期刊文献+
共找到21篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
棕榈酸对BRL-3A细胞胰岛素抵抗和脂代谢的影响 预览 被引量:1
1
作者 姚瑶 李龙龙 +1 位作者 姜志浩 马海田 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期130-136,共7页
[目的]分析不同浓度棕榈酸诱导对BRL-3A细胞(大鼠肝脏间质细胞)胰岛素抵抗和脂代谢的影响,为研究胰岛素抵抗发生的生物化学机制提供肝细胞模型。[方法]采用不同浓度(0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.25mmol·L^-1)棕榈酸处理BRL-3A细... [目的]分析不同浓度棕榈酸诱导对BRL-3A细胞(大鼠肝脏间质细胞)胰岛素抵抗和脂代谢的影响,为研究胰岛素抵抗发生的生物化学机制提供肝细胞模型。[方法]采用不同浓度(0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.25mmol·L^-1)棕榈酸处理BRL-3A细胞,分别检测细胞活力、细胞死亡率、甘油三酯含量和葡萄糖消耗量;RT-qPCR法检测脂代谢相关基因表达;免疫印迹法检测胰岛素抵抗相关蛋白表达。[结果]与对照组相比,0.25mmol·L^-1棕榈酸处理12~48h显著降低BRL-3A细胞活力,并显著增加其死亡率。0.15~0.25mmol·L^-1棕榈酸处理显著增加BRL-3A细胞中脂滴的堆积及甘油三酯含量,显著降低葡萄糖消耗量。0.15~0.25mmol·L^-1棕榈酸处理显著增加脂代谢合成相关基因表达,显著降低脂代谢分解相关基因和胰岛素抵抗相关蛋白的表达。[结论]0.15~0.25mmol·L^-1棕榈酸处理可诱发BRL-3A细胞发生脂代谢紊乱和胰岛素抵抗。考虑到剂量效应和细胞毒性,0.20mmol·L^-1棕榈酸处理BRL-3A细胞24h可作为后续探讨胰岛素抵抗机制相关研究理想模型构建的最佳条件。 展开更多
关键词 棕榈酸 BRL-3A细胞 胰岛素抵抗 脂代谢紊乱
在线阅读 免费下载
基于冷应激条件的下调肝细胞miR-383-5p对能量代谢的影响
2
作者 甄莉 臧树成 +4 位作者 王建发 郭丽 计红 陈勇 杨焕民 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1163-1169,共7页
使用不同浓度抑制剂对BRL-3A细胞进行不同时间的瞬时转染,利用qRT-PCR检测miR-383-5p相对表达量,筛选出在肝细胞建立miR-383-5p下调表达细胞模型的适宜条件。利用生物能量代谢监测分析仪检测下调miR-383-5p表达对大鼠肝细胞产酸率和氧... 使用不同浓度抑制剂对BRL-3A细胞进行不同时间的瞬时转染,利用qRT-PCR检测miR-383-5p相对表达量,筛选出在肝细胞建立miR-383-5p下调表达细胞模型的适宜条件。利用生物能量代谢监测分析仪检测下调miR-383-5p表达对大鼠肝细胞产酸率和氧耗率的影响。结果显示,100 pmol的inhibitor对BRL-3A细胞转染24 h后能够显著降低miR-383-5p的表达量(P<0.01),下调miR-383-5p表达可显著提高产酸率和氧耗率(P<0.01)。结果表明,miR-383-5p表达下调能够显著促进大鼠肝细胞的氧化磷酸化和糖酵解,可以增强能量代谢。 展开更多
关键词 miR-383-5p 能量代谢 冷应激 BRL-3A细胞
MiR-382促进大鼠正常肝细胞BRL-3A增殖
3
作者 高航 张春艳 +1 位作者 王凤娟 徐存拴 《解剖学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期437-442,共6页
目的探讨miR-382对大鼠正常肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响。方法 BRL-3A细胞瞬时转染miR-382的模拟物和抑制物48 h,MTT法测定细胞活性;流式细胞术检测细胞周期;Real-time PCR检测细胞增殖和凋亡相关基因的表达情况。结果在大鼠BRL-3A细... 目的探讨miR-382对大鼠正常肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响。方法 BRL-3A细胞瞬时转染miR-382的模拟物和抑制物48 h,MTT法测定细胞活性;流式细胞术检测细胞周期;Real-time PCR检测细胞增殖和凋亡相关基因的表达情况。结果在大鼠BRL-3A细胞中,转染模拟物可以显著增加miR-382的表达,转染抑制物可以显著降低miR-382的表达(P〈0.01)。