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CXC类趋化因子受体4基因多态性对新辅助化疗宫颈癌患者疗效及预后的影响 预览 被引量:5
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作者 温展翀 陈勍 +3 位作者 黄妙玲 巴音吉力 徐干如 田春芳 《中南医学科学杂志》 CAS 2016年第3期241-246,250共7页
目的 探讨CXCR4基因多态性对新辅助化疗宫颈癌患者化疗疗效的影响以及与新辅助化疗加广泛子宫切除的宫颈癌患者的预后关系。方法 选取妇科肿瘤专科收治的62例IB2-IIB期宫颈癌患者;按照试剂盒说明书的指导蜡块组织提取组织DNA;PCR扩增基... 目的 探讨CXCR4基因多态性对新辅助化疗宫颈癌患者化疗疗效的影响以及与新辅助化疗加广泛子宫切除的宫颈癌患者的预后关系。方法 选取妇科肿瘤专科收治的62例IB2-IIB期宫颈癌患者;按照试剂盒说明书的指导蜡块组织提取组织DNA;PCR扩增基因组DNA片段;直接测序法检测DNA片段序列,测序结果采用图像分析软件“Chromas2”进行终点分析。结果 扩增PCR产物为236 bp;62例样本中,CC基因型25例(40.3%),CT基因型37例(59.7%),TT基因型0例(0.0%)。T等位基因频率为2.98%;CXCR4基因Ile138Ile位点没有发现突变纯合子;位点Ile138Ile在病人中的基因分布频率与化疗反应无显著的相关性(P=0.771);Ile138Ile位点CC型和CT型分布情况在宫颈浸润深度两组中(P=0.025)、淋巴结转移情况两组中(P=0.031)差异有统计学意义,而在化疗效果显示,患者年龄、组织类型、FIGO分期、肿瘤分化程度、肿瘤大小、脉管浸润、贫血情况各组中差异无统计学意义(P均〉0.05);CXCR4基因ATT/ATC(Ile138Ile)位点CC型和CT型两组患者,三年生存率分别为86.4%、70.6%。Log-rank检验结果显示这两个年龄组患者的无病生存率和总生存率差别均无统计学意义。结论CXCR4基因单核苷酸多态性位点Ile138Ile对宫颈癌的进展有影响;CXCR4基因单核苷酸多态性与新辅助化疗宫颈癌患者的生存预后可能无关。 展开更多
关键词 趋化因子受体4 新辅助化疗 宫颈癌 生存预后 化疗反应
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2例儿童先天性粒细胞减少症的基因诊断
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作者 乔明吟 刘炜 +2 位作者 李彦格 毛彦娜 管玉洁 《临床荟萃》 CAS 2018年第4期314-318,共5页
目的提高对先天性粒细胞减少症(CN)的认识,通过检测基因突变类型,探讨其分子学发病机制。方法使用DNA直接测序法分析患儿全基因组,分析其有意义的突变类型,查找数据库进行相应序列对比,再进行一代测序(Sanger法)验证。结果先证者一存在G... 目的提高对先天性粒细胞减少症(CN)的认识,通过检测基因突变类型,探讨其分子学发病机制。方法使用DNA直接测序法分析患儿全基因组,分析其有意义的突变类型,查找数据库进行相应序列对比,再进行一代测序(Sanger法)验证。结果先证者一存在G6PC3基因存在双重杂合子突变:IVS3+1G>T及c.915(E6):缺失G,先证者二存在CXCR4基因突变:c.1004(exon1)-c.1005(exon1)缺失AA。结论2例先天性粒细胞减少症的患儿均存在异常的基因突变,基因诊断对先天性粒细胞减少症的诊断有重大意义,对临床研究及治疗提供依据。 展开更多
关键词 中性粒细胞减少 基因 CXCR4基因 G6PC3基因
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乳腺癌组织中CXCR4表达及临床意义
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作者 浦春 秦明明 +3 位作者 刘夏 刘小岑 卢林明 冯钢 《邵阳学院学报:自然科学版》 2018年第3期104-110,共7页
目的探讨趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor 4,CXCR4)在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌诊断和预后的相关性。方法收集48例临床诊断并经病理确诊的原发性乳腺癌患者,采用逆转录实时荧光定量PCR(Reverse transcription-quantitative... 目的探讨趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor 4,CXCR4)在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌诊断和预后的相关性。