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黄芪多糖对骨骼肌成肌细胞增殖作用的研究 预览
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作者 邓聪 杨志敏 +4 位作者 徐福平 孙玉姣 陈玉状 赖艳娴 岑美婷 《中医药信息》 2019年第5期4-7,共4页
目的:观察黄芪多糖(APS)对C2C12骨骼肌成肌细胞(成肌细胞)的增殖作用。方法:将成肌细胞接种到96孔培养板,APS分为0.1、0.2、0.4、0.8和1 mg/mL 5组浓度;地塞米松(DEX)分为1、10、100和1 000μM 4组浓度,培养12 h、24 h,MTT法检测计算增... 目的:观察黄芪多糖(APS)对C2C12骨骼肌成肌细胞(成肌细胞)的增殖作用。方法:将成肌细胞接种到96孔培养板,APS分为0.1、0.2、0.4、0.8和1 mg/mL 5组浓度;地塞米松(DEX)分为1、10、100和1 000μM 4组浓度,培养12 h、24 h,MTT法检测计算增殖率和抑制率。根据上述实验确定APS、DEX浓度,再分对照组、DEX组、DEX+APS组,培养24 h,MTT法检测OD值、流式细胞仪检测凋亡率、光镜检测肌管横径。结果:APS在0.6 mg/mL浓度以下对成肌细胞有增殖作用(P<0.05),并在0.2 mg/mL达到峰值。100μM浓度以上DEX对成肌细胞有抑制作用(P<0.05)。用100μM DEX建立成肌细胞萎缩模型,给予0.2 mg/mL APS干预后,细胞OD值和肌管横径均升高(P<0.05),凋亡率下降(P<0.05)。结论:APS对成肌细胞有良好的增殖作用,100μM DEX可作为成肌细胞萎缩模型造模有效浓度。 展开更多
关键词 骨骼肌成肌细胞 黄芪多糖 地塞米松 肉减少症 衰老
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干细胞治疗心力衰竭的研究进展
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作者 张开泰 张淑芹 刘华 《中国临床研究》 CAS 2018年第3期427-429,共3页
心力衰竭是指心肌的收缩、舒张功能在各种致病因素的作用下发生障碍,使心排血量减少,不能满足组织代谢需求的病理生理过程,做为机体的一种适应性反应,其过程伴随神经激素和细胞因子的激活,使得心肌发生重构,最终造成不可逆的损伤。目前... 心力衰竭是指心肌的收缩、舒张功能在各种致病因素的作用下发生障碍,使心排血量减少,不能满足组织代谢需求的病理生理过程,做为机体的一种适应性反应,其过程伴随神经激素和细胞因子的激活,使得心肌发生重构,最终造成不可逆的损伤。目前大多数抑制这个过程治疗策略以及心脏再同步化治疗,并取得了一定成功,但仍有进展到终末期心力衰竭的患者治疗效果不理想。而对于这些患者,干细胞疗法作为一种全新的治疗措施,或许有望缓解这一医学难题。 展开更多
关键词 心力衰竭 胚胎干细胞 体干细胞 骨髓 间充质干细胞 骨骼肌成肌细胞 脂肪源性干细胞 内源性心脏干细胞 诱导多能干细胞
Wnt1增强骨骼肌成肌细胞治疗心肌梗死的功能 预览
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作者 杜文娟 杨艳波 +2 位作者 张希玲 许友升 王世鹏 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2016年第2期103-108,共6页
目的探讨Wnt1基因对骨骼肌成肌细胞(skeletal myoblasts,SkMs)治疗心肌梗死(myocardial infarction,MI)功能的影响及其机制。方法分离培养SkMs,构建p-EGFP-C3-Wnt1真核表达载体并转染SkMs。采用随机数字表法将40只大鼠分为假手术组... 目的探讨Wnt1基因对骨骼肌成肌细胞(skeletal myoblasts,SkMs)治疗心肌梗死(myocardial infarction,MI)功能的影响及其机制。方法分离培养SkMs,构建p-EGFP-C3-Wnt1真核表达载体并转染SkMs。采用随机数字表法将40只大鼠分为假手术组、MI组、p-EGFP-C3转染SkMs心肌移植组、pEGFP-C3-Wnt1转染SkMs心肌移植组,每组10只。MI组大鼠结扎其左冠状动脉前降支建立MI模型;细胞移植组大鼠,建立MI模型后立即于梗死边缘区分4点进行细胞移植。术后4周,心脏超声检测各组鼠心功能;应用激光共聚焦显微镜检测移植细胞存活情况和缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达;应用免疫组化检测Sca-1+细胞表达。结果 p-EGFP-C3-Wnt1转染的SkMs心肌移植组移植细胞存活数量、Cx43表达、心脏功能均明显高于p-EGFP-C3转染的SkMs心肌移植组(P〈0.01),并在p-EGFPC3-Wnt1转染的SkMs心肌移植大鼠心脏中发现了更多的Sca-1+心肌干细胞(cardiac stem cells,CSCs)。结论过表达Wnt1的SkMs通过促进移植细胞存活,增加心肌Cx43表达、促进Sca-1+CSCs归巢,改善MI大鼠的心脏功能。 展开更多
