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FLT3基因内部串联重复突变与急性白血病的关系及临床意义 预览 被引量:34
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作者 王莉红 周春林 +3 位作者 张新伟 陈森 王敏 王建祥 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期 393-396,共4页
目的研究FLT3基因的内部串联重复(internal tandem duplication,ITD)突变与急性白血病的关系及临床意义.方法采用PCR方法分析143例急性髓系白血病(AML)、25例急性淋巴细胞白血病(ALL)、2例急性杂合性白血病(AHL)、17例骨髓增生异常综合... 目的研究FLT3基因的内部串联重复(internal tandem duplication,ITD)突变与急性白血病的关系及临床意义.方法采用PCR方法分析143例急性髓系白血病(AML)、25例急性淋巴细胞白血病(ALL)、2例急性杂合性白血病(AHL)、17例骨髓增生异常综合征(MDS)和7例慢性粒细胞白血病急变期(CML-BC)患者骨髓单个核细胞中FLT3基因外显子14和15中ITD突变,分析FLT3-ITD阳性AML患者的临床特征及疗效.结果143例AML患者中37例(25.9%)FLT3-ITD阳性,其中53例M2中10例、40例M3中15例、20例M4中4例、23例Ms中8例.在25例ALL、2例AHL、17例MDS和7例CML-BC患者中未检测到FLT3-ITD突变.对其中5例特征性突变测序结果显示,ITD位于外显子14,长度为21~60 bp,3例为单纯串联重复,2例同时出现插入序列,均未改变FLT3阅读框架.临床研究表明,FLT3-ITD突变在染色体核型正常患者中占有较高比例(P<0.05),FLT3-ITD阳性患者外周血白细胞数高(P<0.05),化疗后完全缓解率低(P<0.05).结论FLT3-ITD突变多见于M3、M5患者,为框内突变(In frame mutation).FLT3-ITD阳性的AML患者外周血白细胞数高,化疗后完全缓解率低. 展开更多
关键词 flt3基因 基因突变 急性白血病 ITD 配体
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急性髓系白血病FLT3基因突变的研究 预览 被引量:7
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作者 叶丽 纪濛濛 孙自敏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期322-327,共6页
目的:检测初发AML患者FLT3基因突变,探讨其在AML疾病特征和预后评估中的意义.方法:应用聚合酶链反应(PCR)检测54例初发成人AML患者的骨髓标本FLT3基因突变.结果:54例初发成人AML患者中FLT3-ITD突变检出率为22.22%,发生FLT3-ITD基... 目的:检测初发AML患者FLT3基因突变,探讨其在AML疾病特征和预后评估中的意义.方法:应用聚合酶链反应(PCR)检测54例初发成人AML患者的骨髓标本FLT3基因突变.结果:54例初发成人AML患者中FLT3-ITD突变检出率为22.22%,发生FLT3-ITD基因阳性的AML患者中伴染色体正常核型10例(占83.3%),复杂异常核型2例(占16.7%).FLT3-ITD基因突变阳性的AML患者的白细胞及骨髓白血病细胞比例显著高于未发生突变者(P<0.05),但在性别、年龄、诱导化疗第1疗程CR率、生存率等方面两组之间差异无统计学意义.2例出现FLT3-TKD基因突变的患者与FLT3-TKD阴性AML患者相比,在初诊时性别、年龄、白细胞计数、骨髓原始细胞比例以及第1疗程CR率差异均无统计学意义.结论:FLT3-ITD突变阳性在染色体正常核型AML患者中比例较高;FLT3-ITD突变的阳性组在外周血白细胞数量和骨髓原始细胞数量方面明显高于该突变阴性组患者. 展开更多
关键词 flt3基因 flt3基因突变 急性髓细胞白血病
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双重PCR检测急性髓系白血病FLT3-ITD和NPM1基因突变 预览 被引量:8
3
作者 张泽川 鹿全意 +2 位作者 赵江宁 陈亚玫 李志鹏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期717-720,共4页