方法收集48例临床诊断并经病理确诊的原发性乳腺癌患者,采用逆转录实时荧光定量PCR(Reverse transcription-quantitative real-time PCR,RT-qPCR)的方法检测乳腺癌及邻近癌旁组织中CXCR4 mRNA的相对表达;收集48例乳腺癌和40例乳腺腺病患者的石蜡组织切片,采用免疫组织化学的方法检测乳腺组织中CXCR4蛋白的表达情况并分析其与临床病理指征的相关性。结果乳腺癌组织中CXCR4在mRNA和蛋白水平均高表达,显著高于癌旁组织和乳腺腺病患者(P〈0.001);CXCR4蛋白对于乳腺癌诊断的敏感性和特异性分别达77.08%和80.0%;乳腺癌组织中CXCR4基因与乳腺癌患者的雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、Ki-67增殖指数、分子分型密切相关。结论 CXCR4在乳腺癌组织中高表达且与有关预后指标密切相关,对于乳腺癌患者的诊断和预后评估具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 CXCR4基因 乳腺癌 临床价值
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转染CXCR4的MSCs对放射性肺损伤组织中细胞因子的影响 预览
4
作者 张春阳 祝艳 冯华松 《西南国防医药》 CAS 2018年第10期903-906,共4页
目的观察慢病毒转染CXCR4的间充质干细胞(MSCs)对放射性怖损伤小鼠怖组织内细胞因子的影响。方法将C57小鼠分为正常组、照射组、对照组和治疗组,除正常组外,其他各组均经直线加速器进行X射线(13Gv,3.68Gy/min)一次性全肺照射... 目的观察慢病毒转染CXCR4的间充质干细胞(MSCs)对放射性怖损伤小鼠怖组织内细胞因子的影响。方法将C57小鼠分为正常组、照射组、对照组和治疗组,除正常组外,其他各组均经直线加速器进行X射线(13Gv,3.68Gy/min)一次性全肺照射。之后对照组经尾静脉注射仅经慢病毒转染EGFP的MSCs,治疗组经尾静脉注射经慢病毒转染CXCR4和EGFP的MSCs。在X线照射后7d,分别留取各组的怖组织标本,荧光显微镜下观察怖内EGFP标记的MSCs分布情况,并行病理组织学HE染色,ELISA法检测各组怖组织内羟脯胺酸(HYP)、丙二醛(MDA)、10kDa干扰素吖诱导蛋白(IP-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板源生长因子(PDGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和基质金属蛋白酶(MMPs).2表达水平。结果治疗组怖组织内EGFP标记的MSCs分布多于对照组。与照射组比较,对照组和治疗组怖组织损伤减轻,两组的怖组织中HYP、MDA、IP-10、TGF-β1、PDGF、TNF-α和MMP-2表达水平明显下降(P〈0.01)。相对于对照组,除TNF-α外,治疗组上述指标水平下降的更明显(P〈0.01)。结论转染CXCR4的MSCs在放射性怖损伤小鼠怖组织内数量增加,并具有更好地减轻放射性怖损伤效果.可有效抑制放射损伤引起的怖组织IP-10、TGF-β1、PDGF、TNF-α和MMP-2细胞因子的升高。 展开更多
关键词 放射性怖损伤 间充质干细胞 CXCR4基因 细胞因子
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siRNA靶向抑制CXCR4基因表达对鼻咽癌细胞增殖及侵袭的影响及机制研究 预览
5
作者 杨世权 阎萍 +1 位作者 周晶 任霞斌 《临床和实验医学杂志》 2018年第12期1271-1275,共5页
目的探讨抑制鼻咽癌细胞趋化因子受体-4(CXCR4)基因表达对癌细胞增殖、侵袭的影响及机制。方法回顾性收集鼻咽癌42例临床资料及相应的癌旁组织。RT-PCR和Western bloting分别检测鼻咽癌及相应的癌旁组织中CXCR4基因的mRNA及蛋白表达;... 目的探讨抑制鼻咽癌细胞趋化因子受体-4(CXCR4)基因表达对癌细胞增殖、侵袭的影响及机制。方法回顾性收集鼻咽癌42例临床资料及相应的癌旁组织。RT-PCR和Western bloting分别检测鼻咽癌及相应的癌旁组织中CXCR4基因的mRNA及蛋白表达;人鼻咽癌细胞系CNE-2Z分为空白组(细胞未做任何处理)、NC-siRNA组(细胞转染无义siRNA序列)和CXCR4-siRNA组(细胞中转染CXCR4的靶向siRNA序列)。转染48 h后Western bloting检测各组细胞中CXCR4、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期素D1(Cyclin D1)蛋白表达;CCK8实验和Transwell小室分别检测细胞的增殖及侵袭能力。