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提高致泻性大肠埃希菌检出率的研究
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作者 朱惠芳 李春毅 +2 位作者 顾伟超 严昕宇 邹志云 《中国卫生检验杂志》 CAS 2020年第4期432-433,438,共3页
目的提高食源性疾病监测中致泻性大肠埃希菌的检出率。方法采集2017年-2018年无锡市梁溪区食源性疾病监测标本272份,采用不同的方法进行可疑菌落的挑选,比较大肠埃希菌、致泻性大肠埃希菌检出率。结果 2017年、2018年分别检测食源性疾... 目的提高食源性疾病监测中致泻性大肠埃希菌的检出率。方法采集2017年-2018年无锡市梁溪区食源性疾病监测标本272份,采用不同的方法进行可疑菌落的挑选,比较大肠埃希菌、致泻性大肠埃希菌检出率。结果 2017年、2018年分别检测食源性疾病监测标本170份、102份,筛选出大肠埃希菌100株、96株,大肠埃希菌检出率分别为58. 8%和94. 1%;采用多重实时荧光PCR分别检出致泻性大肠埃希菌15株、32株,致泻性大肠埃希菌检出率分别为8. 8%和31. 3%。2018年在ECC显色培养基上呈蓝色和无色菌落中分别检出致泻性大肠埃希菌28株和4株。结论 ECC显色培养基用于食源性疾病监测中致泻性大肠埃希菌筛选,用多重实时荧光PCR进行食源性疾病监测中致泻性大肠埃希菌确认试验,2018年大肠埃希菌、致泻性大肠埃希菌检出率较2017年有显著提高。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 致泻性大肠埃希菌 ECC显色培养基
环糊精葡萄糖基转移酶高效异源表达研究进展
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作者 李晓涵 郝建华 +3 位作者 郭姣梅 王伟 孙晶晶 刘均忠 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期615-622,共8页
环糊精葡萄糖基转移酶(cyclodextringlycosyltransferase,CGTase)酶法合成环糊精是目前生产环糊精的主要方法。本文介绍了用于生产环糊精葡萄糖基转移酶的几种工程菌株:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌以及毕赤酵母,其中大肠杆菌是目前应用最广... 环糊精葡萄糖基转移酶(cyclodextringlycosyltransferase,CGTase)酶法合成环糊精是目前生产环糊精的主要方法。本文介绍了用于生产环糊精葡萄糖基转移酶的几种工程菌株:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌以及毕赤酵母,其中大肠杆菌是目前应用最广泛的用于表达CGTase的表达系统。除此之外,本文还总结了高效表达环糊精葡萄糖基转移酶的有效策略:选择合适的表达载体、启动子以及信号肽,以及密码子优化和分子伴侣共表达,以期为在相关CGTase研究领域开展研究提供参考。 展开更多
关键词 环糊精葡萄糖基转移酶 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 酵母 异源表达 策略
竹鼠源致病性大肠杆菌分离鉴定与耐药情况分析
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作者 曾喻兵 周雪珂 +4 位作者 江朝源 彭珂楠 杨泽晓 朱玲 徐志文 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期512-521,共10页
【背景】随着竹鼠养殖业不断发展,人工养殖技术的限制导致细菌性疾病不断发生,其中大肠杆菌病成为防治的重点。【目的】分离导致四川绵阳某规模化竹鼠养殖场竹鼠死亡的病原菌,对病原菌进行遗传进化分析和耐药情况分析,为竹鼠细菌性疾病... 【背景】随着竹鼠养殖业不断发展,人工养殖技术的限制导致细菌性疾病不断发生,其中大肠杆菌病成为防治的重点。【目的】分离导致四川绵阳某规模化竹鼠养殖场竹鼠死亡的病原菌,对病原菌进行遗传进化分析和耐药情况分析,为竹鼠细菌性疾病防治提供案例支撑。【方法】采用形态学观察与16SrRNA基因序列分析对病原菌进行鉴定,并进行病理组织学观察、遗传进化分析、药敏试验和耐药基因分析。【结果】从竹鼠肝脏中分离到一株致病性大肠杆菌,病理组织切片可见肺脏、肝脏、肾脏病变严重,脾脏组织病变程度不大;药敏试验表明该株大肠杆菌对丁胺卡那霉素、庆大霉素、大观霉素、氨苄西林、头孢他啶、头孢吡肟、头孢噻肟、多粘菌素、四环素、多西环素等10种药物高度敏感,对左氧氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、新霉素、红霉素、氟苯尼考、复方新诺明等7种药物耐药;该菌携带氨基糖苷类耐药基因[aac(3)-II、aph(3′)-II]和氯霉素类耐药基因(cmlA、floR)。【结论】该竹鼠养殖场疾病由致病性大肠杆菌导致,该株致病性大肠杆菌携带氨基糖苷类耐药基因和氯霉素类耐药基因。 展开更多
