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手持式柑橘除梢机的设计与试验 预览
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作者 叶昌晓 洪添胜 +3 位作者 李震 吴伟斌 王建波 刘岳 《农机化研究》 北大核心 2019年第5期86-90,96共6页
针对目前柑橘人工除梢劳动强度大、效率低及反复性大等问题,通过分析柑橘新梢物理特性和生长环境,设计了一种手持式柑橘除梢机;阐述了该除梢机结构及工作原理,并对锯片和无刷电机等关键部件及切割线速度等工作参数进行了设计与试验。试... 针对目前柑橘人工除梢劳动强度大、效率低及反复性大等问题,通过分析柑橘新梢物理特性和生长环境,设计了一种手持式柑橘除梢机;阐述了该除梢机结构及工作原理,并对锯片和无刷电机等关键部件及切割线速度等工作参数进行了设计与试验。试验结果表明:该除梢机的除梢成功率为93.8%,除梢后留茬长度理想率为88.4%;该机最大工作高度达3.1m,整机能连续工作12h以上。 展开更多
关键词 果园机械 柑橘除梢机 柑橘新梢 手持式 柑橘黄龙病
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赣南脐橙无菌苗生产的组培脱菌与微芽嫁接快繁技术
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作者 陈传红 古晓斌 +2 位作者 应家轩 高冰冰 陈伊能 《北方园艺》 CAS 北大核心 2019年第18期26-31,共6页
以柑橘良种赣南脐橙带芽茎段为外植体,枳壳无菌实生幼苗作为砧木,探讨了消毒灭菌方法、植物生长调节剂组合、热处理温度和时间及茎尖尺寸大小对其无菌体系的建立、丛生芽的诱导与增殖、脱菌及微嫁接的影响。结果表明:采用70%酒精消毒30... 以柑橘良种赣南脐橙带芽茎段为外植体,枳壳无菌实生幼苗作为砧木,探讨了消毒灭菌方法、植物生长调节剂组合、热处理温度和时间及茎尖尺寸大小对其无菌体系的建立、丛生芽的诱导与增殖、脱菌及微嫁接的影响。结果表明:采用70%酒精消毒30 s,无菌水冲洗3次,再用0.1%升汞加吐温-80消毒15 min,可获得成功率为83.20%的有生命力无菌培养材料;以MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1为最佳芽诱导培养基,诱导率达89.72%;最佳丛生芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.4 mg·L-1+GA3 0.1 mg·L-1,增殖率最高达394.26%;采用40℃高温处理40 min的0.6 mm茎尖进行微嫁接,成活率为63.32%,脱菌率为93.21%。 展开更多
关键词 赣南脐橙 柑橘黄龙病 芽增殖 热处理 微芽嫁接
潜伏期柑橘黄龙病宿主糖代谢及近红外光谱特征 预览
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作者 孟幼青 翁海勇 +2 位作者 岑海燕 李红叶 何勇 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期428-435,共8页
柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing)是柑橘最具有毁灭性的病害,传染性极强,严重影响柑橘产业的健康发展。及时发现潜伏期未显症的病树并挖除,能够更加有效地阻碍黄龙病的传播。为此,特研究潜伏期染病叶片的糖代谢以及叶片组织光学特性的... 柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing)是柑橘最具有毁灭性的病害,传染性极强,严重影响柑橘产业的健康发展。及时发现潜伏期未显症的病树并挖除,能够更加有效地阻碍黄龙病的传播。为此,特研究潜伏期染病叶片的糖代谢以及叶片组织光学特性的变化规律。结果表明,淀粉、蔗糖、葡萄糖和果糖在染病未显症叶片中已经出现了异常累积,分别是健康叶片的3.58、2.16、3.41、1.70倍,同时,近红外光谱的反射率出现了升高的趋势。进一步采用Random Frog算法选择前6个敏感波段(1015、1331、1065、1334、1022、951nm),并结合Nave Bayes(NB)模型对潜伏期未显症柑橘黄龙病叶片进行判别,得到了97.5%的分类正确率,对阳性样本的漏检率为0,说明采用近红外高光谱技术能够实现对未显症柑橘黄龙病的检测,可为田间柑橘黄龙病的快速普查提供新的方法。 展开更多
