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芥子碱对H2O2诱导BMSCs成脂分化的影响 预览
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作者 黄炜平 李可 +2 位作者 刘爱军 陈东风 王洪琦 《中国病理生理杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期918-924,共7页
目的:探讨中药有效单体芥子碱对过氧化氢(H2O2)诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成脂分化的影响。方法 :先通过全骨髓培养法和流式细胞术鉴定并筛选未分化的大鼠BMSCs;一方面利用H2O2诱导BMSCs成... 目的:探讨中药有效单体芥子碱对过氧化氢(H2O2)诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成脂分化的影响。方法 :先通过全骨髓培养法和流式细胞术鉴定并筛选未分化的大鼠BMSCs;一方面利用H2O2诱导BMSCs成脂分化建立模型,一方面采用CCK-8实验检测芥子碱对BMSCs的毒性作用;模型建立成功与芥子碱药用浓度确定后进行油红O半定量实验检测细胞中脂滴含量,筛选出最佳的药物浓度;随后采用油红O染色拍片直接观察药物干预24 h后对BMSCs成脂分化的影响,并且采用qPCR和Western blot实验检测BMSCs中成脂分化相关蛋白——脂肪细胞蛋白2(aP2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和葡萄糖转运蛋白4(Glut4)的变化情况。结果:浓度为200μmol/L的H2O2作用1 h可诱导BMSCs成脂分化;CCK-8实验结果显示在芥子碱浓度〈40μmol/L的条件下对BMSCs的活力没有显著影响,同时结合油红O半定量实验结果筛选出芥子碱抑制其成脂分化的最佳浓度为15μmol/L;油红O染色实验观察到芥子碱组(15μmol/L)组脂滴较模型组数量明显减少,qPCR和Western blot实验结果亦显示正常对照组和芥子碱组aP2、PPARγ和Glut4表达均低于模型组(P〈0.01)。结论:芥子碱能够抑制H2O2诱导BMSCs向脂肪细胞分化,其机制可能与PPARγ/AMPK信号通路有关。 展开更多
关键词 芥子碱 骨髓间充质干细胞 成脂分化 过氧化氢 氧化应激
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养正消积药粉在常氧和低氧条件下对转染目的基因骨髓间充质干细胞生物活性的影响 预览 被引量:1
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作者 罗利琼 卢圆媛 +4 位作者 丁滨 曾慧明 冯刚 陈伟 丁亚文 《疑难病杂志》 CAS 2018年第8期838-841,共4页
目的观察养正消积药粉在常氧和低氧条件下作用不同时间后对转染目的基因的骨髓间充质干细胞(rBMSCs)增殖能力、黏附活性和迁移能力的影响。方法在湖北中医药大学基础实验室进行实验。应用养正消积药粉在常氧和低氧条件下处理rBMSCs,观... 目的观察养正消积药粉在常氧和低氧条件下作用不同时间后对转染目的基因的骨髓间充质干细胞(rBMSCs)增殖能力、黏附活性和迁移能力的影响。方法在湖北中医药大学基础实验室进行实验。应用养正消积药粉在常氧和低氧条件下处理rBMSCs,观察rBMSCs的增殖能力、黏附能力、迁移能力等生物活性的变化,取对数生存期的rBMSCs种于96孔培养板,加入养正消积药粉(实验组):1μg/ml(A组)、5μg/ml(B组)、10μg/ml(C组)、20μg/ml(D组)。置37℃常氧或低氧(5%)条件下培养24、48、72 h。以不含养正消积药粉组为对照组。MTT法检测rBMSCs增殖能力,LDH检测rBMSCs黏附能力,Transwell检测rBMSCs迁移能力。结果在常氧和低氧条件下经养正消积药粉分别处理rBMSCs 24、48、72 h后,各组细胞增殖能力差异无统计学意义(P〉0.05)。在常氧条件下经养正消积药粉分别处理后0.5 h,细胞黏附能力差异无统计学意义(P〉0.05);处理后1 h,对照组和实验组细胞黏附能力差异有统计学意义(P〈0.05),但C组和D组组间比较差异无统计学意义(P〉0.05);与处理后1 h比较,处理后2 h和3 h的结果差异无统计学意义(P〉0.05)。在低氧条件下经养正消积药粉分别处理后0.5 h、1 h,对照组和实验组细胞黏附能力差异无统计学意义(P〉0.05);处理后2 h,对照组和实验组细胞黏附能力差异有统计学意义(P〈0.05);处理后3 h与处理后2 h比较差异也无统计学意义(P〉0.05)。在常氧和低氧条件下经养正消积药粉分别处理后3、6、12、24 h,细胞迁移情况差异无统计学意义(P〉0.05)。结论养正消积药粉不能增强rBMSCs增殖能力和迁移能力;在适当浓度和适当时间的作用下能增强rBMSCs的黏附能力,但在低氧条件下细胞黏附能力有所下降。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 增殖 黏附 迁移 养正消积药粉
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