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高效液相色谱-柱前衍生法测定食用油中黄曲霉毒素B1和B2的方法研究 预览
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作者 陈瑞莲 《现代食品》 2019年第1期110-113,共4页
采用高效液相色谱-柱前衍生法对食用油中的黄曲霉毒素B1和B2进行检测。样品经85%乙腈水提取后,氮吹至近干,用正己烷和三氟乙酸衍生,在高效液相色谱仪荧光检测器上检测。结果表明:黄曲霉毒素B1和B2在0.2~40 ng·mL-1内呈良好的线性关... 采用高效液相色谱-柱前衍生法对食用油中的黄曲霉毒素B1和B2进行检测。样品经85%乙腈水提取后,氮吹至近干,用正己烷和三氟乙酸衍生,在高效液相色谱仪荧光检测器上检测。结果表明:黄曲霉毒素B1和B2在0.2~40 ng·mL-1内呈良好的线性关系,r> 0.999,黄曲霉毒素B1和B2添加浓度在0.2~10μg·kg-1,回收率范围为83.7%~92.8%,RSD为4.0%~8.3%,检出限分别为0.075μg·kg-1和0.068μg·k-1,并用所建方法同GB 5009.22-2016中的第二法进行比较分析,从而为食用油中黄曲霉毒素B1和B2的检测提供一种更快速、更节约成本的方法。 展开更多
关键词 高效液相色谱 柱前衍生 食用油 黄曲霉毒素B1 黄曲霉毒素B2
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快速测定乳制品中黄曲霉毒素B1、M1 预览
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作者 李江 黎丁滔 +3 位作者 綦艳 严家俊 邱启东 佘之蕴 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2019年第1期49-50,55共3页
建立一种快速检测乳制品中黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)、M1(Aflatoxin M1,AFM1)的检测方法。用60%甲醇-水提取样品,1∶4纯水稀释,用酶联免疫法测定样本中的AFB1和AFM1。加标浓度为0.2μg/kg,0.4μg/kg和0.8μg/kg浓度AFB1、AFM1标... 建立一种快速检测乳制品中黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)、M1(Aflatoxin M1,AFM1)的检测方法。用60%甲醇-水提取样品,1∶4纯水稀释,用酶联免疫法测定样本中的AFB1和AFM1。加标浓度为0.2μg/kg,0.4μg/kg和0.8μg/kg浓度AFB1、AFM1标准品,用酶联免疫法测定,每个浓度做三次平行,分别计算AFB1、AFM1回收率。AFB1的回收率分别为:98.7%、97.3%及103.6%;AFM1的回收率为:100.5%、99.2%及101.5%;方法检出为0.03μg/kg。此方法对AFB1、AFM1的回收率结果均在90%~110%之间,符合国标方法中对酶联免疫试剂盒回收率的要求(50%~120%),方法快速、稳定,适用于乳制品中AFB1和AFM1的检测。 展开更多
关键词 乳制品 黄曲霉毒素B1 黄曲霉毒素M1 酶联免疫法
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湖北省奶牛精料原料及牛奶中黄曲霉毒素污染调查 预览
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作者 熊力力 吴文旋 +2 位作者 王翀 熊江林 吴灵英 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期137-141,共5页
为研究湖北省奶牛精料原料黄曲霉毒素B1(AFB1)和牛奶中黄曲霉毒素M1(AFM1)的污染情况,试验在湖北省武汉市、黄冈市、襄阳市和十堰市等地采集162份奶牛精料原料和242份奶样,奶样包括120份超高温灭菌(UHT)奶和122份巴氏灭菌奶,应用ELISA... 为研究湖北省奶牛精料原料黄曲霉毒素B1(AFB1)和牛奶中黄曲霉毒素M1(AFM1)的污染情况,试验在湖北省武汉市、黄冈市、襄阳市和十堰市等地采集162份奶牛精料原料和242份奶样,奶样包括120份超高温灭菌(UHT)奶和122份巴氏灭菌奶,应用ELISA方法分别检测AFB1和AFM1。结果表明:28.4%的饲料样本中检测出AFB1,其中2.5%样本超过国家限量标准,阳性样本平均浓度28.5μg/kg;与麦麸、大豆粕、芝麻饼相比,花生饼和玉米的AFB1污染程度更大;72.7%的牛奶样本中检出AFM1,阳性样本平均浓度为98.1ng/kg;巴氏灭菌奶的AFM1污染显著高于UHT奶(P<0.05),62.3%巴氏灭菌奶和1.7%UHT奶中AFM1超过欧盟限量标准(50ng/kg),但所有牛奶AFM1均未超过我国限量标准(500ng/kg)。综上,奶牛饲料生产中需要加强对易受AFB1污染的饲料原料监测,并监测牛奶AFM1污染情况,确保乳品安全。 展开更多
