期刊文献+
共找到20,089篇文章
< 1 2 250 >
每页显示 20 50 100
基质金属蛋白酶-2在非小细胞肺癌血清及组织中的表达 预览
1
作者 赵天源 常延河 +1 位作者 王颖 任燕 《临床肺科杂志》 2019年第1期79-83,共5页
目的探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase,MMP-2)在非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)血清及癌组织中的表达及其与转移和预后的关系。方法(1)用ELISA法检测85例NSCLC患者和20例肺良性病变患者血清中MMP-2的表达;(2... 目的探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase,MMP-2)在非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)血清及癌组织中的表达及其与转移和预后的关系。方法(1)用ELISA法检测85例NSCLC患者和20例肺良性病变患者血清中MMP-2的表达;(2)用免疫组织化学方法检测85例NSCLC患者和20例肺良性病变患者组织中MMP-2的表达;(3)NSCLC患者术后5年生存期调查。结果(1)肺癌组(实验组)术前血清MMP-2水平(529.23±57.16)ng/mL显著高于肺癌组术后(260.45±24.21)ng/mL和对照组(242.16±30.43)ng/mL(P<0.05);肺癌组(实验组)术前血清MMP-2水平与肿瘤直径大小、肿瘤病理类型、肿瘤临床分期、以及淋巴结转移情况有显著相关性(P<0.05);(2)肺癌组(实验组)癌组织中MMP-2阳性率为55.29%,其表达与肿瘤直径大小、病理类型、临床分期、是否有淋巴结转移有明显相关性(P<0.05);(3)肺癌组MMP-2蛋白表达阳性者其血清MMP-2水平显著高于肺癌组MMP-2蛋白表达阴性者的血清MMP-2水平(P<0.05);(4)血清高表达MMP-2肺癌患者术后5年生存率(2.33%)显著低于低表达MMP-2肺癌患者(7.14%)(P<0.01)。结论血清中MMP-2水平与癌组织中MMP-2蛋白的表达基本一致,MMP-2可能在肿瘤浸润和转移过程中起着促进作用。 展开更多
关键词 MMP-2 非小细胞肺癌 ELISA 免疫组织化学
在线阅读 下载PDF
青霉素类抗生素广谱性酶联免疫分析方法的建立 预览
2
作者 刘伟怡 刘凤银 +4 位作者 江海超 王宇 刘佳 邹红丽 穆洪涛 《生物化工》 2019年第1期52-55,59共5页
为了建立青霉素类抗生素广谱性酶联免疫分析方法,本文通过活泼酯法将青霉素G(PEN)合成人工抗原PEN-BSA和PEN-OVA,将PEN-BSA免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,研究了同源包被与异源包被模式及ELISA各影响因素对检测灵敏度的影响,并考察了... 为了建立青霉素类抗生素广谱性酶联免疫分析方法,本文通过活泼酯法将青霉素G(PEN)合成人工抗原PEN-BSA和PEN-OVA,将PEN-BSA免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,研究了同源包被与异源包被模式及ELISA各影响因素对检测灵敏度的影响,并考察了此方法对测定牛奶中青霉素类抗生素残留的适用性。结果表明:制备的PEN多克隆抗体效价高达10^-5,测定8种青霉素类抗生素几乎无交叉反应,以CAR-OVA为异源包被原具有较高的灵敏性,最低可检测浓度为2.22μg/mL,检测限为0.14μg/mL。以1、10、100μg/mL作为加标浓度,添加回收率范围为74.0%~106.3%,变异系数小于0.21%。 展开更多
关键词 青霉素类抗生素 广谱性 多克隆抗体 异源包被 ELISA
在线阅读 下载PDF
基于黄芪甲苷单克隆抗体的ELISA检测方法的建立
3
作者 于生兰 徐加兵 欧阳臻 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期322-326,共5页
