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XRCC 1基因在乳腺癌中表达的临床意义及其细胞与分子机制
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作者 孙建兵 吴海龙 +1 位作者 唐璇 刘峰 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期30-40,共11页
目的:探讨乳腺癌中X线修复交叉互补蛋白1(X-ray repair cross complementing 1,XRCC1)的表达及其与临床病理特征的关系,同时分析XRCC1基因过表达对人乳腺癌MB-231细胞增殖和迁移的影响及其分子机制。方法 :采用实时荧光定量PCR法检测XRC... 目的:探讨乳腺癌中X线修复交叉互补蛋白1(X-ray repair cross complementing 1,XRCC1)的表达及其与临床病理特征的关系,同时分析XRCC1基因过表达对人乳腺癌MB-231细胞增殖和迁移的影响及其分子机制。方法 :采用实时荧光定量PCR法检测XRCC1 mRNA在人乳腺癌细胞系和组织中的表达水平。免疫组织化学法检测XRCC1蛋白在人乳腺癌组织中的表达情况,并统计分析乳腺癌组织中XRCC1表达与患者临床病理特征的关系。转染pcDNA3.1(+)-Flag-XRCC1重组质粒使乳腺癌MB-231细胞中XRCC1的表达上调,然后采用CCK-8法和软琼脂平板克隆形成实验检测细胞增殖活性的变化,FCM法检测细胞周期和凋亡的变化,Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力的变化,蛋白质印迹法检测XRCC1过表达对细胞周期、凋亡和迁移相关蛋白表达的影响。结果 :与正常乳腺上皮细胞相比,XRCC1 mRNA在大多数乳腺癌细胞系中表达水平明显下调(P值均<0.001)。与正常乳腺上皮和配对癌旁组织相比,XRCC1 mRNA和蛋白在人乳腺癌组织中均表达下调(P值均<0.001);同时XRCC1 mRNA的表达水平与乳腺癌患者预后呈正相关性(γ2=0.052,P=0.046),而XRCC1蛋白表达与肿瘤直径、淋巴结转移、组织学分级及TNM分期具有相关性(P值均<0.05)。过表达XRCC1基因后,乳腺癌MB-231细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力均受到明显抑制(P值均<0.01),而且细胞周期被明显阻滞于G1期(P <0.001),细胞凋亡率则明显升高(P <0.001)。XRCC1过表达能促进细胞周期相关蛋白p21、p27、Bax和剪切型caspase 3,以及迁移相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,同时明显下调细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinase 4/6,CDK4/6)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、Bcl-2、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达(P值均<0.001)。结论 :XRCC1在乳腺癌细胞系和组织中表达下调,其表达水平与乳腺癌患者预后呈正相关性� 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 基因表达 细胞增殖 细胞运动 预后 X线修复交叉互补蛋白1
CXCR4抑制剂对膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其机制的研究
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作者 张涛 陈志毅 +1 位作者 王灿 刘涛 《国际泌尿系统杂志》 2019年第3期441-445,共5页
目的探讨趋化因子受体4(CXCR4)在膀胱癌发展过程中的作用及其调控机制。方法采用qPCR法检测膀胱癌细胞株SW780、5637和T24中CXCR4mRNA的表达。在SW780细胞加入CXCR4抑制剂AMD346510uM处理后,以未加入AMD3465的SW780细胞为对照组,用MTT、... 目的探讨趋化因子受体4(CXCR4)在膀胱癌发展过程中的作用及其调控机制。方法采用qPCR法检测膀胱癌细胞株SW780、5637和T24中CXCR4mRNA的表达。在SW780细胞加入CXCR4抑制剂AMD346510uM处理后,以未加入AMD3465的SW780细胞为对照组,用MTT、Transwell法分别检测抑制CXCR4对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭性的作用。Westernblotting检测β-catenin、Wnt/β-catenin通路相关基因和EMT相关基因的表达变化。用裸鼠皮下异体移植模型研究CXCR4对人膀胱癌SW780细胞裸鼠移植瘤生长的影响。结果SW780膀胱癌细胞经AMD3465处理48、72h后,细胞增殖减慢,其吸光度值与对照组相比差异有统计学意义(P<0.001)。经AMD3465处理48h后的SW780膀胱癌细胞迁移指数、侵袭指数降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.001)。AMD3465明显抑制β-catenin、Wnt/β-catenin通路相关基因MMP-2和c-myc的蛋白表达,同时上调E-cadherin的蛋白表达。结论抑制CXCR4可以通过调控Wnt/β-catenin通路抑制膀胱癌的进展。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 受体 CXCR4 细胞增殖 细胞运动
巨噬细胞移动抑制因子影响胶质瘤细胞迁移、凋亡的机制
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作者 江晓珍 邓葵 +2 位作者 花美玲 李智 徐姗 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期108-111,共4页