关键词 湖北省 牛奶 饲料 黄曲霉毒素B1 黄曲霉毒素M1
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油酸在黄曲霉毒素诱导肝细胞损伤中的保护作用 预览
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作者 师文文 吕攀 +2 位作者 徐庆强 赵杰 肖凯 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期267-274,共8页
为了解油酸在黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)诱发的肝损伤中所起的保护作用,以体外培养的肝细胞(L-02)作为靶细胞,研究油酸的保护机制。设置3组实验:对照组(无处理)、AFB1组(只有AFB1)和油酸组(AFB1和油酸共同处理),药物处理24h后显... 为了解油酸在黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)诱发的肝损伤中所起的保护作用,以体外培养的肝细胞(L-02)作为靶细胞,研究油酸的保护机制。设置3组实验:对照组(无处理)、AFB1组(只有AFB1)和油酸组(AFB1和油酸共同处理),药物处理24h后显微镜观察细胞形态,细胞增殖-毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测细胞活力,荧光法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率,蛋白质免疫印迹检测血红素加氧酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)、Caspase-3以及Survivin蛋白的表达。采用t检验或单因素方差分析进行统计分析。结果发现:与对照组相比,AFB1暴露能够明显抑制肝细胞活力(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.001),升高ROS水平(P<0.001);与AFB1组相比,油酸作用后细胞活力显著增加(P<0.01),细胞凋亡减少(P<0.01),ROS水平降低(P<0.001),同时显著提高了HO-1(P<0.05)和抑凋亡蛋白Survivin的表达(P<0.05),降低了凋亡蛋白Caspase-3(P<0.01)表达。因此认为油酸对AFB1引发的肝细胞损伤具有保护作用,其机制可能与其通过促进抗氧化酶蛋白HO-1的表达,降低氧化应激水平,从而降低细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 油酸 黄曲霉毒素B1 血红素加氧酶-1 氧化应激 细胞凋亡
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酶联免疫法检测花生样本中的黄曲霉毒素B1 预览
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作者 黄钟标 郑思珩 +2 位作者 吴思敏 金佳佳 严家俊 《广州化工》 CAS 2019年第9期124-125,136共3页
使用浓度为40%的甲醇-水对花生样本中的黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)进行提取,再做1:5稀释,采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked Immunosorbent assay,ELISA)对样本中AFB1含量进行检测,并验证该方法的线性,重现性、回收率。结果表明,A... 使用浓度为40%的甲醇-水对花生样本中的黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)进行提取,再做1:5稀释,采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked Immunosorbent assay,ELISA)对样本中AFB1含量进行检测,并验证该方法的线性,重现性、回收率。结果表明,AFB1在2.5~75μg/kg范围内线性关系较好,线性回归方程为:y=-0.507x+0.413,相关系数R2=0.999。重现性实验所得的相对标准偏差(RSD%)为1.56%,不同加标实验的加标回收率均大于97%,相对标准偏差(RSD%)分别为2.07%、3.73%、4.85%。本方法重现性好,准确度高,适用于高效的定量检测花生样本中的AFB1含量。 展开更多
关键词 酶联免疫法 黄曲霉毒素B1 花生样品
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高效液相色谱-串联质谱法测定花生中的黄曲霉毒素B1
6
作者 王一晨 刘奇 +3 位作者 吴学贵 黄肖凤 王芳姑 李小梅 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第7期2059-2063,共5页
