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Analysis of the autophagy gene expression profile of pancreatic cancer based on autophagy-related protein microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3 预览
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作者 Yan-Hui Yang Yu-Xiang Zhang +3 位作者 Yang Gui Jiang-Bo Liu Jun-Jun Sun Hua Fan 《世界胃肠病学杂志:英文版》 SCIE CAS 2019年第17期2086-2098,共13页
BACKGROUND Pancreatic cancer is a highly invasive malignant tumor. Expression levels of the autophagy-related protein microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3 (LC3) and perineural invasion (PNI) are closely ... BACKGROUND Pancreatic cancer is a highly invasive malignant tumor. Expression levels of the autophagy-related protein microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3 (LC3) and perineural invasion (PNI) are closely related to its occurrence and development. Our previous results showed that the high expression of LC3 was positively correlated with PNI in the patients with pancreatic cancer. In this study, we further searched for differential genes involved in autophagy of pancreatic cancer by gene expression profiling and analyzed their biological functions in pancreatic cancer, which provides a theoretical basis for elucidating the pathophysiological mechanism of autophagy in pancreatic cancer and PNI. AIM To identify differentially expressed genes involved in pancreatic cancer autophagy and explore the pathogenesis at the molecular level. METHODS Two sets of gene expression profiles of pancreatic cancer/normal tissue (GSE16515 and GSE15471) were collected from the Gene Expression Omnibus. Significance analysis of microarrays algorithm was used to screen differentially expressed genes related to pancreatic cancer. Gene Ontology (GO) analysis and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) pathway analysis were used to analyze the functional enrichment of the differentially expressed genes. Protein interaction data containing only differentially expressed genes was downloaded from String database and screened. Module mining was carried out by Cytoscape software and ClusterOne plug-in. The interaction relationship between the modules was analyzed and the pivot nodes between the functional modules were determined according to the information of the functional modules and the data of reliable protein interaction network.RESULTS Based on the above two data sets of pancreatic tissue total gene expression, 6098 and 12928 differentially expressed genes were obtained by analysis of genes with higher phenotypic correlation. After extracting the intersection of the two differential gene sets, 4870 genes were determined 展开更多
关键词 Pancreatic cancer Autophagy-related PROTEIN microtubule-associated PROTEIN 1A/1B-light chain 3 Perineural invasion Gene Ontology ANALYSIS Kyoto ENCYCLOPEDIA of Genes and Genomes pathway ANALYSIS Ubiquitin C
