期刊文献+
共找到46篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
84K杨PagC3H3基因表达模式分析 预览
1
作者 樊二勤 刘彩霞 +2 位作者 付鹏跃 杨传平 曲冠证 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期521-528,共8页
木质素作为木材的主要组成成分,通常是由3种单体聚合而成,在其生物合成过程中,共有10个酶家族参与负责将苯丙胺酸转化为单体木质素,其中C3H是在对-香豆酰辅酶A(p-coumaroyl CoA)到咖啡酰辅酶A(caffeoyl CoA)的羟基化过程和G/S单体形成... 木质素作为木材的主要组成成分,通常是由3种单体聚合而成,在其生物合成过程中,共有10个酶家族参与负责将苯丙胺酸转化为单体木质素,其中C3H是在对-香豆酰辅酶A(p-coumaroyl CoA)到咖啡酰辅酶A(caffeoyl CoA)的羟基化过程和G/S单体形成中的关键控制酶类,探究PagC3H3基因表达模式,对于进一步了解该基因功能具有重要意义。该研究通过定量PCR对PagC3H3基因的组织特异性表达进行分析;克隆得到了长度为2035bp的PagC3H3的启动子序列,预测含有多个顺式作用元件;同时,将获得的PagC3H3的启动子序列构建植物表达载体pBI121-PagC3H3pro::GUS,进行拟南芥瞬时转化,结果显示PagC3H3基因在84K杨的根、中部茎节和基部茎节中的表达量较高;瞬时转化拟南芥,GUS染色表明:在下胚轴和根中GUS活性较强,由此推测PagC3H3基因在木质素合成过程中发挥作用。 展开更多
关键词 84K杨 PagC3H3 启动子 拟南芥 瞬时转化 GUS检测
在线阅读 免费下载
芥菜型油菜BjuA09DFR基因及其启动子的克隆与转化和表达 预览
2
作者 袁玉辉 朱守晶 +4 位作者 邹杰 曾贤军 肖强 徐新仁 刘显军 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期24-31,共8页
该研究利用实时荧光定量(qRT-PCR)检测了BjuA09DFR基因的时空表达特异性,并通过克隆BjuA09DFR基因启动子片段,构建该基因的启动子GUS融合表达载体,利用农杆菌介导法将重组质粒转入野生型拟南芥,最后对拟南芥转基因材料不同发育时期的不... 该研究利用实时荧光定量(qRT-PCR)检测了BjuA09DFR基因的时空表达特异性,并通过克隆BjuA09DFR基因启动子片段,构建该基因的启动子GUS融合表达载体,利用农杆菌介导法将重组质粒转入野生型拟南芥,最后对拟南芥转基因材料不同发育时期的不同组织部位进行GUS组织化学染色,分析BjuA09DFR基因启动子的表达模式,为BjuA09DFR基因启动子功能的进一步研究提供理论依据。结果表明:(1)BjuA09DFR基因在芥菜型油菜的多个组织部位都有表达,尤其是在叶、花、角果和授粉后15d种子中表达量较高。(2)成功构建了BjuA09DFR基因启动子和GUS基因融合表达载体(pBjuA09DFR∷GUS),采用农杆菌介导法将重组质粒转入野生型拟南芥,经卡那霉素筛选和PCR检测抗性苗,获得转基因拟南芥阳性苗。(3)GUS组织化学分析结果显示,转基因拟南芥材料的GUS活性具有明显的时空特异性,在叶、花、角果和种子中的染色较深,具有很强的GUS活性。 展开更多
关键词 芥菜型油菜 4-二氢黄酮醇还原酶基因(DFR) 启动子 拟南芥转化 GUS组织化学染色
在线阅读 下载PDF
拟南芥多聚腺苷酸化因子CFIm25植物表达载体的构建及亚细胞定位分析
3
作者 刘玲 赵淑清 +1 位作者 李琴珍 马留银 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第8期2481-2487,共7页