关键词 竹鼠 大肠杆菌 分离鉴定 耐药情况分析
芳樟醇气相抗菌活性与作用机制 预览
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作者 吴克刚 赵欣欣 +4 位作者 段雪娟 柴向华 于泓鹏 刘晓丽 范宇婷 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第1期61-67,共7页
以大肠杆菌为研究对象,探讨芳樟醇的气相抗菌作用及其机制。采用气相熏蒸法比较芳樟醇与其他10种挥发性单体成分对大肠杆菌的抗菌作用,发现芳樟醇、香芹酚、百里香酚的抗菌效果较好,最低抑菌浓度分别为200、100、150μL/L,最低杀菌浓度... 以大肠杆菌为研究对象,探讨芳樟醇的气相抗菌作用及其机制。采用气相熏蒸法比较芳樟醇与其他10种挥发性单体成分对大肠杆菌的抗菌作用,发现芳樟醇、香芹酚、百里香酚的抗菌效果较好,最低抑菌浓度分别为200、100、150μL/L,最低杀菌浓度分别为200、150、200μL/L。1-苯胺基-8-萘磺酸荧光探针结果显示经芳樟醇处理后大肠杆菌的表面疏水性增强,表明菌体细胞壁受到一定程度的破坏。扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察到经芳樟醇处理后大肠杆菌微观结构发生明显变化,菌体外形萎缩,细胞壁和细胞膜的完整性被破坏,使得胞内物质泄漏,胞浆分布不均匀;进一步实验结果表明,外泄物质主要为细胞内的离子、核酸类物质和可溶性蛋白质等。大肠杆菌经芳樟醇处理后的荧光光谱表明产生荧光的氨基酸暴露,脂肪酸组成分析显示处理后脂肪酸C13:0和C17:1相对含量明显增加、C18:0相对含量明显减少,这些结果表明芳樟醇气相处理改变了大肠杆菌生物膜蛋白结构和脂肪酸组成。 展开更多
关键词 芳樟醇 大肠杆菌 气相抗菌活性 抗菌机制
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马齿苋对东乡黑鸡产蛋性能及大肠杆菌和乳酸杆菌的影响 预览
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作者 冯轩彪 黄建华 +2 位作者 付海玲 叶逢春 张水印 《中国饲料》 北大核心 2020年第1期78-80,共3页
为研究马齿苋对东乡黑鸡产蛋性能及大肠杆菌和乳酸杆菌的影响,试验选择产蛋高峰期体况良好东乡黑鸡48只,按体重和产蛋数量基本相同原则分为4个处理组,每个处理组3个重复,每个重复4只。分别饲喂添加0%、1%、2%和3%马齿苋的日粮,试验期为3... 为研究马齿苋对东乡黑鸡产蛋性能及大肠杆菌和乳酸杆菌的影响,试验选择产蛋高峰期体况良好东乡黑鸡48只,按体重和产蛋数量基本相同原则分为4个处理组,每个处理组3个重复,每个重复4只。分别饲喂添加0%、1%、2%和3%马齿苋的日粮,试验期为35 d。从第10天开始收集鸡蛋直至试验结束,并在第20、35天收集蛋鸡早晨的粪便测定其大肠杆菌和乳酸杆菌的含量。结果显示:(1)与对照组相比,日粮中添加2%和3%马齿苋组产蛋数提高49.5%和67.7%,添加1%、2%和3%马齿苋组产蛋率分别提高15.4%、23.1%、26.9%和料蛋比分别降低了16.6%、17.4%、17.6%,差异显著(P﹤0.05)。(2)与对照组相比,日粮中添加3%马齿苋组肠道乳酸杆菌提高一倍,添加3%马齿苋组肠道中大肠杆菌数降低57.9%,差异显著(P﹤0.05),且乳酸杆菌与大肠杆菌数比值比对照组提高了39.0%。综上,日粮中添加3%的马齿苋可以优化蛋鸡肠道中乳酸杆菌和大肠杆菌,提高蛋鸡的抗病能力。 展开更多
关键词 马齿苋 东乡黑鸡 产蛋性能 大肠杆菌 乳酸杆菌
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大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌对奶牛睾丸间质细胞炎症反应和睾酮分泌的影响 预览
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作者 王彦雄 王伟 +5 位作者 潘阳阳 王萌 王立斌 樊江峰 余四九 徐庚全 《动物医学进展》 北大核心 2020年第1期39-44,共6页