目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对胶质瘤细胞株U87MG、U251生物学功能的影响及可能的作用机制。方法运用小干扰RNA(siRNA)技术靶向沉默U87MG细胞株中MIF基因的表达,经蛋白免疫印迹(Western blot)法检测沉默效果;对微弱表达MIF蛋白的... 目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对胶质瘤细胞株U87MG、U251生物学功能的影响及可能的作用机制。方法运用小干扰RNA(siRNA)技术靶向沉默U87MG细胞株中MIF基因的表达,经蛋白免疫印迹(Western blot)法检测沉默效果;对微弱表达MIF蛋白的U251细胞株,则外源性添加不同浓度重组人MIF(rhMIF)。采用划痕实验观察细胞的迁移、流式细胞术检测细胞凋亡率,并经Western blot法检测U87MG、U251细胞内相关蛋白水平的变化。结果经siRNA靶向沉默MIF基因表达后,U87MG细胞的迁移、抗凋亡能力明显下降,细胞内p-AKT、抗凋亡蛋白bcl-2表达水平下降,而凋亡蛋白bax表达升高;微弱表达MIF蛋白的U251细胞随着rhMIF处理浓度的增加,其细胞内MIF蛋白、p-AKT及bcl-2表达水平逐渐升高,凋亡蛋白bax水平则随之下降。结论MIF促进胶质瘤细胞的迁移,抑制其凋亡,影响胶质瘤细胞生物学功能,可能是通过活化PI3K/AKT信号通路实现的。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 巨噬细胞游走抑制因子 细胞运动 细胞凋亡
桃红四物汤干预外周血内皮祖细胞数量与功能增加的时间剂量效应 预览
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作者 王小斌 蒋红心 +3 位作者 屈长宏 吴冬梅 张荣生 徐斌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第9期1354-1358,共5页
背景:近期研究表明,桃红四物汤能减轻血管内皮细胞的损伤和维持其正常的分泌功能,而内皮祖细胞对内皮损伤后的修复有促进作用,因而设想桃红四物汤可能通过改善内皮祖细胞的功能活性及增加其数量来保护内皮功能。目的:观察桃红四物汤对... 背景:近期研究表明,桃红四物汤能减轻血管内皮细胞的损伤和维持其正常的分泌功能,而内皮祖细胞对内皮损伤后的修复有促进作用,因而设想桃红四物汤可能通过改善内皮祖细胞的功能活性及增加其数量来保护内皮功能。目的:观察桃红四物汤对人外周血内皮祖细胞功能活性和数量的影响。方法:从健康人外周血中分离培养内皮祖细胞,将内皮祖细胞分为对照组和桃红四物汤低、中、高质量浓度组,在体外培养24 h以观察量效关系,同时桃红四物汤高质量浓度组培养6,12,24,48 h以观察时效关系。倒置相差显微镜下计数内皮祖细胞数量,通过MTT比色法、黏附能力和Boyden小室观察内皮祖细胞的增殖、黏附和迁移能力。结果与结论:①桃红四物汤干预组内皮祖细胞增殖、黏附和迁移能力明显高于对照组,并与质量浓度呈一定的量效关系,高质量浓度组最为显著(P<0.01);②桃红四物汤高质量浓度组内皮祖细胞增殖、黏附和迁移能力的增加呈时间依赖关系,干预24 h时最为显著(P<0.01);③结果表明,桃红四物汤可增加内皮祖细胞数量并改善其功能,高质量浓度干预24 h时效果最佳。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 桃红四物汤 内皮祖细胞增殖 细胞迁移 细胞黏附 中草药 内皮细胞 细胞增殖 细胞粘附 细胞运动 组织工程
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Raf激酶抑制蛋白对恶性黑色素瘤细胞增殖、迁移的影响及其机制
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作者 周凯 张颖异 +2 位作者 岑瑛 朱国念 张艳阁 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期616-621,共6页
目的探讨Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在体外对恶性黑色素瘤细胞增殖、迁移能力的影响及其机制。方法利用重组慢病毒转染技术构建小鼠恶性黑色素瘤细胞株B16的RKIP过表达及调低的稳定转染株,并将其设立为RKIP过表达组和RKIP调低组,以未经任何... 目的探讨Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在体外对恶性黑色素瘤细胞增殖、迁移能力的影响及其机制。方法利用重组慢病毒转染技术构建小鼠恶性黑色素瘤细胞株B16的RKIP过表达及调低的稳定转染株,并将其设立为RKIP过表达组和RKIP调低组,以未经任何处理的小鼠恶性黑色素瘤B16细胞为空白对照组;通过细胞增殖/毒性检测试剂盒(CCK-8)法与细胞划痕实验检测各组细胞的增殖活性及迁移能力,利用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、钙离子依赖的细胞黏附素、Ki-67、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-13、MMP-2及磷脂酰乙醇胺结合蛋白1(PEBP-1)的相对表达量;Western印迹检测各组细胞间RKIP表达差异及其在核因子(NF)-κB信号通路的蛋白相对表达量。结果RKIP过表达组细胞增殖率显著低于空白对照组(0.794±0.038比1.200±0.081)(P<0.001),而RKIP调低组细胞的增殖率与空白对照组差异无统计学意义(1.077±0.084比1.200±0.081)(P>0.05);RKIP过表达组细胞的迁移能力显著低于空白对照组(P<0.001),而RKIP调低组细胞的迁移能力显著高于空白对照组(P<0.001);除RKIP调低组与空白对照组PEBP-1相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)外,其余检测基因相对表达量在RKIP过表达组均显著低于空白对照组,RKIP调低组均显著高于空白对照组(均P<0.001)。RKIP过表达组中磷酸化的P65(p-P65)蛋白相对表达量显著低于空白对照组(0.080±0.000比0.236±0.000),而RKIP调低组中p-P65蛋白相对表达量则显著高于空白对照组(1.139±0.001比0.236±0.000)(均P<0.001)。结论RKIP过表达可以抑制恶性黑色素瘤细胞的增殖及迁移,其可能与调控NF-κB信号通路相关蛋白P65的磷酸化有关。 展开更多
