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骨髓间充质干细胞对大鼠膀胱癌的治疗效果 预览
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作者 温英武 李强 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期320-324,共5页
目的:研究外源性骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠膀胱癌治疗的影响。方法:体外分离、培养雄性3周龄SD大鼠BMSCs传至3代备用。将60只SD雌性大鼠随机分为3组:对照组,模型组,BMSCs治疗组,每组20只。本研究应用经尿道膀胱灌注N-甲基亚硝... 目的:研究外源性骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠膀胱癌治疗的影响。方法:体外分离、培养雄性3周龄SD大鼠BMSCs传至3代备用。将60只SD雌性大鼠随机分为3组:对照组,模型组,BMSCs治疗组,每组20只。本研究应用经尿道膀胱灌注N-甲基亚硝基脈(MNU)的方法成功构建了大鼠膀胱癌模型。模型建立成功后,治疗组给予BMSCs(1×10^6 ml^-1)进行干预治疗,对照组、模型组给予等剂量的生理盐水。应用RT-PCR以及蛋白印迹法检测Notch1、Jagged1蛋白的定量表达。结果:实验结果显示,Notch1、Jagged1蛋白在对照组中仅有少量的表达,与对照组相比,模型组的表达有显著增高,同模型组相比,治疗组表达有所下降(P<0.05)。结论:初步证实BMSCs移植对大鼠膀胱癌的治疗有一定的作用。 展开更多
关键词 膀胱癌 BMSCS 大鼠 NOTCH1 JAGGED1
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右归丸含药血清对骨髓间充质干细胞Hedgehog信号通路影响
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作者 高举会 林庶茹 尚德阳 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2019年第10期44-46,共3页
目的:探究右归丸治疗骨质疏松症的疗效机制是否与激活Hedgehog信号通路,促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨分化有关,从而为右归丸预防治疗骨质疏松提供依据。方法:体外分离培养大鼠BMSCs,将SPF级大鼠随机分为4组,正常组、诱导液组、福... 目的:探究右归丸治疗骨质疏松症的疗效机制是否与激活Hedgehog信号通路,促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨分化有关,从而为右归丸预防治疗骨质疏松提供依据。方法:体外分离培养大鼠BMSCs,将SPF级大鼠随机分为4组,正常组、诱导液组、福善美组、右归丸组,对大鼠进行灌胃5 d。制备含药血清,并观察上述4组含药血清对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响。酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞中的音猬因子(Ssonic hedgehog,Shh)、12次跨膜蛋白(Ptched,Ptc)、Gli家族锌指蛋白-1(Gli family zinc finger-1,Gli-1)。结果:与正常组和阳性药物组及诱导液组相比,右归丸组的蛋白表达水平明显上升。结论:①Hedgehog信号通路的Shh、Ptc、Gli1的变化可能引起骨质疏松症;②右归丸可以诱导BMSCs内Shh、Ptc、Gli1蛋白的表达;③右归丸能够有效治疗骨质疏松,这种作用可能通过Hedgehog信号通路来实现。 展开更多
关键词 右归丸 骨质疏松症 HEDGEHOG信号通路 BMSCS SHH Ptc Gli-1
骨髓间充质干细胞联合清热燥湿凉血方对溃疡性结肠炎大鼠外周血Treg/Th17平衡及对NF-кB信号通路影响
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作者 李高兵 蔡东平 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2019年第7期57-60,共4页
目的:分析讨论大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合清热燥湿凉血方对溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型外周血Treg/Th17平衡及NF-κB信号通路的影响。方法:选取45只SD大鼠,随机分为正常组(n=11,造模24 h后予以1 mL/100 g生理盐水灌肠)及造模组(n=34... 目的:分析讨论大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合清热燥湿凉血方对溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型外周血Treg/Th17平衡及NF-κB信号通路的影响。方法:选取45只SD大鼠,随机分为正常组(n=11,造模24 h后予以1 mL/100 g生理盐水灌肠)及造模组(n=34,使用三硝基苯磺酸/乙醇复合局部灌肠法建造UC大鼠模型),将造模组分为模型组(n=11,造模24 h后予以1 mL/100 g生理盐水灌肠)、BMSCs组(n=11,造模24 h后尾静脉注射1×106 mL BMSCs悬液)及联合组(n=12,BMSCs组基础上给予1 mL/100 g清热燥湿凉血方混悬液),1次/d,各组均连续灌肠15 d。