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EBV感染与霍奇金淋巴瘤肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因及A20蛋白表达的相关性分析
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作者 徐玉秀 马东升 +1 位作者 王萌 杨静 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期91-95,共5页
目的:分析EB病毒(EBV)感染与霍奇金淋巴瘤肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因及其编码A20蛋白表达的相关性。方法:对本院收治的65例霍奇金淋巴瘤患者的临床资料与病理标本进行了回顾性分析。在肿瘤细胞丰富区制作组织芯片。通过免疫组织化学... 目的:分析EB病毒(EBV)感染与霍奇金淋巴瘤肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因及其编码A20蛋白表达的相关性。方法:对本院收治的65例霍奇金淋巴瘤患者的临床资料与病理标本进行了回顾性分析。在肿瘤细胞丰富区制作组织芯片。通过免疫组织化学染色法对EBV编码的潜伏膜蛋白1进行测定,并用原位杂交法对EBV编码的RNA进行测定以分析其感染状态。通过荧光原位杂交技术对肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因表达进行测定,并用免疫组织化学染色法对EBV编码的A20蛋白表达进行测定。将所获数据纳入SPSS23. 0版统计学软件进行数据处理。结果:潜伏膜蛋白1阳性率为26. 15%(17/65),EBV编码的RNA阳性率也为26. 15%(17/65),二者符合率为100%。65例患者中A20蛋白表达丢失18例(27. 69%),存在肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因纯合或杂合缺失14例(21. 54%)。仅1例出现A20丢失合并肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因纯合缺失。相关性分析结果发现,EBV感染阴性与A20蛋白表达丢失、肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因缺失并无显著关系(P> 0. 05)。结论:EBV阴性与阳性的霍奇金淋巴瘤患者中,均出现A20蛋白表达丢失、肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因缺失,而免疫组织化学染色法与荧光原位杂交技术的检测结果并非完全一致,究其原因可能与技术因素密切相关。 展开更多
关键词 霍奇金淋巴瘤 EB病毒 肿瘤坏死因子α诱导蛋白3 A20蛋白
锌指蛋白A20对移植相关的肝脏病理生理调节作用的研究进展
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作者 杨龙 张雅敏 沈中阳 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 2017年第9期573-575,共3页
锌指蛋白是含有通过结合Zn2+稳定的可以自我折叠形成“手指”结构的一类蛋白质。由于其可以选择性地结合特异的靶结构,使锌指蛋白在基因的表达调控、细胞分化、胚胎发育等生命过程中发挥重要作用。A20作为锌指蛋白家族成员之一是由Di... 锌指蛋白是含有通过结合Zn2+稳定的可以自我折叠形成“手指”结构的一类蛋白质。由于其可以选择性地结合特异的靶结构,使锌指蛋白在基因的表达调控、细胞分化、胚胎发育等生命过程中发挥重要作用。A20作为锌指蛋白家族成员之一是由Dixit等在1990年最早发现于人脐静脉内皮细胞的由790个氨基酸残基组成的蛋白质结构,其中羧基端的7个串联重复的Cysz/Cysz锌指环结构是A20蛋白的功能区。 展开更多
关键词 锌指蛋白A20 生理调节作用 肝脏病理 蛋白质结构 人脐静脉内皮细胞 移植 氨基酸残基 A20蛋白
THP-1细胞中A20蛋白对TLR1和TLR2诱导免疫反应影响的研究 预览 被引量:2
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作者 周李娜 胡锦跃 张平安 《临床和实验医学杂志》 2017年第9期862-866,共5页
目的研究A20蛋白与Toll样受体1(TLR1)和Toll样受体2(TLR2)信号通路产生炎症因子的关系,探讨A20蛋白在TLR1和TLR2信号通路中的分子机制,为细菌性感染疾病的抗炎和基因治疗提供基础理论依据。方法预先用Pam3CSK4处理的THP-1细胞,用Pam... 目的研究A20蛋白与Toll样受体1(TLR1)和Toll样受体2(TLR2)信号通路产生炎症因子的关系,探讨A20蛋白在TLR1和TLR2信号通路中的分子机制,为细菌性感染疾病的抗炎和基因治疗提供基础理论依据。方法预先用Pam3CSK4处理的THP-1细胞,用Pam3CSK4再刺激,分析Pam3CSK4预处理对Pam3CSK4诱导的细胞因子产生的影响;RT-PCR和Western blot检测Pam3CSK4处理后TLR1和TLR2及My D88的表达水平;采用siRNA转染抑制A20表达,验证A20在Pam3CSK4诱导免疫耐受中的作用。结果 Pam3CSK4预处理可下调Pam3CSK4再刺激所诱导的细胞因子表达水平,包括IL-1β、TNF-α及IL-8,同时Pam3csk4预处理下调Pam3csk4所诱导的JNK、p38及NF-κB的信号传导;另外Pam3CSK4显著上调A20的表达水平,且有剂量及时间依赖性;A20过表达细胞中,Pam3csk4诱导的促炎症细胞因子的表达被逆转。结论 A20是诱导Pam3csk4耐受的重要调节因子,对Pam3csk4诱导的炎症反应具有负调控作用。 展开更多