关键词 骨骼肌成肌细胞 梗死 WNT1 细胞移植 Sca-1+心细胞
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低糖应激对成肌细胞增殖的影响及其机制 预览
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作者 李方晖 徐呈祥 冯庆鲲 《生命科学研究》 CAS CSCD 2016年第1期29-35,共7页
利用小鼠骨骼肌成肌细胞系(C2C12)作为细胞模型,通过检测低糖应激对C2C12成肌细胞增殖、细胞周期分布、线粒体功能、去乙酰化酶1(sirtuin1,SIRT1)及其下游基因m RNA表达的影响,探讨低糖应激对成肌细胞增殖影响及其机制。研究发现,... 利用小鼠骨骼肌成肌细胞系(C2C12)作为细胞模型,通过检测低糖应激对C2C12成肌细胞增殖、细胞周期分布、线粒体功能、去乙酰化酶1(sirtuin1,SIRT1)及其下游基因m RNA表达的影响,探讨低糖应激对成肌细胞增殖影响及其机制。研究发现,低糖应激(5 mmol/L)第3 d导致C2C12成肌细胞增殖下降(P〈0.01)、细胞周期停滞于G0/G1期、活性氧和线粒体膜电位显著性降低;低糖应激也增加了线粒体ATP(adenosine triphosphate,ATP)合成(P〈0.05),同时促进了SIRT1、FOXO3a(forkhead box O3a)、p27(p27/Kip1)m RNA表达(P〈0.05)。结果表明,低糖应激可能经SIRT1/FOXO3a轴上调p27 m RNA表达,促使增殖活性下降和细胞周期停滞G0/G1。同时,低糖应激也提升了成肌细胞线粒体能量代谢的高效性。 展开更多
关键词 低糖应激 骨骼肌成肌细胞 增殖 去乙酰化酶1(SIRT1)
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骨骼肌成肌细胞移植治疗急性心肌梗死的研究进展 预览 被引量:1
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作者 刘琦 孙晓薇 杜文娟 《国际心血管病杂志》 2015年第2期79-81,93共4页
骨骼肌成肌细胞具有来源广泛、易于获得,自体移植不受供体来源限制,增殖能力及抗缺血、缺氧能力强大,易在梗死区内存活等多种优点,是干细胞治疗的重要来源。该文主要阐述骨骼肌成肌细胞移植治疗急性心肌梗死的研究进展。
关键词 骨骼肌成肌细胞 细胞 移植 急性心梗死
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Wortmannin 和 U0126 抑制胰岛素对大鼠骨骼肌成肌细胞的促分化作用
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作者 周小鸥 赵勇 +4 位作者 徐良贤 李兴暖 陈培良 邹恒 于欢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期717-720,共4页
目的 观察wortmannin 和U0126抑制胰岛素对大鼠成肌细胞向成熟肌细胞分化作用, 探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。方法 分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞, 用含不同浓度胰岛素的DMEM培养基培养, 收集细胞, 在相差显微镜下观察形态变... 目的 观察wortmannin 和U0126抑制胰岛素对大鼠成肌细胞向成熟肌细胞分化作用, 探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。方法 分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞, 用含不同浓度胰岛素的DMEM培养基培养, 收集细胞, 在相差显微镜下观察形态变化, 并通过免疫细胞化学方法和Western blot法检测生肌素(myogenin)表达。用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂wortmannin和MEK特异性抑制剂U0126干预后, 观察胰岛素对骨骼肌成肌细胞分化的影响。结果 胰岛素能明显促进骨骼肌成肌细胞形成肌小管, 诱导2 d开始有肌管形成并逐渐增多到7 d达到高峰; 胰岛素促进骨骼肌成肌细胞的生肌素阳性细胞核和生肌素蛋白表达增多, 而wortmannin 和U0126能下调胰岛素的这种作用。结论 Wortmannin 和U0126可阻断胰岛素促进骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化, 使肌管生成减少, 生肌素表达下调。 展开更多
