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甲烷饱和生理盐水对内毒素导致急性肺损伤模型大鼠的保护作用 预览
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作者 孟庆溪 王伟恒 +2 位作者 孙爱军 席焱海 叶晓健 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第3期396-403,共8页
背景:研究表明甲烷在肠道、肝脏、心肌等多种缺血再灌注损伤疾病中具有显著的抗氧化和抗凋亡作用。甲烷对急性肺损伤的保护作用未见相关研究。目的:分析甲烷饱和生理盐水对由于内毒素导致的大鼠急性肺损伤的保护作用及其可能的机制。方... 背景:研究表明甲烷在肠道、肝脏、心肌等多种缺血再灌注损伤疾病中具有显著的抗氧化和抗凋亡作用。甲烷对急性肺损伤的保护作用未见相关研究。目的:分析甲烷饱和生理盐水对由于内毒素导致的大鼠急性肺损伤的保护作用及其可能的机制。方法:内毒素(20mg/kg)诱导大鼠急性肺损伤。实验分为空白组,对照组(甲烷饱和生理盐水),急性肺损伤组,急性肺损伤组+甲烷组(急性肺损伤甲烷饱和生理盐水治疗)。24h后取材测定肺组织湿干质量比,苏木精-伊红染色及电镜组织学检查,ELISA法检测肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素1β炎症因子的质量浓度,并检测肺组织丙二醛和超氧化物歧化酶活性;TUNEL检测肺组织中细胞凋亡情况;Westernblot法检测肺组织中caspase-3含量。结果与结论:①空白组和对照组在各项指标上均无显著差异;②与空白组相比,急性肺损伤和急性肺损伤+甲烷组肺组织湿干质量比显著增加(P<0.05),肺组织的炎症反应强度、氧化应激水平和凋亡率均显著增高(P<0.05);③与急性肺损伤组相比,急性肺损伤+甲烷组肺组织湿干质量比,炎症因子、细胞凋亡率、caspase-3表达及丙二醛含量均有显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶活性提高(P<0.05);④结果说明,甲烷饱和生理盐水可以通过降低肺组织氧化应激水平,抑制炎症因子表达,减少细胞凋亡等途径治疗由于内毒素导致的大鼠急性肺损伤。 展开更多
关键词 甲烷 内毒素 急性肺损伤 湿干重比 氧化应激 MDA SOD 炎症反应 凋亡 caspase-3 组织构建 甲烷 内毒素类 急性肺损伤 肿瘤坏死因子α 白细胞介素6 白细胞介素1Β 丙二醛 超氧化物歧化酶 组织工程
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自噬在氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用
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作者 陈红光 毛幸 +5 位作者 张鹏 田婧 王桂平 白广 谢克亮 于泳浩 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期89-92,共4页
目的评价自噬在氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用。方法常规培养小鼠RAW264.7细胞,采用随机数字表法分为4组(n=6):对照组(Con组)、LPS组、LPS+氢组(LPS+H2组)和LPS+氢+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(LPS+H2+3-MA组)。LPS组... 目的评价自噬在氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用。方法常规培养小鼠RAW264.7细胞,采用随机数字表法分为4组(n=6):对照组(Con组)、LPS组、LPS+氢组(LPS+H2组)和LPS+氢+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(LPS+H2+3-MA组)。LPS组给予终浓度为1μg/ml的LPS孵育6h;LPS+H2组给予终浓度为1μg/ml的LPS和浓度为0.6mmol/L的含氢培养液孵育6h;LPS+H2+3-MA组先给予终浓度为2mmol/L的3-MA孵育1h,然后给予终浓度为1μg/ml的LPS和浓度为0.6mmol/L的含氢培养液孵育6h。采用Clark氧电极法测定线粒体呼吸控制率(RCR),采用JC-1法测定线粒体膜电位(MMP),透射电镜下计数自噬体,采用Westernblot法测定细胞PTEN诱导的蛋白激酶1(PINK1)、E3泛素连接酶(Parkin)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)和Beclin-1的表达。结果与Con组比较,LPS组RCR和MMP降低,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调,自噬体计数升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS+H2组RCR和MMP升高,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调,自噬体计数升高(P<0.05);与LPS+H2组比较,LPS+H2+3-MA组RCR和MMP降低,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ和Beclin-1表达下调,自噬体计数降低(P<0.05)。结论自噬增强参与了氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤。 展开更多
关键词 内毒素类 巨噬细胞 线粒体 自噬
苯酚提取法对A群脑膜炎球菌多糖中细菌内毒素含量的影响
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作者 胡菁 瞿明霞 +5 位作者 胡业勤 陈龙 陈有喜 张翌 郭蓉 唐旻瑶 《国际生物制品学杂志》 CAS 2019年第3期105-108,共4页