关键词 A20蛋白 TLR1和TLR2 免疫反应 免疫耐受
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过表达锌指蛋白A20可抑制肺泡巨噬细胞炎症反应 预览 被引量:2
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作者 朱晓丹 王颖 +4 位作者 毕晶 童琳 刘洁 宋元林 白春学 《中国临床医学》 2016年第6期715-719,共5页
目的:通过建立A20过表达肺泡巨噬细胞株,研究A20对肺泡巨噬细胞炎症反应的影响及调控机制。方法:构建携带A20基因的慢病毒载体,转染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383),筛选出稳定过表达A20基因的细胞株并行体外培养。向培养基中加入脂多糖(... 目的:通过建立A20过表达肺泡巨噬细胞株,研究A20对肺泡巨噬细胞炎症反应的影响及调控机制。方法:构建携带A20基因的慢病毒载体,转染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383),筛选出稳定过表达A20基因的细胞株并行体外培养。向培养基中加入脂多糖(LPS,1μg/mL)进行干预,并于刺激后0.5、1、2、4h收集上清液及细胞。ELISA法测定上清液中细胞因子(TNF-α、IL-1β)及核因子κB(NF-κB)活性。Western印迹方法检测A20蛋白及核内p65含量。实时荧光定量PCR法测定A20mRNA含量。结果:LPS刺激后,A20过表达组(A20组)及正常对照组(VEC组)A20蛋白及mRNA含量都升高,并于1h达高峰,之后逐渐下降;且A20组较VEC组A20水平明显升高(P〈0.05)。与VEC组相比,A20组培养上清液中细胞因子(TNF-α、IL-1β)水平明显降低(P〈0.05);NF-κB DNA结合活性及核内p65含量也降低(P〈0.05)。结论:A20能够抑制肺泡巨噬细胞NF-κB活性及TNF-α、IL-1β分泌,进而抑制肺泡巨噬细胞炎症反应活性。 展开更多
关键词 急性呼吸窘迫综合征 A20蛋白 肺泡 巨噬细胞 炎症反应
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脂质体包裹mA20及其突变体质粒转染对内毒素血症小鼠的治疗作用 预览 被引量:1
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作者 左云龙 吴丽娟 +2 位作者 匡凤梧 蒋建新 朱佩芳 《重庆医学》 CAS CSCD 2008年第13期 1434-1436,1441,共4页
目的研究脂质体包裹A20及其突变体mA20-ZnF4-7(mA20△)质粒对脂多糖(LPS)攻击所致内毒素血症小鼠的治疗作用。方法用LPS攻击小白鼠制备内毒素血症动物模型。随机分为;生理盐水对照组(NS组)、单纯内毒素组、空质粒组、脂质体包裹m... 目的研究脂质体包裹A20及其突变体mA20-ZnF4-7(mA20△)质粒对脂多糖(LPS)攻击所致内毒素血症小鼠的治疗作用。方法用LPS攻击小白鼠制备内毒素血症动物模型。随机分为;生理盐水对照组(NS组)、单纯内毒素组、空质粒组、脂质体包裹mA20质粒治疗组(L-mA20组)、脂质体包裹mA20△质粒治疗组(L-mA20△组)。以ELISA检测各组血浆TNF-α、IL-1β表达,并于12h时间点观察组织病理变化。结果(1)L-mA20组和L-mA20△组的TNF-α在各时间点表达(pg/mL)分别为:6h(304.696±6.087)、(304.985±6.291),12h(321.217±10.579)、(256.580±33.524),24h(307.594±11.181)、(280.348±11.698);与单纯内毒素组、空质粒组的TNF-α表达比较有显著性降低(P〈0.05)。(2)L-mA20组和L-mA20△组的IL-1β在各时间点表达(pg/mL)分别为:6h(256.989±3.921)、(263.655±5.645),12h(205.724±4.827)、(154.690±1.380),24h(165.724±7.772)、(101.816±3.259);依时间有显著性下降趋势;与单纯内毒素组、空质粒组的IL-1β表达比较有显著性降低(P〈0.05)。(3)病理观察结果显示:L-mA20组和L-mA20△组的肝、肺损伤均较单纯内毒素组、空质粒组轻;与NS相比,肝、肺损伤无明显差别。结论尾静脉注射被脂质体包裹mA20及其突变体mA20-ZnF4-7质粒对内毒素血症小鼠有相似的治疗作用,为临床应用结构更简单的A20蛋白提供了一定实验基础。 展开更多
关键词 A20蛋白 内毒素 转染 脂质体 基因治疗
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NF-κB activation and zinc finger protein A20 expression in mature dendritic cells derived from liver allografts undergoing acute rejection 预览 被引量:1