关键词 WORTMANNIN U0126 胰岛素 骨骼肌成肌细胞 分化
胰岛素通过PI3K/Akt和MEK/ERK信号通路增强大鼠骨骼肌成肌细胞的增殖 被引量:7
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作者 于欢 张敏 +3 位作者 赵勇 吴萍 陈培良 李卫东 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期19-25,共7页
本文旨在探讨胰岛素对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,用胰岛素作用于培养的骨骼肌成肌细胞,采用3H-TdR渗入法、BrdU检测法、MTT实验分析检测骨骼肌成肌细胞的增殖情况,用Westernblot检测Akt和ERK的磷... 本文旨在探讨胰岛素对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,用胰岛素作用于培养的骨骼肌成肌细胞,采用3H-TdR渗入法、BrdU检测法、MTT实验分析检测骨骼肌成肌细胞的增殖情况,用Westernblot检测Akt和ERK的磷酸化水平,同时使用P13K和MEK特异性抑制剂干预胰岛素对骨骼肌成肌细胞的增殖作用影响。结果显示,胰岛素能明显促进骨骼肌成肌细胞对3H.TdR的摄入,促进细胞的DNA合成和增殖,并且胰岛素促细胞增殖作用具有一定的量效关系,骨骼肌成肌细胞原代细胞和成肌细胞株L6、C2C12都显示该促增殖作用可被P13K和MEK特异性抑制剂阻断,胰岛素还提高了骨骼肌成肌细胞Akt和ERK的磷酸化水平。本研究证实胰岛素可能通过P13K/Akt和MEK/ERK信号通路促进骨骼肌成肌细胞增殖。 展开更多
关键词 骨骼肌成肌细胞 胰岛素 增殖 PI3K/AKT MEK/ERK
1-磷酸神经鞘氨醇对大鼠骨骼肌成肌细胞分化的影响 预览
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作者 于欢 郑美蓉 +2 位作者 余敬谋 陈培良 李卫东 《中山大学学报:医学科学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期6-10,共5页
【目的】观察1-磷酸神经鞘氨醇(SIP)对大鼠骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化、形成肌管的作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。【方法】分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,含不同浓度SIP的高糖DMEM培养基培养,收集细胞.在相差... 【目的】观察1-磷酸神经鞘氨醇(SIP)对大鼠骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化、形成肌管的作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。【方法】分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,含不同浓度SIP的高糖DMEM培养基培养,收集细胞.在相差显微镜和共焦显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学方法分别检测成肌细胞分化的早期特异性标志一肌球蛋白和生肌素表达的改变。使用磷酸神经鞘氨醇激酶(SphK)活性抑制剂DMS和HACPT后观察S1P对骨骼肌成肌细胞的生肌素表达的作用。【结果】S1P能明显促进骨骼肌成肌细胞细胞形成肌小管,诱导2—3d开始有肌管形成,之后肌管越来越多,到6.7d达高峰;同对照组相比随S1P浓度增高,细胞核生肌素阳性率逐渐增高(P〈0.01);SphK活性抑制剂抑制SIP促进骨骼肌成肌细胞生肌素阳性率的增高(P〈0.01)。【结论】体外S1P可能通过提高SphK活性调节成肌细胞向成熟肌细胞分化。 展开更多
关键词 1-磷酸神经鞘氨醇 磷酸神经鞘氨醇激酶 骨骼肌成肌细胞 分化
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外源性1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞DNA合成的影响 预览 被引量:1
