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钛表面粗糙度对成纤维细胞生长影响的研究进展 预览
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作者 江瑶 黎红 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第8期738-740,共3页
种植体与结缔组织的成功结合对种植体远期成功起了至关重要的作用。良好的软组织结合与纯钛表面粗糙度关系密切,而软组织中成纤维细胞在种植体表面的粘附及增殖是建立以及维持良好的黏膜封闭的关键部分。因此近年来,研究人员探索了众多... 种植体与结缔组织的成功结合对种植体远期成功起了至关重要的作用。良好的软组织结合与纯钛表面粗糙度关系密切,而软组织中成纤维细胞在种植体表面的粘附及增殖是建立以及维持良好的黏膜封闭的关键部分。因此近年来,研究人员探索了众多纯钛表面粗糙度与成纤维细胞的体内外实验,并得到了不同的结果。本文就近年来纯钛种植体表面粗糙度对于成纤维细胞生长影响的研究进展作一综述,为今后口腔种植领域的发展提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 纯钛种植体 表面形貌 粗糙度 成纤维细胞 软组织封闭
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芒柄花黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的作用 预览
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作者 回蔷 林时秀 +3 位作者 郭冰玉 常鹏 徐志山 陶凯 《实用药物与临床》 CAS 2019年第5期471-475,共5页
目的探讨芒柄花黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的作用。方法获取手术切除的人增生性瘢痕组织以及局部皮瓣转移修复后剩余的正常皮肤,提取成纤维细胞。通过MTT试验检测不同浓度的芒柄花黄素对成纤维细胞增殖的作用,应用流式细胞术对... 目的探讨芒柄花黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的作用。方法获取手术切除的人增生性瘢痕组织以及局部皮瓣转移修复后剩余的正常皮肤,提取成纤维细胞。通过MTT试验检测不同浓度的芒柄花黄素对成纤维细胞增殖的作用,应用流式细胞术对芒柄花黄素处理后的成纤维细胞周期进行分析。通过An-nexinV-FITC/PI双染色法和Hoechest33258染色观察成纤维细胞的凋亡情况。通过Western blot与RT-PCR试验,检测芒柄花黄素对细胞周期蛋白Cyclin D1和凋亡调节蛋白Bcl-2的作用。结果与对照组比较,芒柄花黄素对正常皮肤成纤维细胞的增殖影响较小,对增生性瘢痕成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用,且药物浓度越高、作用时间越长,抑制作用越强。成纤维细胞大部分阻滞于G1期,S期的细胞减少,细胞周期的进程受到阻断。芒柄花黄素能够通过抑制细胞周期蛋白Cyclin D1来影响细胞周期的进程,将细胞周期阻滞于G1期;通过抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达诱导成纤维细胞的凋亡,从而实现对细胞生长的抑制作用。结论芒柄花黄素能够抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖并诱导其凋亡,可考虑用于增生性瘢痕的预防与临床治疗。 展开更多
关键词 芒柄花黄素 增生性瘢痕 成纤维细胞 增殖 凋亡
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补骨脂酚对光老化HSF细胞保护作用研究 预览
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作者 刘国良 姚远 +3 位作者 张宁 郭玮 王瑶 刘斌 《中国医药导报》 CAS 2019年第19期11-15,24共6页
目的研究补骨脂酚对中波紫外线(UVB)照射诱导的光老化人皮肤成纤维细胞(HSF)的保护作用。方法体外培养HSF细胞,分为空白组(正常培养,不进行UVB辐射)、UVB模型组(UVB辐射)、雌二醇组及补骨脂酚低(1μmol/L)、中(10μmol/L)、高(100μmol... 目的研究补骨脂酚对中波紫外线(UVB)照射诱导的光老化人皮肤成纤维细胞(HSF)的保护作用。方法体外培养HSF细胞,分为空白组(正常培养,不进行UVB辐射)、UVB模型组(UVB辐射)、雌二醇组及补骨脂酚低(1μmol/L)、中(10μmol/L)、高(100μmol/L)剂量组。采用MTT法检测细胞活力;采用Western blot法检测细胞内Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的表达量;采用逆转录PCR法(RT-PCR)检测细胞COLⅠ、MMP-1 mRNA的表达水平。结果确定光老化HSF细胞模型的最佳UVB照射剂量为25 mJ/cm2。与空白组比较,补骨脂酚低、中、高剂量组细胞活力及MMP-1、MMP-3、COLⅠ分泌差异无统计学意义(P> 0.05);UVB模型组的细胞活力、COLⅠ的表达水平显著下降(P <0.05),MMP-1和MMP-3的表达水平显著上升(P <0.05);MMP-1 mRNA表达水平升高、COLⅠmRNA表达水平下降(P <0.05)。与UVB模型组比较,补骨脂酚低、中、高剂量组细胞活力、COLⅠ的表达量显著上升(P <0.05),MMP-1和MMP-3的表达水平显著下降(P <0.05),MMP-1 mRNA表达下降、COLⅠmRNA表达上升(P <0.05)。结论补骨脂酚能够促进HSF细胞COLⅠ表达,抑制MMP-1与MMP-3的表达,防护UVB对HSF细胞的损伤,发挥抗皮肤光老化的作用。 展开更多