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Screening differentially expressed genes from cyclin B1 down-regulated by high-throughput gene chip
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作者 Xian-He Xie Wan-Zun Lin +2 位作者 Wei-Li Zheng Ting Chen Jun-Jin Liu 《海南医科大学学报(英文版)》 2018年第1期1-4,共4页
Objective: To study differentially expressed genes by silencing cyclin B1, and to sift out autophagy-related genes. Methods: Double thymidine deoxyribonucleoside blocking was used to synchronize nasopharyngeal carcino... Objective: To study differentially expressed genes by silencing cyclin B1, and to sift out autophagy-related genes. Methods: Double thymidine deoxyribonucleoside blocking was used to synchronize nasopharyngeal carcinoma cell (CNE-2) to S phase, then flow cytometry was applied to test transfection efficiency. The mRNA and protein expression level of cyclin B1 was assessed by q-PCR and western blot, respectively. Differentially expressed genes were screened by high-throughput gene chip. Results: Double thymidine deoxyribonucleoside (2.5 mmol/L) blocking was used to synchronize the cell cycle to S phase. The transfection efficiency of CNE-2 cells was 85.6%. Compared with negative group,cyclin B1-siRNA treated group significantly down-regulated mRNA expression of cyclin B1 (80%) and protein level (75.3%). Totally, 2408 differentially expressed genes were found in CNE-2, including 1245 up-regulated genes and 1163 down-regulated genes. Moreover, PTEN, an autophagy-related gene, was preliminarily sifted out. Conclusions: Cyclin B1-siRNA significantly down-regulated the expression of cyclin B1 and yielded a total of 2408 differentially expressed genes, including PETN (an autophagy-related gene). 展开更多
关键词 Cyclin B1 Cell cycle SYNCHRONIZATION HIGH-THROUGHPUT GENE chip Autophagy-related GENE
自噬相关蛋白在肺鳞癌和腺癌组织中的表达及相关性研究 预览 被引量:1
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作者 郭凯 黄波 王晓东 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第6期536-539,I0002共5页
目的:探讨肺鳞癌和腺癌中自噬相关蛋白Beclin1、自噬相关蛋白1(Atg1)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达情况及其相关性分析。方法采用免疫组织化学Envision二步法,检测82例肺癌(鳞癌和腺癌)组织及17例癌旁正常肺组织中Beclin1、Atg1... 目的:探讨肺鳞癌和腺癌中自噬相关蛋白Beclin1、自噬相关蛋白1(Atg1)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达情况及其相关性分析。方法采用免疫组织化学Envision二步法,检测82例肺癌(鳞癌和腺癌)组织及17例癌旁正常肺组织中Beclin1、Atg1、mTOR的表达情况,并分析其表达的相关性。结果肺癌组织中Beclin1的阳性表达率低于正常组(52.44%vs 94.12%,P<0.01),在淋巴结转移、TNM分期、不同分化程度情况的肺癌组织中阳性表达率差异有统计学意义,且随肿瘤恶变和侵袭程度的增强呈递减趋势。肺癌组与正常组Atg1阳性表达率比较差异无统计学意义(64.71%vs 46.34%),但在肿块较大肺癌组织中的阳性表达率低于肿块较小者(P〈0.01)。肺癌组mTOR阳性表达率高于正常组(53.66%vs 5.88%,P<0.01),有淋巴结转移的肺癌组织中mTOR阳性表达率高于无淋巴结转移者(P〈0.01)。相关性分析显示,鳞癌中Beclin1与Atg1表达呈正相关(r=0.609),Beclin1、Atg1分别与mTOR呈负相关(r分别为-0.617、-0.444);肺腺癌中,Beclin1与Atg1表达呈正相关(r=0.458),Beclin1、Atg1分别与mTOR呈负相关(r分别为-0.497,-0.541),均P〈0.01。结论 Beclin1、Atg1、mTOR在肺鳞癌和腺癌组织中的表达呈现较好的相关性,提示肺鳞癌和腺癌的临床病理学变化与自噬有关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 鳞状细胞 腺癌 自噬 自噬相关蛋白1 雷帕霉素靶蛋白 BECLIN1 autophagy-related protein 1
