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CPI203抑制肾癌ACHN细胞增殖及其机制 预览
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作者 梁琼仙 胡波 +1 位作者 张海红 谭晓军 《分子影像学杂志》 2019年第2期253-257,共5页
目的研究CPI203杀伤人肾癌ACHN细胞的能力及潜在机制。方法不同浓度(0、0.1、0.5、1、5μmol/L)CPI203药物作用于ACHN细胞24、48h后,采用CCK8试剂盒检测CPI203抑制ACHN细胞增殖效果;采用流式细胞术分析CPI203对ACHN细胞凋亡及细胞周期... 目的研究CPI203杀伤人肾癌ACHN细胞的能力及潜在机制。方法不同浓度(0、0.1、0.5、1、5μmol/L)CPI203药物作用于ACHN细胞24、48h后,采用CCK8试剂盒检测CPI203抑制ACHN细胞增殖效果;采用流式细胞术分析CPI203对ACHN细胞凋亡及细胞周期的影响;划痕实验观察CPI203影响ACHN细胞迁移及侵袭能力;克隆形成实验检测CPI203抑制ACHN细胞克隆集落形成能力;荧光定量PCR法及免疫印迹法分别分析CPI203作用于ACHN细胞后,MYC、NOXA、AKT、ERK、CyclinD1和GSK3β的表达量变化情况。结果CPI203明显抑制肾癌细胞株ACHN细胞增殖,并呈时间及浓度依赖性(P<0.05);CPI203药物可促进ACHN细胞凋亡并抑制细胞生长周期(P<0.05);CPI203呈浓度依赖性地降低ACHN细胞的克隆形成能力及迁移能力(P<0.05);CPI203降低肾癌ACHN细胞中MYC、NOXA、AKT、ERK、CyclinD1和GSK3β表达量减少(P<0.05)。结论CPI203可抑制ACHN细胞增殖,促进肾癌细胞凋亡并抑制其生长周期进展,明显抑制癌细胞迁移及克隆形成能力,其作用机制与CPI203影响肾癌ACHN细胞中MYC、NOXA、AKT、ERK、CyclinD1和GSK3β表达量有关。 展开更多
关键词 肾癌 CPI203 ACHN细胞 细胞凋亡 细胞周期 细胞增殖
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ShRNA-survivin基因对肝癌Huh7细胞增殖、迁移和凋亡的影响 预览
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作者 林海华 余玉红 +3 位作者 张绍敏 陈出新 刘国军 张丽 《精准医学杂志》 2019年第2期122-125,共4页
目的 探讨生存素(survivin)基因对肝癌Huh7细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法 将肝癌细胞分为空白对照组(A组)、空白载体病毒组(B组)和ShRNA-survivin慢病毒组(C组),构建ShRNA-survivin慢病毒载体,通过RT-qPCR检测凋亡因子半胱氨酸天冬... 目的 探讨生存素(survivin)基因对肝癌Huh7细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法 将肝癌细胞分为空白对照组(A组)、空白载体病毒组(B组)和ShRNA-survivin慢病毒组(C组),构建ShRNA-survivin慢病毒载体,通过RT-qPCR检测凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)以及Caspase-3mRNA的表达量;通过CCK-8实验检测肝癌Huh7细胞增殖能力;通过Transwell小室实验检测肝癌Huh7细胞迁移能力;通过AV-PI凋亡试剂盒检测肝癌Huh7细胞的凋亡情况。结果 A、B、C组survivinmRNA的相对表达量分别为1.000±0.000、1.079±0.011、0.421±0.097,A、B组与C组比较差异具有显著统计学意义(F=15.984,q=8.141、3.257,P<0.05),Caspase-3和Caspase-9的mRNA表达量与survivin的mRNA表达量趋势相同;A、B、C组中透过分子筛的细胞数比较差异有显著性(F=31.982,P<0.05);A、B组与C组比较差异均有显著意义(q=7.153、9.074,P<0.05);A、B、C组细胞的增殖率比较差异有显著意义(F=23.983,P<0.05);A、B组与C组比较差异均有显著意义(q=10.322、9.886,P<0.05);A、B、C组细胞的凋亡率比较差异有显著意义(F=30.009,P<0.05);A、B组与C组比较差异均有显著意义(q=9.531、8.001,P<0.05)。结论 ShRNA-survivin对肝癌Huh7细胞的增殖、迁移有抑制作用,对细胞凋亡具有促进作用,可以作为肝癌的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 SURVIVIN 凋亡抑制蛋白质类 肝肿瘤 细胞增殖 细胞运动 细胞凋亡 细胞系 肿瘤
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乌骨藤中C21甾体苷诱导SACC-83和SACC-LM细胞凋亡的作用及其机制研究
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作者 徐加杰 葛明华 +3 位作者 郑国湾 王林红 郭海魏 郑传铭 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1205-1211,共7页
