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稳定表达水貂SLAM受体BHK-21细胞系的建立及初步应用
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作者 王雅文 王小龙 +7 位作者 赵建军 史宁 张蕾 刘昊 韩坤 陈杰 孙杰 闫喜军 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第19期180-182,243,244共5页
为了建立易于犬瘟热病毒(CDV)培养增殖的细胞系,试验采用BHK-21细胞为亲本细胞,将表达水貂信号淋巴细胞激活分子(SLAM)的真核表达质粒pDisplay-mink SLAM转染到细胞中,通过G418压力筛选并结合有限稀释法等方法成功构建出稳定表达水... 为了建立易于犬瘟热病毒(CDV)培养增殖的细胞系,试验采用BHK-21细胞为亲本细胞,将表达水貂信号淋巴细胞激活分子(SLAM)的真核表达质粒pDisplay-mink SLAM转染到细胞中,通过G418压力筛选并结合有限稀释法等方法成功构建出稳定表达水貂SLAM的单克隆细胞系BMS,并采用间接荧光免疫和PCR等方法进行初步鉴定。结果表明:应用该细胞系可有效提高CDV分离效率,并成功分离得到山东诸城水貂、狐狸CDV各1株。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 信号淋巴细胞激活分子 有限稀释法 单克隆细胞系 病毒分离
犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬冠状病毒三重PCR检测方法的建立
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作者 苏霞 周宏专 +1 位作者 常彦嫣 杨兵 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第7期103-107,共5页
参考Gen Bank上登录的犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)和犬冠状病毒(CCV)的基因序列保守片段分别设计特异性引物,建立了可以同时检测CDV(684 bp)、CPV(213 bp)和CCV(417 bp)的三重PCR方法。特异性结果表明,所建立的体系... 参考Gen Bank上登录的犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)和犬冠状病毒(CCV)的基因序列保守片段分别设计特异性引物,建立了可以同时检测CDV(684 bp)、CPV(213 bp)和CCV(417 bp)的三重PCR方法。特异性结果表明,所建立的体系只能扩增CDV、CPV、CCV,而不能扩增犬腺病毒Ⅱ型(CAV-Ⅱ)和犬副流感病毒(CPIV);敏感性试验表明,该方法对CDV、CPV和CCV的最低核酸检测量分别为1.39×10^- 2、6.0×10^-2和6.7×10^-2 copies/L,其敏感性比普通PCR高100倍。采用建立的三重PCR方法对北京、山东地区收集的临床粪便样品进行检测结果表明,使用三重PCR体系的扩增结果与单项PCR扩增结果一致,符合率为100%。以上结果表明该方法快速、敏感、特异性强,对上述3种病毒能够进行快速鉴定诊断,为临床诊断提供了快速简便的方法。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 犬细小病毒 犬冠状病毒 三重PCR
犬瘟热病毒重组H蛋白间接ELISA检测方法的建立 被引量:1
3
作者 蔡孜萌 范威宏 +2 位作者 张洪亮 姜合祥 单虎 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第11期69-74,共6页
为建立一种检测水貂犬瘟热病毒(CDV)血清抗体的间接ELISA方法,将CDV的血凝素蛋白(H)基因的主要抗原表位片段克隆至p ET-30a-c(+)载体中,转化至感受态细胞Rosetta(DE3)中进行诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western-b... 为建立一种检测水貂犬瘟热病毒(CDV)血清抗体的间接ELISA方法,将CDV的血凝素蛋白(H)基因的主要抗原表位片段克隆至p ET-30a-c(+)载体中,转化至感受态细胞Rosetta(DE3)中进行诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。以纯化的重组H蛋白作为包被抗原,建立了检测CDV抗体的间接ELISA方法,并证实该方法具有良好的特异性、重复性和敏感性。采用建立的方法与国外商品化的犬瘟热抗体检测试剂盒对80份血清进行检测,两者符合率为92.5%。本研究建立的间接ELISA方法为水貂抗体水平检测和评价犬瘟热疫苗免疫效力提供了简便快速的方法。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 原核表达 H蛋白 间接ELISA
