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富血小板纤维蛋白对干细胞增殖及成骨分化的研究进展 预览
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作者 徐方方 殷丽华 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第6期527-530,共4页
干细胞是一类具有高度增殖和多向分化潜能的细胞,在特定诱导条件下可转化为成骨细胞,从而促进骨组织再生。富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)是第二代血小板浓缩物,其富含大量生长因子如骨形成蛋白2(bone morphogenetic prote... 干细胞是一类具有高度增殖和多向分化潜能的细胞,在特定诱导条件下可转化为成骨细胞,从而促进骨组织再生。富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)是第二代血小板浓缩物,其富含大量生长因子如骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)、血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)及胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)等可共同作用于干细胞,影响干细胞的增殖和分化。大量体外研究已证实,PRF可以显著促进干细胞增殖及成骨分化。因此,本文就PRF发展、制备方法、结构及成分、对干细胞增殖及成骨分化的影响等研究进展进行综述。 展开更多
关键词 富血小板纤维蛋白 干细胞 细胞增殖 细胞成骨分化
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流体剪切力作用下人脂肪基质细胞体外成骨分化的实验研究 预览
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作者 崔军 贾黎 +1 位作者 刘学恒 崔光辉 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1020-1023,共4页
目的:分离人体脂肪基质细胞(hADSCs)并研究流体剪切应力对其成骨分化的影响。方法:将脂肪抽吸术获取的人体脂肪进行分离,应用强度为3dyne/cm^2的流体剪切力刺激30min后观察细胞形态;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力... 目的:分离人体脂肪基质细胞(hADSCs)并研究流体剪切应力对其成骨分化的影响。方法:将脂肪抽吸术获取的人体脂肪进行分离,应用强度为3dyne/cm^2的流体剪切力刺激30min后观察细胞形态;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力,绘制细胞生长曲线;碱性磷酸酶(ALP)及茜素红染色对其成骨分化进行鉴定。结果:胶原酶消化后的脂肪基质细胞呈梭形,经流体剪切力作用培养后,细胞体积明显增大,胞浆丰富并含有较多的细胞器,细胞排列方向与加力方向一致,呈漩涡状生长,生长速度加快。此外,流体剪切力加载后脂肪基质细胞内碱性磷酸酶活性增高,茜素红染色表明聚集的细胞团中心能形成矿化结节。结论:脂肪基质细胞中的成体干细胞经过流体剪切力作用后可向成骨细胞分化并具有明显的成骨表型,可作为骨组织工程的种子细胞。 展开更多
关键词 流体剪切力 脂肪基质细胞 体外骨分化 骨组织工程
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银杏叶提取物对骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响 预览 被引量:7
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作者 张甲第 时舒曼 +3 位作者 张海洋 谷旭 高幸 吴哲 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期575-579,共5页