结果鼻咽癌中CXCR4基因的mRNA及蛋白表达均显著高于癌旁组织(P〈0.01);转染CXCR4-siRNA组后CXCR4的蛋白表达显著降低;NC-siRNA组细胞存活率、细胞侵袭数及MMP-2、MMP-9、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达与空白组差异无统计学意义(P〉0.05);CXCR4-siRNA组细胞存活率、细胞侵袭数及MMP-2、MMP-9、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达均显著低于空白组(P〈0.01)。结论抑制鼻咽癌细胞CXCR4基因表达可显著降低癌细胞的增殖与侵袭能力,其机制与下调Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 CXCR4基因 增殖 侵袭 WNT/Β-CATENIN信号通路
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基于靶向基因测序的原发性免疫缺陷病基因诊断方法 预览
6
作者 杨丽君 李牛 +1 位作者 刘毅 王剑 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期390-393,共4页
目的 ·设计并建立基于靶向基因测序(TPS)的适合原发性免疫缺陷病(PID)的高通量基因诊断方法。方法 ·阅读文献并查询相关数据库确定PID的已知致病基因,设计并定制针对这些基因所有外显子及侧翼序列的捕获探针,并通过该... 目的 ·设计并建立基于靶向基因测序(TPS)的适合原发性免疫缺陷病(PID)的高通量基因诊断方法。方法 ·阅读文献并查询相关数据库确定PID的已知致病基因,设计并定制针对这些基因所有外显子及侧翼序列的捕获探针,并通过该方法对1例疑似PID患儿进行分子诊断。结果 ·该PID测序panel共包含100个已知致病基因。该疑似PID患儿测序结果共产生读条数16 414 298(reads),平均覆盖深度为157 X,98.35%的目标区域测序深度大于20 X,99.97%的目标区域具有1 X以上的测序深度。最终在患儿的CXCR4基因第2号外显子区域发现一个杂合的无义突变(c.1000C〉T,p.Arg334*)。Sanger测序结果验证了患儿CXCR4基因的变异并表明其父母在相应位点均为野生型,证实了患儿CXCR4基因的变异为新生突变(de novo)。结论 ·建立了PID高通量基因诊断方法,并借助该靶向基因测序技术成功诊断1例WHIM综合征患儿。 展开更多
关键词 原发性免疫缺陷病 靶向基因测序 WHIM综合征 CXCR4基因 新生突变
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MYD88^L265P及CXCR4^WHIM基因突变在华氏巨球蛋白血症中的意义 被引量:1
7
作者 孟琦 曹欣欣 李剑 《中国医学科学院学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期578-582,共5页
华氏巨球蛋白血症是一种以分泌单克隆免疫球蛋白M为特征的淋巴浆细胞淋巴瘤。MYD88^L265P和CXCR4^WHIM两种体细胞突变在华氏巨球蛋白血症患者中存在较高的突变率,且突变情况与靶向药物的疗效相关。本文主要综述MYD88^L265P及CXCR4^WHIM... 华氏巨球蛋白血症是一种以分泌单克隆免疫球蛋白M为特征的淋巴浆细胞淋巴瘤。MYD88^L265P和CXCR4^WHIM两种体细胞突变在华氏巨球蛋白血症患者中存在较高的突变率,且突变情况与靶向药物的疗效相关。本文主要综述MYD88^L265P及CXCR4^WHIM基因突变在华氏巨球蛋白血症诊断和治疗中的意义。 展开更多
关键词 华氏巨球蛋白血症 MYD88^L265P CXCR4^WHIM 基因突变
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CXCR4基因转染对骨髓间充质干细胞体外生物学行为的影响 预览 被引量:2
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作者 王玉莹 张囡 +6 位作者 李秀丽 王雅萌 李少恒 闫宇辉 宋捷 杨静娴 闻庆平 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2017年第6期806-813,共8页