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大潮气量机械通气对大鼠肺内自噬和线粒体损伤的影响
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作者 胡召锟 荆忍 +2 位作者 戴惠军 张随随 潘灵辉 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期325-330,共6页
目的探讨不同潮气量(VT)机械通气(MV)与大鼠肺内自噬和线粒体损伤的关系。方法采用随机数字表法将120只清洁级雄性SD大鼠分为5组(n=24),依次给予0(自主呼吸)、10、20、30、40 mL/kg VT进行MV;各组再按照通气时间分为1、2、3、4 h 4个亚... 目的探讨不同潮气量(VT)机械通气(MV)与大鼠肺内自噬和线粒体损伤的关系。方法采用随机数字表法将120只清洁级雄性SD大鼠分为5组(n=24),依次给予0(自主呼吸)、10、20、30、40 mL/kg VT进行MV;各组再按照通气时间分为1、2、3、4 h 4个亚组,每个亚组6只大鼠。收集各组肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),并体外培养肺泡巨噬细胞(AMs)和Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)或蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3B -Ⅱ(LC3B -Ⅱ)和自噬相关基因Beclin1、p62的mRNA及蛋白表达;透射电镜下观察肺组织自噬体形成情况;并检测三磷酸腺苷(ATP)、活性氧簇(ROS)和线粒体膜电位(MMP)水平,从而评估线粒体损伤情况。结果通气1 h各组间肺组织LC3B -Ⅱ、p62、Beclin1的mRNA及蛋白表达比较差异均无统计学意义。随通气时间延长,MV各组LC3B -Ⅱ、p62、Beclin1的mRNA及蛋白表达水平均逐渐升高,2~3 h达峰值,以30 mL/kg VT组升高更为显著,与自主呼吸组比较差异有统计学意义〔通气2 h:LC3B -ⅡmRNA(2^-ΔΔCt)为2.44±0.24比1.12±0.04,LC3B -Ⅱ/LC3B -Ⅰ为1.42±0.16比0.57±0.03,p62 mRNA(2^-ΔΔCt)为2.96±0.14比1.14±0.02,Beclin1 mRNA(2^-ΔΔCt)为2.80±0.13比1.14±0.02;通气3 h:p62/β-actin为1.14±0.15比0.55±0.04,Beclin1/β-actin为1.27±0.06比0.87±0.04,均P<0.05〕。透射电镜下观察显示,30 mL/kg VT通气2 h可在AECⅡ中观察到自噬体及自噬溶酶体,而在AECⅠ中均未观察到。与自主呼吸组比较,30 mL/kg VT通气2 h AMs内ATP合成明显下降(A值:0.82±0.05比1.00±0.00,P<0.05),AMs和AECⅡ中ROS累积明显增加〔AMs中ROS:(33.83±4.00)%比(6.90±0.62)%,AECⅡ中ROS:(80.68±0.90)%比(2.16±0.19)%,均P<0.05〕;且随着VT增加及通气时间延长,AMs和AECⅡ中ATP、ROS水平逐渐下降,40 mL/kg VT通气4 h AMs中ATP(A值)为0.41±0.05,AMs中ROS为(12.95±0.88)%,AECⅡ中ROS为(40.43±2.29)%。� 展开更多
关键词 自噬 线粒体损伤 微管相关蛋白1轻链3B 自噬相关基因p62 自噬相关基因Beclin1
阿霉素肾病大鼠不同病理时期自噬体的形成及自噬相关蛋白的表达及分布情况及其与肾组织损伤、肾脏疾病进展的关系分析 预览
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作者 刘钰 曾光 杨舸 《临床和实验医学杂志》 2019年第13期1350-1354,共5页
四川省医学会四川省医学科研项目(编号:S16043)目的探讨阿霉素肾病(AN)大鼠自噬体在不同病理时期的形成和自噬相关蛋白表达、分布及其与大鼠肾脏疾病进展、肾组织损伤程度的相关性。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分为对照组(于鼠尾静脉... 四川省医学会四川省医学科研项目(编号:S16043)目的探讨阿霉素肾病(AN)大鼠自噬体在不同病理时期的形成和自噬相关蛋白表达、分布及其与大鼠肾脏疾病进展、肾组织损伤程度的相关性。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分为对照组(于鼠尾静脉注入生理盐水)与实验组(于鼠尾静脉注入阿霉素6.5mg/kg),两组各20只。密切监测并比较两组大鼠15d、30d、45d、60d时血清尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、总胆固醇(TC)、白蛋白(Alb)及24h尿蛋白定量(24hUPQ)水平的变化情况,观察两组大鼠足细胞结构和自噬体的形成及肾脏组织病理学变化情况。采用免疫荧光染色法对自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅰ及LC3-Ⅱ在两组大鼠肾组织中的分布情况进行检测,并用Western蛋白印迹法对三种蛋白表达水平进行检测。结果实验组第15天时血清Alb明显降低,24hUPQ显著增高,第30天时TC显著增高,与对照组相比存在显著性差异(P<0.05);实验组第30天时血清BUN和SCr出现轻度增高,第45天时肾功能损伤加重,且出现进行性加重,与对照组相比存在显著性差异(P<0.05)。光镜下观察实验组大鼠肾脏组织病理改变可见早期由微小病变肾病逐渐进展为局灶节段性肾小球硬化。透射电镜下观察大鼠早期存在系膜细胞增生,细胞器(如溶酶体等)分布和形态异常改变,足突增宽且出现弥漫性融合的现象,晚期观察可见足突消失和核固缩现象。免疫荧光染色结果可见对照组大鼠肾组织自噬能力较差,但在实验组中,随着肾脏疾病的进展,大鼠自噬能力进一步提高,且保持在较高水平。经Western蛋白印迹法检测结果所示,随着肾脏疾病的进展,实验组大鼠自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅰ及LC3-Ⅱ蛋白表达明显提高,且与对照组相比存在显著性差异(P<0.05)。结论随着AN病情程度的进展,大鼠肾功能损伤加重,且出现进行性加重,同时自噬能力进一步提高,自噬� 展开更多