目的建立高效液相色谱-串联质谱法测定花生中黄曲霉毒素B1含量的分析方法。方法样品经乙腈水溶液提取,三氯甲烷反提取后,正己烷净化,以水(D)和乙腈(A)作为流动相进行梯度洗脱,质谱采用多离子检测模式对黄曲霉毒素B1的定量离子和定性离... 目的建立高效液相色谱-串联质谱法测定花生中黄曲霉毒素B1含量的分析方法。方法样品经乙腈水溶液提取,三氯甲烷反提取后,正己烷净化,以水(D)和乙腈(A)作为流动相进行梯度洗脱,质谱采用多离子检测模式对黄曲霉毒素B1的定量离子和定性离子进行检测。结果在0.5~10 ng/mL范围内线性良好(线性方程:Y=8.57×103X+312, r>0.999),黄曲霉毒素B1在1、5、10μg/kg 3个水平上进行加标回收试验,平均回收率为93.2%~100.2%,相对标准偏差为2.8%~6.9%,方法检出限为0.1μg/kg。结论该方法经济、快速、准确,适合测定花生中黄曲霉毒素B1的含量。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱法 黄曲霉毒素B1 花生
生物法降解黄曲霉毒素B1的机理研究进展 预览
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作者 黄巍 殷海成 王乐 《中国饲料》 北大核心 2019年第1期7-11,15共6页
黄曲霉毒素B1是由寄生曲霉、黄曲霉等真菌产生的次级代谢物,具有极强的致畸、致癌等毒性,不仅对人和动物健康构成严重的威胁,而且也给食品和饲料工业带来巨大的经济损失。如何消除黄曲霉毒素B1的污染依然是目前学者迫切要解决的重点问... 黄曲霉毒素B1是由寄生曲霉、黄曲霉等真菌产生的次级代谢物,具有极强的致畸、致癌等毒性,不仅对人和动物健康构成严重的威胁,而且也给食品和饲料工业带来巨大的经济损失。如何消除黄曲霉毒素B1的污染依然是目前学者迫切要解决的重点问题。相比理化法消除黄曲霉毒素B1的缺点和局限,生物法降解具有安全、高效和绿色环保等优点,使其成为更具有潜力的解毒方法。本文主要对生物吸附作用和生物酶解作用降解黄曲霉毒素B1的机理及降解产物的结构分析进行了论述。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 微生物 吸附作用 酶解作用
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酶联免疫法检测混合植物油中黄曲霉毒素B1含量
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作者 王重阳 吴小慧 +4 位作者 张喆昌 魏鸿媛 金珠 汤晶晶 王丹 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第4期881-885,共5页
目的建立酶联免疫法测定混合植物油中黄曲霉毒素B1含量的分析方法。方法采用直接竞争酶联免疫吸附法对样品进行测定。样品经甲醇溶液提取,提取的抗原及黄曲霉毒素B1标记物与微孔板上的黄曲霉毒素B1特异性单克隆抗体竞争结合,洗涤除去未... 目的建立酶联免疫法测定混合植物油中黄曲霉毒素B1含量的分析方法。方法采用直接竞争酶联免疫吸附法对样品进行测定。样品经甲醇溶液提取,提取的抗原及黄曲霉毒素B1标记物与微孔板上的黄曲霉毒素B1特异性单克隆抗体竞争结合,洗涤除去未结合杂质。将底物加入孵育,产生蓝色产物,加入终止液终止反应蓝色产物变成黄色产物,450nm处测量吸光度。结果本方法在2h内完成混合植物油中黄曲霉毒素B1含量的测定。黄曲霉毒素B1的加标浓度在1.0~20.0μg/kg之间时的回收率为76.5%~120.2%,方法定量限为1.00μg/kg。结论该方法快速、准确、灵敏,适合测定混合植物油中黄曲霉毒素B1。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 直接竞争酶联免疫吸附法 混合植物油
核酸适体结构转换荧光法检测黄曲霉毒素B1 预览
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作者 班珺 谢岩黎 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期118-124,共7页
基于黄曲霉毒素B1(AflatoxinB1,AFB1)与互补链竞争结合核酸适体的位点使荧光恢复,建立了核酸适体结构转换焚光法检测AFB1。以PBS为工作液,200nmol/L核酸适体与200nmol/L猝灭链反应30min后加入AFB1孵育1h,利用荧光分光光度计检测到的荧... 基于黄曲霉毒素B1(AflatoxinB1,AFB1)与互补链竞争结合核酸适体的位点使荧光恢复,建立了核酸适体结构转换焚光法检测AFB1。以PBS为工作液,200nmol/L核酸适体与200nmol/L猝灭链反应30min后加入AFB1孵育1h,利用荧光分光光度计检测到的荧光恢复程度对AFB1进行定量检测,可获得该方法的最佳效果。在优化条件下,AFB1检测浓度范围为1~300ng/mL,检出限为0.8ng/mL。对该检测方法的特异性进行考察,结果表明该法具有良好的特异性。对花生、玉米实际样品进行检测,回收率在81.1%~108.3%之间。 展开更多