目的 研究苯酚提取法对A群脑膜炎球菌粗制多糖原液中细菌内毒素含量的影响.方法 用苯酚对A群脑膜炎球菌多糖原液进行提取,比较粗制多糖的不同溶解倍数、苯酚提取过程中的不同搅拌转数、提取次数、提取温度等因素对多糖细菌内毒素含量的... 目的 研究苯酚提取法对A群脑膜炎球菌粗制多糖原液中细菌内毒素含量的影响.方法 用苯酚对A群脑膜炎球菌多糖原液进行提取,比较粗制多糖的不同溶解倍数、苯酚提取过程中的不同搅拌转数、提取次数、提取温度等因素对多糖细菌内毒素含量的影响.结果 粗制多糖采用4.5% 醋酸钠溶液以1:100质量体积比溶解后进行苯酚提取的多糖细菌内毒素含量最低.同时,综合考虑多糖原液中蛋白含量与多糖回收率的检定结果,确定苯酚提取的最佳条件为搅拌转数400 r/min,提取次数3次,温度13~15℃,可有效降低多糖原液中细菌内毒素的含量.结论 苯酚提取法可明显降低A群脑膜炎球菌粗制多糖原液中的细菌内毒素含量. 展开更多
关键词 奈瑟球菌 脑膜炎 多糖类 细菌 内毒素
TREM-1与ICAM-1在内毒素致兔ARDS中的表达及其意义
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作者 于海容 张明月 +2 位作者 杨冰 孙军平 汪建新 《临床急诊杂志》 CAS 2018年第5期325-329,共5页
目的:本实验以脂多糖(LPS)静脉注射的方法复制兔急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型,通过观察模型动物的病理生理变化,探讨ARDS的发病机理及防治方法。方法:21只新西兰白兔被随机分成3组,分别为对照组(A组)、致伤组(B组)和干预组(... 目的:本实验以脂多糖(LPS)静脉注射的方法复制兔急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型,通过观察模型动物的病理生理变化,探讨ARDS的发病机理及防治方法。方法:21只新西兰白兔被随机分成3组,分别为对照组(A组)、致伤组(B组)和干预组(C组)。B组一次性静注脂多糖(剂量为720μg/kg)建立实验动物模型;C组除同等剂量脂多糖外,同时给予复方苦参注射液(剂量为4ml/kg)进行干预;A组静注同等容量0.9%NaCl注射液。不同时间点观察PaO2、PaO2/FiO2变化,测定肺组织湿/干重比、肺组织髓样细胞触发性受体-1(TREM-1)及细胞间黏附因子-1(ICAM-1)的表达,光镜下观察各组肺组织病理变化。结果:A组各项指标基本正常;B组致伤后PaO2、PaO2/FiO2下降,湿/干重比增加,TREM-1及ICAM-1表达明显增加,光镜下可见肺泡间隔显著增厚、炎细胞浸润;C组损伤明显轻于B组。结论:一次性静注LPS(720μg/kg)可复制兔ARDS动物模型,TREM-1和ICAM-1在模型动物损伤组中表达明显增加,复方苦参具有一定保护作用。 展开更多
关键词 急性呼吸窘迫综合征 内毒素 髓样细胞触发性受体-1 细胞间黏附因子-1 免疫组织化学 苦参素
PI3K/Akt信号通路在内毒素攻击大鼠肺泡上皮细胞时一氧化碳上调线粒体融合蛋白中的作用
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作者 黄漫迎 史佳 +4 位作者 张圆 吴丽丽 宫丽荣 董树安 余剑波 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期728-731,共4页
目的 评价1-磷酯酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路在内毒素攻击大鼠肺泡上皮细胞时一氧化碳(CO)上调线粒体融合蛋白表达中的作用.方法 将肺泡上皮细胞用含10%胎牛血清的1%青链双抗F12K完全培养基于37℃、5%CO2的培养箱... 目的 评价1-磷酯酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路在内毒素攻击大鼠肺泡上皮细胞时一氧化碳(CO)上调线粒体融合蛋白表达中的作用.方法 将肺泡上皮细胞用含10%胎牛血清的1%青链双抗F12K完全培养基于37℃、5%CO2的培养箱中培养,采用随机数字表法分为10组(n=5):对照组(C组);内毒素组(L组)向培养基中加入10 μg/ml脂多糖(LPS);LPS+外源性CO释放剂CORM-2组(L+CO组)向培养基中加入CORM-2 100 μmol/L,1h后向培养基中加入10 μg/ml LPS;LPS+PI3K抑制剂LY294002组(L+ LY组)向培养基中加入25 μmol/LLY294002,1h后向培养基中加入10 μg/ml LPS;LPS+外源性CO释放剂CORM-2+ PI3K抑制剂LY294002组(L+CO+LY组)向培养基中加入25 μmol/L LY294002,1h后向培养基中加入CORM-2 100μmol/L,1h后向培养基中加入10 μg/ml LPS;LPS+无活性的CO释放剂iCORM-2组(L+iCO组)向培养基中加入iCORM 100 μmol/L,1h后向培养基中加入10 μg/ml LPS;LPS+二甲基亚砜(DM-SO)组(L+D组)向培养基中加入等浓度DMSO,1h后加入1μg/ml LPS;外源性CO释放剂CORM-2组(CO组)向培养基中加入CORM-2 100 μmol/L;PI3K抑制剂LY294002组(LY组)向培养基中加入25 μmol/L LY294002;外源性CO释放剂CORM-2+PI3K抑制剂LY294002组(CO+LY组)向培养基中加入25 μmol/L LY294002,1 h后向培养基中加入CORM-2 100 μmol/L.孵化24h后收集细胞,检测MDA含量和SOD活性,采用Western blot法检测血红素氧合酶-1(HO-1)、磷酸化Akt(p-Akt)、线粒体融合蛋白1(Mfn1)、Mfn2和视神经萎缩蛋白1(OPA1)的表达.结果 与C组比较,L组、L+CO组、L+LY组、L+CO+LY组、L+iCO组、L+D组MDA含量升高,SOD活性降低,L组HO-1、Mfn1、Mfn2、OPA1、p-Akt表达上调(P<0.05);与L组比较,L+CO组MDA含量降低,SOD活性升高,L+LY组MDA含量升高,SOD活性降低,L+CO组HO-1、Mfn1、Mfn2、OPA1、p-Akt表达上调,L+LY组HO-1、Mfn1、Mfn2、OPA1、p-Akt表达下调(P<0.05);与L+CO组比较,L+CO+LY组MDA含量升高,SOD活性降低,HO-1、Mfn1、Mfn2、OP 展开更多