目的研究乌骨藤提取物C21甾体苷对唾液腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinomacv,SACC)低侵袭细胞株(salivaryadenoidcysticcarcinoma-83,SACC-83)和肺高转移细胞株(SACC-LM)增殖抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法用不同浓度... 目的研究乌骨藤提取物C21甾体苷对唾液腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinomacv,SACC)低侵袭细胞株(salivaryadenoidcysticcarcinoma-83,SACC-83)和肺高转移细胞株(SACC-LM)增殖抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法用不同浓度(5,10,20,40,60,80,100μmol·L-1)C21甾体苷处理SACC-83和SACC-LM细胞48 h后,MTT法检测细胞活力,并计算药物的IC20和IC50;细胞克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测SACC-83及SACC-LM细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR和Western blot检测SACC-83和SACC-LM细胞Bcl-2、Bax、caspase 3的mRNA和蛋白的表达。结果不同浓度的C21甾体苷降低SACC-83和SACC-LM细胞活力,抑制细胞增殖,并且作用于SACC-83细胞C21甾体苷的IC20浓度为7.49μmol·L-1,IC50浓度为38.34μmol·L-1;作用于SACC-LM细胞的C21甾体苷IC20浓度为9.30μmol·L-1,IC50浓度为46.04μmol·L-1;细胞克隆集落形成明显减少。C21甾体苷IC20浓度分别促进SACC-83及SACC-LM细胞凋亡,且随着给药时间延长,凋亡率增加,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。经7.49,9.30μmol·L-1C21甾体苷分别处理SACC-83及SACC-LM细胞后,Bcl-2的mRNA及蛋白水平显著降低(P<0.01),而Bax、Caspase3的mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论乌骨藤C21甾体苷抑制SACC-83及SACC-LM细胞增殖、促进凋亡,其作用机制可能与调控Bcl-2、Bax和Caspase 3表达有关。 展开更多
关键词 乌骨藤 C21甾体苷 SACC-83细胞 SACC-LM细胞 细胞增殖 细胞凋亡
竹节参皂苷Ⅳ、Ⅳa和Ⅴ对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的作用
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作者 张莹 王广 +4 位作者 左天 张小海 张祚 徐燃 张绍鹏 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期796-801,共6页
目的研究竹节参齐墩果烷型皂苷单体对人胃癌SGC-7901细胞的增殖、迁移和侵袭以及凋亡的影响。方法实验分空白对照组、阳性对照组(5-氟脲嘧啶)和竹节参皂苷组。将不同浓度的竹节参皂苷Ⅳ、Ⅳa和Ⅴ分别体外作用于胃癌SGC-7901细胞,采用CC... 目的研究竹节参齐墩果烷型皂苷单体对人胃癌SGC-7901细胞的增殖、迁移和侵袭以及凋亡的影响。方法实验分空白对照组、阳性对照组(5-氟脲嘧啶)和竹节参皂苷组。将不同浓度的竹节参皂苷Ⅳ、Ⅳa和Ⅴ分别体外作用于胃癌SGC-7901细胞,采用CCK-8法检测竹节参皂苷对胃癌细胞增殖的抑制能力;利用流式细胞法分析竹节参皂苷对胃癌细胞凋亡的影响;通过划痕实验和Transwell小室检测皂苷对胃癌细胞的迁移能力和侵袭能力的影响。结果作用于细胞48 h后,在37.5~600μg·mL-1的浓度范围内,皂苷Ⅳ、Ⅳa和Ⅴ均以浓度依赖方式抑制胃癌细胞增殖,以皂苷Ⅳa的抑制作用最强;流式细胞法检测显示,250、500μg·mL-1浓度的皂苷Ⅳ、Ⅳa和Ⅴ在作用于胃癌细胞48 h后均表现出不同程度的凋亡诱导作用,且呈浓度依赖性,其中以皂苷Ⅳ的作用最强;250、500μg·mL-1浓度的皂苷Ⅳ、Ⅳa和Ⅴ作用24 h后可明显抑制胃癌细胞的迁移和侵袭,且呈浓度依赖性。结论竹节参齐墩果烷型皂苷能够明显诱导胃癌SGC-7901细胞的凋亡,并可显著抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 竹节参 齐墩果烷型皂苷 胃癌 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移 细胞凋亡
长链非编码RNA LINC00324对非小细胞肺癌细胞生物学功能的影响
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作者 周征宇 向颖 +11 位作者 袁帅 吴龙 邬娜 谢薇佳 许斌 李成英 张耀 马翔宇 蔡同建 余祖滨 白莉 李亚斐 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期331-338,共8页
目的观测长链非编码RNA LINC00324在非小细胞肺癌中的表达情况,探讨其对非小细胞肺癌细胞系生物学功能的影响。方法通过qRT-PCR检测LINC00324在65对配对肺癌组织及癌旁正常组织中的表达,检测不同非小细胞肺癌细胞系(4株非小细胞肺癌细胞... 目的观测长链非编码RNA LINC00324在非小细胞肺癌中的表达情况,探讨其对非小细胞肺癌细胞系生物学功能的影响。方法通过qRT-PCR检测LINC00324在65对配对肺癌组织及癌旁正常组织中的表达,检测不同非小细胞肺癌细胞系(4株非小细胞肺癌细胞系:A549、SPCA1、H460和H1299;1株支气管上皮细胞系:HBE)中LINC00324基因的表达;构建LINC00324基因的过表达载体,构建LINC00324过表达细胞系;采用CCK-8、Transwell、流式细胞术检测过表达LINC00324基因后对非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响。结果 LINC00324在肺癌组织中较癌旁正常组织低表达(P<0.05);以HBE作为对照,LINC00324在A549和H460细胞系中相对低表达(P<0.05),在H1299和SPCA1细胞系中相对高表达(P<0.05);成功构建LINC00324过表达A549和H460细胞系,LINC00324基因在A549和H460过表达细胞系中表达均升高(P<0.05);CCK-8实验显示,过表达LINC00324基因能够抑制H460和A549肺癌细胞的增殖(P<0.05);Transwell实验显示,过表达LINC00324基因较空质粒对照组能够显著降低H460和A549肺癌细胞的侵袭和迁移(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,过表达LINC00324基因较空质粒对照组能够显著增加H460和A549肺癌细胞的凋亡(P<0.05)。结论长链非编码RNA LINC00324可能通过调节肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡,在肺癌的发生、发展中起着重要的抑癌基因作用。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 长链非编码RNA LINC00324 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 细胞凋亡
