和猪、马等动物的健康。为建立检测多种动物血清中JEV抗体的ELISA,应用重组囊膜蛋白和辣根过氧化物酶标记的JEV单克隆抗体建立了检测JEV抗体的阻断ELIS... 流行性乙型脑炎是由日本脑炎病毒(JEV)引起的蚊媒传播人畜共患传染病,严重危害人类和猪、马等动物的健康。为建立检测多种动物血清中JEV抗体的ELISA,应用重组囊膜蛋白和辣根过氧化物酶标记的JEV单克隆抗体建立了检测JEV抗体的阻断ELISA。结果显示:通过对100份JEV抗体阴性猪血清的检测结果进行统计学分析,确定阻断ELISA的判定标准:阻断率(PI)≥34%时判定为阳性,PI≤25%时判定为阴性,25%<PI<34%时判定为可疑。该阻断ELISA与其他常见猪病毒病抗体阳性血清无交叉反应;批内和批间重复试验的变异系数均小于5%;与商品化ELISA试剂盒的对比检测表明,敏感性为98.5%、特异性为94.3%,两者的符合率为97.2%。应用该阻断ELISA对临床收集的猪、牛和羊共515份血清样品进行检测,JEV抗体阳性检出率分别为74.5%、13.3%和9.2%,抽样的血清中和试验结果与阻断ELISA检测结果的符合率为100%(9/9)。本研究成功建立了可适用于猪、牛和羊临床血清JEV抗体检测的阻断ELISA方法。 展开更多
关键词 日本脑炎病毒 囊膜蛋白 酶标单抗 阻断ELISA
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猪瘟E2蛋白的抗免疫抑制能力及遗传特性 预览
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作者 王耀帮 麻秋霞 胡海涛 《浙江畜牧兽医》 2018年第6期27-29,共3页
猪瘟病毒结构蛋白中的E2蛋白是囊膜糖蛋白,也是猪瘟病毒的主要保护性抗原,研究表明E2蛋白是猪瘟病毒的一个重要免疫蛋白,能够刺激机体产生中和抗体从而提供保护性免疫,用E2蛋白免疫猪只,能有效抵御猪瘟强毒的攻击。因此它已成为当今猪... 猪瘟病毒结构蛋白中的E2蛋白是囊膜糖蛋白,也是猪瘟病毒的主要保护性抗原,研究表明E2蛋白是猪瘟病毒的一个重要免疫蛋白,能够刺激机体产生中和抗体从而提供保护性免疫,用E2蛋白免疫猪只,能有效抵御猪瘟强毒的攻击。因此它已成为当今猪瘟免疫和检测研究的热点,以E2蛋白抗体为检测对象的阻断ELISA在猪瘟抗体的监测实验中得到了充分的运用。 展开更多
关键词 E2蛋白 猪瘟病毒 免疫蛋白 遗传特性 抑制能力 阻断ELISA 病毒结构蛋白 中和抗体
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3种猪瘟抗体检测试剂盒的比较与分析 预览 被引量:1
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作者 范振涛 《中国动物保健》 2017年第11期15-17,共3页
为掌握3种猪瘟病毒抗体检测试剂盒的优缺点,本研究应用IHA、间接ELISA、阻断ELISA试剂盒分别对67份猪血清样品进行检测,结果显示IHA、间接ELISA、阻断ELISA分别检测出阳性样品48份、56份、59份,阳性率分别为71.64%、83.58%、88.06%,与... 为掌握3种猪瘟病毒抗体检测试剂盒的优缺点,本研究应用IHA、间接ELISA、阻断ELISA试剂盒分别对67份猪血清样品进行检测,结果显示IHA、间接ELISA、阻断ELISA分别检测出阳性样品48份、56份、59份,阳性率分别为71.64%、83.58%、88.06%,与中和试验的符合率分别为89.55%、92.53%、94.03%。结果表明IHA灵敏度稍低,对血清质量要求高,但检测快速、操作简单及无需特殊仪器设备,适合个体检测和基层实验室使用;间接ELISA和阻断ELISA敏感性高、通量高,但对操作人员有专业水平要求、需要酶标仪,适合对畜群检测和一般实验室使用。 展开更多
关键词 猪瘟抗体 IHA 间接ELISA 阻断ELISA 比较与分析
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阻断ELISA法检测非洲猪瘟抗体 预览 被引量:2
9
作者 邓飞 李丽 +3 位作者 裴超信 周丽媛 张睿 邵靓 《四川畜牧兽医》 2016年第6期22-23,共2页