关键词 1-磷酯酰肌醇3-激酶 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶 内毒素类 一氧化碳 肺泡 上皮细胞 线粒体蛋白质类
内毒素耐受对人正常前列腺上皮细胞分泌IL-6和IL-8的影响
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作者 黄煜 郑硕 +3 位作者 曹德宏 刘振华 杨璐 魏强 《国际泌尿系统杂志》 2018年第1期1-6,共6页
目的 研究发现前列腺组织炎症在前列腺增生的发生与进展中有着重要作用.方法 内毒素耐受(endotoxin tolerance,ET)现象存在于人组织上皮细胞中如肠上皮细胞和人牙龈上皮细胞等,并可能影响组织的炎症和免疫反应.产生内毒素/脂多糖(Lip... 目的 研究发现前列腺组织炎症在前列腺增生的发生与进展中有着重要作用.方法 内毒素耐受(endotoxin tolerance,ET)现象存在于人组织上皮细胞中如肠上皮细胞和人牙龈上皮细胞等,并可能影响组织的炎症和免疫反应.产生内毒素/脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)的G-菌如大肠埃希菌是影响前列腺炎的主要病原体.因此,本研究拟通过分析LPS反复刺激人正常前列腺上皮细胞RWPE-1中细胞炎性因子IL-6和IL-8表达,探讨是否内毒素耐受现象存在于人前列腺上皮细胞中.结果 采用1μg/mL大肠杆菌(Escherichia coli) LPS刺激人正常前列腺上皮细胞RWPE-1 24 h,洗涤细胞后,给予1μg/mL浓度LPS再次刺激24 h,构建内毒素耐受模型.采用液相芯片技术检测细胞培养液中细胞因子IL-6和IL-8分泌水平的变化.结果LPS刺激后6h和24 h,IL-6和IL-8分泌水平均呈现上升趋势(P<0.05),较空白对照组有明显增高(P<0.05),LPS反复刺激后,诱导细胞耐受后,IL-6和IL-8分泌水平较第1次刺激后明显降低(P<0.05).结论 内毒素耐受现象存在于RWPE-1中,能抑制RWPE-1细胞因子IL-6和IL-8的表达,进而可能影响前列腺组织的炎症和免疫反应. 展开更多
关键词 前列腺 内毒素类 白细胞介素6 白细胞介素8
不同方式营养支持对重症急性胰腺炎患者肠道功能和C反应蛋白、血浆内毒素的影响
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作者 陈东升 《中国基层医药》 CAS 2018年第22期2876-2880,共5页
目的 探讨不同方式营养支持对重症急性胰腺炎(SAP)患者肠道功能和C反应蛋白(CRP)、血浆内毒素(LPS)的影响.方法 选取运城市中心医院2012年8月至2016年9月治疗的SAP患者112例,采用随机数字表法将患者分为三组:完全肠外营养组(TPN... 目的 探讨不同方式营养支持对重症急性胰腺炎(SAP)患者肠道功能和C反应蛋白(CRP)、血浆内毒素(LPS)的影响.方法 选取运城市中心医院2012年8月至2016年9月治疗的SAP患者112例,采用随机数字表法将患者分为三组:完全肠外营养组(TPN组,n=37例)、早期肠内营养组(EEN组,n=37例)、肠外+早期肠内营养组(PN+EEN组,n=38例).分别在入院1 d、营养支持7 d、14 d检测三组患者的CRP、LPS、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)水平,在入院1 d、营养支持14 d检测三组患者的D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)水平,并在营养支持14 d后对比三组患者感染、腹胀腹泻、多器官功能衰竭综合征(MODS)、消化道出血等的发生情况.结果 营养支持7 d、14 d后PN+EEN组血清CRP、LPS、TNF-α 水平[7 d分别为(35.56±4.54)mg/L、(1.59±0.58)EU/L、(48.56±5.25)ng/L,14 d分别为(8.68±2.36)mg/L、(1.23±0.43)EU/L、(38.63±4.82)ng/L],均显著低于TPN组[7 d分别为(60.86±5.63)mg/L、(1.91±0.59)EU/L、(54.10±4.02)ng/L,14 d分别为(28.38±2.47)mg/L、(1.62±0.52)EU/L、(44.51±4.58)ng/L]和EEN组[7 d分别为(59.58±5.25)mg/L、(1.89±0.61)EU/L、(52.54±5.13)ng/L,14 d分别为(27.45±2.13)mg/L、(1.58±0.46)EU/L、(43.21±5.20)ng/L],差异均有统计学意义(tTPN组=21.451、35.321、2.369、3.544、5.121、5.413,t EEN组=21.212、36.127、2.183、3.405、3.320、3.957,均P〈0.05).营养支持14 d后PN+EEN组的D-乳酸、DAO水平[(5.27±1.01)mg/L、(5.78±1.94)U/L]低于TPN组[(8.62±1.26)mg/L、(9.32±2.04)U/L]和EEN组[(8.43±1.08)mg/L、(8.98±2.01)U/L](tTPN组=12.619、12.999,tEEN组=7.649、6.968,均P〈0.05).营养支持治疗14 d后,PN+EEN组患者腹胀腹泻、MODS、感染的发生例数分别为4例、2例、5例,均明显少于EEN组的11例、8例、12例和TPN组的12例、9例、13例,差异均有统计学意义(χ2=5.361、4.321、4. 展开更多
关键词 胰腺炎 急性坏死性 营养支持 胃肠外营养 C反应蛋白质 内毒素类 乳酸 临床对照试验