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作者 于欢 熊建军 +2 位作者 陈培良 周师洁 李卫东 《复旦学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期423-427,共5页
目的观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine1-phosphate,SIP)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备SIP脂质体使SIP转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3H-TdR渗入法检测S1P... 目的观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine1-phosphate,SIP)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备SIP脂质体使SIP转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3H-TdR渗入法检测S1P进入细胞内和在细胞外对骨骼肌成肌细胞DNA的合成;进一步使用磷酸神经鞘氨醇激酶(sphingosinekinase,SphK)活性抑制剂N,N-二甲基鞘氨醇(N,N-dimethylsphingosine,DMS)和HACPT[2-(p-hydroxyanilino)-4-(p-ehlorophenyl)thiazole3,观察其对S1P促进DNA合成作用的影响。结果S1P脂质体转入可明显促进骨骼肌成肌细胞DNA合成。100~1000nmol/L剂量范围内s1P脂质体使细胞胸腺嘧啶核苷(3H—TdR)的摄人量较对照组增加12.3%~50.7%(P〈0.01),并与剂量呈正相关。该促进作用不会被SphK活性抑制剂DMS和HACPT所阻断。S1P直接加入培养液同样能促进细胞DNA合成(P〈0.01),500和1000nmol/L剂量组。H—TdR的摄人量较对照组分别增加18.8%(P〈O.05)和26.5%(1P〈0.05),增幅低于同剂量的S1P脂质体。该促进作用可被DMS和HACPT所阻断。结论外源性S1P可促进体外培养的大鼠骨骼肌成肌细胞增殖,其作用可能与细胞内SphK活性增加引起细胞内S1P生成增多。 展开更多
关键词 1-磷酸神经鞘氨醇(S1P) 磷酸神经鞘氨醇激酶(SphK) 骨骼肌成肌细胞 DNA合 大鼠
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人骨骼肌成肌细胞体外分化的全程观察及INK4a信号通路对其衰老的诱导研究 被引量:2
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作者 赵丽霞 李蓉 +2 位作者 熊东林 姚尚龙 廖翔 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1383-1386,共4页
目的建立人骨骼肌成肌细胞分离和纯化方法,展示人成肌细胞体外增殖分化至衰老的全过程;研究INK4a信号通路对其衰老的诱导。方法采用机械法和胶原酶消化法,结合差速贴壁技术,获得高纯度的人成肌细胞,结蛋白(desmin)抗体染色鉴定,... 目的建立人骨骼肌成肌细胞分离和纯化方法,展示人成肌细胞体外增殖分化至衰老的全过程;研究INK4a信号通路对其衰老的诱导。方法采用机械法和胶原酶消化法,结合差速贴壁技术,获得高纯度的人成肌细胞,结蛋白(desmin)抗体染色鉴定,β-半乳糖苷酶染色及倒置显微镜下观察人成肌细胞生长、分化及衰老全程。构建慢病毒载体pLVX—p16INK4a,感染第3代人骨骼肌成肌细胞(p16组),采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT—qPCR)法测定p16INK4amRNA水平,Westernblot法测定蛋白水平;用β-半乳糖苷酶染色及倒置显微镜下观察鉴定细胞衰老程度。结果desmin抗体着色表明分离得到的人成肌细胞纯度接近100%,获取了其增殖并分化为肌管、肌纤维以及最终转归为衰老细胞各阶段的实验图片。转染7d后,RT—qPCR法与Westernblot法证明p16组细胞p16INK4amRNA与蛋白表达水平明显高于对照组(P〈0.05);p16组细胞镜下见明显衰老表型,细胞计数显著少于对照组(P〈0.05),胞质经β-半乳糖苷酶染色后有明显蓝染,而对照组胞质蓝染微弱。结论人成肌细胞体外分离培养获得的不同阶段实验图景与现象分析,为以其为靶点的研究奠定了基础。INK4a信号通路的上调直接诱导了人成肌细胞的衰老。 展开更多