目的:研究银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对大鼠的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖及成骨分化过程的影响。方法:将不同浓度的GBE作用于第3代BMSCs,通过CCK-8(Cell Counting Kit-8)... 目的:研究银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对大鼠的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖及成骨分化过程的影响。方法:将不同浓度的GBE作用于第3代BMSCs,通过CCK-8(Cell Counting Kit-8)法及流式细胞仪法检测其对细胞增殖活性变化的影响,通过茜素红染色及碱性磷酸酶(Alkalinet phosphatase,ALP)法判定其对细胞成骨能力的影响。RT-PCR检测成骨相关基因骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、Runx2(runt-related transcription factor2)的mRNA的表达。结果:不同浓度的GBE对BMSCs的增殖无明显影响,但能使细胞处于S期,显著促进ALP的表达,在浓度为150mg/L时表达最多。其成骨相关基因BMP-2、Runx2的mRNA表达也相对增高。结论:银杏叶提取物对骨髓间充质干细胞的成骨分化具有积极意义。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 骨髓间充质干细胞 成骨分化 增殖
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影响骨髓间质干细胞向成骨细胞分化的调控因素 预览 被引量:3
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作者 黄艳 李莹辉 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期 85-88,共4页
骨骼废用引起的骨质减少主要归因于骨形成的减少,成骨细胞由具有多向分化潜能的间充质细胞经骨原细胞、前成骨细胞分化而来,骨髓间质干细胞是骨髓来源的具有多向分化潜能的干细胞。综述了骨髓间质干细胞向成骨细胞分化的调控因素,有... 骨骼废用引起的骨质减少主要归因于骨形成的减少,成骨细胞由具有多向分化潜能的间充质细胞经骨原细胞、前成骨细胞分化而来,骨髓间质干细胞是骨髓来源的具有多向分化潜能的干细胞。综述了骨髓间质干细胞向成骨细胞分化的调控因素,有助于增加对骨丢失的理解,并进行预防和治疗,为航天员和骨骼废用病人创造更健康的生活。 展开更多
关键词 调控因素 骨髓间质干细胞 成骨分化
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不同成骨诱导作用下骨髓间充质干细胞的基因表达模式 预览 被引量:8
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作者 段瑞平 吴凌 +3 位作者 林云锋 刘磊 汤炜 田卫东 《四川大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期 856-859,共4页
目的研究骨髓间充质干细胞不同成骨分化模式的分子调控机制,为将其作为骨组织缺损基因治疗的载体细胞奠定理论基础。方法用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),传代扩增后分别用矿化培养基(100nmol/L... 目的研究骨髓间充质干细胞不同成骨分化模式的分子调控机制,为将其作为骨组织缺损基因治疗的载体细胞奠定理论基础。方法用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),传代扩增后分别用矿化培养基(100nmol/L地塞米松、10mmol/Lβ-甘油磷酸钠和50mg/mL抗坏血酸)与重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2,500ng/mL)进行诱导。分别于诱导后1、2周行茜素红染色鉴定钙结节形成情况;诱导后1、2和3d时用RT-PCR检测Runx2、Osx、OCN和ColⅠ的基因表达情况。结果矿化诱导组和rhBMP-2诱导组,茜素红染色均呈阳性钙结节,但矿化诱导组细胞于1周后形成矿化结节,时间早于rhBMP-2诱导组(2周后形成矿化结节);RT-PCR显示,在矿化诱导组,Runx2在诱导的1、2、3d均没有表达,Osx在诱导后2、3d有表达,OCN和ColⅠ在诱导的1、2、3d均有表达;在rhBMP-2诱导组.Runx2和Osx于诱导的第2d开始表达,OCN和ColⅠ在诱导的1、2、3d均表达。结论与rhBMP-2相比,矿化培养基通过更为直接的信号传导方式调控着骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,因此矿化培养基诱导骨髓间充质干细胞形成矿化结节的能力强于rhBMP-2。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 矿化诱导 骨形成蛋白-2 基因表达模式
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水解罗非鱼胶原促进人牙周膜细胞活力及成骨分化的效应 预览 被引量:2