流式细胞术测定并计算各组大鼠外周血中Treg/Th17比值,实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测结肠组织中TLR4、核因子-кB(NF-κB)mRNA的表达。结果:与正常组相比,模型组Treg/Th17比值明显下降(P<0.01);与模型组相比,BMSCs组及联合组Treg/Th17比值均有明显回升(P<0.01);且联合组Treg/Th17比值明显高于BMSCs组(P<0.05)。与正常组相比,模型组大鼠组织中TLR4、NF-κB mRNA表达均有明显升高(P<0.01);与模型组相比,BMSCs组及联合组TLR4、NF-κB mRNA表达均有明显降低(P<0.01);且与BMSCs组相比,联合组TLR4、NF-κB mRNA的表达量明显有所降低(P<0.05)。结论:BMSCs+清热燥湿凉血方能够通过共同调节Treg/Th17细胞分化平衡,抑制TLR4/NF-κB信号通路基因的激活,达到减轻UC炎症反应的效果。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 BMSCS Treg/Th17平衡 清热燥湿凉血方 信号通路 NF-κB
从信号交联角度探讨骨髓脂肪化在原发性骨质疏松中的作用机制 预览
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作者 甘东浩 陈德强 +1 位作者 谭国庆 徐展望 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1176-1180,共5页
骨质疏松症好发于老年人或绝经后妇女,在骨量不断丢失的同时伴随着骨髓腔内的脂肪细胞增加。研究表明,骨质疏松患者的骨髓间充质干细胞成骨分化能力减弱,更易于向脂肪细胞分化,并促进成骨细胞凋亡,具体机制尚未完全阐明。本文拟从FoxO-... 骨质疏松症好发于老年人或绝经后妇女,在骨量不断丢失的同时伴随着骨髓腔内的脂肪细胞增加。研究表明,骨质疏松患者的骨髓间充质干细胞成骨分化能力减弱,更易于向脂肪细胞分化,并促进成骨细胞凋亡,具体机制尚未完全阐明。本文拟从FoxO-β-catenin-PPARγ信号轴角度对骨髓脂肪化在原发性骨质疏松中的作用机制进行综述,为该疾病的诊治提供新的着眼点。 展开更多
关键词 骨质疏松 骨髓脂肪化 信号交联 BMSCS 分化失衡
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骨髓间充质干细胞中与miRNA相关的研究进展 预览
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作者 毕会阳 高俊玲 《世界最新医学信息文摘》 2019年第52期68-69,共2页
骨髓间充质干细胞是一种多功能分化潜能细胞,在损伤组织修复重构中具有显著的'明星'效果,但临床应用仍存在许多限制性因素。伴随微小RNA(miRNA)在国际生物学研究领域中的逐渐升温,大量文献指出,miRNA在BMSCs中重要的调控机制,... 骨髓间充质干细胞是一种多功能分化潜能细胞,在损伤组织修复重构中具有显著的'明星'效果,但临床应用仍存在许多限制性因素。伴随微小RNA(miRNA)在国际生物学研究领域中的逐渐升温,大量文献指出,miRNA在BMSCs中重要的调控机制,能够微观促使BMSCs性能发生改变,一定程度上规避单纯骨髓间充质干细胞治疗中的实际限制因素。本文就骨髓间充质干细胞与miRNA间的相互作用机制作以归总。 展开更多
关键词 BMSCS MIRNA 调控 分化 临床应用
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miR-150在骨髓间充质干细胞分化中的作用及其可能的机制 预览
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作者 郭伟壮 兰涛 +1 位作者 杨欣建 田长庆 《黑龙江医学》 2019年第10期1143-1146,共4页
目的采用去卵巢法建立骨质疏松模型,并研究模型中miR-150的表达情况及其影响骨质疏松过程的可能机制。方法选取C57BL/6J采用卵巢摘除法建立骨质疏松模型,micro CT检测模型中骨质情况,并分离BMSCs细胞,流式细胞仪检测BMSCs表面抗原检测结... 目的采用去卵巢法建立骨质疏松模型,并研究模型中miR-150的表达情况及其影响骨质疏松过程的可能机制。方法选取C57BL/6J采用卵巢摘除法建立骨质疏松模型,micro CT检测模型中骨质情况,并分离BMSCs细胞,流式细胞仪检测BMSCs表面抗原检测结果,MTT生长曲线和克隆形成情况鉴定BMSCs细胞增殖情况,RT-PCR检测模型中miR-150、RUNX-2的表达情况,转染miR-150 mimics和inhibitor后RT-PCR和Western Blot检测细胞中RUNX-2的表达情况,成骨诱导及碱性磷酸酶(ALP)染色和茜红素检测不同处理组成骨能力变化情况。结果处理2个月后实验组骨小梁明显减少,稀疏,断裂,骨含量下降;BMSCs克隆数及细胞增殖能力6 d、8 d后显著降低,miR-150内源性表达异常升高,两组BMSCs表型CD29、CD44阳性,CD34、CD45阴性。模型建立成功后,实验组中RUNX-2表达显著降低,inhibitor抑制miR-150表达后,RUNX-2表达升高,miR-150 mimics组结果变化趋势与miR-150 inhibitor组相反。与对照组相比,mimics组ALP染色结果变浅,表达降低,而inhibitor组染色变深,表达升高。结论在成骨诱导过程中,miR-150可作为成骨负性调控因子,通过影响RUNX-2的表达影响成骨分化。 展开更多
关键词 RUNX-2 miR-150 BMSCS
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慢病毒载体介导miR-146a转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究 预览