目的 观察对转染CXCR4基因的骨髓间充质干细胞体外生物学行为的影响。方法 将培养的骨髓间充质干细胞分为3组,GFP组、CXCR4+组、CXCR4-组,转染趋化因子受体CXCR4,并用免疫荧光细胞化学法、流式细胞仪法及Transwell小室细胞趋化实验,体... 目的 观察对转染CXCR4基因的骨髓间充质干细胞体外生物学行为的影响。方法 将培养的骨髓间充质干细胞分为3组,GFP组、CXCR4+组、CXCR4-组,转染趋化因子受体CXCR4,并用免疫荧光细胞化学法、流式细胞仪法及Transwell小室细胞趋化实验,体外研究了CXCR4高表达及低表达对MSCs增殖、分化与迁移能力的影响。结果 CX-CR4高表达及低表达均不影响MSCs的增殖能力,对其向肺组织分化的能力也没有影响。与GFP-MSCs组相比,CX-CR4+-MSCs组迁移的细胞数量明显升高,而CXCR4--MSCs组迁移细胞数量差异无显著性。结论 CXCR4高表达及低表达不改变MSCs的增殖、分化能力,然而CXCR4高表达明显增强MSCs向炎症病灶的迁移能力。说明CXCR4高表达的MSCs移植入体后将会更快速、更大量地到达病变区域参与组织修复,明显增强疗效。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 趋化因子受体CXCR4 基因转染 增殖 分化 迁移
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TALEN介导的CXCR4敲除肝癌细胞株的建立 被引量:1
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作者 张文美 丁妍 +3 位作者 郭兴荣 李东升 赵万红 王小莉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期225-228,共4页
通过TALEN打靶建立CXCR4的细胞株,旨在研究CXCR4对肝癌的影响。选用肝癌细胞株Hep G2,采用转录激活样效应物核酸酶(TALEN)干扰细胞中CXCR4的表达。构建的CXCR4 TALEN质粒转入Hep G2细胞,通过T7E1酶切确定打靶效率为40%,并通过测序筛... 通过TALEN打靶建立CXCR4的细胞株,旨在研究CXCR4对肝癌的影响。选用肝癌细胞株Hep G2,采用转录激活样效应物核酸酶(TALEN)干扰细胞中CXCR4的表达。构建的CXCR4 TALEN质粒转入Hep G2细胞,通过T7E1酶切确定打靶效率为40%,并通过测序筛选出了CXCR4敲除的单克隆细胞,免疫荧光和Western blot进一步证实CXCR4基因表达显著下调。 展开更多
关键词 TALEN CXCR4 肝癌 基因打靶
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CXCR4基因沉默对黑色素瘤侵袭和转移影响的实验研究 预览
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作者 吴包金 李文鹏 +4 位作者 丁伟 周兆平 周仲文 顾小叶 江华 《医学研究杂志》 2016年第5期53-58,共6页
目的探讨CXCR4基因沉默对黑色素瘤侵袭及转移的影响及可能机制。方法设计合成CXCR4特异性短发夹状RNA(shRNA)插入pSilencer载体,转染人高转移性黑色素瘤细胞株MV3、RT—PCR和Western blot法检测shRNA对靶基因CX—CR4表达的影响。利用... 目的探讨CXCR4基因沉默对黑色素瘤侵袭及转移的影响及可能机制。方法设计合成CXCR4特异性短发夹状RNA(shRNA)插入pSilencer载体,转染人高转移性黑色素瘤细胞株MV3、RT—PCR和Western blot法检测shRNA对靶基因CX—CR4表达的影响。利用Transwell小室模型检测细胞体外侵袭能力,MTT法检测细胞体外增殖能力。通过裸鼠尾静脉瘤细胞注射,将转染后的细胞接种至裸鼠皮下,构建黑色素瘤转移模型,观察肿瘤生长情况。结果CXCR4-shRNA能有效下调CXCR4基因的表达,降低黑色素瘤细胞增殖、体外侵袭及转移能力。RT—PCR及细胞免疫荧光显示,转染CXCR4-shRNA的黑色素瘤瘤MV3细胞系MMP-2表达下调;免疫组化结果显示,实验组裸鼠黑色素瘤瘤体及转移灶组织MMP-2的表达低于对照组。结论shRNA介导的CXCR4基因沉默在体外实验能够显著抑制黑色素瘤细胞的生长和增殖活性,减弱体外侵袭能力,且体外产生抑瘤效应,明显降低肝、脑器官转移能力和定向肺转移能力。其机制可能与SDF-1/CXCR4信号途径阻断,进而抑制MMP-2的表达有关。 展开更多
关键词 黑色素瘤 趋化因子受体CXCR4 基因沉默 肿瘤转移
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过表达CXCR4基因对人脐带间充质干细胞迁移作用的影响 被引量:2
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作者 张春阳 冯华松 祝艳 《武警后勤学院学报:医学版》 CAS 2015年第11期849-853,共5页