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作者 Ming-QingXu WeiWang +1 位作者 LanXue Lv-NanYan 《世界胃肠病学杂志:英文版(电子版)》 SCIE CAS CSCD 2003年第6期1296-1301,共6页
AIM: To investigate the role of NF-κB activation and zinc finger protein A20 expression in the regulation of maturation of dendritic cells (DCs) derived from liver allografts undergoing acute rejection. METHODS: Sixt... AIM: To investigate the role of NF-κB activation and zinc finger protein A20 expression in the regulation of maturation of dendritic cells (DCs) derived from liver allografts undergoing acute rejection. METHODS: Sixty donor male SD rats and sixty recipient male LEW rats weighing 220-300 g were randomly divided into whole liver transplantation group and partial liver transplantation group. Allogeneic (SD rat to LEW rat) whole and 50 % partial liver transplantation were performed. DCs from liver grafts 0 hour and 4 days after transplantation were isolated and propagated in the presence of GM-CSF in vitro. Morphological characteristics and phenotypical features of DCs propagated for 10 days were analyzed by electron microscopy and flow cytometry, respectively. NF-κB binding activity, IL-12p70 protein and zinc finger protein A20expression in these DCs were measured by EMSA and Western blotting, respectively. Histological grading of rejection was determined. RESULTS: Allogeneic whole liver grafts showed no signs of rejection on day 4 after the transplantation. In contrast,allogeneic partial liver grafts demonstrated moderate to severe rejection on day 4 after the transplantation. After propagation for 10 days in the presence of GM-CSF in vitro,DCs from allogeneic whole liver grafts exhibited features of immature DC with absence of CD40 surface expression,these DCs were found to exhibit detectable but very low level of NF-κB activity, IL-12 p70 protein and zinc finger protein A20 expression. Whereas, DCs from allogeneic partial liver graft 4 days after transplantation displayed features of mature DC, with high level of CD40 surface expression, and as a consequence, higher expression of IL-12p70 protein, higher activities of NF-κB and higher expression of zinc finger protein A20 compared with those of DCs from whole liver grafts (P<0.001). CONCLUSION: These results suggest that A20expression is up-regulated in response to NF-κB activation in mature DCs derived from allogeneic liver grafts undergoing acute rejecti 展开更多