内毒素攻击大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞时P13K/Akt信号通路在线粒体分裂中的作用
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作者 曹涵冰 史佳 +3 位作者 宫丽荣 张圆 董树安 余剑波 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期618-621,共4页
目的评价内毒素攻击大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞时磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(P13K/Akt)信号通路在线粒体分裂中的作用。方法将肺泡Ⅱ型上皮细胞以密度2×10^5/ml接种于6孔板,采用随机数字表法将其分为6组(n=10):空白对照组(C... 目的评价内毒素攻击大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞时磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(P13K/Akt)信号通路在线粒体分裂中的作用。方法将肺泡Ⅱ型上皮细胞以密度2×10^5/ml接种于6孔板,采用随机数字表法将其分为6组(n=10):空白对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+CORM一2组(L+CO组)、LPS+I|Y294002组(L+LY组)、LPS+无活性的CORM-2(iCORM-2)组(L+iCO组)、LPS+甲基亚砜组(L+D组)。L组、L+CO组、L+LY组、L+iCO组和L+D组采用10Ixg/mlLPS孵育24h;于LPS孵育前1h时,L+CO组、L+LY组、LPS+iCO组分别加入CORM-2100μmol、LY29400225I-Lg、iCORM-2100μmol:L+D组于LPS孵育前1h加入0.1%二甲基亚砜100Ixmol。细胞孵育结束后,采用ELISA法测定培养液TNF-a和IL-6浓度。采用Westernbolt法测定细胞磷酸化Akt(p-Akt)、血红素加氧酶-1(HO-1)、线粒体动力相关蛋白1(Drpl)、线粒体分裂相关蛋白1(Fisl)的表达。结果与C组比较,L组、L+CO组、L+LY组、L+iCO组和L+D组培养液TNF-a和IL-6浓度升高,p-Akt、HO-1、Drpl和Fisl表达上调(P〈0.05)。与L组比较,L+C0组TNF-a和IL-6浓度降低,p-Akt和HO-1表达上调。Drpl和Fisl表达下调.L+LY组TNF-a和IL-6浓度升高,p-Akt和HO.1表达下调,Drpl和Fisl表达上调(P〈0.05)。结论内毒素攻击大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞时P13K/Akt信号通路激活可抑制线粒体分裂。 展开更多
关键词 1-磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶 内毒素类 线粒体 上皮 细胞 肺泡
肠-肝轴在炎症性肠病发病机制中的作用 预览
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作者 施莹莹 陈颖伟 《胃肠病学》 2018年第7期429-432,共4页
炎症性肠病(IBD)是一种病因和发病机制未明的慢性复发性肠道炎性疾病,肝胆系统症状是其最常见的肠外表现。肠道与肝脏在结构和功能上紧密联系、相互影响,称之为"肠-肝轴"。研究发现,胆汁酸肠肝循环异常、肠道细菌和内毒素移位以及... 炎症性肠病(IBD)是一种病因和发病机制未明的慢性复发性肠道炎性疾病,肝胆系统症状是其最常见的肠外表现。肠道与肝脏在结构和功能上紧密联系、相互影响,称之为"肠-肝轴"。研究发现,胆汁酸肠肝循环异常、肠道细菌和内毒素移位以及淋巴细胞归巢紊乱可能通过肠-肝轴参与IBD的发病。本文就肠-肝轴在IBD发病机制中的作用作一综述。 展开更多
关键词 炎症性肠病 肠-肝轴 胆汁酸 内毒素类 淋巴细胞归巢
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丙二醛、超氧化物歧化酶及内毒素在大鼠布加综合征模型肝损伤中的表达及意义
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作者 朱楠 成德雷 +1 位作者 方伟伟 吕维富 《中华放射学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第7期554-559,共6页
目的探讨丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及内毒素(ET)在大鼠布加综合征(BCS)肝损伤模型中的表达及意义。 方法通过部分结扎大鼠肝后段下腔静脉建立BCS动物模型。所有实验大鼠分为3组:健康对照组(12只)、模型组(48只)... 目的探讨丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及内毒素(ET)在大鼠布加综合征(BCS)肝损伤模型中的表达及意义。 方法通过部分结扎大鼠肝后段下腔静脉建立BCS动物模型。所有实验大鼠分为3组:健康对照组(12只)、模型组(48只)和假手术组(48只),模型组及假手术组又各分4个亚组(实验1、3、6、12周),每亚组12只大鼠。行DSA证实造模成功后每组随机抽取9只大鼠处死,留取血清及肝脏组织,采用双抗体夹心法检测肝匀浆及血清中MDA、SOD及ET的表达量。通过Levene法检验所测数据符合方差齐性后,以方差分析比较组内、组间的差异,采用LSD法行组内、组间两两比较,采用Pearson法行MDA、SOD及ET相关性分析。 结果模型组大鼠术后肝匀浆及血清中各时间点的MDA、SOD、ET值与对照组及假手术组中相应指标比较,差异均具有统计学意义(MDA:肝匀浆F值分别为52.906、219.016,血清分别为21.573、43.878;SOD:肝匀浆F值分别为22.927、19.317,血清分别为10.841、31.643;ET:肝匀浆F值分别为33.588、105.515,血清分别为40.832、46.323;P值均〈0.05)。