关键词 中波紫外线 补骨脂酚 成纤维细胞 植物雌激素 光老化
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两种富血小板纤维蛋白对人牙龈成纤维细胞增殖活性影响的比较 预览
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作者 王灿莉 焦志立 +1 位作者 孙勇 孙嵩 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第7期1007-1012,共6页
背景:自体血液制成的富血小板纤维蛋白在促进软组织再生修复方面成为研究热点。目的:对比2种富血小板纤维蛋白对人牙龈成纤维细胞生长速度的影响,为临床中选择口腔软组织再生修复材料提供参考。方法:阻生牙拔除同期取患牙周围健康龈瓣(8... 背景:自体血液制成的富血小板纤维蛋白在促进软组织再生修复方面成为研究热点。目的:对比2种富血小板纤维蛋白对人牙龈成纤维细胞生长速度的影响,为临床中选择口腔软组织再生修复材料提供参考。方法:阻生牙拔除同期取患牙周围健康龈瓣(8例),组织块培养法获取人牙龈成纤维细胞并进行鉴定。抽取对应患者静脉血分别制成改良型富血小板纤维蛋白、富血小板纤维蛋白,8例样本均取第5代细胞分改良型富血小板纤维蛋白、富血小板纤维蛋白、空白组3组进行培养,于第1,3,5及7天,CCK-8法检测细胞增殖活性。结果与结论:①培养的人牙龈成纤维细胞Vimentin染色阳性,Cytokeratin染色阴性;②成功获得2种富血小板纤维蛋白凝胶;与富血小板纤维蛋白相比,改良型富血小板纤维蛋白颜色较深,膜更厚,韧性更好;③CCK-8结果显示,第1天,3组细胞增殖活性无显著差异(P>0.05);第3天,改良型富血小板纤维蛋白和富血小板纤维蛋白组的细胞增殖活性显著高于空白组(P<0.05);第5和7天,细胞增殖活性表现为改良型富血小板纤维蛋白组>富血小板纤维蛋白组>空白组(P<0.01,P<0.05);④结果提示,改良型富血小板纤维蛋白、富血小板纤维蛋白均能提高成纤维细胞增殖活性,且改良型富血小板纤维蛋白促细胞增殖效果明显优于富血小板纤维蛋白。 展开更多
关键词 富血小板纤维蛋白 改良型富血小板纤维蛋白 人牙龈成纤维细胞 软组织缺损 引导组织再生 细胞增殖 组织块培养 组织构建 纤维蛋白 软组织损伤 成纤维细胞 引导组织再生术 细胞培养技术 组织工程
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经皮植入物与周围软组织整合研究进展
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作者 吴昊 雷星 +4 位作者 李俊琴 张帅帅 程朋真 毕龙 裴国献 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1143-1147,共5页
经皮植入物周围感染是导致植入失败及相关并发症的主要原因,良好的软组织密封和完整的上皮屏障对于抵抗外界侵扰和细菌的侵袭起到关键作用。本文从人体皮肤和天然经皮结构出发,探究这些精妙的生物结构周围复杂的整合机制,为构建更为合... 经皮植入物周围感染是导致植入失败及相关并发症的主要原因,良好的软组织密封和完整的上皮屏障对于抵抗外界侵扰和细菌的侵袭起到关键作用。本文从人体皮肤和天然经皮结构出发,探究这些精妙的生物结构周围复杂的整合机制,为构建更为合理的仿生植入物指明方向。经皮植入物穿透皮肤(黏膜)和软组织,启动创伤愈合反应,良好愈合是达到周围软组织密封的基础。在显微镜下观察时,上皮细胞的增殖和成纤维细胞的黏附是愈合过程的关键。通过使用不同的材料和(或)改变植入物的表面结构,可诱导成纤维细胞的黏附与长入,从而阻止上皮细胞下移。在植入物表面涂覆生物分子同样可以促进创面愈合,但尚长期随访观察。相信随着纳米技术和生物材料学的迅猛发展,经皮植入物软组织整合领域也一定会有长足的进步。 展开更多
关键词 经皮植入物 骨科植入物 上皮细胞 成纤维细胞 软组织整合
形觉剥夺性近视模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达及Wnt/β-catenin信号通路的调控作用 预览
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作者 张新 巨朝娟 +1 位作者 张剑 赵燕 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期861-866,共6页
目的:构建形觉剥夺性近视(FDM)大鼠模型,阐明FDM大鼠巩膜成纤维细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及其与Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的关系。方法: 40只大鼠随机分为对照组和FDM模型组,每组20只,FDM模型组大鼠建立FDM模型... 目的:构建形觉剥夺性近视(FDM)大鼠模型,阐明FDM大鼠巩膜成纤维细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及其与Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的关系。方法: 40只大鼠随机分为对照组和FDM模型组,每组20只,FDM模型组大鼠建立FDM模型。测定大鼠眼轴长度;取大鼠眼球分离巩膜组织,采用Western blotting法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定大鼠巩膜组织中TGF-β1蛋白和mNRA表达水平。