目的建立黄芪甲苷的酶联免疫分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。方法以制备的黄芪甲苷单克隆抗体为基础,选择其最佳工作浓度,建立黄芪甲苷间接竞争ELISA法,并用该方法检测黄芪饮片中的黄芪甲苷含量。结果该方法... 目的建立黄芪甲苷的酶联免疫分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。方法以制备的黄芪甲苷单克隆抗体为基础,选择其最佳工作浓度,建立黄芪甲苷间接竞争ELISA法,并用该方法检测黄芪饮片中的黄芪甲苷含量。结果该方法线性范围为39~1 830 ng·mL-1,组内和组间差异均≤10%,平均加样回收率为102.7%(n=6)。采用该方法检测黄芪饮片中黄芪甲苷的含量,所得结果与HPLC法基本一致。结论建立了黄芪甲苷的ELISA检测方法,可为黄芪饮片及其制品的质量控制提供方法补充。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 单克隆抗体 ELISA 质量控制
副结核分支杆菌MAP0862蛋白的表达及临床应用
4
作者 解晓莉 孙阳阳 +5 位作者 程凯慧 楚会萌 张亮 王基隆 杨美 杨宏军 《山东农业科学》 2019年第2期111-116,共6页
本研究以腹泻牛粪便基因组DNA为模板,扩增MAP0862基因,构建重组表达载体pET-30a(+)-MAP0862和pEGX-6P-1-MAP0862,通过原核表达系统表达His-MAP0862和GST-MAP0862蛋白,经纯化后制备兔源高免血清,建立ELISA特异性检测方法,最后将纯化蛋白... 本研究以腹泻牛粪便基因组DNA为模板,扩增MAP0862基因,构建重组表达载体pET-30a(+)-MAP0862和pEGX-6P-1-MAP0862,通过原核表达系统表达His-MAP0862和GST-MAP0862蛋白,经纯化后制备兔源高免血清,建立ELISA特异性检测方法,最后将纯化蛋白和ELISA方法用于牛副结核病临床样品检测,并对检测数据进行分析。结果表明,以MAP0862蛋白为检测原建立的ELISA检测方法在临床样品检测中具有较高的特异性和敏感性,说明MAP0862蛋白适用于副结核病抗体检测。本研究建立的ELISA检测方法可有效检测临床样品中副结核病的感染。 展开更多
关键词 副结核病 MAP0862蛋白 ELISA 副结核分枝杆菌
在线阅读 免费下载
芥菜抗芜菁花叶病毒种质资源的鉴定与评价 预览
5
作者 杨媛 蔡丽 +2 位作者 刘淑晶 姚培杰 万正杰 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期65-72,共8页
对33份不同变种的芥菜种质资源材料(大头芥4份、笋子芥1份、茎瘤芥3份、分蘖芥6份、大叶芥11份、结球芥2份、长柄芥1份、籽用芥1份、宽柄芥菜4份)进行人工机械摩擦接种,通过病情调查和抽薹期ELISA检测,最终筛选出9份抗病毒病材料。在病... 对33份不同变种的芥菜种质资源材料(大头芥4份、笋子芥1份、茎瘤芥3份、分蘖芥6份、大叶芥11份、结球芥2份、长柄芥1份、籽用芥1份、宽柄芥菜4份)进行人工机械摩擦接种,通过病情调查和抽薹期ELISA检测,最终筛选出9份抗病毒病材料。在病情调查中,17Y-7V、17Y-36V病情指数都为0,表现为免疫,其ELISA鉴定DP/DN比值小于2.1,分别为1.38、1.97,呈阴性;17Y-13V、17Y-20V、17Y-21V、17Y-31V、17Y-33V、17Y-34V、17Y-35V病情指数分别为2.86、5.33、2.00、8.00、5.93、5.71、2.00,表现为高抗,其ELISA鉴定DP/DN比值分别为1.12、0.89、1.60、0.93、0.78、0.81、1.33,均小于2.1,呈阴性。 展开更多
关键词 芥菜 病毒病 抗性鉴定 TUMV ELISA
在线阅读 下载PDF
单个B细胞制备CRP单克隆抗体及其ELISA检测体系的初步建立 预览
6
作者 林骏 山云 +3 位作者 刘谦 王晓炜 王洪涛 刘尧 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期69-73,共5页