关键词 柑橘黄龙病 糖代谢 近红外高光谱
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柑橘黄龙病菌亚洲种菌毛装配蛋白基因(PAP)序列分析、原核表达及抗血清制备 预览
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作者 李宾宾 余乃通 +3 位作者 杨毅 王健华 张秀春 刘志昕 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期214-220,共7页
菌毛装配蛋白(Flp pilus assembly protein,PAP)是一种分泌蛋白,参与细菌菌毛的组装,表达量高。本研究以感染柑橘黄龙病的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA,用其菌毛装配蛋白基因(PAP)的特异引物进行PCR扩增,获得该基因的目的片段,序... 菌毛装配蛋白(Flp pilus assembly protein,PAP)是一种分泌蛋白,参与细菌菌毛的组装,表达量高。本研究以感染柑橘黄龙病的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA,用其菌毛装配蛋白基因(PAP)的特异引物进行PCR扩增,获得该基因的目的片段,序列分析表明海南琼海柑橘黄龙病菌PAP基因与柑橘黄龙病菌亚洲种(GenBank登录号:CP001677.5)PAP基因序列一致。功能预测表明它含有两个与分泌功能相关的CpaC和Secretin结构域。PCR产物通过Eco RⅤ和XhoⅠ双酶切构建重组载体pET32a-PAP。将pET32a-PAP载体转化BL21(DE3)大肠杆菌,经终浓度为1 mmoL/L IPTG诱导,目的蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白经Ni^2+-NTA层析柱纯化,并作为抗原腹腔免疫小白鼠,获得效价在1∶500~1∶1 000的多克隆抗血清。Western blot分析表明,PAP多克隆抗血清特异性强;以田间样品总蛋白做抗原时,能特异性检测染病样品。本研究为PAP蛋白功能研究和开发柑橘黄龙病菌的蛋白检测产品提供研究基础。 展开更多
关键词 柑橘黄龙病 基因表达 PAP蛋白 抗血清制备
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柑橘黄龙病菌基因组学的研究进展 预览
5
作者 邓晓玲 郑永钦 +1 位作者 郑正 许美容 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期137-148,共12页
柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing, HLB)是柑橘生产上最具毁灭性的病害,严重威胁着世界柑橘产业的发展。该病害由难培养细菌候选韧皮部杆菌(Candidatus Liberibacter spp.)所引起,通过带病苗木和媒介昆虫进行传播蔓延。近年来,随着 DNA... 柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing, HLB)是柑橘生产上最具毁灭性的病害,严重威胁着世界柑橘产业的发展。该病害由难培养细菌候选韧皮部杆菌(Candidatus Liberibacter spp.)所引起,通过带病苗木和媒介昆虫进行传播蔓延。近年来,随着 DNA 测序技术和生物信息学的发展,基因组学被广泛应用于柑橘黄龙病的研究,并为克服黄龙病菌难培养所造成的研究瓶颈提供了新的方法和思路。柑橘黄龙病菌基因组学的研究,不仅有助于探究黄龙病菌与寄主植物的互作关系,而且可为抗病栽培和病害早期检测提供重要的理论基础。本文结合当前柑橘黄龙病的研究概况、病原全基因组的测序策略及基因组的特征描述,重点综述基因组学在黄龙病致病机理、病原遗传多样性与分子检测等方面的研究进展。 展开更多