CFIm25是前体m RNA多聚腺苷酸化的关键因子,在动物中研究较多,主要定位于细胞核和细胞质。而在植物中,目前的报道仅见于细胞核。为探究该因子在拟南芥中的功能及亚细胞定位,本研究首先对CFIm25做进化分析,结果显示,CFIm25的两个亚基亲... CFIm25是前体m RNA多聚腺苷酸化的关键因子,在动物中研究较多,主要定位于细胞核和细胞质。而在植物中,目前的报道仅见于细胞核。为探究该因子在拟南芥中的功能及亚细胞定位,本研究首先对CFIm25做进化分析,结果显示,CFIm25的两个亚基亲缘性极高,说明二者功能相似,另外,它们与AT5G51660的亲缘关系也很近,暗示三者可能参与相同的生物学事件。接着我们克隆了拟南芥(Arabidopsis thaliana)CFIm25的两个基因At4g25550和At4g29820,构建植物表达载体pCAMBIA3301-ACT2-CFIm25并进行烟草(Nicotiana tabacum)转化。荧光显微镜观察发现,CFIm25在烟草下表皮细胞的细胞质和细胞核均有表达,进一步分析发现CFIm25主要定位在细胞质中。说明拟南芥CFIm25不仅存在于细胞核,也存在于细胞质中,提示该因子可能在细胞质中发挥一定的生物学功能。最后,采用农杆菌介导的花序浸泡法将重组质粒转化拟南芥,经Western blot检测证实At4g25550/At4g29820已成功整合到部分植株的基因组中。综上,本研究为进一步探索拟南芥CFIm25的功能提供了理论依据。 展开更多
关键词 拟南芥 CFIm25 植物表达载体 瞬时转化 亚细胞定位
麻疯树JcFATA基因干涉表达载体构建和功能初步分析
4
作者 刘颖 刘国选 +7 位作者 黄川腾 杨亚利 唐家年 何春英 林诗婉 高美芳 吴东霖 陈建平 《农业生物技术学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期899-910,共12页
植物脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶A (fatty acyl-acyl carrier protein thioesterase, FATA)是脂肪酸积累过程中的关键酶,直接调控脂肪酸的含量与组成。目前有关麻疯树(Jatropha curcas)FATA基因(JcFATA)(GenBank登录号: EU267122.... 植物脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶A (fatty acyl-acyl carrier protein thioesterase, FATA)是脂肪酸积累过程中的关键酶,直接调控脂肪酸的含量与组成。目前有关麻疯树(Jatropha curcas)FATA基因(JcFATA)(GenBank登录号: EU267122.2)的功能研究还未见报道。本研究首先构建JcFATA基因RNA干涉(RNA interference, RNAi)表达载体,进行下调表达研究,以麻疯树叶片cDNA为模板,克隆出JcFATA基因正向片段FATA1(439 bp),然后将其连接到含内含子的干涉表达载体pYLRNAi.2-35S上,构建JcFATA基因RNAi表达载体pYLRNAi.2-35S-FATA1-FATA2;再通过电击法将其转入到根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105感受态细胞中,然后利用花序侵染法进行拟南芥(Arabidopsis thaliana)遗传转化,最后通过PCR检测和Southern blot验证。对转基因拟南芥植株进行了表型观察、表达量分析和脂肪酸的含量测定,结果显示,JcFATA基因干涉表达的转基因植物生长发育可能受到抑制。本研究结果可为进一步探讨JcFATA基因的功能及该基因在麻疯树遗传改良中的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 麻疯树 麻疯树脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶A基因(JcFATA) RNA干涉(RNAi) 拟南芥转化 脂肪酸