目的:用单个B细胞抗体制备技术结合Exip293真核表达系统制备hs-CRP单克隆抗体。方法:用重组CRP蛋白免疫小鼠,荧光标记探针和流式分选技术分离出表达CRP单克隆抗体的单个B细胞,通过PCR方法扩增出编码CRP单克隆抗体蛋白的轻重链核酸序列... 目的:用单个B细胞抗体制备技术结合Exip293真核表达系统制备hs-CRP单克隆抗体。方法:用重组CRP蛋白免疫小鼠,荧光标记探针和流式分选技术分离出表达CRP单克隆抗体的单个B细胞,通过PCR方法扩增出编码CRP单克隆抗体蛋白的轻重链核酸序列并构建重组质粒,质粒转染到Expi 293细胞中制备出单克隆抗体蛋白。结果:用间接ELISA法筛选出两个具有良好特异性的单克隆抗体20#,22#,将这两个抗体配对并建立ELISA双抗体夹心检测方法,CRP浓度在15~250 ng/ml范围内有较好的检测线性(y=0.003x-0.035 8,R 2=0.997 4),精密度分析的批内变异系数CV为6.7%~9.37%,批间变异系数为8.52%~9.10%,平均回收率为98%,与临床血清检测值具有良好的相关性,达到CRP检测要求。结论:本研究所用的单个B细胞分离分选方法结合Expi 293真核表达系统在制备单克隆抗体方面具有省时、高效、特异性好、灵敏度高的特点,具有很好的应用价值。 展开更多
关键词 单个B细胞 CRP 单克隆抗体 真核表达系统 ELISA
在线阅读 下载PDF
遵义地区犬狂犬病毒血清抗体流行病学调查与大学生对该病的认知情况分析 预览
7
作者 代军 马晓春 +4 位作者 赵宇艳 秦廷洋 徐磊 王小兵 张仕斌 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期168-172,178共6页
目的调查遵义地区犬RV血清抗体流行病学情况和大学生对狂犬病的认知情况。方法采用RV生物素双抗原夹心ELISA试剂盒对遵义地区422份犬血清样品进行RV血清抗体检测,采用网络问卷对遵义地区大学生开展狂犬病认知情况调查。结果共采集422份... 目的调查遵义地区犬RV血清抗体流行病学情况和大学生对狂犬病的认知情况。方法采用RV生物素双抗原夹心ELISA试剂盒对遵义地区422份犬血清样品进行RV血清抗体检测,采用网络问卷对遵义地区大学生开展狂犬病认知情况调查。结果共采集422份犬血清样本,其中宠物犬297例,192例免疫过狂犬疫苗,65例未免疫,40例免疫信息不详,125例流浪犬狂犬疫苗免疫信息不详。422份犬血清样品RV抗体总阳性率为43.36%(183/422),其中,宠物犬、流浪犬、雄性犬、雌性犬的RV抗体阳性率分别为56.57%(168/297)、12%(15/125)、41.63%(102/245)、45.76%(81/177),犬性别与RV抗体阳性率差异无统计学意义(χ^2=0.714,P﹥0.05),宠物犬与流浪犬RV的抗体阳性差异存在统计学意义(χ^2=71.143,P<0.05)。问卷调查显示大学生群体对狂犬病具有较高的认知水平。结论遵义地区流浪犬RV抗体阳性率远低于宠物犬,应加强流浪犬管理,遵义地区大学生群体对狂犬病具有较高的认知水平,这对于本地区狂犬病的预防与控制具有积极意义。 展开更多
关键词 狂犬病毒 流行病学 ELISA 问卷调查
在线阅读 下载PDF
茄科劳尔氏菌单克隆抗体的制备及其特性鉴定 预览
8
作者 马兰 曾海娟 +9 位作者 谢曼曼 胡谦 丁承超 王淑娟 翟绪昭 孙静娟 李杰 王艳 董庆利 刘箐 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期95-100,共6页
茄科劳尔氏菌( Ralstonia solanacearum ,RS)是番茄、茄子、辣椒、马铃薯等茄科蔬菜青枯病害的致病菌。为实现对RS的快速高效检测,以茄科劳尔氏菌株1.76免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后利用间接酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked Immunosorbe... 茄科劳尔氏菌( Ralstonia solanacearum ,RS)是番茄、茄子、辣椒、马铃薯等茄科蔬菜青枯病害的致病菌。为实现对RS的快速高效检测,以茄科劳尔氏菌株1.76免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后利用间接酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)筛选出3株能稳定分泌抗茄科劳尔氏菌株1.76的单克隆杂交瘤细胞株1C1、1B3和9D7。