MTT检测表明,miR-382过表达后,BRL-3A细胞活性明显提高;流式细胞术检测表明,miR-382过表达组S期的细胞数明显增加,而miR-382干涉组S期的细胞数明显减少;用Real-time PCR检测细胞增殖/凋亡相关基因mRNA表达水平表明,miR-382过表达后,BRL-3A细胞增殖相关基因增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2和Ccnd1的mRNA表达水平上调,细胞凋亡相关基因Caspase-3和Bax的mRNA表达水平下调,而miR-382干涉组与上述结果相反。结论 miR-382通过促进细胞增殖相关基因表达,抑制细胞凋亡相关基因表达而促进大鼠正常肝细胞BRL-3A增殖。 展开更多
关键词 MiR-382 BRL-3A细胞 细胞周期 细胞增殖 实时定量聚合酶链反应 大鼠
H2O2诱导BRL-3A细胞氧化损伤的研究 预览 被引量:2
4
作者 徐国银 谈为忠 +1 位作者 杨利慧 马海田 《中国畜牧兽医文摘》 2018年第4期75-77,199共4页
目的:本试验研究不同浓度过氧化氢(H2O2)对BRL-3A细胞氧化应激损伤的影响。方法:采用不同浓度H2O2处理BRL-3A细胞,MTT法检测细胞活力,试剂盒法检测蛋白质羰基含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽过氧化物酶(... 目的:本试验研究不同浓度过氧化氢(H2O2)对BRL-3A细胞氧化应激损伤的影响。方法:采用不同浓度H2O2处理BRL-3A细胞,MTT法检测细胞活力,试剂盒法检测蛋白质羰基含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及过氧化氢酶(CAT)活性,流式细胞术检测活性氧(ROS)和细胞凋亡率。结果:实验结果表明,150~500μmol·L-1H2O2处理可显著降低细胞活力和SOD、POD及CAT活性(P〈0.01)。与对照相比,150~500μmol·L-1 H2O2处理显著提高活性氧和蛋白质羰基含量以及细胞凋亡率(P〈0.01),并呈浓度明显的剂量依赖性。结论:150~500μmol·L-1 H2O2处理可导致BRL-3A细胞发生氧化应激损伤,且损伤程度与H2O2处理浓度呈现明显的相关性。研究结果为今后深入开展动物肝脏损伤和抗损伤保护机制的研究奠定基础。 展开更多
关键词 过氧化氢 BRL-3A细胞 肝脏 氧化应激
在线阅读 下载PDF
白藜芦醇对大鼠肝癌细胞CBRH7919凋亡的诱导作用研究 被引量:3
5
作者 卢乙众 刘小红 +1 位作者 路平 尚校军 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期821-823,共3页
目的研究白藜芦醇对大鼠肝癌细胞CBRH7919凋亡的诱导作用。方法将大鼠肝癌细胞CBRH7919分为2组:A组用80μmol·L^-1的白藜芦醇处理,B组加入等量的二甲基亚砜(DMSO);选取大鼠正常肝细胞BRL-3A作为对照组,也将细胞分为2组:C组用80... 目的研究白藜芦醇对大鼠肝癌细胞CBRH7919凋亡的诱导作用。方法将大鼠肝癌细胞CBRH7919分为2组:A组用80μmol·L^-1的白藜芦醇处理,B组加入等量的二甲基亚砜(DMSO);选取大鼠正常肝细胞BRL-3A作为对照组,也将细胞分为2组:C组用80μmol·L^-1的白藜芦醇处理,D组加入等量的DMSO;比较各组细胞的细胞活性、细胞周期变化、caspase-3、bcl-2和bax的表达水平和线粒体膜电位。结果 A组细胞的细胞活力较B组细胞的活力明显减弱(P〈0.05)。A、B、C、D组细胞G0/G1分别为(35.67±3.38)%,(48.12±5.01)%,(41.98±4.05)%,(41.87±4.11)%。A组细胞处于G0/G1期细胞比例明显少于B组(P〈0.05),且2组细胞的caspase-3、bcl-2和bax的表达水平和线粒体膜电位有明显差异(P〈0.05)。C组和D组细胞的细胞活性、细胞周期变化、caspase-3、bcl-2和bax的表达水平和线粒体膜电位无明显差异(P〉0.05)。结论白藜芦醇可有效诱导大鼠肝癌细胞CBRH7919的凋亡,其可能是通过调控Bcl-2/Bax的表达和引起线粒体膜的去极化发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 CBRH7919细胞 BRL-3A细胞 细胞凋亡
地塞米松对大鼠肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响
6
作者 常翠芳 赵卫明 +4 位作者 杨婧 李晓芳 陈莎莎 王改平 徐存拴 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期197-202,共6页