探讨不同数量大肠埃希菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus)对奶牛睾丸间质细胞(LCs)炎性因子、类固醇合成快速调节蛋白(StAR)以及睾酮(T)分泌的影响。通过体外培养LCs,选取生长状态良好的第3代LCs进行试验。根据E.coli和S.aureus作用... 探讨不同数量大肠埃希菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus)对奶牛睾丸间质细胞(LCs)炎性因子、类固醇合成快速调节蛋白(StAR)以及睾酮(T)分泌的影响。通过体外培养LCs,选取生长状态良好的第3代LCs进行试验。根据E.coli和S.aureus作用数量,试验各分为6组,即用不同数量的E.coli(0、10~4、10~5、10~6、10~7、10~8 CFU/mL)和不同数量的S.aureus(0、10~4、10~5、10~6、10~7、10~8 CFU/mL)感染LCs。通过实时荧光定量PCR检测相关炎性因子和StAR mRNA表达的变化;用牛睾酮(T)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒检测睾酮分泌水平的变化。结果表明,E.coli数量为10~8 CFU/mL和S.aureus数量为10~7 CFU/mL时,IL-6和IL-1βmRNA的表达量最高,与其他组相比较增加极显著(P<0.01);E.coli数量为10~4、10~5、10~6、10~7、10~8 CFU/mL时感染LCs后,StAR mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05);S.aureus浓度为10~6、10~7和10~8 CFU/mL时,StAR mRNA的表达量显著低于对照组(P<0.05);分别用E.coli和S.aureus感染LCs 12 h,睾酮分泌量与对照组相比无显著变化(P>0.05)。结果表明,LCs被E.coli和S.aureus感染12 h,能引起LCs的炎症反应,同时抑制StAR mRNA的表达,但对睾酮的分泌无显著影响。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌 睾丸间质细胞 STAR 睾酮
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医院获得性大肠埃希菌血流感染的临床特点及耐药性分析 预览
7
作者 罗婷婷 杨兴祥 +1 位作者 龙珊珊 杨仁国 《西南军医》 2020年第2期126-130,共5页
目的分析医院获得性大肠埃希菌血流感染的临床特点及耐药情况,为临床防治提供依据。方法回顾性分析四川省人民医院2014年1月-2016年12月医院获得性大肠埃希菌血流感染患者的临床资料及菌株药敏情况。结果血培养分离259株大肠埃希菌,其中... 目的分析医院获得性大肠埃希菌血流感染的临床特点及耐药情况,为临床防治提供依据。方法回顾性分析四川省人民医院2014年1月-2016年12月医院获得性大肠埃希菌血流感染患者的临床资料及菌株药敏情况。结果血培养分离259株大肠埃希菌,其中产ESBLs菌株占54.8%。医院获得性产ESBLs菌株血流感染患者在泌尿系梗阻性疾病、近1月内使用第三代头孢菌素超过3日及感染来源于泌尿生殖系统方面显著多于非产ESBLs菌株感染患者(P<0.05)。大肠埃希菌血流感染分布前5位科室的分别为:妇产科、神经外科、ICU、泌尿外科、血液科。产ESBLs菌株检出率最高的科室为:肝胆外科、泌尿外科。产ESBLs菌株对大多数药物的耐药性明显高于非产ESBLs菌株(P<0.05);对哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、呋喃妥因敏感性仍较高,均>90%;对头孢替坦、美罗培南、亚胺培南、厄他培南的敏感性>99%。结论医院获得性大肠埃希菌血流感染中产ESBLs菌株的检出率较高。临床需结合患者病情、临床特点和院内菌株耐药性监测结果,合理指导抗生素使用。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 血流感染 医院获得性 耐药性 临床特点
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有抗菌能力的牙周引导组织再生膜的制备研究 预览
8
作者 马璋玉 张丛笑 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第2期126-130,共5页