关键词 骨骼肌成肌细胞 分化 衰老 信号通路
S1P对缺氧/复氧诱导的共培养心肌细胞和成肌细胞损伤的影响 预览 被引量:2
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作者 于欢 谷翔 +4 位作者 张普华 徐良贤 陈培良 秦仲君 赵勇 《华中科技大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期637-641,共5页
目的探讨1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对联合培养的大鼠骨骼肌成肌细胞及新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧所致细胞损伤的影响。方法体外分离与培养新生大鼠心肌细胞,并与大鼠骨骼肌成肌细胞共同培养,构建缺氧/复氧损伤模... 目的探讨1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对联合培养的大鼠骨骼肌成肌细胞及新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧所致细胞损伤的影响。方法体外分离与培养新生大鼠心肌细胞,并与大鼠骨骼肌成肌细胞共同培养,构建缺氧/复氧损伤模型,于复氧期开始给予S1P干预。利用2,4二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,硫代巴比妥酸显色法检测丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)含量,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,并比较各组间差异,从而观察S1P对共同培养新生大鼠心肌细胞和大鼠骨骼肌成肌细胞缺氧/复氧诱导细胞损伤的影响。结果①新生大鼠心肌细胞在培养24h后开始贴壁生长,培养6d内细胞数量未见明显变化,培养2d后倒置显微镜下见散在的具有搏动能力的心肌细胞,第3天可见散在的心肌细胞相互间连接成合胞且可见细胞搏动,4~5d呈同一节律的搏动。②100、500、1 000nmol/L S1P均可减少共培养心肌细胞和骨骼肌成肌细胞缺氧/复氧损伤后LDH活性和MDA含量,即可减轻复氧所诱导的细胞损伤。③S1P可抑制共培养心肌细胞和骨骼肌成肌细胞缺氧/复氧损伤后的细胞凋亡。结论 S1P可减少因复氧所诱导的共同培养细胞损伤,抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 1-磷酸神经鞘氨醇 骨骼肌成肌细胞 肌细胞 缺氧 复氧 细胞凋亡
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大鼠骨骼肌成肌细胞与乳鼠心肌细胞共培养对缝隙连接蛋白43表达的影响
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作者 刘丽霞 邵素霞 +2 位作者 张雷 陈红霞 赵春芳 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期489-493,共5页
目的观察体外共培养的乳鼠心肌细胞与大鼠骨骼肌成肌细胞(简称L6细胞)以及乳鼠心肌细胞与转染外源性缝隙连接蛋白43(Cx43)基因的L6细胞(简称L6-Cx43细胞)间Cx43蛋白的表达情况,从而探讨共培养时心肌环境对成肌细胞的作用。方法... 目的观察体外共培养的乳鼠心肌细胞与大鼠骨骼肌成肌细胞(简称L6细胞)以及乳鼠心肌细胞与转染外源性缝隙连接蛋白43(Cx43)基因的L6细胞(简称L6-Cx43细胞)间Cx43蛋白的表达情况,从而探讨共培养时心肌环境对成肌细胞的作用。方法将乳鼠心肌细胞与4’,6-二脒基-2-苯基吲哚标记的大鼠骨骼肌成肌细胞进行共培养,用免疫荧光双标方法检测共培养后两种细胞中Cx43的表达定位;用Western blotting方法检测共培养对成肌细胞中Cx43蛋白表达量的影响及共培养时间对成肌细胞Cx43蛋白表达水平的影响。结果免疫荧光双标结果显示,共培养后两种细胞接触的细胞膜上均有Cx43的表达;Western blotting结果进一步证实,共培养后成肌细胞中Cx43蛋白的表达增多,L6-Cx43细胞中Cx43增多更明显。结论心肌环境能够促进成肌细胞Cx43蛋白的表达,且两种细胞接触是必需的,转染外源性Cx43可以提高这种作用。 展开更多
关键词 骨骼肌成肌细胞 肌细胞 共培养 缝隙连接蛋白43 缝隙连接 免疫印迹法 大鼠
成肌细胞移植改善心肌梗死大鼠心功能的机制 预览
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作者 马牧欣 《中国科技信息》 2010年第21期 207-210,212,共5页