芍药PlFLS基因生物信息学分析及对拟南芥的遗传转化 预览
5
作者 史旻 孙静 陶俊 《华南农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期93-100,共8页
【目的】探讨类黄酮合成途径关键基因黄酮醇合酶基因(FLS)在芍药Paeonia lactiflora花色调控中的作用。【方法】克隆获得芍药PlFLS基因,对其进行生物信息学分析,构建PlFLS基因的过表达载体,通过农杆菌介导的Floral-dip法进行拟南芥遗传... 【目的】探讨类黄酮合成途径关键基因黄酮醇合酶基因(FLS)在芍药Paeonia lactiflora花色调控中的作用。【方法】克隆获得芍药PlFLS基因,对其进行生物信息学分析,构建PlFLS基因的过表达载体,通过农杆菌介导的Floral-dip法进行拟南芥遗传转化研究。【结果】生物信息学分析表明,芍药PlFLS基因氨基酸序列与茶树相似性较高,存在2个功能结构域,但不存在信号肽位点。芍药PlFLS蛋白预测模型揭示了其蛋白三级结构中存在1个2–氧代戊二酸配体,并与多条肽链相连接。试验成功获得了转PlFLS基因纯合拟南芥植株,GUS染色和PCR鉴定证实了目的基因已经整合转基因植株基因组,qRT-PCR分析显示,相对于野生型,PlFLS基因在遗传转化植株中显著高表达(P<0.05)。色谱分析结果显示,转PlFLS基因拟南芥植株叶片中花黄素含量显著增加(P<0.05)。【结论】成功构建转PlFLS基因拟南芥,并证明PlFLS基因可以显著影响拟南芥类黄酮合成途径。 展开更多
关键词 芍药 类黄酮 PlFLS基因 拟南芥 转基因植株 遗传转化
在线阅读 下载PDF
紫花苜蓿MsSAG113基因的克隆及对拟南芥的转化
6
作者 宿强 曾会明 +1 位作者 许立新 晁跃辉 《北方园艺》 北大核心 2018年第6期10-15,共6页
以紫花苜蓿为试材,采用RT-PCR技术克隆出一个与拟南芥SAG113同源的基因,利用无缝连接酶将其与3302Y连接构建过量表达的植物表达载体,通过花序浸泡法转化拟南芥获得具有草铵膦抗性的植株,以期为研究MsSAG113的功能提供参考依据。结果表明... 以紫花苜蓿为试材,采用RT-PCR技术克隆出一个与拟南芥SAG113同源的基因,利用无缝连接酶将其与3302Y连接构建过量表达的植物表达载体,通过花序浸泡法转化拟南芥获得具有草铵膦抗性的植株,以期为研究MsSAG113的功能提供参考依据。结果表明:MsSAG113基因编码区长849bp,编码283个氨基酸,PCR和RT-PCR检测显示成功获得了转MsSAG113基因拟南芥植株,初步证明在转基因拟南芥中外源SAG113基因能够转录表达。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 SAG113基因 拟南芥 转化
玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及其表达载体构建 预览
7
作者 曹路遥 周岩 +4 位作者 魏琦超 陈燕绘 陈亚东 蔺一帆 田瑞婷 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第5期16-23,共8页
为了克隆磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)的编码基因以用于表达载体的构建,本研究根据已公开的序列信息设计特异性引物,以玉米自交系ZD410的叶片DNA为模板,通过PCR技术成功克隆了pepc基因的全长序列。生物信息学分析发现,该基因完整OR... 为了克隆磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)的编码基因以用于表达载体的构建,本研究根据已公开的序列信息设计特异性引物,以玉米自交系ZD410的叶片DNA为模板,通过PCR技术成功克隆了pepc基因的全长序列。生物信息学分析发现,该基因完整ORF长度为2 913 bp,编码蛋白质分子质量约为108.179 ku,等电点(PI)为5.73;对其氨基酸序列进行同源性检索分析显示,该蛋白质与其他C4植物的PEPC蛋白具有极高的同源性;利用Gateway技术构建含pepc目的基因的表达载体,并通过农杆菌介导的花序浸染法将该基因导入野生型拟南芥。 展开更多
