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釉原蛋白在牙周组织再生中的生物学作用 预览
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作者 杨宇轩 张海霞 王爽 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期191-196,共6页
牙周组织缺损的修复是牙周治疗的一大难题,目前釉基质蛋白被广泛用于牙周组织再生治疗,并取得了良好的治疗效果。釉原蛋白是釉基质蛋白的主要成分,在牙周组织再生中发挥着多种生物学作用,调节牙周组织细胞的生物学行为,进而影响牙周组... 牙周组织缺损的修复是牙周治疗的一大难题,目前釉基质蛋白被广泛用于牙周组织再生治疗,并取得了良好的治疗效果。釉原蛋白是釉基质蛋白的主要成分,在牙周组织再生中发挥着多种生物学作用,调节牙周组织细胞的生物学行为,进而影响牙周组织再生的过程。目前对于釉原蛋白引起牙周组织再生的生物学机制仍不清楚,其作用的信号通路仍有待研究。本文将从调节细胞的黏附、迁移、增殖、分化等方面,论述釉原蛋白在牙周组织再生中的作用,探讨其可能的作用机制。 展开更多
关键词 釉原蛋白 釉基质蛋白 细胞黏附 细胞迁移 细胞增殖 细胞分化
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鸽骨骼肌卫星细胞的分离、培养及成肌特性 预览
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作者 林正浩 王讯 +1 位作者 李晓开 罗毅 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期53-58,共6页
【目的】探讨白羽王鸽Columba livia骨骼肌卫星细胞的分离、培养和鉴定的方法,建立完整的家鸽骨骼肌卫星细胞的培养体系。【方法】选择孵化16d的鸽胚作为试验材料,采用组织块贴壁法和胶原酶消化法分离胸肌的骨骼肌卫星细胞并绘制其生长... 【目的】探讨白羽王鸽Columba livia骨骼肌卫星细胞的分离、培养和鉴定的方法,建立完整的家鸽骨骼肌卫星细胞的培养体系。【方法】选择孵化16d的鸽胚作为试验材料,采用组织块贴壁法和胶原酶消化法分离胸肌的骨骼肌卫星细胞并绘制其生长曲线。待卫星细胞分化出肌管后,采用免疫荧光法检测肌球蛋白重链(MyHC)的表达;在细胞分化出肌管前、后分别提取总RNA,采用RT-qPCR方法检测Desmin、Pax7、MyoG和MyoD1基因在细胞分化出肌管前、后的相对表达量。【结果】组织块贴壁法和胶原酶法均能成功地分离出骨骼肌卫星细胞,其生长曲线呈“S”型;该细胞经含体积分数为20%FBS的DMEM高糖培养液培养7d后视野中出现大量明显可见的肌管,成肌特异性标志MyHC表达呈阳性。RT-qPCR结果表明,Desmin和MyoG基因分化后的相对表达量分别是分化前的5.68和10.38倍,而Pax7和MyoD1基因分化前的相对表达量分别是分化后的7.01和5.51倍。【结论】建立了鸽骨骼肌卫星细胞的培养体系,为今后进行家鸽肌肉发育的研究提供细胞模型。 展开更多
关键词 骨骼肌 卫星细胞 肌管 细胞增殖 细胞分化
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1,25-维生素-D3体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的最适浓度
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作者 刘洋 吕洋 +3 位作者 王浩宇 李娇 任君旭 王海萍 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期580-588,607共10页
目的探讨1,25-维生素D3(1,25-vitamin-D3)体外诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的最适浓度。方法采用全骨髓贴壁法结合密度梯度离心法分离培养SD大鼠BMSCs,应用3、6、12、24 nmol/L 1,25-vitamin-D3对第2代BMSCs进行定向诱... 目的探讨1,25-维生素D3(1,25-vitamin-D3)体外诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的最适浓度。方法采用全骨髓贴壁法结合密度梯度离心法分离培养SD大鼠BMSCs,应用3、6、12、24 nmol/L 1,25-vitamin-D3对第2代BMSCs进行定向诱导,倒置相差显微镜下动态观察细胞生长状况。运用流式细胞仪对BMSCs进行鉴定。应用免疫细胞化学、免疫荧光及Western blotting法检测诱导后4周的BMSCs原肌球蛋白(TPM)、间隙连接蛋白43(Cx43)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达情况。运用透射电子显微镜观察分化细胞与心肌细胞类似的超微结构。在诱导后1、2和4周这3个时间点,以Real-time PCR法检测细胞心肌早期转录因子GATA结合蛋白4(GATA4)、Nkx2.5的表达。结果 1.倒置相差显微镜下观察,原代细胞培养72 h后,大部分细胞呈短梭形;培养1周后,细胞呈现出多样化的形态;诱导4周的BMSCs,相邻细胞间联系紧密,排列具有明显的方向性。不同浓度1,25-vitamin-D3诱导后的BMSCs,其数量及形态存在差异。2.流式细胞术的鉴定结果显示,CD29、CD45、CD90的阳性表达率分别为97.4%、3.3%和91.4%。3.免疫细胞化学、免疫荧光及Western blotting法检测不同浓度1,25-vitamin-D3诱导4周后的BMSCs均可见TPM、Cx43及cTnT的阳性表达,其中6 nmol/L组的表达均最高,而未诱导组细胞呈弱阳性或阴性表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.透射电子显微镜观察,细胞诱导培养至4周,胞质内可见较多平行排列的肌丝及线粒体、核糖体、粗面内质网等细胞器。5.Real-time PCR检测结果显示,GATA4及Nkx2.5基因于诱导后1周表达增强,2周表达减弱,4周表达增强;4个诱导组相比较,6 nmol/L组明显优于其他3组(P<0.05)。结论 1,25-vitamin-D3可以诱导BMSCs获得心肌分化表型,其诱导分化最适浓度为6 nmol/L。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 1 25-维生素-D3 心肌样细胞 细胞分化 免疫印迹法 大鼠