关键词 核酸适体 黄曲霉毒素B1 荧光检测
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黄曲霉毒素B1免疫快速检测技术研究进展及其在中药中的应用
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作者 单利楠 豆小文 +3 位作者 刘好 段亚萍 杨世海 杨美华 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期194-209,共16页
黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)是由产毒真菌(如黄曲霉和寄生霉菌)产生的有毒次级代谢产物,具有致癌、致畸、致突变作用。研究表明AFB1广泛存在于农作物、食品、饲料甚至中药中,对人类健康造成了严重的安全隐患。建立一系列适用于不... 黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)是由产毒真菌(如黄曲霉和寄生霉菌)产生的有毒次级代谢产物,具有致癌、致畸、致突变作用。研究表明AFB1广泛存在于农作物、食品、饲料甚至中药中,对人类健康造成了严重的安全隐患。建立一系列适用于不同基质中AFB1的多种快速检测技术,为预防和控制食品与药品的安全、保障人类健康方面具有重要意义。随着小分子免疫技术的不断提高,近年来各种检测形式的AFB1免疫快速技术被开发利用到现场快速检测领域,该文系统综述了我国现行有效的AFB1检测相关标准及近年来一些地区和国家等对中药材中黄曲霉毒素的限量标准情况,这些限量标准主要针对食品、饲料及一些易污染中药材中的黄曲霉毒素,而研究表明除了限量标准进行规定的中药材品种外也存在一些药用植物及其产品也有被黄曲霉毒素污染的情况。并对AFB1抗原抗体制备技术,以及基于抗原抗体特异性识别功能的快速检测方法包括酶联免疫吸附法、亲和色谱法、荧光免疫法、化学发光免疫法和新型免疫传感器法的开发及应用进行了归纳总结与对比。以期为中药规范化种植、中药集散贸易市场、药店医院、中药质量监管等方面形成快速、准确、灵敏的检测技术标准提供参考,确保中药的质量安全。 展开更多
关键词 中药 黄曲霉毒素B1 抗体 抗原 免疫技术 快速检测
超高压辅助酶法脱除黄曲霉毒素B 1工艺对米糠多肽品质的影响 预览
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作者 林奕云 林耀盛 +3 位作者 郑家概 林晨 付强 刘学铭 《食品科学技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期86-92,110共8页
研究了超高压辅助酶法脱除黄曲霉毒素B1优化工艺对米糠多肽品质的影响。研究表明,在超高压300MPa条件下,随着超高压处理时间(0、1、3、5、7、9min)的延长,超高压辅助酶法制备无毒米糠多肽的多肽得率、水解度、溶解性、起泡稳定性、乳化... 研究了超高压辅助酶法脱除黄曲霉毒素B1优化工艺对米糠多肽品质的影响。研究表明,在超高压300MPa条件下,随着超高压处理时间(0、1、3、5、7、9min)的延长,超高压辅助酶法制备无毒米糠多肽的多肽得率、水解度、溶解性、起泡稳定性、乳化性和乳化稳定性先提高后下降,起泡性和持油性显著提高,而持水性呈下降趋势。因此,该工艺不仅能确保米糠多肽产品安全无毒,还可提高米糠多肽的品质。 展开更多
关键词 米糠多肽 超高压处理 酶法水解 黄曲霉毒素B1 脱除 品质
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表没食子儿茶素没食子酸酯对黄曲霉毒素B1致肝细胞氧化损伤的保护作用 预览
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作者 黄丰 肖德强 +4 位作者 高伟 崔秀 邓志杰 赵静芳 鲁力 《广西医科大学学报》 CAS 2019年第5期696-700,共5页
目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对黄曲霉毒素B1(AFB1)致人正常肝细胞(HL7702细胞)氧化损伤的影响。方法:将HL7702细胞分为正常对照组、溶剂对照组(0.3%DMSO)、AFB1染毒组和低、中、高剂量EGCG组(5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL)... 目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对黄曲霉毒素B1(AFB1)致人正常肝细胞(HL7702细胞)氧化损伤的影响。方法:将HL7702细胞分为正常对照组、溶剂对照组(0.3%DMSO)、AFB1染毒组和低、中、高剂量EGCG组(5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL)。