关键词 黑色素瘤 Raf激酶类 细胞增殖 细胞运动 NF-ΚB
槐耳通过诱导自噬抑制肝癌细胞增殖与迁移 预览
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作者 黎文信 王喜城 +5 位作者 向美焕 谭文亮 徐云修修 叶义标 陈捷 陈涛 《中华肝脏外科手术学电子杂志》 CAS 2019年第2期169-174,共6页
目的探讨槐耳对人肝细胞癌(肝癌)细胞增殖与迁移的影响,并探讨其相关分子机制。方法将肝癌细胞株SK-HEP-1和HEP3B分别设为对照组、槐耳处理组和自噬抑制剂组。CCK-8方法检测细胞活性,克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,T... 目的探讨槐耳对人肝细胞癌(肝癌)细胞增殖与迁移的影响,并探讨其相关分子机制。方法将肝癌细胞株SK-HEP-1和HEP3B分别设为对照组、槐耳处理组和自噬抑制剂组。CCK-8方法检测细胞活性,克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移,GFP-LC3荧光融合蛋白检测自噬小体的形成,Westernblot检测上皮-间充质转化(EMT)、自噬和Akt/mTOR通路相关蛋白。两组数据比较采用t检验,多组比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果肝癌细胞SK-HEP-1与HEP3B活性随着槐耳浓度升高与时间的增加而降低。6g/L槐耳处理组肝癌细胞SK-HEP-1和HEP3B的克隆数分别为(77±9)、(84±9)个,明显少于对照组的(231±15)、(257±35)个(t=-8.90,-6.33;P<0.05)。槐耳可明显促进细胞凋亡,具有浓度依赖性(F=120.88,199.59;P<0.05)。8g/L槐耳处理组肝癌细胞SK-HEP-1和HEP3B的穿膜细胞数分别为(68±13)、(54±13)个,明显少于对照组的(389±28)、(411±15)个(t=-17.98,-31.47;P<0.05)。Westernblot检测显示,槐耳处理组N-cadhenin和Vimentin蛋白表达减弱;LC3Ⅱ表达增强,LC3Ⅰ表达减弱;p-Akt、p-mTOR、p62蛋白表达减弱,同时诱导LC3Ⅱ表达增强。自噬抑制剂3-MA可减少槐耳处理组的自噬。结论槐耳通过促进肝癌细胞凋亡及抑制细胞增殖和转移而发挥抗肿瘤效应,其机制可能与抑制Akt/mTOR通路诱导自噬和阻止EMT有关。 展开更多
关键词 肝细胞 自噬 信号通路 细胞增殖 细胞运动
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FBXO22对乳腺癌细胞侵袭迁移能力的影响 预览
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作者 方虹舒 张薇 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第10期1157-1160,1164共5页
目的探究FBXO22基因沉默后对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭迁移能力的影响,并初步研究其相关分子机制。方法利用小干扰RNA(siRNA)技术制备FBXO22小片段干扰RNA转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,下调FBXO22基因表达,通过蛋白质印迹(Western blot)法... 目的探究FBXO22基因沉默后对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭迁移能力的影响,并初步研究其相关分子机制。方法利用小干扰RNA(siRNA)技术制备FBXO22小片段干扰RNA转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,下调FBXO22基因表达,通过蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞转染效率,细胞划痕实验检测干扰FBXO22基因表达水平对乳腺癌细胞侵袭能力的影响,Transwell小室迁移实验检测下调FBXO22基因表达水平对乳腺癌细胞迁移能力的影响,Western blot法检测下调FBXO22基因表达水平对乳腺癌细胞侵袭迁移相关蛋白表达的影响。结果FBXO22-siRNA转染后乳腺癌MDA-MB-231细胞中FBXO22蛋白表达明显下降,迁移侵袭能力降低,E-cadherin蛋白水平升高,而波形蛋白的蛋白水平降低,基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9水平下降。结论下调FBXO22基因水平能抑制乳腺癌细胞的迁移侵袭能力。其潜在的机制可能为FBXO22基因表达下调抑制了MDA-MB-231上皮细胞-间充质转化进程,并使细胞转移相关重要蛋白--MMP-2和MMP-9表达减少。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 肿瘤浸润 细胞运动 FBXO22
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HIBADH蛋白表达在胃腺癌组织中的临床意义及其在胃癌细胞中的功能研究
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作者 吴巨钢 裴国清 +4 位作者 杨建军 火海钟 宋致成 俞继卫 顾岩 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2019年第3期294-300,共7页