然后利用小鼠体内诱生腹水,1C1、1B3和9D7效价分别为11 024 000、 1 64 000、1 256 000。采用饱和硫酸铵沉淀及Protein-G亲和层析法纯化腹水,经SDS-PAGE鉴定显示纯化后的单克隆抗体(Monoclonal Antibodies,mAb)纯度较高。纯化后单克隆抗体(2 mg/mL)效价分别为1 17 529、1 35 819、1 50 000,抗体亚型均为IgG1。对3株抗体进行特异性检测结果显示,1C1和9D7均不能与RS-5结合,1B3不能结合1.74和RS-5。此外,检测结果还表明3株单克隆抗体与桑肠杆菌JX-6、苏云金芽胞杆菌SYJ及实验室现有11株燕麦嗜酸菌卡特莱兰亚种、燕麦嗜酸菌西瓜亚种、玉米细菌性条斑菌、嗜酸菌魔芋亚种,梨火疫病菌QB0809、 XL-4,玉米细菌性枯萎病菌QB0241、QB0242,水稻细菌性谷枯病菌QB0017、QB0753、QB0755均无交叉情况。此次茄科劳尔氏菌抗体的制备,为后期青枯病菌的快速检测提供参考。 展开更多
关键词 茄科劳尔氏菌 ELISA 单克隆抗体
在线阅读 下载PDF
两种方法检测RA患者血清抗CCP抗体的结果比对分析 预览
9
作者 张云松 白云辉 《标记免疫分析与临床》 CAS 2019年第2期355-357,共3页
目的对比分析酶联免疫吸附法(ELISA)和胶乳免疫比浊法检测类风湿关节炎(RA)患者血清抗CCP抗体的测定结果。方法随机选择80例RA患者作为RA组,另选同期的80例非RA患者作为非RA组。所有受试者均于入院次日,分别采用ELISA和胶乳免疫比浊法... 目的对比分析酶联免疫吸附法(ELISA)和胶乳免疫比浊法检测类风湿关节炎(RA)患者血清抗CCP抗体的测定结果。方法随机选择80例RA患者作为RA组,另选同期的80例非RA患者作为非RA组。所有受试者均于入院次日,分别采用ELISA和胶乳免疫比浊法测定血清中抗CCP抗体,比较两种检测方法的结果,及诊断准确性、特异性、灵敏度和结果一致性等。结果①ELISA检测抗CCP抗体结果显示真阳性78例,假阳性4例,真阴性76例,假阴性2例;胶乳免疫比浊法检测结果为真阳性72例,假阳性7例,真阴性73例,假阴性8例。②在160例受试者中,两种方法有153例受试者的抗CCP抗体检测结果一致,其中76例受试者均为阳性,77例受试者均为阴性,仅7例受试者检测结果不一致,一致率达到95.6%(153/160),Kappa值达到0.914。比较不同水平间结果一致性,可见高水平的抗CCP抗体阳性一致率高,低水平的抗CCP抗体阴性一致率较高。③ELISA检测抗CCP抗体的准确性(96.3%)、特异性(95.0%)、灵敏度(97.5%)显著高于胶乳免疫比浊法(90.6%、91.3%、90.0%),χ2值分别为4.373、3.817、5.955,P<0.05。结论ELISA和胶乳免疫比浊法测定抗CCP结果一致性良好,二者各有优势,ELISA检测结果准确性、特异性和灵敏度稍高,临床应用过程中可根据需要选择检测方法。 展开更多
关键词 ELISA 胶乳免疫比浊法 抗CCP 类风湿关节炎
在线阅读 下载PDF
大中型猪场猪伪狂犬病抗体检测与分析 预览
10
作者 梁乔 《养猪》 2019年第1期118-120,共3页
为了解大中型猪场猪伪狂犬病免疫抗体水平,采用ELISA方法对辽宁3个区域大中型猪场共7个场采集猪血清样品共270份进行猪伪狂犬病gE抗体和gB抗体检测。结果显示:猪伪狂犬病gE抗体和gB抗体的总阳性率分别为15.9%和85.9%。其中区域一、区域... 为了解大中型猪场猪伪狂犬病免疫抗体水平,采用ELISA方法对辽宁3个区域大中型猪场共7个场采集猪血清样品共270份进行猪伪狂犬病gE抗体和gB抗体检测。结果显示:猪伪狂犬病gE抗体和gB抗体的总阳性率分别为15.9%和85.9%。其中区域一、区域二、区域三猪伪狂犬病gE抗体阳性率分别为21.8%、0和23.8%,猪伪狂犬病gB抗体阳性率分别为85.5%、91.3%和81.3%。结果表明:大中型猪场的免疫措施得当,免疫效果明显,但还存在感染的猪只。区域一和区域三所采样的大中型场中均有不同程度的野毒感染,区域二的野毒感染率和免疫抗体水平均优于其它两个地区。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 ELISA gE/gB抗体
在线阅读 下载PDF
可食包装纸原料中玉米赤霉烯酮的快速检测研究 预览