关键词 玉米 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因 基因克隆 载体构建 拟南芥 遗传转化
在线阅读 下载PDF
基于CRISPR/Cas9技术的月季TCP9基因转化拟南芥 被引量:2
8
作者 谢磊 王姗珊 +2 位作者 胡博文 熊兴耀 陈己任 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期928-933,共6页
为了探究月季TCP9基因对花器官发育调控的影响,应用CRISPR/Cas9技术构建植物双元表达载体,经检测结果显示,含月季TCP9基因的植物表达载体构建成功。以拟南芥为受体,采用农杆菌介导的花序侵染法对拟南芥进行转化,并获得转化植株,转化植... 为了探究月季TCP9基因对花器官发育调控的影响,应用CRISPR/Cas9技术构建植物双元表达载体,经检测结果显示,含月季TCP9基因的植物表达载体构建成功。以拟南芥为受体,采用农杆菌介导的花序侵染法对拟南芥进行转化,并获得转化植株,转化植株表型变异明显,花瓣增多,雄蕊数目减少,雌蕊柱头弯曲。表明月季TCP9基因对花器官发育形成有一定的调控能力。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 月季TCP9基因 拟南芥转化
黄肿树JcFATA基因组织表达特性及其启动子克隆与表达分析 被引量:2
9
作者 刘颖 杨亚利 +4 位作者 殷学贵 李林峰 朱宏波 陆建农 施玉珍 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期214-221,共8页
植物脂酰一酰基载体蛋白硫酯酶A(fatty acyl acyl carrier thioesterase,FATA)在脂肪酸合成代谢过程中具有重要的调控作用。目前有关黄肿树(Jatropha curcas)脂酰-ACP硫酯酶A基因(JcFATA)和其启动子的表达模式均还未见报道。为... 植物脂酰一酰基载体蛋白硫酯酶A(fatty acyl acyl carrier thioesterase,FATA)在脂肪酸合成代谢过程中具有重要的调控作用。目前有关黄肿树(Jatropha curcas)脂酰-ACP硫酯酶A基因(JcFATA)和其启动子的表达模式均还未见报道。为了研究如硝掰基因的表达模式,本研究利用半定量RT-PCR和实时荧光定量(qRT-PCR)检测了JcFATA基因的时空表达特异性。结果表明,如FATA基因在黄肿树的多个组织部位都有表达,尤其是在根、花和叶中表达量较高。为了分析JcFATA附基因启动子的组织表达模式,本研究将克隆的JcFATA基因启动子片段(PJcFATA)插入到双元表达载体pCAMBIA1300G中,成功构建了JcFATA基因启动子驱动的β-葡糖醛酸酶(β—glucuronidase,Gvs)基因融合表达载体(p1300G—PJcFATA-GUS);通过农杆菌(Agrobacteriumtum efaciens)介导的转化方法将重组质粒转入野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana),经过潮霉素筛选,最后对抗性苗进行PCR检测和GUS组织化学分析。PCR检测结果表明,JcFATA基因启动子片段已经成功整合到拟南芥基因组中(JGD登录号:Jcr4S00539)。对不同发育时期的拟南芥植株进行GUS组织化学染色分析,结果显示GUS活性具有明显的时空特异性,在根、花和叶中的染色较深,有很强的GUS活性。本研究结果为进一步研究JcFATA基因及其启动子功能提供了理论依据。 展开更多