目的:研究心肌梗死大鼠骨骼肌成肌细胞移植后心功能变化情况,同时观察移植后的成肌细胞的存活及P2X1受体的表达情况。探讨骨骼肌成肌细胞移植对大鼠心肌梗死后心功能的改善作用的机制。方法:以同种系Wister大鼠为研究对象,取其股四头... 目的:研究心肌梗死大鼠骨骼肌成肌细胞移植后心功能变化情况,同时观察移植后的成肌细胞的存活及P2X1受体的表达情况。探讨骨骼肌成肌细胞移植对大鼠心肌梗死后心功能的改善作用的机制。方法:以同种系Wister大鼠为研究对象,取其股四头肌肌组织,采用胶原酶、链酶蛋白酶两步消化法获取大鼠骨骼肌成肌细胞进行体外培养。取同种系Wister大鼠30只随机分为2组(对照组和移植组)采用结扎冠状动脉的方法制造心梗模型,模型建立一周后再次开胸分别以分点注射法于心脏梗死区输入细胞培养液(对照组)或成肌细胞悬液(移植组)。于建模前、成肌细胞移植术前及移植术后第一、二周行超声心动检测。处死动物后,进行普通HE染色,抗myosin、抗P2X1受体免疫组化染色。结果:超声显示骨骼肌成肌细胞移植后二周,大鼠心脏功能较移植前有明显改善,其中射血分数由(40.3±2.5)%增加到(52.1±2.3)%且与对照组相比有显著差异(P﹤0.05)。普通HE染色发现,移植组的心梗区域可见红色的条索状团块。抗myosin染色证实有移植的细胞存在。抗P2X1受体染色阳性。结论:骨骼肌成肌细胞移植后能在大鼠体内存活,移植二周后对心肌梗死后心功能降低即有明显的改善作用,这可能与P2X1受体对细胞间连接的调节及其介导的正性肌力作用有关。 展开更多
关键词 骨骼肌成肌细胞 梗死 细胞移植 P2X1受体 缝隙连接
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骨骼肌成肌细胞移植对慢性心衰犬血液动力学的影响 预览 被引量:2
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作者 李冬云 范利 +3 位作者 何昆仑 刘宏斌 范明 刘淑红 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期475-477,共3页
目的观察自体骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬血液动力学的影响。方法19只慢性心衰犬模型建立后随机分为实验组(n=9):采用开胸直接心肌内注射自体骨骼肌成肌细胞;对照组(n=10):注射等量生理盐水。术前及术后5周行血液动力学检... 目的观察自体骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬血液动力学的影响。方法19只慢性心衰犬模型建立后随机分为实验组(n=9):采用开胸直接心肌内注射自体骨骼肌成肌细胞;对照组(n=10):注射等量生理盐水。术前及术后5周行血液动力学检查,病理组织标本行Desmin和Brd-U免疫荧光双重染色。结果(1)术后5周,实验组dP/dtmax、MAP、LVSP明显升高(P〈0.05),LVEDP明显下降(P〈0.05),而对照组上述指标无显著性差异(P〉0.05);(2)实验组心肌注射部位可见存活细胞,经Desmin和Brd-U免疫荧光双重染色证实来自于移植的骨骼肌成肌细胞。结论自体骨骼肌成肌细胞对慢性心力衰竭犬的血液动力学有明显改善作用。 展开更多
关键词 骨骼肌成肌细胞 动物模型 充血性心力衰竭 细胞移植 血液动力学
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巴戟天寡糖对成肌细胞增殖及向心肌样细胞分化的影响 预览
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作者 吴瑶 冯国清 胡香杰 《中国药理通讯》 2009年第2期 42-43,共2页
目的:研究巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)诱导成肌细胞增殖、分化的机制并观察其是否可诱导心肌细胞标志物的表达,为临床探索运用心脏组织工程学治疗心肌梗死提供更有效的依据。方法:采用出生1~3d... 目的:研究巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)诱导成肌细胞增殖、分化的机制并观察其是否可诱导心肌细胞标志物的表达,为临床探索运用心脏组织工程学治疗心肌梗死提供更有效的依据。方法:采用出生1~3d的SD大鼠乳离体差速贴壁法纯化培养双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法,用24h后的原代成肌细胞进行试验。实验分5组:空白对照组、5-氮杂胞苷(10μmol/ml)阳性药对照组、MOO各剂量(100gg/ml、300gg/ml、500μg/m1)组。分别检测以下指标:(1)观察加药前后成肌细胞形态学改变。(2)Desmin(结蛋白)鉴定。(3)加药前后成肌细胞对异丙肾上腺素(Isoprenaline,IP)的反应。(4)采用RT-PCR法检测成肌细胞中TGF-β1、GATA-4mRNA的表达。结果:(1)与空白对照组相比,MOO诱导48h后成肌细胞生长密集,胞浆丰富,增殖明显,具有较好的折光性。并呈一定方向性的长轴平行排列,细胞融合的肌管增多,分化良好,有明显自发性搏动的收缩现象,生长状态明显好于空白对照组。(2)与空白对照组相比,IP对阳性药对照组和MOO小剂量组成肌细胞正性变时作用不明显(P〉0.05);而IP对MOO中剂量组和大剂量组成肌细胞正性变时作用显著(P〈0.05)。 展开更多