关键词 柑橘黄龙病 候选韧皮部杆菌 基因组学 致病机制 遗传多样性 分子检测
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砂糖桔黄龙病3种检测引物灵敏性比较研究砂糖桔黄龙病3种检测引物灵敏性比较研究 预览
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作者 肖婉钰 黄江华 《仲恺农业工程学院学报》 CAS 2019年第3期14-17,共4页
柑橘黄龙病是柑橘毁灭性病害,给世界柑橘产业造成了巨大的损失.利用PCR检测黄龙病病原菌是目前柑橘黄龙病诊断的可靠方法,具有快速、特异、高效灵敏等优点.前期已有文献报道过用于常规PCR检测的黄龙病检测引物,但尚无比较这些引物的灵... 柑橘黄龙病是柑橘毁灭性病害,给世界柑橘产业造成了巨大的损失.利用PCR检测黄龙病病原菌是目前柑橘黄龙病诊断的可靠方法,具有快速、特异、高效灵敏等优点.前期已有文献报道过用于常规PCR检测的黄龙病检测引物,但尚无比较这些引物的灵敏性的报道.为了验证相关文献报道的3对引物检测柑橘黄龙病的灵敏度,本研究选择感病砂糖桔样品作为反应模板,并设置相同PCR反应条件下,分别利用3对特异性引物(P1/P2, P3/P4和OI1/OI2c)对10份砂糖桔感病样本总DNA进行扩增.结果表明,引物P1/P2灵敏度最低,扩增不出条带;引物P3/P4灵敏度较好,扩增条带明显,但个别样品扩增条带不明显;引物OI1/OI2c灵敏度最好,所有样品扩增条带均明显. 展开更多
关键词 柑橘黄龙病 引物 灵敏度
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青霉素喷施防治柑橘黄龙病试验初报 预览
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作者 吴泳贤 李先其 +4 位作者 舒本水 罗梅 吴仲真 林进添 宾淑英 《仲恺农业工程学院学报》 CAS 2019年第1期49-52,共4页
柑橘黄龙病是世界性分布的柑橘毁灭性病害,严重制约着柑橘产业的发展.为探究青霉素对柑橘黄龙病的防治效果,本试验采用喷施的方式对柑橘黄龙病病树进行处理,同时结合实时荧光定量PCR技术对病树内黄龙病菌量进行动态监测,确定青霉素对柑... 柑橘黄龙病是世界性分布的柑橘毁灭性病害,严重制约着柑橘产业的发展.为探究青霉素对柑橘黄龙病的防治效果,本试验采用喷施的方式对柑橘黄龙病病树进行处理,同时结合实时荧光定量PCR技术对病树内黄龙病菌量进行动态监测,确定青霉素对柑橘黄龙病的相对防效.结果表明连续喷施4次青霉素3个月和7个月后病树中黄龙病菌含量均出现不同程度的上调,相对防效分别为-170.16%和-63.96%.以上结果表明喷施的方式进行青霉素处理黄龙病病树对柑橘黄龙病并不能取到防治效果. 展开更多
关键词 青霉素 柑橘黄龙病 防效
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基于原噬菌体类型的我国柑橘黄龙病菌种群遗传结构分析 被引量:1
8
作者 李嘉慧 郑正 邓晓玲 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期334-342,共9页
柑橘黄龙病是柑橘生产上最严重的病害之一,由难培养的候选韧皮部杆菌亚洲种('Candidatus Liberibacter asiaticus',CLas)引起。目前,已报道的与CLas相关的原噬菌体有3种,并且不同的CLas样品中可以检测到不同类型的原噬菌体或不... 柑橘黄龙病是柑橘生产上最严重的病害之一,由难培养的候选韧皮部杆菌亚洲种('Candidatus Liberibacter asiaticus',CLas)引起。目前,已报道的与CLas相关的原噬菌体有3种,并且不同的CLas样品中可以检测到不同类型的原噬菌体或不同类型的组合。本研究基于原噬菌体类型特异引物对从我国南方8省收集的548个黄龙病样品进行原噬菌体类型的鉴定和分析。