【目的】通过transwell趋化实验,观察经慢病毒转染后过表达CXCR4的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs)是否具有更好的迁移作用。【方法】通过组织贴壁法,分离和培养来源于人脐带华通胶组织中的M... 【目的】通过transwell趋化实验,观察经慢病毒转染后过表达CXCR4的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs)是否具有更好的迁移作用。【方法】通过组织贴壁法,分离和培养来源于人脐带华通胶组织中的MSCs。经慢病毒转染,将CXCR4目的基因转染至第3代HUMSCs,并进行免疫荧光、western blotting检测在HUMSCs中表达CXCR4基因的情况。通过transwell小室进行HUMSCs的趋化迁移试验检测,观察转染CXCR4基因后的HUMSCs迁移能力是否增强。【结果】自脐带分离培养的HUMSCs通过慢病毒转染后,可过表达CXCR4基因。Transwell试验发现,过表达CXCR4的HUMSCs较正常HUMSCs和未转染目的基因的HUMSCs,迁移的细胞数明显增加(P〈0.05)。【结论】通过慢病毒转染过表达CXCR4的HUMSCs,其趋化、迁移能力明显增强。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 CXCR4基因 Transwell试验
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壳聚糖介导RNA干扰沉默CXCR4基因对食管癌细胞增殖、侵袭力的影响
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作者 万一元 万莉 +2 位作者 惠红霞 王晓炜 程劲松 《徐州医学院学报》 CAS 2015年第1期6-11,共6页
目的探讨沉默CXCRd基因对食管鳞癌ECl09细胞体外增殖、侵袭能力的影响。方法化学合成两对针对CXCR4基因的干扰序列(实验序列、对照序列),构建表达小发夹RNA(shRNA)的质粒,以壳聚糖为基因载体转染人食管癌ECl09细胞。荧光显微镜观... 目的探讨沉默CXCRd基因对食管鳞癌ECl09细胞体外增殖、侵袭能力的影响。方法化学合成两对针对CXCR4基因的干扰序列(实验序列、对照序列),构建表达小发夹RNA(shRNA)的质粒,以壳聚糖为基因载体转染人食管癌ECl09细胞。荧光显微镜观测转染效率,Westernblot法分析转染前后CXCR4蛋白的变化,集落形成实验检测细胞增殖能力,transwell侵袭小室检测细胞侵袭能力,ELISA法检测转染前后ECl09细胞上清液血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平的变化。结果酶切电泳、测序证实成功构建靶向CXCR4基因的shRNA表达质粒。以壳聚糖为载体转染HEK293A,转染效率达80%以上。与空白对照组、实验对照组比较:转染实验组质粒能明显下调CXCR4蛋白表达;抑制ECl09细胞增殖,影响其集落形成能力;降低ECl09细胞穿膜数目,影响其侵袭能力;时间依赖性降低ECl09细胞上清液中VEGF水平,转染48h及72h后与空白对照组、实验对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论CXCR4基因在食管癌细胞生长、侵袭方面发挥重要作用,沉默其表达可降低食管癌细胞增殖,抑制肿瘤细胞集落形成和侵袭能力,抑制细胞分泌VEGF能力。CXCR4基因有可能成为食管癌治疗新的、有效靶点。 展开更多
关键词 食管癌 CXCR4基因 RNA干扰 壳聚糖
LPS对5-FU杀伤QBC939细胞影响的实验研究 预览
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作者 霍胜军 吕忠诚 +2 位作者 邹晓鹤 宋建文 王康 《医学研究杂志》 2015年第3期78-80,共3页
目的 探讨LPS联合化疗药物5-FU对人胆管癌QBC939细胞生长和诱导细胞凋亡的影响.方法 四甲基唾哇蓝(MTT)试验检测LPS对5-FU抑制QBC939细胞增殖的影响,流式细胞术观察LPS对5-FU诱导QBC939细胞凋亡的影响.结果 ①MTT法检测显示5-FU对胆... 目的 探讨LPS联合化疗药物5-FU对人胆管癌QBC939细胞生长和诱导细胞凋亡的影响.方法 四甲基唾哇蓝(MTT)试验检测LPS对5-FU抑制QBC939细胞增殖的影响,流式细胞术观察LPS对5-FU诱导QBC939细胞凋亡的影响.结果 ①MTT法检测显示5-FU对胆管癌细胞株QBC939杀伤作用明显,但易出现耐药性,LPS可以增强5-FU后期杀伤作用,能一定程度上防止耐药的出现;②流式细胞术结果显示化疗药物5-FU后能显著诱导QBC939细胞发生凋亡,凋亡指数为11.50±2.15(P <0.05),对照组为3.53 ±0.32,加用LPS后,能更明显地诱导凋亡,凋亡指数达到26.50 ±3.12,与单用加化疗药物5-FU比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 LPS能增强5-FU对胆管癌细胞株QBC939的后期杀伤作用,LPS联合化疗药物可能是胆管癌临床治疗的一种合理策略. 展开更多