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作者 买买提沙吾提阿吉·麦麦提 马原 朱旭 《新疆医科大学学报》 CAS 2019年第6期734-738,共5页
目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)应用于基因治疗的可行性。方法体外分离、培养并鉴定BMSCs,采用具有高效转染非分裂期细胞的慢病毒载系统将miR-146a导入BMSCs中,采用绿色荧光蛋白(EGFP)荧光技术、... 目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)应用于基因治疗的可行性。方法体外分离、培养并鉴定BMSCs,采用具有高效转染非分裂期细胞的慢病毒载系统将miR-146a导入BMSCs中,采用绿色荧光蛋白(EGFP)荧光技术、实时荧光定量PCR(qPCR)、Western Blot技术分别检测转染率、miR-146a及白介素-1(IL-1)受体相关激酶1(IRAK1)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)蛋白水平表达情况。结果经流式细胞技术鉴定第三代BMSCs中表达CD90、CD106,不表达CD45。慢病毒感染MSCs的感染复数为50最佳感染率可达80%。EGFP荧光表达自72 h时开始逐渐增强。转染的BMSCs中miR-146a高表达。结论(1)通过贴壁筛洗法能够获取纯度较高的BMSCs。(2)通过携带miR-146a的慢病毒载体成功转染BMSCs,并下调靶蛋白IL-1 IRAK1和TRAF6。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 慢病毒载体 增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 微小RNA-146a(miR-146a)
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大鼠骨髓间充质干细胞对子宫内膜的损伤修复
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作者 林彤 李冬宏 +5 位作者 张鲁榕 郭玉佳 陈丽红 陈杏婷 连梅 林晨 《中国妇产科临床杂志》 CSCD 北大核心 2019年第3期240-242,共3页
目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)移植对大鼠子宫内膜损伤的修复作用。方法 45只雌性SD大鼠分为三组:正常组、模型组、BMSCs组,每组15只。除正常组外,其余两组大鼠采用95%乙醇宫腔注射法建立子宫内... 目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)移植对大鼠子宫内膜损伤的修复作用。方法 45只雌性SD大鼠分为三组:正常组、模型组、BMSCs组,每组15只。除正常组外,其余两组大鼠采用95%乙醇宫腔注射法建立子宫内膜损伤模型。正常组不予任何干预,模型组造模后注射PBS溶液,BMSCs组注射体外分离培养的雄性SD大鼠BMSCs悬液。14 d后切除子宫,观察子宫内膜形态学改变、子宫内膜厚度、用免疫组织化学方法检测子宫内膜角蛋白、波形蛋白、整合素β3的表达,通过对移植后子宫内膜组织的SRY DNA原位杂交来定位源自雄性供体的细胞。结果与正常组相比,模型组大鼠子宫内膜厚度显著变薄[(276.25±59.46)μm vs(413.52±68.67)μm,P <0.01],而BMSCs组大鼠子宫内膜的厚度[(347.22±87.56)μm]较模型组显著增加(P <0.05)。与正常组相比,模型组大鼠子宫内膜角蛋白、波形蛋白、整合素β3表达明显减少(P <0.01),而BMSCs组较模型组明显增加(P <0.05)。BMSCs组损伤侧子宫内膜组织中有SRY阳性细胞的定植,模型组则未见。结论 BMSCs移植能不同程度地促进大鼠损伤子宫内膜的修复。 展开更多
关键词 大鼠骨髓充质干细胞 子宫损伤模型 大鼠 SRY DNA
大鼠BMSCs与ADSCs全基因组DNA甲基化差异分析 预览
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作者 陈旭涛 万卓 +2 位作者 韦梦影 杨国栋 宋应亮 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期170-175,共6页
目的:探讨BMSCs和ADSCs全基因组甲基化模式。方法:提取大鼠原代培养的BMSCs和ADSCs基因组,使用高通量测序技术检测BMSCs与ADSCs甲基化谱,筛选DNA甲基化差异基因,并对检测结果进行GO分析和Pathway分析。结果:基因组甲基化测序共检测到差... 目的:探讨BMSCs和ADSCs全基因组甲基化模式。方法:提取大鼠原代培养的BMSCs和ADSCs基因组,使用高通量测序技术检测BMSCs与ADSCs甲基化谱,筛选DNA甲基化差异基因,并对检测结果进行GO分析和Pathway分析。结果:基因组甲基化测序共检测到差异性甲基化区域112 545个,共富集到4 603条GO条目,其中610条GO条目具有显著差异(P<0.05)。通过Pathway分析可以富集到322条通路,其中有98条通路显著富集(P<0.05)。结论:BMSCs与ADSCs基因组存在大量甲基化差异位点,这些甲基化差异位点可能在BMSCs与ADSCs分化与免疫表型的差异有关。 展开更多
关键词 全基因组甲基化测序 骨髓间充质干细胞 脂肪间充质干细胞
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独正岗接骨膏对体外培养兔骨髓间充质干细胞成骨活性的影响