模型组术后各时间点肝匀浆MDA值差异有统计学意义(F=7.716,P=0.001),血清MDA值差异无统计学意义(F=1.965,P=0.139);模型组肝匀浆及血清SOD及ET值在术后各时间点比较,差异均有统计学意义(SOD:F值分别为17.053、7.903;ET:F值分别为19.870、39.372;P值均〈0.05),两者在肝匀浆及血清中含量均从术后1周开始逐渐上升,6周达峰值,第12周稍下降。模型组各时间点肝匀浆MDA及ET较假手术组上升值均高于血清中相应上升值。模型组肝匀浆及血清中MDA与SOD均为负相关(r分别为-0.814、-0.591,P均为0.001)、与ET均为正相关(r分别为0.761、0.422,P分别为0.004、0.001),SOD与ET均为负相关(r分别为-0.726、-0.490,P均为0.001)� 展开更多
关键词 缺氧 内毒素类 氧自由基 布加综合征
NLRP3炎症小体在富氢液减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用
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作者 陈红光 张杨 +5 位作者 韩焕芝 毛幸 田婧 冯竞成 谢克亮 于泳浩 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期1241-1244,共4页
目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体在富氢液减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用。方法常规培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,采用随机数字表法随机分为4组(n=6):对照组(C组)、LPS组、富氢液+LPS组(LPS+H2组)... 目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体在富氢液减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用。方法常规培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,采用随机数字表法随机分为4组(n=6):对照组(C组)、LPS组、富氢液+LPS组(LPS+H2组)和富氢液+LPS+ATP组(LPS+ATP+H2组)。LPS组给予浓度为1μg/ml的LPS孵育30min。LPS+H2组和LPS+ATP+H2组同时给予浓度为1μg/ml的LPS和浓度为0.6mmol/L的富氢液孵育30min,然后LPS+ATP+H2组给予浓度为1nmol/L的ATP孵育6h。采用JC-1法测定线粒体膜电位(MMP),采用Clark氧电极法测定线粒体呼吸控制率(RCR)。采用Westernblot法测定细胞NLRP3、caspase-1和凋亡相关点状蛋白(ASC)的表达。采用ELISA法检测上清液IL-1β、IL-18和IL-6的浓度。结果与C组比较,LPS组MMP和RCR降低,上清液IL-1β、IL-18和IL-6浓度升高,细胞NLRP3、caspase-1和ASC表达上调(P<0.05);与LPS比较,LPS+H2组MMP和RCR升高,上清液IL-1β、IL-18和IL-6浓度降低,细胞NLRP3、caspase-1和ASC表达下调(P<0.05);与LPS+H2组比较,LPS+ATP+H2组MMP和RCR升高,上清液IL-1β、IL-18和IL-6浓度降低,细胞NLRP3、caspase-1和ASC表达下调(P<0.05)。结论富氢液可通过抑制NLRP3炎症小体激活,减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤。 展开更多
关键词 内毒素类 巨噬细胞 线粒体 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3
口服肠道微生态制剂治疗非酒精性脂肪性肝病的疗效观察
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作者 夏晨梅 陈霞 +1 位作者 李倩倩 金玲肖 《中国基层医药》 CAS 2018年第10期1234-1237,共4页
目的 探讨非酒精性脂肪性肝病患者接受微生态制剂口服治疗的临床价值。方法 选取非酒精性脂肪性肝病患者100例为研究对象,对临床资料进行回顾性分析,根据患者治疗方法的不同分为两组,接受基础治疗患者50例为对照组,在基础治疗... 目的 探讨非酒精性脂肪性肝病患者接受微生态制剂口服治疗的临床价值。方法 选取非酒精性脂肪性肝病患者100例为研究对象,对临床资料进行回顾性分析,根据患者治疗方法的不同分为两组,接受基础治疗患者50例为对照组,在基础治疗上加用微生态制剂口服治疗50例为观察组,分析两组疗效。结果 观察组总有效率(54.00%)明显高于对照组(30.00%)(χ2=5911,P=0015);治疗后,观察组丙氨酸氨基转移酶(ALT)、甘油三酯(TG)、稳定胰岛素抵抗指数(HOMA-R)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、D乳酸、内毒素水平均明显优于对照组(均P<0.05);两组不良反应发生率差异无统计学意义(400%比2.00%,χ2 =0343,P=0.558)。结论 微生态制剂口服治疗非酒精性脂肪性肝病,可以降低患者的肠黏膜通透性,改善肠源性内毒素血症,促进患者预后的改善。 展开更多
关键词 脂肪肝 胃肠道 微生物学技术 内毒素类
自噬在右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应中的作用
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作者 毛幸 闫梦莹 +4 位作者 陈红光 冯竞成 王国林 谢克亮 于泳浩 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期992-995,共4页