miR-184通过抑制EPB41L5调控大鼠肾癌细胞增殖及迁移
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作者 李斌斌 唐兴国 刘宏伟 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期3312-3316,共5页
为了探讨miR-184对肾癌细胞的影响及机制,本研究选取肾癌细胞株786-0细胞,随机分为对照组、空白转染组和miR-184转染组,其中miR-184转染组转染miR-184 mimic,空白转染组转染空白mimic,采用CCK-8细胞增殖实验检测各组细胞增殖,流式细胞... 为了探讨miR-184对肾癌细胞的影响及机制,本研究选取肾癌细胞株786-0细胞,随机分为对照组、空白转染组和miR-184转染组,其中miR-184转染组转染miR-184 mimic,空白转染组转染空白mimic,采用CCK-8细胞增殖实验检测各组细胞增殖,流式细胞仪检测各组细胞凋亡,划痕实验检测各组细胞迁移,Western blotting检测各组EPB41L5蛋白表达。研究结果表明miR-184转染组培养48 h和培养72 h时OD值分别为(0.964±0.103)和(1.011±0.121),明显低于对照组和空白转染组(p<0.05);miR-184转染组培养72 h后细胞凋亡率为(18.22±2.26)%,明显高于对照组和空白转染组(p<0.05);miR-184转染组培养24 h后细胞迁移数为(17.21±3.06)个,明显低于对照组和空白转染组(p<0.05);miR-184转染组细胞EPB41L5蛋白相对表达量为(0.241±0.061),明显低于对照组和空白转染组(p<0.05)。本研究初步表明:miR-184可抑制肾癌786-0细胞增殖和迁移,促进细胞凋亡,其可能与其抑制EPB41L5蛋白表达有关。 展开更多
关键词 肾癌 miR-184 EPB41L5蛋白 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移
下调Annexin A3基因对结肠癌HCT116/L-OHP细胞生物学特性影响
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作者 孙佳 肖海娟 +3 位作者 闫克敏 王娇娇 李文姣 帖君 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期771-777,共7页
目的肿瘤患者体内人膜联蛋白A3(annexinA3,ANXA3)水平升高可能为结直肠癌(colorectal cancer,CRC)潜在筛查的标志物。本研究探讨ANXA3在CRC耐药细胞株HCT116/LOHP中表达,及其对细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法设计合成慢病毒载体GV493... 目的肿瘤患者体内人膜联蛋白A3(annexinA3,ANXA3)水平升高可能为结直肠癌(colorectal cancer,CRC)潜在筛查的标志物。本研究探讨ANXA3在CRC耐药细胞株HCT116/LOHP中表达,及其对细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法设计合成慢病毒载体GV493,感染HCT116/L-OHP耐药细胞株,实验分为对照组、空载体组、LV-ANXA3-RNAi-1实验组和LV-ANXA3-RNAi-2实验组4组。利用qRT-PCR和蛋白质印迹法分别检测ANXA3mRNA和蛋白表达水平;CCK-8法测定细胞体外增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Transwell双室法检测细胞侵袭能力。结果成功构建下调ANAX3稳定感染细胞株,与对照组(4.889±0.652 7)和空载体组(1.000±0.062 3)相比,实验组LV-ANXA3-RNAi-1(0.532 7±0.039 8)与LV-ANXA3-RNAi-2(0.466 9±0.014 8)的ANXA3mRNA表达量下降,F=125.5,P<0.001;实验组LV-ANXA3-RNAi-1、LV-ANXA3-RNAi-2的ANXA3蛋白表达为0.147 5±0.015 5、0.149 1±0.010 7与对照组(0.937 4±0.025 8)和空载体组(0.678 5±0.063 7)相比,ANXA3蛋白表达量下降,F=123.2,P<0.001;实验组细胞增殖速度减慢,P<0.001;LV-ANXA3-RNAi-1和LV-ANXA3-RNAi-2实验组细胞凋亡率分别为(26.2±0.519 6)%、(36.47±0.545 7)%,高于对照组(7.2±0.404 1)%和空载体组(3.3±0.230 9)%,F=1 259,P<0.001;LV-ANXA3-RNAi-1和LV-ANXA3-RNAi-2实验组穿透滤膜的细胞数量分别为63.67±6.119、50.00±5.132,少于对照组(112.3±1.453)和空载体组(100.0±4.359)穿透滤膜的细胞数量,细胞侵袭能力下降,F=40.89,P<0.001。结论下调ANXA3基因可抑制人结肠癌细胞HCT116/L-OHP的增殖,促进细胞凋亡,降低细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 ANXA3 结肠癌 HCT116/L-OHP细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭
IAP抑制剂增强TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展 预览
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作者 郝金莉 罗保斌 +1 位作者 魏燕妮 李慧萍 《河北北方学院学报:自然科学版》 2019年第6期57-60,共4页