目的探讨地塞米松对体外培养大鼠肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的地塞米松处理BRL-3A细胞,于12、24、48、72、120 h后用MTT检测地塞米松对BRL-3A细胞活性的影响,同时分别用Annexin V-FITC双染法、PI单染色法、实时定量... 目的探讨地塞米松对体外培养大鼠肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的地塞米松处理BRL-3A细胞,于12、24、48、72、120 h后用MTT检测地塞米松对BRL-3A细胞活性的影响,同时分别用Annexin V-FITC双染法、PI单染色法、实时定量-聚合酶链反应(Real-time PCR)等方法检测地塞米松对BRL-3A细胞周期和凋亡的影响。结果 MTT检测表明,地塞米松能够抑制BRL-3A细胞的活性;Annexin V-FITC双染法分析显示,地塞米松具有显著促进BRL-3A细胞凋亡的效果;PI单染色法检测细胞周期分布情况表明,地塞米松处理后的细胞与对照组相比增殖能力减弱;用Real-time PCR检测促细胞凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和促增殖基因Ccnd1和Jun的mRNA表达情况,结果显示,用地塞米松处理后的细胞中Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9均表达上调,而Ccnd1和Jun均表达下调,说明地塞米松能促进BRL-3A细胞的凋亡。结论地塞米松可以促进BRL-3A细胞的凋亡,并抑制其增殖。 展开更多
关键词 地塞米松 BRL-3A细胞 流式细胞 实时定量-聚合酶链反应 大鼠
对乙酰氨基酚对大鼠原代肝细胞及BRL-3A细胞的毒性作用比较 被引量:3
7
作者 李曼 吴纯启 +4 位作者 许赫雷 谢丽华 韩刚 王全军 王茜莎 《药物评价研究》 CAS 2016年第3期349-356,共8页
目的建立大鼠原代肝细胞提取鉴定体系,比较对乙酰氨基酚(APAP)对大鼠原代肝细胞和永生化细胞BRL-3A的毒性作用。方法采用胶原酶原位两步灌流法提取大鼠原代肝细胞,通过过碘酸雪夫染色(PAS)和肝细胞双核结构进行鉴定;CCK 8法测定APA... 目的建立大鼠原代肝细胞提取鉴定体系,比较对乙酰氨基酚(APAP)对大鼠原代肝细胞和永生化细胞BRL-3A的毒性作用。方法采用胶原酶原位两步灌流法提取大鼠原代肝细胞,通过过碘酸雪夫染色(PAS)和肝细胞双核结构进行鉴定;CCK 8法测定APAP对大鼠原代肝细胞及BRL-3A细胞毒性作用的IC50;光学显微镜透射电镜观察APAP对2种细胞的损伤情况;全自动生化分析仪测定细胞上清AST、ALT、LDH、ALP、ALB、BUN、TP、GLU 8项生化指标的变化。结果PAS糖原染色鉴定获取的大鼠原代肝细胞,双核结构,细胞存活率浮动在80%~95%;最佳接种密度为60 000/cm^2,在第3~5天为对数生长期;APAP作用于大鼠原代肝细胞24 h的IC50为18.03 mmol/L,95%置信区间为(17.28~18.81)mmol/L,作用于BRL-3A的IC_(50)为20.05 mmol/L,95%置信区间为(18.99~21.17)mmol/L;透射电镜结果显示,在30 mmol/L APAP作用下,2种细胞细胞器肿胀,核膜破裂,细胞膜边界模糊不清;与对照组比较,大鼠原代肝细胞分泌的天冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)、葡萄糖(GLU)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)随着APAP浓度增加产生显著变化,而BRL-3A细胞几乎所有的酶学指标变化均差异不显著。结论与永生化细胞BRL-3A比较,大鼠原代肝细胞更能体现药物的肝脏毒性作用,但其体外培养存活时间较短;BRL-3A细胞缺少肝脏重要酶类,增加细胞内肝脏酶类是提升其作为肝脏毒性筛选模型的更好手段之一。 展开更多
关键词 大鼠原代肝细胞 原代培养 BRL-3A细胞 对乙酰氨基酚 肝毒性
紫杉醇、多西紫杉醇对大鼠肝细胞株BRL-3A细胞缝隙连接功能的影响 预览 被引量:1
8
作者 汤南 万洁 +2 位作者 陈博 张媛 陈鸿鹏 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第23期31-33,共3页