关键词 黄肿树脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶A基因(JcFATA) 启动子 拟南芥转化 GUS组织化学染色
陆地棉GhVP1基因干扰载体的构建及拟南芥的遗传转化
10
作者 王帅 赵小洁 +6 位作者 王俊娟 王德龙 郭丽雪 阴祖军 樊伟莉 郭晓宁 叶武威 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2017年第7期2642-2646,共5页
为进一步探索陆地棉GhVP1基因的功能,本研究以本实验室克隆得到的陆地棉GhVP1基因为模板,经Blast比对,选择长度为347 bp片段作为干涉载体正义、反义序列。利用In-fusion方法构建干涉载体,挑选阳性克隆测序验证,成功构建pBI121-PH::VP... 为进一步探索陆地棉GhVP1基因的功能,本研究以本实验室克隆得到的陆地棉GhVP1基因为模板,经Blast比对,选择长度为347 bp片段作为干涉载体正义、反义序列。利用In-fusion方法构建干涉载体,挑选阳性克隆测序验证,成功构建pBI121-PH::VP1干涉载体。利用农杆菌介导法转化拟南芥,并进行PCR检测,成功获得9株转基因苗,并对获得的T3代转基因拟南芥进行耐盐性分析。结果显示,盐胁迫下,转干涉载体拟南芥的发芽率降低,根长变短,整个生育期的生长受到抑制。研究表明VP基因与植物的耐盐性相关,为进一步研究GhVP1基因及其作用机理提供了参考依据。 展开更多
关键词 GhVP1基因 RNA干扰 拟南芥转化 盐胁迫
CRISPR-Cas9植物基因编辑系统敲除拟南芥AG基因表达载体的构建 被引量:6
11
作者 王晓霞 苏哲 +1 位作者 岳彩云 樊金会 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期593-597,共5页
CRISPR-Cas系统是细菌和古细菌在进化过程中逐渐形成的一种适应性免疫系统,通过sg RNA介导对靶位点进行定位并利用Cas酶对核酸实现双链断裂(double-strand break,DSB)。CRISPR-Cas系统作为一种新兴的基因定点编辑技术逐渐成熟并在多个... CRISPR-Cas系统是细菌和古细菌在进化过程中逐渐形成的一种适应性免疫系统,通过sg RNA介导对靶位点进行定位并利用Cas酶对核酸实现双链断裂(double-strand break,DSB)。CRISPR-Cas系统作为一种新兴的基因定点编辑技术逐渐成熟并在多个植物中成功得到应用,以此技术对目的基因进行靶向的敲除或敲入。本实验以拟南芥AG基因为基础,构建CRISPR-Cas9植物基因编辑系统敲除拟南芥AG基因的表达载体,并利用农杆菌介导CRISPR-Cas9植物基因编辑系统敲除拟南芥AG基因,以获得高效的敲除拟南芥基因的遗传转化体系。 展开更多
关键词 CRISPR-Cas9 基因敲除 拟南芥 AG 遗传转化
一种基于农杆菌介导的拟南芥瞬时转化技术优化 预览 被引量:5
12
作者 郭勇 王玉成 王智博 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期41-44,83共5页
利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的拟南芥瞬时转化体系影响因素来确定最佳转化条件。以生长15日龄的拟南芥幼苗为试验材料,以转化p CAMBIA1301空载体的根癌农杆菌EHA105为目的菌株进行瞬时转化。研究了吐温20、菌液OD... 利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的拟南芥瞬时转化体系影响因素来确定最佳转化条件。以生长15日龄的拟南芥幼苗为试验材料,以转化p CAMBIA1301空载体的根癌农杆菌EHA105为目的菌株进行瞬时转化。研究了吐温20、菌液OD值、乙酰丁香酮(AS)及转化时间等对拟南芥瞬时转化效率的影响。结果表明:以体积分数为0.05%的吐温、菌液OD600值为1.0和120μmol/L的AS侵染拟南芥2.5 h后,再共培养72 h,能够得到高瞬时转化效果。 展开更多