组蛋白去乙酰化酶抑制剂对脑胶质瘤干细胞的作用及其机制 预览
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作者 冀保卫 陈丽华 +1 位作者 陈治标 蔡强 《广西医学》 CAS 2019年第5期582-585,共4页
目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂对脑胶质瘤干细胞的作用及其机制。方法从脑胶质母细胞瘤组织中分离出脑胶质瘤干细胞,传代培养后分为实验组与对照组。实验组采用组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275进行干预,对照组给予等体积的磷酸缓冲盐溶... 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂对脑胶质瘤干细胞的作用及其机制。方法从脑胶质母细胞瘤组织中分离出脑胶质瘤干细胞,传代培养后分为实验组与对照组。实验组采用组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275进行干预,对照组给予等体积的磷酸缓冲盐溶液干预。采用细胞计数法检测细胞增殖情况,单克隆法检测细胞单克隆形成率,流式细胞仪检测CD133+细胞含量和细胞周期,免疫印迹法检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1表达情况。结果经MS-275干预后,实验组胶质瘤干细胞增殖抑制率为(28.30±0.72)%,胶质瘤干细胞单克隆形成率、CD133+细胞含量、Cyclin D1表达水平及S期细胞比例均低于对照组,G0/G1期细胞比例高于对照组(均P<0.05)。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275能抑制脑胶质瘤干细胞增殖,促进其分化,其机制可能与MS-275降低脑胶质瘤干细胞Cyclin D1蛋白表达而导致细胞周期受阻滞有关。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 干细胞 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 细胞增殖 细胞分化 细胞周期
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蛇六谷提取物抑制K562细胞增殖并诱导分化的作用 预览
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作者 李赛 潘磊 +3 位作者 高瑞兰 赵燕娜 余潇苓 尹利明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期592-596,共5页
目的:探讨蛇六谷提取物(TuAKe)抑制人慢性髓系白血病K562细胞增殖和诱导分化的作用机制。方法:不同浓度的TuAKe处理K562细胞,MTT比色法和半固体集落形成实验检测K562细胞的增殖能力;瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态;流式细胞术检测分化相... 目的:探讨蛇六谷提取物(TuAKe)抑制人慢性髓系白血病K562细胞增殖和诱导分化的作用机制。方法:不同浓度的TuAKe处理K562细胞,MTT比色法和半固体集落形成实验检测K562细胞的增殖能力;瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态;流式细胞术检测分化相关抗原CD11b、CD14和CD42b的阳性表达率;Western blot法检测细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白E1(cyclin E1)和红系分化核转录因子GATA-1的蛋白表达水平。结果:TuAKe能够抑制K562细胞增殖,改变细胞形态,抑制K562细胞进入S期,并阻滞在G2/M期,提高分化相关抗原CD11b、CD14和CD42b阳性表达率,上调GATA-1蛋白表达,同时下调CDK2和cyclin E1蛋白表达(P<0.05)。结论:TuAKe可能通过调控细胞周期抑制K562细胞增殖,同时诱导K562细胞多向分化。 展开更多
关键词 蛇六谷 白血病 细胞周期 细胞分化 细胞增殖
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Tonsil-derived stem cells as a new source of adult stem cells 预览
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作者 Kyung-Ah Cho Hyun Jung Lee +8 位作者 Hansaem Jeong Miri Kim Soo Yeon Jung Hae Sang Park Kyung-Ha Ryu Seung Jin Lee Byeongmoon Jeong Hyukjin Lee Han Su Kim 《世界干细胞杂志:英文版(电子版)》 2019年第8期506-518,共13页