目的 评价自噬在右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应中的作用.方法 体外培养的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,细胞常规接种于6孔板或96孔板,待融合度为60%时,采用随机数字表法分为4组(n=20):对照组(Con组)、LPS组、LPS+右美托咪定组... 目的 评价自噬在右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应中的作用.方法 体外培养的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,细胞常规接种于6孔板或96孔板,待融合度为60%时,采用随机数字表法分为4组(n=20):对照组(Con组)、LPS组、LPS+右美托咪定组(LPS+Dex组)和LPS+右美托咪定+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(LPS+Dex+3-MA组).Con组加入PBS培养12 h;LPS组加入终浓度为1000 ng∕ml的LPS孵育12 h;LPS+Dex组先加入终浓度为1000 ng∕ml的LPS,随后立即加入终浓度为1μmol∕L的右美托咪定孵育12 h;LPS+Dex+3-MA组先加入终浓度为2 mmol∕L的3-MA孵育1 h,再加入终浓度为1000 ng∕ml的LPS,随后立即加入终浓度为1μmol∕L右美托咪定孵育12 h.采用CCK-8法检测细胞活力,采用ELISA法测定上清液NO、TNF-α和IL-1β的浓度,采用Western blot法测定微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、LC3Ⅱ、泛素结合蛋白(P62)和Bcelin-1的表达水平,计算LC3Ⅱ∕LC3Ⅰ比值.结果 与Con组相比,LPS组巨噬细胞活力降低,TNF-α、IL-1β和NO的浓度升高,LC3Ⅱ∕LC3Ⅰ比值升高,P62和Beclin-1的表达上调(P<0.05);与LPS组相比,LPS+Dex组巨噬细胞活力升高,TNF-α、IL-1β和NO的浓度降低,LC3Ⅱ∕LC3Ⅰ比值升高,P62表达下调,Beclin-1表达上调(P<0.05);与LPS+Dex组相比,LPS+Dex+3-MA组巨噬细胞活力降低,TNF-α、IL-1β和NO的浓度升高,LC3Ⅱ∕LC3Ⅰ比值降低,P62表达上调,Beclin-1表达下调(P<0.05).结论 自噬增强参与了右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应. 展开更多
关键词 右美托咪啶 自噬 内毒素类 巨噬细胞 炎症
M3受体在盐酸戊乙奎醚减轻内毒素诱导人肺微血管内皮细胞损伤中的作用
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作者 刘强胜 颜学滔 +7 位作者 刘安鹏 袁清红 沈石文 郑菲 张宗泽 陈凯 王焱林 詹佳 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期996-1000,共5页
目的 评价M3受体在盐酸戊乙奎醚(PHC)减轻内毒素(LPS)诱导人肺微血管内皮细胞损伤中的作用.方法 正常人肺微血管内皮细胞和M3 shRNA转染人肺微血管内皮细胞,以1×105个∕ml的密度接种于6孔板(2 ml∕孔)或培养瓶(4 ml∕瓶)中,采用随... 目的 评价M3受体在盐酸戊乙奎醚(PHC)减轻内毒素(LPS)诱导人肺微血管内皮细胞损伤中的作用.方法 正常人肺微血管内皮细胞和M3 shRNA转染人肺微血管内皮细胞,以1×105个∕ml的密度接种于6孔板(2 ml∕孔)或培养瓶(4 ml∕瓶)中,采用随机数字表法分为5组(n=5):对照组(C组)、LPS组、PHC+LPS组(P+LPS组)、LPS+M3 shRNA转染组(LPS+shRNA组)和PHC+LPS+M3 shRNA转染组(P+LPS+shRNA组).C组不给予药物处理;余各组均加入终浓度为0.1μg∕ml LPS;P+LPS组和P+LPS+shRNA组于加入LPS前1 h加入PHC 2μg∕ml;LPS+shRNA组和P+LPS+shRNA组以含2.5 nmol∕L M3受体shRNA的质粒转染细胞.加入LPS后1 h时,采用流式细胞仪测定内皮细胞纤维状肌动蛋白(F-actin)的含量;免疫荧光法检测肌球蛋白轻链激酶(MLCK)和血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的表达;Western blot法检测NF-κB p65和IκB的表达;ELISA法测定TNF-α和IL-6的含量;实时定量PCR法分别检测加入LPS后10、30和60 min时M3受体mRNA表达水平.结果 与C组比较,LPS组和P+LPS组F-actin含量降低,VE-cadherin和IκB表达下调,TNF-α和IL-6含量升高,MLCK和NF-κB p65表达上调(P<0.05);与C组比较,LPS组M3受体mRNA表达上调(P<0.05),P+LPS组差异无统计学意义(P>0.05);与LPS组比较,P+LPS组和LPS+shRNA组F-actin含量升高,VE-cadherin和IκB表达上调,TNF-α和IL-6浓度降低,MLCK、NF-κB p65和M3受体mRNA表达下调(P<0.05);与P+LPS组比较,P+LPS+shRNA组F-actin含量升高,VE-cadherin和IκB表达上调,TNF-α和IL-6浓度降低,MLCK、NF-κB p65和M3受体mRNA表达下调(P<0.05).结论 PHC可通过干扰M3受体,抑制NF-κB介导炎性反应,减轻LPS诱导的人肺微血管内皮细胞损伤. 展开更多
关键词 受体 毒蕈碱M3 胆碱能拮抗剂 内毒素类 内皮细胞
6例血液内毒素阳性精神分裂症患者的脑脊液内毒素分析
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作者 律东 林志雄 +9 位作者 麦奇 罗旭东 戴准 杨志江 冼君定 廖德权 殷静雯 颜海锋 王丽静 林举达 《神经疾病与精神卫生》 2018年第6期427-429,共3页