关键词 大鼠 阿霉素肾病 自噬 自噬相关蛋白 肾组织损伤 疾病进展
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ATG5基因启动子区域单核苷酸多态性与急性心肌梗死的相关性分析 预览
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作者 张业欣 马如超 +3 位作者 杨文涛 逄淑超 崔英华 闫波 《临床检验杂志》 CAS 2019年第2期87-91,共5页
目的探讨自噬相关蛋白5(autophagy-related protein,ATG5)基因启动子序列单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的关系。方法采用PCR和Sanger基因测序法检测ATG5基因... 目的探讨自噬相关蛋白5(autophagy-related protein,ATG5)基因启动子序列单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的关系。方法采用PCR和Sanger基因测序法检测ATG5基因启动子序列SNPs;通过卡方检验、Logistic回归分析及单倍型分析法对378例AMI患者和374例健康对照人群的SNPs进行分型和关联分析。结果发现ATG5基因启动子序列中的2个SNPs:rs506027[OR=1.4,95%CI(0.6~3.0),P=0.411]和rs510432[OR=1.6,95%CI(0.7~3.4),P=0.275]并未增加AMI的易感性,且未发现该2个SNPs与AMI相关的单倍型。结论ATG5基因启动子多态性与AMI易感性无关。 展开更多
关键词 心肌梗死 自噬 自噬相关蛋白5 单核苷酸多态性 单倍型
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FOXO3相关信号途径影响细胞自噬的研究进展 预览
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作者 黄坚毅 王进 +1 位作者 黄燕宁 陈红常 《医学综述》 2019年第7期1249-1254,共6页
叉形头转录因子O亚型3(FOXO3)是FOXO家族的重要成员,其广泛参与机体的许多生物学过程,如细胞自噬、氧化应激反应、细胞周期调控及细胞凋亡,但具体的调控机制尚未明确。FOXO3参与自噬调控的活性受磷酸化及乙酰化等修饰的影响,并多与AMP... 叉形头转录因子O亚型3(FOXO3)是FOXO家族的重要成员,其广泛参与机体的许多生物学过程,如细胞自噬、氧化应激反应、细胞周期调控及细胞凋亡,但具体的调控机制尚未明确。FOXO3参与自噬调控的活性受磷酸化及乙酰化等修饰的影响,并多与AMP活化的蛋白激酶、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B等信号转导通路相关。此外,FOXO3还通过调节一些自噬相关基因如微管相关蛋白1轻链3、磷脂酰肌醇-3-激酶/囊泡蛋白分选相关蛋白34、γ氨基丁酸受体相关蛋白1等的转录调控自噬。因此,了解转录因子FOXO3在自噬调节中的作用有助于对经典自噬模型进行探究,也可对自噬相关疾病如肿瘤、衰老以及神经退行性变,包括帕金森病、阿尔茨海默病等疾病的治疗提供线索。 展开更多
关键词 细胞自噬 叉形头转录因子O亚型3 信号途径 AMP活化的蛋白激酶 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B 自噬相关基因
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舌癌与自噬相关基因的研究进展 预览
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作者 罗婕瑜 姚金光 《右江医学》 2019年第6期401-405,共5页
自噬是细胞通过溶酶体降解细胞内“废物”,维持细胞稳态的一种进化上保守的行为。自噬与癌症的关系具有两面性,一方面可以“自食”,另一方面在癌细胞形成后,又可通过自噬为癌细胞提供存活的能量。舌癌作为一个高发、预后差的癌症,为近... 自噬是细胞通过溶酶体降解细胞内“废物”,维持细胞稳态的一种进化上保守的行为。自噬与癌症的关系具有两面性,一方面可以“自食”,另一方面在癌细胞形成后,又可通过自噬为癌细胞提供存活的能量。舌癌作为一个高发、预后差的癌症,为近年来研究的热点。迄今为止,已有30多种自噬相关基因及其蛋白质被发现并研究,其与癌症有着不可分割的关系。通过研究自噬基因与舌癌的关系,可以为舌癌的治疗及预后评估提供依据。 展开更多
关键词 自噬 自噬相关基因 舌癌
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锌α2糖蛋白通过增强脂肪细胞自噬活性改善胰岛素抵抗的作用及机制研究 预览
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作者 张韶君 遆红燕 +5 位作者 高江琴 燕桂新 郭亚莉 康芳芳 邱贵娟 岳志远 《中国药物与临床》 CAS 2019年第3期349-351,共3页
目的研究锌α2糖蛋白(ZAG)对胰岛素抵抗3T3-L1细胞自噬相关基因7和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白基因和蛋白表达的影响,探讨ZAG调控脂肪细胞自噬活性改变的作用及分子机制。方法将3T3-L1脂肪细胞随机分为正常对照、胰岛素抵抗、ZAG、氯喹、ZAG... 目的研究锌α2糖蛋白(ZAG)对胰岛素抵抗3T3-L1细胞自噬相关基因7和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白基因和蛋白表达的影响,探讨ZAG调控脂肪细胞自噬活性改变的作用及分子机制。方法将3T3-L1脂肪细胞随机分为正常对照、胰岛素抵抗、ZAG、氯喹、ZAG+氯喹5组,应用地塞米松诱导细胞胰岛素抵抗,ZAG组加入ZAG,氯喹组加入氯喹,ZAG+氯喹组同时加入ZAG和氯喹。以葡萄糖氧化酶法测定5组细胞上清液中葡萄糖消耗量,观察ZAG对脂肪细胞葡萄糖摄取的影响;应用免疫印迹技术测定脂肪细胞Atg7和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的蛋白表达变化;应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测脂肪细胞Atg7和m TOR的mRNA表达变化。结果与正常对照组相比,胰岛素抵抗组的Atg7蛋白和m RNA表达明显下降(P均<0.05),而mTOR的蛋白和mRNA表达显著升高(P均<0.05),经ZAG干预后,Atg7蛋白和m RNA表达水平有一定升高,mTOR的蛋白和mRNA表达降低,与正常对照组比较差异有统计学意义(P均<0.05)。结论ZAG通过调控脂肪细胞Atg7及mTOR的表达,增强脂肪细胞自噬活性,进而改善胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 胰岛素抗药性 锌α2糖蛋白 自噬 自噬相关基因 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