11
作者 俞大海 毛佳甜 +5 位作者 王一铭 徐丽广 马伟 刘丽强 匡华 胥传来 《包装工程》 CAS 北大核心 2019年第1期87-92,共6页
目的针对可食包装纸原料中的玉米赤霉烯酮进行检测,采用以酶联免疫法为主,胶体金试纸条检测法为辅的免疫分析方法,为实时监控食品的包装、包装存储条件等提供有效技术手段。方法实验主要选取可食包装纸原料玉米粉作为检测对象,为提高酶... 目的针对可食包装纸原料中的玉米赤霉烯酮进行检测,采用以酶联免疫法为主,胶体金试纸条检测法为辅的免疫分析方法,为实时监控食品的包装、包装存储条件等提供有效技术手段。方法实验主要选取可食包装纸原料玉米粉作为检测对象,为提高酶联免疫法检测结果的准确性,通过添加回收实验,以最高的回收率为判断标准对应得到最优的前处理条件;先通过标准曲线的封闭温度和温育时间的优化,再进行玉米赤霉烯酮的前处理方式(包括对提取液浓度、稀释液的pH值、稀释液中有机溶剂的浓度等3个方面进行优化,以添加回收结果作为判断依据)进行测试。同时,将优化后的实验结果组装到胶体金试纸条,并对掺杂玉米赤霉烯酮的玉米粉进行快速检测。结果前处理最适条件,甲醇溶液的体积分数为50%,缓冲液pH值为8.0且含甲醇的体积分数为10%,在该条件下测得的回收率最高。在该优化条件下,组装的胶体金试纸条其检测灵敏度可达0.75ng/mL。结论该检测结果与添加标品所测实验结果基本一致,可以确定该胶体金试纸条是一种快速有效的检测方法。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 ELISA 胶体金 前处理
在线阅读 下载PDF
ELISA法测定番茄茎叶中的褪黑素含量 预览
12
作者 胡永静 潘光军 +6 位作者 龙慧 皮毅 张才鲜 明方艳 谷佳 陈阿敏 须文 《蔬菜》 2019年第2期20-24,共5页
为了研究植物内源褪黑素与植物抗性的关系,以4叶1心的番茄幼苗为试验材料,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定正常番茄、鱼腥草提取液和灰霉菌侵染后的番茄茎叶中的褪黑素含量。结果表明:番茄叶片和茎的褪黑素含量分别为14.53、2.80 ng... 为了研究植物内源褪黑素与植物抗性的关系,以4叶1心的番茄幼苗为试验材料,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定正常番茄、鱼腥草提取液和灰霉菌侵染后的番茄茎叶中的褪黑素含量。结果表明:番茄叶片和茎的褪黑素含量分别为14.53、2.80 ng/g,二者之间差异极显著,叶片的褪黑素含量是茎的5.19倍;经鱼腥草提取液预处理和灰霉菌侵染后,番茄叶片的褪黑素含量显著增加,鱼腥草提取液预处理有助于减轻番茄叶片上的灰霉病发病症状,但并不依赖于叶片内源褪黑素含量的增加。可以检出的番茄茎叶中的褪黑素含量高于2.60 ng/g,就灵敏度而言,ELISA法完全可以用来检测番茄的组织器官的褪黑素含量。 展开更多
关键词 番茄 褪黑素 鱼腥草 灰霉病 ELISA
在线阅读 下载PDF
猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白间接ELISA方法的建立 预览
13
作者 陈汉锶 林旭埜 +3 位作者 田允波 齐冬梅 邹伟斌 胡美容 《中国兽药杂志》 2019年第2期17-26,共10页
为研制特异性敏感性较好的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体检测方法,更好地实现PRRSV的流行病学监测和诊断,将PRRSV GDr180毒株N蛋白基因序列克隆到p ET32a(+)载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内实现了高效表达,表达形式为可溶性表达... 为研制特异性敏感性较好的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体检测方法,更好地实现PRRSV的流行病学监测和诊断,将PRRSV GDr180毒株N蛋白基因序列克隆到p ET32a(+)载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内实现了高效表达,表达形式为可溶性表达,通过Western blot证明表达产物与PRRSV GDr180株阳性血清具有很好的反应原性和特异性。