本研究旨在建立-种同时筛查FLT3-ITD突变和NPM1突变的检测方法。设计2对引物,分别扩增NPM1基因的外显子12和FLT3基因的外显子14、内含子14、外显子15,以覆盖几乎所有已知突变位点。对双重PCR体系的反应程序和引物浓度比例进行优化,... 本研究旨在建立-种同时筛查FLT3-ITD突变和NPM1突变的检测方法。设计2对引物,分别扩增NPM1基因的外显子12和FLT3基因的外显子14、内含子14、外显子15,以覆盖几乎所有已知突变位点。对双重PCR体系的反应程序和引物浓度比例进行优化,将双重PCR产物通过毛细管电泳分离,根据野生型产物和突变型产物的大小差异来判断突变存在与否并利用产物的峰面积对突变比例进行定量,并对突变阳性标本进行测序验证。结果表明,在93例标本中NPM1突变者17例(18.5%),FLT3-ITD突变者15例(16.3%),NPMl突变和FLT3-ITD突变双阳性6例。17例NPM1突变中7例M2、4例M4、5例M5、1例M6,其中10例男性、7例女性;有15例为A型,1例为B型,1例为Nm型;有1例CML急变为AML的标本中带有NPM1基因A型突变。15例FLT3-ITD阳性中1例M1、8例M2、2例M3、1例M4、3例M5,其中5例男性、10例女性。扩增产物测序结果进-步证明了该检测体系的准确性和可靠性。结论:建立了同时筛查FLT3—1TD突变和NPM1突变的检测体系,该体系以基因组DNA为模板,具有方便、快捷、准确、可定量的优点。 展开更多
关键词 白血病 NPM1基因 flt3基因 内部串联重复 毛细管电泳
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FLT3-ITD阳性与阴性急性髓细胞白血病的实验室特征及预后比较 被引量:8
4
作者 李婷婷 孙雪冬 +8 位作者 董征 余长林 孙琪云 乔建辉 胡锴勋 刘广贤 姚波 艾辉胜 郭梅 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期501-505,共5页
目的比较伴FLT3基因突变(FLT3-ITD+)与不伴FLT3基因突变(FLT3-ITD-)的急性髓细胞白血病(AML)患者的实验室特征、疗效以及预后。方法 2010年10月-2012年10月收治的初诊AML患者93例,年龄10~66岁,包括21例FLT3-ITD+AML(22.6%)和7... 目的比较伴FLT3基因突变(FLT3-ITD+)与不伴FLT3基因突变(FLT3-ITD-)的急性髓细胞白血病(AML)患者的实验室特征、疗效以及预后。方法 2010年10月-2012年10月收治的初诊AML患者93例,年龄10~66岁,包括21例FLT3-ITD+AML(22.6%)和72例FLT3-ITD-AML(77.4%,对照组)列入分析。比较两组患者的临床表现,HOX11、EVI、ETO、MLL、NPM1基因表达情况,细胞学抗原(CD34/CD38、淋巴抗原、CD7和CD4)表达情况,细胞遗传学表现(正常核型、复杂核型),2年无事件生存(EFS)和2年总生存(OS)情况。结果 FLT3-ITD+AML初诊时合并外周血白细胞增高(〉100×109/L)及出血者多于FLT3-ITD-组(P〈0.01,P=0.004),但两组在年龄、免疫表型及染色体异常等方面无明显差异。FLT3-ITD+AML完全缓解(CR)率28.57%,显著低于FLT3-ITD-AML的55.56%(P=0.03)。FLT3-ITD+AML 2年无事件生存率为29.2%,低于FLT3-ITD-AML组(37.7%,P=0.04)。FLT3-ITD+AML联合表达NPM1者占33.33%,明显高于FLT3-ITD-AML组(1.39%,P=0.001)。FLT3-ITD+AML中表达NPM1的患者均未达完全缓解。结论 FLT3-ITD+AML易合并白细胞增高,完全缓解率低,无事件存活率低,预后差。 展开更多
关键词 白血病 前髓细胞性 急性 易位 遗传 flt3基因 NPM1基因
恶性血液病FLT3基因突变的检测及临床意义 预览 被引量:4
5
作者 刘红 于红 +2 位作者 贾红英 张文 国承杰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期 709-713,共5页
为了探讨FLT3基因及FLT3内部串联重复(ITD)突变与恶性血液病的关系及临床意义,采用PCR结合DNA测序技术分析32例急性髓系白血病(AML)、18例急性淋巴细胞白血病(ALL)、2例急性杂合性白血病(AHL)、12例骨髓增生异常综合征(MDS)... 为了探讨FLT3基因及FLT3内部串联重复(ITD)突变与恶性血液病的关系及临床意义,采用PCR结合DNA测序技术分析32例急性髓系白血病(AML)、18例急性淋巴细胞白血病(ALL)、2例急性杂合性白血病(AHL)、12例骨髓增生异常综合征(MDS)、10例慢性粒细胞白血病(CML)、3例非何杰金淋巴瘤(NHL)及9例多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞中FLT3基因及FLT3/ITD突变,分析FLT3/ITD阳性患者的临床特征及疗效。结果表明:在32例AML患者中5例FLT3/ITD(15.6%)阳性,其中7例M3中1例、10例M4中1例、10例M5中3例;而在18例ALL、2例AHL、12例MDS和10例CML患者中未检测到FLT3/ITD突变;在3例非何杰金淋巴瘤(NHL)、9例多发性骨髓瘤(MM)患者中亦未检测到FLT3基因。对2例特征性突变进行了测序,其结果显示,ITD位于外显子14,长度为27-63bp,为单纯串联重复,FLT3/ITD序列包括有2个SH2-结合结构域(YEYV与YEYDLK),其中1例出现氨基酸的替换,其ITD序列及氨基酸的替换均具有独特性,均未改变FLT3阅读框架。临床研究表明,FLT3/ITD阳性AML患者外周血白细胞数高(p〈0.01),骨髓原始细胞比例高(p〈0.01),化疗后有低缓解率趋势。结论:FLT3/ITD突变多见于M5患者,为框内突变。FLT3/ITD阳性的AML患者外周血白细胞数高,骨髓原始细胞比例高,伴低缓解率趋势。FLT3/ITD基因突变可作为预测AML预后的一个指标。 展开更多