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自噬相关基因3过表达促进乳腺癌细胞自噬并抑制盐霉素诱导的细胞凋亡 预览
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作者 李芳 黄果 +4 位作者 彭平 刘瑶 李双辉 刘罗根 章运生 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期162-168,共7页
目的研究人自噬相关基因3(ATG3)过表达对乳腺癌细胞自噬及盐霉素诱导细胞凋亡的影响和机制。方法采用慢病毒的方法,构建了稳定过表达ATG3的乳腺癌MCF-7细胞株;通过Westernblotting、免疫荧光和透射电镜等方法分析了ATG3过表达对乳腺癌MC... 目的研究人自噬相关基因3(ATG3)过表达对乳腺癌细胞自噬及盐霉素诱导细胞凋亡的影响和机制。方法采用慢病毒的方法,构建了稳定过表达ATG3的乳腺癌MCF-7细胞株;通过Westernblotting、免疫荧光和透射电镜等方法分析了ATG3过表达对乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响;并用AKT/mTOR的激动剂(SC79和MHY1485)分析AKT/mTOR信号通路对ATG3过表达促进细胞自噬的影响;通过Westernblotting和流式细胞术,同时结合盐霉素和自噬抑制剂(3-MA),分析了自噬对ATG3过表达抑制盐霉素诱导细胞凋亡的影响。结果成功构建稳定高表达ATG3的MCF-7细胞株。ATG3能够促进MCF-7细胞自噬,并且抑制AKT/mTOR信号通路。ATG3明显抑制了盐霉素诱导的细胞凋亡(P<0.01),且ATG3过表达组中促凋亡分子cleavedcaspase3(P<0.01)和Bax表达明显减少(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达增多(P<0.05)。自噬的阻滞能够削弱ATG3对盐霉素诱导细胞凋亡的抑制作用。结论ATG3可能通过抑制AKT/mTOR信号通路诱导乳腺癌MCF-7细胞自噬,并通过细胞自噬减少盐霉素诱导的细胞凋亡。综上提示诱发细胞自噬可能是乳腺癌细胞耐药的机制之一。 展开更多
关键词 自噬相关基因3 慢病毒 细胞自噬 盐霉素 乳腺癌
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MEBT/MEBO对小鼠烧伤创面组织中K19表达的影响及作用机制 预览
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作者 李雄 彭浩 贺全勇 《中国烧伤创疡杂志》 2019年第1期24-33,共10页
目的探究烧伤创疡再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)对烧伤创面组织中角蛋白19 (keratin 19, K19)表达的影响及可能的作用机制。方法选取15只健康雄性昆明小鼠,按照随机数表法随机选取... 目的探究烧伤创疡再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)对烧伤创面组织中角蛋白19 (keratin 19, K19)表达的影响及可能的作用机制。方法选取15只健康雄性昆明小鼠,按照随机数表法随机选取5只作为对照组,10只建立深Ⅱ度烫伤模型后随机分为模型组与治疗组,其中治疗组小鼠创面采用湿润烧伤膏进行处理、模型组小鼠创面采用生理盐水进行处理、对照组小鼠背部脱毛后不做任何处理,1周后取皮肤或创面组织并通过免疫组织化学染色、蛋白质印迹(Western blot)及定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction, Q-PCR)等技术检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3及K19的表达水平。结果治疗第1-7天,治疗组小鼠创面清洁,并始终保持湿润状态,且随着治疗时间的延长逐渐呈现上皮化状态;模型组小鼠创面逐渐加深,并出现感染征象。治疗1周后,免疫组织化学染色法及Western blot法检测结果显示,3组小鼠皮肤或创面组织中Beclin-1、LC3及K19表达水平对比,治疗组>模型组>对照组,P均<0.01,差异具有统计学意义;除Western blot法检测结果显示治疗组与模型组小鼠创面组织中LC3表达水平对比,P>0.05外,其余各检测结果均显示小鼠皮肤或创面组织中Beclin-1、LC3及K19表达水平两两对比,P<0.01,差异具有统计学意义。Q-PCR技术检测结果显示,3组小鼠皮肤或创面组织中K19 mRNA表达水平对比,治疗组>模型组>对照组,P <0.01,差异具有统计学意义;3组小鼠皮肤或创面组织中K19mRNA表达水平两两对比,P均<0. 01,差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO促进烧伤创面愈合可能与增加创面组织中K19的表达有关,而诱导自噬相关蛋白的高表达可能是其具体机制之一。 展开更多
关键词 烧伤创疡再生医疗技术 烧伤 创面 角蛋白19 自噬相关蛋白 LC3 Beclin-1
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电针“百会”“太冲”对自发性高血压大鼠心肌肥大和自噬的影响
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作者 张跃 纪智 +6 位作者 袁静云 王紫娟 梁靖蓉 吴娇娟 臧颖颖 王朝阳 刘清国 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期90-94,共5页