结果表明,基于原噬菌体类型,在548个样品中共鉴定了7种类型的菌株,分别为Type 1(7.12%)、Type 2(60.22%)、Type 3(3.83%)、Type 1+Type 2(3.28%)、Type 1+Type 3(17.34%)、Type 1+Type 2+Type 3(3.47%)和None类型(不含上述3种类型原噬菌体)(4.74%),其中只携带Type 2类型原噬菌体菌株为华南地区优势种群。此外,基于遗传多样性和遗传距离对我国南方地区的CLas种群进行种群结构分析发现,我国南方地区的CLas种群可以分为3个组,即Ⅰ组(广东、江西、广西、福建)、Ⅱ组(浙江和湖南)以及Ⅲ组(云南和海南),其中Ⅰ组和Ⅱ组又可聚为一大组。该结果可为研究我国柑橘黄龙病流行规律提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 柑橘黄龙病 原噬菌体 种群遗传结构
柑橘黄龙病病原CLIBASIA_03230基因的克隆及其编码蛋白的原核表达 预览
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作者 赵国欢 张小兵 +1 位作者 李凡 李为民 《云南农业大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2019年第1期9-14,共6页
【目的】柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB)是由韧皮部杆菌(Candidatus Liberibacter spp.)引发的重要柑橘病害。本试验利用生物信息学方法分析韧皮部杆菌全基因组,推测CLIBASIA_03230基因(命名为Clsp11)编码分泌蛋白,克隆该基因并... 【目的】柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB)是由韧皮部杆菌(Candidatus Liberibacter spp.)引发的重要柑橘病害。本试验利用生物信息学方法分析韧皮部杆菌全基因组,推测CLIBASIA_03230基因(命名为Clsp11)编码分泌蛋白,克隆该基因并构建其原核表达载体,表达、纯化Clsp11蛋白,以用于制备特异抗体。【方法】利用CTAB法从感染柑橘黄龙病病原的长春花中提取总DNA,以此为模板经PCR扩增Clsp11,并克隆至pMD18-T载体,挑取阳性克隆测序验证;利用无缝克隆技术将Clsp11克隆至原核表达载体pET30a,通过PCR和酶切鉴定筛选阳性克隆,命名为pET30a-Clsp11;转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,表达N-端融合6×His标签的Clsp11重组蛋白,SDS-PAGE电泳检测,分析目的蛋白的表达水平,并利用镍柱进行纯化。【结果】Clsp11蛋白成功表达,IPTG诱导5h表达量显著提高,主要以包涵体形式存在于宿主菌中。【结论】本研究克隆了柑橘黄龙病病原Clsp11基因,构建了原核表达载体pET30a-Clsp11,并成功表达、纯化了Clsp11重组蛋白,为进一步制备特异性抗体和研究Clsp11生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 柑橘黄龙病 Clsp11 基因克隆 原核表达
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基于压缩自编码融合极限学习机的柑橘黄龙病鉴别方法 预览
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作者 路皓翔 徐明昌 +2 位作者 张卫东 杨辉华 刘振丙 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第5期652-660,共9页