目的:在聚乳酸-乙醇酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]表面接枝2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱(2-methacryloyloxyethyl phosphorylcholine,2-MPC),制备一种具有抗菌能力的牙周引导组织再生膜。方法:用紫外光接枝聚合法将2-MP... 目的:在聚乳酸-乙醇酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]表面接枝2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱(2-methacryloyloxyethyl phosphorylcholine,2-MPC),制备一种具有抗菌能力的牙周引导组织再生膜。方法:用紫外光接枝聚合法将2-MPC接枝于PLGA表面,采用傅立叶变换红外光谱验证接枝的成功,并用扫描电镜观察样品改性前后的表面形貌。以大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌为实验菌株,在已接枝的和未接枝的样品表面接种1×106 CFU/mL浓度的细菌悬液,37℃孵育4 h,梯度脱水后扫描电镜观察。并且在材料表面接种小鼠成骨细胞系MC3T3-E1培养12 h,进行活细胞染色观察样品表面细胞形态。结果:红外和扫描电镜结果证明2-MPC成功接枝于PLGA膜表面,抗菌实验结果显示接枝后的材料抗大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌粘附能力显著提高,并且体外细胞实验结果证明,表面接枝2-MPC在有效提高材料抗菌能力的同时,2-MPC对材料的生物相容性并没有明显的抑制作用。结论:在PLGA表面接枝2-MPC可以获得一种具有优良抗菌性能的牙周组织引导再生膜材料。 展开更多
关键词 牙周引导组织再生膜 2-甲基丙烯酰氧基乙基磷酰胆碱 聚乳酸-乙醇酸共聚物 大肠杆菌金黄色葡萄球菌
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细菌性肝脓肿临床和细菌学分析 预览
9
作者 陈梅 张莉 赵久法 《现代医药卫生》 2020年第5期691-695,共5页
目的总结近7年该院收治的细菌性肝脓肿(BLA)患者的临床特征和细菌学特点,为及时、准确诊治该病提供帮助。方法对2012年1月至2018年12月该院确诊的166例BLA患者的临床和实验室资料进行回顾性分析。结果166例患者中男123例(74.10%),女43例... 目的总结近7年该院收治的细菌性肝脓肿(BLA)患者的临床特征和细菌学特点,为及时、准确诊治该病提供帮助。方法对2012年1月至2018年12月该院确诊的166例BLA患者的临床和实验室资料进行回顾性分析。结果166例患者中男123例(74.10%),女43例(25.90%),平均年龄(58.42±5.23)岁,发热(95.78%)、腹痛(62.05%)是其最常见的临床表现。肺炎克雷伯菌(65.14%)和大肠埃希菌(21.10%)是主要的致病菌。将107例细菌学培养阳性肝脓肿分为肺炎克雷伯菌组(70例)与非肺炎克雷伯菌组(37例),比较发现肺炎克雷伯菌组常见合并糖尿病(χ^2=6.557,P=0.01),而非肺炎克雷伯菌组更多合并有胆道系统疾病(χ^2=11.899,P<0.05)、腹部手术史(χ^2=20.103,P<0.05)。引起肝脓肿的致病菌表现为低耐药率,但同时发现产超广谱β-内酰胺酶阳性致病菌22株。抗菌药物联合经皮肝穿刺置管引流术是最常见的治疗手段。结论该院BLA患者临床表现大多不典型,肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌是最常见的致病菌。根据影像学及药敏试验结果及时选择合适的治疗方案,预后较好。 展开更多
关键词 细菌性肝脓肿 临床特征 肺炎克雷伯菌 大肠埃希菌 病原学
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双歧杆菌四联活菌片辅助治疗酒精性肝病的疗效及肠道菌群的变化 预览
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作者 张建集 吴月红 +3 位作者 任飞 边缓缓 刘振中 白格兰 《安徽医药》 CAS 2020年第3期593-596,共4页
目的探求酒精性肝病采用双歧杆菌四联活菌片辅助治疗对其疗效及肠道菌群变化的影响。方法研究对象为石家庄市第五医院2016年10月至2018年10月收治的酒精性肝病病人98例,按随机数字表法将其分为试验组(49例)和对照组(49例)。对照组在常... 目的探求酒精性肝病采用双歧杆菌四联活菌片辅助治疗对其疗效及肠道菌群变化的影响。方法研究对象为石家庄市第五医院2016年10月至2018年10月收治的酒精性肝病病人98例,按随机数字表法将其分为试验组(49例)和对照组(49例)。对照组在常规治疗的基础上加用蒙脱石散治疗,3克/次,3次/天。在此基础上,试验组加用双歧杆菌四联活菌片治疗,3片/次,3次/天。两组治疗期间均予以保肝治疗,连续治疗2周后,比较两组临床疗效、肝功能、血清炎性因子、肠道菌群、不良反应。