乌苏里貉IgG Fc片段克隆表达及免疫交叉源性分析
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作者 赵翠 刘玲红 +4 位作者 郭树源 庞晓茹 宋道祯 付石军 常维山 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1864-1868,1890共6页
为研究乌苏里貉IgGFc与犬IgG间的免疫交叉源性,本研究采用斑点酶联免疫吸附法(dot—ELISA)初步确定犬与乌苏里貉血清抗体间存在较强免疫交叉反应源性;通过RTPCR成功克隆乌苏里貉IgGFc片段基因,构建pcDNA3.1-IgG(Fc)真核表达质... 为研究乌苏里貉IgGFc与犬IgG间的免疫交叉源性,本研究采用斑点酶联免疫吸附法(dot—ELISA)初步确定犬与乌苏里貉血清抗体间存在较强免疫交叉反应源性;通过RTPCR成功克隆乌苏里貉IgGFc片段基因,构建pcDNA3.1-IgG(Fc)真核表达质粒,转染HEK293T细胞,借助间接免疫荧光试验(IFA))证实该蛋白成功表达(大小约为22000),免疫印迹(Western blot)试验证明该蛋白与抗犬IgG存在免疫结合反应。结果表明,乌苏里貉IgG Fc与犬IgG间存在强烈的免疫交叉源性,应用犬源高免血清或犬免疫球蛋白治疗貉犬瘟热具有可行性,同时为今后构建特定抗原基因与IgG Fc基因融合表达载体,研究DNA疫苗及Fc的生物佐剂提供了理论依据。 展开更多
关键词 乌苏里貉 免疫球蛋白(G)Fc 真核表达 免疫交叉反应 犬瘟热
“融合新闻”CDV助您快人一步 预览
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《广播电视信息》 2016年第9期106-107,共2页
8月23日,BIRTV2016主题报告会在北京国际饭店紫金大厅降重召开,新奥特(CDV)事业部副总监吕辉在现场作了“构建融合型新闻制播体系”的主题报告。
关键词 新闻 CDV 主题报告 报告会
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大熊猫犬瘟热病毒LG株的分离鉴定 预览 被引量:1
6
作者 岳进华 刘鹤媛 +4 位作者 周铭 高洋 杨启明 李雯丽 陈德坤 《动物医学进展》 北大核心 2016年第10期60-63,共4页
为获得大熊猫犬瘟热病毒株,采集死亡大熊猫的心脏、肺、肝病料,研磨并反复冻融后收集上清液接种Vero细胞,待出现细胞病变(CPE)后,收集病毒液。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定病毒分离株,测定病毒TCID50,动物回归试验测定其毒力... 为获得大熊猫犬瘟热病毒株,采集死亡大熊猫的心脏、肺、肝病料,研磨并反复冻融后收集上清液接种Vero细胞,待出现细胞病变(CPE)后,收集病毒液。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定病毒分离株,测定病毒TCID50,动物回归试验测定其毒力。结果显示,盲传到第5代时,Vero细胞出现圆缩、聚集、脱落等病变;PCR扩增出287bp片段,与预期相符;测序结果显示,该毒株与已发表的CDV SD(14)11毒株(亚洲-Ⅰ型)的同源性为98%;毒株的TCID50为10^-5.2/mL;幼犬感染分离毒株后出现体温升高、鼻头发干、拉稀、眼鼻分泌出水样分泌物等症状。本研究成功分离出大熊猫源犬瘟热病毒株。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 大熊猫 分离鉴定
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CDV和CPV及CCV多重纳米PCR检测方法的建立与应用 被引量:3
7
作者 罗亚坤 刘琪 +4 位作者 蔺文成 王静 周灵 梁琳 崔尚金 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1207-1212,共6页
参考Gen Bank上登录的犬瘟热病毒(CDV)N基因序列、犬细小病毒(CPV)VP2基因序列和犬冠状病毒(CCV)M基因序列的保守型片段分别设计特异性引物,建立了CPV(193 bp)、CDV(500 bp)和CCV(780bp)的多重纳米PCR(nano-mPCR)检测方法... 参考Gen Bank上登录的犬瘟热病毒(CDV)N基因序列、犬细小病毒(CPV)VP2基因序列和犬冠状病毒(CCV)M基因序列的保守型片段分别设计特异性引物,建立了CPV(193 bp)、CDV(500 bp)和CCV(780bp)的多重纳米PCR(nano-mPCR)检测方法,同时考查所建立nano-mPCR检测方法的特异性和敏感性。结果表明,该方法特异性和敏感性良好,对CPV、CDV和CCV的最低核酸检测量分别为1.39×10~2、6.0×10~2和6.7×10~2copies/L,其敏感性比普通PCR高100倍。临床样品的检测结果表明,nano-mPCR的建立为CDV、CPV和CCV的单独或混合感染进行早期快速、灵敏、准确的鉴别诊断提供了新方法。 展开更多