针对柑橘黄龙病检测模型的准确度较低、可靠性较差等问题,提出了一种压缩自编码融合极限学习机(Contractive auto-encoder combined extreme learning machine,CAE-ELM)的柑橘黄龙病鉴别方法。此方法通过ELM代替CAE顶层的Softmax分类器... 针对柑橘黄龙病检测模型的准确度较低、可靠性较差等问题,提出了一种压缩自编码融合极限学习机(Contractive auto-encoder combined extreme learning machine,CAE-ELM)的柑橘黄龙病鉴别方法。此方法通过ELM代替CAE顶层的Softmax分类器和反向微调阶段,达到减少算法运行时间同时提高模型的稳定性及鉴别能力的目的。其中,CAE实现了样本深层特征提取,ELM可实现分类鉴别。为了评估CAE-ELM模型性能,以不同比例的柑橘叶片近红外光谱数据作为训练集进行实验,采用波形叠加极限学习机(Summation wavelet extreme learning machine, SWELM)、ELM、支持向量机(Support vector machine, SVM)、堆叠去噪自编码(Stacked denoising auto-encoder, SDAE)、反向传播模型(Back propagation, BP)、CAE作为对比方法。在柑橘黄龙病的鉴别实验中,无论训练集样本大小,CAE-ELM均能保持最高的分类准确度,尤其当训练集与测试集为1080/165时分类准确度达100.00。同时,CAE-ELM模型比SDAE、CAE和BP模型具有更快的训练速度,但慢于SVM、ELM和SWELM模型。结果表明,CAE-ELM模型可以准确鉴别柑橘黄龙病,且模型具有良好的鲁棒性和可扩展性。 展开更多
关键词 压缩自编码 极限学习机 近红外光谱 柑橘黄龙病
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柑橘响应黄龙病侵染的韧皮部蛋白2基因CsPP2B15的克隆与表达分析
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作者 文庆利 谢竹 +3 位作者 吴柳 何永睿 陈善春 邹修平 《园艺学报》 CSCD 北大核心 2018年第12期2347-2357,共11页
黄龙病病原菌诱导柑橘筛孔胼胝体过度积累是其致病的一个重要因素。柑橘韧皮部蛋白(Phloem Protein,PP)在筛孔胼胝体积累中起着重要作用。为研究柑橘韧皮部蛋白响应黄龙病亚洲种(Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas)侵染的功能,克... 黄龙病病原菌诱导柑橘筛孔胼胝体过度积累是其致病的一个重要因素。柑橘韧皮部蛋白(Phloem Protein,PP)在筛孔胼胝体积累中起着重要作用。为研究柑橘韧皮部蛋白响应黄龙病亚洲种(Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas)侵染的功能,克隆获得了一个响应黄龙病侵染差异表达的PP基因CsPP2B15的编码区和长1.5kb的启动子序列,并以高感品种锦橙和耐病品种酸柚老叶和嫩叶为材料,进行基因表达分析。结果发现,CsPP2B15在高感品种锦橙嫩叶中受CLas诱导显著上调表达,而在耐病品种酸柚嫩叶中受CLas诱导显著下调表达,且在叶肉中的表达量显著高于叶脉。嫩叶和嫩梢被认为是柑橘响应黄龙病侵染的早期原初侵染部位。因此,CsPP2B15可能在CLas侵染柑橘早期中起重要作用。CsPP2B15启动子的顺式作用元件预测分析发现,CsPP2B15启动子含有许多与逆境和激素有关的顺式作用元件。进一步构建了CsPP2B15启动子控制GUS报告基因的植物表达载体,转化枳[Poncirus trifoliata(L.)Raf.]上胚轴。GUS组织化学染色和GUS酶活性测定均表明,CsPP2B15启动子具有较强的韧皮部组织特异性。 展开更多
关键词 柑橘 黄龙病 CsPP2B15 韧皮部特异性启动子 基因表达
柑橘黄龙病的防治进展 预览
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作者 林积秀 《东南园艺》 2018年第5期45-52,共8页