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)可高效、特异地诱导肿瘤细胞凋亡,但某些肿瘤细胞对TRAIL介导的细胞凋亡并不敏感。凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs... 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)可高效、特异地诱导肿瘤细胞凋亡,但某些肿瘤细胞对TRAIL介导的细胞凋亡并不敏感。凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)抑制剂与TRAIL联合应用能够显著增强TRAIL介导的肿瘤细胞凋亡。综述了IAP抑制剂对TRAIL的协同增效作用及可能的机制。 展开更多
关键词 细胞凋亡 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 凋亡抑制蛋白 IAP抑制剂
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植物化学物复方抗癌实验研究 预览
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作者 祝和成 扬升 +7 位作者 祝斌 徐扬 姚毅 李旺 唐大寒 黄雅静 罗以 任彩萍 《肿瘤代谢与营养电子杂志》 2019年第1期47-52,共6页
目的研究人参皂苷、白藜芦醇、灵芝多糖及冬虫夏草四种植物化学物单药其及复方的体外抗癌活性,探讨四种植物化学物联合使用是否具有协同抗癌作用。方法体外培养A549、MCF-7、SW480三株癌细胞,CCK8法检测人参皂苷、白藜芦醇、灵芝多糖、... 目的研究人参皂苷、白藜芦醇、灵芝多糖及冬虫夏草四种植物化学物单药其及复方的体外抗癌活性,探讨四种植物化学物联合使用是否具有协同抗癌作用。方法体外培养A549、MCF-7、SW480三株癌细胞,CCK8法检测人参皂苷、白藜芦醇、灵芝多糖、冬虫夏草单药及其复方对三株癌细胞生长抑制率的影响;流式细胞仪检测分析植物化学物GRGC复方阻滞癌细胞周期及诱导癌细胞凋亡的作用;透射电镜观察植物化学物GRGC复方诱导A549肺癌细胞凋亡的形态学变化。结果人参皂苷、白藜芦醇、灵芝多糖及冬虫夏草对A549、MCF-7、SW480三株癌细胞均具有显著的抑制杀伤作用,并随药物浓度的增加其杀伤活性更强,呈明显剂量效应关系。人参皂苷、白藜芦醇、灵芝多糖、冬虫夏草配制成复方联合用药时,其杀伤效应较单药显著增强,有明显的协同抗癌效应。流式细胞周期分析显示植物化学物GRGC复方能将A549、MCF-7、SW480三株癌细胞周期阻滞于G0/G1期。流式细胞凋亡分析GRGC复方诱导A549、MCF-7、SW480三株癌细胞凋亡呈剂量依赖性。在透射电镜下可观察到GRGC复方能诱导A549癌细胞细胞膜破损、核被膜消失、胞核逐渐浓缩聚集成新月状或形成凋亡小体。结论人参皂苷、白藜芦醇、灵芝多糖、冬虫夏草GRGC复方对体外培养的A549、MCF-7、SW480三株癌细胞的抑制杀伤效率比单药显著增强,具有明显的协同抗癌效应,能阻滞A549、MCF-7和SW480癌细胞周期于G0/G1期,阻滞癌细胞增殖,并能有效诱导A549、MCF-7、SW480癌细胞凋亡,抑制癌细胞的生长,为肿瘤的综合治疗打下坚实的基础。 展开更多
关键词 癌细胞系 植物化学物复方 细胞凋亡 细胞周期
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干扰牛磺酸上调基因1表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭迁移的影响及其机制 预览
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作者 黄少江 阎吕军 +1 位作者 牛凯 李青 《山东医药》 CAS 2019年第21期19-22,共4页
目的探讨干扰长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响及机制。方法采用qRT-PCR方法从结直肠癌细胞SW480、HCT-116、SW620和Lo Vo中筛选高表达TUG1的结直肠癌细胞系。将SW620和Lo V... 目的探讨干扰长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响及机制。方法采用qRT-PCR方法从结直肠癌细胞SW480、HCT-116、SW620和Lo Vo中筛选高表达TUG1的结直肠癌细胞系。将SW620和Lo Vo细胞分为siRNA-NC(转染siRNA-NC,阴性对照)和siRNA-TUG1组(转染siRNA-TUG1),采用CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell法观察细胞侵袭和迁移能力,流式细胞术检测细胞周期分布、测算细胞凋亡率,同时采用RT-PCR和Western blotting法检测结直肠癌细胞转化生长因子-β(TGF-β)、细胞内信号转导蛋白2(Smad2)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) mRNA及蛋白相对表达量。结果筛选出高表达TUG1的结直肠癌细胞系SW620和Lo Vo。siRNA-TUG1组SW620和Lo Vo细胞中TUG1的表达水平较siRNA-NC组低(P均<0. 05)。与siRNA-NC组比较,siRNA-TUG1组SW620和Lo Vo细胞增殖活性、侵袭和迁移能力均降低,G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低,细胞凋亡率升高(P均<0. 05),TGF-β、Smad2、α-SMA mRNA和蛋白的表达水平下降(P均<0. 05)。结论干扰TUG1表达可抑制结直肠细胞增殖、侵袭、迁移,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡,其可能通过抑制TGF-β信号通路实现上述作用的。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 牛磺酸上调基因1 结直肠癌 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭 细胞迁移
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镰形棘豆黄酮含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及周期的影响