Located near the oropharynx, the tonsils are the primary mucosal immune organ. Tonsil tissue is a promising alternative source for the high-yield isolation of adult stem cells, and recent studies have reported the ide... Located near the oropharynx, the tonsils are the primary mucosal immune organ. Tonsil tissue is a promising alternative source for the high-yield isolation of adult stem cells, and recent studies have reported the identification and isolation of tonsil-derived stem cells (T-SCs) from waste surgical tissue following tonsillectomies in relatively young donors (i.e., under 10 years old). As such, TSCs offer several advantages, including superior proliferation and a shorter doubling time compared to bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs). T-SCs also exhibit multi-lineage differentiation, including mesodermal, endodermal (e.g., hepatocytes and parathyroid-like cells), and even ectodermal cells (e.g., Schwann cells). To this end, numbers of researchers have evaluated the practical use of T-SCs as an alternative source of autologous or allogenic MSCs. In this review, we summarize the details of T-SC isolation and identification and provide an overview of their application in cell therapy and regenerative medicine. 展开更多
关键词 STEM CELL Tonsil-derived STEM CELL Differentiation ENDODERM Mesoderm ECTODERM CELL therapy
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Emdogain对共培养成骨样细胞及内皮细胞成骨及成血管基因表达的影响
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作者 王珊珊 XiaohuiRausch-Fan +3 位作者 OlehAndrukov 林毅 林李嵩 施斌 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2019年第1期32-39,共8页
目的:评价emdogain对直接与间接共培养条件下成骨样细胞和内皮细胞成骨及成血管基因表达的影响以及其间的相关性。方法:将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和成骨样细胞(MG63)按2∶1比例于12孔板内进行直接及间接共培养,并使用不同浓度(0、0.1、... 目的:评价emdogain对直接与间接共培养条件下成骨样细胞和内皮细胞成骨及成血管基因表达的影响以及其间的相关性。方法:将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和成骨样细胞(MG63)按2∶1比例于12孔板内进行直接及间接共培养,并使用不同浓度(0、0.1、1、10、50μg/mL)的emdogain共培养细胞72 h。采用细胞计数仪结合流式细胞仪评价细胞增殖情况,并通过荧光激活流式细胞分选技术分选共培养细胞。对分选后的成骨样细胞及内皮细胞采用实时荧光定量PCR分别检测成骨相关基因碱性磷酸酶(ALP)、I型胶原蛋白(Col-1)及成血管相关基因血管内皮细胞生长因子(VEGF)、VEGF酪氨酸激酶受体1(Flt-1)、VEGF酪氨酸激酶受体2(KDR)、von Willebrand因子(vWF)、内皮细胞C蛋白受体(EPCR)、E选择素(E-Selectin)、促血管生成素2(Ang-2)的表达水平。采用SPSS24.0软件包对数据进行统计学处理。结果:在直接与间接共培养条件下,Emdogain对MG63及HUVEC细胞增殖的作用具有浓度依赖性。随着emdogain浓度增加,细胞增殖率逐渐下降。50μg/mL浓度的emdogain对MG63及HUVEC细胞增殖抑制作用最为明显。随着emdogain浓度增加,MG63表面ALP和Col-1表达水平逐渐增加;50μg/mL浓度条件下,表达水平最高且与其他组基因表达水平差异显著(P<0.01)。同一emdogain浓度条件下,直接共培养MG63表面ALP及Col-1表达水平均显著高于间接共培养(P<0.01)。除10μg/mL组外,直接共培养条件下,VEGF表达水平均显著高于间接共培养(P<0.01)。50μg/mL组直接共培养的HUVEC表面Flt-1、KDR、vWF、E-selectin基因表达水平显著高于间接共培养及直接共培养的其他各组(P<0.01)。间接共培养条件下,HUVEC表面EPCR及Ang-2基因表达水平显著高于直接共培养(P<0.05)。结论:Emdogain对共培养MG63和HUVEC增殖的作用具有浓度依赖性,50μg/mL可能是emdogain作用的关键浓度。在直接共培养条件下,50μg/mL emdogain抑制MG63及 展开更多
关键词 EMDOGAIN 成骨细胞 内皮细胞 直接共培养 间接共培养 细胞增殖 细胞分化 细胞交联
千里光合子胚和胚乳形成及其早期发育的细胞学特征 预览
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作者 钱秋博言 王蕾 +4 位作者 杨春先 余金芮 谢欣 钱刚 贺莉芳 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期79-86,共8页