分离培养对照组和FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞,对照组大鼠巩膜成纤维细胞作为对照组,FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞分为FDM组和FDM+Dickkopf相关蛋白1(DDK1)组(加入DDK1培养),采用Western blotting法和RT-PCR法测定各组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、3型核糖核酸酶(DCL3)、结肠腺瘤样息肉蛋白(APC)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平。结果:与对照组比较,FDM组大鼠眼轴长度均明显增加(P<0.05),巩膜组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达水平均明显降低(P<0.01)。对照组、FDM组和FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中GSK3β蛋白和mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05),TGF-β1、DCL3、APC、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平比较差异有统计学意义(P<0.01);与对照组比较,FDM组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平降低(P<0.05),DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05);与FDM组比较,FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05),DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论: FDM模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达水平降低,其水平受Wnt/β-catenin信号通路调控。 展开更多
关键词 近视 巩膜 成纤维细胞 转化生长因子Β1 Wnt/β-连环蛋白 大鼠 SD
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芦荟大黄素对培养人成纤维细胞Smad 2与I型胶原表达及细胞周期的影响 预览
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作者 杨成华 程基焱 《医学理论与实践》 2019年第2期157-159,共3页
目的:探讨中药大黄提取物芦荟大黄素对培养人成纤维细胞Smad 2、Ⅰ型胶原蛋白表达及细胞周期的影响,分析芦荟大黄素对成纤维细胞的调控作用及作用机制。方法:体外培养人成纤维细胞,用芦荟大黄素进行干扰,分为对照组(CG)、低剂量组(50-TG... 目的:探讨中药大黄提取物芦荟大黄素对培养人成纤维细胞Smad 2、Ⅰ型胶原蛋白表达及细胞周期的影响,分析芦荟大黄素对成纤维细胞的调控作用及作用机制。方法:体外培养人成纤维细胞,用芦荟大黄素进行干扰,分为对照组(CG)、低剂量组(50-TG)、中剂量组(100-TG)、高剂量组(500-TG),观察细胞生长特征,并用量子点免疫荧光技术检测Smad 2、Ⅰ型胶原的表达,流式细胞仪检测的细胞周期。结果:(1)干扰48h后,实验组Smad 2表达的荧光强度,与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);(2)0x09实验组Ⅰ型胶原表达,与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);(3)流式细胞仪检测细胞周期结果显示,对照组、实验组G1期细胞所占比例比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:芦荟大黄素对培养成纤维细胞的Smad 2、Ⅰ型胶原蛋白表达具有调控作用,并能影响其细胞周期和细胞的活性,可能是含有芦荟大黄素的中药如芦荟、大黄等调控成纤维细胞功能的主要机制之一。 展开更多
关键词 芦荟大黄素 成纤维细胞 SMAD 2 Ⅰ型胶原 细胞周期
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组蛋白去乙酰化酶在特发性肺纤维化和隐源性机化性肺炎发病机制中的作用
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作者 李珊 刘永哲 +3 位作者 黄慧 张倩 方楚玲 徐作军 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期361-366,共6页