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作者 牛俐燃 李冠聪 +2 位作者 张婉婷 杨光明 潘扬 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期790-795,共6页
目的研究镰形棘豆黄酮提取物(OFF)含药血清对人肺腺癌A549细胞活力、细胞形态学、凋亡率及增殖周期的影响。方法将SD大鼠随机分为5组:空白对照组,阳性对照组(环磷酰胺CTX,40 mg·kg-1),OFF低剂量组(0.587 g·kg-1)、中剂量组(1.... 目的研究镰形棘豆黄酮提取物(OFF)含药血清对人肺腺癌A549细胞活力、细胞形态学、凋亡率及增殖周期的影响。方法将SD大鼠随机分为5组:空白对照组,阳性对照组(环磷酰胺CTX,40 mg·kg-1),OFF低剂量组(0.587 g·kg-1)、中剂量组(1.174 g·kg-1)、高剂量组(2.348 g·kg-1);早晚各给药1次,连续4 d,制备含药血清。采用CCK-8法检测细胞活力;倒置显微镜观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;流式细胞术检测细胞周期。结果在12、24、48 h给药时间内,OFF含药血清各剂量组的细胞活力随剂量递增呈抑制增强效果,且在24 h抑制作用最强,48 h抑制作用减弱,但与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P <0.001);倒置显微镜下观察, OFF含药血清作用24 h后,各剂量组的A549细胞均生长缓慢,细胞呈不规则形态。与空白对照组比较,OFF含药血清低、中、高剂量组的凋亡细胞比例上升,凋亡率分别为47.91%、55.09%、60.37%,差异均有统计学意义(P <0.001);OFF各剂量组的细胞周期中,G0/G1期细胞比例明显上升(P <0.01),S期(P<0.05,OFF高剂量组)及G2期(P<0.01,OFF中、高剂量组)比例下降。结论OFF含药血清对A549人肺腺癌细胞活力有较好的抑制作用,并能够诱导细胞凋亡,将细胞周期阻滞在G0/G1期。 展开更多
关键词 镰形棘豆 黄酮提取物 含药血清 A549细胞 细胞活力 细胞凋亡 细胞周期
肌钙蛋白I3基因表达下调对大鼠胚胎心肌细胞H9C2生物学特性的影响
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作者 张璐璐 郑春杨 +2 位作者 刘红波 姜红堃 邱广蓉 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2019年第9期698-702,共5页
目的探讨肌钙蛋白I3(Tnni3)基因表达下调对大鼠胚胎心肌细胞H9C2生物学特性的影响。方法培养大鼠胚胎心肌细胞H9C2,分为2组:转染阴性对照小干扰RNA(NC-siRNA)组和转染Tnni3小干扰RNA(Tnni3-siRNA)组。分别于转染后48 h、72 h收集细胞,... 目的探讨肌钙蛋白I3(Tnni3)基因表达下调对大鼠胚胎心肌细胞H9C2生物学特性的影响。方法培养大鼠胚胎心肌细胞H9C2,分为2组:转染阴性对照小干扰RNA(NC-siRNA)组和转染Tnni3小干扰RNA(Tnni3-siRNA)组。分别于转染后48 h、72 h收集细胞,实时定量PCR检测Tnni3 mRNA和Caspase-3 mRNA表达,Western blot检测Tnni3蛋白、Cyclin A1蛋白和Cyclin B1蛋白表达,Annexin V-异硫氰酸荧光素(FITC)凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果与转染NC-si-RNA组比较,转染Tnni3-siRNA 48 h,Tnni3基因mRNA(0.27±0.05比1.00±0.00)和蛋白(0.18±0.03比1.00±0.00)表达降低,差异均有统计学意义(t=25.26、47.40,均P<0.01)。转染NC-siRNA组和转染Tnni3-siRNA组H9C2细胞均出现细胞凋亡。与转染NC-siRNA组比较,转染Tnni3-siRNA 72 h,H9C2细胞凋亡率明显增高[(11.30±1.85)%比(0.33±0.15)%],Caspase-3基因mRNA表达升高(1.39±0.13比1.00±0.00),差异均有统计学意义(t=10.24、5.19,均P<0.01)。与转染NC-siRNA组比较,转染Tnni3-siRNA组表现为显著的时间依赖性细胞增殖能力降低(48 h:0.32±0.06比0.46±0.03;72 h:0.31±0.01比0.63±0.04;96 h:0.36±0.01比0.75±0.04),差异均有统计学意义(t=3.62、13.45、16.39,均P<0.05)。转染Tnni3-siRNA 72 h,G1期、S期和G2期细胞比例分别为(71.25±3.82)%、(18.28±2.78)%和(9.94±1.09)%。与转染NC-siRNA组比较,转染Tnni3-siRNA组G2期细胞比例明显增加[(9.94±1.09)%比(4.54±0.99)%],Cyclin A1蛋白表达升高(1.89±0.09比1.00±0.00),Cyclin B1蛋白表达降低(0.47±0.06比1.00±0.00),差异均有统计学意义(t=6.35、17.12、15.32,均P<0.01)。结论Tnni3基因表达下调能够诱导大鼠胚胎心肌细胞H9C2细胞凋亡,抑制细胞增殖,导致细胞周期阻滞于G2期。 展开更多
关键词 肌钙蛋白I3基因 细胞凋亡 细胞增殖 细胞周期
PLK1在套细胞淋巴瘤中的表达及临床意义
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作者 沈绿瑛 林聪猛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期833-838,共6页