目的研究3-羟异丁酸脱氢酶(3-hydroxyisobutyrate dehydrogenase,HIBADH)蛋白在胃腺癌中表达的临床意义及其在胃癌细胞中的生物学功能。方法回顾性收集2006年1月至2007年12月期间上海交通大学医学院附属第九人民医院普外科收治的76例胃... 目的研究3-羟异丁酸脱氢酶(3-hydroxyisobutyrate dehydrogenase,HIBADH)蛋白在胃腺癌中表达的临床意义及其在胃癌细胞中的生物学功能。方法回顾性收集2006年1月至2007年12月期间上海交通大学医学院附属第九人民医院普外科收治的76例胃腺癌患者。采用免疫组织化学染色检测胃癌原发灶、癌旁组织及癌转移淋巴结中HIBADH蛋白的表达,分析胃癌组织中HIBADH蛋白的表达与患者临床病理学特征的关系。在细胞层面,采用分子克隆技术构建HIBADH稳定敲除的MKN45胃癌细胞系。通过细胞增殖实验、迁移实验、侵袭实验及伤口愈合实验(细胞分为转染组和阴性对照组,分别转染干扰序列和阴性对照序列),探索HIBADH蛋白在胃癌细胞中的生物学功能。结果胃腺癌原发灶组织中的HIBADH蛋白表达阳性率较癌旁组织高(χ~2=54.738,P<0.001),且胃癌组织中HIBADH蛋白的表达与肿瘤直径、淋巴管浸润、pT分期、淋巴结转移及pTNM分期均相关(P<0.05)。在癌转移的淋巴结中,HIBADH蛋白的表达阳性率为100%(48/48)。HIBADH蛋白表达阳性组和HIBADH蛋白表达阴性组患者的术后10年生存率分别为16.4%和69.4%,后者的生存时间较长(χ~2=19.612,P<0.001)。HIBADH蛋白表达被干扰后,MKN45胃癌细胞的迁移能力、侵袭能力及伤口愈合能力较阴性对照组均明显下降(P<0.05),但细胞增殖能力无明显变化(P>0.05)。结论 HIBADH蛋白在胃癌原发灶中的表达提示肿瘤分期晚、患者预后差。抑制HIBADH蛋白表达可降低胃癌细胞的运动能力。 展开更多
关键词 3-羟异丁酸脱氢酶 胃癌 预后 细胞运动
芪贞归脾汤对淋巴瘤细胞株生物学行为的影响及其机制探讨
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作者 张影 路莎莎 +2 位作者 蔡佳翌 李鹤 黄洪晖 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期346-358,共13页
目的:探讨芪贞归脾汤对淋巴瘤细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移和侵袭的影响,并通过高通量组学技术探索其可能的分子作用机制。方法:采用不同浓度的芪贞归脾汤作用于淋巴瘤Jurkat、SU-DHL-4和Raji细胞株;CCK-8法检测细胞的增殖抑制率;FC... 目的:探讨芪贞归脾汤对淋巴瘤细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移和侵袭的影响,并通过高通量组学技术探索其可能的分子作用机制。方法:采用不同浓度的芪贞归脾汤作用于淋巴瘤Jurkat、SU-DHL-4和Raji细胞株;CCK-8法检测细胞的增殖抑制率;FCM法检测细胞凋亡率及细胞周期;Transwell小室法检测细胞的迁移和侵袭能力;采用PrimeView人类基因表达谱芯片(PrimeView Human Gene Expression Array)检测基因表达谱变化;应用IngenuityPathwayAnalysis(IPA)进行经典通路分析;选择有差异表达的6个基因[磷脂酰肌醇3-激酶催化亚单位α(phosphatidylinositol3-kinasecatalyticsubunitalpha,PIK 3CA)、B细胞κ轻肽基因增强子核因子1(nuclearfactorofkappalightpolypeptide geneenhancerinB-cells1,NFKB 1)、B细胞κ轻肽基因增强子抑制因子,激酶β(inhibitor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells,kinase beta,IKBKB)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Janus激酶2(Januskinase2,JAK 2)和信号转导及转录激活因子3(signaltransducer and activator of transcription 3,STAT 3)]进行实时荧光定量PCR法验证。结果:质量浓度为5~25 mg/mL的芪贞归脾汤对Jurkat、SU-DHL-4和Raji细胞株均有明显的增殖抑制作用(P值均<0.01)。芪贞归脾汤质量浓度为20和25 mg/mL组Jurkat及Raji细胞的凋亡率显著升高(P值均<0.01)。10、15和20mg/mL芪贞归脾汤作用48h后,3株淋巴瘤细胞的细胞周期均被阻滞在G2/M期(P值均<0.01)。15mg/mL芪贞归脾汤可显著抑制Jurkat及Raji细胞的迁移和侵袭能力(P值均<0.05)。Jurkat细胞在15mg/mL芪贞归脾汤作用48h后,共有648个基因表达上调和1022个基因表达下调。基于IPA的经典通路分析结果显示,差异基因显著富集的信号通路中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinaseB,PKB,又称Akt)信号通路(P<0.001)及JAK/STAT信号通路(P<0.05)明显受到抑制。PIK3CA、NFKB1、IKBKB、Bcl-2、JAK2和STAT3 mRNA的 展开更多
关键词 淋巴瘤 植物药疗法 细胞增殖 细胞凋亡 细胞运动
新化合物OSU-03012对结肠癌细胞增殖、迁移以及凋亡的影响 预览
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作者 李玉琴 施建平 +3 位作者 金怒云 步丽梅 王凯 田培营 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第2期113-118,225共7页