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作者 黄琼 向阳 曾楚华 《吉林中医药》 2019年第1期82-87,共6页
目的观察独正岗接骨膏对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨活性的影响。方法分离、培养兔骨髓间充质干细胞,选取生长良好第3代BMSCs分组培养。依据培养基中加入影响因子的不同分为4组:对照组,不加任何影响因子;独正岗接骨膏组,分别加入三种... 目的观察独正岗接骨膏对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨活性的影响。方法分离、培养兔骨髓间充质干细胞,选取生长良好第3代BMSCs分组培养。依据培养基中加入影响因子的不同分为4组:对照组,不加任何影响因子;独正岗接骨膏组,分别加入三种不同浓度独正岗接骨膏水提液(5%、10%、20%);Chordin干预组,分别于三种不同浓度独正岗接骨膏水提液(5%、10%、20%)中均加入Chordin(100μg/L)进行干预;Noggin干预组,分别于三种不同浓度独正岗接骨膏水提液(5%、10%、20%)中加入Noggin(100μg/L)进行干预。各组分别于培养第4、7、10天进行指标检测。采用MTT法测定各组BMSCs细胞相对数量;采用磷酸苯二钠法测定各组细胞ALP活性;采用Real-time PCR法检测各组细胞中BMP-2,7,9基因的表达情况。结果加药干预4、7 d后,与对照组相比,各组细胞均有明显增殖趋势(P<0.05),其中各组内10%浓度细胞增殖趋势显著高于同期5%、20%浓度(P<0.05),20%浓度细胞增殖趋势高于同组5%浓度(P<0.05);加药干预10 d后,各组细胞增殖趋势低于对照组(P<0.05);加药干预4、7、10 d后,除对照组外,各组细胞ALP活性、BMP-2,7,9基因表达量均在7 d时达到最高,随后开始下降(P<0.05);各组间比较,在各时间段(4、7、10 d),独正岗接骨膏组ALP活性、BMP-2,7,9基因表达量均高于同期Chordin干预组和Noggin干预组(P<0.05);结论独正岗接骨膏可能通过促进BMP的早期表达,促进BMSCs向OB分化,达到促进骨折愈合的作用。 展开更多
关键词 独正岗接骨膏 兔骨髓间充质干细胞 增殖
3D-printed surface promoting osteogenic differentiation and angiogenetic factor expression of BMSCs on Ti6Al4V implants and early osseointegration in vivo
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作者 Jinkai Zhang Wenhui Zhou +2 位作者 Hui Wang Kaili Lin Fengshan Chen 《材料科学技术学报:英文版》 SCIE EI CAS CSCD 2019年第2期336-343,共8页
Three-dimensional-printed(3 D-P) titanium implants display many advantages, such as design flexibility,higher efficiency, the capability to easily construct complex or customized structures, etc., and is believed to p... Three-dimensional-printed(3 D-P) titanium implants display many advantages, such as design flexibility,higher efficiency, the capability to easily construct complex or customized structures, etc., and is believed to potentially replace traditional implants. However, the biological performance of the 3 D-P titanium surface has not been investigated systematically. Herein, we analyzed the surface characteristics of 3 D-P Ti6 Al4 V implants and evaluated the biological responses of bone marrow derived mesenchymal stromal cells(BMSCs) to the 3 D-P surface in vitro. Moreover, after implantation into the rat femoral condyle for3 and 6 weeks, the osseointegration performance was evaluated. The results showed the 3 D-P Ti6 Al4 V implant presented distinct fluctuant macroscale rough surface and relatively better hydrophilicity which enhanced the adhesion, proliferation, osteogenic differentiation and angiogenetic factor expression of BMSCs. Moreover, the in vivo osseointegration performance was also better than that of the control group at the early stage. The present study suggested the 3 D-P titanium alloy is a promising candidate to be used as implant material. 展开更多