关键词 flt3基因 内部串联重复 恶性血液病
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PCR-SSCP检测急性髓系白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变 预览 被引量:3
6
作者 黄晶 刘力华 +2 位作者 张玲 刘民 谭岩 《中国实验诊断学》 北大核心 2009年第8期 1090-1092,共3页
目的研究急性髓系白血病(AML)患者DNA水平FLT3基因及其内部串联重复(ITD)突变。方法采用多聚酶链反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测43例不同免疫分型AML患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变。结果43例AML患者经PCR... 目的研究急性髓系白血病(AML)患者DNA水平FLT3基因及其内部串联重复(ITD)突变。方法采用多聚酶链反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测43例不同免疫分型AML患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变。结果43例AML患者经PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳FLT3基因检测全部阳性,未发现FLT3/ITD基因突变;SSCP电泳FLT3基因检测全部阳性,43例AML患者中有15例(35%)出现FLT3/ITD基因突变。结论PCR-SSCP适用于检测急性髓系白血病FLT3/ITD基因突变分析。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 flt3基因 flt3/ITD基因突变 多聚酶链反应
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白血病患者FLT3基因第二酪氨酸激酶结构域点突变分析 预览 被引量:2
7
作者 王莉红 王敏 +4 位作者 周春林 陈森 张新伟 邢海燕 王建祥 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期 335-338,共4页
目的研究FLT3基因酪氨酸激酶结构域(TKD)点突变与急性白血病的关系及临床意义.方法采用PCR结合限制性内切酶酶切及序列测定,检测143例急性髓系白血病(AML)、25例急性淋巴细胞白血病(ALL)、2例急性杂合细胞白血病(AHL)、17例骨髓增生异... 目的研究FLT3基因酪氨酸激酶结构域(TKD)点突变与急性白血病的关系及临床意义.方法采用PCR结合限制性内切酶酶切及序列测定,检测143例急性髓系白血病(AML)、25例急性淋巴细胞白血病(ALL)、2例急性杂合细胞白血病(AHL)、17例骨髓增生异常综合征(MDS)和7例慢性粒细胞白血病-急变期(CML-BC)患者骨髓单个核细胞中FLT3基因外显子20中的TKD点突变,分析其临床相关性.结果143例AML患者中9例(6.3%)存在FLT3-TKD点突变(FLT3-TKD+),阳性率显著低于FLT3基因内部串联重复(ITD)突变(25.9%,P<0.01).FLT3-TKD+存在于AML-M2(3/53)、M3(3/40)、M5(2/23)、M6(1/2)亚型中.2例FLT3-TKD+患者同时存在FLT3-ITD突变,M.M3各1例.在25例ALL、2例AHL、17例MDS和7例CML-BC患者中未检测到FLT3-TKD+.测序分析显示TKD点突变累及密码子D835,未改变FLT3的开放式阅读框架,为错义突变.D835的第1个核苷酸G被T替换,即D835Y.FLT3-TKD+组和FLT3-TKD-组在性别、年龄组成、白细胞计数、骨髓原始细胞比例及化疗缓解率方面差异无统计学意义.结论AML患者中FLT3-TKD点突变的阳性率显著低于FLT3-ITD.TKD点突变累及密码子D835,为错义突变.TKD点突变可单独存在,也可与ITD同时存在.与FLT3-ITD相比,TKD点突变与高白细胞无关. 展开更多
关键词 白血病 flt3基因 第二酪氨酸激酶结构域 突变
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FLT3基因3'-非翻译区-荧光素酶报告载体的构建及其活性鉴定 预览 被引量:5
8
作者 高晓宁 林季 +2 位作者 李永辉 王莉莉 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期694-697,共4页