目的:通过观察电针对自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞超微结构和自噬相关蛋白表达的影响,探究电针调节SHR心肌肥大的内在机制。方法:选用12只12周龄雄性WKY大鼠作为正常组,24只同周龄雄性SHR随机分为模型组和电针组各12只。电针组电针&qu... 目的:通过观察电针对自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞超微结构和自噬相关蛋白表达的影响,探究电针调节SHR心肌肥大的内在机制。方法:选用12只12周龄雄性WKY大鼠作为正常组,24只同周龄雄性SHR随机分为模型组和电针组各12只。电针组电针"百会"和右侧"太冲",留针20min,每日1次,共30d。以无创血压仪检测大鼠尾动脉收缩压,超声心动检测大鼠左心室肥厚程度和功能,Masson染色和透射电子显微镜观察心肌组织结构和细胞超微结构的变化,Western blot法检测各组大鼠心肌组织中Beclin-1和LC3表达的变化。结果:模型组大鼠收缩压与正常组比较显著升高(P<0.01),电针组大鼠收缩压与模型组相比显著降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组左心室质量指数(LVMI)、左室舒张末期前壁厚度(LVAWd)、左室舒张末期后壁厚度(LVPWd)显著升高(P<0.01),舒张末期左室内径(LVIDd)显著降低(P<0.01);与模型组比较,电针组LVMI、LVAWd和LVPWd明显降低(P<0.01,P<0.05),LVIDd显著升高(P<0.01)。Masson染色和透射电子显微镜结果显示,电针组较模型组心肌组织损伤明显改善,自噬现象明显减少。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组心肌组织Beclin-1、LC3-Ⅱ的相对表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著升高(P<0.01);与模型组比较,电针组心肌组织Beclin-1、LC3-Ⅱ的相对表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论:电针"百会""太冲"可有效改善SHR心肌肥大,其机制可能与电针调节Beclin-1和LC3的表达,从而抑制心肌细胞的过度自噬有关。 展开更多
关键词 电针 自发性高血压 左心室功能 自噬相关蛋白 形态学改变
电针对食源性肥胖大鼠下丘脑自噬相关蛋白7表达的影响
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作者 姚俊鹏 李瑛 张林 《广州中医药大学学报》 CAS 2019年第4期545-548,共4页
【目的】探讨电针对食源性肥胖大鼠下丘脑自噬相关蛋白7(Autophagy-related protein 7,Atg7)表达的影响。【方法】将40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组8只和饮食诱导肥胖(Diet-induced obesity,DIO)造模组32只,造模组给予高脂饲料饲养1... 【目的】探讨电针对食源性肥胖大鼠下丘脑自噬相关蛋白7(Autophagy-related protein 7,Atg7)表达的影响。【方法】将40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组8只和饮食诱导肥胖(Diet-induced obesity,DIO)造模组32只,造模组给予高脂饲料饲养14周制备DIO大鼠肥胖模型,取造模成功的16只大鼠随机分为肥胖模型组和针刺干预组,每组各8只。针刺干预组选取中脘、足三里、天枢、三阴交穴进行治疗,每天1次,每周连续针刺5 d,共针刺干预4周。观察各组大鼠体质量的变化,Western blot法检测大鼠下丘脑Atg7蛋白质的表达。【结果】高脂喂养14周后肥胖模型组和针刺干预组大鼠体质量均明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。电针干预4周后,针刺干预组大鼠体质量显著低于肥胖模型组(P<0.05)。肥胖模型组大鼠下丘脑Atg7蛋白质含量明显低于正常对照组(P<0.05),电针干预组大鼠下丘脑Atg7蛋白质含量高于肥胖模型组(P<0.05)。【结论】电针干预可减轻肥胖大鼠体质量,可能与调控下丘脑自噬水平变化有关。 展开更多
关键词 电针 肥胖 自噬相关蛋白7 大鼠
自噬相关蛋白Atg5及Beclin-1在宫颈癌组织中的表达及意义
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作者 杨雨 李彤 李岩 《中国医师杂志》 CAS 2019年第1期69-72,共4页
目的探讨自噬相关基因5(Atg5)及Beclin-1两种蛋白在宫颈癌组织中的表达及其临床病理意义。方法采用SP免疫组织化学方法对宫颈癌标本50例、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)标本50例、正常宫颈组织标本50例进行试验,检测各组织中Atg5及Beclin-1... 目的探讨自噬相关基因5(Atg5)及Beclin-1两种蛋白在宫颈癌组织中的表达及其临床病理意义。方法采用SP免疫组织化学方法对宫颈癌标本50例、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)标本50例、正常宫颈组织标本50例进行试验,检测各组织中Atg5及Beclin-1蛋白的表达。结果(1)在宫颈癌组织中,Atg5及Beclin-1阳性表达率分别为34%、26%,低于正常宫颈组织中的阳性表达率72%、96%,且差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)Atg5蛋白的阳性表达率与宫颈癌患者临床分期、肿瘤大体类型、细胞分化程度有关(x^2=14.90,4.36,14.78,P<0.05)。Beclin-1蛋白的阳性表达率与宫颈癌患者年龄、临床分期、宫颈肿瘤大小、肿瘤大体类型、肿瘤病理类型、细胞分化程度、是否伴有淋巴结转移等均无关(P>0.05)。(3)Atg5与Beclin-1蛋白,在宫颈癌组织中的表达具有相关性(x^2=17.92,P<0.05)。结论Atg5及Beclin-1蛋白在宫颈癌中的表达下调,可能与宫颈病变的进展有关。Atg5蛋白与宫颈癌患者临床分期、肿瘤大体类型及细胞分化程度有关,提示Atg5可作为预测宫颈癌发生发展和评估患者预后的生物学指标。且Atg5及Beclin-1在宫颈癌组织中二者的表达具有相关性,提示二者可能在宫颈癌的发生、发展发挥重要作用。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 自噬相关蛋白质5 BECLIN-1