关键词 Three-dimensional PRINTING Titanium alloy BMSCS OSTEOGENESIS OSSEOINTEGRATION
近动脉生理脉动流对骨髓间充质干细胞向动脉内皮细胞方向分化的影响
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作者 黄艳 樊瑜波 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第A01期115-116,共2页
目的开展剪切应力对干细胞内皮向分化的影响研究对于组织工程化血管再生具有重要的意义。前期研究表明,定常层流剪切应力可以促进干细胞内皮向分化,不同的生化因子可以诱导干细胞分化为动脉或静脉内皮细胞,内皮细胞对定常层流和脉动流... 目的开展剪切应力对干细胞内皮向分化的影响研究对于组织工程化血管再生具有重要的意义。前期研究表明,定常层流剪切应力可以促进干细胞内皮向分化,不同的生化因子可以诱导干细胞分化为动脉或静脉内皮细胞,内皮细胞对定常层流和脉动流等不同流动方式非常敏感,因此,本文研究近动脉生理脉动流剪切应力对骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)向动脉内皮细胞方向分化的影响。方法采用密度梯度离心法分离培养BMSCs;利用本实验室自主研制的脉动流细胞力学实验系统对BMSCs加载不同流型和大小的剪切应力;通过免疫组化、RT-PCR、western blotting等检测动脉和静脉内皮细胞相关基因和蛋白的表达等。结果对照组细胞F-actin骨架稀疏、发散、无规律;定常层流剪切应力组沿流动腔方向排列;近动脉生理脉动流剪切应力组在细胞边缘处聚集成束。近动脉生理脉动流剪切应力组比定常层流剪切应力组表达更多的FLK-1、VE-cdherin和t和PA的mRNA;近动脉生理脉动流剪切应力组CD31和vWF蛋白的表达明显多定常层流剪切应力组;剪切应力使BMSCs具有很好的摄取Dil标记乙酰化低密度脂蛋白的能力。另外,近动脉生理脉动流切应力作用后BMSCs表达更多的动脉内皮细胞标志物EprinB2和Cx40,体外更好地形成微管状结构。结论近动脉生理脉动流剪切应力比定常层流剪切应力更好地诱导骨髓间充质干细胞向动脉内皮细胞方向分化,干细胞不仅能感受力学刺激,还能区分刺激的不同形式。因此,在血管组织工程种子细胞研究和生物反应器设计时,流型是需要引起重视的因素。 展开更多
关键词 动脉内皮细胞 BMSCS 骨髓间充质干细胞 静脉内皮细胞
去铁胺促进BMSCs靶向归巢和血管新生的实验研究
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作者 郑胜武 杜子婧 +5 位作者 黄雄梅 庄兢 林根辉 杨宇 丁昕 昝涛 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期85-92,共8页
目的应用低氧模拟剂去铁胺(desferrioxamine,DFO)模拟组织缺氧环境,观察其是否能促进BMSCs在大鼠随意皮瓣中的归巢和血管新生。方法分离、培养荧光素酶转基因Lewis大鼠的BMSCs和成纤维细胞(fibroblast,FB)。选用4周龄Lewis雄性大鼠40只... 目的应用低氧模拟剂去铁胺(desferrioxamine,DFO)模拟组织缺氧环境,观察其是否能促进BMSCs在大鼠随意皮瓣中的归巢和血管新生。方法分离、培养荧光素酶转基因Lewis大鼠的BMSCs和成纤维细胞(fibroblast,FB)。选用4周龄Lewis雄性大鼠40只,在其背部形成10cm×3cm大小矩形皮瓣,然后随机分成4组,每组10只:A组于大鼠球后静脉丛注射200μLPBS;B、C组同上法分别注射浓度为1×10^6个/mL的FB和BMSCs200μL;D组同C组方法注射BMSCs后,腹腔注射DFO[100mg/(kg·d)],连续7d。术后7d,观察各组大鼠皮瓣成活情况并计算皮瓣成活率,采用激光散斑血流成像仪检测皮瓣血流情况;术后30min及1、4、7、14d采用生物发光成像检测移植细胞在大鼠体内分布情况;术后7d行CD31免疫荧光染色计算毛细血管密度,免疫荧光检测基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor1,SDF-1)、EGF、FGF及Ki67的表达情况;利用荧光素酶抗体标记移植的BMSCs,免疫荧光染色观察其是否参与损伤组织修复。结果术后7d各组缺血皮瓣坏死边界已明确,C、D组皮瓣成活率明显高于A、B组,D组高于C组(P<0.05)。激光散斑血流成像仪检测示,C、D组皮瓣血流值显著高于A、B组,D组高于C组(P<0.05)。生物发光成像示BMSCs随时间变化逐渐向缺血缺氧区迁移,最终分布到缺血组织中;术后14dD组的光子信号明显强于其他组(P<0.05)。CD31免疫荧光染色示,C、D组毛细血管密度显著高于A、B组,D组高于C组(P<0.05)。C、D组SDF-1、EGF、FGF及Ki67的表达明显强于A、B组,D组强于C组。术后7d移植的荧光素酶标记BMSCs表达于组织的动脉弹力层、毛细血管处和毛囊处。结论DFO可以加速BMSCs向随意皮瓣缺氧区域的迁移归巢,加速BMSCs在缺血组织中的分化,同时促进缺血组织血管新生。 展开更多
关键词 低氧模拟剂 去铁胺 BMSCS 归巢 血管新生
粒细胞集落刺激因子动员BMSCs归巢治疗大鼠脊髓损伤的疗效观察