结果试验组总有效率93.88%高于对照组79.59%,差异有统计学意义(χ^2=4.346,P=0.037);治疗后,两组天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酰转肽酶(GGT)水平均较治疗前低,且试验组较对照组低,差异有统计学意义(t=11.624,4.688,3.750,P=0.000,0.000,0.000);治疗后,两组肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)、白细胞介素⁃6(IL⁃6)、超敏C⁃反应蛋白(hs⁃CRP)水平均较治疗前低,且试验组较对照组低,差异有统计学意义(t=9.684,4.601,4.780,P=0.000,0.000,0.000);治疗后,试验组肠球菌(4.26±0.96)LogCFU/g、大肠杆菌(6.26±0.84)LogCFU/g水平低于对照组肠球菌(6.98±1.04)LogCFU/g、大肠杆菌(7.18±1.06)LogCFU/g;乳酸菌(7.16±0.93)LogCFU/g、双歧杆菌(7.87±1.21)LogCFU/g水平高于照组乳酸菌(5.37±0.82)LogCFU/g、大肠杆菌(6.39±1.05)LogCFU/g,差异有统计学意义(t=13.453,10.106,6.467,4.762,P=0.000,0.000,0.000,0.000);两组不良反应发生率相比,差异无统计学意义(χ^2=0.178,P=0.399)。结论酒精性肝病采用双歧杆菌四联活菌片辅助治疗可提高临床疗效,改善肝功能,调节肠道菌群,降低炎性因子水平,且不良反应少,安全性较高。 展开更多
关键词 肝疾病 酒精性 天冬氨酸氨基转移酶类 γ⁃谷氨酰转移酶 肿瘤坏死因子α C反应蛋白质 大肠杆菌 双歧杆菌四联活菌片 蒙脱石散
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表达KsdD重组大肠杆菌的构建及转化工艺优化 预览
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作者 汤睿 申雁冰 +2 位作者 耿宇菡 赵云秋 王敏 《山东农业大学学报:自然科学版》 北大核心 2020年第1期19-24,共6页
3-甾酮-△1-脱氢酶(KsdD)是催化甾体化合物C1,2位脱氢反应的关键酶,在甾体药物的生产中起着重要作用。本研究首先通过对红球菌、分枝杆菌及简单节杆菌来源的KsdD蛋白进行氨基酸序列分析,并进一步通过酶活比较及底物催化能力的验证,最终... 3-甾酮-△1-脱氢酶(KsdD)是催化甾体化合物C1,2位脱氢反应的关键酶,在甾体药物的生产中起着重要作用。本研究首先通过对红球菌、分枝杆菌及简单节杆菌来源的KsdD蛋白进行氨基酸序列分析,并进一步通过酶活比较及底物催化能力的验证,最终筛选获得具有较高C1,2位脱氢活力的脱氢酶KsdDR2。研究了过表达KsdDR2蛋白重组大肠杆菌的转化条件对底物雄甾-4-烯-3,17-二酮(AD)转化的影响,结果表明,在30℃转化条件下,当AD:羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)的摩尔比为1:1.5时,可使底物AD的转化率达99%以上。本研究为利用工程菌株高效生产C1,2位脱氢甾体化合物的研究奠定了理论基础。 展开更多
关键词 3-甾酮-△1-脱氢酶 大肠杆菌 微生物转化 雄甾-4-烯-3 17-二酮
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代谢工程改造大肠杆菌合成反式-4-羟基-L-脯氨酸 预览
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作者 李强 韩亚昆 +4 位作者 蒋帅 张悦 吴鹤云 徐庆阳 谢希贤 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第2期202-207,共6页
通过比对筛选,从Micromonospora sp.CNB394中获得高活性的L-脯氨酸-4-羟基化酶,随后利用规律成簇的间隔短回文重复-associated protein 9基因编辑方法,通过强化L-脯氨酸合成途径和引入高活性的L-脯氨酸-4-羟基化酶,构建1株以葡萄糖为碳... 通过比对筛选,从Micromonospora sp.CNB394中获得高活性的L-脯氨酸-4-羟基化酶,随后利用规律成簇的间隔短回文重复-associated protein 9基因编辑方法,通过强化L-脯氨酸合成途径和引入高活性的L-脯氨酸-4-羟基化酶,构建1株以葡萄糖为碳源合成反式-4-羟基-L-脯氨酸的大肠杆菌基因工程菌HYP15。摇瓶发酵30 h,工程菌的反式-4-羟基-L-脯氨酸产量达到13.6 g/L。5 L发酵罐分批补料发酵40 h,反式-4-羟基-L-脯氨酸产量达到48.6 g/L,糖酸转化率和平均生产强度分别达到21.6%和1.22 g/(L h),具有良好的工业应用前景。 展开更多