关键词 同种异体肝移植术 急性排斥反应 核因子-ΚB 树突状细胞 A20蛋白
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胱抑素C对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮质紧密连接的影响
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作者 李伟祥 马凯旋 +4 位作者 王江南 张雨欣 苏亚 孙颢琳 陈萌 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期499-504,共6页
目的:观察胱抑素C(Cys C)干预对脑缺血再灌注损伤(IRI)后大鼠脑皮质毛细血管内皮细胞紧密连接超微结构的形态学变化并探讨其影响机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注损伤组(IRI)和胱抑素C(Cys C)干预组(根据药物... 目的:观察胱抑素C(Cys C)干预对脑缺血再灌注损伤(IRI)后大鼠脑皮质毛细血管内皮细胞紧密连接超微结构的形态学变化并探讨其影响机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注损伤组(IRI)和胱抑素C(Cys C)干预组(根据药物浓度不同分为低、中、高3个亚组分别为Cys C-L、Cys C-M和Cys C-H),采用改良线拴法建立大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注24 h模型。透射电镜下观察内皮细胞紧密连接超微结构的改变,Western Blot观察损伤侧脑皮质ZO-1蛋白表达变化,免疫荧光检测Hsp20的表达与分布。结果:与Sham组相比,IRI组电镜下可见毛细血管内皮细胞紧密连接开放,ZO-1蛋白表达明显减少(P <0. 01),Hsp20细胞数目增多。与IRI组比较,Cys C-L、Cys C-M组紧密连接开放程度明显减轻,ZO-1蛋白表达增加(P <0. 01),Hsp20阳性细胞数也显著增多。而Cys C-H组紧密连接结构消失,毛细血管内皮细胞间完全开放、松散;ZO-1蛋白表达明显降低,Hsp20阳性细胞数也明显减少。结论:Cys C在一定浓度下干预能减轻脑IRI对紧密连接超微结构的破坏,其机制可能与ZO-1蛋白表达增加及Hsp20阳性细胞个数增多有一定的关系。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 ZO-1蛋白 紧密连接 Hsp20蛋白 免疫荧光组织化学 大鼠
钩端螺旋体层粘连蛋白结合蛋白Lsa20的表达与功能分析 预览
8
作者 魏颖 袁盛凌 +5 位作者 姚雪晶 陶好霞 王令春 刘纯杰 田威 王艳春 《生物技术通讯》 CAS 2015年第4期481-484,共4页
目的:表达并纯化可溶性重组钩端螺旋体层粘连蛋白结合蛋白Lsa20,并对其与层粘连蛋白(LN)相互作用的生物特性进行分析。方法:优化合成Lsa20基因,连接到表达载体p ET28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,然后利用Ni... 目的:表达并纯化可溶性重组钩端螺旋体层粘连蛋白结合蛋白Lsa20,并对其与层粘连蛋白(LN)相互作用的生物特性进行分析。方法:优化合成Lsa20基因,连接到表达载体p ET28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,然后利用Ni-NTA亲和介质纯化目标蛋白,重组蛋白经超滤浓缩后,进行相关ELISA、流式细胞术、间接免疫荧光实验。结果:构建了重组蛋白表达菌株,目标蛋白呈可溶性表达,纯化后纯度达90%以上;ELISA证实重组Lsa20与LN有较强的亲和力,测得解离常数为(27.23±2.53)nmol/L;流式细胞术及间接免疫荧光实验结果表明重组Lsa20可黏附到COS-7细胞表面。结论:重组Lsa20在体外能够与层粘连蛋白结合,具有同天然蛋白类似的生物学特性。同时,以Lsa20与LN相互作用实验为例,建立了研究LN结合蛋白生物功能的基本方案,为后续鉴定和研究新的LN结合蛋白的作用规律及黏附机制奠定了良好的实验基础。 展开更多
关键词 Lsa20蛋白 原核表达 黏附 层粘连蛋白 相互作用
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扫描探针显微术用于B淋巴瘤细胞表面分子数量化与可视化研究
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作者 王淑蕙 赵磊 +4 位作者 李华飞 陈雅琳 王皓 郭亚军 李博华 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期270-273,共4页
本研究试图采用原子力显微术(AFM)和近场光学显微术(NS()M)对B淋巴瘤细胞的表面形态和超微结构进行了纳米级高分辨的成像研究,获得Rituximab抗体处理前后不同状态下的高清晰、对比度良好的NSOM和AFM的B淋巴瘤细胞图像,建立超高... 本研究试图采用原子力显微术(AFM)和近场光学显微术(NS()M)对B淋巴瘤细胞的表面形态和超微结构进行了纳米级高分辨的成像研究,获得Rituximab抗体处理前后不同状态下的高清晰、对比度良好的NSOM和AFM的B淋巴瘤细胞图像,建立超高分辨率显微镜观测B淋巴瘤细胞膜分子表面分布的方法。采用AFM和NSOM,对B淋巴瘤细胞的表面形态及光学性质进行了观测。结果显示建立了一种观测B淋巴瘤细胞超微细胞表面结构的方法,结合NSOM对Rituximab抗体处理前后CD20膜蛋白分子在细胞膜表面位置进行高分辨率的观测。AFM的结果表明Rituximab抗体处理以后B淋巴瘤细胞细胞膜的颗粒度明显增加,NSOM结果发现在Rituximab处理B淋巴瘤细胞前后,CD20膜蛋白分子仍然散在分布在细胞膜表面。 展开更多
