期刊文献+
共找到31篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
中华鳖dazl基因克隆及在生殖细胞中的表达 预览 被引量:1
1
作者 唐舟凯 张飘逸 +4 位作者 储张杰 朱新平 李伟 吴栩灵 徐红艳 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期400-409,共10页
为探索龟鳖类生殖细胞的发育分化机制,实验通过特异性引物克隆了中华鳖dazl基因的cDNA片段,长1007bp,其中包括5′端非编码区197bp,3′端非编码区33bp,开放阅读框777bp,编码258个氨基酸。氨基酸序列比对显示其与西部锦龟Dazl同源性最高,... 为探索龟鳖类生殖细胞的发育分化机制,实验通过特异性引物克隆了中华鳖dazl基因的cDNA片段,长1007bp,其中包括5′端非编码区197bp,3′端非编码区33bp,开放阅读框777bp,编码258个氨基酸。氨基酸序列比对显示其与西部锦龟Dazl同源性最高,达96%;与小鼠Dazl同源性达75%。荧光定量PCR分析结果显示,中华鳖dazl mRNA主要在精巢和卵巢中表达,在体细胞组织中仅检测到微量表达。冰冻切片原位杂交结果显示,中华鳖dazl mRNA在生殖细胞中特异表达,且在不同时期的生殖细胞中呈动态表达模式。在精巢中,中华鳖dazl mRNA在初级和次级精母细胞中表达最强,在精原干细胞中表达水平次之,在精子细胞中未检测到信号;在卵巢中,中华鳖dazlmRNA信号在初级卵母细胞胞质中均匀分布且在最早期的初级卵母细胞中信号最强,随着卵母细胞的增大,信号逐渐聚集并逐渐减弱。研究表明,dazl基因可能对中华鳖两性生殖细胞的发生具有重要的调控作用。 展开更多
关键词 中华鳖 DAZL 生殖细胞 精子发生 卵子发生
在线阅读 下载PDF
青鱼Dazl基因的原核表达及其多克隆抗体制备 预览
2
作者 王艺舟 潘启华 +6 位作者 王乾 夏必琳 罗君志 方健 邓羽 廖明聪 陈天圣 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第3期27-31,共5页
实验进行了青鱼( Mylopharyngodon piceus ) Dazl 基因的原核表达,兔抗青鱼源Dazl多克隆抗体的制备及抗体的特异性验证。首先将青鱼 Dazl 基因的编码区利用重组表达引物从pCS2- MpDazl 质粒中扩增出来,经酶切后连接到pET-28a载体中,构建... 实验进行了青鱼( Mylopharyngodon piceus ) Dazl 基因的原核表达,兔抗青鱼源Dazl多克隆抗体的制备及抗体的特异性验证。首先将青鱼 Dazl 基因的编码区利用重组表达引物从pCS2- MpDazl 质粒中扩增出来,经酶切后连接到pET-28a载体中,构建pET-28a- MpDazl 重组表达载体。然后将pET-28a- MpDazl 重组质粒转化至大肠杆菌( Escherichia coli )BL21中,利用异丙基-β-d-硫代半乳糖苷( IPTG)诱导表达,获得分子量为27 kD的Dazl重组蛋白。将纯化的Dazl重组蛋白作为抗原免疫家兔制备多克隆抗体,抗体的效价和特异性通过ELISA法和 Western blot检测。结果:成功构建重组表达载体pET-28a- MpDazl;以0.5 mmol/L IPTG在37 ℃条件下诱导4 h可获得高效表达的Dazl重组蛋白;制备的兔抗青鱼Dazl多克隆抗体能够特异性识别原核表达Dazl蛋白、青鱼卵巢的内源Dazl蛋白以及细胞中过表达的Dazl蛋白,并证实了青鱼Dazl蛋白在性腺中表达的特异性。 展开更多
关键词 青鱼( Mylopharyngodon piceus ) DAZL 原核表达 多克隆抗体
在线阅读 下载PDF
Minifish dazl和dnd基因的克隆及表达分析
3
作者 陈克让 丁天宜 李名友 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2018年第7期2795-2803,共9页