目的探讨组蛋白去乙酰化酶在特发性肺纤维化(IPF)和隐源性机化性肺炎(COP)发病机制中的作用。方法收集2018年3—10月在北京协和医院呼吸科确诊的IPF患者15例(IPF组),男14例,女1例,年龄40~73岁,平均(59±8)岁;7例尚未治疗,6例正在使... 目的探讨组蛋白去乙酰化酶在特发性肺纤维化(IPF)和隐源性机化性肺炎(COP)发病机制中的作用。方法收集2018年3—10月在北京协和医院呼吸科确诊的IPF患者15例(IPF组),男14例,女1例,年龄40~73岁,平均(59±8)岁;7例尚未治疗,6例正在使用吡非尼酮,2例使用N-乙酰半胱氨酸。COP患者15例(COP组),男5例,女10例,年龄41~71岁,平均(59±8)岁;7例尚未治疗,7例使用糖皮质激素,1例使用克拉霉素。同期无呼吸道疾病的体检者15例(对照组),男4例,女11例,年龄43~70岁,平均(58±6)岁。采集外周血并分离外周血单个核细胞(PBMC)进行核质分离,通过荧光法测定组蛋白去乙酰化酶总体活性,并分析其与各组主要实验室指标及肺功能参数的相关性。结果 IPF组和COP组PBMC胞质蛋白中组蛋白去乙酰化酶活性分别为(724±216)、(718±245)nmol/L,高于对照组的(409±105)nmol/L(均P<0.01)。IPF组和COP组核蛋白组蛋白去乙酰化酶活性分别为(2 309±708)和(3 310±1 005)nmol/L,高于对照的(1 572±611)nmol/L(均P<0.01)。COP患者PBMC核蛋白中组蛋白去乙酰化酶活性高于IPF患者(Z=-2.840,P=0.005)。PBMC核蛋白中组蛋白去乙酰化酶活性与IPF患者FEV1占预计值%和DLCO占预计值%呈负相关(r=-0.574,P=0.025;r=-0.583,P=0.029),与COP患者FVC占预计值%和肺总量占预计值%(TLC占预计值%)呈负相关(r=-0.846,P=0.016;r=-0.900,P=0.015)。结论组蛋白去乙酰化酶可能参与了COP及IPF的发病过程。 展开更多
关键词 特发性间质性肺炎 组蛋白去乙酰化酶 成纤维细胞
DDX5对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖及凋亡的影响
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作者 陈祝锋 王晓艳 《中国骨与关节杂志》 CAS 2019年第4期299-302,共4页
目的探讨DDX5在类风湿关节炎滑膜中的表达,及其对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法应用RT-qPCR检测类风湿关节炎滑膜组织中DDX5的表达;取行关节置换的类风湿关节炎患者滑膜细胞原代培养,转染siDDX5 72 h后,CCK8检测细... 目的探讨DDX5在类风湿关节炎滑膜中的表达,及其对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法应用RT-qPCR检测类风湿关节炎滑膜组织中DDX5的表达;取行关节置换的类风湿关节炎患者滑膜细胞原代培养,转染siDDX5 72 h后,CCK8检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果DDX5 mRNA表达,类风湿关节炎组(1.61±0.63)高于对照组(1.00±0.00),(P<0.05,t=4.56)差异有统计学意义;成纤维细胞增殖活性:转染72 h后,转染siDDX5组(0.81±0.02)低于转染siCtrl组(0.89±0.009),(P<0.01,t=5.5),差异有统计学意义;细胞凋亡:转染72 h后,转染siDDX5组(21.7±2.12)高于转染siCtrl组(13.4±1.44),(P<0.05,t=5.35),差异有统计学意义。结论 DDX5可能通过促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖,抑制凋亡,参与滑膜增生。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 滑膜炎 成纤维细胞 DDX5
肿瘤相关成纤维细胞自噬对三阴性乳腺癌细胞转移的影响 预览
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作者 王梦川 张健 +3 位作者 纪术峰 赵侃侃 王子祥 吴爱国 《中华乳腺病杂志(电子版)》 CAS CSCD 2019年第1期8-15,共8页
目的探讨三阴性乳腺癌(TNBC)细胞和肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)共培养环境下,CAFs自噬促进TNBC细胞转移的作用机制。方法 (1)分离和鉴定CAFs:采用前瞻性研究方法收集2015年1月至2016年12月期间,就诊于南方医科大学珠江医院的6例TNBC患者(... 目的探讨三阴性乳腺癌(TNBC)细胞和肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)共培养环境下,CAFs自噬促进TNBC细胞转移的作用机制。方法 (1)分离和鉴定CAFs:采用前瞻性研究方法收集2015年1月至2016年12月期间,就诊于南方医科大学珠江医院的6例TNBC患者(临床分期Ⅱ~Ⅲ期)的肿瘤组织和癌旁正常组织,从这些标本中分离CAFs和正常成纤维细胞(NFs)。进一步采用荧光抗体标记抗α平滑肌肌动蛋白(α-SMA),并计算α-SMA阳性细胞比例,采用Western blot检测CAFs和NFs的α-SMA表达水平,以鉴定CAFs为本实验所需。(2)评估CAFs自噬水平:利用Western blot检测CAFs组、NFs组和CAFs+3-MA组(加入自噬抑制剂3-MA的CAFs)自噬标志蛋白beclin 1和p62的表达水平。(3)明确CAFs自噬对MDA-MB-231和BT-549细胞迁移的作用:采用Transwell小室模型观察不同培养条件[分4组,包括空白组(含10%FBS的DMEM培养基,即普通培养基)、NFs组、CAFs组和CAFs+3-MA组]下MDA-MB-231和BT-549的细胞迁移数。(4)明确CAFs自噬对MDA-MB-231和BT-549细胞发生上皮-间质转化(EMT)的影响:采用Western blot检测3种培养条件[普通培养基(空白组)、CAFs条件培养基(CAFs-CM组)和加入3-MA的CAFs条件培养基(CAFs+3-MA-CM组)]下MDA-MB-231和BT-549 EMT相关蛋白(E-cadherin,N-cadherin, vimentin)的表达情况。