关键词 原子力显微镜 近场光学显微镜 超微结构 B淋巴瘤 CD20蛋白 RITUXIMAB
骨肉瘤组织SRp20蛋白表达及其临床意义的初步研究 被引量:1
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作者 包俊杰 麦威 +2 位作者 于宏伟 郭扬 曲国蕃 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2012年第7期 518-521,共4页
目的:探讨骨肉瘤组组织SRp20蛋白表达情况及其临床意义。方法:应用MaxVision免疫组化方法检测64例骨肉瘤组织和18例骨软骨瘤组织SRp20蛋白表达情况,并分析与临床病理参数之间的关系。结果:骨肉瘤组织和骨软骨瘤组织中,SRp20胞核阳... 目的:探讨骨肉瘤组组织SRp20蛋白表达情况及其临床意义。方法:应用MaxVision免疫组化方法检测64例骨肉瘤组织和18例骨软骨瘤组织SRp20蛋白表达情况,并分析与临床病理参数之间的关系。结果:骨肉瘤组织和骨软骨瘤组织中,SRp20胞核阳性表达率分别为14.1%(9/64)和0(0/18),P:0.195;而骨肉瘤组织和骨软骨瘤组织中,SRp20细胞质阳性表达率分别为73.4%(47/64)和5.6%(1/18),P〈O.001。在骨肉瘤组织中,SRp20的细胞质阳性表达与骨肉瘤的恶性程度(P=0.002)、Enneking分期(P=0.001)以及5年生存率(P=0.023)相关。结论:SRp20细胞质表达与骨肉瘤患者的不良预后相关,可能成为预测患者预后情况的靶点。 展开更多
关键词 骨肉瘤 免疫组织化学 SRp20蛋白
牦牛病毒性腹泻病毒P20和P14蛋白基因的原核表达及其产物检测 预览 被引量:1
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作者 冯英阳 刘亚刚 +3 位作者 于吉锋 胡炳峰 王文伯 王盼盼 《西南民族大学学报:自然科学版》 CAS 2009年第3期493-498,共6页
以牦牛BVDV基因组DNA为模板,运用聚合酶链反应首次成功扩增出牦牛BVDVP20及P14基因,并将其插入到pET-28a原核表达载体,构建重组表达质粒pET-28a-P20和pET-28a-P14并分别转化至Rosetta(DE3)和BL21(DE3)宿主菌中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE... 以牦牛BVDV基因组DNA为模板,运用聚合酶链反应首次成功扩增出牦牛BVDVP20及P14基因,并将其插入到pET-28a原核表达载体,构建重组表达质粒pET-28a-P20和pET-28a-P14并分别转化至Rosetta(DE3)和BL21(DE3)宿主菌中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测,pET-28a-P20在宿主菌Rosetta(DE3)和BL21(DE3)中表达出约26KU的融合蛋白,pET-28a-P14表达出约20KU的融合蛋白,结果分析表明p20和p14蛋白在两个宿主中都获得了高效表达,表达出的蛋白大小与预期结果相符. 展开更多
关键词 牦牛 牛病毒性腹泻病毒 P20蛋白 P14蛋白 原核表达
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幽门螺杆菌Lpp20蛋白的生物信息学分析 预览 被引量:5
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作者 岳俊杰 李北平 +3 位作者 周围 高原 王月兰 梁龙 《生物技术通讯》 CAS 2009年第5期 651-653,共3页
目的:分析幽门螺杆菌Lpp20蛋白的主要化学和免疫学分子特征,为基因工程疫苗和诊断抗原的研究奠定基础。方法:根据Lpp20蛋白的氨基酸序列,应用生物信息学工具分析其蛋白序列,预测其信号肽、跨膜区、疏水性、二级结构、三级结构等性质... 目的:分析幽门螺杆菌Lpp20蛋白的主要化学和免疫学分子特征,为基因工程疫苗和诊断抗原的研究奠定基础。方法:根据Lpp20蛋白的氨基酸序列,应用生物信息学工具分析其蛋白序列,预测其信号肽、跨膜区、疏水性、二级结构、三级结构等性质。结果:Lpp20蛋白具有一段信号肽、脂蛋白信号肽酶切位点及脂盒模体,没有跨膜区,可能是一个外周膜蛋白;Lpp20蛋白的二级结构以α螺旋为主,其三级结构为一个致密的球状。结论:为基于幽门螺杆菌Lpp20蛋白的疫苗开发打下了基础。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 Lpp20蛋白 生物信息学 结构
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牛病毒性腹泻病毒P20及P14蛋白基因的表达及其产物的抗原性分析 预览 被引量:1
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作者 李慧昕 王君伟 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期 795-799,共5页
将牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)p20和p14基因分别亚克隆至原核表达载体pGEX-6p-1和pPROEX—HTb,并转化至相应的宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)pLysS和DH5α中表达。P20蛋白在2个宿主中都获得了高效表达;P14蛋白... 将牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)p20和p14基因分别亚克隆至原核表达载体pGEX-6p-1和pPROEX—HTb,并转化至相应的宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)pLysS和DH5α中表达。P20蛋白在2个宿主中都获得了高效表达;P14蛋白在BL21(DE3)pLysS中表达量较低,而在DH5α中未见表达。对P14蛋白诱导表达过程的监测表明,P14蛋白对大肠杆菌是一种毒性蛋白。用Western—blotting分析未能检测到两种蛋白的反应条带,推测这两种蛋白可能存在构象表位。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 P20蛋白 P14蛋白 原核表达 抗原性
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CPGL的基因结构及其与肝癌相关性的研究 预览 被引量:1
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作者 朱奕奕 覃文新 +4 位作者 李宏年 李锦军 周筱梅 张萍萍 万大方 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期 263-267,共5页
目的克隆carboxypeptidase of glutamate like(CPGL)全长cDNA,初步探讨它在肝癌发生发展中的作用.方法通过5'-RACE方法和RT-PCR验证,确定(CPGL)全长序列,根据其全长与人类基因组的比较进而确定基因的染色体定位和其外显子、内含子;... 目的克隆carboxypeptidase of glutamate like(CPGL)全长cDNA,初步探讨它在肝癌发生发展中的作用.方法通过5'-RACE方法和RT-PCR验证,确定(CPGL)全长序列,根据其全长与人类基因组的比较进而确定基因的染色体定位和其外显子、内含子;应用WestemBlot方法检测CPGL在肝癌组织和癌旁组织中的表达;细胞克隆形成及生长曲线检测CPGL对肝癌细胞生长的影响.结果CPGL全长2 616 bp,编码475个氨基酸的蛋白,染色体定位于18q22.3,蛋白产物定位于细胞质中,Western Bbt结果发现CPGL在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织.将CPGL转染肝癌细胞系SMMC7721发现其具有抑制生长的作用.同源比较发现CPGL含有M20蛋白酶家族的保守功能域.结论上述发现表明CPGL是具有潜在抑癌作用的基因. 展开更多
关键词 肝癌 CPGL基因 M20蛋白酶家族 抑癌作用
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抗人CD20单克隆抗体诱导Daudi细胞凋亡的功能研究 预览 被引量:2
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作者 李爱玲 黎燕 +4 位作者 孙瑛勋 于鸣 赵法伋 郭俊生 沈倍奋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期 292-295,305,共5页
目的观察由基因重组抗原制备的抗人CD20单克隆抗体 (CD20-McAb)1-28对B淋巴瘤细胞的促凋亡作用,并探讨其作用机理.方法利用流式细胞术测定所获1-28单抗对标准CD20-FITC单抗的竞争抑制作用及对胞内游离钙的影响;通过电镜观察其诱导Daudi... 目的观察由基因重组抗原制备的抗人CD20单克隆抗体 (CD20-McAb)1-28对B淋巴瘤细胞的促凋亡作用,并探讨其作用机理.方法利用流式细胞术测定所获1-28单抗对标准CD20-FITC单抗的竞争抑制作用及对胞内游离钙的影响;通过电镜观察其诱导Daudi细胞凋亡后形态上的改变,免疫印迹实验显示Daudi细胞凋亡后功能上的变化.结果 1-28能明显竞争标准CD20-FITC单抗与Daudi细胞表面CD20分子的结合.电镜结果证实了1-28能够促进Daudi细胞发生凋亡的结论;实验结果显示Daudi细胞与1-28作用后胞内游离钙浓度明显升高(P<0.05),细胞内Bcl-2蛋白和caspase酶原的表达量下降,而Bax蛋白和caspase酶原降解的活性产物表达增加.结论 1-28能竞争结合Daudi细胞表面的CD20分子并诱导其发生凋亡. 展开更多
关键词 CD20蛋白 单克隆抗体 DAUDI细胞 流式细胞术 淋巴瘤 McAb疗法
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人免疫缺陷病毒gag p20蛋白表达产物的纯化和鉴定 预览
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作者 吉昌华 苏成芝 《第四军医大学学报》 1992年第5期 321-325,共5页