目的 观察紫杉醇、多西紫杉醇对大鼠肝细胞株BRL-3A细胞缝隙连接(GJ)功能的影响。方法 采用磺酰罗丹明B比色法筛选紫杉醇和多西紫杉醇不影响BRL-3A细胞生长的作用浓度。采用细胞接种荧光示踪法与划痕标记染料示踪技术检测紫杉醇与多... 目的 观察紫杉醇、多西紫杉醇对大鼠肝细胞株BRL-3A细胞缝隙连接(GJ)功能的影响。方法 采用磺酰罗丹明B比色法筛选紫杉醇和多西紫杉醇不影响BRL-3A细胞生长的作用浓度。采用细胞接种荧光示踪法与划痕标记染料示踪技术检测紫杉醇与多西紫杉醇作用BRL-3A后细胞GJ功能。结果 筛选出的紫杉醇、多西紫杉醇药物浓度均为0.01、0.1、0.5、1.0μmol/L。与溶剂对照组相比,0.01、0.1、0.5、1.0μmol/L紫杉醇处理的BRL-3A细胞Calcein荧光传递率降低(P均〈0.05),多西紫杉醇处理的BRL-3A细胞Calcein荧光传递率无明显变化。与溶剂对照组相比,紫杉醇作用细胞后LY向邻近细胞传递距离缩短,多西紫杉醇作用细胞后LY向邻近细胞传递距离无明显变化。结论 紫杉醇可显著抑制大鼠肝细胞株BRL-3A细胞GJ功能,而多西紫杉醇则不影响GJ功能。 展开更多
关键词 紫杉醇 多西紫杉醇 细胞缝隙链接 细胞 BRL-3A细胞
在线阅读 下载PDF
人胰岛素抑制大鼠肝细胞系BRL-3A凋亡且促增殖 预览 被引量:1
9
作者 王改平 陈莎莎 +4 位作者 李晓芳 杨婧 赵卫明 常翠芳 徐存拴 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第10期1320-1324,共5页
目的探讨人胰岛素对体外培养的大鼠肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响。方法人胰岛索作用于BRL-3A后,用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,qRT—PCR检测相关基因的表达。结果人胰岛素呈剂量依赖性地促进BRL-3A增殖(P... 目的探讨人胰岛素对体外培养的大鼠肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响。方法人胰岛索作用于BRL-3A后,用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,qRT—PCR检测相关基因的表达。结果人胰岛素呈剂量依赖性地促进BRL-3A增殖(P〈0.05或P〈0.01);500nmol/L人胰岛素处理3d后,处于G0/G1期的细胞比例显著下降(P〈0.05);促凋亡基因BAX表达下凋(P〈0.05),而促细胞增殖基因CCNA2表达上调(P〈0.05)。结论人胰岛素可通过下调BAX表达和上调CCNA2表达,从而抑制大鼠肝细胞BRL-3A凋亡,促进细胞增殖。 展开更多
关键词 人胰岛素 BRL-3A细胞 细胞凋亡 细胞周期
在线阅读 下载PDF
大鼠肝细胞系BRL-3A细胞Hsp70过表达条件的优化
10
作者 计红 薛琳琳 +8 位作者 耿仁德 郭景茹 臧琳 王建发 孔凡志 齐艳萍 杨焕民 郭丽 蒲丽君 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期34-38,209共6页
为了使热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)在BRL-3A细胞中过表达,试验以带有标签基因的腺病毒感染BRL-3A细胞,根据感染效率初筛病毒感染的最适浓度和作用时间;然后用初筛出的最适浓度(4×10^7,2×10^7,1×... 为了使热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)在BRL-3A细胞中过表达,试验以带有标签基因的腺病毒感染BRL-3A细胞,根据感染效率初筛病毒感染的最适浓度和作用时间;然后用初筛出的最适浓度(4×10^7,2×10^7,1×10^7,0.5×10^7,0.25×10^7pfu/mL)和时间(24h和48h)感染BRL-3A细胞,优化Hsp70重组腺病毒感染BRL-3A细胞的条件,并应用荧光定量RT—PCR和免疫蛋白印记方法检测Hsp70的mRNA和蛋白表达量。结果表明:当用1×10^-7pfu/mL病毒Ad—CMV—Hsp70按照最佳感染条件的感染复数(MOI)=20感染BRL一3A细胞48h时,能使Hsp70表达量比病毒空载体感染细胞和无病毒的对照组细胞极显著升高(P〈0.01)。 展开更多
关键词 热休克蛋白70(Hsp70) BRL-3A细胞 大鼠 过表达 腺病毒
缝隙连接增强肿瘤坏死因子-α的肝细胞毒性 预览
11
作者 陈章燕 原冬冬 +2 位作者 王韧 黄菲 黎尚荣 《中山大学学报:医学科学版》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期237-241,共5页