正态分布的数据用■表示,偏态分布的数据用M(P25-P75)表示。2组间α-SMA表达水平比较采用两独立样本非参数秩和检验,α-SMA阳性细胞比例比较采用两独立样本t检验,各组间细胞自噬标志蛋白表达水平、细胞迁移数和EMT相关蛋白表达水平的比较均采用单因素方差分析。结果 (1)荧光显微镜下观察发现,每视野下CAFs组α-SMA阳性细胞比例显著高于NFs组[(81.11±3.95)%比(5.11±2.37)%,t=49.49,P<0.001);Western blot检测表明,CAFs组α-SMA表达水平也高于NFs组[M(P25~P75):0.98(0.95~0.98)比0.48(0.47~0.48),Z=2.023,P=0.043]。(2)CAFs组、NFs组和CAFs+3-MA组细胞beclin 1表� 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 成纤维细胞 自噬
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乳糜化脂肪对移植于裸鼠背部皮下的人增生性瘢痕影响的实验研究 预览
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作者 陈俊男 赖琳英 +5 位作者 马奎 黄桢雅 周云超 周桂文 梁黎明 陈敏亮 《中华损伤与修复杂志(电子版)》 CAS 2019年第3期188-194,共7页
目的评价乳糜化脂肪对移植于裸鼠背部皮下人增生性瘢痕的影响。方法选取18只BALB/c裸鼠;收集解放军总医院第四医学中心烧伤整形科行腹部、大腿外侧部脂肪负压抽吸手术获取的脂肪颗粒细胞及面、颈部手术切除的增生性瘢痕组织;脂肪颗粒细... 目的评价乳糜化脂肪对移植于裸鼠背部皮下人增生性瘢痕的影响。方法选取18只BALB/c裸鼠;收集解放军总医院第四医学中心烧伤整形科行腹部、大腿外侧部脂肪负压抽吸手术获取的脂肪颗粒细胞及面、颈部手术切除的增生性瘢痕组织;脂肪颗粒细胞经过纳米转换头等操作处理为乳糜化脂肪;无菌条件下将增生性瘢痕组织切割成多块小样本;用眼科剪于各个裸鼠背部各作4个皮肤切口,稍做游离后将前述人增生性瘢痕组织块埋植入切口内,制备增生性瘢痕裸鼠动物模型。18只裸鼠按照随机数字表法分为3组,对照组,曲安奈德组和乳糜化脂肪组,每组6只裸鼠,24块瘢痕组织。移植后1周,对照组于每块移植瘢痕组织块内注射0.9%氯化钠溶液(0.05 mL/g);曲安奈德组注射曲安奈德注射液(0.05 mL/g);乳糜化脂肪组注射乳糜化脂肪(0.05 mL/g);之后每周各注射1次。移植后4周取材,比较移植前人增生性瘢痕组织块重量、移植后4周人增生性瘢痕组织块重量变化百分比;行苏木精-伊红染色和Masson染色,生物显微镜下观察组织形态学变化;比较Masson染色半定量分析阳性面积(天蓝色)占整体视野总面积的百分比。行免疫组织化学染色检测核心蛋白聚糖表达。对数据行单因素方差分析和Dunnett-t检验。结果移植前,3组人增生性瘢痕组织块重量比较,差异无统计学意义(F=26.230,P=0.119),移植后4周,乳糜化脂肪组、曲安奈德组、对照组人增生性瘢痕组织块重量变化百分比分别为(73.2±15.9)%、(79.5±8.6)%、(87.0±14.9)%,比较差异有统计学意义(F=16.680,P=0.042),乳糜化脂肪组分别与对照组、曲安奈德组比较,差异均有统计学意义(t=14.130、1.228,P=0.010、0.099)。组织学观察可见,苏木精-伊红染色与Masson染色整体变化趋势相符:对照组真皮层可见大量胶原纤维及纤维细胞,胶原纤维排列紊乱;曲安奈德组真皮层见粗大胶原纤维, 展开更多
关键词 乳糜 脂肪组织 瘢痕 增生 小鼠 成纤维细胞 胶原
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碱性调宁蛋白对糖尿病大鼠烧伤创面成纤维细胞增殖与凋亡的影响 预览
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作者 周彪 张军 +5 位作者 王凌峰 巴特 孙一凡 侯智慧 陈强 闫增强 《中华损伤与修复杂志(电子版)》 CAS 2019年第3期195-201,共7页
目的探讨碱性调宁蛋白在糖尿病大鼠烧伤创面愈合过程中的表达情况及其对成纤维细胞增殖与凋亡的影响。方法选64只雄性Wistar大鼠,按随机数字表法分为实验组和对照组,每组32只。实验组大鼠,腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg,制作糖尿病大鼠模... 目的探讨碱性调宁蛋白在糖尿病大鼠烧伤创面愈合过程中的表达情况及其对成纤维细胞增殖与凋亡的影响。方法选64只雄性Wistar大鼠,按随机数字表法分为实验组和对照组,每组32只。实验组大鼠,腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg,制作糖尿病大鼠模型;对照组大鼠,腹腔注射0.9%氯化钠溶液1.0 mL。适应性饲养2周后将2组大鼠均制作为深Ⅱ度烫伤模型(以下称为烧伤),伤后立即液体复苏、常规治疗。观察两组大鼠的创面愈合时间及在伤后第7、14、21、28天的创面愈合率,创周切取组织、制作切片,行苏木精-伊红染色观察组织形态学变化,免疫组织化学SP法分析碱性调宁蛋白表达,成纤维细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,原位末端转移酶标记(TUNEL)法测定成纤维细胞凋亡情况。对数据行方差分析和t检验。