关键词 拟南芥 GUS基因 瞬时表达 实时定量 农杆菌介导转化
在线阅读 下载PDF
BraSDG2 RNA干扰载体的构建和拟南芥的遗传转化 预览 被引量:1
13
作者 周雅智 姜玲 黄勇 《山东农业科学》 2016年第10期7-11,共5页
多倍化是植物进化过程中的自然现象,也是植物进化的重要源泉。在前期的研究中,通过生物信息学分析发现二倍体的白菜型油菜中存在两个拟南芥SDG2的同源基因BraSDG2a(Bra037086)和BraSDG2b(Bra039562)。经序列比对,选取258 bp的保守... 多倍化是植物进化过程中的自然现象,也是植物进化的重要源泉。在前期的研究中,通过生物信息学分析发现二倍体的白菜型油菜中存在两个拟南芥SDG2的同源基因BraSDG2a(Bra037086)和BraSDG2b(Bra039562)。经序列比对,选取258 bp的保守序列构建RNA干扰载体pFGC5941-BraSDG2-RNAi。通过浸花法转化野生型拟南芥(Col-0),经抗性筛选及PCR检测,获得1株表型稳定的转基因植株。通过对T4代转基因拟南芥(纯合体)的表型观察发现,BraSDG2 RNA干扰转基因植株具有拟南芥sdg2突变体相似的生物学表型,植株弱小、种子稀少。本试验为进一步研究Bra SDG2的生物学功能奠定基础。 展开更多
关键词 白菜型油菜 BraSDG2 RNA干扰 拟南芥 遗传转化
在线阅读 免费下载
丹参SmWRKY65基因的克隆及其拟南芥遗传转化 预览
14
作者 于海征 郭万里 +2 位作者 陈洋洋 薛清静 梁宗锁 《浙江理工大学学报》 2016年第6期906-911,共6页
为研究丹参WRKY家族基因的生物学特性,通过生物信息学的方法从丹参转录组库中筛选出响应茉莉酸甲酯(MeJA)的SmWRKY65,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测该基因的组织器官表达特性,进而采用花序浸泡法把基因导入到拟南芥中。研究表明... 为研究丹参WRKY家族基因的生物学特性,通过生物信息学的方法从丹参转录组库中筛选出响应茉莉酸甲酯(MeJA)的SmWRKY65,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测该基因的组织器官表达特性,进而采用花序浸泡法把基因导入到拟南芥中。研究表明SmWRKY65基因编码区的长度为867bp,编码288个氨基酸,含有1个WRKY保守结构域和1个C_2H_2锌指结构域,属于WRKY转录因子家族第IIa类成员。SmWRKY65在根、茎、叶、花等组织器官中均有表达,且在叶和茎中的表达量最高,5月份和10月份各个组织器官中表达也存在差异。最后获得了转基因拟南芥株系。 展开更多
关键词 丹参 拟南芥 SmWRKY65 基因克隆 遗传转化
在线阅读 下载PDF
枸杞LbMYB103基因克隆及转化拟南芥的研究 预览
15
作者 郑蕊 岳思君 +2 位作者 王丽娟 钱贻崧 代金霞 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1722-1727,共6页
以枸杞品种‘宁杞1号’花药为材料,采用RT-PCR技术,分离了R2R3类MYB基因LbMYB103包含完整开放阅读框(ORF)的cDNA片段,碱基序列与已知基因HQ415755完全一致。运用Gateway技术构建LbMYB103基因植物过表达载体pMDC83-LbMYB103,利用基因... 以枸杞品种‘宁杞1号’花药为材料,采用RT-PCR技术,分离了R2R3类MYB基因LbMYB103包含完整开放阅读框(ORF)的cDNA片段,碱基序列与已知基因HQ415755完全一致。