目的在细胞水平上初步探讨新化合物OSU-03012抗结肠癌的机制。方法分别用1、3、5和10μmol/L OSU-03012化合物干预的人结肠癌细胞株HCT-116作为研究对象,以等体积二甲基亚砜(DMSO)处理的HCT-116细胞作为对照组。CCK-8法检测各组细胞干... 目的在细胞水平上初步探讨新化合物OSU-03012抗结肠癌的机制。方法分别用1、3、5和10μmol/L OSU-03012化合物干预的人结肠癌细胞株HCT-116作为研究对象,以等体积二甲基亚砜(DMSO)处理的HCT-116细胞作为对照组。CCK-8法检测各组细胞干预24、48、72 h时的抑制率,划痕实验和Transwell实验检测各组细胞迁移能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,免疫荧光、Western blot检测各组细胞Bcl-2、Caspase-3蛋白表达情况,Real-time PCR检测各组细胞Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达情况。结果对照组、1μmol/L组、3μmol/L组、5μmol/L组和10μmol/L组的细胞抑制率、凋亡率呈逐渐升高趋势,而细胞迁移距离、细胞迁移数目呈逐渐减小或降低趋势,组间多重比较差异均有统计意义(均P<0.05);3、5、10μmol/L组Bcl-2 mRNA和蛋白表达量低于对照组,而Caspase-3mRNA和蛋白表达量高于对照组(均P<0.05)。结论新化合物OSU-03012可抑制结肠癌细胞增殖与迁移,并促进结肠癌细胞凋亡,且呈剂量依赖效应。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 细胞增殖 细胞运动 细胞凋亡 OSU-03012 环氧合酶-2
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ClC-3在子宫内膜异位症中的研究进展
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作者 皮亚男 曹婧 +2 位作者 侯爽 周碎央 邱晓红 《中国医师杂志》 CAS 2019年第2期319-320,F0003共3页
氯离子通道3(ClC-3)是由CLCN3基因编码,电压门控成员Cl2通道超家族的一员,并涉及到调节电活动、细胞体积、增殖、迁移、侵袭、凋亡和细胞内pH,成为目前研究的热点。近年来ClC-3在妇科疾病中的研究日益增多,本文将对ClC-3与妇科良恶性疾... 氯离子通道3(ClC-3)是由CLCN3基因编码,电压门控成员Cl2通道超家族的一员,并涉及到调节电活动、细胞体积、增殖、迁移、侵袭、凋亡和细胞内pH,成为目前研究的热点。近年来ClC-3在妇科疾病中的研究日益增多,本文将对ClC-3与妇科良恶性疾病,尤其是对ClC-3与子宫内膜异位症发生发展相关的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 氯化物通道 细胞运动 综述
COL4A1在肝癌中的表达及其对肝癌细胞迁移、侵袭能力的影响 预览
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作者 王译文 李民 +4 位作者 阿布都艾合提·买买提明 程方雄 罗少锋 何峰 王必蓉 《重庆医学》 CAS 2019年第9期1472-1475,共4页
目的探讨血清Ⅳ型胶原蛋白基因α1(COL4A1)在肝癌组织中的表达,分析敲低COL4A1表达对肝癌细胞迁移及侵袭能力的影响。方法采用Western blot法检测COL4A1在68例肝癌及配对癌旁组织的表达水平;运用siRNA技术敲低肝癌细胞COL4A1表达,采用CC... 目的探讨血清Ⅳ型胶原蛋白基因α1(COL4A1)在肝癌组织中的表达,分析敲低COL4A1表达对肝癌细胞迁移及侵袭能力的影响。方法采用Western blot法检测COL4A1在68例肝癌及配对癌旁组织的表达水平;运用siRNA技术敲低肝癌细胞COL4A1表达,采用CCK-8试验检测其对肝癌细胞增殖能力的影响,采用Transwell试验检测其对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果生物信息学分析提示COL4A1mRNA在肝癌中高表达(P<0.01);COL4A1在肝癌组织表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05),敲低COL4A1表达明显降低肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。结论 COL4A1在肝癌组织中高表达,并促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 肝肿瘤 Ⅳ型胶原蛋白基因α1 细胞运动 侵袭
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miR-429在食管鳞癌中的表达及对细胞增殖迁移的影响 预览
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作者 花光斌 朱国玺 苏煜强 《中国医药生物技术》 2019年第1期46-51,共6页
目的探讨微小RNA-429(miR-429)在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其对细胞增殖及迁移的影响。方法选取本院45例ESCC患者手术切除的癌组织(ESCC组)及癌旁组织(正常组)标本为研究对象,并采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测两组miR-429表达水平。体... 目的探讨微小RNA-429(miR-429)在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其对细胞增殖及迁移的影响。方法选取本院45例ESCC患者手术切除的癌组织(ESCC组)及癌旁组织(正常组)标本为研究对象,并采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测两组miR-429表达水平。体外培养ESCC癌细胞株系ECa109及人正常食管上皮细胞株Het-1A,将转染试剂、miR-429阴性对照质粒、miR-429 mimic质粒分别转染ECa109细胞,命名为空白组、阴性转染组、miR-429过表达组,同时应用生物信息学工具预测miR-429的靶基因为CTl0激酶调节子样蛋白(CRKL),荧光素酶活性检测miR-429与CRKL的靶向调控关系。