千里光(Senecio scandens Buch.-Ham.ex D.Don)是传统中草药,抗菌功效显著。本研究从细胞学角度对千里光合子胚和胚乳的形成与发育进行观察研究。结果显示,结构和功能迥异的基细胞和顶细胞源自细胞质不均一分布的合子所致,推测合子的极... 千里光(Senecio scandens Buch.-Ham.ex D.Don)是传统中草药,抗菌功效显著。本研究从细胞学角度对千里光合子胚和胚乳的形成与发育进行观察研究。结果显示,结构和功能迥异的基细胞和顶细胞源自细胞质不均一分布的合子所致,推测合子的极性与胚囊的极性和生殖核分裂为“二态”精细胞有关;基细胞在合子胚胎“球型期”末期出现分化,早期胚胎的组织分化始于“三角期”,可辨别的结构差异直到“鱼雷期”才出现。此外,胚乳形成遵循无细胞壁核化模型。本研究对千里光细胞分化、组织分化和结构差异各发育阶段特征的观察结果,不仅可为深入分析胚胎发育过程功能基因的时空表达提供依据,也为相关近缘物种的系统植物学研究提供参考资料。 展开更多
关键词 千里光 细胞分化 组织分化 合子胚 胚乳
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胶质细胞源性神经营养因子体外诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化 预览
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作者 刘振东 王瑞 +1 位作者 杨建东 王静成 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第29期4605-4609,共5页
背景:骨髓间充质干细胞作为中胚层来源的多能干细胞,除了能够分化为间充质系细胞如成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞外,还具有神经分化潜能,具有广阔的应用前景。目的:探讨胶质细胞源性神经营养因子体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元... 背景:骨髓间充质干细胞作为中胚层来源的多能干细胞,除了能够分化为间充质系细胞如成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞外,还具有神经分化潜能,具有广阔的应用前景。目的:探讨胶质细胞源性神经营养因子体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的可行性。方法:选用健康SD大鼠,采用全骨髓贴壁法体外培养、纯化骨髓间充质干细胞,经流式细胞仪进行细胞表型鉴定。取生长状态良好的第4代骨髓间充质干细胞进行实验分组:对照组不加任何诱导剂;实验组培养液内加入胶质细胞源性营养因子,调整质量浓度分别为20,50,100μg/L,倒置相差显微镜连续观察细胞生长情况及形态变化。诱导6,12,24,48,72h,采用免疫组化法检测巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶的表达。结果与结论:①原代提取获得的骨髓间充质干细胞形态均一性较好,流式细胞仪检测结果为CD44,CD90呈强阳性表达,CD34,CD45阳性表达率很低;②经胶质细胞源性营养因子诱导后,细胞胞体逐渐向胞核收缩,变形细胞逐渐增多,出现双极、多极和锥形等典型的神经元样细胞形态,细胞边缘出现突起,且与邻近细胞突起逐渐相互连接;③胶质细胞源性营养因子诱导6h后出现巢蛋白表达阳性,24h后达顶峰,50,100μg/L胶质细胞源性营养因子组巢蛋白表达显著高于20μg/L胶质细胞源性营养因子组。胶质细胞源性营养因子诱导12h后检测到神经元特异性烯醇化酶表达阳性,且表达强度随时间延长逐渐增加,48h后达顶峰,50,100μg/L胶质细胞源性营养因子组巢蛋白表达显著高于20μg/L胶质细胞源性营养因子组。对照组未见明显神经元样细胞的形态变化及特异性标志的阳性表达;④结果表明,大鼠骨髓间充质干细胞可通过全骨髓贴壁法在体外进行原代提取分离及传代培养,经胶质细胞源性营养因子诱导后具有向神经元样细胞分化的潜能。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 胶质细胞源性神经营养因子 细胞分化 神经细胞 巢蛋白 神经元特异性烯醇化酶 国家自然科学基金
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线粒体调控造血干细胞功能的研究进展 被引量:1
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作者 刘子闲 董芳 +2 位作者 张森 韩明哲 依马秀夫 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期277-282,共6页
线粒体是真核细胞中特有的双层膜细胞器,其目前已知作用包括能量代谢、信号转导、细胞增殖与凋亡的调控等。近年来研究显示,线粒体在造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)功能维持和细胞定向分化调节中发挥着重要作用:线粒体合成... 线粒体是真核细胞中特有的双层膜细胞器,其目前已知作用包括能量代谢、信号转导、细胞增殖与凋亡的调控等。近年来研究显示,线粒体在造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)功能维持和细胞定向分化调节中发挥着重要作用:线粒体合成受限及线粒体及时清除是抵抗氧化应激、维持HSC稳态的重要手段;线粒体累积将导致HSC增殖甚至衰老;线粒体通过调节细胞内钙离子浓度调控HSC谱系分化。本文就以上相关内容进行详细探讨,旨在深入理解线粒体如何影响HSC的功能,为HSC的代谢调控研究提供理论参考。 展开更多
关键词 线粒体 造血干细胞 静息状态 细胞分化 衰老
Notch1/Hes1信号调控C/EBPα表达对AECII细胞增殖与分化的影响 预览
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作者 万峰云 卢红艳 +2 位作者 万雪晴 朱玥 郝晓波 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期495-499,共5页