【目的】观察缝隙连接(GJ)功能改变对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)肝细胞毒性的影响。【方法】使用3种不同的方法:(1)GJ抑制剂预处理;(2)高低密度接种细胞;(3)小分子RNA转染抑制缝隙连接蛋白32(Cx32)表达等3种不同的方法抑制GJ的功能,观察... 【目的】观察缝隙连接(GJ)功能改变对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)肝细胞毒性的影响。【方法】使用3种不同的方法:(1)GJ抑制剂预处理;(2)高低密度接种细胞;(3)小分子RNA转染抑制缝隙连接蛋白32(Cx32)表达等3种不同的方法抑制GJ的功能,观察不同浓度TNF-α作用不同时间后对肝细胞毒性的影响。【结果】TNF-α的肝细胞毒性呈浓度和时间依赖性;抑制剂预处理后,TNF-α的肝细胞毒性明显降低(P<0.01);低密度接种细胞(细胞间无GJ形成)时,TNF-α的肝细胞毒性较高密度接种细胞(细胞间有GJ形成)明显降低(P<0.01);抑制Cx32的表达后,TNF-α的肝细胞毒性明显降低(P<0.01)。【结论】抑制由Cx32组成的GJ的功能后,TNF-α的肝细胞毒性明显降低,Cx32的表达对于TNF-α的肝细胞毒性作用具有重要的作用。 展开更多
关键词 缝隙连接 TNF-Α BRL-3A细胞 Cx32蛋白 油酸酰胺 SIRNA
在线阅读 下载PDF
H_2O_2诱导BRL-3A细胞模拟大鼠肝脏氧化应激损伤的研究 被引量:5
12
作者 臧琳 郭景茹 +5 位作者 郭爽 王慧 计红 甄莉 汪志 杨焕民 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期445-449,共5页
动物冷暴露过程中,肝脏因发生氧化应激而受损。利用不同浓度过氧化氢(H2O2)作用BRL-3A细胞,根据细胞存活率确定500μmol/L H2O2作用细胞3h为施加条件,然后通过检测蛋白质羰基含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P... 动物冷暴露过程中,肝脏因发生氧化应激而受损。利用不同浓度过氧化氢(H2O2)作用BRL-3A细胞,根据细胞存活率确定500μmol/L H2O2作用细胞3h为施加条件,然后通过检测蛋白质羰基含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性,探讨在细胞水平上建立冷暴露大鼠肝脏损伤模型。结果显示,H2O2处理组细胞存活率下降,蛋白质羰基含量升高,SOD、GSH-Px和CAT活性均降低。与对照组相比,其存活率、细胞内蛋白质羰基含量和CAT活性,均差异极显著(P〈0.01),细胞内SOD和GSH-Px活性,差异显著(P〈0.05)。结果表明,500μmol/L H2O2作用于BRL-3A细胞可导致氧化应激的发生,其相关指标与大鼠冷暴露后肝脏受损指标改变趋势类似,利用BRL-3A细胞建立冷暴露引起的肝脏氧化损伤模型,为进一步探讨冷应激对肝脏损伤的机制奠定基础。 展开更多
关键词 过氧化氢 BRL-3A细胞 冷暴露 肝脏 氧化应激
TGF-β1对大鼠肝细胞系BRL-3A凋亡和细胞周期的影响 预览 被引量:2
13
作者 王世美 郑素军 +5 位作者 邢欣悦 邓志华 刘梅 俞豪 李长勇 段钟平 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第16期1659-1665,共7页
目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠肝细胞系BRL-3A凋亡和细胞周期的影响.方法:MTT法检测TGF-β1对细胞增殖的影响:将BRL-3A细胞分为6组,分别给予不同浓度的TGF-β1(0、2、4、6、8、10μg/L),检测各组细胞24、36、48h时的... 目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠肝细胞系BRL-3A凋亡和细胞周期的影响.方法:MTT法检测TGF-β1对细胞增殖的影响:将BRL-3A细胞分为6组,分别给予不同浓度的TGF-β1(0、2、4、6、8、10μg/L),检测各组细胞24、36、48h时的增殖活性;进一步将BRL-3A细胞分为TGF-β1处理组和对照组,分别给予和不予TGF-β1(8μg/L),进行如下检测:流式细胞仪检测两组细胞24、36、48h时的凋亡情况和细胞周期分布;实时定量RT-PCR检测两组细胞24、36、48h时CyclinE、Cdk-2、EGF、HGF、Bcl-2、c-Myc、MMP9、NF-κB基因的表达变化.