采用qRT-PCR法检测细胞中miR-429与CRKL mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法检测细胞中CRKL蛋白表达。MTT法检测细胞增殖情况,Transwell检测细胞迁移能力。结果与正常组相比,ESCC组miR-429表达水平显著降低(P﹤0.05);荧光素酶活性测定显示3'UTR-Wt细胞中miR-429过表达组荧光素酶活性显著低于阴性对照组(P﹤0.05),3'UTR-Mut细胞中miR-429阴性转染组与过表达组比较差异无统计学意义(P﹥0.05);与Het-1A细胞相比,ECa109细胞中miR-429表达水平显著降低(P﹤0.05),而CRKL mRNA及蛋白表达水平显著升高(P﹤0.05);与空白组、阴性转染组相比,miR-429过表达组miR-429表达水平显著升高(P﹤0.05),而CRKL mRNA及蛋白表达水平显著降低(P﹤0.05);与空白组、阴性转染组相比,miR-429过表达组细胞增殖率及迁移数量均显著降低(P﹤0.05)。结论ESCC中miR-429呈低表达,其可通过下调CRKL表达进而抑制ESCC细胞增殖及迁移。 展开更多
关键词 食管肿瘤 细胞增殖 细胞运动 微小RNA-429
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脂肪间充质干细胞来源外泌体对角质形成细胞增殖和迁移的影响与机制 预览
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作者 田新立 江波 颜洪 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第1期68-73,共6页
背景:皮肤烧烫伤是一类非常常见且致死和致残率极高的疾病,探索有效促进伤口愈合的方法意义重大。目的:探讨脂肪间充质干细胞来源外泌体是否对角质形成细胞增殖与迁移产生影响及其潜在机制。方法:采用胰酶消化法培养人角质形成细胞,并... 背景:皮肤烧烫伤是一类非常常见且致死和致残率极高的疾病,探索有效促进伤口愈合的方法意义重大。目的:探讨脂肪间充质干细胞来源外泌体是否对角质形成细胞增殖与迁移产生影响及其潜在机制。方法:采用胰酶消化法培养人角质形成细胞,并利用角质形成细胞特异标记蛋白Keratin 14进行鉴定;超速离心法分离人脂肪间充质干细胞来源外泌体,并利用外泌体特异标记蛋白CD9、CD63和CD81进行鉴定;将纯化好的脂肪间充质干细胞来源外泌体,以不同质量浓度(0,10,20,50,100 mg/L)加入第3代角质形成细胞中,在处理的不同时间点(0,12,24,48 h)进行增殖和迁移相关指标检测。结果与结论:脂肪间充质干细胞来源外泌体促进角质形成细胞增殖和迁移,在质量浓度为50 mg/L和处理48 h时增殖最显著,脂肪间充质干细胞来源外泌体可能通过调控ERK、AKT和STAT3蛋白的磷酸化而促进角质形成细胞增殖与迁移。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 外泌体 角质形成细胞 细胞增殖 细胞迁移 干细胞 角蛋白细胞 脂肪组织 间质干细胞 外泌体 细胞增殖 细胞运动 组织工程
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白花蛇舌草通过抑制RAP1-JNK信号通路选择性促进人肾癌ACHN细胞间质-上皮转化
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作者 邹寒冰 周雁 +3 位作者 张元亮 何小珍 刘培峰 刘永忠 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期235-248,共14页
目的 :研究白花蛇舌草(Hedyotis di usa Willd,HDW)对人肾癌细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :人肾细胞腺癌ACHN和人肾近曲小管HK-2细胞经HDW处理24 h后,采用CCK-8法检测HDW对ACHN和HK-2细胞... 目的 :研究白花蛇舌草(Hedyotis di usa Willd,HDW)对人肾癌细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :人肾细胞腺癌ACHN和人肾近曲小管HK-2细胞经HDW处理24 h后,采用CCK-8法检测HDW对ACHN和HK-2细胞增殖的影响,FCM法检测HDW对细胞周期和凋亡的影响。光学显微镜下及罗丹明染色法观察HDW处理对ACHN和HK-2细胞形态的影响;采用免疫荧光染色法和蛋白质印迹法检测间质-上皮转化(mesenchymal-epithelial transition,MET)相关蛋白表达的变化。划痕愈合实验和Transwell小室法检测ACHN和HK-2细胞的迁移和侵袭能力,RNA测序法检测HDW对ACHN细胞转录组的影响;实时荧光定量PCR法检测RAP1信号通路相关基因RAP1GAP、RASGRP2、RAPGEF3、MAGI1及GNAI1 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法检测丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activate protein kinase,MAPK)通路相关蛋白c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、磷酸化JNK(phospho-JNK,p-JNK)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)、磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)和磷酸化ERK(phospho-ERK,p-ERK)表达水平的改变。结果:HDW可选择性抑制ACHN细胞增殖(P <0.01),将细胞周期阻滞于S期(P <0.01),诱导细胞凋亡(P <0.01)。HDW处理后ACHN细胞的形态发生了明显变化,HDW可促进ACHN细胞中E-钙黏蛋白1(E-cadherin 1)和β-连环蛋白(β-catenin)的表达,并抑制波形蛋白(Vimentin)和Snail1的表达(P值均<0.01)。HDW能显著抑制细胞的迁移和侵袭能力(P值均<0.01),且ACHN和HK-2细胞之间没有明显差异。RNA测序结果分析显示,HDW可影响细胞周期相关基因以及控制细胞生长的转录因子E2F和Myc靶基因的表达,并激活p53信号通路;HDW可显著下调ACHN细胞中RAP1GAP、RASGRP2、RAPGEF3、MAGI1及GNAI1 mRNA(P值均<0.000 1)和p-JNK蛋白的表达水平。结论 :HDW可能通过抑制RAP1-JNK信号通路来选择� 展开更多