目的:探讨Notch1/Hes1信号通路能否通过调控CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的表达从而影响肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的增殖与分化功能。方法:体外培养人AECⅡ,将细胞随机分为对照组、激活剂组(加入Notch通路激活剂Jagged1蛋白500μg/L... 目的:探讨Notch1/Hes1信号通路能否通过调控CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的表达从而影响肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的增殖与分化功能。方法:体外培养人AECⅡ,将细胞随机分为对照组、激活剂组(加入Notch通路激活剂Jagged1蛋白500μg/L)和抑制剂组(加入Notch通路抑制剂DAPT 10μmol/L),于干预后24 h收获各组细胞。采用RT-qPCR和Western blot法分别检测Notch1、Hes1及C/EBPα的mRNA与蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞活力;细胞计数检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期及分化。结果:与对照组相比,激活剂组Notch1、Hes1和C/EBPα的mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05),促进AECⅡ从S期进入G2/M期,增殖增加而分化减少(P<0.05);抑制剂组Notch1、Hes1和C/EBPαmRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),AECⅡ被阻滞于G0/G1期,增殖减少而分化增加(P<0.05)。结论:Notch1/Hes1信号可调控C/EBPα表达并能影响AECⅡ增殖与分化。 展开更多
关键词 Notch1/Hes1信号通路 CCAAT/增强子结合蛋白α 肺泡Ⅱ型上皮细胞 细胞增殖 细胞分化
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胶质瘤致病相关蛋白1对肺癌A549细胞生长及分化的影响 预览 被引量:1
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作者 生秀梅 黄新祥 王正新 《郑州大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2019年第1期5-8,共4页
目的:观察胶质瘤致病相关蛋白1(GLIPR1)对肺癌A549细胞生长及分化的影响,以期为肺癌药物的研制提供线索。方法:构建重组慢病毒Lenti-GLIPR1和包含GLIPR1胞外可溶性区段(GLIPR1-S)基因片段的LentiGLIPR1-S,感染A549细胞后,通过Western b... 目的:观察胶质瘤致病相关蛋白1(GLIPR1)对肺癌A549细胞生长及分化的影响,以期为肺癌药物的研制提供线索。方法:构建重组慢病毒Lenti-GLIPR1和包含GLIPR1胞外可溶性区段(GLIPR1-S)基因片段的LentiGLIPR1-S,感染A549细胞后,通过Western blot法检测GLIPR1或GLIPR1-S蛋白的表达,细胞计数法检测细胞生长,免疫细胞化学法观察细胞分化。结果:A549细胞经慢病毒Lenti-GLIPR1和Lenti-GLIPR1-S感染后,均可表达相应蛋白,细胞生长受抑,细胞形态发生改变,向肺上皮细胞分化。结论:感染GLIPR1和GLIPR1-S均可促进A549细胞向肺上皮细胞分化,抑制A549细胞的生长。 展开更多
关键词 GLIPR1 GLIPR1-S 肺肿瘤 A549细胞 细胞分化
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DAPT对肺纤维化小鼠Th17细胞分化的影响 预览
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作者 徐芳 王爱利 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第13期12-17,共6页
目的研究γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断NOTCH信号通路对博来霉素致肺纤维化动物模型Th17细胞分化的影响,探索肺纤维化的发病机制。方法选取15只昆明鼠按随机数字表法分为对照组、模型组及DAPT组,每组5只。对照组气管注入生理盐水(1.25ml/kg)... 目的研究γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断NOTCH信号通路对博来霉素致肺纤维化动物模型Th17细胞分化的影响,探索肺纤维化的发病机制。方法选取15只昆明鼠按随机数字表法分为对照组、模型组及DAPT组,每组5只。对照组气管注入生理盐水(1.25ml/kg),其余两组注入博来霉素(5mg/kg)复制肺纤维化模型。DAPT组于模型复制次日起用DAPT溶液灌胃[5mg/(kg·d)],隔天1次,直到处死。于第28天处死动物,取左肺组织行苏木精-伊红(HE)染色观察肺泡炎和肺纤维化程度。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肺组织NOTCH1、白细胞介素-17(IL-17)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达水平。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血NOTCH1、IL-17的含量。流式细胞术检测辅助T细胞17(Th17)的比例。结果模型组肺泡炎及纤维化程度较重,DAPT组炎症程度较模型组减轻,纤维组织大量减少。qRT-PCR结果显示,模型组NOTCH1、IL-17和α-SMAmRNA的表达水平均较对照组升高(P<0.05),NOTCH1水平与IL-17呈正相关(P<0.05);DAPT组较模型组下降(P<0.05)。ELISA结果显示DAPT组的外周血IL-17及NOTCH1含量较模型组下降(P<0.05)。流式细胞术结果显示模型组CD3^+CD4^+IL-17^+细胞数量增加(P<0.05),DAPT组较模型组降低(P<0.05)。结论DAPT阻断NOTCH信号通路的激活,抑制Th17的分化,减轻肺纤维化程度。 展开更多
关键词 肺纤维化 TH17细胞 受体 NOTCH1 细胞分化 DAPT
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miR-132-3p过表达对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响 预览