非洲猪瘟(ASF)是我国重点防范的外来动物疫病,目前我国尚无疫情发生,为防患于未然,仍需加强病原监测。本试验采用西班牙Ingenasa非洲猪瘟阻断ELISA抗体检测试剂盒对来源于四川省内的92份猪血清进行检测,结果表明92份血清样本均为ASFV... 非洲猪瘟(ASF)是我国重点防范的外来动物疫病,目前我国尚无疫情发生,为防患于未然,仍需加强病原监测。本试验采用西班牙Ingenasa非洲猪瘟阻断ELISA抗体检测试剂盒对来源于四川省内的92份猪血清进行检测,结果表明92份血清样本均为ASFV抗体阴性。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 阻断ELISA 抗体检测
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天水市2014~2015年羊小反刍兽疫免疫抗体检测与分析 预览
10
作者 成小莉 王美菊 王玙 《甘肃畜牧兽医》 2016年第17期5-6,共2页
目的:掌握天水市羊小反刍兽疫免疫抗体水平和效果;方法:采用阻断ELISA方法,对2014~2015年采自85个养殖场(户)的1 340份羊血清进行PPR抗体检测。结果:个体阳性率为79.25%,免疫合格养殖场(户)72个,合格率为84.71%。检测养殖场47个... 目的:掌握天水市羊小反刍兽疫免疫抗体水平和效果;方法:采用阻断ELISA方法,对2014~2015年采自85个养殖场(户)的1 340份羊血清进行PPR抗体检测。结果:个体阳性率为79.25%,免疫合格养殖场(户)72个,合格率为84.71%。检测养殖场47个,场免疫合格率为91.49%,散养户38个,散养户免疫合格率为74.36%。结论:场户群体和个体免疫抗体合格率均达到农业部要求70%以上的标准要求。 展开更多
关键词 小反刍兽疫(PPR) 阻断ELISA 抗体检测
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梁平县规模化羊场小反刍兽疫免疫效果检测 预览
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作者 杨琪 侯权书 +1 位作者 李冰 谢冬梅 《兽医导刊》 2016年第14期188-188,203共2页
为了解小反刍兽疫在规模化羊场的免疫效果,本试验采集了重庆梁平县4个规模化羊场血清样品157份,进行小反刍兽疫阻断ELISA抗体检测,结果表明,小反刍兽疫阻断ELISA抗体阳性率达80.89%,达到了农业部规定≥70%的标准。
关键词 小反刍兽疫 免疫效果 阻断ELISA
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新疆部分规模化奶牛场牛病毒性腹泻调查 预览
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作者 刘洁琼 《当代畜禽养殖业》 2016年第2期6-7,共2页
为了了解新疆部分规模化奶牛场BVDV的感染情况,对采集的奶牛血清、流产死胎和鼻拭子等组织病料应用Ruminant BVD/BD p80-Serum阻断ELISA实验及牛病毒性腹泻(BVD)实时荧光RTPCR的方法进行检测,BVDV血清学检测阳性率为63.8%,组织病料样... 为了了解新疆部分规模化奶牛场BVDV的感染情况,对采集的奶牛血清、流产死胎和鼻拭子等组织病料应用Ruminant BVD/BD p80-Serum阻断ELISA实验及牛病毒性腹泻(BVD)实时荧光RTPCR的方法进行检测,BVDV血清学检测阳性率为63.8%,组织病料样品中阳性率为13.46%,结果表明BVDV在新疆规模化奶牛场中已存在感染,因此应该对发病动物进行隔离或者淘汰,避免相互感染传播,降低感染率。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻 阻断ELISA 实时荧光RT-PCR
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应用三种方法筛选猪瘟抗体阴性猪的比较试验 预览