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作者 李杰 陈雷 +2 位作者 陈秋洪 胡德庆 林建华 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期93-100,共8页
目的观察粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)动员BMSCs归巢对大鼠脊髓损伤的治疗效果,评估G-CSF动员BMSCs治疗脊髓损伤的可行性。方法将24只成年健康雌性SD大鼠术前12 h于鼠尾静脉注射绿色荧光蛋白(green... 目的观察粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)动员BMSCs归巢对大鼠脊髓损伤的治疗效果,评估G-CSF动员BMSCs治疗脊髓损伤的可行性。方法将24只成年健康雌性SD大鼠术前12 h于鼠尾静脉注射绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)标记的BMSCs(GFP-BMSCs),并随机分为假手术组(A组)、假手术+G-CSF组(B组)、脊髓损伤组(C组)、脊髓损伤+G-CSF组(D组),每组6只。C、D组采用T10水平脊髓半切法建立脊髓损伤模型,A、B组仅行椎板切除,不损伤脊髓;术后1 h B、D组分别注射G-CSF(10μg/kg·d),连续注射3 d;A、C组注射等量生理盐水。术后1、3、7、14、21、28 d采用BBB评分行大鼠双后肢神经功能评估,并采用ELISA法检测血清TNF-α和基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor 1,SDF-1)表达。术后28 d处死大鼠取脊髓样品行免疫组织化学染色观察细胞因子SDF-1、BDNF、VEGF和TNF-α表达,免疫荧光染色观察GFP-BMSCs阳性细胞及双染荧光黄色的GFP/神经元核抗原(neuronal nuclei,NeuN)阳性神经元细胞和GFP/胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)阳性神经胶质细胞数;并采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果术后各时间点A、B组BBB评分较术前无明显变化;术后1 d,C、D组BBB评分降至最低,后逐渐上升。除术后1 d外,其余各时间点D组BBB评分均显著高于C组(P<0.05)。术后3、7、14、21、28 d,C、D组TNF-α和SDF-1含量均明显高于A、B组(P<0.05);但D组各时间点TNF-α含量显著低于C组,SDF-1含量显著高于C组(P<0.05)。免疫组织化学染色示,术后各时间点C、D组SDF-1、BDNF、VEGF和TNF-α表达均显著高于A、B组(P<0.05);D组SDF-1、BDNF、VEGF表达显著高于C组,TNF-α表达显著低于C组(P<0.05)。免疫荧光染色示,C、D组GFP-BMSCs、GFP/NeuN、GFP/GFAP阳性细胞数均显著多于A、B组,D组显著多于C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。TUNEL法检测示,C、D组凋亡细胞数目显著� 展开更多
关键词 脊髓损伤 粒细胞集落刺激因子 BMSCS 归巢
VEGF/PELA/bFGF混合微囊促进大鼠BMSCs成血管分化研究
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作者 赵胜利 殷杰 +2 位作者 于庆贺 张国炜 闵少雄 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期243-251,共9页
目的观察VEGF/聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸共聚物(polylactide-polyethyleneglycol-polylactic acid copolymer,PELA)/bFGF对SD大鼠BMSCs成血管分化作用。方法经全骨髓贴壁法分离培养BMSCs并传代。取第3代BMSCs行Wright-Giemsa染色及流式细... 目的观察VEGF/聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸共聚物(polylactide-polyethyleneglycol-polylactic acid copolymer,PELA)/bFGF对SD大鼠BMSCs成血管分化作用。方法经全骨髓贴壁法分离培养BMSCs并传代。取第3代BMSCs行Wright-Giemsa染色及流式细胞术鉴定。利用复乳溶剂挥发法制备VEGF/PELA/bFGF(A组)、PELA/bFGF(B组)、VEGF/PELA(C组)及PELA(D组)微囊。对PELA微囊行降解性能及细胞毒性检测,VEGF/PELA/bFGF混合微囊行VEGF及bFGF体外释放检测。取4组微囊缓释上清液分别与第3代BMSCs培养。培养1、3、7、14、20 d于倒置显微镜下观察细胞形态变化;21 d时,行摄取Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-labeled acetylated low density lipoprotein,Dil-ac-LDL)及FITC标记的荆豆凝集素(FITC-labeled ulex europaeus agglutinin I,FITC-UEA-I)实验,观察细胞摄取能力;同时行Matrigel基质胶小管形成实验,定量分析小管形成指标(节点数、交叉点数、主干数及主干长度)。结果经鉴定分离培养的细胞为BMSCs。PELA微囊在37℃恒温条件下降解时程超过20 d,且对BMSCs活力无明显影响。VEGF/PELA/bFGF混合微囊体外释放检测显示,至20 d时VEGF、bFGF累积释放量分别超过95%、80%。倒置显微镜下观察共培养期间A、B、C组BMSCs均出现形态学变化,其中A、B组20 d细胞呈典型内皮细胞"铺路石"样改变。荧光显微镜观察,A组双荧光标记细胞最多,B组次之,C组较少,D组几乎不具备内皮细胞特有的摄取功能。Matrigel基质胶小管形成实验示,A、B组诱导细胞在Matrigel基质胶上均形成网格状结构;定量分析显示A、B组节点数、交叉点数、主干数以及主干长度均多于C、D组(P<0.05)。A组节点数以及主干长度多于B组(P<0.05);两组交叉点数、主干数差异无统计学意义(P>0.05)。结论 VEGF/PELA/bFGF混合微囊具有显著促进BMSCs成血管分化的能力。 展开更多