关键词 肾肿瘤 白花蛇舌草 上皮-间质转化 细胞运动 RAP1-JNK信号通路
ShRNA-survivin基因对肝癌Huh7细胞增殖、迁移和凋亡的影响 预览
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作者 林海华 余玉红 +3 位作者 张绍敏 陈出新 刘国军 张丽 《精准医学杂志》 2019年第2期122-125,共4页
目的 探讨生存素(survivin)基因对肝癌Huh7细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法 将肝癌细胞分为空白对照组(A组)、空白载体病毒组(B组)和ShRNA-survivin慢病毒组(C组),构建ShRNA-survivin慢病毒载体,通过RT-qPCR检测凋亡因子半胱氨酸天冬... 目的 探讨生存素(survivin)基因对肝癌Huh7细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法 将肝癌细胞分为空白对照组(A组)、空白载体病毒组(B组)和ShRNA-survivin慢病毒组(C组),构建ShRNA-survivin慢病毒载体,通过RT-qPCR检测凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)以及Caspase-3mRNA的表达量;通过CCK-8实验检测肝癌Huh7细胞增殖能力;通过Transwell小室实验检测肝癌Huh7细胞迁移能力;通过AV-PI凋亡试剂盒检测肝癌Huh7细胞的凋亡情况。结果 A、B、C组survivinmRNA的相对表达量分别为1.000±0.000、1.079±0.011、0.421±0.097,A、B组与C组比较差异具有显著统计学意义(F=15.984,q=8.141、3.257,P<0.05),Caspase-3和Caspase-9的mRNA表达量与survivin的mRNA表达量趋势相同;A、B、C组中透过分子筛的细胞数比较差异有显著性(F=31.982,P<0.05);A、B组与C组比较差异均有显著意义(q=7.153、9.074,P<0.05);A、B、C组细胞的增殖率比较差异有显著意义(F=23.983,P<0.05);A、B组与C组比较差异均有显著意义(q=10.322、9.886,P<0.05);A、B、C组细胞的凋亡率比较差异有显著意义(F=30.009,P<0.05);A、B组与C组比较差异均有显著意义(q=9.531、8.001,P<0.05)。结论 ShRNA-survivin对肝癌Huh7细胞的增殖、迁移有抑制作用,对细胞凋亡具有促进作用,可以作为肝癌的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 SURVIVIN 凋亡抑制蛋白质类 肝肿瘤 细胞增殖 细胞运动 细胞凋亡 细胞系 肿瘤
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Ac-SDKP调节Rac1信号抑制皮肤肌成纤维细胞的转化和迁移 预览
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作者 王姗 张巧丹 +3 位作者 李世峰 徐洪 杨方 杨洁 《福建医科大学学报》 2019年第1期9-12,22共5页
目的研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)通过阻断小G蛋白Ras相关的C3肉毒素底物(Rac1)信号,抑制转化生长因子β1(TGF-β1)介导的皮肤肌成纤维细胞转化的机制。 方法原代培养大鼠乳鼠皮肤成纤维细胞,分为空白对照组、T... 目的研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)通过阻断小G蛋白Ras相关的C3肉毒素底物(Rac1)信号,抑制转化生长因子β1(TGF-β1)介导的皮肤肌成纤维细胞转化的机制。 方法原代培养大鼠乳鼠皮肤成纤维细胞,分为空白对照组、TGF-β1诱导组及Ac-SDKP预处理组。划痕实验检测细胞迁移能力,免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Rac1蛋白的表达,Western-blot法检测α-SMA、血清应答因子(SRF)、心肌蛋白相关转录因子(MRTF-A)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)及Rac1蛋白的表达。 结果细胞划痕实验显示,TGF-β1诱导组与空白对照组比较,细胞迁移至中央划痕区的距离明显增大,Ac-SDKP预处理组与TGF-β1诱导组比较,细胞迁移至中央划痕区的距离减小。免疫细胞化学法检测结果显示,TGF-β1诱导组α-SMA和Rac1的阳性表达较空白对照组增强,而Ac-SDKP预处理组可明显抑制α-SMA和Rac1的阳性表达。TGF-β1诱导组的α-SMA,SRF,MRTF-A,ColⅠ及Rac1蛋白表达均较空白对照组明显上调,Ac-SDKP预处理组的蛋白表达较TGF-β1诱导组下降(P<0.05)。 结论Ac-SDKP能够阻断Rac1信号,抑制TGF-β1介导的皮肤成纤维细胞迁移能力的提高和肌成纤维细胞转化。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 成纤维细胞 细胞运动 蛋白质类
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T-钙黏蛋白联合顺铂对黑色素瘤顺铂耐药株的作用研究 预览