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作者 肖华春 尤宗耀 +4 位作者 张绍线 滕振艺 陆有飞 黄庆南 周如卫 《广西畜牧兽医》 2016年第1期6-8,共3页
为了寻找筛选猪瘟抗体阴性猪更简便的方法,本试验应用猪瘟中和试验(SN)、阻断ELISA和正向间接血凝(IHA)三种方法分别对170份未经猪瘟活疫苗免疫的仔猪血清进行猪瘟抗体检测。结果显示,SN、ELISA和IHA检测出的猪瘟阴性血清分别为14... 为了寻找筛选猪瘟抗体阴性猪更简便的方法,本试验应用猪瘟中和试验(SN)、阻断ELISA和正向间接血凝(IHA)三种方法分别对170份未经猪瘟活疫苗免疫的仔猪血清进行猪瘟抗体检测。结果显示,SN、ELISA和IHA检测出的猪瘟阴性血清分别为144份、150份和131份,表明三种检测方法有较好的符合率,其中SN与ELISA的检测符合率为90.59%,SN与IHA的检测符合率为82.94%,而ELISA法与另两种方法比较阴性符合率最高。本结果表明,ELISA法具有较高的敏感性,适合应用于猪瘟活疫苗安全检验抗体阴性猪的筛选。 展开更多
关键词 猪瘟抗体 筛选 中和试验 阻断ELISA 间接血凝 符合率
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甘肃省规模化猪场伪狂犬病的血清学调查与防控建议 预览 被引量:1
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作者 康文彪 宋建国 +3 位作者 周峰 薛喜娟 张莉 康新华 《国外畜牧学:猪与禽》 2015年第11期50-52,共3页
了解规模化猪场PR野毒感染状况和免疫效果,为规模化猪场伪狂犬病控制和净化提供科学依据。采用阻断ELISA方法,对采自11个规模场户的379份血清进行PR-g E野毒抗体检测,对其中的195份血清进行PR-g B抗体检测。被调查的11个规模场中有6个... 了解规模化猪场PR野毒感染状况和免疫效果,为规模化猪场伪狂犬病控制和净化提供科学依据。采用阻断ELISA方法,对采自11个规模场户的379份血清进行PR-g E野毒抗体检测,对其中的195份血清进行PR-g B抗体检测。被调查的11个规模场中有6个规模场PR-g E抗体为阳性,群体阳性率为54.55%,个体阳性率54.09%。阳性率公猪为58.33%、母猪为83.44%,仔猪为5.08%、育肥猪为39.10%;PR-g B抗体阳性率公猪为100%、母猪为100%,仔猪为73.33%。甘肃省规模猪场PR-g E抗体的群体阳性率和个体阳性率处于较高水平;免疫猪群的高PR-g E抗体阳性率是值得重视的问题;甘肃省猪伪狂犬病上升势头明显。 展开更多
关键词 PR gE抗体 gB抗体 阻断ELISA
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蓝舌病病毒阻断ELISA抗体检测方法的建立 预览 被引量:5
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作者 苗海生 李乐 +4 位作者 朱建波 肖雷 廖德芳 王金萍 李华春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期111-115,共5页
为建立蓝舌病病毒(BTV)群特异性抗体的检测方法,本研究通过制备BTV群特异性多克隆抗体,建立蓝舌病群特异性阻断ELISA抗体检测方法。利用该方法同时对88份绵羊和山羊BTV阴性血清进行检测,确定阴阳性血清临界值为抗原对照平均0D450nm... 为建立蓝舌病病毒(BTV)群特异性抗体的检测方法,本研究通过制备BTV群特异性多克隆抗体,建立蓝舌病群特异性阻断ELISA抗体检测方法。利用该方法同时对88份绵羊和山羊BTV阴性血清进行检测,确定阴阳性血清临界值为抗原对照平均0D450nm的50%。实验结果表明,该方法的敏感性、特异性和重复性符合通用标准。该方法根据血清样品对特定稀释度病毒抗原的阻断能力确定待检样品的抗体效价,通过阻断ELISA与中和试验对29份标准阳性血清检测结果比较表明:成对样本相关系数为0.898,相关性显著,蓝舌病群特异性阻断ELISA可以取代中和试验用于蓝舌病的血清抗体效价检测。 展开更多