关键词 BMSCS VEGF BFGF 聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸共聚物 内皮分化
BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶对BMSCs成骨活性的体外研究 预览
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作者 罗叙文 聂涛 《江西医药》 CAS 2019年第9期1030-1033,1062共5页
目的探究BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶联合BMSCs体外成骨活性。方法制备BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶可发挥BMP-9的缓控释放,通过增殖、电泳、Western Blot、迁移等实验观察BMSCs的迁移、增殖、分化及成骨的影响。结果BMP-9/壳聚... 目的探究BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶联合BMSCs体外成骨活性。方法制备BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶可发挥BMP-9的缓控释放,通过增殖、电泳、Western Blot、迁移等实验观察BMSCs的迁移、增殖、分化及成骨的影响。结果BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶发挥BMP-9的缓控释放,促进BMSCs定向迁移、增殖、定向分布、分化和骨形成活性。结论体外实验证实BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶缓控释放BMP-9可促进BMSCs定向迁移、增殖、定向分布、分化和成骨活性。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白9 水凝胶 MSCS 成骨活性
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紫草酸通过其抗氧化作用及激活PI3K/Akt信号通路抑制氧化应激导致的骨髓间充质干细胞的凋亡 预览
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作者 李汪洋 周友良 +5 位作者 李窕 曾朋 徐无忌 陆小龙 齐新宇 熊辉 《数字中医药(英文)》 2019年第1期29-40,共12页
目的尽管骨髓间充质干细胞的应用在骨科领域展现出巨大的潜力,但因移植后面临着严峻的氧化应激的环境,使得其应用受到限制。本实验将研究紫草酸对过氧化氢诱导的骨髓间充质干细胞早期凋亡的抗凋亡和抗氧化作用的研究。方法本次研究使用... 目的尽管骨髓间充质干细胞的应用在骨科领域展现出巨大的潜力,但因移植后面临着严峻的氧化应激的环境,使得其应用受到限制。本实验将研究紫草酸对过氧化氢诱导的骨髓间充质干细胞早期凋亡的抗凋亡和抗氧化作用的研究。方法本次研究使用过氧化氢诱导的氧化应激的细胞模型,利用相关试剂盒检测间充质干细胞内活性氧和超氧化物歧化酶水平,蛋白免疫印迹检测胞内p-AKT、Bax、Bcl-2的蛋白表达情况。结果紫草酸能显著抑制过氧化氢诱导的细胞核固缩,降低胞内活性氧的水平和增强超氧化物歧化酶的活性;而且,它抑制过氧化氢诱导的骨髓间充质干细胞凋亡与上调Bcl-2、p-Akt蛋白表达,下调Bax蛋白表达有关,其抑制作用能被PI3K抑制剂LY294002阻断。结论紫草酸能抑制过氧化氢诱导的骨髓间充质干细胞的氧化应激损伤,其抗氧化应激可能与它的抗氧化性及部分调节PI3K/Akt信号通路有关。因此,紫草酸预处理骨髓间充质干细胞将有助于改善干细胞移植治疗骨科疾病过程中的细胞存活的问题。 展开更多
关键词 氧化应激 紫草酸 凋亡 骨髓间充质干细胞 PI3K/AKT
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SDF-1α/CXCR4信号通路在轴向应力刺激促进骨再生中的作用研究
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作者 林剑彪 黄国锋 +6 位作者 叶文斌 朱聪 高建廷 刘国浚 江惠祥 吴本文 丁真奇 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期689-697,共9页