柑橘黄龙病是一种对柑橘极具毁灭性的柑橘病害,给世界柑橘产业带来的重大的损失。目前尚未有有效的方法可以治疗柑橘黄龙病,本文对当前国内外柑橘黄龙病的防治进展进行总结,主要介绍了:使用无病的柑橘种苗繁殖、防治其传播媒介——柑橘... 柑橘黄龙病是一种对柑橘极具毁灭性的柑橘病害,给世界柑橘产业带来的重大的损失。目前尚未有有效的方法可以治疗柑橘黄龙病,本文对当前国内外柑橘黄龙病的防治进展进行总结,主要介绍了:使用无病的柑橘种苗繁殖、防治其传播媒介——柑橘木虱、挖除病树、黄龙病抗/耐性育种、化学治疗以及黄龙病热治疗等几种防治策略。 展开更多
关键词 柑橘黄龙病 产业 防治
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黄龙病菌在柑橘枝条上的分布和多样性分析 被引量:1
13
作者 陈燕玲 唐瑞 +2 位作者 刘洋 邓晓玲 许美容 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期728-737,共10页
柑橘黄龙病是由“CandidatusLiberibacterasiaticus”(CLas)引起的毁灭性病害,在染病植株的叶片和果实上表现出不同症状。但目前还未见在同一植株或枝条上表现不同症状的叶片或果实中的CLas是否存在多样性的报道。本研究分析来自美国佛... 柑橘黄龙病是由“CandidatusLiberibacterasiaticus”(CLas)引起的毁灭性病害,在染病植株的叶片和果实上表现出不同症状。但目前还未见在同一植株或枝条上表现不同症状的叶片或果实中的CLas是否存在多样性的报道。本研究分析来自美国佛罗里达与中国广东两地染病柑橘样品,发现佛罗里达的CLas遗传多样性较低。以3对位于CLas短串联重复位点两端的序列为引物,对广东柑橘黄龙病病株的样品进行PCR扩增和PAGE检测,结果发现:同一植株上的CLas多样性高于同一枝条;同一病枝上显不同症状的叶片和果实中的CLas浓度分布不均匀,但成熟病果中CLas的浓度最高。以同一病枝条为一个组,PCR扩增和PAGE检测53个枝条的样品,发现不同组间CLas多样性不一:3对引物扩增条件下分别有4组(7.55%)、7组(13.21%)和11组(20.75%)样品存在组间多样性,推测同一枝条中含有不同的CLas菌株。以上结果说明了CLas在柑橘枝条上的分布规律,为监测我国CLas的多样性提供了科学依据。 展开更多
关键词 “CandidatusLiberibacterasiaticus” 柑橘黄龙病 多样性 分布
最大信息系数的柑橘黄龙病差异表达基因识别 预览
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作者 邱文凤 刘汉明 《赣南师范大学学报》 2018年第3期72-77,共6页
柑橘黄龙病是柑橘生产中的严重灾害,被称为柑橘“癌症”,对全球柑橘产业造成了巨大的破坏.通过基因的差异表达信息,可以精确地洞察生物学过程和功能紊乱,并发现相关的致病基因,明确黄龙病菌对柑橘基因表达的关键影响.通过使用新型的非... 柑橘黄龙病是柑橘生产中的严重灾害,被称为柑橘“癌症”,对全球柑橘产业造成了巨大的破坏.通过基因的差异表达信息,可以精确地洞察生物学过程和功能紊乱,并发现相关的致病基因,明确黄龙病菌对柑橘基因表达的关键影响.通过使用新型的非参数统计方法最大信息系数与常用的Rank Products和Wilcoxon符号秩检验两种方法识别柑橘植物差异表达基因,并对它们的识别结果进行比较,以期讨论最大信息系数在柑橘黄龙病差异表达基因识别中的可行性.实验表明,最大信息系数用于柑橘黄龙病差异表达基因的识别是可行的. 展开更多
关键词 柑橘黄龙病 最大信息系数 RANK PRODUCTS Wilcoxon符号秩检验 差异表达基因识别
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对柑橘黄龙病防控对策的再思考 预览 被引量:2
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作者 周常勇 《植物保护》 CSCD 北大核心 2018年第5期30-33,共4页
柑橘黄龙病系柑橘产业的头号杀手,该文分析其流行态势和防控形势,概述其研发主要进展,并分析思考了当前防控对策、面临的困窘和改进建议。
关键词 柑橘黄龙病 防控形势 对策思考
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柑桔黄龙病菌亚洲种菌毛形成蛋白基因序列分析、原核表达及抗血清制备 预览