Minifish(Paedocypris progenetica)是目前世界上发现的个体最小的鱼,是探索生物进化及多样性的优良脊椎动物。当前,受人类活动影响,其生存空间日渐压缩,种群数量快速减少,研究该物种的生殖发育对维持及扩大其种群数量具有重要意义。... Minifish(Paedocypris progenetica)是目前世界上发现的个体最小的鱼,是探索生物进化及多样性的优良脊椎动物。当前,受人类活动影响,其生存空间日渐压缩,种群数量快速减少,研究该物种的生殖发育对维持及扩大其种群数量具有重要意义。本研究首次克隆了minifish dazl(Pp-dazl)和dnd(Pp-dnd)基因,Pp-dazl c DNA长为678 bp核酸,编码218个氨基酸;Pp-dnd c DNA长为1 071 bp核酸,编码352个氨基酸。氨基酸比对分析显示,Pp-Dazl和Pp-Dnd蛋白含有保守的RNA结合结构域。系统进化树分析表明,Pp-dazl和Pp-dnd与鲤科鱼类的同源蛋白亲缘关系最近。RT-PCR表明Pp-dazl和Pp-dnd RNA具有组织表达特异性,仅在成体组织中的性腺如卵巢中表达。本研究预示了Pp-dazl和Pp-dnd RNA在minifish性腺及生殖发育中具有重要作用,为minifish的生殖发育研究提供了基础信息。 展开更多
关键词 DAZL DND Minifish Paedocypris progenetica
小鼠DAZL基因启动子核心区域分析及甲基化对其启动活性的影响
4
作者 王颖洁 张文慧 +8 位作者 朱睿 左其生 李东 王飞 路镇宇 纪艳芹 王曼 张亚妮 李碧春 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期420-426,共7页
旨在确定小鼠DAZL启动子基本活性区,并分析启动子区域甲基化对其启动子活性的影响,探究小鼠DAZL的表达调控机制。采用PCR法扩增不同长度的小鼠DAZL启动子,插入到p EGFP-N1和p GL3-Basic载体,构建重组载体。将重组载体转染GC-1细胞系,并... 旨在确定小鼠DAZL启动子基本活性区,并分析启动子区域甲基化对其启动子活性的影响,探究小鼠DAZL的表达调控机制。采用PCR法扩增不同长度的小鼠DAZL启动子,插入到p EGFP-N1和p GL3-Basic载体,构建重组载体。将重组载体转染GC-1细胞系,并通过添加适量DNA甲基化转移酶抑制剂(5-azacytidine,5-aza-C)逆转各试验组启动子片段的甲基化水平,然后利用双荧光素酶报告基因检测系统检测DAZL活性变化。双荧光素酶活性检测结果表明,小鼠Dazl启动子基本活性区域为5’侧翼区-370~-36 bp,在-370~-166 bp区域存在不可或缺的重要调控元件;经5-aza-C处理后,各缺失片段载体转染的GC-1细胞DAZL的启动子活性与对照组相比均有不同程度的提升,但差异不显著。本试验确定了小鼠DAZL启动子基本活性区域,证明降低小鼠睾丸DAZL启动子区域甲基化水平,有助于DAZL在生殖细胞中特异性表达,为进一步探究DAZL生物学功能和调控机制提供参考。 展开更多
关键词 DAZL 启动子甲基化 5-aza-C 基因活性
牙鲆dazl基因的克隆与表达分析 预览 被引量:1
5
作者 孙近近 张俊玲 +1 位作者 孙文慧 施志仪 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2016年第4期391-399,共9页
dazl(deletedinazoospermia—like)基因是多种物种精子发生的重要调控因子,为探讨该基因在牙鲆(Paralichthysolivaceus)性腺发育分化中的作用,本研究采用同源克隆和RACE技术克隆了牙鲆dazl基因的eDNA序列,利用生物信息学方法分... dazl(deletedinazoospermia—like)基因是多种物种精子发生的重要调控因子,为探讨该基因在牙鲆(Paralichthysolivaceus)性腺发育分化中的作用,本研究采用同源克隆和RACE技术克隆了牙鲆dazl基因的eDNA序列,利用生物信息学方法分析了其序列结构,并利用实时荧光定量PCR技术检测了该基因在牙鲆成体组织和早期发育阶段的表达情况。结果发现:牙鲆dazlcDNA序列全长2031bp,包括105bp的5’端非翻译区,1275bp的3’端非翻译区和编码217个氨基酸残基的651bp开放阅读框;氨基酸同源序列比对显示该序列存在一个高度保守的RRM(RNArecognitionmotif)结构域,且该结构域在鱼类中具有100%的序列一致性;荧光定量PCR结果显示dazl基因主要在牙鲆性腺中表达,且在精巢中的表达高于卵巢;在牙鲆早期发育阶段,dazl基因在未受精卵、受精卵及囊胚期均有较高的转录本,而在原肠胚期表达开始降低,至孵化后3d一直保持较低的水平,这些丰富表达的母源性dazlmRNA可能参与了胚胎发育中原始生殖细胞的形成。本研究为进一步阐明dazl基因在牙鲆生殖发育中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 牙鲆 DAZL CDNA克隆 基因表达