目的通过轴向应力刺激促进骨再生,观察基质细胞衍生因子1α/趋化因子CXC亚族受体4(stromal cell-derived factor 1α/cysteine X cysteine receptor 4,SDF-1α/CXCR4)信号通路变化,探讨轴向应力刺激促进骨再生的机制。方法取72只雄性新... 目的通过轴向应力刺激促进骨再生,观察基质细胞衍生因子1α/趋化因子CXC亚族受体4(stromal cell-derived factor 1α/cysteine X cysteine receptor 4,SDF-1α/CXCR4)信号通路变化,探讨轴向应力刺激促进骨再生的机制。方法取72只雄性新西兰大白兔,于右后肢胫骨近端内侧制备直径8 mm圆形皮质骨缺损并脱蛋白松质骨支架修复模型,随机分为3组(n=24)。A组腹腔注射PBS,B组术肢给予应力刺激治疗+腹腔注射PBS,C组术肢给予应力刺激治疗+腹腔注射CXCR4拮抗剂(AMD3100)。术后2、4、8、12周,摄X线片并采用Lane-Sandhu X线评分标准评价骨愈合情况,取标本行HE染色观察新生骨组织及支架降解,免疫组织化学染色观察VEGF、CXCR4表达水平;4、8周取标本Western blot检测SDF-1α及CXCR4蛋白表达水平;12周行Micro-CT检查,计算新生骨体积及新生骨密度。结果 X线片检查示,除术后2周各组骨缺损区及支架无明显变化外,4、8及12周时B组骨愈合评分均高于A、C组(P<0.05)。12周时Micro-CT扫描可见B组骨缺损修复、髓腔再通,新生骨体积及骨密度均高于A、C组(P<0.05)。HE染色显示,术后4周开始B组骨再生及支架降解均明显快于A、C组。免疫组织化学染色示,各组VEGF及CXCR4阳性表达均在4周达峰值;各时间点B组VEGF及CXCR4表达量均显著高于A、C组(P<0.05)。Western blot检测显示,4、8周时B组SDF-1α与CXCR4表达量均显著高于A、C组(P<0.05)。结论轴向应力刺激促进骨再生可能与其促进骨缺损区组织高表达SDF-1α,激活与其下游调控BMSCs募集的CXCR4信号有关。 展开更多
关键词 基质细胞衍生因子1Α 趋化因子CXC亚族受体4 BMSCS 轴向应力 骨再生
穿心莲内酯通过抑制TNF-α活化的NF-κB信号途径保护和促进成骨分化
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作者 丁丁 车千红 +2 位作者 徐樱溪 付瑜 孔娟 《解剖科学进展》 2019年第3期316-319,334共5页
目的探索穿心莲内酯是否能够抵抗TNF-α激活的NF-κB信号通路活化,从而保护和促进骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的成骨分化作用。方法碱性磷酸酶染色和茜素红染色观察穿心莲内酯对BMSCs在有或无TNF-α环境下对... 目的探索穿心莲内酯是否能够抵抗TNF-α激活的NF-κB信号通路活化,从而保护和促进骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的成骨分化作用。方法碱性磷酸酶染色和茜素红染色观察穿心莲内酯对BMSCs在有或无TNF-α环境下对成骨分化的保护和促进作用。通过real time PCR分析穿心莲内酯对BMSCs在有或无TNF-α环境下Runx2、Opn和Col1的调节作用。通过免疫荧光染色分析穿心莲内酯对TNF-α激活下NF-κB信号通路活化的影响,从而确定穿心莲内酯保护TNF-α对BMSCs细胞成骨分化影响的机制。结果与对照组相比,穿心莲内酯通过促进BMSCs中Runx2、Opn和Col1的表达,从而促进BMSCs成骨分化。同时,穿心莲内酯能够抑制TNF-α对NF-κB信号途径的激活作用,并能保护TNF-α对BMSCs成骨分化的抑制作用。结论穿心莲内酯通过抑制TNF-α激活的NF-κB信号途径保护和促进BMSCs成骨分化。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 BMSCS TNF-Α 成骨分化 NF-ΚB
Periostin表达上调对去势大鼠骨髓间充质干细胞生物学行为的作用
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作者 周维维 李豆豆 +3 位作者 张洁云 刘思麟 李春绒 曹猛 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第10期1864-1869,共6页
目的:探究Periostin(骨膜蛋白)表达上调对雌性去势大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化、细胞增殖与凋亡特性的作用。方法:通过去势手术建立雌性大鼠骨质疏松模型,待建模成功后分离培养并鉴定BMSCs,利用含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)... 目的:探究Periostin(骨膜蛋白)表达上调对雌性去势大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化、细胞增殖与凋亡特性的作用。方法:通过去势手术建立雌性大鼠骨质疏松模型,待建模成功后分离培养并鉴定BMSCs,利用含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和大鼠Periostin基因的重组慢病毒转染P3代BMSCs,成骨诱导后鉴定其成骨分化能力改变,流式细胞仪检测其细胞周期以及细胞凋亡率的变化。结果:成功建立骨质疏松模型;荧光显微镜下观察到绿色荧光提示慢病毒载体实现转染并表达目的蛋白;慢病毒转染组BMSCs成骨诱导后ALP及茜素红染色较去势组BMSCs染色加深;慢病毒转染组BMSCs的S期细胞比例为(17.07±0.56)%,显著高于去势组BMSCs的S期细胞比例(8.42±0.02)%,差异具有统计学意义(P<0.05);慢病毒转染组BMSCs的细胞凋亡率为(7.3±0.1)%,显著低于去势组BMSCs的凋亡率(12.05±0.55)%,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Periostin表达上调可提高去势骨髓间充质干细胞的成骨分化及细胞增殖能力,并对其凋亡有抑制作用。 展开更多
关键词 PERIOSTIN 绝经后骨质疏松症 骨髓间充质干细胞 成骨分化
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