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作者 刘超 孙皎 《口腔材料器械杂志》 2017年第2期74-78,共5页
目的探讨水解罗非鱼胶原促进人牙周膜细胞活力及成骨分化的作用。方法制备水解罗非鱼胶原,原代分离培养人牙周膜细胞(hPDL细胞),分别利用MTT试验和real-time PCR试验检测水解罗非鱼胶原对细胞活力和成骨分化相关基因ALP,COL I,OCN和... 目的探讨水解罗非鱼胶原促进人牙周膜细胞活力及成骨分化的作用。方法制备水解罗非鱼胶原,原代分离培养人牙周膜细胞(hPDL细胞),分别利用MTT试验和real-time PCR试验检测水解罗非鱼胶原对细胞活力和成骨分化相关基因ALP,COL I,OCN和RUNX2的表达的影响,运用激光共聚焦显微镜观察成骨分化相关蛋白骨钙蛋白的表达,进一步采用westernblot技术探讨水解罗非鱼胶原对整合素.ERK信号通路的作用。结果水解罗非鱼胶原能促进hPDL细胞的增殖,使ALP,COLI,OCN和RUNX2的基因上调,诱导骨钙蛋白的产生,这些生物效应与水解罗非鱼胶原叮激活整合素-ERK信号通路有关。结论水解罗非鱼胶原具有骨诱导性,具有历导hPDL细胞成骨分化的潜能。 展开更多
关键词 水解罗非鱼胶原 人牙周膜细胞 细胞活力 成骨分化 整合素-ERK通路
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人脐带间充质干细胞的原代培养、鉴定及成骨分化的实验研究 预览 被引量:1
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作者 李云鹏 赵昕 +5 位作者 封兴华 张浚睿 陆斌 王一波 刘彦普 侯锐 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2014年第8期709-712,共4页
目的:研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的成骨分化及其在成骨诱导过程中成骨相关标记物的变化情况。方法:通过原代培养的方法获得hUCMSCs;通过流式细胞技术对获得的细胞进行鉴定;通过茜素红染色和细胞免疫荧光技术对成骨诱导后的细... 目的:研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的成骨分化及其在成骨诱导过程中成骨相关标记物的变化情况。方法:通过原代培养的方法获得hUCMSCs;通过流式细胞技术对获得的细胞进行鉴定;通过茜素红染色和细胞免疫荧光技术对成骨诱导后的细胞进行鉴定;在成骨诱导过程中设立时间点(0d、7d、14d、21d),对成骨相关标记物(碱性磷酸酶、骨桥蛋白、Runx2)进行检测。结果:通过原代培养成功获得hUCMSCs;流式分析结果显示其表达间充质干细胞标记物;进行成骨诱导21d后茜素红染色阳性,免疫荧光染色检测胞浆内大量表达骨桥蛋白;碱性磷酸酶活性和骨桥蛋白(mRNA水平)在第7天时即表现出具有统计学差异的升高,Runx2(mRNA水平)在第7天时达到峰值,随后下降。结论:hUCMSCs的成骨分化过程是一个连续的过程;体外诱导7d后成骨分化进行已经全面启动;经过诱导的hUCMSCs比未诱导的细胞更适合用于骨缺损修复。 展开更多
关键词 间充质干细胞 脐带 细胞培养 成骨分化
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不同浓度地塞米松诱导脂肪干细胞成骨分化的实验研究 被引量:9
8
作者 王伟 陈磊杰 +2 位作者 张晨 余强 王坤正 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期 1486-1492,共7页
目的地塞米松是MSCs成骨诱导分化的基础试剂,探讨诱导脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)成骨分化过程中地塞米松的优选浓度,为进一步骨组织工程研究提供理论依据。方法 3月龄清洁级健康新西兰大白兔5只,雌雄不限,体重2~3... 目的地塞米松是MSCs成骨诱导分化的基础试剂,探讨诱导脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)成骨分化过程中地塞米松的优选浓度,为进一步骨组织工程研究提供理论依据。方法 3月龄清洁级健康新西兰大白兔5只,雌雄不限,体重2~3 kg。取腹股沟区皮下脂肪4~6 mL,采用胶原酶消化离心贴壁法分离培养ADSCs,取第3代细胞进行实验。倒置相差显微镜观察细胞形态变化;联合CD44、CD106免疫荧光染色和成脂诱导分化鉴定ADSCs。调整细胞密度为1×105个/mL,分别用普通培养液(A组)及含0(B组)、1×10-9(C组)、1×10-8(D组)、1×10-7(E组)、1×10-6(F组)、1×10-5 mol/L(G组)地塞米松的成骨诱导培养液对ADSCs进行培养。