在线阅读 下载PDF
DAZL基因多态性位点(A260G、A386G)与无精子症和少精子症的关联性Meta分析 被引量:3
6
作者 陈小艳 陈平 +1 位作者 徐畅 张新华 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期345-356,共12页
目的:探讨DAZL基因多态性位点(A260G,A386G)与无精子症和少精子症导致男性不育的关联性。方法:计算机检索PubMed、Sciencedirect、Wileyonlinelibrary、中国知网、维普中文科技期刊数据库、万方数据库,查找并筛选出研究DAZL基因... 目的:探讨DAZL基因多态性位点(A260G,A386G)与无精子症和少精子症导致男性不育的关联性。方法:计算机检索PubMed、Sciencedirect、Wileyonlinelibrary、中国知网、维普中文科技期刊数据库、万方数据库,查找并筛选出研究DAZL基因多态性位点A260G和A386G与男性不育关系的病例对照研究,同时查阅检索结果中所附相似文献及参考文献,检索时限均为各数据库建库至2013年11月30日。由2名评价员单独进行文献筛选及资料提取,采用StataSEl2.0软件进行Meta分析以及其他相关统计学分析。结果:共纳入文献13篇(A260G位点多态性10篇,A386G位点多态性11篇);男性不育患者共2715例,其中少精子症或无精子症患者共2500例,健康对照1835例。Meta分析结果显示,DAZLA260G位点多态性在等位基因模型、显性基因模型、隐性基因模型、共显性基因模型、超显性基因模型差异无统计学意义(P〉0.05)。而DAZLA386G位点多态性的分析表明,亚洲人中DAZLA386G位点多态性与少精子症或无精子症在等位基因模型、显性基因模型、共显性基因模型(AA/AG)和超显性基因模型下整体效应差异有统计学意义:等位基因模型优势比(OR)=0.15,95%可信区间(CI)0.07~0.34,P〈0.05;显性基因模型OR=0.16,95%C10.07~0.35,P〈0.05;共显性基因模型(AA/AG)OR=0.15,95%C10.06~0.33,P〈0.05;超显性基因模型OR=0.15,95%C10.06—0.33,P〈0.05。地区亚组分析结果显示,中国A386G位点多态性与少精子症或无精子症患者在等位基因模型、显性基因模型和超显性基因模型下总效应差异有统计学意义:等位基因模型OR=0.11,95%C10.04~0.28,P〈0.05;显性基因模型OR=O.11,95%CIO.04~0.28,P〈0.05;共显性基因模型(AA/AG)OR=0.09,95%C10.03~0.26,P〈0.05;超显性基因模型OR= 展开更多
关键词 DAZL A260G A386G 基因多态性 男性不育症 Meta分析
小鼠Dazl基因真核表达载体的构建及表达检测 预览
7
作者 孙星虹 孙晓凤 +1 位作者 孙雷雷 李兰 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第B12期35-39,共5页
为研究小鼠Dazl基因的功能及探究Dazl基因过表达在干细胞向生殖细胞分化过程中的作用,采用RTPCR方法,从13.5 dpc雌性胎鼠卵巢中克隆出Dazl基因的全部编码区,测序正确后利用限制性内切酶将其连接到真核表达载体pc DNA3.1上。线性化后对... 为研究小鼠Dazl基因的功能及探究Dazl基因过表达在干细胞向生殖细胞分化过程中的作用,采用RTPCR方法,从13.5 dpc雌性胎鼠卵巢中克隆出Dazl基因的全部编码区,测序正确后利用限制性内切酶将其连接到真核表达载体pc DNA3.1上。线性化后对小鼠成纤维细胞进行转染,qRT-PCR及Western Blot技术显示外源基因Dazl已经成功转染并表达。为研究Dazl基因的功能及干细胞向生殖细胞的诱导分化奠定了基础。 展开更多
关键词 Dazl基因 真核表达载体 转染
在线阅读 免费下载
黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织Dazl基因实时荧光定量PCR检测方法的建立 预览 被引量:1
8
作者 付永 魏雅萍 +4 位作者 孟茹 吴克选 陈生梅 张立成 王谢忠 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第1期12-18,共7页