结果实验组大鼠创面平均愈合时间[(25.6±2.8)d]长于对照组大鼠创面平均愈合时间[(19.1±2.1)d],差异有统计学意义(t=10.49,P<0.05);在伤后第7、14、21、28天,实验组大鼠创面愈合率分别为(18.8±4.6)%、(37.6±7.9)%、(66.3±11.4)%、(85.4±4.8)%,明显小于对照组[(40.8±4.5)%、(62.1±6.7)%、(90.2±9.7)%、(95.4±5.5)%,差异均有统计学意义(t=9.69、6.69、4.51、3.87,P值均小于0.05)。伤后第7、14、21天,两组大鼠创面逐渐愈合,创面组织中成纤维细胞、新生微血管均逐渐增多,且对照组大鼠未愈合创面组织中成纤维细胞、新生微血管均较实验组增多。伤后第7、14、21、28天,实验组大鼠碱性调宁蛋白在烧伤创面组织中的表达分别为1.43±0.07、1.17±0.11、0.73±0.06、0.77±0.07,均高于对照组大鼠(0.75±0.09、0.60±0.10、0.63±0.06、0.64±0.10),差异均有统计学意义(t=17.58、10.92、3.44、3.10,P值均小于0.05)。实验组大鼠成纤维细胞PCNA在烧伤创面组织中表达分别为654.19±102.80、820.84±112.86、766.68±156.63、232.75±55.37,较对照组(766.85±73.30、1322.22� 展开更多
关键词 糖尿病 皮肤 伤口愈合 大鼠 成纤维细胞 碱性调宁蛋白
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氧化苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及凋亡的作用
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作者 回蔷 郭冰玉 +3 位作者 张倩 常鹏 徐志山 陶凯 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期415-420,共6页
目的探讨氧化苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法从人的增生性瘢痕组织中提取成纤维细胞进行培养,通过MTT实验观察不同浓度的氧化苦参碱对成纤维细胞增殖的影响。应用流式细胞术检测经氧化苦参碱处理后成纤维细胞的... 目的探讨氧化苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法从人的增生性瘢痕组织中提取成纤维细胞进行培养,通过MTT实验观察不同浓度的氧化苦参碱对成纤维细胞增殖的影响。应用流式细胞术检测经氧化苦参碱处理后成纤维细胞的周期变化,并通过Annexin V-FITC/PI双染色法和Hoechst 33258染色观察细胞的凋亡情况。通过Western Blot和RT-PCR检测氧化苦参碱对细胞周期蛋白CDK4、CDK6,以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的作用。结果与对照组相比,氧化苦参碱的浓度为10μmol·L-1时,24 h细胞增殖的抑制率为(18.92±3.77)%,成纤维细胞的早期和晚期凋亡率分别为(3.28±2.56)%和(2.98±1.78)%;氧化苦参碱的浓度为20μmol·L-1时,24 h细胞增殖的抑制率为(32.93±2.68)%,成纤维细胞的早期和晚期凋亡率分别为(6.89±0.76)%和(1.47±2.57)%。氧化苦参碱能够通过抑制细胞周期蛋白CDK4、CDK6和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,诱导促凋亡蛋白Bax的表达来影响细胞周期进程,将细胞周期阻滞于G1期,使细胞增殖受到抑制,凋亡率增加。结论氧化苦参碱能够抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖并诱导其凋亡,可作为预防和治疗增生性瘢痕的潜在药物。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 增生性瘢痕 成纤维细胞 增殖 凋亡
圆锥角膜相关成纤维细胞的培养与鉴定 预览
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作者 王亚妮 刘先宁 +3 位作者 王小东 高伟 银勇 朱秀萍 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期83-87,共5页
目的分离、培养并鉴定人圆锥角膜相关成纤维细胞(HKCs)。方法采用组织块贴壁法培养HKCs和正常人角膜成纤维细胞(HCFs),倒置相差显微镜和电子显微镜下分别观察细胞形态和超显微结构,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增生,Westernblot... 目的分离、培养并鉴定人圆锥角膜相关成纤维细胞(HKCs)。方法采用组织块贴壁法培养HKCs和正常人角膜成纤维细胞(HCFs),倒置相差显微镜和电子显微镜下分别观察细胞形态和超显微结构,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增生,Westernblot法检测成纤维细胞标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及α1-1型胶原蛋白(COL1A1)和α1-3型胶原蛋白(COL3A1)蛋白的表达水平。结果与HCFs相比,HKCs生长速度较快,胶原纤维变细减少,线粒体肿大,嵴消失,高尔基体明显扩张,内质网严重肿胀。培养后不同时间点2种角膜成纤维细胞A值比较,差异均有统计学意义(F组间=5023.13,P<0.01;F时间=38518.16,P<0.01),其中同一时间点HKCs细胞A值均明显大于HCFs细胞A值,差异均有统计学意义(均P<0.01)。HKCs和HFCs中α-SMA的相对表达量分别为120.00±5.77和100.00±0.00,COL3A1的相对表达量分别为158.33±4.41和100.00±0.00,COL1A1相对表达量为88.33±1.67和100.00±0.00,HKCs中α-SMA和COL3A1的相对表达量均较HCFs明显升高,HKCs中COL1A1的相对表达量较HCFs明显降低,差异均有统计学意义(t=-3.46,P<0.05;t=-13.23,P<0.01;t=7.00,P<0.05)。结论成功培养并鉴定HKCs,该细胞适用于建立体外圆锥角膜细胞模型。 展开更多