AFB1染毒组用60μg/mLAFB1作用细胞24h,建立肝HL7702细胞氧化应激模型。低、中、高剂量EGCG组预先用相应浓度EGCG处理细胞1h,再加入60μg/mLAFB1作用24h。用CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS),并检测细胞培养上清液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)以及受损细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。结果:与对照组相比,AFB1染毒组ALT、AST、MDA及ROS水平明显升高,肝细胞存活率、SOD酶活性明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);与AFB1染毒组相比,EGCG处理可使ALT、AST、MDA及ROS水平明显降低,肝细胞存活率、SOD活性明显升高(均P<0.05)。结论:EGCG可明显减轻AFB1诱导的肝细胞损伤,其作用机制可能与抗氧化损伤有关。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 黄曲霉毒素B1 HL7702细胞 氧化应激
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QuEChERS净化-UPLC-MS/MS测定小油坊土榨花生油中黄曲霉毒素B1方法的研究 预览
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作者 梁剑锋 李亚 梁峰 《粮食与饲料工业》 CAS 2019年第5期55-60,共6页
建立了QuEChERs净化UPLC-MS/MS测定小油坊土榨花生油中黄曲霉毒素B1实验室分析方法。样品经过1%甲酸酸化的乙腈溶液提取后,采用QuEChERs净化(300 mg MgSO4+100 mg HC-C18+50 mg PSA+0 mg多壁碳纳米管),UPLC-MS/MS多反应监测正离子模式测... 建立了QuEChERs净化UPLC-MS/MS测定小油坊土榨花生油中黄曲霉毒素B1实验室分析方法。样品经过1%甲酸酸化的乙腈溶液提取后,采用QuEChERs净化(300 mg MgSO4+100 mg HC-C18+50 mg PSA+0 mg多壁碳纳米管),UPLC-MS/MS多反应监测正离子模式测定,外标法定量。黄曲霉毒素B1在2.88~23.04 ng/ml内呈线性关系,相关系数大于0.99,低、中、高三个浓度加标回收率在90.8%~92.5%,相对标准偏差(RSD)为2.5%~4.9%,方法检出限0.03μg/kg。该方法具有简单、快速、灵敏、准确、精密度好、回收高、检出限低等特点,适用于土榨花生油等复杂基质、高风险样品中黄曲霉毒素B1项目的日常检测。 展开更多
关键词 UPLC-MS/MS QUECHERS 黄曲霉毒素B1 土榨花生油
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液相色谱-荧光检测法快速检测饲料中黄曲霉毒素B1 预览
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作者 刘成模 杨曦 +1 位作者 陈小燕 黄智成 《粮食与饲料工业》 CAS 2019年第5期61-64,共4页
饲料样品经过乙腈-水溶液(乙腈∶水=84∶16)提取,与三氟乙酸衍生后经高效液相色谱-荧光检测法测定。结果表明,饲料样品中黄曲霉毒素B1回收率大于75%,样品检出限和定量限分别为2.0μg/kg(S/N=3)和6.7μg/kg(S/N=10)。
关键词 饲料 高效液相色谱 黄曲霉毒素B1 快速检测
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碱液处理花生脱除花生油中黄曲霉毒素B1的研究 预览
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作者 杨威 董志文 +3 位作者 雷芬芬 胡传荣 何东平 罗质 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期90-93,共4页
用碱液处理花生,检测压榨花生油中的黄曲霉毒素B1(AFB1)的含量及花生油质量指标。研究表明:碱液处理花生对脱除花生油中黄曲霉毒素B1具有良好的效果。采用碱液pH 13. 40、碱液加入量10%的条件处理四级花生15 min,压榨花生油中AFB1脱除率... 用碱液处理花生,检测压榨花生油中的黄曲霉毒素B1(AFB1)的含量及花生油质量指标。研究表明:碱液处理花生对脱除花生油中黄曲霉毒素B1具有良好的效果。采用碱液pH 13. 40、碱液加入量10%的条件处理四级花生15 min,压榨花生油中AFB1脱除率达93. 3%,采用p H 13. 44、碱液加入量7. 5%的条件处理三级花生25 min,压榨花生油中AFB1脱除率达98. 0%。碱液处理对花生油的酸价有一定影响但在标准规定范围内,对过氧化值、碘值及脂肪酸组成无确定影响关系。 展开更多