为了检测黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织Dazl基因mRNA表达水平。利用GenBank中牛Dazl mRNA序列,在其保守区设计并合成特异性引物,以牛肌动蛋白基因(β-actin)为内参,建立实时荧光定量PCR方法。结果表明,在100~10-6 7个拷贝量重组质粒稀释... 为了检测黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织Dazl基因mRNA表达水平。利用GenBank中牛Dazl mRNA序列,在其保守区设计并合成特异性引物,以牛肌动蛋白基因(β-actin)为内参,建立实时荧光定量PCR方法。结果表明,在100~10-6 7个拷贝量重组质粒稀释范围内,Dazl和β-actin基因的Ct值与重组质粒的含量均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999。熔解曲线产物为特异的单峰,具有较高的灵敏度和特异性。Dazl基因重组质粒最小检出含量达到10拷贝/μL,批内变异系数保持在1.351%以内,批间变异系数保持在3.217%以内,重复性较好。Dazl基因的mRNA表达量在犏牛睾丸组织中最低,这一分布可能与犏牛精子发生过程中减数分裂调控作用相关。 展开更多
关键词 犏牛 雄性不育 DAZL 荧光实时定量PCR
在线阅读 下载PDF
DAZL腺病毒载体的构建及其对人脐带间充质干细胞向男性生殖细胞诱导分化的影响 被引量:1
9
作者 吴扬 赖秀蓝 +8 位作者 唐秋灵 陈辉 罗梅娟 冯学永 蔡志伟 刘必刚 贺谷雨 秦山 马廉 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期1261-1266,共6页
目的构建高效表达的DAZL重组腺病毒载体系统,观察DAZL基因对人脐带间充质干细胞(HUMSCs)向男性生殖细胞分化的影响。方法1.用Gateway腺病毒系统制备含DAZL及EGFP基因的重组腺病毒pAd-DAZL-EGFP。2.用组织块贴壁法获得HUMSCs,用Ad-... 目的构建高效表达的DAZL重组腺病毒载体系统,观察DAZL基因对人脐带间充质干细胞(HUMSCs)向男性生殖细胞分化的影响。方法1.用Gateway腺病毒系统制备含DAZL及EGFP基因的重组腺病毒pAd-DAZL-EGFP。2.用组织块贴壁法获得HUMSCs,用Ad-EGFP-DAZL感染第3代生长良好的HUMSCs,观察感染效率及细胞生长情况,确定最佳感染复数(MOI)和感染时间。3.通过形态学、反转录(RT)-PCR和免疫荧光鉴定DAZL基因异位表达诱导HUMSCs向男性生殖细胞方向分化的结果。结果成功构建表达DAZL的腺病毒,病毒滴度为1.0×10^9pfu/mL。最佳的感染条件为:MOI=100,感染时间:8h,该条件下的感染率为(43.00±1.52)%。HUMSCs在感染DAZL重组腺病毒后形态发生了明显的变化,第4—6天由成纤维细胞变成圆形,少数变圆的细胞在2~3周后变成蝌蚪状,阴性对照组及空白对照组细胞则未发生类似变化。RT—PCR和免疫荧光均证实实验组表达精原细胞的标志STELLA(DDPA3)、VASA(DDX4)、c—kit、DAZL和OCT4(POU5F1),阴性对照组及空白对照组则只表达内参基因。结论DAZL重组腺病毒感染HUMSCs后能诱导HUMSCs向男性生殖细胞方向分化,证实DAZL基因是精子形成过程中的关键基因。 展开更多
关键词 DAZL 人脐带间充质干细胞 腺病毒载体 生殖细胞 男性不育
鸡Dazl基因的克隆及其亚细胞定位研究 被引量:2
10
作者 郑蒙蒙 李伟 +3 位作者 施青青 王丹 黄晓梅 李碧春 《中国家禽》 北大核心 2013年第6期8-12,共5页
为克隆鸡Dazl(Deleted in azoospermia—like,Dazl)基因CDS序列,通过构建eGFP标记的DAZL真核表达载体,实现该基因产物的亚细胞定位以探究其生物信息学功能。提取1日龄鸡睾丸总RNA,通过巢式PCR方法扩增出Dazl基因的CDS,构建真核... 为克隆鸡Dazl(Deleted in azoospermia—like,Dazl)基因CDS序列,通过构建eGFP标记的DAZL真核表达载体,实现该基因产物的亚细胞定位以探究其生物信息学功能。提取1日龄鸡睾丸总RNA,通过巢式PCR方法扩增出Dazl基因的CDS,构建真核表达载体pEGFP—C1-DAZL。