目的:研究PLK1在套细胞淋巴瘤中的表达,探讨shRNA干扰沉默PLK1基因表达对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞增殖、凋亡、周期的影响。方法:应用免疫组织化学S-P法检测42例套细胞淋巴瘤和30例反应性增生淋巴结炎患者组织中PLK1蛋白并进行分析与比较... 目的:研究PLK1在套细胞淋巴瘤中的表达,探讨shRNA干扰沉默PLK1基因表达对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞增殖、凋亡、周期的影响。方法:应用免疫组织化学S-P法检测42例套细胞淋巴瘤和30例反应性增生淋巴结炎患者组织中PLK1蛋白并进行分析与比较。PLK1 shRNA慢病毒感染Jeko-1细胞,应用RQ-PCR检测PLK1 mRNA的表达及Western blot检测PLK1蛋白的表达,鉴定PLK1 shRNA干扰沉默效果,CCK-8试验检测细胞增殖,AnnexinⅤ/PI双染检测细胞凋亡, PI单染检测细胞周期,Western blot测定凋亡相关蛋白BAX BCL-2、Caspase-3的变化。结果:套细胞淋巴瘤患者组织中PLK1阳性率66.67%(28/42),明显高于增生淋巴结炎患者组织的20%(6/30)(P <0.05)。PLK1阳性表达与套细胞淋巴瘤患者B症状、IPI评分、Ann-Arbor临床分期存在相关性(P <0.05)。PLK1 shRNA慢病毒感染Jeko-1细胞72 h后,PLK1 mRNA和PLK1蛋白表达明显下降(P<0.05),PLK1 shRNA组细胞增殖率明显低于对照和Neg shRNA组(P <0.05),PLK1 shRNA组细胞的凋亡率为(27.42±3.44)%,明显高于对照组的(1.23±0.42)%和Neg shRNA组的(2.07±0.58)%(P <0.05)。细胞周期分析发现,PLK1 shRNA组的G2/M期细胞比例为(27.21±3.59)%,高于对照组的(13.28±2.63)%及Neg shRNA组的(14.34±2.37)%(P <0.05)。凋亡相关蛋白检测显示,促凋亡蛋白BAX上调,抑制凋亡蛋白BCL-2表达下调、caspase-3表达上调。结论:PLKl在套细胞淋巴瘤患者组织中过量表达,干扰沉默PLK1基因可抑制人套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞细胞增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期于G2/M期。 展开更多
关键词 套细胞淋巴瘤 PLK1 细胞凋亡 细胞周期
益气解毒化瘀小复方及其单味药对大鼠肾小球系膜细胞Smad3,Smad7mRNA的影响研究
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作者 王圣治 张君 +2 位作者 杨冠琦 丁晓欢 郑艳 《辽宁中医杂志》 CAS 2019年第8期1755-1758,共4页
目的:探讨益气解毒化瘀小复方及其单味药对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠肾小球系膜细胞信号通路Smad3,Smad7mRNA的基因表达影响,初步明确其抗肾小球硬化的作用机理。方法:常规培养大鼠肾小球系膜细胞(GMCs),RT-PCR法检测Smad3,Smad7mRNA表达... 目的:探讨益气解毒化瘀小复方及其单味药对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠肾小球系膜细胞信号通路Smad3,Smad7mRNA的基因表达影响,初步明确其抗肾小球硬化的作用机理。方法:常规培养大鼠肾小球系膜细胞(GMCs),RT-PCR法检测Smad3,Smad7mRNA表达。结果:小复方组抑制系膜细胞Smad3mRNA的表达最为明显,促进Smad7mRNA表达最为明显,与各单味药组、西药对照组比较,有显著性差异(P <0. 01或P <0. 05)。结论:益气解毒化瘀小复方可有效地抑制肾小球系膜细胞Smad3mRNA的表达,有效地促进系膜细胞Smad7mRNA表达,并优于单味药,从而达到抗肾小球硬化,保护肾脏的目的。 展开更多
关键词 系膜细胞 益气解毒化瘀 细胞增殖 细胞凋亡
过表达miR-218对舌鳞癌细胞系SCC-4和SCC-9的增殖和侵袭的影响
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作者 冯小东 易文 殷卫红 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期373-377,共5页
目的:探讨miR-218在舌鳞癌细胞中的表达,以及对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:在人舌鳞癌细胞系SCC-4和SCC-9中分别转染negative control、miR-218模拟物和抑制剂,然后利用MTT法检测细胞增殖活性;通过流式细胞仪检测细胞周期和细胞... 目的:探讨miR-218在舌鳞癌细胞中的表达,以及对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:在人舌鳞癌细胞系SCC-4和SCC-9中分别转染negative control、miR-218模拟物和抑制剂,然后利用MTT法检测细胞增殖活性;通过流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;通过Transwell实验检测细胞侵袭能力,采用GraphPad 7.0软件包对数据进行统计学分析。结果:与对照组相比,转染miR-218抑制剂的SCC-4和SCC-9细胞,细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和侵袭能力无显著改变;而转染miR-218模拟物的细胞,增殖能力变弱,凋亡数增加,侵袭能力显著降低。结论:miR-218在口腔癌中的表达量和细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和侵袭能力相关,提示miR-218与口腔癌的发生、发展有一定关系。 展开更多
关键词 MIR-218 舌鳞癌细胞 细胞增殖 细胞凋亡 侵袭
白桦脂酸对HepG2细胞的诱导凋亡作用及其机制 预览
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作者 李豪 周万怡 +1 位作者 吴嘉南 陈启和 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期47-53,共7页