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作者 孙芬 刘名燕 +2 位作者 刘铭 孙心旖 冯云霞 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第1期59-64,共6页
背景:机械牵引力能够影响MC3T3-E1细胞的增殖分化过程,并引起细胞内miR-132-3p的差异表达。然而,牵引力是否通过调控miR-132-3p的表达来影响成骨细胞增殖分化仍需进一步研究。目的:明确12%牵引力作用下MC3T3-E1细胞中成骨分化标志因子及... 背景:机械牵引力能够影响MC3T3-E1细胞的增殖分化过程,并引起细胞内miR-132-3p的差异表达。然而,牵引力是否通过调控miR-132-3p的表达来影响成骨细胞增殖分化仍需进一步研究。目的:明确12%牵引力作用下MC3T3-E1细胞中成骨分化标志因子及miR-132-3p表达变化,并进一步探讨miR-132-3p对细胞增殖分化的影响。方法:MC3T3-E1细胞分别加载0%,12%牵张应力,检测应力加载后碱性磷酸酶活性、骨钙蛋白及miR-132-3pmRNA的表达水平;细胞内瞬时转染miR-132-3p模拟物及其阴性对照,qRT-PCR检测转染后碱性磷酸酶、骨钙蛋白、Runt标志转录因子2mRNA的表达,CCK-8法检测miR-132-3p对细胞增殖能力的影响。结果与结论:①12%牵张应力作用下,MC3T3-E1细胞中碱性磷酸酶活性、骨钙蛋白mRNA表达水平下调(P<0.01),miR-132-3p表达水平显著升高(P<0.05);②细胞内转染miR-132-3p后,miR-132-3p模拟物组成骨分化标志因子碱性磷酸酶、骨钙蛋白、Runt标志转录因子2mRNA表达水平显著降低(P<0.05);③相比于阴性对照组,miR-132-3p模拟物转染24,48,72h后细胞增殖能力明显降低(P<0.001),且在转染48h后降低最明显;④结果说明12%周期性循环牵张应力能够通过过表达miR-132-3p负向调节MC3T3-E1细胞的增殖和成骨分化。 展开更多
关键词 机械牵引力 miR-132-3p MC3T3-E1细胞 细胞分化 碱性磷酸酶 骨钙蛋白 细胞增殖 国家自然科学基金
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骨形态发生蛋白2及碱性成纤维生长因子2对大鼠骨髓间充质干细胞膜片增殖和成骨分化的影响 预览
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作者 张文静 王佳 +3 位作者 田梦婷 韩祥祯 周琦琪 何惠宇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第1期65-71,共7页
背景:现阶段骨形态发生蛋白2和碱性成纤维生长因子2对骨髓间充质干细胞膜片增殖、成骨分化的影响和作用机制还尚未可知,如何将生长因子与组织工程细胞膜片技术相整合,最终将其用于骨缺损修复具有重要意义。目的:探讨单独及联合应用骨形... 背景:现阶段骨形态发生蛋白2和碱性成纤维生长因子2对骨髓间充质干细胞膜片增殖、成骨分化的影响和作用机制还尚未可知,如何将生长因子与组织工程细胞膜片技术相整合,最终将其用于骨缺损修复具有重要意义。目的:探讨单独及联合应用骨形态发生蛋白2和碱性成纤维生长因子2对骨髓间充质干细胞膜片增殖和成骨分化的影响。方法:体外分离培养鉴定SD大鼠骨髓间充质干细胞并构建细胞膜片,选用不同质量浓度的骨形态发生蛋白2和碱性成纤维生长因子2单独及联合诱导骨髓间充质干细胞膜片,CCK-8法结合碱性磷酸酶活性检测确定2种因子促进膜片增殖和成骨分化的最佳有效质量浓度;然后对骨髓间充质干细胞膜片进行成骨诱导,通过大体及显微镜观察、Vonkossa染色、茜素红染色、RT-PCR检测相关成骨标志物来评估诱导效果。结果与结论:单独应用骨形态发生蛋白2可增强骨髓间充质干细胞膜片的碱性磷酸酶活性,最佳质量浓度为100μg/L(P<0.001),单独应用碱性成纤维生长因子2能加速骨髓间充质干细胞膜片的增殖,最佳质量浓度为20μg/L(P<0.001),而联合应用既可以促进膜片增殖又能提高其碱性磷酸酶活性(P<0.001);经成骨诱导后,4组膜片在形态学上无明显差异,均能诱导骨髓间充质干细胞膜片的成骨分化,其中联合组钙结节最明显(P<0.001),可显著促进膜片晚期成骨分化并抑制其早期成骨分化,具有明显的协同促进作用(P<0.001)。结果表明,骨形态发生蛋白2和碱性成纤维生长因子2联合应用时具有协同作用,既可以促进骨髓间充质干细胞膜片增殖,又能显著增强其成骨诱导能力。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白2 成纤维细胞生长因子2 细胞膜片技术 细胞增殖 成骨分化
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Synergistic effects of combined therapy of curcumin and Fructus Ligustri Lucidi for treatment of osteoporosis: cellular and molecular evidence of enhanced bone formation
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作者 Syed Nasir Abbas Bukhari Fahad Hussain +1 位作者 Hnin Ei Thu Zahid Hussain 《结合医学学报:英文版》 CAS CSCD 2019年第1期38-45,共8页