关键词 L-脯氨酸-4-羟基化酶 反式-4-羟基-L-脯氨酸 大肠杆菌 间隔短回文重复-associated protein 9 发酵
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东北泡菜中抑菌微生物的分离筛选及鉴定 预览
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作者 燕平梅 宋敏丽 赵文婧 《中国调味品》 CAS 北大核心 2020年第3期53-56,共4页
实验的目的是分离延边泡菜中具有抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的微生物。采用稀释涂布的方法分离泡菜中微生物,挑选110株拟似乳酸菌的菌落,采用管碟法筛选具有抑菌能力的乳酸菌,通过菌落的培养特征、革兰氏染色实验和过氧化氢酶反应实... 实验的目的是分离延边泡菜中具有抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的微生物。采用稀释涂布的方法分离泡菜中微生物,挑选110株拟似乳酸菌的菌落,采用管碟法筛选具有抑菌能力的乳酸菌,通过菌落的培养特征、革兰氏染色实验和过氧化氢酶反应实验、生理生化(糖发酵实验)及16S rRNA基因鉴定,结果为62株抑制金黄色葡萄球菌的乳酸菌中11株为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum;51株为Lactobacillus acidophilus。91株抑制大肠杆菌的乳酸菌中72株为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum;19株为Lactobacillus brevis。表明东北泡菜中乳酸菌具有抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的作用。 展开更多
关键词 东北泡菜 乳酸菌 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌
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AEP环化酶的高效原核诱导表达与活性检测体系的建立 预览
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作者 胡晓韵 何华华 彭文舫 《湖北大学学报:自然科学版》 CAS 2020年第1期20-26,共7页
天冬酰胺内切酶(AEPs)可催化短肽形成结构异常稳定的环肽,其具有药物设计框架的应用前景.将来源于白花蛇舌草(Oldenlandia affinis)中AEP(OaAEP1 b)环化酶(cyclase)基因采用融合标签表达的策略在大肠杆菌菌株BL21中进行诱导表达,并比较... 天冬酰胺内切酶(AEPs)可催化短肽形成结构异常稳定的环肽,其具有药物设计框架的应用前景.将来源于白花蛇舌草(Oldenlandia affinis)中AEP(OaAEP1 b)环化酶(cyclase)基因采用融合标签表达的策略在大肠杆菌菌株BL21中进行诱导表达,并比较了不同的融合标签麦芽糖结合蛋白(MBP),N-utilization substance A(NusA),小泛素修饰蛋白(SUMO),绿色荧光蛋白(GFP)以及泛素(ubiquitin)对AEP环化酶表达量的影响.结果表明,MBP标签对AEP的表达促进作用最强,达到(3.6±0.05)mg/L,是目前文献报道的2倍.体外酶切实验证实该环化酶可对融合表达的底物蛋白MBP-Kalata B1-6 His-GST进行有效切割,但连接反应过程有待验证.本研究对AEP环化酶进行肽工程研究与应用奠定了较好的基础,并提供了一套高效的研究工具. 展开更多
关键词 AEP环化酶 环化肽 大肠杆菌 融合表达
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共表达谷氨酰-tRNA还原酶增强染料脱色过氧化物酶在大肠杆菌中的表达活性 预览
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作者 顾鹏帅 潘梅 +1 位作者 丁亮亮 唐蕾 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期45-50,共6页