运用Gateway技术构建LbMYB103基因植物过表达载体pMDC83-LbMYB103,利用基因枪法将融合有绿色荧光蛋白(GFP)的过表达载体转入洋葱表皮细胞,将LbMYB103基因定位在细胞核。实时荧光定量PCR分析发现,LbMYB103基因在花药中优势表达,果实中表达量较低,在根、茎和叶中均未检测到其转录本,推测LbMYB103基因可能在花药发育过程中起重要作用。通过根癌农杆菌介导法将pMDC83-LbMYB103转入拟南芥(Col-0),经筛选获得T1代抗性再生植株52棵,PCR鉴定有41棵阳性植株,收获T1代种子,经抗性筛选获得T2代抗性植株29棵,PCR鉴定有23棵阳性植株。实时荧光定量PCR分析表明,LbMYB103在拟南芥植株的基因组中正常表达。表型观察发现T1和T2代拟南芥花药发育异常,花发育迟缓,果荚短小无种子,进一步表明LbMYB103可能与植物的育性有关。该结果为进一步开展枸杞遗传转化,深入研究LbMYB103基因在枸杞花药发育过程中可能发挥的调控功能奠定了基础。 展开更多
关键词 枸杞 LbMYB103 植物过量表达载体 拟南芥 遗传转化
在线阅读 下载PDF
BolSDG8 RNA干扰载体构建和拟南芥的遗传转化 预览 被引量:1
16
作者 常诚 姜玲 阮颖 《安徽农业科学》 CAS 2015年第16期36-38,84共4页
拟南芥SDG8通过调控开花关键基因FLC位点上H3 K36的甲基化水平促进其转录表达进而抑制植株早花.甘蓝BolSDG8是拟南芥SDG8的同源基因,经比对,选择一段约为359 bp的保守序列,命名为BolSDG8-RNAi,通过构建RNA干扰载体,并将其转化至野生型... 拟南芥SDG8通过调控开花关键基因FLC位点上H3 K36的甲基化水平促进其转录表达进而抑制植株早花.甘蓝BolSDG8是拟南芥SDG8的同源基因,经比对,选择一段约为359 bp的保守序列,命名为BolSDG8-RNAi,通过构建RNA干扰载体,并将其转化至野生型拟南芥(Col-0)中,获得了稳定遗传的转基因植株.通过对T3代转基因植物的表型观察,开花天数及莲座叶数目的统计分析,发现BolSDG8 RNA干扰转基因植株表现出与拟南芥sdg8-2突变体相似的生物学表型,即植株弱小,明显早花,暗示BolSDG8与拟南芥SDG8在调控植物开花上具有相似的生物学功能,为进一步深入研究甘蓝BolSDG8的生物学功能奠定基础. 展开更多
关键词 BolSDG8 RNA干扰 拟南芥 遗传转化
在线阅读 下载PDF
拟南芥AtLCR67干扰质粒的构建及转基因植株的鉴定 预览
17
作者 郭磊 胡佳 +1 位作者 肖文娟 刘春林 《作物研究》 2015年第3期221-225,共5页
种子发育过程是植物整个生长周期最重要的阶段,涉及到一系列功能物质的合成和转化,是由各种相互关联的基因共同控制完成的,因此,研究该阶段特异性表达的基因对研究种子发育过程非常重要。以种子特异性表达的基因At LCR67为研究对象,通... 种子发育过程是植物整个生长周期最重要的阶段,涉及到一系列功能物质的合成和转化,是由各种相互关联的基因共同控制完成的,因此,研究该阶段特异性表达的基因对研究种子发育过程非常重要。以种子特异性表达的基因At LCR67为研究对象,通过构建RNAi干扰质粒,借助根癌农杆菌介导的浸花法,将At LCR67基因的RNAi表达框转到拟南芥基因组中;经过PPT抗性筛选与PCR鉴定,成功获得了8株转基因植株。对其中的3株进一步作RT-PCR检测,显示有2株中的At LCR67基因表达被完全抑制,另一株的基因表达水平被抑制了大约70%,结果完全实现了设计目标;同时还发现T2代植株有晚花表型。这两株转基因植株为进一步研究At LCR67功能与作用机制提供了良好的遗传材料。 展开更多
关键词 拟南芥 At LCR67基因 RNAi质粒 遗传转化 基因沉默
在线阅读 下载PDF
紫花苜蓿MsMYB2基因的克隆及转化 预览 被引量:1
18
作者 冯子蓉 孙彦 +2 位作者 晁跃辉 袁柱 陆继肖 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期580-585,共6页