为分析FMS样酪氨酸激酶3(FMS—like tyrosine kinase3,FLT3)基因3i非翻译区(3’untranslated region,3’-UTR)可能的微小RNA(miRNA)调控位点,构建FLT3基因3’-UTR-荧光素酶报告载体,与miRNA共转染293T细胞,分析miRNA对其调... 为分析FMS样酪氨酸激酶3(FMS—like tyrosine kinase3,FLT3)基因3i非翻译区(3’untranslated region,3’-UTR)可能的微小RNA(miRNA)调控位点,构建FLT3基因3’-UTR-荧光素酶报告载体,与miRNA共转染293T细胞,分析miRNA对其调控作用。采用PCR方法从HepG2细胞基因组DNA中扩增FLT3基因3,-UTR区序列,插入经PstI和EcoRI双酶切的经过改造的荧光素酶报告载体pGL3-control(pGL3-control—ITI);通过Target Scan5.1软件预测可能与FLT3基因3’-UTR作用的miRNA;采用FuGENEHD转染试剂包裹荧光素酶报告重组子和miRNA真核表达载体共转染293T细胞,双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。结果表明,成功构建了含有804bp的FLT3基因3’-UTR序列的荧光素酶报告重组子,通过酶切和基因测序的方法鉴定正确;miRNA靶位点预测显示,FLT3基因3’-UTR可能是miRNA-15a、miRNA-15b、miRNA-16、miRNA-195、miRNA-424、miRNA-497的作用靶点;与对照组相比,miRNA-15a、15b、195可使荧光素酶报告重组子的荧光素酶活性降低20%左右。结论:成功构建了FLT3基因3’-UTR-荧光素酶报告载体,而miRNA-15a、miRNA-15b、miRNA-195可抑制其荧光素酶活性。 展开更多
关键词 flt3基因 microRNA 3’-非翻译区 荧光素酶报告载体 基因调控 基因转染
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变性PAGE检测急性髓系白血病flt3基因突变及其临床意义 预览 被引量:5
9
作者 马亮 钟明华 +4 位作者 丰岱荣 龙红 沈军 马一盖 黄尚志 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第6期1386-1389,共4页
分析急性髓系白血病(AML)初诊患者flt3长度突变(flt3-LM)发生率及其与染色体核型及FAB亚型之间的关系,以及flt3-LM与疗效之间的关系。采用聚合酶链反应(PCR)扩增基因组DNA,应用2%琼脂糖凝胶与8%变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(PAGE)分... 分析急性髓系白血病(AML)初诊患者flt3长度突变(flt3-LM)发生率及其与染色体核型及FAB亚型之间的关系,以及flt3-LM与疗效之间的关系。采用聚合酶链反应(PCR)扩增基因组DNA,应用2%琼脂糖凝胶与8%变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(PAGE)分析结果,检测99例初诊AML患者flt3基因长度突变;应用G显带方法对其中72例初诊AML患者进行细胞遗传学分析。结果表明:应用琼脂糖凝胶检测AML患者flt3-LM发生率为20.2%(20/99),而应用变性PAGE检测初诊AML患者flt3-LM发生率为29.29%(29/99);flt3-LM在各亚型患者中发生率分别为M0(0/1)、M2(30%,9/30)、M3(22.2%,6/27)、M4(28.6%,4/14)、M5(36.8%,7/19)、M6(37.5%,3/8)。flt3-LM在正常核型组为39.13%(9/23),高于异常核型组(24.49%,12/49),但无统计学差异。73例可评价疗效患者中flt3-LM阳性完全缓解(CR)率36.36%(8/22),低于flt3-LM阴性患者CR率62.75%(32/51)(p〈0.05)。flt3-LM在完全缓解患者中占20%(8/40)、部分缓解(PR)患者中占38.1%(8/21)、未缓解(NR)患者中占50%(6/12)。结论:变性聚丙烯酰氨凝胶电泳检测flt3-LM比较敏感、可靠;flt3-LM在AML中发生率较高,但对AML的CR率有不利影响。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 变性PAGE flt3基因 核型分析
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Flt3基因在白血病中的表达及临床意义 预览 被引量:3
10
作者 李东 顾庆礼 《癌症:英文版》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第6期 589-593,共5页
目的 研究Flt3基因在不同类型、亚型白血病中mRNA表达、分布情况,以期阐明Flt3基因表达与疾病发生、发展的关系,探索Flt3基因作为白血病转归及预后指标的意义。方法 应用血细胞Percoll不连续密度度分离法分... 目的 研究Flt3基因在不同类型、亚型白血病中mRNA表达、分布情况,以期阐明Flt3基因表达与疾病发生、发展的关系,探索Flt3基因作为白血病转归及预后指标的意义。方法 应用血细胞Percoll不连续密度度分离法分离出外周血中原始细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),检测Flt3基因在109例恶性血液病患者外周血中表达。结果 初治AML(急性髓细胞性白血病)中Flt3基因mRNA表达为 展开更多