关键词 胆管癌QBC939 CXCR4 脂多糖 基因治疗
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CXCR4 shRNA对U87胶质瘤细胞周期和凋亡的影响 被引量:2
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作者 袁宏 冯虎 +2 位作者 家秀秀 姚晓晴 王溪 《中国热带医学》 CAS 2015年第1期25-27,共3页
目的探讨下调CXCR4的表达对U87胶质瘤细胞周期和凋亡的影响,为CXCR4 sh RNA治疗胶质瘤提供实验依据。方法设计合成CXCR4的特异性sh RNA,采用脂质体转染U87细胞株。实验将细胞分为空白对照组(A组),阴性对照组(转染非特异载体p GPU6/GF... 目的探讨下调CXCR4的表达对U87胶质瘤细胞周期和凋亡的影响,为CXCR4 sh RNA治疗胶质瘤提供实验依据。方法设计合成CXCR4的特异性sh RNA,采用脂质体转染U87细胞株。实验将细胞分为空白对照组(A组),阴性对照组(转染非特异载体p GPU6/GFP/NC组)(B组),实验组(转染CXCR4-sh RNA组)(C组)共三组,用RT-PCR检测各组细胞CXCR4基因表达情况,用流式细胞术检测细胞周期分布和细胞的凋亡情况。结果成功构建了CXCR4的特异性sh RNA。C组的U87细胞CXCR4 m RNA为(42.5±4.6)%,显著低于B组的(65.4±5.9)%和A组的(69.6±7.4)%(P〈0.05),G0/G1期细胞比例增加(39.4±1.7)%与(25.8±1.3)%和(20.3±1.2)%,G2/M期细胞比例相应下降(20.2±1.6)%与(30.1±1.2)%和(26.4±1.3)%;S期细胞比例相应下降(46.5±2.7)%与(55.7±2.8)%和(54.9±2.6)%,凋亡细胞率为(18.68±0.44)%明显高于A组(5.14±0.23)%和B组(4.87±0.16)%(P〈0.05)。结论 CXCR4 sh RNA能够有效下调U87细胞CXCR4基因表达,诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞,从而抑制细胞的增殖,提示CXCR4在胶质瘤发展过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 CXCR4基因 U87细胞 细胞凋亡 细胞周期
胆囊癌中趋化因子CXCL12和CXCR4的表达 预览 被引量:2
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作者 沈剑 王伯良 +1 位作者 严琦敏 郭学刚 《山西医科大学学报》 CAS 2015年第9期885-888,共4页
目的研究原发性胆囊癌中趋化因子CXCL12和CXCR4的表达并讨论其临床其意义。方法选择2010-01~2014-12手术切除病理证实胆囊癌标本132例,其中男性74例,女性58例,选择24例正常胆囊作为对照。用免疫组织化学方法测定在胆囊癌和正常胆囊中CXC... 目的研究原发性胆囊癌中趋化因子CXCL12和CXCR4的表达并讨论其临床其意义。方法选择2010-01~2014-12手术切除病理证实胆囊癌标本132例,其中男性74例,女性58例,选择24例正常胆囊作为对照。用免疫组织化学方法测定在胆囊癌和正常胆囊中CXCL12和CXCR4的表达。结果 CXCL12和CXCR4表达阳性染色均定位于胆囊癌细胞胞质。CXCL12和CXCR4表达在胆囊癌中的阳性表达率分别为69.7%(92/132)和62.1%(82/132),而正常胆囊表达分别为16.7%(4/24)和8.3%(2/24),胆囊癌中两者表达明显高于正常胆囊(P均〈0.01)。CXCL12和CXCR4表达与Nevin分期、淋巴结转移密切相关(P〈0.05)。结论 CXCL12和CXCR4在胆囊癌中有明显表达,且与Nevin分期、淋巴结转移密切相关,提示测定它们的表达对原发性胆囊癌的诊断具有一定临床意义。 展开更多
关键词 CXCL12 CXCR4 基因表达 免疫组织化学 胆囊癌
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CXCR4基因慢病毒表达载体的构建、包装及鉴定 预览
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作者 徐丽娟 王淑芳 +3 位作者 张云巍 潘美妍 胡亚卓 阎丽 《局解手术学杂志》 2015年第5期473-476,共4页