miR-210-3p 通过靶向ATG7抑制人膀胱癌细胞J82的自噬和诱导凋亡
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作者 韩兴涛 杨凌博 +3 位作者 魏澎涛 李小辉 孙建涛 杨锦建 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期615-620,共6页
目的探索miR-210-3p抑制人膀胱癌细胞J82机制。方法应用定量实时PCR(qRTPCR)检测miR-210-3p及其靶基因自噬相关基因7(autophagy-relatedgene7,ATG7)在J82细胞中的表达。为验证miR-210-3p和ATG7之间的生物学关系,进行荧光素酶报告检测。... 目的探索miR-210-3p抑制人膀胱癌细胞J82机制。方法应用定量实时PCR(qRTPCR)检测miR-210-3p及其靶基因自噬相关基因7(autophagy-relatedgene7,ATG7)在J82细胞中的表达。为验证miR-210-3p和ATG7之间的生物学关系,进行荧光素酶报告检测。通过体外实验研究miR-210-3p和ATG7在J82细胞中的生物学功能,包括CCK-8法检测细胞增殖情况,hoechst染色检测细胞凋亡,westernblot检测细胞自噬。结果miR-210-3p表达明显下调ATG7表达水平,生物信息学预测和荧光素酶报告实验证明miR-210-3p抑制ATG7是通过直接结合到ATG73’-未翻译区域(3’-UTR)。在J82细胞中,miR-210-3p上调可抑制ATG7表达、细胞自噬和细胞增殖,同时诱导细胞凋亡。结论miR-210-3p通过负调控ATG7抑制细胞增殖和自噬,并促进凋亡,从而促进膀胱癌细胞J82细胞死亡。因此,在膀胱癌中抑制自噬对于开发针对膀胱癌的自噬靶向治疗至关重要。本研究补充了miRNA调控膀胱癌的相关机制。 展开更多
关键词 膀胱癌 miR-210-3p autophagy-relatedgene7 自噬
甲亢宁胶囊含药血清对M22刺激FRTL-5细胞增殖的影响及自噬在其中的作用
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作者 魏军平 郑慧娟 +4 位作者 李敏 王秋虹 魏璠 柏力萄 陈舒雅 《中国中西医结合杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期1222-1228,共7页
目的探讨甲亢宁胶囊含药血清对甲状腺刺激性抗体(TSAb)单克隆抗体M22刺激Fisher大鼠甲状腺细胞系(FRTL-5)增殖作用和自噬的影响。方法体外培养FRTL-5细胞,采用不同浓度及时间观察M22刺激细胞增殖的量效关系,并确定作用最佳浓度及时... 目的探讨甲亢宁胶囊含药血清对甲状腺刺激性抗体(TSAb)单克隆抗体M22刺激Fisher大鼠甲状腺细胞系(FRTL-5)增殖作用和自噬的影响。方法体外培养FRTL-5细胞,采用不同浓度及时间观察M22刺激细胞增殖的量效关系,并确定作用最佳浓度及时间并制备甲亢宁胶囊含药血清。将FRTL-5细胞分为模型组(M22刺激24 h+15%空白大鼠血清),中药低、中、高剂量组(M22刺激24 h后5%、10%、15%甲亢宁胶囊含药血清干预24 h),正常组(15%空白大鼠血清)。采用CCK8法、酶联免疫竞争法检测各组细胞增殖情况及上清液中c AMP水平。确定高剂量(15%)甲亢宁胶囊含药血清抑制细胞增殖作用最强后再将FRTL-5细胞分为正常组(15%空白大鼠血清)、模型组(M22刺激24 h+15%空白大鼠血清)和中药组(M22刺激24 h后15%甲亢宁胶囊含药血清干预24 h),透射电镜下观察各组细胞内自噬体的变化,Western blot检测各组细胞自噬相关LC3及Beclin1蛋白水平。结果 M22对FRTL-5细胞的增殖影响呈现明显量效关系,确定1μg/m L M22于24 h增殖作用最佳。与正常组比较,模型组FRTL-5细胞增殖活性明显增强(P 〈0. 01),细胞上清液中c AMP释放量增加(P 〈0. 01),自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表达减少(P〈0. 01);与模型组比较,中药中剂量组和高剂量组FRTL-5细胞增殖被抑制(P 〈0. 01),上清液中c AMP释放量减少(P 〈0. 05,P 〈0. 01),中药低剂量组作用差异无统计学意义(P〉0. 05),中药组自噬关键蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1表达均增高(P 〈0. 01)。透射电镜提示,模型组较正常组自噬小体的数量减少,而中药组较模型组增多。结论 M22可促进FRTL-5细胞增殖且导致细胞自噬异常,而中药甲亢宁胶囊可通过改善其自噬异常,进而发挥抑制FRTL-5细胞增殖的作用。 展开更多
关键词 甲亢宁胶囊 GRAVES病 M22 FRTL-5细胞 细胞自噬 自噬相关蛋白
疟原虫和弓形虫的自噬作用研究进展 被引量:1
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作者 李缜 邹洋 +3 位作者 贾永根 闫爱霞 李晶晶 谷俊朝 《中国热带医学》 CAS 2018年第9期944-949,共6页
自噬(autophagy)是一种十分保守且普遍存在于真核细胞的代谢途径。虽然原生生物的自噬具有很多特殊性,但随着近年来对酵母和哺乳动物自噬机制的深入研究,顶复门原虫(Apicomplexa)的代表性生物疟原虫(Plasmodium)和弓形虫(Toxopla... 自噬(autophagy)是一种十分保守且普遍存在于真核细胞的代谢途径。虽然原生生物的自噬具有很多特殊性,但随着近年来对酵母和哺乳动物自噬机制的深入研究,顶复门原虫(Apicomplexa)的代表性生物疟原虫(Plasmodium)和弓形虫(Toxoplasma gondii)的自噬研究也取得了一定进展。疟原虫和弓形虫能够进行经典的自噬代谢,也涉及一种和顶质体相关的非典型代谢机制。在顶复门原虫中也发现了许多经典的自噬相关蛋白,其在自噬代谢途径中的功能和分子机制受到广泛关注。本文重点对疟原虫和弓形虫的自噬研究进展进行综述。 展开更多
关键词 自噬 疟原虫 弓形虫 顶质体 自噬相关蛋白
结直肠癌组织中Tricellulin、LC3和Beclin1的表达及意义 预览
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作者 李思漫 张金秀 +3 位作者 朱晔 叶喆 彭鹏 黄杰安 《山东医药》 2018年第41期1-5,共5页