关键词 flt3基因 白血病 基因表达 MRNA PCR
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中药复方对急性髓细胞性白血病干细胞Flt3和N-ras基因表达的影响 预览 被引量:4
11
作者 徐瑞荣 王晓玲 +3 位作者 王敬毅 崔兴 王琰 李丽珍 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第40期 7969-7973,共5页
背景:在白血病患者体内存在一群白血病干细胞,这些恶性干细胞是白血病细胞存在和不断增殖的根源,针对干预白血病干细胞的特异性靶向治疗药物已成为近年来研究热点。目的:探讨中药复方对急性髓细胞性白血病干细胞Flt3和N-ras基因表达... 背景:在白血病患者体内存在一群白血病干细胞,这些恶性干细胞是白血病细胞存在和不断增殖的根源,针对干预白血病干细胞的特异性靶向治疗药物已成为近年来研究热点。目的:探讨中药复方对急性髓细胞性白血病干细胞Flt3和N-ras基因表达的影响。设计、时间及地点:随机区组实验,于2007-09/2008-12在山东中医药大学附属医院完成。对象:2006-2007年山东中医药大学附属医院、山东大学齐鲁医院血液科就诊的急性髓细胞性白血病初治患者50例,FAB分型M15例,M215例,M49例,M521例。方法:原方:黄芪、白花蛇舌草、小蓟、太子参、半枝莲、蒲公英、生地、黄精、女贞子、旱莲草、天冬、麦冬、白术、茯苓、甘草。扶正方:黄芪、太子参、生地、黄精、女贞子、天冬、麦冬、白术、茯苓、甘草。祛邪方:白花蛇舌草、小蓟、半枝莲、蒲公英、旱莲草。制剂:上述3组组方药物由山东中医药大学附属医院中药制剂实验室(国家三级重要制剂实验室)配制成1g/mL的药液,无菌试验阴性后过滤除菌备用。常规无菌采集急性髓细胞性白血病M1,M2,M4,M5型患者骨髓各5mL,稀释后加入淋巴细胞分离液,联合应用免疫磁珠分选系统和流式细胞仪分离纯化白血病干细胞。调整细胞浓度至2×108L-1,均分成4组:对照组不加药物,实验组分别加入原方、扶正方、祛邪方的对应中药制剂,终浓度为100mg/L,继续培养48h后进行指标检测。主要观察指标:RT-PCR法检测Flt3、N-ras基因的表达。结果:与对照组比较,原方组、扶正方组、祛邪方组Flt3表达阳性率均明显降低(P〈0.05),但原方组降低幅度明显大于扶正方组、祛邪方组(P〈0.05);扶正方组与祛邪方组Flt3表达阳性率比较无明显差异(P〉0.05)。4组N-ras表达阳性率与Flt3表达情况基本一致。结论:Flt3和N-ras基因在白血病干细胞中存在过度表� 展开更多
关键词 中药 急性白血病干细胞 flt3基因 N-RAS基因 RT-PCR
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骨髓增生异常综合征患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变的检测及价值 预览 被引量:1
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作者 徐兵 徐晓兰 +1 位作者 周淑芸 孟凡义 《广东医学》 CAS CSCD 2003年第11期 1186-1188,共3页
目的研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变情况.方法采用聚合酶链反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)分析36例MDS患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变.结果 36例MDS患者中9例(25%)FLT3基因检测阳性,难治性贫... 目的研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变情况.方法采用聚合酶链反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)分析36例MDS患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变.结果 36例MDS患者中9例(25%)FLT3基因检测阳性,难治性贫血伴原始细胞增多(RAEB)、慢性粒单细胞白血病和转变中的RAEB(RAEBT)组FLT3基因检测阳性率显著高于难治性贫血(RA)和环形铁粒幼细胞性难治性贫血(RAS)组(P<0.025).FLT3基因检测阳性MDS转化为急性髓性白血病(AML)时间显著短于FLT3检测阴性患者(P<0.05).36例MDS患者中有2例(5.6%)出现FLT3/ITD基因突变,RAEB及RAEBT各1例.结论部分MDS患者可检测出FLT3基因表达和FLT3基因突变,FLT3基因及FLT3/ITD基因突变检测可能有助于MDS的预后判断. 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 flt3基因 flt3/ITD基因 基因突变 检测
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一种同时检测急性髓系白血病FLT3-ITD和NPM1基因突变的快速和简便方法 被引量:3