为研究白桦脂酸对人的HepG2细胞的凋亡作用及其机制。采用不同质量浓度的白桦脂酸处理HepG2细胞,MTT法测定白桦脂酸对HepG2细胞增殖影响;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,PI单染法检测细胞周期,罗丹明123检测线粒体膜电... 为研究白桦脂酸对人的HepG2细胞的凋亡作用及其机制。采用不同质量浓度的白桦脂酸处理HepG2细胞,MTT法测定白桦脂酸对HepG2细胞增殖影响;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,PI单染法检测细胞周期,罗丹明123检测线粒体膜电位。MTT分析表明,白桦脂酸可抑制HepG2细胞增殖并呈剂量依赖关系。白桦脂酸对HepG2细胞24,48,72h的半抑制质量浓度IC50分别为52,26,17.5μg/mL。流式细胞仪检测结果表明,用20,30,40μg/mL的白桦脂酸分别处理48h,总凋亡率分别为49.82%,55.575%,57.46%。细胞周期结果表明,随着白桦脂酸质量浓度的增加,G1期的细胞比例下降,S期的细胞比例增加,说明出现S期的阻滞。用质量浓度分别为20,40,80μg/mL的白桦脂酸处理的各组线粒体膜电位分别为83.63,73.63,64.3,与对照组89.25相比,均明显降低,这表明白桦脂酸诱导细胞凋亡可能与线粒体途径有关。白桦脂酸可抑制肝癌HepG2细胞的增值,诱导HepG2细胞凋亡,这一机制可能与线粒体途径有关,通过将细胞阻滞在S期来实现。 展开更多
关键词 白桦脂酸 HEPG2细胞 细胞凋亡 流式细胞术 MTT试验 细胞周期 线粒体膜电位
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松乳菇多糖对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖、凋亡和迁移的影响
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作者 江波 张雅稚 《中医学报》 CAS 2019年第8期1680-1685,共6页
目的:研究松乳菇多糖体外对人骨肉瘤Saos-2细胞生长、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:体外培养Saos-2细胞,将不同浓度的松乳菇多糖作用于细胞,MTT法检测不同时间点和不同浓度的松乳菇多糖对细胞生长的抑制作用;AnnexinV-FITC... 目的:研究松乳菇多糖体外对人骨肉瘤Saos-2细胞生长、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:体外培养Saos-2细胞,将不同浓度的松乳菇多糖作用于细胞,MTT法检测不同时间点和不同浓度的松乳菇多糖对细胞生长的抑制作用;AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响;Transwell小室法检测细胞的侵袭和迁移能力;Western blot法检测环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白和核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路蛋白的表达。结果:松乳菇多糖以时间和浓度依赖性抑制人骨肉瘤Saos-2细胞的生长,促进人骨肉瘤Saos-2细胞凋亡,抑制人骨肉瘤Saos-2细胞侵袭和迁移,抑制人骨肉瘤Saos-2细胞COX-2、NF-κB和NF-κB p65蛋白的表达。结论:松乳菇多糖可抑制人骨肉瘤Saos-2细胞的生长,降低其侵袭和迁移能力,其作用机制可能与阻滞NF-κB信号通路和下调COX-2蛋白表达有关。 展开更多
关键词 松乳菇多糖 人骨肉瘤Saos-2细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移能力 NF-ΚB COX-2
双链RNA结合蛋白STAU1对3T3-L1前脂肪细胞增殖与凋亡作用 预览
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作者 胡婷婷 巩雪俐 +3 位作者 高佳乐 徐尤宗盛 孟轩羽 关亚群 《新疆医科大学学报》 CAS 2019年第9期1105-1110,共6页
目的探究双链RNA结果蛋白STAU1对3T3-L1前脂肪细胞增殖与凋亡的影响。方法以3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,将pCMV6-Entry STAU1真核表达质粒,通过脂质体转染3T3-L1前脂肪细胞(实验组),对照组转染pCMV6-Entry空载体。分别利用RTq-PCR和Wes... 目的探究双链RNA结果蛋白STAU1对3T3-L1前脂肪细胞增殖与凋亡的影响。方法以3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,将pCMV6-Entry STAU1真核表达质粒,通过脂质体转染3T3-L1前脂肪细胞(实验组),对照组转染pCMV6-Entry空载体。分别利用RTq-PCR和Western blot检测stau1、caspase3、caspase9、cyclinD1、cyclinE1 mRNA及蛋白质的表达水平;对照组和实验组采用CCK-8细胞计数法及Annexin V-FITC/PI双染法检测STAU1对细胞数量及凋亡情况的影响。结果(1)与对照组比较,实验组stau1、caspase3、caspase9 mRNA和蛋白质的表达水平均显著上升(P<0.05),cyclinE1 mRNA和蛋白质的表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05),cyclinD1 mRNA表达水平降低而蛋白质表达水平无明显变化。(2)与对照组相比,实验组细胞数量显著减少,凋亡率增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 STAU1可能通过下调cyclinE1的表达抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖;通过上调caspase3、caspase9的表达水平促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 STAU1 3T3-L1前脂肪细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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不同浓度蒿甲醚对人涎腺腺样囊性癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响及其机制 预览
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作者 李帅 徐向华 +3 位作者 刘继光 刘学超 张洲铭 王彭议 《山东医药》 CAS 2019年第12期14-17,共4页