16
作者 余乃通 李宾宾 +2 位作者 黎维丽 杨毅 刘志昕 《广东农业科学》 CAS 2018年第11期74-80,共7页
柑桔黄龙病菌菌毛形成蛋白(pilus formation protein, 408)是一种丰度较高的分泌蛋白。以感染柑桔黄龙病(HLB) 的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA,利用408 基因的特异引物进行PCR 扩增,获得该基因的目的片段。序列分析结果表明海南... 柑桔黄龙病菌菌毛形成蛋白(pilus formation protein, 408)是一种丰度较高的分泌蛋白。以感染柑桔黄龙病(HLB) 的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA,利用408 基因的特异引物进行PCR 扩增,获得该基因的目的片段。序列分析结果表明海南琼海黄龙病菌408 基因与柑桔黄龙病菌亚洲种psy62 株系(GenBank 登录号:CP001677.5)408 基因序列一致。功能预测结果表明其含有一个与菌毛形成相关的N端结构域,以及C 端含有两个高度保守的基序(Motif 1 和Motif 2)。通过EcoR Ⅴ和Xho Ⅰ双酶切构建重组载体pET32a-408 并将其转化BL21(DE3)大肠杆菌。重组菌经终浓度为1 mmoL/L IPTG 诱导,目的蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白经Ni2+-NTA 层析柱纯化,并以此为抗原,腹腔免疫小白鼠,获得效价在1∶500~1∶10000 的多克隆抗血清;Western blot 进一步分析表明,408 蛋白多克隆抗血清特异性强。研究结果为柑桔黄龙病菌408 蛋白功能研究和柑桔黄龙病菌的蛋白检测产品开发提供重要科学依据。 展开更多
关键词 柑桔黄龙病 柑桔黄龙病菌 菌毛形成蛋白 分泌蛋白 抗血清制备
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不同寄主植物对柑橘木虱发育和繁殖的影响
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作者 任素丽 欧达 +3 位作者 张利荷 桑文 吉前华 邱宝利 《应用昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期602-607,共6页
【目的】研究柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama在柚、酸橘、黄皮、九里香、砂糖橘5种代表性芸香科寄主植物上的发育、存活和繁殖情况,为柑橘木虱及黄龙病的可持续防控提供参考。【方法】利用种群生命表的方法,分析了柑橘木虱在5种不... 【目的】研究柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama在柚、酸橘、黄皮、九里香、砂糖橘5种代表性芸香科寄主植物上的发育、存活和繁殖情况,为柑橘木虱及黄龙病的可持续防控提供参考。【方法】利用种群生命表的方法,分析了柑橘木虱在5种不同寄主植物上的发育历期、存活率、成虫寿命、性比及产卵量等数据。【结果】柑橘木虱卵、1龄若虫以及整个若虫的发育历期受寄主植物的影响较为明显,在26℃条件下在柚子植物上柑橘木虱若虫的存活率最高(58.10%),在黄皮上最低(46.04%),两者差异显著。寄主植物影响柑橘木虱成虫寿命,在柚子上柑橘木虱成虫的寿命显著长于黄皮上的寿命。黄皮上的柑橘木虱的单雌产卵量(298粒/雌)显著低于其他4种寄主植物。柑橘木虱在九里香上的内禀增长率(rm)最高(0.133 7)、酸橘上最低(0.129 8);而净增值率(R0)在砂糖橘上最高(187.74)、黄皮上最低(145.27)。【结论】在5种寄主植物中,除黄龙病隐症寄主九里香之外,显症寄主中砂糖橘是柑橘木虱的最适寄主。 展开更多
关键词 柑橘木虱 黄龙病 寄主植物 寄主适合度
基于可见与近红外光谱联用的柑桔黄龙病快速无损检测研究 预览 被引量:6