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作者 陆滢 汪琼 +3 位作者 牧启田 余梦霞 黄勤 金洁 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期 163-166,共4页
目的建立用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE)同时快速检测正常核型急性髓细胞白血病(cytogeneticallynormalacutemyeloidleukemia,CN—AML)患者FLT3-ITD和NPM1基因突变的方法。方法在多重PCR基础上... 目的建立用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE)同时快速检测正常核型急性髓细胞白血病(cytogeneticallynormalacutemyeloidleukemia,CN—AML)患者FLT3-ITD和NPM1基因突变的方法。方法在多重PCR基础上,用毛细管电泳法(capillaryelectrophoresis,CE)和PAGE凝胶电泳法同时检测117例初发CN-AML患者的FLT3-ITD和NPM1基因突变。结果突变型双链DNA分子,如突变型FLT3和NPM1的长度均比野生型长(FLT3-mut:420bp〉FLT3-wt:327~332bp,NPM1-mut:172bp〉NPMI—wt:168bp),因此,在PAGE凝胶电泳中突变双链DNA比未突变的DNA移动得慢,从而可将突变检出。117例CN—AML患者均通过CE检测得到验证,其结果与PAGE凝胶电泳结果完全一致(FLT3-ITD+/NPM1-患者18例,占15.4%;FLT3-ITD+/NPM1+患者19例,占16.2%;FLT3-ITD-/NPM1+患者25例,占21.4%;FLT3-ITD-/NPM1-患者55例,占47.0%)。结论两种电泳法均可快速、简便地同时检测CN—AML患者FLT3-ITD和NPM1基因突变。CE检测敏感,图像清晰;PAGE凝胶电泳法则操作简单,成本低,结果可靠,更适于在基层医院开展初步筛查。 展开更多
关键词 聚丙烯酰胺凝胶电泳 毛细管电泳 急性髓系白血病 flt3基因 NPM1基因
PCR分析急性淋巴细胞白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变 预览 被引量:2
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作者 徐兵 周淑芸 +1 位作者 李冰 林榕 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期 978-979,共2页
目前研究发现约30%急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者FLT3基因近膜区发生内部串联重复(ITD)突变,称为FLT3/ITD基因突变,该突变与ANLL的预后存在密切关系[1].为进一步研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变,采用PCR... 目前研究发现约30%急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者FLT3基因近膜区发生内部串联重复(ITD)突变,称为FLT3/ITD基因突变,该突变与ANLL的预后存在密切关系[1].为进一步研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变,采用PCR技术分析63例ALL患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变. 展开更多
关键词 PCR分析 急性淋巴细胞白血病 flt3基因 flt3/ITD 基因突变
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PCR-SSCP分析急性淋巴细胞白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变及意义
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作者 徐兵 李琳 +1 位作者 唐家宏 周淑芸 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第10期 1207-1210,共4页