关键词 花生 碱液处理 花生油 黄曲霉毒素B1 质量指标
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基于高光谱特征选择的霉变玉米黄曲霉毒素B1的检测方法 预览
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作者 殷勇 戴松松 于慧春 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期305-312,共8页
为研究高光谱技术检测霉变玉米中黄曲霉毒素B1含量的可行性,选择5种不同霉变程度的玉米为试验材料,利用高光谱图像采集系统获得了250个霉变玉米样本的高光谱数据,并进行多元散射校正(MSC)预处理;运用偏最小二乘回归(PLSR)系数来选择特... 为研究高光谱技术检测霉变玉米中黄曲霉毒素B1含量的可行性,选择5种不同霉变程度的玉米为试验材料,利用高光谱图像采集系统获得了250个霉变玉米样本的高光谱数据,并进行多元散射校正(MSC)预处理;运用偏最小二乘回归(PLSR)系数来选择特征波长,筛选出7个特征波长,然后利用Fisher判别分析(FDA)分别对全波长和特征波长下霉变玉米进行鉴别分析。结果表明,5组样本在全光谱波段下的FDA鉴别正确率在85%~88%之间,而在特征光谱下的FDA鉴别正确率均在98%以上,说明特征波长能较好地表征不同霉变等级的玉米。神经网络模型优于PLSR模型,其预测集相关系数和均方根误差分别为0.999 9、0.180 9。因此,可认为利用高光谱技术来检测不同霉变程度玉米中的黄曲霉毒素B1含量是可行的。本研究结果为高光谱鉴别其他农产品提供了重要参考。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 特征波长 FISHER判别分析 偏最小二乘回归 BP神经网络
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黄曲霉毒素B1单克隆抗体的制备及基于该抗体的黄曲霉毒素B1免疫学检测方法的建立 预览
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作者 姚静静 胡骁飞 +6 位作者 韩俊岭 徐帆 滕蔓 邢云瑞 孙亚宁 邓瑞广 张改平 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期1405-1414,共10页
为了快速准确检测粮食与饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量,本试验制备了具有高灵敏度的AFB1单克隆抗体,并将其应用于AFB1间接竞争酶联免疫吸附测定(ELISA)方法的建立。采用碳二亚胺(EDC)法制备AFB1完全抗原[AFB1-牛血清白蛋白(BSA)和AFB1-... 为了快速准确检测粮食与饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量,本试验制备了具有高灵敏度的AFB1单克隆抗体,并将其应用于AFB1间接竞争酶联免疫吸附测定(ELISA)方法的建立。采用碳二亚胺(EDC)法制备AFB1完全抗原[AFB1-牛血清白蛋白(BSA)和AFB1-鸡卵白蛋白(OVA)],并免疫BALB/c小鼠。经细胞融合,筛选出能够分泌高灵敏度AFB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。采用体内诱生腹水法,大量制备AFB1单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。基于制备的AFB1单克隆抗体,建立AFB1间接竞争ELISA检测方法。结果显示:通过筛选,获得稳定产生抗体的杂交瘤细胞株9H1F5,经间接ELISA方法测定,获得的AFB1单克隆抗体的效价高达5.12×105,亲和力常数(Ka)=6.72×107L/mol,抗体亚型为免疫球蛋白G2(IgG2)。采用间接竞争ELISA方法测得AFB1的半数抑制浓度(IC50)为0. 232 ng/mL,检测范围为0.014~1.920 ng/mL,最低检测限为0.014 ng/mL。同时,该AFB1单克隆抗体与黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)、黄曲霉毒素G2(AFG2)、黄曲霉毒素M1(AFM1)的交叉反应率分别为40.21%、33.19%、31.96%、4.40%,与其他霉菌毒素无交叉反应。由上述结果可知,本试验成功制备了灵敏度高、特异性强的AFB1单克隆抗体,并基于该抗体建立了检测AFB1的间接竞争ELISA方法,为粮食与饲料中AFB1快速免疫学检测奠定了基础。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 细胞融合 单克隆抗体 ELISA