关键词 细胞分化 成肌细胞增殖 巴戟天寡糖 PCR法检测 心脏组织工程学 骨骼肌成肌细胞 细胞形态学改变 对异丙肾上腺素
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SD乳鼠离体骨骼肌成肌细胞与心肌细胞间连接的初步研究 预览 被引量:1
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作者 赖颢 徐德民 +2 位作者 虞勇 王春生 王克强 《中国临床医学》 2009年第2期 180-183,共4页
目的:探寻共同培养的骨骼肌成肌细胞与心肌细胞间连接的形态学证据。方法:将鼠心肌细胞与骨骼肌成肌细胞体外共培养,于第2、4、7、14天免疫组化染色钙粘素(Cadherin)、细胞间隙连接蛋白73(Connexin43)、神经细胞粘附分子(NCAM)... 目的:探寻共同培养的骨骼肌成肌细胞与心肌细胞间连接的形态学证据。方法:将鼠心肌细胞与骨骼肌成肌细胞体外共培养,于第2、4、7、14天免疫组化染色钙粘素(Cadherin)、细胞间隙连接蛋白73(Connexin43)、神经细胞粘附分子(NCAM)3种蛋白,并行定量RT-PCR检查分组比较分析;于第4、7、10、14天透射电镜观察。结果:共同培养物中的骨骼肌成肌细胞表达Connexin43,且随时间延长而增加;Cadherin表达增加不明显;NCAM含量维持在较低水平,至2周时才表达较多;透射电镜下观察到两者间存在类似于缝隙连接的连接。结论:与心肌细胞共培养后骨骼肌成肌细胞融合、成熟延迟,Connexin43表达增多;两者间确有形成类似于缝隙连接的物质基础并可形成连接。 展开更多
关键词 肌细胞 骨骼肌成肌细胞 连接
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犬骨骼肌成肌细胞体外分离、纯化及培养方法改良探索 被引量:3
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作者 苏冠华 刘启云 +4 位作者 卢永昕 米少华 孙雨霏 刘晓明 帅欣欣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期 257-259,共3页
目的:探讨犬骨骼肌成肌细胞(SkMs)体外分离、纯化及培养方法的改良并研究其生物学特性。方法:采用机械分离结合Ⅱ型胶原酶、中性蛋白酶双酶一步消化法分离犬骨骼肌成肌细胞,经差速贴壁法纯化后,在骨骼肌细胞生长培养基(SKGM)中进... 目的:探讨犬骨骼肌成肌细胞(SkMs)体外分离、纯化及培养方法的改良并研究其生物学特性。方法:采用机械分离结合Ⅱ型胶原酶、中性蛋白酶双酶一步消化法分离犬骨骼肌成肌细胞,经差速贴壁法纯化后,在骨骼肌细胞生长培养基(SKGM)中进行原代和传代培养,免疫细胞化学染色鉴定。结果:改良后的培养方法适于获取犬骨骼肌成肌细胞,SKGM培养基适于犬骨骼肌成肌细胞的体外培养。SkMs在细胞密集或低血清分化培养基作用下可融合成肌管。结蛋白(desmin)单克隆抗体(mAb)细胞化学染色鉴定SkMs呈阳性,纯度在90%以上。结论:通过改良后的双酶一步消化法获得的SkMs在合适的培养条件下能够增殖、分化并保持其生物学特性,为其在基因治疗和组织工程中的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 骨骼肌成肌细胞 细胞培养 生物学特性
不同数量大鼠L6骨骼肌成肌细胞移植对心肌梗死疗效的影响
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作者 赵静 张雷 +2 位作者 邵素霞 张金平 赵春芳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期990-991,共2页
心肌梗死是导致中老年人死亡的主要疾病之一。近年来,用正常细胞移植修复梗死心肌,改善心功能,越来越受到国内外学者关注,但移植细胞数量与心肌梗死面积间的关系尚未明确。本实验观察了不同数量的大鼠L6骨骼肌成肌细胞对心肌梗死治... 心肌梗死是导致中老年人死亡的主要疾病之一。近年来,用正常细胞移植修复梗死心肌,改善心功能,越来越受到国内外学者关注,但移植细胞数量与心肌梗死面积间的关系尚未明确。本实验观察了不同数量的大鼠L6骨骼肌成肌细胞对心肌梗死治疗效果的差异,旨在探讨适宜的移植细胞数量,为今后的研究提供必要的实验数据。 展开更多