结果:MTT结果显示,各浓度TGF-β1组在24、36、48h时的细胞增殖活性差异无统计学意义;流式细胞仪分析结果显示,TGF-β1处理组24、36、48h时的细胞凋亡率和细胞周期分布与对照组间的差异均无统计学意义;实时定量RT-PCR发现,TGF-β1处理组相对于对照组,CyclinEmRNA、Cdk2mRNA、EGFmRNA在24h时分别下调至0.194±0.103、0.181±0.064、0.634±0.116倍,36h时分别下调至0.379±0.173、0.457±0.123、0.619±0.112倍,48h时分别上调至1.956±0.215、2.17±0.471、7.66±0.437倍;HGFmRNA在24、36、48h时均明显下调,分别至0.152±0.068、0.146±0.053、0.158±0.061倍;Bcl-2mRNA在24、36h时无统计学差异,48h时上调至1.567±0.115倍;c-MycmRNA、MMP9mRNA、NF-κBmRNA在3个时刻均上调,24h时分别至1.742±0.389、3.484±0.411、1.625±0.369倍,36h时分别至2.292±0.361、1.563±0.323、1.486±0.494倍,48h时分别至2.499±0.475、2.233±0.493、3.612±0.364倍.以上基因表达差异均有统计学意义(P〈0.05).结论:大鼠肝细胞系BRL-3A对TGF-β1促凋亡和细胞周期阻滞作用的敏感性低下,可能与非Smads途径的激活,NF-κB、Bcl-2、c-Myc、MMP9表达的上调有关. 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 BRL-3A细胞 细胞凋亡 细胞周期 肝再生
在线阅读 免费下载
三丁基锡对BRL-3A细胞活力以及凋亡的影响 预览 被引量:2
14
作者 朱欣 傅文宇 +1 位作者 王晓峰 徐立红 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 25-26,共2页
三丁基锡(tributyltin,TBT),已经广泛应用于农业杀虫、材料防腐和海洋船体涂料等。由于TBT可以从涂料释放到水中造成污染,不仅毒害水生生物,破坏生态环境,而且不可忽视的是它们都在食用水生生物机体内富集,这些生物被食用可造... 三丁基锡(tributyltin,TBT),已经广泛应用于农业杀虫、材料防腐和海洋船体涂料等。由于TBT可以从涂料释放到水中造成污染,不仅毒害水生生物,破坏生态环境,而且不可忽视的是它们都在食用水生生物机体内富集,这些生物被食用可造成对人体的危害,因此引起了研究者们的关注。国外已有很多文献报道了TBT诱导凋亡的事实,但是国内在此领域的研究较少,本实验采用正常大鼠肝细胞(BRL-3A细胞),研究TBT对其细胞活力的影响和凋亡的诱导作用。 展开更多
关键词 三丁基锡 BRL-3A细胞 细胞活力 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
U6嵌合型抗caspase—3核酶的体外及体内活性鉴定 被引量:1
15
作者 徐人欢 刘静 +5 位作者 徐丰 江舸 谢青 周霞秋 金由辛 王德宝 《中国科学:C辑》 CSCD 北大核心 2001年第4期353-359,共7页
教謈aspase-3基因在细胞凋亡中的作用,及不同表达核酶的载体在体内的表达效果,本研究对比了3种表达核酶的真核质粒,包括RNA聚合酶Ⅱ启动的p1.5RZ107(自我剪切)和pRZ107及RNA聚合酶Ⅲ启动的嵌合于U6中的pU6RZ107在体外和在肝细胞BRL... 教謈aspase-3基因在细胞凋亡中的作用,及不同表达核酶的载体在体内的表达效果,本研究对比了3种表达核酶的真核质粒,包括RNA聚合酶Ⅱ启动的p1.5RZ107(自我剪切)和pRZ107及RNA聚合酶Ⅲ启动的嵌合于U6中的pU6RZ107在体外和在肝细胞BRL-3A内的活性,以期获得细胞内切割活性较高的的核酶载体方面的信息。结果显示,具有自我剪切功能的质粒p1.5RZ107在体外切割靶RNA的效率最高,几达80%;而体内caspase-3在RNA,蛋白水平及蛋白功能活性上均显著下降,证明核酶在体内均可有效地表达并切割底物,以pU6RZ107切割效率最高,约达65%,pRZ107次之,p1.5RZ107最低。结果表明,U6嵌合型核酶pU6RZ107体内可有效地表达核酶及下调靶RNA水平,这不仅为探讨caspase-3在凋亡途径中的作用,也可为今后的基因治疗提供研究基础。 展开更多
关键词 核酶 caspacse-3基因 切割反应 BRL-3A细胞 细胞凋亡 U6嵌合型 体外活性 体内活性
自噬在镉致BRL3A细胞损伤中的保护作用 被引量:2
16
作者 谢俊泽 杨小康 +5 位作者 严磊 顾建红 袁燕 卞建春 刘宗平 刘学忠 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1899-1902,1915共5页