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宏基因组学揭示AFB1对牦牛瘤胃微生物多样性及CAZy谱影响 预览
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作者 安雅静 文勇立 +6 位作者 赵佳琦 陈智华 艾鷖 李子谦 齐沛森 李强 扎升 《家畜生态学报》 北大核心 2019年第2期13-20,共8页
采用宏基因组学方法探讨黄曲霉毒素B1(AFB1)对牦牛瘤胃微生物多样性及碳水化合物酶类(CAZy)功能谱的影响。试验设E1、E2两个试验组和对照组C,日粮中添加AFB1量分别为20μg·kg^-1、60μg·kg^-1和0。采集瘤胃液,提取DNA,进行宏... 采用宏基因组学方法探讨黄曲霉毒素B1(AFB1)对牦牛瘤胃微生物多样性及碳水化合物酶类(CAZy)功能谱的影响。试验设E1、E2两个试验组和对照组C,日粮中添加AFB1量分别为20μg·kg^-1、60μg·kg^-1和0。采集瘤胃液,提取DNA,进行宏基因组分析。结果表明,AFB1降低拟杆菌门及厚壁菌门的丰度,在属水平上较高水平的AFB1对普雷沃氏菌具有抑制作用。牦牛瘤胃中降解植物纤维素主要的CAZy是糖苷水解酶(GH)和糖基转移酶(GT)。AFB1对CAZy中6类酶以及3种纤维小体构成组分均产生影响,且高水平影响更大。研究揭示,AFB1降低瘤胃细菌多样性,影响CAZy功能。研究结果有利于探讨AFB1影响反刍动物瘤胃微生态的机制,为饲料安全使用及牦牛健康养殖和产品安全生产提供参考。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 牦牛 瘤胃 微生物多样性 宏基因组学 碳水化合物酶类
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广东小作坊生产花生油中黄曲霉毒素B1膳食暴露及风险评估 预览
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作者 宋美英 乐丽华 +2 位作者 罗钰珊 谢超炀 陈泽锋 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期96-101,共6页
对广东居民通过小作坊花生油对黄曲霉毒素B1的膳食暴露及其产生的健康风险进行评价。采用点评估模型对广东不同年龄人群通过花生油对黄曲霉毒素B1的膳食暴露情况进行评估,按照联合国粮农组织和世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会推... 对广东居民通过小作坊花生油对黄曲霉毒素B1的膳食暴露及其产生的健康风险进行评价。采用点评估模型对广东不同年龄人群通过花生油对黄曲霉毒素B1的膳食暴露情况进行评估,按照联合国粮农组织和世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会推荐的方法对黄曲霉毒素B1引发的肝癌风险进行评价。结果表明:2017年广东地区小作坊花生油黄曲霉毒素B1超标率11. 8%,检出率56. 9%;各年龄组高消费水平暴露量规律为7~14岁> 15~50岁> 50岁以上> 2~6岁,15~50岁、50岁以上、2~6岁3个年龄段女性高消费水平暴露量大于男性;高消费人群由于花生油中黄曲霉毒素B1的膳食暴露引发肝癌的风险为7~14岁男性少年儿童危险度最大,高消费水平肝癌贡献率最高,达28. 9%。高消费人群花生油中黄曲霉毒素B1引发肝癌的风险相对较高,应对全省小作坊花生油黄曲霉毒素污染予以足够的重视。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 点评估 膳食暴露 风险
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磁性氧化石墨烯固相萃取酶联免疫吸附法测定芝麻油中黄曲霉毒素B1含量 预览
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作者 葛正法 汪学德 纪俊敏 《粮食与油脂》 北大核心 2019年第3期76-79,共4页
通过共沉淀法合成磁性氧化石墨烯作为磁固相萃取材料,结合酶联免疫吸附法(ELISA)建立测定芝麻油中黄曲霉毒素B1含量的新方法。试验考察了萃取条件和洗脱条件等参数对黄曲霉毒素B1吸附效率的影响,在最优的试验条件下,检出灵敏度为0.05μg... 通过共沉淀法合成磁性氧化石墨烯作为磁固相萃取材料,结合酶联免疫吸附法(ELISA)建立测定芝麻油中黄曲霉毒素B1含量的新方法。试验考察了萃取条件和洗脱条件等参数对黄曲霉毒素B1吸附效率的影响,在最优的试验条件下,检出灵敏度为0.05μg/kg,日内和日间相对标准偏差分别为3.75%~5.14%和5.26%~7.15%,实际样品加标回收率在80.6%~92.3%。结果表明,该方法稳定性好、测定准确,适用于芝麻油中黄曲霉毒素B1含量的检测。 展开更多
关键词 磁性氧化石墨烯 磁固相萃取 黄曲霉毒素B1 酶联免疫吸附法
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