目的研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患者DNA水平FLT3基因及其内部串联重复(ITD)突变情况.方法采用多聚酶链反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测63例不同免疫分型ALL患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变.结果63例ALL患者经PCR扩... 目的研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患者DNA水平FLT3基因及其内部串联重复(ITD)突变情况.方法采用多聚酶链反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测63例不同免疫分型ALL患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变.结果63例ALL患者经PCR扩增发现41例(65.1%)FLT3基因检测阳性,其中前前B细胞ALL、前B细胞ALL、成熟B细胞ALL及T细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率分别为93.3%(14/15),77.8%(14/18),41.7%(5/12)和28.6%(4/14);前前B细胞ALL和前B细胞患者ALL FLT3基因检测阳性率84.8%,显著高于成熟B细胞ALL(41.7%,P<0.005);B细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率为73.3%,显著高于T细胞系ALL患者(28.6%,P<0.001).63例ALL患者中仅有2例(3.2%)出现FLT3/ITD基因突变,均为伴有两种髓系抗原表达、免疫学检查诊断为急性混合细胞白血病患者,均伴有外周血高白细胞数、骨髓中高白血病细胞比例,预后较差.结论B细胞系ALL和T细胞系ALL患者DNA水平均可检测出FLT3基因,但B细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率显著高于T细胞系ALL;B细胞系ALL中细胞分化越成熟则FLT3基因检测率阳性越低.ALL患者一般不出现FLT3/ITD基因突变,FLT3/ITD基因突变检测可能有助于急性白血病基因分型及预后判断. 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 flt3基因 flt3/ITD基因突变 多聚酶链反应
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实时荧光定量PCR检测急性髓系白血病患者FLT3基因的表达水平及意义 被引量:2
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作者 徐兵 唐家宏 +2 位作者 宋小燕 周淑芸 胡斌 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1173-1175,共3页
FLT3(fms-like tyrosine kinase 3 )基因是近年来发现的具有酪氨酸激酶活性的生长因子受体基因,它与FLT3配体结合能诱导受体自主磷酸化,并通过各种细胞浆相关蛋白的传导激活信号而对造血发育过程起重要的调节作用。目前研究发现,2... FLT3(fms-like tyrosine kinase 3 )基因是近年来发现的具有酪氨酸激酶活性的生长因子受体基因,它与FLT3配体结合能诱导受体自主磷酸化,并通过各种细胞浆相关蛋白的传导激活信号而对造血发育过程起重要的调节作用。目前研究发现,20%左右急性髓系白血病(AML)患者出现FLT3基因近膜区框架内的串联重复(FLT3/ITD)突变,具有FLT3/ITD突变的AML患者预后差, 展开更多
关键词 急性髓系白血病 flt3基因 荧光定量PCR检测 白血病患者 flt3/ITD flt3配体 胞浆相关蛋白 受体基因
FLT3-ITD突变检测及其临床意义 预览 被引量:4
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作者 马亮 马一盖 《中日友好医院学报》 2011年第3期 178-180,184,共4页
Fms样酪氨酸激酶-3(fms-like tyrosine kinase-3,FLT3)是Ⅲ型受体酪氨酸激酶家族成员,在约20%-30%的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中FLT3基因中外显子14和15存在内部串联重复(FLT3 in-tema]tandemduplication,F... Fms样酪氨酸激酶-3(fms-like tyrosine kinase-3,FLT3)是Ⅲ型受体酪氨酸激酶家族成员,在约20%-30%的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中FLT3基因中外显子14和15存在内部串联重复(FLT3 in-tema]tandemduplication,FLT3-ITD),近年来对于FLT3突变的检测、预后意义以及FLT3抑制剂的应用研究比较深入.本文对此作一综述。 展开更多
关键词 突变检测 临床意义 FMS样酪氨酸激酶 Ⅲ型受体酪氨酸激酶 flt3基因 急性髓系白血病 内部串联重复 家族成员
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我如何治疗FLT3-ITD突变阳性急性髓系白血病
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作者 王建祥 《中华血液学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期1-4,共4页
