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豚鼠鼻黏膜成纤维细胞的分离、培养及鉴定 预览
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作者 庄翔莉 吴博 +3 位作者 陈莹莹 甘思雨 林青 郑健 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第15期2369-2372,共4页
背景:鼻黏膜成纤维细胞可通过分泌多种细胞因子和趋化因子,参与多种鼻部疾病的炎症反应和损伤修复;豚鼠是最适合用于变态反应性疾病研究的实验动物之一。目的:探讨豚鼠鼻黏膜成纤维细胞分离、培养、纯化和鉴定的有效方法。方法:胶原酶... 背景:鼻黏膜成纤维细胞可通过分泌多种细胞因子和趋化因子,参与多种鼻部疾病的炎症反应和损伤修复;豚鼠是最适合用于变态反应性疾病研究的实验动物之一。目的:探讨豚鼠鼻黏膜成纤维细胞分离、培养、纯化和鉴定的有效方法。方法:胶原酶消化法分离豚鼠鼻黏膜成纤维细胞,经差速贴壁法纯化后,采用倒置相差显微镜进行形态学观察,波形蛋白免疫细胞化学法鉴定成纤维细胞,并通过MTT检测法绘制细胞生长曲线。结果与结论:①倒置相差显微镜下可见原代鼻黏膜成纤维细胞中有不同形态细胞交杂生长,以类梭形和扁平状细胞为主,细胞成团散落分布;纯化后的成纤维细胞形态均一,多呈长梭形,分布较均匀,呈鱼群状或放射状排列;②免疫细胞化学染色显示,成纤维细胞波形蛋白表达呈阳性;③细胞生长曲线大致呈“S”形。④结果表明,所分离培养的细胞具有典型的成纤维细胞生物学特征。 展开更多
关键词 纤维细胞 豚鼠 鼻黏膜纤维细胞 原代细胞培养 鼻黏膜 波形蛋白 纤维细胞波形蛋白 组织工程
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醒鼻凝胶滴鼻剂对变应性鼻炎豚鼠鼻黏膜成纤维细胞Fyn-STAT5信号通路的影响
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作者 庄翔莉 吴博 +2 位作者 邱彩霞 艾斯 郑健 《中华中医药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期1794-1799,共6页
目的:通过观察醒鼻凝胶滴鼻剂干预变应性鼻炎(AR)豚鼠鼻黏膜成纤维细胞对Fyn-STAT5信号通路的影响,进一步阐明醒鼻凝胶剂治疗AR可能的作用机制。方法:体外分离培养AR豚鼠鼻黏膜成纤维细胞并进行鉴定;将成纤维细胞分为正常组、模型组... 目的:通过观察醒鼻凝胶滴鼻剂干预变应性鼻炎(AR)豚鼠鼻黏膜成纤维细胞对Fyn-STAT5信号通路的影响,进一步阐明醒鼻凝胶剂治疗AR可能的作用机制。方法:体外分离培养AR豚鼠鼻黏膜成纤维细胞并进行鉴定;将成纤维细胞分为正常组、模型组、TGF-β1组、醒鼻剂组和雷诺考特组,分别检测各组成纤维细胞中Fyn-STAT5信号通路及相关因子的基因和蛋白变化。结果:细胞鉴定结果显示,F3代成纤维细胞波形蛋白表达呈阳性。MTT检测结果提示,经25ng/m L TGF-β1干预24h后,细胞活力增长最明显。Real-time PCR和Western blot检测结果显示,模型组中Fyn m RNA及蛋白和SCF m RNA高表达(P〈0.01),IL-10 m RNA和STAT5蛋白呈现低表达(P〈0.01);与模型组比较,3个给药组干预12、24h后,Fyn m RNA及蛋白、SCF m RNA的表达均显著降低,IL-10 m RNA、STAT5蛋白显著升高(P〈0.01,P〈0.05),干预48h后,酸鼻剂组及雷诺考特组IL-10 m RNA仍明显升高(P〈0.01)。结论:醒鼻凝胶滴鼻剂可能通过降低Fyn和SCF表达,同时上调STAT5和IL-10,从而抑制Fyn-STAT5信号传导通路,减轻AR成纤维细胞免疫反应。 展开更多
关键词 变应性 鼻黏膜纤维细胞 凝胶滴 Fyn-STAT5信号通路
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