将人免疫缺陷病毒(HIV)gag p20基因插入表达质粒pBV220,得到重组表达质粒pCY7.在大肠杆菌中高效表达了p20蛋白.Western blot结果显示,大肠杆菌表达的p20蛋白能被抗p17单克隆抗体识别.用脱氧胆酸裂解重组表达菌,得到上清和沉淀两部分,SDS... 将人免疫缺陷病毒(HIV)gag p20基因插入表达质粒pBV220,得到重组表达质粒pCY7.在大肠杆菌中高效表达了p20蛋白.Western blot结果显示,大肠杆菌表达的p20蛋白能被抗p17单克隆抗体识别.用脱氧胆酸裂解重组表达菌,得到上清和沉淀两部分,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,p20蛋白主要存在于沉淀中.经用盐溶液洗涤2次后,沉淀中p20蛋白的纯度达到27.4%.再用1mol/L脲溶液洗2次沉淀,p20蛋白纯度提高到58.1%.用6 mol/L脲溶液溶解沉淀,上肝素亲和层析柱,用6 mol/L脲洗脱,得到4个蛋白峰.p20蛋白主要存在于第3峰,凝胶电泳和扫描分析表明,p20蛋白纯度为84.2%。 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒 P20蛋白 表达产物
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SOX6在膀胱癌发生发展中的作用及相关机制 预览
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作者 付真睿 盛飞 +3 位作者 张昌文 常泰浩 陈仕洋 乔宝民 《天津医科大学学报》 2019年第4期373-377,共5页
目的:研究SOX6在膀胱癌中的表达特征,并探讨其在膀胱癌中发挥的生物学效应及相关机制。方法:利用免疫组化检测膀胱癌组织和癌旁组织中的SOX6的表达,蛋白印记(Western blot)及荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测SOX6在膀胱癌细胞(T24、BIU-87... 目的:研究SOX6在膀胱癌中的表达特征,并探讨其在膀胱癌中发挥的生物学效应及相关机制。方法:利用免疫组化检测膀胱癌组织和癌旁组织中的SOX6的表达,蛋白印记(Western blot)及荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测SOX6在膀胱癌细胞(T24、BIU-87、EJ、5637)和正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)中表达情况。通过SOX6高表达质粒和空载质粒分别转染膀胱癌细胞(EJ、5637),使用Transwell方法检测两组细胞的侵袭能力,采用划痕实验检测迁移能力,Western blot法检测E-cadherin和Vimentin的表达,使用CCK-8实验检测两组细胞的增殖能力,流式细胞术检测凋亡情况,并研究对膀胱癌细胞的蛋白酶体活性的影响。结果:与癌旁组织和正常膀胱上皮细胞相比,膀胱癌组织和细胞中SOX6的表达显著下降,在细胞EJ和5637尤其明显。与对照组对比,转染SOX6高表达质粒的EJ 和5637膀胱癌细胞的迁移、侵袭、增殖能力减弱,凋亡增加,上皮间质转化能力减弱,同时蛋白酶体活性显著降低。结论:SOX6在膀胱癌中作为抑癌基因发生作用,通过降低蛋白酶体活性来抑制膀胱癌的发展。 展开更多
关键词 膀胱癌 SOX6 上皮间质转化 20s蛋白酶体
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乙型肝炎病毒感染者血清干扰素诱导基因20kDa蛋白表达水平及其临床意义 预览
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作者 付囡 李红 张庆 《中华实验和临床感染病杂志(电子版)》 CAS 2019年第4期310-315,共6页
目的观察乙型肝炎病毒感染者血清干扰素诱导基因20 kDa蛋白(ISG20)蛋白表达变化及其临床意义.方法选取2017年3月至2018年6月汉中市中心医院收治的HBV感染所致慢性乙型肝炎患者(CHB组)67例、肝硬化患者(LC组)58例、肝癌患者(HCC组)54例... 目的观察乙型肝炎病毒感染者血清干扰素诱导基因20 kDa蛋白(ISG20)蛋白表达变化及其临床意义.方法选取2017年3月至2018年6月汉中市中心医院收治的HBV感染所致慢性乙型肝炎患者(CHB组)67例、肝硬化患者(LC组)58例、肝癌患者(HCC组)54例和同期体检47例健康者(对照组).采用酶联免疫吸附法检测各组研究对象血清ISG20蛋白水平.比较不同组患者血清ISG20水平差异.采用Spearman相关分析探讨血清ISG20水平与各组患者年龄、性别、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)、白蛋白、凝血酶原、甲胎蛋白(AFP)、HBV DNA的相关性.结果对照组患者血清ISG20水平为9.4(0.82~25.72)ng/ml,显著低于CHB组[18.6(1.87~56.32)ng/ml,Z=-1.567、P=0.034]和HCC组[28.2(3.09~81.42)ng/ml,Z=-1.854、P=0.021].HCC组患者血清ISG20水平显著高于CHB组(Z=-1.431、P=0.041)和LC组[12.9(2.81~77.54)ng/ml,Z=-1.987、P=0.029).HCC组不同Child-Pugh分级患者血清ISG20水平差异有统计学意义(H=6.976、P=0.031).HCC组患者血清ISG20水平与AST(r=0.323、P<0.001)、ALT(r=0.248、P=0.036)、TBil(r=0.221、P=0.031)、DBil(r=0.215、P=0.043)、AFP(r=0.176、P=0.044)呈正相关,与白蛋白呈负相关(r=-0.239、P=0.019).结论 HBV感染者,尤其是HBV感染所致HCC患者,血清ISG20水平升高.血清ISG20水平与HBV感染疾病进展和临床参数有一定的相关性. 展开更多