采用Lipofectamin”LTX介导重组表达载体pEGFP—C1-DAZL转染CEF细胞,48h后于荧光倒置显微镜下观察其表达定位,同时利用RT—PCR和Western-blot进-步鉴定eGFP—Dazl和蛋白水平的表达情况。结果表明:克隆出Dazl基因的完整CDS,长度870bp,共编码289个氨基酸,与公布的鸡Dazl基因(GenBank登陆号:NM-204218)CDS区同源性达99%,编码氨基酸完全-致。酶切鉴定和序列分析均表明真核表达载体pEGFP—C1-DAZL构建成功。转染48h后,RT—PCR和Western—blot分别检测到949bp特异条带和59.7ku的融合蛋白。荧光显微镜观察显示,融合蛋白(eGFP—Dazl)主要分布于细胞核。 展开更多
关键词 DAZL 真核表达载体 绿色荧光蛋白 亚细胞定位
Identification of the RNAs for Transcription Factor Mitf as a Component of the Balbiani Body
11
作者 Mingyou Li Yongming Yuan Yunhan Hong 《遗传学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2013年第2期75-81,共7页
<正>Balbiani body(BB) is a large distinctive organelle aggregate uniquely present in developing oocytes of diverse animal species.BB is thought as a stage-specific structure that resembles germ plasm,the cytopla... <正>Balbiani body(BB) is a large distinctive organelle aggregate uniquely present in developing oocytes of diverse animal species.BB is thought as a stage-specific structure that resembles germ plasm,the cytoplasmic organelle of germ cells.The role and function of BB have remained speculative because of a highly dynamic structure and a lack of genetic and molecular data.BB has been found to contain proteins and RNAs,none of them—except the zebrafish foxHl RNA,is or encodes a transcription factor.Here we report in the fish medaka(Oryzias latipes) that RNAs encoding microphthalmia-associated transcription factor(Mitf) are prominent components of the BB. By fluorescence in situ hybridization on ovarian section,we revealed that the transcripts of both mitfl and mitfl genes concentrated in the BB,in which they co-localized with the dazl RNA,a definitive BB marker highly conserved in vertebrates.Therefore,the mitf product may play dual roles in germ gene transcription and BB formation and/or function in this organism.Our data provide the second evidence that the RNA of a transcription factor can be a prominent component of the BB in a vertebrate. 展开更多
关键词 转录因子 MITF RNA 荧光原位杂交技术 鉴定 组件 生殖细胞 脊椎动物