OBJECTIVE: The present study explored the effects of the combined herbal therapy consisting of curcumin (CUR) and Fructus Ligustri Lucidi (FLL) on aspects of bone regeneration. METHODS: Prior to analyzing the ability ... OBJECTIVE: The present study explored the effects of the combined herbal therapy consisting of curcumin (CUR) and Fructus Ligustri Lucidi (FLL) on aspects of bone regeneration. METHODS: Prior to analyzing the ability of this novel combined herbal therapy to promote aspects of bone regeneration, its cytotoxicity was determined using MC3T3-E1 cells (pre-osteoblast model). Cell proliferation was evaluated using phase-contrast microscopy and cell differentiation was estimated using alkaline phosphatase activity. The effect of the combined herbal therapy (CUR + FLL) was also assessed in terms of mineralization in the extracellular matrix (ECM) of cultured cells. Further, to explore the molecular mechanisms of bone formation, time-dependent expression of bone-regulating protein biomarkers was also evaluated. RESULTS: Combined herbal therapy (CUR + FLL) significantly upregulated the viability, proliferation and differentiation of MC3T3-E1 cells compared to the monotherapy of CUR or FLL. The magnitude of ECM mineralization (calcium deposition) was also higher in MC3T3-E1 cells treated with combined therapy. The time-dependent expression of bone-forming protein biomarkers revealed that the tendency of expression of these bone-regulating proteins was remarkably higher in cells treated with combined therapy.CONCLUSION: The co-administration of CUR and FLL had superior promotion of elements of bone regeneration in cultured cells, thus could be a promising alternative herbal therapy for the management of bone erosive disorders such as osteoporosis. 展开更多
关键词 OSTEOPOROSIS CURCUMIN Fructus Ligustri Lucidi Combined HERBAL therapy CELL proliferation CELL DIFFERENTIATION BONE formation
白芍总苷对小鼠成骨细胞增殖、分化和矿化的影响
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作者 赵向绒 王海芳 +5 位作者 刘杨 霍雪萍 梁导艳 孙晶莹 胡军 武敏 《中国中西医结合杂志》 CSCD 北大核心 2019年第10期1230-1233,共4页
目的研究白芍总苷(TGP)对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)增殖、分化和矿化的影响。方法采用MTT法和流式细胞术检测TGP对MC3T3-E1细胞增殖和细胞周期的影响;诱导MC3T3-E1成骨分化,通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性和RT-PCR法检测人类相关转录因子2(R... 目的研究白芍总苷(TGP)对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)增殖、分化和矿化的影响。方法采用MTT法和流式细胞术检测TGP对MC3T3-E1细胞增殖和细胞周期的影响;诱导MC3T3-E1成骨分化,通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性和RT-PCR法检测人类相关转录因子2(Runx2)基因表达,分析TGP对成骨分化的影响,采用茜素红染色分析TGP对矿化的影响。结果 3、10 μg/L TGP均能促进MC3T3-E1细胞增殖(P<0.05, P<0.01);10 μg/L TGP可使G1期细胞的比例减少,S+ G2期细胞的比例增加(P<0.05);与对照组比较,TGP处理组细胞的ALP活性和Runx2表达水平显著升高(P<0.05, P<0.01),且矿化结节量明显增加。结论 TGP具有促进MC3T3-E1细胞增殖和分化成熟的能力,为炎性骨质疏松的治疗策略提供了实验依据和治疗思路。 展开更多
关键词 白芍总苷 成骨细胞 细胞增殖 成骨分化 矿化 人类相关转录因子2
FoxO1转录因子与肝纤维化的关系研究进展 预览
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作者 廖丹 钱波 徐敏 《中国医药导报》 CAS 2019年第13期54-57,共4页
FoxO1作为叉头转录因子家族中的成员,能够促进肝细胞糖异生基因的表达,同时促进ApoC-Ⅲ的表达,形成非酒精性脂肪肝病导致肝纤维化;FoxO1通过调节自噬基因的表达及参与肝星状细胞自噬来调节肝纤维化;FoxO1能通过参与肝星状细胞细胞周期... FoxO1作为叉头转录因子家族中的成员,能够促进肝细胞糖异生基因的表达,同时促进ApoC-Ⅲ的表达,形成非酒精性脂肪肝病导致肝纤维化;FoxO1通过调节自噬基因的表达及参与肝星状细胞自噬来调节肝纤维化;FoxO1能通过参与肝星状细胞细胞周期阻滞而调节肝纤维化;PDGF因子可以通过调节FoxO1表达参与肝星状细胞的活化而调节肝纤维化;FoxO1通过参与脂肪细胞、肌纤维细胞的分化来调节肝纤维化的形成。本文将从上述方面阐述FoxO1与肝纤维化的关系进行综述。 展开更多