关键词 干扰素诱导基因20kDa蛋白 肝炎病毒 乙型 肝炎 乙型 慢性 肝硬化 肝癌
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蛋白酶体抑制剂MG132对大鼠胶原诱导性关节炎的干预机制 预览 被引量:1
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作者 宁丽常 蹇孝丽 +1 位作者 岳萍 蒋红梅 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期1361-1365,共5页
目的:探讨蛋白酶体抑制剂MG132对大鼠胶原诱导性关节炎(Collagen induced arthritis,CIA)的干预效果及作用机制。方法:48只雌性SD大鼠被随机分为空白对照组、CIA模型组、MG132干预模型组,每组16只CIA模型组和MG132干预模型组注射牛... 目的:探讨蛋白酶体抑制剂MG132对大鼠胶原诱导性关节炎(Collagen induced arthritis,CIA)的干预效果及作用机制。方法:48只雌性SD大鼠被随机分为空白对照组、CIA模型组、MG132干预模型组,每组16只CIA模型组和MG132干预模型组注射牛Ⅱ型胶原建立CIA模型大鼠,初次免疫后第21天,干预组大鼠以1 mg/kg的剂量每天1次,连续14天皮下注射MG132。建模起每周观察大鼠关节肿胀程度,计算关节炎指数(Arthritis index,AI),第42天后称重并处死大鼠;HE染色观察关节滑膜组织的病理改变;荧光底物测定法检测滑膜组织20S蛋白酶体的活性;蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠关节滑膜组织NF-κB/p65、IκBα蛋白的表达情况。结果:与CIA模型组比较,MG132干预模型组大鼠关节炎指数在注射MG132后一周明显降低(P〈0.05),关节滑膜组织未见明显增生,只伴有少量炎性细胞浸润。与空白对照组大鼠比较,CIA模型组大鼠关节滑膜组织20S蛋白酶体活性增高;与CIA模型组大鼠比较,MG132皮下注射干预后关节滑膜组织20S蛋白酶体活性降低(P〈0.05)。与空白对照组比较,CIA模型组大鼠关节滑膜组织高表达NF-κB/p65蛋白,其中胞核NF-κB/p65表达增高更为明显(P〈0.01),注射蛋白酶体抑制剂MG132干预后,其滑膜组织胞浆及胞核NF-κB/p65蛋白表达均显著减少(P〈0.01)。与空白对照组比较,CIA模型组大鼠关节滑膜低表达IκBα蛋白(P〈0.01),注射MG132干预后关节滑膜IκBα蛋白表达显著增多(P〈0.01)。结论:大鼠CIA体内实验显示,蛋白酶体抑制剂MG132经皮下注射可明显改善大鼠关节炎症状,其作用机制可能与MG132降低大鼠CIA关节滑膜组织20S蛋白酶体活性,减少其底物蛋白IκBα的表达,从而抑制NF-κB活性有关。 展开更多
关键词 胶原诱导性关节炎 蛋白酶体抑制剂MG132 20S蛋白酶体 NF-ΚB IκBα蛋白
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年龄相关性白内障晶状体前囊膜20s蛋白酶体α2亚基表达及意义
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作者 苏丹丹 郑久胜 刘银萍 《中国实用眼科杂志》 2017年第5期533-537,共5页
目的年龄相关性白内障(ARC)患者晶状体混浊程度及核的硬度与20s蛋白酶体α2亚基的蛋白表达水平及意义的关系。 方法于2015年3月至2016年7月在弋矶山医院眼科收集行超声乳化或小切口白内障摘除术的前囊膜120例(核性60例,皮质性60例... 目的年龄相关性白内障(ARC)患者晶状体混浊程度及核的硬度与20s蛋白酶体α2亚基的蛋白表达水平及意义的关系。 方法于2015年3月至2016年7月在弋矶山医院眼科收集行超声乳化或小切口白内障摘除术的前囊膜120例(核性60例,皮质性60例)。根据晶状体核的硬度及混浊程度进行分组,核性组分为A组:年轻核,B组:老核;皮质组分为A组:轻度混浊,B组:重度混浊。两种类型白内障中以A组为实验组,B组为对照组;并应用western-blot测定20s蛋白酶体α2亚基在两组ARC患者晶状体前囊膜中的表达水平。 结果与A组相比较,B组20s蛋白酶体α2亚基表达水平明显降低,核性(0.99±0,02)VS(0.58±0.08)差异有统计学意义(P〈0.01),皮质性(1.26±0,15)VS(0.89±0.09)差异有统计学意义(P〈0.05)。ARC患者晶状体混浊程度及核的硬度与20s蛋白酶体α2亚基含量呈显著负相关。 结论ARC患者前囊膜中20s蛋白酶体α2亚基的蛋白表达含量随晶状体混浊程度及核的硬度加深而降低。 展开更多
关键词 年龄相关性白内障 20s蛋白酶体α2亚基 泛素-蛋白酶体途径 前囊膜
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