Dazl基因mRNA表达水平与犏牛雄性不育关系的研究 预览 被引量:2
12
作者 付永 《青海畜牧兽医杂志》 2012年第6期9-11,共3页
本文旨在探讨Dazl基因与犏牛雄性不育的关系。采用实时荧光定量PCR技术检测黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织中Dazl基因mRNA表达并进行分析。结果表明:三种牛中Dazl基因在睾丸组织中特异表达,且犏牛睾丸组织中表达量最低,其中黄牛与牦牛、... 本文旨在探讨Dazl基因与犏牛雄性不育的关系。采用实时荧光定量PCR技术检测黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织中Dazl基因mRNA表达并进行分析。结果表明:三种牛中Dazl基因在睾丸组织中特异表达,且犏牛睾丸组织中表达量最低,其中黄牛与牦牛、黄牛与犏牛差异显著(P〈0.05),犏牛与牦牛差异不显著(P〉0.05)。结果提示,Dazl基因在三种牛睾丸组织特异表达,说明Dazl基因在细胞周期运行中发挥作用,Dazl基因在犏牛睾丸组织中低表达与犏牛雄性不育相关。 展开更多
关键词 犏牛 雄性不育 DAZL 荧光实时定量PCR
在线阅读 下载PDF
BPA不影响卵母细胞减数分裂相关基因Dazl的甲基化 预览 被引量:1
13
作者 章寒琼 张西锋 +2 位作者 潘博 沈伟 李兰 《青岛农业大学学报:自然科学版》 2011年第2期 83-87,共5页
为了探讨环境雌激素BPA对小鼠卵母细胞减数分裂相关基因Dazl甲基化的影响,本研究通过给孕鼠饮用含有BPA的水方式使胎鼠在发育过程中接触BPA,利用重亚硫酸盐测序法,分析了胎鼠生殖嵴卵母细胞不同发育时期Dazl甲基化水平的变化。结果... 为了探讨环境雌激素BPA对小鼠卵母细胞减数分裂相关基因Dazl甲基化的影响,本研究通过给孕鼠饮用含有BPA的水方式使胎鼠在发育过程中接触BPA,利用重亚硫酸盐测序法,分析了胎鼠生殖嵴卵母细胞不同发育时期Dazl甲基化水平的变化。结果显示:Dazl在减数分裂期间处于低甲基化水平,无论对照组或处理组均低于10%,说明Dazl的低甲基化对维持减数分裂的正常进行有重要作用;对照组与处理组的甲基化水平相当,差异不显著,说明本研究的BPA浓度不影响卵母细胞Dazl的甲基化水平。 展开更多
关键词 小鼠 卵母细胞 BPA DAZL DNA甲基化
在线阅读 免费下载
DAZL基因单核苷酸多态性与男性不育相关性研究 预览
14
作者 李效良 刘京昇 +3 位作者 高裕慧 尹秀凯 张廷香 张子安 《泰山医学院学报》 2009年第9期 652-655,共4页
目的探讨常染色体DAZL基因单核苷酸多态性与男性不育的关系。方法采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测71例男性不育患者和200例正常对照者DAZL基因单核苷酸多态位点Rs2303591A〉G的基因型,计算基因型频率和等... 目的探讨常染色体DAZL基因单核苷酸多态性与男性不育的关系。方法采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测71例男性不育患者和200例正常对照者DAZL基因单核苷酸多态位点Rs2303591A〉G的基因型,计算基因型频率和等位基因频率,对比分析两组基因频率和基因型频率分布。结果Rs2303591A〉G位点在中国汉族人群中具有多态性,其基因频率与基因型频率分布在病例组和对照组中均符合Hardy-Weinberg平衡,基因型AA、GA和GG的频率在病例组分别为0.155、0.563和0.282,在对照组中分别为0.285、0.550和0.165,该位点的基因型频率在病例组和对照组间的差异均无统计学意义(P〉0.05),而基因频率差异有统计学意义(P〈0.05),提示该多态位点与中国汉族人群男性不育无显著相关性。结论DAZL基因Rs2303591A〉G与中国汉族人群男性不育易感性没有显著相关性。 展开更多
关键词 男性不育 DAZL 单核苷酸多态 关联分析
在线阅读 免费下载
水貂DAZL基因的DNA池测序分析 预览
15
作者 刘琳玲 丛波 +3 位作者 刘宗岳 王桂武 宋兴超 杨福合 《特产研究》 2019年第2期32-34,共3页