FLT3基因编码的酪氨酸激酶参与造血发育。在急性髓系白血病(AML)患者中存在两种FLT3基因突变:一种为FLT3基因激酶区的点突变(TKD),另一种为FLT3基因内部串联重复(ITD)。1996年一个日本研究组在研究将FLT3mRNA作为微小残留病检... FLT3基因编码的酪氨酸激酶参与造血发育。在急性髓系白血病(AML)患者中存在两种FLT3基因突变:一种为FLT3基因激酶区的点突变(TKD),另一种为FLT3基因内部串联重复(ITD)。1996年一个日本研究组在研究将FLT3mRNA作为微小残留病检测指标时发现了FLT3-ITD突变。这类突变是FLT3基因的近膜区序列ITD,为非移码突变, 展开更多
关键词 急性髓系白血病 点突变 flt3基因 酪氨酸激酶 阳性 治疗 内部串联重复 微小残留病
FLT3基因动态监测在急性髓系白血病治疗中的应用 预览 被引量:2
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作者 李树 王彤 +2 位作者 王杰 李军 张璐 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期 705-708,共4页
微小残留病(Minute Residual Disease,MRD)是急性髓系白血病(Acute myeloid leukaemia,AML)复发和妨碍长期无病生存率的重要原因。本研究旨在探讨FLT3基因在AML发病中的作用及对微小残留病(MRD)检测的意义。应用PCR技术检测了125... 微小残留病(Minute Residual Disease,MRD)是急性髓系白血病(Acute myeloid leukaemia,AML)复发和妨碍长期无病生存率的重要原因。本研究旨在探讨FLT3基因在AML发病中的作用及对微小残留病(MRD)检测的意义。应用PCR技术检测了125例AML患者在化疗与异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗前后FLT3基因的表达,并对FLT3基因阳性者进行了随访观察。结果表明:PCR检测FLT3基因的灵敏度为10-4;AML初诊患者中FLT3基因的阳性表达率为69.6%;完全缓解(CR)患者FLT3表达基因阳性表达率44.90%,FLT3转为阴性者占48.98%;FLT3表达无改变者占6.12%;复发者FLT3基因表达转为阳性,而未缓解者FLT3持续阳性,治疗前FLT3阳性AML患者完全缓解率低于FLT3基因表达阴性患者,两者有显著性差异(p〈0.05)。获得CR的FLT3阳性AML患者的复发率显著高于FLT3阴性患者(p〈0.05)。结论:FLT3基因表达与白血病发生有关,PCR动态检测AML患者治疗前后FLT3表达水平,可作为判断AML白血病预后和监测微量残留病的一项指标。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 flt3基因 MRD 白血病预后 PCR
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FLT3基因在各种血液肿瘤患者中的表达及其临床意义 预览 被引量:1
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作者 唐家宏 徐兵 +1 位作者 李琳 李冰 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期 981-983,共3页
目的 为进一步研究各种类型血液肿瘤患者FLT3基因的表达情况。方法 采用多聚酶链反应(PCR)方法检测103例初治AML、76例急性淋巴细胞白血病(ALL)、53例慢性粒细胞白血病(CML)慢性期、31例CML急变期、11例慢性淋巴细胞白血病(CLL)... 目的 为进一步研究各种类型血液肿瘤患者FLT3基因的表达情况。方法 采用多聚酶链反应(PCR)方法检测103例初治AML、76例急性淋巴细胞白血病(ALL)、53例慢性粒细胞白血病(CML)慢性期、31例CML急变期、11例慢性淋巴细胞白血病(CLL)、36骨髓增生异常综合征(MDS)患者、9例多发性骨髓瘤(MM)及13例伴有骨髓侵犯非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者FLT3基因表达情况。结果 FLT3基因在各种血液肿瘤表达为AML患者90.3%(93/103)、ALL患者60.5%(46/76)、CML慢性期患者5.7%(3/53)、CML急变期患者61.3%(19/31)、CLL患者9.1%(1/11)、MDS患者25.0%(9/36)。9例MM和7例伴有骨髓浸润NHL患者均未发现FLT3基因表达。AML患者FLT3基因检测阳性率显著高于其他类型白血病患者,CML急变期患者FLT3基因检测阳性率显著高于慢性期患者,ALL患者FLT3基因检测阳性率显著高于CLL患者。结论 各种类型白血病均可出现FLT3基因的表达,但表达率不同,以AML最高,而CLL和CML慢性期最低,FLT3基因在急性髓系白血病恶性克隆的增殖和维持中起重要作用。 展开更多
关键词 flt3基因 血液肿瘤 多聚酶链反应
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