关键词 多重纳米PCR 犬瘟热病毒 犬细小病毒 犬冠状病毒 检测 流行病学
2009年~2014年河南省部分地区犬细小病毒病流行病学调查 预览 被引量:2
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作者 赵战勤 刘会胜 +5 位作者 彭春平 龙塔 常世恺 丁轲 段笑笑 单虎 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期453-457,共5页
为了解2009年-2014年河南省部分地区犬细小病毒(CPV)病流行病学情况,本研究对2009年3月-2014年12月来河南省6个地区(洛阳市、安阳市、焦作市、三门峡市、新乡市和郑州市)部分宠物医院就诊的19 907个病例进行了调查。结果表明:CPV... 为了解2009年-2014年河南省部分地区犬细小病毒(CPV)病流行病学情况,本研究对2009年3月-2014年12月来河南省6个地区(洛阳市、安阳市、焦作市、三门峡市、新乡市和郑州市)部分宠物医院就诊的19 907个病例进行了调查。结果表明:CPV病的发病率为5.87%(1 169/19 907);6年时间内CPV病的发病率相对稳定,一年四季均可发生,但春季和秋季发病率最高;CPV主要感染4月龄以内的幼犬;公犬与母犬的发病率无明显差别;中小型犬、纯种犬和未接种疫苗的犬感染比例最高;阳性犬主要是从市场购买的幼龄犬;CPV可以与球虫、犬瘟热病毒(CDV)、犬冠状病毒、钩虫、蛔虫、绦虫、焦虫和线虫混合感染,与球虫的混合感染比例较高,与CDV混合感染比例次之。本研究调查的样品数量和来源较广,在一定程度上代表了CPV病在河南省的实际发病情况,为该病的进一步防制提供了现地调查依据。 展开更多
关键词 犬细小病毒 流行病学 协同感染 犬瘟热病毒 球虫
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融合全媒体·智慧云平台——CDV实践之路 预览 被引量:1
9
作者 舒文琦 《现代电视技术》 2015年第8期36-39,共4页
如果把每年的CCBN比成广电行业的风向标.那么ITTC一定是属于广电行业技术体系的盛宴.在这里无论是电视台还是技术公司总结着去年技术给广电带来的变化.同时畅想着未来科技能给广电会带来哪些不同。尤其今年,媒体行业正处在规划着下... 如果把每年的CCBN比成广电行业的风向标.那么ITTC一定是属于广电行业技术体系的盛宴.在这里无论是电视台还是技术公司总结着去年技术给广电带来的变化.同时畅想着未来科技能给广电会带来哪些不同。尤其今年,媒体行业正处在规划着下一个五年计划的特殊时期,那么下一个五年计划是什么.毫无疑问地落在了智慧的融合媒体云平台身上。 展开更多
关键词 全媒体 智慧 CDV 平台 广电行业 CCBN 媒体行业 技术
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国内媒体资产管理服务的困境与营销策略创新 预览
10
作者 李丽 刘畅 刘近奇 《天津职业院校联合学报》 2015年第7期102-105,共4页
媒体资产管理在中国兴起并得到推广利用,本文从媒体资产管理服务营销的概念入手,总结国内媒体资产管理缺乏营销策略规划,专业人才培养力度不够和品牌策略失当这三方面的不足,并希望从分类细化目标客户,丰富产品结构,打造专业媒资服务团... 媒体资产管理在中国兴起并得到推广利用,本文从媒体资产管理服务营销的概念入手,总结国内媒体资产管理缺乏营销策略规划,专业人才培养力度不够和品牌策略失当这三方面的不足,并希望从分类细化目标客户,丰富产品结构,打造专业媒资服务团队这三个方面探寻媒体资产管理服务营销策略的创新方法。 展开更多
关键词 媒体资产管理 服务营销 新奥特 创新
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CDV车型在中国的发展动向 预览 被引量:2
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作者 周鹏 杜金玲 《汽车纵横》 2014年第5期96-99,共4页
自从2010年NV200和五菱宏光上市以来,CDV(Car Derived Van,轿车平台厢式车)这种兼具轿车与厢式货车特征的车型就受到了大家的普遍关注,一方面是由于这种车型在中国市场迅速发展,被广大消费者广泛认可;
关键词 中国市场 车型 CDV 厢式货车 VAN 厢式车 消费者 轿车
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郑州日产的“风度” 预览