关键词 蓝舌病 阻断ELISA 抗体效价
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猪圆环病毒2型阻断ELISA抗体检测试剂盒的研制与应用 被引量:1
16
作者 王丽敏 杨香林 +2 位作者 侯成才 王先炜 姜平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1584-1588,共5页
为了进一步提高对猪圆环病毒2型(PCV2)检测的特异性,利用PCV2Cap蛋白及酶标记Cap单克隆抗体,建立了一种检测猪血清中PCV2Cap蛋白抗体的阻断ELISA方法,并将其组装成试剂盒。对阻断ELISA试剂盒进行了敏感性、特异性、重复性、符合率和保... 为了进一步提高对猪圆环病毒2型(PCV2)检测的特异性,利用PCV2Cap蛋白及酶标记Cap单克隆抗体,建立了一种检测猪血清中PCV2Cap蛋白抗体的阻断ELISA方法,并将其组装成试剂盒。对阻断ELISA试剂盒进行了敏感性、特异性、重复性、符合率和保存期测定。结果显示,其敏感性高,特异性强,批内批间重复性好,与商品化试剂盒符合率高,保存期长且性质相对稳定。先后制备了5个批次的阻断ELISA试剂盒,用于检测PCV2不同疫苗免疫猪血清、规模猪场PMWS发病猪及同群健康猪血清、不同日龄猪群血清.结果显示,PCV2油佐剂免疫组血清抗体水平相对较高,PWMS发病猪血清抗体水平高于同群健康猪,猪群中育肥猪血清抗体水平最高。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 CAP蛋白 阻断ELISA
酶联免疫吸附试验中常见问题的产生原因及解决办法 预览 被引量:2
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作者 詹文辉 《福建畜牧兽医》 2013年第4期36-37,共2页
用酶标记物进行免疫学检测的方法称为酶联免疫吸附试验(ELISA)。该技术诞生于20世纪70年代初,可进行定性或定量分析,主要有间接ELISA、阻断ELISA、双抗体夹心ELISA三种方法。目前该技术在猪瘟、口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、猪伪狂犬... 用酶标记物进行免疫学检测的方法称为酶联免疫吸附试验(ELISA)。该技术诞生于20世纪70年代初,可进行定性或定量分析,主要有间接ELISA、阻断ELISA、双抗体夹心ELISA三种方法。目前该技术在猪瘟、口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪乙型脑炎、猪链球菌病、猪圆环病毒病、猪传染性胸膜肺炎、猪细小病毒病等动物疫病检测中得到广泛应用。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附试验 双抗体夹心ELISA 猪传染性胸膜肺炎 间接ELISA 阻断ELISA 原因 猪圆环病毒病 猪细小病毒病
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培氟沙星阻断ELISA检测方法的建立
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作者 赵银丽 王金荣 苏兰利 《畜牧与兽医》 北大核心 2013年第7期64-66,共3页
为了建立牛奶样品中培氟沙星的阻断ELISA检测方法,采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法合成了培氟沙星的完全抗原。免疫BALB/c小鼠,制备了血清抗体,并对其血清抗体效价、半数抑制浓度、特异性、牛奶样品的添加回收率等进行了测定。结果:血清... 为了建立牛奶样品中培氟沙星的阻断ELISA检测方法,采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法合成了培氟沙星的完全抗原。免疫BALB/c小鼠,制备了血清抗体,并对其血清抗体效价、半数抑制浓度、特异性、牛奶样品的添加回收率等进行了测定。结果:血清抗体的效价为1∶25 600,阻断ELISA的线性检测范围为1.79~100 ng/mL,半数抑制浓度(IC50)为10.12 ng/mL,抗体与其他抗生素的交叉反应率小于0.1%,牛奶样品的平均添加回收率大于85%。 展开更多