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作者 刘燕德 肖怀春 +5 位作者 孙旭东 韩如冰 叶灵玉 黄亮 肖禹松 廖小红 《光谱学与光谱分析》 CSCD 北大核心 2018年第2期528-534,共7页
黄龙病是柑桔果树的毁灭性病害,对柑桔产业危害巨大。基于模型平均理论,探讨联用可见与近红外光谱技术,提高柑桔黄龙病快速无损检测精度的可行性。采集记录柑桔叶片的可见与近红外光谱,经实时荧光定量PCR鉴别黄龙病叶片为轻度、中度和... 黄龙病是柑桔果树的毁灭性病害,对柑桔产业危害巨大。基于模型平均理论,探讨联用可见与近红外光谱技术,提高柑桔黄龙病快速无损检测精度的可行性。采集记录柑桔叶片的可见与近红外光谱,经实时荧光定量PCR鉴别黄龙病叶片为轻度、中度和重度三类,缺素和正常样品也经PCR鉴定,共五类叶片。基于光谱直接拼接、光谱归一化拼接和模型平均三种不同策略,结合偏最小二乘判别分析(PLS-DA)和多元线性回归(MLR)方法,分别建立了柑桔黄龙病可见与近红外光谱联用无损检测模型。经比较发现,光谱联用模型的检测精度均高于可见或近红外单一检测模型,且经导数处理后的光谱直接拼接PLS-DA模型检测精度最高,模型预测相关系数为0.97,预测均方根误差为0.67,模型总误判率为3%,其原因是导数消除了光谱的基线漂移。光谱归一化拼接的PLS-DA模型检测精度次之,模型总误判率为7%。可见与近红外模型平均的检测精度最低,模型总误判率为7.2%。实验结果表明,联用可见与近红外光谱,结合光谱拼接方法,提高了柑桔黄龙病无损检测模型的检测精度,研究可为其他领域的光谱联用提供参考依据。 展开更多
关键词 柑桔黄龙病 光谱联用 归一化 偏最小二乘判别分析 多元线性回归
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实时荧光定量PCR检测柑橘黄龙病田间试验药剂防治效果 预览
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作者 唐利华 郭堂勋 +2 位作者 李其利 黄穗萍 莫贱友 《安徽农业科学》 CAS 2018年第24期128-129,159共3页
[目的]评价柑橘黄龙病田间试验药剂橘叶青的防控效果。[方法]采用实时荧光定量PCR检测喷施橘叶青后的柑橘叶片和果皮中黄龙病病原菌的含量。[结果]喷施橘叶青后的叶片和果皮组织含菌量明显降低,叶片组织含菌量降低了近35倍,果皮组织含... [目的]评价柑橘黄龙病田间试验药剂橘叶青的防控效果。[方法]采用实时荧光定量PCR检测喷施橘叶青后的柑橘叶片和果皮中黄龙病病原菌的含量。[结果]喷施橘叶青后的叶片和果皮组织含菌量明显降低,叶片组织含菌量降低了近35倍,果皮组织含菌量降低了约7倍。[结论]防治药剂橘叶青对柑橘黄龙病具有较好的防控效果,可以有效控制病原菌在柑橘组织中发展。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR 柑橘黄龙病 田间防效
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光谱检测技术在柑橘黄龙病诊断中的研究进展 预览
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作者 陈波 姚林建 《赣南师范大学学报》 2018年第6期69-72,共4页
柑橘黄龙病严重危害柑橘产业的发展,且目前没有特效药可治愈.光谱检测技术的开发,其快速、安全、无损的优点广受研究者的关注.本文就目前国内外关于近红外光谱技术与高光谱技术在柑橘黄龙病诊断方面的最新应用进行综述,着重介绍光谱检... 柑橘黄龙病严重危害柑橘产业的发展,且目前没有特效药可治愈.光谱检测技术的开发,其快速、安全、无损的优点广受研究者的关注.本文就目前国内外关于近红外光谱技术与高光谱技术在柑橘黄龙病诊断方面的最新应用进行综述,着重介绍光谱检测技术的物理机制以及在柑橘黄龙病检测中的研究进展,提出光谱检测技术是实现柑橘黄龙病准确、快速且无损检测的发展趋势. 展开更多
关键词 柑橘黄龙病 快速检测技术 近红外光谱 高光谱
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