染料脱色过氧化物酶(dye-decoloorizing peroxidase,DyP)属于以血红素为辅基的新型过氧化物酶类,常因缺乏辅因子而导致催化活性低。将来源于褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的染料脱色过氧化物酶基因(TfuDyP)与大肠杆菌谷氨酰-tRNA... 染料脱色过氧化物酶(dye-decoloorizing peroxidase,DyP)属于以血红素为辅基的新型过氧化物酶类,常因缺乏辅因子而导致催化活性低。将来源于褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的染料脱色过氧化物酶基因(TfuDyP)与大肠杆菌谷氨酰-tRNA还原酶基因(hemA),构建重组质粒phemA-DyP,转化至E.coli BL21中进行共表达。分别以2,2-联氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)和顽固性染料活性蓝19(RB19)、溴酚蓝、溴甲酚绿为底物检测TfuDyP的催化活力以及染料脱色效率。结果表明,诱导后的共表达菌株pAD胞内血红素含量为9. 8μmol/L,而单独过表达基因TfuDyP的菌株pD仅为3. 4μmol/L。TfuDyP纯酶的全波长扫描分析表明,在菌株pAD中DyP酶与血红素的结合度相比pD有较大幅度的提升。pAD菌株表达的DyP酶活力较pD菌株提高了110%,酶活力的提高使其在染料脱色应用方面也得到增强。在pAD菌株培养基中分别添加谷氨酸(Glu)、FeCl2使得胞内血红素含量、DyP酶活力和染料脱色效率比未添加时进一步提高。以上结果为TfuDyP的功能开发奠定了基础,同时也为其他血红素依赖性过氧化物酶的研发提供借鉴。 展开更多
关键词 大肠杆菌 褐色嗜热裂孢菌 血红素 染料脱色过氧化物酶 共表达
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肌注硫酸庆大霉素在大肠杆菌感染鸡体内的药动学试验
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作者 刘锦妮 李义坤 +2 位作者 孟青艳 徐光科 叶兆伟 《中国家禽》 北大核心 2020年第3期35-40,共6页
为分析硫酸庆大霉素在健康和鸡大肠杆菌感染鸡体内的药物动力学特征,试验通过给健康鸡腹腔注射大肠杆菌O157,以临床症状、病理剖检和微生物检查为指标,成功建立鸡大肠杆菌感染模型。选取健康鸡和患病鸡各8只,分别以20 mg/kg体重单剂量... 为分析硫酸庆大霉素在健康和鸡大肠杆菌感染鸡体内的药物动力学特征,试验通过给健康鸡腹腔注射大肠杆菌O157,以临床症状、病理剖检和微生物检查为指标,成功建立鸡大肠杆菌感染模型。选取健康鸡和患病鸡各8只,分别以20 mg/kg体重单剂量肌内注射硫酸庆大霉素,分别于0.167、0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8和12 h时间点采血,采用管碟法测定血浆中庆大霉素的浓度。结果显示:试验所建立的标准曲线相关性好,相关系数均达0.990以上,日内、日间变异系数均小于10%。肌注给药后,硫酸庆大霉素在鸡体内吸收迅速,房室模型分析表明,健康鸡与患病鸡药时数据均符合有二室开放模型,硫酸庆大霉素在健康鸡体内峰浓度(Cmax)为(15.01±3.51)μg/mL,药时曲线下面积(AUC)为(100.79±5.14)μg/mL·h,消除半衰期(t1/2β)为(4.41±1.32)h,达峰时间(Tp)为(1.27±0.50)h。硫酸庆大霉素在患病鸡体内峰浓度(Cmax)为(12.50±2.19)μg/mL,药时曲线下面积(AUC)为(83.38±4.19)μg/mL·h,消除半衰期(t1/2β)为(4.18±1.17)h,达峰时间(Tp)为(0.97±0.05)h。结果表明:硫酸庆大霉素在患病鸡体内的峰浓度和药时曲线下面积低于健康鸡(P<0.05),因此对于已感染大肠杆菌的病鸡可以考虑适当增加给药剂量。 展开更多
关键词 硫酸庆大霉素 大肠杆菌 药物动力学
大肠杆菌对链状弯壳藻生长特性的影响 预览
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作者 万年新 王涛 +1 位作者 易志勇 裴国凤 《中南民族大学学报:自然科学版》 CAS 2020年第2期128-132,共5页
目的:探究细菌与链状弯壳藻共培养时对其生长特性的影响,了解链状弯壳藻改变存在状态、形成水华的原因.方法:研究了不同大肠杆菌(Escherichia coli)添加量对链状弯壳藻生物量、多细胞群体形成、胞外多糖含量等的影响.结果:大肠杆菌对链... 目的:探究细菌与链状弯壳藻共培养时对其生长特性的影响,了解链状弯壳藻改变存在状态、形成水华的原因.方法:研究了不同大肠杆菌(Escherichia coli)添加量对链状弯壳藻生物量、多细胞群体形成、胞外多糖含量等的影响.结果:大肠杆菌对链状弯壳藻的生长存在抑制作用,表现为总细胞密度随添加菌液浓度(0.2%~2%)的增加而减少;但细菌的存在对链状弯壳藻单细胞形成群体具有促进作用,其中1%的菌液浓度最有利于链状弯壳藻形成群体,群体细胞的密度约为对照的5倍.与1%菌液浓度共培养的链状弯壳藻胞外多糖含量是对照的2.3倍,且链状弯壳藻的胞外多糖含量与群体细胞密度正相关(P<0.05).结论:细菌的存在是链状弯壳藻形成多细胞链状群体的重要因素. 展开更多