目的构建CXCR4基因慢病毒过表达载体并对其进行包装、鉴定。方法首先设计合成引物,采用PCR法扩增目的基因CXCR4,将目的基因与酶切线性化的载体进行定向交换,成功构建重组载体慢病毒表达载体p GC-FU-CXCR4,将其产物转化大肠杆菌感受态细... 目的构建CXCR4基因慢病毒过表达载体并对其进行包装、鉴定。方法首先设计合成引物,采用PCR法扩增目的基因CXCR4,将目的基因与酶切线性化的载体进行定向交换,成功构建重组载体慢病毒表达载体p GC-FU-CXCR4,将其产物转化大肠杆菌感受态细胞。对培养出的克隆先进行菌落PCR鉴定,再对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析,最后将获得的病毒载体共同转染293T细胞,收集病毒颗粒,并采用Real time PCR法测定病毒滴度。结果 PCR鉴定结果显示扩增的目的基因已成功插入p GC-FU载体,Western Blot结果显示得到的片段与理论大小相符,阳性克隆测序结果与目的基因序列一致,说明重组慢病毒载体的插入序列完全正确。结论本实验成功构建了CXCR4慢病毒表达载体,并成功对慢病毒进行了包装及病毒滴度测定。 展开更多
关键词 慢病毒载体 CXCR4基因 293T细胞
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CXCR4沉默对缺氧诱导的N9小胶质细胞迁移能力的影响
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作者 种莉 唐鹏 +4 位作者 刘鹏 陈丽 刘玥 李锐 郭民侠 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1112-1116,共5页
目的探讨缺氧对N9小胶质细胞CXCR4表达的影响及CXCR4在缺氧诱导的小胶质细胞运动迁移变化过程中的作用。方法将N9小胶质细胞置于常氧和缺氧(含1%O2)的环境中培养。提取细胞总RNA用实时定量PCR(PT-PCR)检测CXCR4 mRNA的表达,Wester... 目的探讨缺氧对N9小胶质细胞CXCR4表达的影响及CXCR4在缺氧诱导的小胶质细胞运动迁移变化过程中的作用。方法将N9小胶质细胞置于常氧和缺氧(含1%O2)的环境中培养。提取细胞总RNA用实时定量PCR(PT-PCR)检测CXCR4 mRNA的表达,Western blotting检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及CXCR4的蛋白表达水平。采用siRNA沉默N9细胞HIF-1α或CXCR4后,再次检测缺氧对CXCR4表达的影响。用Transwell法检测常氧及缺氧条件下N9细胞的迁移运动能力,沉默CXCR4后,再次观察N9细胞的迁移运动能力。结果与生长在常氧环境中的N9细胞相比,生长在缺氧环境中的N9细胞的CXCR4表达明显升高,差异有统计学意义(P〈0.05);沉默HIF-1α可以抑制缺氧诱导的CXCR4的上调,与仅转染si-Control的细胞相比,差异有统计学意义(P〈0.05);与常氧条件下培养的细胞相比,生长在缺氧条件下的N9细胞的迁移运动动力能力显著增强,前者穿膜细胞数为(20.33±2.08)个,后者穿膜细胞数为(63.00±5.57)个,差异有统计学意义(P〈0.05);与仅转染si-Control的细胞相比,CXCR4沉默可以显著抑制N9细胞的运动迁移能力,前者穿膜细胞数为(63.00±4.00)个,后者的穿膜细胞数为(19.33±3.21)个,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论缺氧可以通过诱导N9小胶质细胞CXCR4的表达上升而促进细胞的迁移运动能力。 展开更多
关键词 小胶质细胞 缺氧 CXCR4 基因沉默 缺氧诱导因子-1Α
慢病毒载体介导的CXCR4基因过表达骨髓间充质干细胞在防治小鼠移植物抗宿主病中的作用 被引量:2
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作者 陈伟 李淼 +5 位作者 张翠萍 王祥民 潘彬 曾令宇 李振宇 徐开林 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期936-940,共5页
目的 探讨小鼠CXC型趋化因子受体4(CXCR4)基因过表达的骨髓间充质干细胞(MSC)防治小鼠移植物抗宿主病(GVHD)作用.方法 利用慢病毒载体构建过表达小鼠CXCR4基因的重组慢病毒载体,包装病毒后转导小鼠骨髓间充质干细胞(CXCR4-MSC).... 目的 探讨小鼠CXC型趋化因子受体4(CXCR4)基因过表达的骨髓间充质干细胞(MSC)防治小鼠移植物抗宿主病(GVHD)作用.方法 利用慢病毒载体构建过表达小鼠CXCR4基因的重组慢病毒载体,包装病毒后转导小鼠骨髓间充质干细胞(CXCR4-MSC).以C57BL/6小鼠为供鼠,BALB/c小鼠为受鼠,建立小鼠异基因骨髓移植(BMT)模型,同时输注骨髓MSC.分5组:全身照射(TBI)组:仅接受TBI; BMT组:TBI组输注小鼠骨髓细胞;GVHD组:BMT组输注异基因脾细胞;EGFP-MSC组:GVHD组输注EGFP-MSC; CXCR4组:GVHD组输注CXCR4-MSC.