以大鼠肝细胞系(BRL3A)为模型,不同浓度的镉处理细胞,用免疫印迹法和免疫荧光法检测自噬标记分子LC3表达;通过添加雷帕霉素(自噬促进剂)和氯喹(自噬抑制剂)来升高和降低自噬水平,MTT法检测自噬水平艺变化对细胞活性的影响。... 以大鼠肝细胞系(BRL3A)为模型,不同浓度的镉处理细胞,用免疫印迹法和免疫荧光法检测自噬标记分子LC3表达;通过添加雷帕霉素(自噬促进剂)和氯喹(自噬抑制剂)来升高和降低自噬水平,MTT法检测自噬水平艺变化对细胞活性的影响。结果显示:与对照组相比,随着镉浓度的升高,细胞LC3—Ⅱ含量先上升后下降,8μmol/L时,LC3-Ⅱ含量最高,差异显著或极显著(P〈0.05或P〈0.01)。与镉处理组相比,自噬水平的上升可以显著提高细胞活性(P〈0.05),自噬水平的下降显著降低细胞活性(P〈0.05)。结果表明:镉可以引起BRL3A细胞自噬水平的上升,激活的自噬对镉致细胞损伤具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 自噬 BRL3A细胞 细胞活性
镉致大鼠BRL 3A细胞DNA及线粒体损伤 被引量:3
17
作者 张义冉 胡迪 +6 位作者 王家晶 王玲玲 姚路连 袁燕 顾建红 刘学忠 刘宗平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期759-763,共5页
为了研究镉对大鼠肝细胞系(BRL 3A细胞)DNA及线粒体损伤的作用,本研究选用0、10、20、40μmol/L的醋酸镉分别作用于BRL 3A细胞12h,利用四氮唑蓝比色分析法(MTT法)测定细胞存活率,显微镜观察各组细胞形态,通过彗星试验法检测细胞DNA... 为了研究镉对大鼠肝细胞系(BRL 3A细胞)DNA及线粒体损伤的作用,本研究选用0、10、20、40μmol/L的醋酸镉分别作用于BRL 3A细胞12h,利用四氮唑蓝比色分析法(MTT法)测定细胞存活率,显微镜观察各组细胞形态,通过彗星试验法检测细胞DNA的损伤,用透射电镜观察细胞线粒体超微结构,并检测细胞Caspase 3,9的活力。结果显示,随镉浓度的增大(10~40μmol/L),BRL 3A细胞存活率降低,拖尾率、尾长、尾部DNA含量、细胞Caspase 3,9的活力和线粒体变形肿胀以及空泡现象均呈增加趋势;表明镉可致BRL 3A细胞DNA及线粒体损伤,并呈剂量依赖关系。 展开更多
关键词 醋酸镉 BRL3A细胞 DNA损伤 线粒体损伤 彗星试验
MiR-199a-3p对大鼠肝细胞增殖的抑制作用 预览 被引量:2
18
作者 高红强 刘静 +3 位作者 李志强 王海雷 陈刚 李立 《昆明医科大学学报》 CAS 2017年第3期10-16,共7页
目的探讨miR-199a-3p对体外培养SD大鼠BRL-3A增殖的影响.方法人工合成miR-199a-3p模拟物、miR-199a-3p阻遏物及其各自阴性对照载体,分别转染BRL-3A肝细胞,转染后12 h、24 h、48 h和72h,应用定量PCR分析细胞中Cyclin D1和PCNA mRNA表达水... 目的探讨miR-199a-3p对体外培养SD大鼠BRL-3A增殖的影响.方法人工合成miR-199a-3p模拟物、miR-199a-3p阻遏物及其各自阴性对照载体,分别转染BRL-3A肝细胞,转染后12 h、24 h、48 h和72h,应用定量PCR分析细胞中Cyclin D1和PCNA mRNA表达水平,免疫组化方法观测Cyclin D1和PCNA阳性细胞比率,流式细胞仪检测细胞各周期比例和CCK 8法检测细胞增殖.实验分4组:mimics组,mi-nc组,inhibitors组和in-nc组.结果转染后24 h、48 h、72 h,inhibitors组肝细胞Cyclin D1和PCNA mRNA表达水平较in-nc组显著增多(P〈0.05),而mimics组肝细胞Cyclin D1和PCNA mRNA表达水平较mi-nc组显著降低(P〈0.05).inhibitors组肝细胞Cyclin D1和PCNA阳性细胞比率均高于mi-nc组(P〈0.05),而mimics组肝细胞Cyclin D1和PCNA阳性细胞比率均低于mi-nc组(P〈0.05).inhibitorss组肝细胞G0/G1期细胞比例明显低于in-nc组(P〈0.05),而mimics组肝细胞G0/G1期细胞比例明显高于mi-nc组(P〈0.05).同时,inhibitors组肝细胞S期细胞比例明显低于mi-nc组(P〈0.05)和in-nc组(P〈0.05).inhibitors组肝细胞增殖能力明显高于in-nc组(P〈0.05),mimics组肝细胞增殖能力明显低于mi-nc组(P〈0.05).结论 miR-199a-3p能够延长大鼠BRL-3A肝细胞周期和抑制肝细胞增殖,其作用可能与抑制Cyclin D1和PCNA的表达有关. 展开更多