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作者 赵欢 《时代汽车》 2014年第6期56-57,共2页
郑州日产计划在未来三年(2015年-2017年),面向市场推出五款新车型。包括东风风度品牌的三款城市跨界型SUV、MPV和CDV,以及NISSAN品牌的全新皮卡和全新SUV产品,最终实现从2013年11.8万台到2016年20万台的销量,完成年均超过20%的... 郑州日产计划在未来三年(2015年-2017年),面向市场推出五款新车型。包括东风风度品牌的三款城市跨界型SUV、MPV和CDV,以及NISSAN品牌的全新皮卡和全新SUV产品,最终实现从2013年11.8万台到2016年20万台的销量,完成年均超过20%的增长率。 展开更多
关键词 郑州日产 风度 NISSAN SUV 新车型 CDV MPV 增长率
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解放左脚郑州日产NV200 预览
13
作者 白正阳 祁子鑫 《汽车与驾驶维修:汽车版》 2014年第12期68-69,共2页
虽然NV200看起来与小面无异,但在郑州日产的定义里却是一辆CDV,而悬挂日产标也让它在“社会地位”上远高于小面,尤其是在引入了自动挡车型以后,定位上更加“高富帅”了。
关键词 郑州日产 CDV 自动挡 悬挂
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在商言商:郑州日产NV200 CVT 预览
14
作者 张海涛 《轿车情报》 2014年第6期106-107,共2页
让我们来做个假设,NV200是一台商务车!即便很多人不愿意这么认为,但我觉得从某些方面这个假设也是成立的。譬如,它拥有一定的时尚设计元素;它是在轿车底盘基础上延伸出的厢式车型;诸多为提升乘坐性设计的细节;还有这是一台CVT无... 让我们来做个假设,NV200是一台商务车!即便很多人不愿意这么认为,但我觉得从某些方面这个假设也是成立的。譬如,它拥有一定的时尚设计元素;它是在轿车底盘基础上延伸出的厢式车型;诸多为提升乘坐性设计的细节;还有这是一台CVT无级变速器的CDV。 展开更多
关键词 CVT无级变速器 郑州日产 设计元素 轿车底盘 商务车 CDV 厢式
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双品牌之路 郑州日产借力发展民族自主品牌
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《汽车与社会》 2013年第3期118-119,共2页
在经历了各种危机、考验、政策以及调整之后,2012年的中国国内整体汽车产销量逐步趋于理性,国内汽车市场已步入“微增长”时代。在这样的行业环境下,长期潜心于双品牌路线、并于2009年开始构建了“大宗+大众”新型营销模式的郑州日... 在经历了各种危机、考验、政策以及调整之后,2012年的中国国内整体汽车产销量逐步趋于理性,国内汽车市场已步入“微增长”时代。在这样的行业环境下,长期潜心于双品牌路线、并于2009年开始构建了“大宗+大众”新型营销模式的郑州日产,随着CDV车型帅客、NV200的导入,CDV细分市场占有率从10年的28%增长到2012年的46%。 展开更多
关键词 自主品牌 郑州日产 民族 汽车市场 市场占有率 营销模式 CDV 产销量
从“空”军到空军——评《战争游戏——空地—体战》
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作者 老黑 《大众软件》 2013年第17期114-117,共4页
经历了10年前的繁荣之后,现代写实风格RTS纷纷进入瓶颈。好在,依然存在有才华的制作组,不畏吃力不讨好,在跋涉中取得突破。从德国游戏公司CDV出品的《突袭》(SUddenStrike)开始,真实系RTS已经走过了13个年头。从微观角度来看,... 经历了10年前的繁荣之后,现代写实风格RTS纷纷进入瓶颈。好在,依然存在有才华的制作组,不畏吃力不讨好,在跋涉中取得突破。从德国游戏公司CDV出品的《突袭》(SUddenStrike)开始,真实系RTS已经走过了13个年头。从微观角度来看,表现一发穿甲弹在不同距离、不同方向、不同角度命中同一辆坦克后所产生的不同毁伤效果, 展开更多
关键词 战争游戏 空军 《突袭》 游戏公司 毁伤效果 RTS CDV 穿甲弹
犬瘟热病毒荧光定量RT—PCR检测方法的建立及初步应用 预览
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作者 余绍华 罗满林 +5 位作者 苏力 蔡勤辉 陈武 陈虹 黄晓卉 苏乔 《广东畜牧兽医科技》 2013年第2期35-39,共5页