关键词 细胞移植 大鼠 骨骼肌成肌细胞 梗死 心功能
巴戟天寡糖对转化生长因子β信号传导的影响 预览
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作者 焦平利 冯国清 胡香杰 《中国药理通讯》 2009年第2期 39-40,共2页
目的:细胞移植技术的探索,为急性心肌梗死患者坏死区的心肌细胞重建及衰竭心脏的功能恢复,可能是-种极具前途的临床治疗手段。我们前期的研究初步证实巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)具有明显促进成... 目的:细胞移植技术的探索,为急性心肌梗死患者坏死区的心肌细胞重建及衰竭心脏的功能恢复,可能是-种极具前途的临床治疗手段。我们前期的研究初步证实巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)具有明显促进成肌细胞的增殖和分化的作用保护心脏作用的研究。方法:采用离体纯化培养乳鼠双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法,以5-氮杂2’-脱氧胞苷(5-Aza—dc)为阳性药对照组、并设立MOO中剂量+5-Aza—dc联合用药组,应用免疫组化、蛋白免疫痕迹技术进-步观察了MOO促成肌细胞向心肌样细胞分化时对TGF-β2受体及信号传导的影响。结果:(1)与空白对照组相比,各组TGF-β2表达水平均上调,差异显著(P〈0.05);与阳性对照组相比,MOO各剂量组TGF—β2表达水平随剂量增加而增强,联合用药组TGF-β2表达水平显著高于阳性对照组(P〈0.05)。(2)与空白对照组相比,各用药组Smad4表达水平均显著上调(P〈0.05),各用药组间Smad4表达水平无明显差异。(3)与空白对照组相比,MOO小剂量组及联合用药组Smad2/3表达轻微上调、MOO中、大剂量组及阳性组均下调Smad2/3的表达。(4)与空白对照组相比,各组Smad7的表达差异显著(P〈0.05),其中MOO小剂量组、阳性组和联合组均抑制Smad7表达,MOO中、大剂量组逐渐增强Smad7的表达。结论:(1)MOO可促进TGF-β2的表达,并随着剂量的增加表达增强。 展开更多
关键词 巴戟天寡糖 信号传导 转化生长因子Β 骨骼肌成肌细胞 TGF-Β2 细胞分化 SMAD4表达 Smad2/3
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骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬左心室功能的影响 预览 被引量:1
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作者 李冬云 范利 +5 位作者 何昆仑 刘宏斌 张波 王亮 张今尧 刘涛 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2009年第6期468-471,共4页
目的:观察自体骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬的左心室重塑及左心室功能的影响。方法:19只慢性心力衰竭犬模型建立后随机分为实验组(n=9):采用开胸直接心肌内注射自体骨骼肌成肌细胞;对照组(n=10):开胸心肌内注射等量生... 目的:观察自体骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬的左心室重塑及左心室功能的影响。方法:19只慢性心力衰竭犬模型建立后随机分为实验组(n=9):采用开胸直接心肌内注射自体骨骼肌成肌细胞;对照组(n=10):开胸心肌内注射等量生理盐水。移植前及移植后5周行超声心动图检查,病理组织标本行Desmin和Brd—U免疫荧光双重染色。结果:①移植后较移植前,实验组收缩末期心室腔面积(ESA)、舒张末期心室腔面积(EDA)均明显下降(P〈0.05),射血分数显著升高(P〈0.05),差异有统计学意义;而对照组ESA和EDA在移植前、移植后差异无统计学意义(P〉0.05);②实验组心肌注射部位可见存活细胞,经Desmin和Brd—U免疫荧光双重染色证实来自于移植的骨骼肌成肌细胞。结论:自体骨骼肌成肌细胞对慢性心力衰竭犬的左心室重塑及功能有明显改善作用。 展开更多
关键词 骨骼肌成肌细胞 充血性心力衰竭 细胞移植 左心室功能
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