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作者 陆海涛 李雪飞 +2 位作者 刘利君 何磊 段昕所 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第5期459-463,I0001共6页
目的探讨T-钙黏蛋白联合顺铂对黑色素瘤顺铂耐药株的作用。方法采用大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法诱导建立小鼠黑色素瘤B16F10顺铂耐药细胞株(CDDP-RB16F10)。 MTT法检测CDDP-RB16F10的增殖能力。将T-钙黏蛋白转染肿瘤细胞。分... 目的探讨T-钙黏蛋白联合顺铂对黑色素瘤顺铂耐药株的作用。方法采用大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法诱导建立小鼠黑色素瘤B16F10顺铂耐药细胞株(CDDP-RB16F10)。 MTT法检测CDDP-RB16F10的增殖能力。将T-钙黏蛋白转染肿瘤细胞。分别采用反转录聚合酶链式反应(R T-PCR)和免疫组化SP法检测转染后T-钙黏蛋白mRNA和蛋白的表达。实验将CDDP-RB16F10细胞分为空白对照组、pEGFP-N1组、pEGFP-N1-T-cadherin组、顺铂组、pEGFP-N1联合顺铂组、pEGFP-N1-T-cadherin联合顺铂组。采用Wound-healing划痕实验和transwell侵袭实验检测T-钙黏蛋白联合顺铂对CDDP-RB16F10细胞迁移和侵袭力的影响。结果成功建立黑色素瘤顺铂耐药细胞株。MTT法结果显示,CDDP-RB16F10细胞增殖能力与B16F10细胞相比差异无统计学意义(P>0.05)。 RT-PCR和免疫组化SP法检测表明,转染后细胞可稳定转录和表达T-钙黏蛋白。pEGFP-N1-T-cadherin联合顺铂组细胞迁移率和穿膜细胞数低于pEGFP-N1-T-cadherin组(P<0 .05),而 pEGFP-N1-T-cadherin组低于空白对照组、pEGFP-N1组、顺铂组和pEGFP-N1联合顺铂组(P<0 .05)。析因分析显示,T-钙黏蛋白与顺铂联合对CDDP-R B16F10细胞迁移率及侵袭力的抑制有交互作用(P<0 .05)。结论 T-钙黏蛋白可恢复顺铂对黑色素瘤顺铂耐药细胞株迁移及侵袭力的抑制作用。 展开更多
关键词 顺铂 黑色素瘤 实验性 细胞运动 T-钙黏蛋白 耐药 侵袭力
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低糖浓度耐受对膀胱肿瘤T24细胞细胞学行为及免疫逃逸的影响 预览
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作者 吴晖 刘大千 +4 位作者 秦路峰 张钰 杨学成 梁晔 牛海涛 《精准医学杂志》 2019年第2期147-151,共5页
目的 探讨低糖培养基筛选的低糖浓度耐受型膀胱肿瘤T24细胞系增殖和迁移能力的变化,以及其免疫检查点PD-L1表达量的变化。方法 用不同葡萄糖浓度(2000、1500、1000、500mg/L)的培养基逐代筛选出低糖浓度耐受型膀胱肿瘤T24细胞系。将耐10... 目的 探讨低糖培养基筛选的低糖浓度耐受型膀胱肿瘤T24细胞系增殖和迁移能力的变化,以及其免疫检查点PD-L1表达量的变化。方法 用不同葡萄糖浓度(2000、1500、1000、500mg/L)的培养基逐代筛选出低糖浓度耐受型膀胱肿瘤T24细胞系。将耐1000mg/L葡萄糖浓度培养基的T24细胞设为A组,将耐500mg/L葡萄糖浓度培养基的T24细胞设为B组,将普通T24细胞设为C组。通过乳酸浓度检测比较不同组别细胞糖酵解能力的差异。通过细胞划痕实验测定不同组别细胞的迁移能力。通过MTT法检测不同组别细胞的增殖能力。通过荧光定量PCR技术检测不同组别细胞PD-L1mRNA的表达水平。采用WesternBlot方法检测不同组别细胞PD-L1蛋白的表达水平。结果 乳酸浓度检测结果显示,B组和A组乳酸生成量较C组明显增加(F=30.72,q=7.29、10.88,P<0.05),且B组大于A组(q=3.59,P<0.05)。划痕实验结果显示,B组和A组迁移能力较C组明显增强(F=13.11,q=6.39、6.15,P<0.05),A、B组间比较差异无显著性(P>0.05)。MTT法检测结果显示,B组与A组的膀胱肿瘤增殖能力较C组明显增强(F=63.22,q=9.32、21.99,P<0.05),而且B组大于A组(q=6.42,P<0.05)。荧光定量PCR以及WesternBlot方法检测结果证明,无论在mRNA还是蛋白水平,PD-L1的表达量均为B组>A组>C组。结论 低糖浓度耐受型膀胱肿瘤细胞系相较于非低糖浓度耐受型膀胱肿瘤细胞系糖酵解、迁移及增殖能力增强,并且其免疫检查点PD-L1的表达亦有明显增加,可能可以作为膀胱肿瘤的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 细胞系 肿瘤 糖酵解 细胞增殖 细胞运动 B7-H1抗原
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Rab35与肿瘤关系的研究现状及展望 预览
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作者 李美月 田文艳 +1 位作者 王颖梅 薛凤霞 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第5期548-551,共4页
Rab蛋白是小分子GTP结合蛋白Ras超家族中最大的亚家族,在囊泡的形成、运输、融合等过程中发挥着重要的作用。Rab35作为Rab家族的新成员,在人体组织中的分布比较广泛。已有研究证实Rab35与肿瘤迁移和侵袭等生物学特性有关,可能为潜在的... Rab蛋白是小分子GTP结合蛋白Ras超家族中最大的亚家族,在囊泡的形成、运输、融合等过程中发挥着重要的作用。Rab35作为Rab家族的新成员,在人体组织中的分布比较广泛。已有研究证实Rab35与肿瘤迁移和侵袭等生物学特性有关,可能为潜在的肿瘤预后标志物,可为临床治疗提供新的靶点。本文就Rab35的来源、结构、功能及其在肿瘤中的作用进行综述。 展开更多
关键词 肿瘤侵润 细胞运动 肿瘤 Rab35 GTP磷酸水解酶类
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