MTT法检测细胞增殖情况;RT-PCR检测诱导细胞骨钙素(osteocalcin,OC)和核心结合因子α1(core binding factorα1,Cbfα1)的表达;测定ALP活性及矿化面积百分率;对矿化结节行茜素红染色。结果 ADSCs形态多为梭形、多角形,呈"漩涡状"排列;表面抗原分子CD44呈阳性,CD106呈阴性,成脂诱导后可观察到细胞内有脂滴形成,油红O染色呈阳性。MTT检测显示随地塞米松浓度升高,吸光度(A)值呈下降趋势;其中成骨诱导5、7 d时,D、E组A值比较差异有统计学意义(P〈0.05)。RT-PCR检测示,成骨诱导7 d OC和Cbfα1 mRNA的表达分别在E组和D组达高峰;成骨诱导14 d ALP活性和矿化面积百分率均在D组达高峰,随后逐渐下降。D、E组间OC和Cbfα1 mRNA的表达量、ALP活性及矿化面积百分率比较差异均无统计学意义(P〉0.05),与其余各组比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。成骨诱导14 d,G组细胞均死亡;茜素红染色除A、G组外均呈阳性。结论成骨培养液中地塞米松浓度为1×10-8 mol/L时,能在减少对细胞增殖抑制的同时,更有效地诱导ADSCs成骨分化。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 细胞培养 成骨分化 地塞米松
二磷酸盐对成骨细胞增殖及分化成熟作用的实验研究 预览 被引量:4
9
作者 杨贺杰 吴立东 +2 位作者 冯洁 师钟丽 熊炎 《浙江医学》 CAS 2007年第10期 1038-1041,共4页
目的研究二磷酸盐类药物—阿伦磷酸对成骨细胞增殖及分化成熟的作用。方法将人成骨样MG-63细胞体外培养、传代后分为5组:空白对照组、阳性对照组(加入10-8M地塞米松)、3个实验组(分别加入10-6M、10-8M、10-10M阿伦磷酸)。培养数日... 目的研究二磷酸盐类药物—阿伦磷酸对成骨细胞增殖及分化成熟的作用。方法将人成骨样MG-63细胞体外培养、传代后分为5组:空白对照组、阳性对照组(加入10-8M地塞米松)、3个实验组(分别加入10-6M、10-8M、10-10M阿伦磷酸)。培养数日后,行细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、骨形态发生蛋白-(2BMP-2)、骨钙素(OC)、I型胶原(Coll.I)基因表达等检测。结果加入阿伦磷酸的3个实验组MG-63细胞数目较对照组显著增加,其峰值出现在浓度为10-8M时;同时,阿伦磷酸使ALP活性增强,而且BMP-2、OC、Coll.I等成骨细胞相关基因的表达增加。结论阿伦磷酸具有促进成骨细胞增殖及分化成熟,诱导骨形成的能力。 展开更多
关键词 阿伦磷酸 MG-63细胞 成骨分化 骨形态发生蛋白-2
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密度梯度离心和贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞增殖活性和成骨功能比较 预览 被引量:11
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作者 韩立赤 胡静 +2 位作者 戚孟春 邹淑娟 王大章 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期 287-290,共4页
目的通过比较密度梯度离心和贴壁筛选两种方法所获MSCs的增殖活性和成骨功能,探索骨髓MSCs体外分离和纯化较好的方法,为MSCs进一步的试验研究提供依据.方法应用密度梯度离心和贴壁筛选两种方法分离纯化骨髓MSCs,并通过MTT法检测其增殖活... 目的通过比较密度梯度离心和贴壁筛选两种方法所获MSCs的增殖活性和成骨功能,探索骨髓MSCs体外分离和纯化较好的方法,为MSCs进一步的试验研究提供依据.方法应用密度梯度离心和贴壁筛选两种方法分离纯化骨髓MSCs,并通过MTT法检测其增殖活性.用第三代MSCs进行骨向诱导,以观察两种方法所获MSCs是否有相似的骨向分化能力.结果密度梯度离心法所获MSCs纯度高,杂质细胞少,增殖活性强,常表现为梭形和小多角形,7到10天内便可达到融合.而贴壁法所获MSCs纯度低,红细胞、破骨样细胞等杂质细胞较多,增殖速度相对较慢,且经数次传代仍有较多杂质细胞存在.经骨向诱导后,两种方法所获MSCs表现出相似的ALP活性和矿化结节形成能力.矿化结节数目在两组比较无显著性差异(P>0.05).结论密度梯度离心法是体外分离和纯化骨髓MSCs较好的方法,所获细胞增殖活性高.两种方法所获MSCs具有相似的骨向分化能力. 展开更多
关键词 细胞增殖活性 贴壁法 骨髓间充质 功能比较 密度梯度离心法 MSCs 分离和纯化 大鼠 MTT法检测 分化能力 矿化结节 破骨样细胞 ALP活性 显著性差异 成骨功能 试验研究 分离纯化 方法应用 增殖速度 形成能力 第三代 相似 杂质
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