目的探讨血液内毒素(LPS)、脑脊液LPS与精神分裂症的相关性。方法回顾性分析6例血液LPS检测阳性的精神分裂症患者的血液、脑脊液检验结果。结果6例患者血液LPS水平为0.063—0.669 EU/ml,脑脊液LPS水平为0~1.018EU/ml,其中4例... 目的探讨血液内毒素(LPS)、脑脊液LPS与精神分裂症的相关性。方法回顾性分析6例血液LPS检测阳性的精神分裂症患者的血液、脑脊液检验结果。结果6例患者血液LPS水平为0.063—0.669 EU/ml,脑脊液LPS水平为0~1.018EU/ml,其中4例阳性。3例血液白细胞计数〉10×10^9/L,1例中性粒细胞〉70%;血清抗链球菌溶血素O(ASO)为25~606 IU/ml,其中1例ASO〉116 IU/ml。结论血液LPS阳性的精神分裂症患者,部分脑脊液LPS阳性,考虑感染与精神分裂症的发病相关,脑外细菌感染可能是精神分裂症的始发病因。 展开更多
关键词 精神分裂症 内毒素类 隐性感染
氧化苦参碱对牙龈卟啉菌内毒素作用下人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的影响 预览
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作者 汪义永 陈凌 +1 位作者 魏斌 吴贇 《福建医科大学学报》 北大核心 2017年第3期166-169,共4页
目的研究氧化苦参碱对牙龈卟啉菌内毒素(Pg-LPS)作用下人牙周膜细胞(PDLC)碱性磷酸酶(ALP)的活性及其表达的影响。方法采用细胞培养技术分离PDLC,对照组为仅含1%胎牛血清的细胞培养液,实验组分别加入不同浓度的氧化苦参碱溶液和Pg... 目的研究氧化苦参碱对牙龈卟啉菌内毒素(Pg-LPS)作用下人牙周膜细胞(PDLC)碱性磷酸酶(ALP)的活性及其表达的影响。方法采用细胞培养技术分离PDLC,对照组为仅含1%胎牛血清的细胞培养液,实验组分别加入不同浓度的氧化苦参碱溶液和Pg-LPS。采用细胞培养技术和酶联免疫、实时荧光定量RT-PCR技术,观察Pg-LPS对PDLC的ALP活性及其表达的影响。结果在25μg/mL的Pg-LPS作用下,PDLC的ALP活性及其表达明显减低,加入一定浓度的氧化苦参碱溶液后,PDLC的ALP活性及其表达有一定程度恢复。结论氧化苦参碱可以减轻Pg-LPS对PDLC的破坏,对Pg-LPS抑制PDLC的ALP活性及其表达的现象具有拮抗作用。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 内毒素类 牙龈/微生物学 拟杆菌属 牙周膜/细胞学 碱性磷酸酶
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β-抑制蛋白-1在盐酸戊乙奎醚抑制LPS致人肺微血管内皮细胞通透性升高中的作用
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作者 袁清红 颜学滔 +5 位作者 郑菲 王轶芃 张宗泽 陈凯 王焱林 詹佳 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期869-873,共5页
目的 评价β-抑制蛋白-1在盐酸戊乙奎醚抑制LPS致人肺微血管内皮细胞通透性升高中的作用.方法 人肺微血管内皮细胞以1×10^5个/ml的密度接种于6孔板(2 ml/孔)或培养瓶(4ml/瓶)中,采用随机数字表法分为5组(n=15):空质粒转染组... 目的 评价β-抑制蛋白-1在盐酸戊乙奎醚抑制LPS致人肺微血管内皮细胞通透性升高中的作用.方法 人肺微血管内皮细胞以1×10^5个/ml的密度接种于6孔板(2 ml/孔)或培养瓶(4ml/瓶)中,采用随机数字表法分为5组(n=15):空质粒转染组(C组)、LPS+空质粒转染组(LPS组)、盐酸戊乙奎醚+LPS+空质粒转染组(P+LPS组)、LPS+β-抑制蛋白-1 shRNA转染组(LPS+ shRNA组)和盐酸戊乙奎醚+LPS+β-抑制蛋白-1 shRNA转染组(P+LPS+shRNA组).LPS组和LPS+shRNA组分别以空质粒1.5 μg或含15 nmol/L β-抑制蛋白-1 shRNA的质粒转染细胞,孵育24 h时加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS孵育1 h;P+LPS组和P+LPS+shRNA组分别以空质粒1.5 μg或含15 nmol/L β-抑制蛋白-1 shRNA的质粒转染细胞,孵育24 h时加入终浓度为2μg/ml的盐酸戊乙奎醚,孵育1h时加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS孵育1h.采用Transwell法测定细胞通透性,采用免疫荧光化学法检测热休克蛋白27(HSP27)的表达水平,采用Western blot法检测β-抑制蛋白-1、丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK (p-p38MAPK)的表达水平,并计算p-p38MAPK/p38MAPK比值.结果 与C组比较,LPS组、LPS+shRNA组和P+LPS+shRNA组细胞通透性升高,HSP27表达上调,p-p38MAPK/p38MAPK比值升高,β-抑制蛋白-1表达下调(P〈0.05),P+LPS组上述指标差异无统计学意义(P〉0.05);与LPS组比较,P+LPS组细胞通透性降低,HSP27表达下调,p-p38MAPK/p38MAPK比值降低,β-抑制蛋白-1表达上调,P+LPS+shRNA组p-p38MAPK/p38MAPK比值升高(P〈0.05),其余指标差异无统计学意义(P〉0.05);与P+LPS组比较,P+LPS+shRNA组细胞通透性升高,HSP27表达上调,p-p38MAPK/p38MAPK比值升高,β-抑制蛋白-1表达下调(P〈0.05).结论 盐酸戊乙奎醚抑制LPS导致的人肺微血管内皮细胞通透性升高的机制完全与β-抑制蛋白-1有关. 展开更多
关键词 抑制蛋白类 胆碱能拮抗剂 内毒素类 毛细血管通透性