关键词 培氟沙星 完全抗原 阻断ELISA
我国部分省份猪嗜血支原体感染血清流行病学调查
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作者 程王琨 侯成才 +1 位作者 常晨 李玉峰 《畜牧与兽医》 北大核心 2013年第11期82-84,共3页
为研究猪嗜血支原体在猪群中的感染情况,本研究采用阻断ELISA方法对来自我国7个省(区)的1492份猪血清进行了检测,并对其感染的时间、空间和种群间的分布进行了分析。结果表明:血清总阳性率为17.36%,其中上海地区最高为57.01%... 为研究猪嗜血支原体在猪群中的感染情况,本研究采用阻断ELISA方法对来自我国7个省(区)的1492份猪血清进行了检测,并对其感染的时间、空间和种群间的分布进行了分析。结果表明:血清总阳性率为17.36%,其中上海地区最高为57.01%,广西地区最低为4.55%,安徽、浙江、江苏、江西和四川分别为28.40%、20.25%、13.93%、7.14%和5.49%。感染时间从6、7月份开始,9月份感染比例达到最高(33.94%),然后开始慢慢下降。种群间分析显示,母猪血清阳性率为65.48%,仔猪为4.8%。血清流行病学调查结果显示猪嗜血支原体在我国猪群的感染比较普遍,而且呈现出逐年增加的趋势,应该引起足够的重视。 展开更多
关键词 猪嗜血支原体 阻断ELISA 血清 流行病学调查
口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体阻断ELISA的建立与效果评价 被引量:5
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作者 厍大亮 卢曾军 +4 位作者 曹轶梅 付元芳 孙普 李冬 刘在新 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1144-1151,共8页
使用组氨酸单克隆抗体作为捕获抗体,口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)3B单克隆抗体作为检测抗体,原核表达的口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC作为抗原,建立了一种以区分疫苗免疫动物与康复带毒动物或持续感染动物为目的,检测口蹄疫病毒非结构蛋白3... 使用组氨酸单克隆抗体作为捕获抗体,口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)3B单克隆抗体作为检测抗体,原核表达的口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC作为抗原,建立了一种以区分疫苗免疫动物与康复带毒动物或持续感染动物为目的,检测口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体的阻断ELISA(FMDV NSP B-ELISA)。使用本研究建立的ELISA检测了大量牛、羊及猪的血清,并用公式(1-样品D450nm/阴性对照D450nm)来计算血清阻断率,最终确定:血清阴断率≥0.46判为阳性,血清阻断率〈0.46判为阴性。根据此标准检测试验感染牛、羊及猪血清,敏感性≥85.4%;检测免疫健康牛、羊及猪血清,特异性≥99.2%。通过比较发现本研究建立的ELISA与Ceditest NS ELISA试剂盒有很高的符合率,对感染动物血清与疫区田间牛血清的阳性检出率均高于同类试剂盒。表明,本研究建立的ELISA可以作为田间疫情监测方法,在口蹄疫灭活疫苗免疫动物群体中使用。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 非结构蛋白3ABC 3B单克隆抗体 阻断ELISA 免疫动物 感染动物 血清鉴别
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