选取短毛黑、银兰、红眼白水貂构建品种DNA池。扩增DAZL基因部分序列,对扩增产物测序。从测序结果分析可以看出,不同品种水貂间的DAZL基因部分序列完全一致;同源性表明,水貂与雪貂同源性很高(94.2%),与猪、犀牛、骆驼、江豚同源性较高(8... 选取短毛黑、银兰、红眼白水貂构建品种DNA池。扩增DAZL基因部分序列,对扩增产物测序。从测序结果分析可以看出,不同品种水貂间的DAZL基因部分序列完全一致;同源性表明,水貂与雪貂同源性很高(94.2%),与猪、犀牛、骆驼、江豚同源性较高(80.8%~81.8%),与牛的同源性较低(77.4%)。系统进化树显示,水貂与雪貂属同一分支。 展开更多
关键词 水貂 DAZL基因 DNA池 同源性
在线阅读 免费下载
Dazl基因在绵羊不同发育期睾丸组织中的表达与细胞定位
16
作者 李讨讨 马友记 +4 位作者 赵兴绪 高建锋 雒瑞瑞 陈灿灿 李东红 《农业生物技术学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期421-428,共8页
类无精症缺失基因(deleted in azoospermia-like gene, Dazl)在雄性动物生殖细胞分化过程中起重要调控作用,但对于不同物种或处于不同发育阶段的同一物种而言,其调控机制存在差异。为了探讨Dazl在绵羊(Ovis aries)不同发育期睾丸... 类无精症缺失基因(deleted in azoospermia-like gene, Dazl)在雄性动物生殖细胞分化过程中起重要调控作用,但对于不同物种或处于不同发育阶段的同一物种而言,其调控机制存在差异。为了探讨Dazl在绵羊(Ovis aries)不同发育期睾丸组织中的表达、定位及调控作用,本实验选取0、2、5、12和24月龄健康的绵羊15只,每组3只,采取睾丸、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和肌肉组织。运用实时荧光定量PCR(quantitative Real time PCR, qRT-PCR)检测了0、2、5、12和24月龄绵羊睾丸组织及12月龄绵羊的不同体组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和肌肉)中Dazl mRNA的表达量,利用Western blot技术对Dazl基因编码蛋白的表达量进行检测,并采用免疫组织化学染色方法检测Dazl蛋白的阳性信号在不同月龄睾丸组织中的分布情况。结果显示,对于不同月龄睾丸组织,从mRNA和蛋白水平均检测到了Dazl基因的表达,并且二者的趋势基本相似。在0、2和5月龄睾丸中Dazl mRNA及蛋白表达量较低,12月龄中表达量较高且极显著高于0、2和5月龄(P<0.01),而在24月龄中Dazl mRNA及蛋白的表达量均出现不同程度的下调现象。12月龄绵羊各组织的qRT-PCR检测结果显示,Dazl mRNA只在睾丸组织中高表达,在心脏中表达量很低,而在其他组织中不表达。免疫组织化学染色结果显示,Dazl蛋白在初情期前(0、2和5月龄)定位于睾丸间质细胞,而在12和24月龄定位于睾丸间质细胞、初级精母细胞、次级精母细胞和精子细胞。研究结果表明,Dazl基因在性成熟前公羊的睾丸间质细胞及成年羊的睾丸间质细胞、精母细胞和精细胞中表达,并且在他们的增殖过程中起调控作用。由此推测,在绵羊睾丸发育过程中,Dazl基因可能通过直接作用(调控精母细胞的成熟分裂)和间接作用(调控睾丸间质细胞的增殖)� 展开更多
关键词 类无精症缺失基因(Dazl) 绵羊 睾丸 表达 定位
含鸡生殖细胞标志基因DAZL的慢病毒表达载体构建
17
作者 张廉 莫国东 廖玉英 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第13期125-127,共3页
为了构建含目的基因的慢病毒表达载体,包装成病毒并检测病毒感染情况,试验采用PCR技术和Multi Site Gateway技术构建含DAZL基因的慢病毒表达载体p Lenti6.4/EF1α/V5/DAZL并制备慢病毒。结果表明:试验成功构建了含目的基因DAZL的慢病... 为了构建含目的基因的慢病毒表达载体,包装成病毒并检测病毒感染情况,试验采用PCR技术和Multi Site Gateway技术构建含DAZL基因的慢病毒表达载体p Lenti6.4/EF1α/V5/DAZL并制备慢病毒。结果表明:试验成功构建了含目的基因DAZL的慢病毒表达载体,并制备出有感染能力的慢病毒。说明试验构建的慢病毒表达载体适用于含目的基因DAZL的慢病毒生产。 展开更多
关键词 生殖细胞 慢病毒表达载体 Multi SITE GATEWAY技术 DAZL基因 慢病毒包装
鸡Dazl基因启动子活性检测及其诱导剂的初步筛选 预览
18