将大肠杆菌表达的N蛋白经过超声、离心、过柱纯化后,作为间接ELISA包被抗原检测血清中的PRRSV抗体,通过对各参数和试剂的优化建立了能检测PRRSV血清抗体的间接ELISA检测方法;对方法的特异性和重复性以及与同类成品试剂盒间的应用效果对比进行了试验。结果表明,研究建立的ELISA抗体检测方法可用于检测猪血清中PRRSV抗体、监测猪繁殖与呼吸综合征的流行情况和评价相关疫苗的免疫效果。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 PRRSV ELISA
在线阅读 下载PDF
牛支原体EF-Tu基因的克隆表达、亚细胞定位及间接ELISA方法建立
14
作者 王艳芳 周雅坪 +4 位作者 郭婷 张新竹 吴倩 陈昕迪 郝永清 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期134-142,共9页
旨在获得牛支原体延伸因子EF-Tu蛋白,分析其在牛支原体菌体内的分布情况,建立EF-Tu间接ELISA法,为进一步研究牛支原体EF-Tu的生物学功能提供理论依据,也为建立牛支原体有效的血清学诊断方法和亚单位疫苗的研制奠定基础。参照Uniprot数... 旨在获得牛支原体延伸因子EF-Tu蛋白,分析其在牛支原体菌体内的分布情况,建立EF-Tu间接ELISA法,为进一步研究牛支原体EF-Tu的生物学功能提供理论依据,也为建立牛支原体有效的血清学诊断方法和亚单位疫苗的研制奠定基础。参照Uniprot数据库中M.bovisPG45株EF-Tu基因序列,应用OverlapPCR扩增获得EF-Tu基因并将其克隆至pMD19-T载体,测序正确后,构建pET32a-EF-Tu原核表达载体,转化大肠杆菌BL21表达菌,IPTG诱导表达,纯化后的表达产物免疫新西兰兔(New Zealand rabbit)制备多克隆抗体,利用间接ELISA测定高免血清抗体效价,用Western blot和间接ELISA法初步定位EF-Tu在菌体内的分布,通过优化反应条件,建立间接ELISA检测法。结果表明:重组蛋白EF-Tu约为66ku,主要以可溶性形式表达;采用间接ELISA测定的多克隆抗体效价为1∶6400;Western blot和ELISA表明该蛋白在牛支原体细胞质和细胞膜中均有表达,且含量相当。利用EF-Tu建立的ELISA法具有很好的特异性和敏感性。通过原核表达系统成功得到牛支原体延伸因子的重组蛋白,该蛋白分布于菌体细胞质和膜表面,且含量基本相当。本研究所建立的EF-TuELISA法适合大规模的血清学诊断检测。 展开更多
关键词 牛支原体 原核表达 多克隆抗体 亚细胞定位 ELISA
在线阅读 免费下载
黄曲霉毒素B1单克隆抗体的制备及基于该抗体的黄曲霉毒素B1免疫学检测方法的建立 预览
15
作者 姚静静 胡骁飞 +6 位作者 韩俊岭 徐帆 滕蔓 邢云瑞 孙亚宁 邓瑞广 张改平 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期1405-1414,共10页
为了快速准确检测粮食与饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量,本试验制备了具有高灵敏度的AFB1单克隆抗体,并将其应用于AFB1间接竞争酶联免疫吸附测定(ELISA)方法的建立。采用碳二亚胺(EDC)法制备AFB1完全抗原[AFB1-牛血清白蛋白(BSA)和AFB1-... 为了快速准确检测粮食与饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量,本试验制备了具有高灵敏度的AFB1单克隆抗体,并将其应用于AFB1间接竞争酶联免疫吸附测定(ELISA)方法的建立。采用碳二亚胺(EDC)法制备AFB1完全抗原[AFB1-牛血清白蛋白(BSA)和AFB1-鸡卵白蛋白(OVA)],并免疫BALB/c小鼠。经细胞融合,筛选出能够分泌高灵敏度AFB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。采用体内诱生腹水法,大量制备AFB1单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。基于制备的AFB1单克隆抗体,建立AFB1间接竞争ELISA检测方法。