为获得MsMYB2基因过量表达的转基因拟南芥(Arabidopsis thaliana)植株,利用PCR技术在紫花苜蓿(Medicago sativa)中克隆出MYB2基因并命名为MsMYB2,MsMYB2基因编码区全长834 bp,编码1条长度为278个氨基酸的多肽链。通过DNA重组技术将... 为获得MsMYB2基因过量表达的转基因拟南芥(Arabidopsis thaliana)植株,利用PCR技术在紫花苜蓿(Medicago sativa)中克隆出MYB2基因并命名为MsMYB2,MsMYB2基因编码区全长834 bp,编码1条长度为278个氨基酸的多肽链。通过DNA重组技术将其与pBI121连接,成功构建了植物表达载体pBI-MsMYB2。通过花序侵染法获得具有卡那霉素抗性的转基因拟南芥植株,并通过PCR和RT-PCR对目的基因进行检测,结果证明目的基因已整合到拟南芥基因组中并且可以表达,成功获得了MsMYB2基因表达的拟南芥转基因植株。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 MsMYB2基因 拟南芥 转化
在线阅读 下载PDF
拟南芥AtCDPK1基因克隆与转化马铃薯的研究 预览 被引量:2
19
作者 聂利珍 于肖夏 +4 位作者 李国婧 鞠天华 孙瑞芬 崔阔澍 于卓 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期447-453,共7页
以野生拟南芥生态型(Col-0)为材料,利用PCR和DNA重组技术,克隆了拟南芥钙依赖蛋白激酶基因(AtCDPK1)。AtCDPK1基因全长为2 269bp,碱基序列与已知基因At1g18890完全一致。构建AtCDPK1基因的植物表达载体pCHF3-CDPK1,并利用农杆菌介... 以野生拟南芥生态型(Col-0)为材料,利用PCR和DNA重组技术,克隆了拟南芥钙依赖蛋白激酶基因(AtCDPK1)。AtCDPK1基因全长为2 269bp,碱基序列与已知基因At1g18890完全一致。构建AtCDPK1基因的植物表达载体pCHF3-CDPK1,并利用农杆菌介导法将pCHF3-CDPK1转入马铃薯品种‘费乌瑞它’的脱毒试管微型薯中,经筛选与植株再生,共获得50个抗性再生植株。PCR检测显示,有36个植株基因组中含有AtCDPK1基因。RT-PCR分析证实,AtCDPK1基因在这些马铃薯植株的基因组中均能正常转录表达。这一结果为进一步开展AtCDPK1基因功能分析及转基因抗旱马铃薯新品种选育研究奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 AtCDPK1 基因克隆 马铃薯 遗传转化 转录表达
在线阅读 下载PDF
玉米ZmLTP3基因表达载体的构建及遗传转化 预览
20
作者 孙小艳 朱泳 邹华文 《湖北农业科学》 北大核心 2014年第4期929-931,935共4页
LTP3基因在植物生理活动中起着非常重要的作用,为研究玉米(Zea mays)中类LTP3基因的功能,构建了含有ZmLTP3基因序列的重组植物表达载体,通过农杆菌介导转入拟南芥(Arabidopsis thaliana)中进行过量表达。PCR及Western-blot分析结果... LTP3基因在植物生理活动中起着非常重要的作用,为研究玉米(Zea mays)中类LTP3基因的功能,构建了含有ZmLTP3基因序列的重组植物表达载体,通过农杆菌介导转入拟南芥(Arabidopsis thaliana)中进行过量表达。PCR及Western-blot分析结果表明,ZmLTP3基因已转入拟南芥中,并且在大多数转化植株中稳定表达。 展开更多
关键词 玉米(Zea mays) ZmLTP3基因 拟南芥(Arabidopsis thaliana) 遗传转化
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