关键词 圆锥角膜 成纤维细胞 细胞培养 细胞鉴定
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肝癌实质细胞及肿瘤相关成纤维细胞分离培养方案的优化 预览
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作者 向俊西 刘鹏 +6 位作者 田波彦 李青山 杨丽斐 郑幸龙 张谞丰 刘学民 吕毅 《中华肝脏外科手术学电子杂志》 CAS 2019年第3期265-269,共5页
目的分离培养人原发性肝癌(肝癌)实质细胞及肿瘤相关成纤维细胞(CAF),并检测其生物学特性。方法标本来源于2015 年9 月至2016 年10 月西安交通大学第一附属医院15 例肝癌患者手术切除新鲜肝癌组织。其中男12 例,女3 例;年龄28~64 岁,中... 目的分离培养人原发性肝癌(肝癌)实质细胞及肿瘤相关成纤维细胞(CAF),并检测其生物学特性。方法标本来源于2015 年9 月至2016 年10 月西安交通大学第一附属医院15 例肝癌患者手术切除新鲜肝癌组织。其中男12 例,女3 例;年龄28~64 岁,中位年龄45 岁;肝细胞癌13 例,胆管细胞型肝癌2 例。患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。采用胶原酶消化法分离培养人原代肝癌细胞及CAF。倒置显微镜下观察肝癌实质及CAF 的形态特征。CCK-8 法测定细胞活性,免疫荧光鉴定肝癌细胞标志物AFP 及CAF 标志物波形蛋白(Vimentin)表达。结果原代肝癌实质细胞培养成功率为2/15,CAF 培养成功率为11/15,均为肝细胞癌。肝癌实质细胞为上皮样细胞,铺路石样分布。CAF 为长梭形或多角形,呈“鱼群样”分布。肝癌细胞与CAF 生长状态良好,增殖活跃,呈对数型生长,CAF 的增殖能力略强于肝癌细胞。免疫荧光染色显示原代肝癌细胞质中AFP 染色阳性,CAF 中Vimentin 蛋白表达阳性。结论采用胶原酶消化法可以成功获得高增殖活性的人原代肝癌实质细胞及CAF。 展开更多
关键词 肝细胞 成纤维细胞 培养技术
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青藤碱对人增生性瘢痕成纤维细胞生长和迁移的抑制作用
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作者 李海博 陶凯 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1027-1029,共3页
目的观察青藤碱对人增生性瘢痕成纤维细胞生长和迁移的抑制作用。方法手术切除3例患者[年龄(34.04±6.36)岁,肩背部2例、四肢1例]的增生性瘢痕,提取成纤维细胞进行培养。首先通过噻唑蓝(MTT)实验检测25μmol/L和50μmol/L的青藤碱... 目的观察青藤碱对人增生性瘢痕成纤维细胞生长和迁移的抑制作用。方法手术切除3例患者[年龄(34.04±6.36)岁,肩背部2例、四肢1例]的增生性瘢痕,提取成纤维细胞进行培养。首先通过噻唑蓝(MTT)实验检测25μmol/L和50μmol/L的青藤碱对成纤维细胞增殖的影响,应用流式细胞术对青藤碱作用后的成纤维细胞的细胞周期进行分析。通过Hochest33258染色法观察经青藤碱处理的成纤维细胞的凋亡情况。利用Transwell实验检测青藤碱对成纤维细胞迁移的作用。通过蛋白质印迹法(Westernblot)验证青藤碱对转化生成因子-β1(TGF-β1)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的调节作用。计量资料采用t检验,计数资料比较采用χ^2检验。结果25μmol/L和50μmol/L青藤碱作用于成纤维细胞24h后对细胞增殖的抑制比率分别为(13.14±5.51)%和(43.28±4.98)%,青藤碱对细胞的抑制作用随着药物浓度的增加和作用时间的延长而增强。青藤碱作用后,细胞会出现G1/S期阻滞的现象,凋亡细胞数量有所增加,细胞的迁移数量降低。空白对照、25μmol/L和50μmol/L青藤碱处理成纤维细胞24h后,TGF-β1、CyclinD1、bcl-2和MMP-2蛋白表达灰度值分别为(0.84±0.01比0.16±0.04比0.17±0.03)、(1.06±0.01比0.93±0.04比0.82±0.05)、(0.55±0.03比0.34±0.01比0.28±0.01)和(0.64±0.01比0.28±0.04比0.14±0.02),组间比较差异有统计学意义(t=11.040、25.370;18.880、15.410;15.760、17.440;19.600、7.210,P<0.05)。结论青藤碱能够抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的生长和迁移。 展开更多
关键词 青藤碱 增生性瘢痕 成纤维细胞 生长 迁移
芍药苷促进糖尿病创面愈合 预览
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作者 房志锐 陈璐 +6 位作者 李春晓 宋敏 张璐莎 Joel Wake Coffie 张丽媛 马璐璐 王虹 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1084-1091,共8页