目的观察不同浓度的蒿甲醚(ART)对人涎腺腺样囊性癌(SACC)细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响,并探讨其机制。方法将SACC细胞系ACC-2分为4组,分别加入125、250、500μg/m L的ART或等量0. 1%DMSO培养液进行培养,记为125μg/m L组、250μg/... 目的观察不同浓度的蒿甲醚(ART)对人涎腺腺样囊性癌(SACC)细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响,并探讨其机制。方法将SACC细胞系ACC-2分为4组,分别加入125、250、500μg/m L的ART或等量0. 1%DMSO培养液进行培养,记为125μg/m L组、250μg/m L组、500μg/m L组、对照组。采用CCK-8法测算各组细胞增殖率,采用流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法测算各组细胞凋亡率,采用Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能力,采用Transwell迁移实验检测各组细胞迁移能力,采用Western blotting法检测各组细胞HMGB1蛋白。结果培养0、24、48、72、96 h时,125μg/m L组细胞增殖率分别为100. 7%±8. 7%、77. 5%±5. 2%、61. 0%±7. 7%、50. 6%±3. 3%、39. 0%±2. 6%,250μg/m L组细胞增殖率分别为99. 5%±7. 3%、63. 3%±3. 6%、50. 4%±3. 4%、38. 1%±2. 7%、25. 5%±2. 3%,500μg/m L组细胞增殖率分别为101. 5%±2. 4%、56. 0%±2. 9%、38. 2%±3. 7%、28. 9%±2. 3%、11. 0%±2. 4%,对照组细胞增殖率均为100. 0%,各组培养24、48、72、96 h时细胞增殖率相比,P均<0. 01。125μg/m L组、250μg/m L组、500μg/m L组、对照组细胞凋亡率分别为21. 98%±0. 44%、34. 76%±1. 74%、49. 94%±1. 43%、2. 30%±0. 17%,侵袭细胞数目分别为(61±3)、(39±3)、(15±1)、(99±8)个,迁移细胞数分别为(93±13)、(69±3)、(30±3)、(164±16)个,细胞HMGB1蛋白相对表达水平为0. 798±0. 064、0. 667±0. 079、0. 424±0. 019、0. 887±0. 045,上述各指标组间相比,P均<0. 01。结论 125、250、500μg/m L的ART对SACC细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移均可发挥调节作用,ART可能通过下调HMGB1蛋白的表达调控SACC细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 青蒿素衍生物 蒿甲醚 腺样囊性癌 涎腺腺样囊性癌 高迁移蛋白-1 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭 细胞迁移
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下调ANKRD22表达对人肺腺癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响 预览
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作者 张烽 殷俊 +4 位作者 傅文凡 戴璐 潘雷 钟圣鹏 赵健 《山东医药》 CAS 2019年第5期1-4,共4页
目的通过RNA干扰技术下调人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株H1975中锚蛋白重复系列22(ANKRD22)表达,观察其对细胞增殖、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法体外培养H1975细胞,随机分为siRNA干扰组、阴性对照组、空白对照组,siRNA干扰组、阴性对... 目的通过RNA干扰技术下调人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株H1975中锚蛋白重复系列22(ANKRD22)表达,观察其对细胞增殖、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法体外培养H1975细胞,随机分为siRNA干扰组、阴性对照组、空白对照组,siRNA干扰组、阴性对照组分别转染ANKRD22-siRNA质粒和阴性对照质粒NC-siRNA,转染24h;空白对照组不予转染。采用实时荧光定量qRT-PCR法检测各组ANKRD22表达,采用MTT法检测细胞培养24、48、72、96、120h的细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果siRNA干扰组ANKRD22相对表达量低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05),空白对照组与阴性对照组比较P >0.05。siRNA干扰组转染24h再培养24、48、72、96、120h细胞增殖能力均低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05),空白对照组与阴性对照组比较P均 >0.05。siRNA干扰组G0/G1期细胞所占比例高于空白对照组与阴性对照组(P均<0.05),S期、G2/M期细胞所占比例低于空白对照组与阴性对照组(P均<0.05),空白对照组与阴性对照组比较P均 >0.05。siRNA干扰组细胞凋亡率高于空白对照组与阴性对照组(P均<0.05),空白对照组与阴性对照组比较P >0.05。结论通过RNA干扰下调NSCLC细胞株H1975中ANKRD22表达后,可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,延长细胞周期。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 锚蛋白重复系列22 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期
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