观察受鼠生存状态,统计生存率,观察受鼠组织病理学改变及炎症细胞因子变化,评价其对GVHD防治作用.结果 TBI组小鼠在照射后14d内均死于造血衰竭,BMT组受鼠可获长期存活,GVHD组、EGFP-MSC组和CXCR4-MSC组生存时间分别为(1 7.0±2.3)、(21.7±4.8)、(30.1±9.1)d,CXCR4-MSC共移植组受鼠存活时间明显长于GVHD组(P<0.05).各组受鼠均出现腹泻、弓背、翘毛、皮肤缺损、体重减轻等GVHD症状,共移植CXCR4-MSC组受鼠临床评分低于GVHD组(P<0.05).GVHD组与EGFP-MSC组受鼠肝脏、小肠与皮肤均存在典型GVHD病理改变,CXCR4-MSC组仅发生Ⅰ~Ⅱ度病理改变,受鼠组织病理评分低于以上两组.移植后第14天,各组受鼠促炎症因子水平明显升高,CXCR4-MSC组IFN-γ、IL-2、TNF-α水平明显低于GVHD组与EGFP-MSC组(P<0.05).结论 联合输注CXCR4过表达的骨髓MSC可通过降低受鼠移植后炎症因子分泌从而减轻GVHD. 展开更多
关键词 慢病毒载体 骨髓移植 移植物抗宿主病 间质干细胞 CXCR4基因
鲈鱼cxcr4 cDNA克隆和序列分析
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作者 吴风瑞 丁彪 +1 位作者 刘勇 李文雍 《阜阳师范学院学报:自然科学版》 2013年第2期39-43,共5页
趋化因子受体(cxcr4)是一类重要的免疫调节因子受体,对原始生殖细胞的迁移和存活具有十分重要的作用。在对脊椎动物cxcr4进行初步生物信息学分析基础上设计引物,采用RT—PCR和RACE相结合的方法从鲈鱼卵巢克隆了cxcr4a全长和46部分cD... 趋化因子受体(cxcr4)是一类重要的免疫调节因子受体,对原始生殖细胞的迁移和存活具有十分重要的作用。在对脊椎动物cxcr4进行初步生物信息学分析基础上设计引物,采用RT—PCR和RACE相结合的方法从鲈鱼卵巢克隆了cxcr4a全长和46部分cDNAs序列,并预测其编码的氨基酸序列。结果表明,由于鱼类基因组经历一次特有的复制,cxcr4在鱼类存在两个复制基因。鲈鱼cxcr4a cDNA全长为1432bp,编码311个氨基酸;cxcr4b部分cDNA片段长为905bp,编码285个氨基酸。将鲈鱼cxcr4序列与所有已克隆的硬骨鱼类进行同源性比较,结果显示硬骨鱼类保守性较高,所有已经克隆的cxcr4按照进化地位的不同成簇聚类,表现出了较高的同源性。 展开更多
关键词 鲈鱼 CXCR4 基因克隆 序列分析
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趋化性细胞因子受体CXCR4基因表达对人骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响 预览 被引量:1
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作者 吕南千 费青 +1 位作者 张麒云 楼国祥 《中国骨科临床与基础研究杂志》 2012年第5期361-366,共6页
目的探讨趋化性细胞因子受体CXCR4基因表达对人骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响。方法Real-time PCR 检测人骨肉瘤细胞株 HOS-8603、U2OS 和 MG-63 中 CXCR4 mRNA 的表达情况;构建、鉴定pcDNA3/CXCR4 重组质粒并将其转染到 HOS-8603 细胞中... 目的探讨趋化性细胞因子受体CXCR4基因表达对人骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响。方法Real-time PCR 检测人骨肉瘤细胞株 HOS-8603、U2OS 和 MG-63 中 CXCR4 mRNA 的表达情况;构建、鉴定pcDNA3/CXCR4 重组质粒并将其转染到 HOS-8603 细胞中(PCDNA3/CXCR4 组),同时制备转染 pcDNA3 空质粒的阴性对照组(pcDNA3组)。MTT检测细胞增殖情况,穿膜小室重组细胞基底膜迁移实验检测细胞迁移情况。结果 HOS-8603细胞中CXCR4 mRNA相对表达含量低于U2OS、MG-63细胞(P 〈0.05)。转染后24、48h,pcDNA3/CXCR4 组 CXCR4 mRNA 表达量是 pcDNA3 组的 96 倍和 124 倍(P 〈0.05)。与 pcDNA3 组比较,转染后24、48、72 h,pcDNA3/CXCR4组细胞增殖率和发生迁移的细胞数明显增加(P 〈0.05)。结论 CXCR4的表达可能是促进骨肉瘤细胞增殖和迁移的重要因素。 展开更多
关键词 骨肉瘤 趋化因子类 受体 趋化因子 CXCR4 基因表达 细胞增殖 细胞运动
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