关键词 miR-199a-3p 模拟物 阻遏物 大鼠BRL-3A肝细胞 细胞增殖 CYCLIN D1 PCNA
在线阅读 下载PDF
流体切应力促永生化大鼠BRL-3A肝细胞增殖的研究
19
作者 马心逸 喻智勇 +6 位作者 韦嘉 马铎 邓 刘巧云 高则海 蔡强 支春平 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1534-1537,共4页
目的观察不同大小流体切应力对永生化大鼠BRL-3A肝细胞株增殖动力学的影响。方法构建流体切应力加载细胞培养装置,以永生化大鼠BRL-3A肝细胞株为研究对象,实验分为未添加肝细胞生长因子(HGF)的A组和添加HGF的B组,各组加载0、12、24... 目的观察不同大小流体切应力对永生化大鼠BRL-3A肝细胞株增殖动力学的影响。方法构建流体切应力加载细胞培养装置,以永生化大鼠BRL-3A肝细胞株为研究对象,实验分为未添加肝细胞生长因子(HGF)的A组和添加HGF的B组,各组加载0、12、24dyn/cm^2大小的流体切应力,采用直接细胞计数和分光光度计测定细胞计数试剂盒(CCK-8)的方法检测12、24、48、168h细胞增殖动力学的变化。结果未加载流体切应力时,B组细胞增殖优于A组;加载流体切应力越大,A组和B组细胞均增殖更明显;在同一时间点加载同样大小切应力时,B组细胞增殖由于A组(P〈0.05)。加载大小为24dyn/cm^2的切应力培养细胞24h,A和B组的细胞计数和CCK-8分光光度计吸光度(A)值均达到最高值,细胞计数分别为A组(10.73±2.54)×10^6个和B组(15.93±2.00)×10^6个(P〈0.05),CCK-8分光光度计A值分别为A组(2.04±0.51)和B组(3.09±0.40,P〈0.05);24—72h逐渐下降,但仍高于未加载应力组(P〈0.05),168h则接近或略高于未加载应力组。结论流体切应力对永生化大鼠BRL-3A肝细胞株增殖有促进作用,而且,理化因素(流体切应力联合HGF)共同作用下肝细胞增殖更明显。 展开更多
关键词 肝再生 永生化大鼠BRL-3A肝细胞 流体切应力 细胞生长因子
NM23B对大鼠肝细胞体外增殖的影响 预览
20
作者 高红强 李志强 +4 位作者 王海雷 薛国友 刘静 陈刚 李立 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期23-25,共3页
目的观察NM23B在体外培养大鼠肝细胞增殖中的作用。方法构建NM23B过表达载体和干扰载体及其阴性对照载体,分别转染SD大鼠BRL-3A肝细胞,并设空白对照组(CON)、干扰NC组(siRNA-NC)、干扰组(siRNA)、过表达组(OE)、过表达NC组(OE... 目的观察NM23B在体外培养大鼠肝细胞增殖中的作用。方法构建NM23B过表达载体和干扰载体及其阴性对照载体,分别转染SD大鼠BRL-3A肝细胞,并设空白对照组(CON)、干扰NC组(siRNA-NC)、干扰组(siRNA)、过表达组(OE)、过表达NC组(OE-NC),通过定量PCR分析各组细胞中Cyclin D1、NM23B和PCNA的mRNA变化;Western印迹分析比较各组细胞中Cyclin D1、NM23B和PCNA蛋白的变化;流式细胞仪检测各组细胞周期比例;用CCK 8法检测细胞增殖。结果 OE组Cyclin D1、NM23B和PCNA的mRNA及蛋白的表达量较CON组显著增多(P〈0.05);另一方面,siRNA组的Cyclin D1、NM23B和PCNA的mRNA及蛋白的表达量较CON组显著降低(P〈0.05),干扰NC组和OE-NC组与CON组相比无统计学差异(P〉0.05)。OE组的G0/G1期细胞比例明显低于CON组(P〈0.05),siRNA组的G_0/G_1期细胞比例明显高于CON组(P〈0.05)。同时,OE组的S期细胞比例明显高于CON组(P〈0.05),siRNA组的S期细胞比例明显低于CON组(P〈0.05),siRNA-NC组和OE-NC组与CON组相比无统计学差异(P〉0.05)。CCK-8检测细胞增殖表明OE组的增殖速度明显快于CON组(P〈0.05),siRNA组的增殖速度明显慢于CON组(P〈0.05),siRNA-NC组和OE-NC组与CON组相比无统计学差异(P〉0.05)。结论过表达NM23B可以加强Cyclin D1、PCNA的表达,缩短细胞周期,从而促进肝细胞增殖;干扰NM23B表达则削弱了Cyclin D1、PCNA的表达,延长细胞周期,从而抑制肝细胞增殖。证实了NM23B在体外培养SD大鼠肝细胞增殖中的作用,为后续体内实验奠定了理论基础。 展开更多
关键词 NM23B 大鼠BRL-3A肝细胞 细胞周期 增殖
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