结果显示:通过筛选,获得稳定产生抗体的杂交瘤细胞株9H1F5,经间接ELISA方法测定,获得的AFB1单克隆抗体的效价高达5.12×105,亲和力常数(Ka)=6.72×107L/mol,抗体亚型为免疫球蛋白G2(IgG2)。采用间接竞争ELISA方法测得AFB1的半数抑制浓度(IC50)为0. 232 ng/mL,检测范围为0.014~1.920 ng/mL,最低检测限为0.014 ng/mL。同时,该AFB1单克隆抗体与黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)、黄曲霉毒素G2(AFG2)、黄曲霉毒素M1(AFM1)的交叉反应率分别为40.21%、33.19%、31.96%、4.40%,与其他霉菌毒素无交叉反应。由上述结果可知,本试验成功制备了灵敏度高、特异性强的AFB1单克隆抗体,并基于该抗体建立了检测AFB1的间接竞争ELISA方法,为粮食与饲料中AFB1快速免疫学检测奠定了基础。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 细胞融合 单克隆抗体 ELISA
在线阅读 下载PDF
福建省龙岩市部分地区猪伪狂犬病野毒感染血清学调查 预览
16
作者 李圣元 《福建畜牧兽医》 2019年第1期9-11,共3页
为了探究福建省龙岩地区的2018年猪伪狂犬病野毒感染及流行概况,本试验随机选取龙岩新罗区、连城县、武平县以及长汀县的部分规模化猪场共21个,应用ELISA法对763份血清样品PRVgE抗体进行血清学调查。结果显示样品检测总阳性率为30.41%,... 为了探究福建省龙岩地区的2018年猪伪狂犬病野毒感染及流行概况,本试验随机选取龙岩新罗区、连城县、武平县以及长汀县的部分规模化猪场共21个,应用ELISA法对763份血清样品PRVgE抗体进行血清学调查。结果显示样品检测总阳性率为30.41%,其中保育猪、育肥猪、能繁母猪及后备母猪的阳性率分别为:25.29%、30.98%、30.85%、31.75%;用SPSS19.0对其进行差异显著性分析,结果显示不同阶段的猪群gE抗体阳性率差异不显著(P=0.741 >0.05);各场场均阳性率为31.89%;各地区阳性率分别为:41.58%、18.18%、30.14%、26.29%,场均阳性率分别为41.14%、23.50%、29.60%、33.33%,对其进行差异显著性分析,结果表示不同地区之间gE抗体阳性率差异极显著(P=0.0003<0.001),即各地区之间伪狂犬病野毒感染情况差异较大,部分地区更需要加强其控制和净化措施。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 伪狂犬病gE抗体 ELISA 血清学调查
在线阅读 下载PDF
酿酒酵母菌及其灭活菌对绵羊瘤胃外植体β-防御素-1(SBD-1)表达的影响
17
作者 王云鹤 金鑫 +4 位作者 张曼 魏方 温婧怡 赵霏霏 杨银凤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期581-591,共11页
旨在探索益生性酿酒酵母菌及其灭活菌对绵羊瘤胃外植体内β-防御素-1(sheep beta-defensin-1,SBD-1)表达的影响。本研究建立了绵羊瘤胃外植体培养方法,将不同浓度(10 4 、10 5 、10 6 、10 7 、10 8 、10 9 CFU·mL -1 )的酿酒酵母... 旨在探索益生性酿酒酵母菌及其灭活菌对绵羊瘤胃外植体内β-防御素-1(sheep beta-defensin-1,SBD-1)表达的影响。本研究建立了绵羊瘤胃外植体培养方法,将不同浓度(10 4 、10 5 、10 6 、10 7 、10 8 、10 9 CFU·mL -1 )的酿酒酵母菌及其灭活菌与外植体共培养24 h后,通过qPCR和ELISA方法检测瘤胃外植体内SBD-1 mRNA和蛋白的表达变化,以分别确定活菌及其灭活菌诱导SBD-1表达最高的菌液浓度;然后用该浓度的活菌及其灭活菌对瘤胃外植体进行不同时间(2、4、8、12、16、20、24 h)的刺激,同样用qPCR和ELISA方法检测瘤胃外植体内SBD-1 mRNA 及蛋白的表达变化,从而筛选出活菌及其灭活菌诱导SBD-1表达的最佳时间。结果表明,益生性酿酒酵母菌及其灭活菌均能显著促进绵羊瘤胃外植体SBD-1的表达( P <0.05)。