目的观察结直肠癌组织中细胞间紧密连接蛋白(Tricellulin)、细胞自噬相关蛋白LC3、Beclin1的表达,并探讨其意义。方法 收集经外科手术切除的结直肠标本145例份,其中正常结直肠黏膜76例份、结直肠癌69例份,患者均未接受放化疗,标本均经... 目的观察结直肠癌组织中细胞间紧密连接蛋白(Tricellulin)、细胞自噬相关蛋白LC3、Beclin1的表达,并探讨其意义。方法 收集经外科手术切除的结直肠标本145例份,其中正常结直肠黏膜76例份、结直肠癌69例份,患者均未接受放化疗,标本均经病理确诊。采用免疫组化SP法检测结直肠癌组织及正常结直肠黏膜组织中Tricellulin、LC3和Beclin1表达,并分析三者阳性表达与结直肠癌患者临床病理特征的关系;同时采用Western blotting法检测Tricellulin、LC3和Beclin1在正常结直肠上皮细胞和结直肠癌细胞中的蛋白表达。采用Pearson或Spearman相关检验分析Tricellulin、LC3和Beclin1表达的相关性。结果 正常结直肠黏膜组织与结直肠癌组织中Tricellulin阳性表达率分别为48.68%(37/76)、69.57%(48/69);LC3阳性表达率分别为46.05%(35/76)、66.67%(46/69);Beclin1阳性表达率分别为43.42%(33/76)、65.22%(45/69),两种组织中Tricellulin、LC3和Beclin1的阳性表达率比较差异有统计学意义(P均<0.05)。与正常结直肠上皮细胞相比,Tricellulin、LC3和Beclin1均在结直肠癌细胞中高表达,差异有统计学意义(P均<0.05)。Tricellulin、LC3及Beclin1表达与结直肠癌患者肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移和远处转移有关(P均<0.05)。结直肠癌组织中Tricellulin与LC3、Beclin1表达呈正相关(r分别为0.334、0.377,P均<0.05),LC3与Beclin1表达呈正相关(r=0.323,P<0.05)。结论 结直肠癌组织中Tricellulin、LC3和Beclin1均呈高表达,三者可能共同参与了结直肠癌的发生发展及侵袭转移。 展开更多
关键词 结直肠癌 细胞间紧密连接蛋白 细胞自噬相关蛋白 细胞自噬
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姜黄素联合阿糖胞苷对人急性髓系白血病细胞KG1a增殖、自噬及凋亡的影响 预览 被引量:1
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作者 马翠 陈雅琳 +1 位作者 白天鸽 魏虹 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2018年第7期946-952,共7页
目的探讨姜黄素(CUR)联合阿糖胞苷(Ara-C)对人急性髓系白血病KG1a细胞株增殖、凋亡的影响,及与自噬间的联系。方法 MTT法筛选CUR及Ara-C的最佳联合浓度并检测联合效应,分析CUR和Ara-C对KG1a细胞的增殖、自噬、凋亡和细胞周期的影响... 目的探讨姜黄素(CUR)联合阿糖胞苷(Ara-C)对人急性髓系白血病KG1a细胞株增殖、凋亡的影响,及与自噬间的联系。方法 MTT法筛选CUR及Ara-C的最佳联合浓度并检测联合效应,分析CUR和Ara-C对KG1a细胞的增殖、自噬、凋亡和细胞周期的影响,评估CUR和Ara-C的联合用药效果。结果 CUR和Ara-C均对KG1a细胞的增殖有明显抑制作用(P〈0.05),且呈一定的剂量、时间依赖性。经40μmol·L~(-1)CUR和0.5μmol·L~(-1)Ara-C联合处理的细胞抑制率明显高于各自剂量的单用组,经3-MA预处理的细胞存活率明显降低(P〈0.05)。吖啶橙染色观察到细胞内出现自噬泡,联合用药的表达率高于单用组,且能被3-MA抑制。联合组细胞的凋亡率高于单用组,经3-MA预处理组细胞凋亡率均高于各自单用组(P〈0.05)。细胞在G_0/G_1期比例明显多于S期。caspase-3、LC3、Beclin-1基因的表达上调,Bcl-2基因则下调(P〈0.05)。联合组caspase-3和Beclin-1的蛋白量明显高于单用组(P〈0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值升高。3-MA预处理组的Beclin-1表达降低,caspase-3的表达则升高(P〈0.05)。结论姜黄素能诱导KG1a细胞自噬与凋亡,并能提高白血病细胞对阿糖胞苷的敏感性,自噬抑制剂3-MA不仅能抑制该自噬,而且能促进其凋亡。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 姜黄素 阿糖胞苷 细胞自噬 细胞凋亡 自噬相关蛋白
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BmATG5蛋白作为分子开关调控家蚕细胞自噬和凋亡关系的研究进展
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作者 谢昆 李密杰 +4 位作者 蒋成砚 鲁海菊 孔琼 高波 杨婉莹 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2018年第2期315-320,共6页
细胞自噬(autophagy)和凋亡(apoptosis)是昆虫蜕皮与变态发育过程中细胞死亡最主要的2种方式。家蚕(Bombyx mori)是鳞翅目的模式昆虫之一,有关细胞自噬和凋亡的研究也比较深入,包括细胞自噬和凋亡的形态特征、诱导信号和通路、对... 细胞自噬(autophagy)和凋亡(apoptosis)是昆虫蜕皮与变态发育过程中细胞死亡最主要的2种方式。家蚕(Bombyx mori)是鳞翅目的模式昆虫之一,有关细胞自噬和凋亡的研究也比较深入,包括细胞自噬和凋亡的形态特征、诱导信号和通路、对蚕体发育的影响、自噬相关蛋白的鉴定和功能等。前期研究揭示家蚕自噬相关蛋白Bm ATG5和Bm ATG6具有自噬与凋亡的分子开关功能,但它们调控细胞凋亡的具体机制至今不详。本文在简要综述昆虫及家蚕细胞自噬和凋亡研究的基础上,重点介绍了Bm ATG5调控细胞凋亡分子机制研究的最新进展,为深入揭示Bm ATG5的分子调控功能,以及其应用于鳞翅目害虫防治和家蚕变态发育调控的研究提供参考依据。 展开更多
关键词 自噬 凋亡 ATG5蛋白 家蚕
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