细胞周期依赖激酶2重组慢病毒对内毒素致大鼠急性肺损伤的作用 被引量:1
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作者 许燕 谢羚 +1 位作者 欧阳玉芳 舒仕瑜 《中华创伤杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期555-559,共5页
目的探讨细胞周期依赖激酶2(cdk2)重组慢病毒在内毒素(LPS)导致急性肺损伤(ALI)中的作用。方法36只成年SD大鼠按随机数字表法分为对照组、LPS模型组、基因干预组,每组12只。通过气管滴加LPS的方法成功复制大鼠LPS致ALI动物模型... 目的探讨细胞周期依赖激酶2(cdk2)重组慢病毒在内毒素(LPS)导致急性肺损伤(ALI)中的作用。方法36只成年SD大鼠按随机数字表法分为对照组、LPS模型组、基因干预组,每组12只。通过气管滴加LPS的方法成功复制大鼠LPS致ALI动物模型。对照组于伤后0,24,48 h气管滴加60 μl/kg等渗盐水;LPS模型组于伤后0,24 h气管滴加60 μl/kg对照慢病毒,伤后48 h给予对照组同等体积的LPS等渗盐水;基因干预组于伤后0,24 h气管滴加60 μl/kg cdk2重组慢病毒,伤后48 h给予对照组同等体积的LPS等渗盐水。伤后24 h,取各组右肺下叶肺组织200 mg,HE染色观察肺组织病理变化;Western blot法检测组织cdk2、Clara细胞分泌蛋白(CCSP)、磷脂酶A2(PLA2)和磷酸化C/EBP β (p-C/EBP β)的蛋白表达;采集各组伤后24 h新鲜血液,ELISA法检测血液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10的含量。结果伤后24 h,与对照组比较,LPS模型组肺组织炎性浸润明显,肺泡组织结构损伤严重;与LPS模型组比较,基因干预组大鼠肺组织炎性浸润则明显减弱,肺泡结构趋于正常。基因干预组cdk2含量(4.29±0.73)明显高于对照组(1.00±0.21)和LPS模型组(0.93±0.17)(P〈0.05);基因干预组CCSP表达量(3.19±0.38)明显高于对照组(1.00±0.20)及LPS模型组(0.32±0.19)(P〈0.05); LPS模型组PLA2表达量(4.49±0.51)明显高于对照组(1.00±0.13)和基因干预组(1.76±0.26)(P〈0.05);三组p-C/EBP β浓度变化趋势与CCSP相似。LPS模型组TNF-α表达量[(196.34±30.17)pg/ml]明显高于对照组[(71.24±5.13)pg/ml]和基因干预组[(86.32±11.02)pg/ml](P〈0.05);三组IL-1β、IL-6、IL-10变化趋势与TNF-α相似。结论cdk2过表达可使CCSP蛋白表达增加,PLA2、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10表达减少,对于LPS导致� 展开更多
关键词 CCAAT增强子结合蛋白B 磷酸化酶类 细胞周期依赖激酶2 内毒素类 急性肺损伤
内毒素定量检测仪的研究 预览
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作者 向天雨 王惠来 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第11期1506-1507,1510共3页
目的 利用压电晶体在液相环境中阻尼效应(非质量效应),研究能定量、高灵敏度、低检测限、快速的内毒素生物传感检测系统。方法 通过对石英晶体传感探头表面的光滑处理和亲水性处理得到性能(消除质量负载影响、提高液固偶合效应)更... 目的 利用压电晶体在液相环境中阻尼效应(非质量效应),研究能定量、高灵敏度、低检测限、快速的内毒素生物传感检测系统。方法 通过对石英晶体传感探头表面的光滑处理和亲水性处理得到性能(消除质量负载影响、提高液固偶合效应)更好的传感器探头,提高测量的稳定性和重复性,降低测量的检测下限。利用CPLD器件和LabView软件将整个测量系统做成一种微型的自动化的内毒素检测系统,实现测量数据的自动采集、分析和结果显示。结果 不同浓度的内毒素与频移最终稳定值存在良好的线性关系。结论 通过建立的频移数据,能够准确、方便地得到内毒素浓度。 展开更多
关键词 内毒素类 压电石英晶体 传感器 鲎试剂 特征值
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缺血性脑卒中患者血浆内毒素水平及活性的研究 预览 被引量:1
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作者 刘泽晶 杨富佼 《心血管康复医学杂志》 CAS 2017年第5期475-477,共3页
目的:探究缺血性脑卒中患者血浆中内毒素(LPS)水平及活性。方法:选择80例缺血性卒中住院患者作为脑卒中组,50例健康人作为健康对照组;检测健康对照组以及缺血性脑卒中患者卒中后1、3d血浆中LPS及LPS结合蛋白(LBP)、s CD14水平,并... 目的:探究缺血性脑卒中患者血浆中内毒素(LPS)水平及活性。方法:选择80例缺血性卒中住院患者作为脑卒中组,50例健康人作为健康对照组;检测健康对照组以及缺血性脑卒中患者卒中后1、3d血浆中LPS及LPS结合蛋白(LBP)、s CD14水平,并进行比较。结果:与健康对照组比较,脑卒中组患者卒中后1、3d血浆中LPS、LBP和s CD14的水平显著升高(P均〈0.01),且与脑卒组卒中1d比较,卒中3d后血浆LPS[(0.29±0.07)U/ml比(0.38±0.05)U/ml]、LBP[(22.13±2.75)μg/ml比(27.16±3.75)μg/ml]和s CD14[(1251.11±179.79)ng/ml比(1472.29±158.18)ng/ml]水平显著升高(P均=0.001)。结论:缺血性脑卒中患者血浆中内毒素水平及活性显著升高,通过检测血浆中内毒素水平及活性有助于临床医生对缺血性卒中患者病情的诊断。 展开更多
关键词 卒中 脑缺血 内毒素类
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