关键词 FOXO1 肝纤维化 肝星状细胞 糖脂代谢 自噬 细胞周期阻滞 细胞分化
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Extracellular matrix and biomimetic engineering microenvironment for neuronal differentiation 预览
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作者 Deepak Jain Sabrina Mattiassi +1 位作者 Eyleen L.Goh Evelyn K.F.Yim 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2020年第4期573-585,共13页
Extracellular matrix(ECM)influences cell differentiation through its structural and biochemical properties.In nervous system,neuronal behavior is influenced by these ECMs structures which are present in a meshwork,fib... Extracellular matrix(ECM)influences cell differentiation through its structural and biochemical properties.In nervous system,neuronal behavior is influenced by these ECMs structures which are present in a meshwork,fibrous,or tubular forms encompassing specific molecular compositions.In addition to contact guidance,ECM composition and structures also exert its effect on neuronal differentiation.This short report reviewed the native ECM structure and composition in central nervous system and peripheral nervous system,and their impact on neural regeneration and neuronal differentiation.Using topographies,stem cells have been differentiated to neurons.Further,focussing on engineered biomimicking topographies,we highlighted the role of anisotropic topographies in stem cell differentiation to neurons and its recent temporal application for efficient neuronal differentiation. 展开更多
关键词 biomimetic platforms biophysical cues contact guidance extracellular matrix neuronal development neural regeneration neural stem cell niche neuronal differentiation neuronal maturation stem cell topography
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SD乳鼠骨髓间充质干细胞体外改良筛选法培养及鉴定 预览
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作者 李楠 翁军权 +1 位作者 谢华德 孙海鹏 《标记免疫分析与临床》 CAS 2019年第5期851-857,共7页
目的评估应用SD乳鼠骨髓的改良筛选法分离培养骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs)的可行性及优势,探讨一种简单高效的BMSCs体外分离、纯化及扩增的方法。方法选择7d龄SD大鼠6只,无菌解剖大鼠双侧股骨,于完全培... 目的评估应用SD乳鼠骨髓的改良筛选法分离培养骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs)的可行性及优势,探讨一种简单高效的BMSCs体外分离、纯化及扩增的方法。方法选择7d龄SD大鼠6只,无菌解剖大鼠双侧股骨,于完全培养基浸泡、剪碎,反复吹打暴露骨髓腔,高速震荡3min后取上清液接种于培养瓶中,24h后半量换液,48h后全量换液,以后隔天换液。应用CCK-8法测定生长曲线;成骨分化诱导3周后进行茜素红染色,成脂分化诱导4周后进行油红“O”染色;应用流式细胞仪鉴定细胞表面抗原。结果原代培养的BMSCs细胞生长曲线呈“S”形,接种1d后有少量细胞贴壁,第3~6天为对数增殖期,第7天进入平台期。BMSCs经成骨诱导3周后茜素红染色细胞外基质中可见深红色团块状矿化结节;经成脂肪诱导4周后胞浆内充满“串珠状”红色脂滴。流式细胞仪检测BMSCs表面抗原CD29、CD44、CD90阳性,CD34和CD45阴性。结论应用7d龄SD乳鼠的改良全骨髓自然贴壁筛选法可以高效分离纯化出BMSCs。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 细胞分离 细胞培养 SD乳鼠 诱导分化
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