当酿酒酵母菌浓度为10 7 CFU·mL -1 、灭活菌浓度为10 8 CFU·mL -1 分别诱导绵羊瘤胃外植体16 h时,SBD-1表达量分别达到最大,且二者与对照相比均呈极显著差异( P <0.01)。在最佳诱导条件下对比二者的诱导效果,酿酒酵母菌活菌高于其灭活菌。因此,益生性酿酒酵母菌及其灭活菌均能促进绵羊瘤胃外植体内SBD-1的表达,且活菌浓度为10 7 CFU·mL -1 、灭活菌浓度为 10 8 CFU·mL -1 分别诱导16 h时,绵羊瘤胃外植体内的SBD-1的表达量分别达到最大,并且益生性酿酒酵母菌的诱导效果高于其灭活菌。 展开更多
关键词 酿酒酵母菌 β-防御素-1 绵羊瘤胃外植体 qPCR ELISA
在线阅读 免费下载
口蹄疫O型抗体不同检测方法的比较和分析 预览
18
作者 李小明 杨儒爱 +1 位作者 祁光宇 田波 《兽医导刊》 2019年第3期68-69,共2页
口蹄疫病毒以传播速度之快,发病率之高被世界动物卫生组织(OIE)和联合国粮农组织(FAO)将其列为A类烈性传染病之首,我国将其列为一类传染病首位。目前,发达国家控制FMD主要采取扑杀,无害化处理等措施,从源头控制FMD的流行;亚洲、非洲、... 口蹄疫病毒以传播速度之快,发病率之高被世界动物卫生组织(OIE)和联合国粮农组织(FAO)将其列为A类烈性传染病之首,我国将其列为一类传染病首位。目前,发达国家控制FMD主要采取扑杀,无害化处理等措施,从源头控制FMD的流行;亚洲、非洲、欧洲一些国家主要以疫苗免疫来防控口蹄疫的发生与流行。疫苗免疫后抗体效价的评价,这就需要根据免疫计划,定时采血评价免疫效果。以下是本实验室通过三种试剂盒对同一批血样检测结果的分析。 展开更多
关键词 间接血凝试验 ELISA 金标试纸条 口蹄疫病毒 免疫抗体 检测方法
在线阅读 下载PDF
红寺堡区牛支原体血清学调查分析
19
作者 张慧宁 饶天师 +2 位作者 黄荣兴 王金升 杨鸿斌 《基层农技推广》 2019年第2期47-49,共3页
随着集约化、规模化饲养的快速发展,牛支原体病频发,由于该病传播速度快、难治愈、危害性非常大,对牛产业的影响越来越大。为掌握宁夏回族自治区吴忠市红寺堡区牛支原体病感染情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对未接种牛支原体疫... 随着集约化、规模化饲养的快速发展,牛支原体病频发,由于该病传播速度快、难治愈、危害性非常大,对牛产业的影响越来越大。为掌握宁夏回族自治区吴忠市红寺堡区牛支原体病感染情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对未接种牛支原体疫苗的肉牛随机进行血清检测,结果表明:273份牛血清中,牛支原体阳性率为35.53%。证实牛支原体在红寺堡区普遍存在,应引起相关部门重视,尽早做好综合防控工作。 展开更多
关键词 红寺堡区 牛支原体 血清检测 ELISA 阳性率
四川省自贡市健康成人血清胃泌素-17参考区间的调查研究 预览
20
作者 刘孝桢 杨洁 《实用医技杂志》 2019年第1期66-67,共2页
由于地域环境的差异、生活饮食习惯的不同以及实验室水平条件的不同所得到的参考区间可能有所区别,因此,日前通用的血清胃泌素(G-17)的参考区间是否对于全体国民都适用,需要我们做更多的调研工作,更加深层次的探讨研究。以建立真正适合... 由于地域环境的差异、生活饮食习惯的不同以及实验室水平条件的不同所得到的参考区间可能有所区别,因此,日前通用的血清胃泌素(G-17)的参考区间是否对于全体国民都适用,需要我们做更多的调研工作,更加深层次的探讨研究。以建立真正适合不同地区的血清G-17参考值,为临床诊治提供便利。本研究目的在于进一步获得自贡地区健康人群血清G-17水平与性别及年龄的关系,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分层建立健康人群血清G-17的参考区间。 展开更多
关键词 血清胃泌素 健康成人 自贡市 四川省 酶联免疫吸附试验 生活饮食习惯 健康人群 ELISA
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 250 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