作者 金晶 朱睿 +5 位作者 王颖洁 左其生 王曼 张文慧 张亚妮 李碧春 《家畜生态学报》 北大核心 2016年第7期13-18,共6页
论文旨在确定Dazl基因核心启动子活性调控区,并比较不同诱导剂的诱导效率,筛选出最佳基因诱导剂。用PCR技术扩增不同长度的Dazl基因启动子,插入到pEGFP-N1和/或pGL3-basic载体中,构建重组载体;再将这些重组载体分别转染DF-1细胞系和GC-... 论文旨在确定Dazl基因核心启动子活性调控区,并比较不同诱导剂的诱导效率,筛选出最佳基因诱导剂。用PCR技术扩增不同长度的Dazl基因启动子,插入到pEGFP-N1和/或pGL3-basic载体中,构建重组载体;再将这些重组载体分别转染DF-1细胞系和GC-1细胞系,使用双荧光素酶报告基因检测系统测定其转录活性,确定Dazl基因启动子核心活性区域;添加单因素或多因素诱导因子,比较不同诱导剂以及诱导剂组合对鸡Dazl基因启动子活性的影响大小。如皋黄鸡Dazl基因的-932bp~-186bp区域在DF-1和GC-1两种细胞中,都有不同程度的启动活性,而-186bp~-39bp启动子活性几乎完全丧失;诱导剂筛选结果表明,FSH+E2组和Am80组、E2组能够显著提高Dazl基因启动子的活性,RA组、ATRA组、FSH组和睾酮组都不同程度地提高了启动子的活性,而睾丸提取液和BMP4对启动子活性没有显著影响。通过体外诱导实验筛选出如皋黄鸡Dazl基因最适诱导剂,为鸡ESCs体外向雄性生殖细胞分化的细胞诱导剂进一步筛选奠定了基础。 展开更多
关键词 Dazl基因 核心启动子 基因诱导剂筛选
在线阅读 下载PDF
浙江地区无精子症和少弱精子症患者DAZL基因A260G和A386G单核苷酸多态性分析
19
作者 倪吴花 杨旭 +3 位作者 杨海燕 费前进 潘承双 黄学锋 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期713-716,共4页
目的:探讨浙江地区人群中DAZL基因A260G和A386G单核苷酸多态性(SNP)与无精子症和少弱精子症的关系。方法:收集浙江地区无精子症和少弱精子症患者317例和正常生育男性246例外周血标本,利用SNa Pshot SNP分型技术对样本DAZL基因Q260G... 目的:探讨浙江地区人群中DAZL基因A260G和A386G单核苷酸多态性(SNP)与无精子症和少弱精子症的关系。方法:收集浙江地区无精子症和少弱精子症患者317例和正常生育男性246例外周血标本,利用SNa Pshot SNP分型技术对样本DAZL基因Q260G和A386G多态性位点进行分型。结果:DAZL基因A260G在浙江地区汉族人群中具有多态性,其基因频率与基因型频率分布在病例组和对照组中均符合Hardy-Weinberg平衡。AA、AG和GG的基因型频率在对照组中分别为92.3%、7.3%和0.4%,而病例组中分别为94.3%、5.7%和0%,统计学分析无显著性差异(P=0.430,OR=0.780,95%CI=0.413~1.46)。A386G突变只在正常对照组中出现1例杂合子AG,两组中都没有发现纯合子GG突变,两组之间亦无显著性差异(P=0.259,OR=0.698,59%CI:0.374~1.306)。结论:DAZL基因Q260G和A386G多态性与中国浙江地区无精子症和少弱精子症无相关性,两者都不能作为无精子症和少弱精子症遗传诊断的分子标志。 展开更多
关键词 男性不育 DAZL基因 单核苷酸多态性 浙江地区
牛DAZL基因序列分析、克隆及表达载体构建 预览
20
作者 郑鹏 郑晓萌 +2 位作者 于磊 赵骞 张贵学 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第1期34-36,共3页
利用生物信息学方法对牛DAZL基因的一级结构和同源性进行分析,并根据牛DAZL基因序列设计引物来克隆该基因,通过酶切、连接、转化构建该基因的表达载体,成功克隆到了DAZL基因。生物信息学分析结果显示,哺乳动物的DAZL基因同源性很高。此... 利用生物信息学方法对牛DAZL基因的一级结构和同源性进行分析,并根据牛DAZL基因序列设计引物来克隆该基因,通过酶切、连接、转化构建该基因的表达载体,成功克隆到了DAZL基因。生物信息学分析结果显示,哺乳动物的DAZL基因同源性很高。此外,构建了牛DAZL基因的带绿色荧光蛋白的真核表达质粒p EGFP-N3-DAZL。 展开更多
关键词 DAZL基因 序列 克隆 表达载体
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