根据犬瘟热病毒的核衣壳蛋白(N)基因保守序列,设计特异性引物,建立犬瘟热病毒荧光定量RT—PCR检测方法。试验结果表明,该方法敏感性比普通RT-PCR高出100倍,重复性良好,变异系数在1.01%以下,对犬的常见病原核酸提取物检测均为... 根据犬瘟热病毒的核衣壳蛋白(N)基因保守序列,设计特异性引物,建立犬瘟热病毒荧光定量RT—PCR检测方法。试验结果表明,该方法敏感性比普通RT-PCR高出100倍,重复性良好,变异系数在1.01%以下,对犬的常见病原核酸提取物检测均为阴性,证明特异性良好。对32份临床样本进行检测,27份为阳性,高于普通RT-PCR方法。试验结果表明该方法可用于犬瘟热感染情况的检测。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 核衣壳蛋白(N)基因 荧光定量RT-PCR
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犬瘟热的研究进展 预览 被引量:1
18
作者 巫应强 《中国工作犬业》 2013年第6期29-33,共5页
犬瘟热是由犬瘟热病毒(CDV)引起的高度接触性传染病,危害极大。CDV结构蛋白的一些特性决定着它的感染力,同时其细胞受体也在感染中起关键作用。CDV感染引起动物上皮细胞、淋巴细胞病变和神经系统损伤,由此出现犬瘟热特征性症状。CD... 犬瘟热是由犬瘟热病毒(CDV)引起的高度接触性传染病,危害极大。CDV结构蛋白的一些特性决定着它的感染力,同时其细胞受体也在感染中起关键作用。CDV感染引起动物上皮细胞、淋巴细胞病变和神经系统损伤,由此出现犬瘟热特征性症状。CDV血清学检测是当前临床上最常用、最主要的确诊方法, 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 接触性传染病 神经系统损伤 血清学检测 感染力 CDV 结构蛋白 细胞受体
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CDV、CPV和CPIV多重PCR检测方法的建立 预览 被引量:6
19
作者 康泰 毕玉敏 +3 位作者 陈欣 孙忠晟 王祖荣 尹燕博 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第9期62-65,共4页
为了建立一种快速诊断犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬副流感病毒的多重PCR方法,参照Geil-Bank中的犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬副流感病毒(CPIV)基因序列,设计了3对引物分别用于特异扩增犬瘟热病毒F基因、犬细小病毒VP2... 为了建立一种快速诊断犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬副流感病毒的多重PCR方法,参照Geil-Bank中的犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬副流感病毒(CPIV)基因序列,设计了3对引物分别用于特异扩增犬瘟热病毒F基因、犬细小病毒VP2基因和犬副流感病毒F基因上的目的片段。通过优化反应条件,建立同时扩增CDV(740bp)、CPV(419bp)和CPIV(559bp)的多重PCR方法。结果表明特异性和敏感性良好,对CDV、CPV、CPIV3种病毒的最低核酸检测量为1ng/μL。临床样品的多重PCR检测结果表明,建立的多重PCR方法能够对CDV、CPV、CPIV单个感染或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。 展开更多
关键词 多重PCR 犬瘟热病毒 犬细小病毒 犬副流感病毒
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犬瘟热病毒捕获ELISA试剂盒的研究 预览
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作者 张力 李宏 +1 位作者 李香 张玥 《畜牧兽医杂志》 2013年第6期107-109,112共4页
建立犬瘟热病毒捕获ELISA,用于该病的快速诊断。方法采用犬抗CDV抗体包被96孔反应板,用以捕获样品中的CDV,再用CDV单克隆抗体和酶标羊抗鼠IgG检测被捕获的CDV抗原,经方阵试验,确立了抗原捕获ELISA的反应条件,并组装ELISA试剂盒。... 建立犬瘟热病毒捕获ELISA,用于该病的快速诊断。方法采用犬抗CDV抗体包被96孔反应板,用以捕获样品中的CDV,再用CDV单克隆抗体和酶标羊抗鼠IgG检测被捕获的CDV抗原,经方阵试验,确立了抗原捕获ELISA的反应条件,并组装ELISA试剂盒。结果用建立的ELISA方法,检测REOV、CPV2、USCCV、CAV-1、CAV-2病毒,均不发生交叉反应;检测犬的临床样本110份。 展开更多
关键词 抗原捕获ELISA ELISA试剂盒 犬瘟热病毒 ELISA方法 单克隆抗体 CDV 快速诊断 反应条件
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