关键词 链状弯壳藻 大肠杆菌 胞外多糖 多细胞群体
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大肠埃希菌的临床分布及其耐药性分析 预览
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作者 雷文珍 《中国医学创新》 CAS 2020年第5期69-72,共4页
目的:探讨大肠埃希菌的临床分布及其耐药性。方法:选取2016年1月-2019年12月本院从住院患者标本中分离的大肠埃希菌673株,对所有病原菌完成临床分布调查,并对其进行药敏试验,检测病原菌的耐药情况。结果:673株大肠埃希菌的主要来源为痰... 目的:探讨大肠埃希菌的临床分布及其耐药性。方法:选取2016年1月-2019年12月本院从住院患者标本中分离的大肠埃希菌673株,对所有病原菌完成临床分布调查,并对其进行药敏试验,检测病原菌的耐药情况。结果:673株大肠埃希菌的主要来源为痰液342株(50.82%),其次是尿液234株(34.77%),其他来源所占比例较小;673株大肠埃希菌分布科室相对较广,外科、ICU、内科系统多药耐药菌株检出率分别为9.50%、10.41%、4.35%。结论:本院大肠埃希菌的主要来源为痰液、尿液,分布科室相对较广,多药耐药菌株检出率较高,应在医院加强耐药菌的监测及病原菌耐药性分析,有效预防感染,提高抗菌药物合理性。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 抗菌药物 耐药性
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3种肠源性乳酸杆菌对大肠杆菌的体外抑菌效果
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作者 易力 刘路 +1 位作者 杨伟平 张海艳 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第1期96-98,共3页
为了研究3种肠源性乳酸杆菌对大肠杆菌的抑制效果,采用琼脂打孔法进行了肠源性乳酸杆菌对同源性和异源性大肠杆菌的体外抑菌试验。结果表明:随机抽取的2株肠源性乳酸杆菌对同源性大肠杆菌均存在抑制作用,且抑菌圈平均直径均>20 mm,... 为了研究3种肠源性乳酸杆菌对大肠杆菌的抑制效果,采用琼脂打孔法进行了肠源性乳酸杆菌对同源性和异源性大肠杆菌的体外抑菌试验。结果表明:随机抽取的2株肠源性乳酸杆菌对同源性大肠杆菌均存在抑制作用,且抑菌圈平均直径均>20 mm,敏感度均为高度敏感;从2株中各随机抽取的1株肠源性乳酸杆菌并不完全对异源性大肠杆菌都存在抑制作用,如鸡源乳酸杆菌对鹅源大肠杆菌存在抑菌作用,抑菌圈直径为30.72 mm,敏感度均为高度敏感,而对鱼源大肠杆菌不存在抑菌作用。说明肠源性乳酸杆菌对同源性和部分异源性大肠杆菌存在抑制作用,且抑制强度不同。 展开更多
关键词 乳酸杆菌 大肠杆菌 抑制作用 同源性 异源性
链霉菌来源谷氨酰胺合成酶GLnA_Shy的性质表征 预览
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作者 刘辉 刘璋敏 +2 位作者 冯雁 李谦 崔莉 《南京工业大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2020年第2期249-256,共8页
在大肠杆菌BL21(DE3)中对吸水链霉菌5008的GLnyShy基因进行克隆表达。GLnAShy蛋白由469个氨基酸组成,其分子量约为5.2×10^4。体外酶学性质及酶动力学测定结果显示,GLnAShy酶催化反应的最适温度为35℃,最适pH为7.5,对底物谷氨酸的... 在大肠杆菌BL21(DE3)中对吸水链霉菌5008的GLnyShy基因进行克隆表达。GLnAShy蛋白由469个氨基酸组成,其分子量约为5.2×10^4。体外酶学性质及酶动力学测定结果显示,GLnAShy酶催化反应的最适温度为35℃,最适pH为7.5,对底物谷氨酸的米氏常数(Km)和催化常数(kcat)分别为(21.8±3.2)μmol/L和(3.8±0.5)×10^-3 s^-1。进化树分析和同源建模结果显示GLnAShy蛋白属于谷氨酰胺合成酶(GS)家族,该酶包含一个较小的N端结构域(残基区域为16~94)和一个较大的C端结构域(残基区域为101~466),其三级结构具有GS典型的双通道结构,与底物谷氨酸的结合位点为Glu131、Ser264、Arg320和Arg359。谷氨酰胺合成酶在含氮化合物的生产上应用广泛,通过解析GLnAShy的功能,为进一步对其进行定点改造提供了理论基础。 展开更多
关键词 谷氨酰胺合成酶 大肠杆菌 同源建模 链霉菌 克隆表达
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