目的 研究芍药苷(paeoniflorin,PA)对糖尿病创面愈合作用及作用机制。方法 采用糖尿病小鼠全层皮肤切除夹板模型,HE染色及Masson染色观察创面组织形态改变;免疫荧光法检测血管新生。PA干预人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endoth... 目的 研究芍药苷(paeoniflorin,PA)对糖尿病创面愈合作用及作用机制。方法 采用糖尿病小鼠全层皮肤切除夹板模型,HE染色及Masson染色观察创面组织形态改变;免疫荧光法检测血管新生。PA干预人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)和小鼠成纤维细胞(fibroblast,FB),MTS、BrdU和划痕实验检测细胞增殖和迁移能力;Matrigel实验检测HUVECs成管能力,qPCR检测FB中Collagen Ⅲ、Fibronectin、α-SMA mRNA的变化;免疫荧光法观察α-SMA在FB中的表达部位及表达量的变化。结果 与db/db模型组相比,PA组创面肉芽组织,胶原形成和新生毛细血管密度明显增加(P<0.01)。PA对HUVECs增殖无影响,可明显促进HUVECs迁移和成管的能力(P<0.05 ,P <0.01)。PA可明显增加FB增殖和迁移的能力,明显增加Collagen Ⅲ、α-SMA mRNA的表达(P<0.05 ,P <0.01),对Fibronectin mRNA的表达无影响,同时可增加α-SMA的荧光强度。结论 芍药苷可能通过促进细胞外基质生成和血管新生,促进糖尿病创面愈合。 展开更多
关键词 芍药苷 糖尿病创面愈合 血管新生 细胞外基质 内皮细胞 成纤维细胞
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病理状态对心肌细胞及心脏成纤维细胞β3-肾上腺素受体表达的影响 预览
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作者 徐忠诚 辛俊舟 +2 位作者 吴磊 刘红阳 王丽 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第7期700-704,共5页
目的观察与心力衰竭相关的不同病理因素刺激下,Sprague-Dawley(SD)乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞中β3-肾上腺素受体(β3-AR)表达变化的差异。方法分离培养SD乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞并行免疫荧光鉴定,分别给予血管紧张素Ⅱ(AngⅡ... 目的观察与心力衰竭相关的不同病理因素刺激下,Sprague-Dawley(SD)乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞中β3-肾上腺素受体(β3-AR)表达变化的差异。方法分离培养SD乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞并行免疫荧光鉴定,分别给予血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及去甲肾上腺素(NE)进行刺激,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测心肌细胞肥大相关基因[心钠肽(ANP)、脑钠肽(BNP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)]、心脏成纤维细胞纤维化相关基因[Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(COL-Ⅲ)]及2种细胞中β3-AR的mRNA表达。结果免疫荧光鉴定显示,分离培养的心肌细胞和心脏成纤维细胞均状态良好。AngⅡ和NE分别刺激2种细胞48h后,心肌细胞中ANP、BNP、β-MHC和β3-AR的表达较对照组明显增加;心脏成纤维细胞中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ表达较对照组明显增加,但β3-AR的表达没有明显变化。结论参与心力衰竭发生发展的病理因素AngⅡ和NE主要引起心肌细胞的β3-AR表达增加,而不是心脏成纤维细胞。 展开更多
关键词 肌细胞 心脏 成纤维细胞 去甲肾上腺素 β3-肾上腺素受体 血管紧张素Ⅱ
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Production of homeobox A10 gene transgenic pigs by somatic cell nuclear transfer 预览
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作者 XIAO Qian ZHAO Chang-zhi +7 位作者 LIN Rui-yi LI Guang-lei LI Chang-chun WANG Hai-yan XU Jing XIE Sheng-song YU Mei ZHAO Shu-hong 《农业科学学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第5期1072-1079,共8页
Homeobox A10(Hoxa10) gene is one of the most important candidate genes associated with the reproductive performance of humans and mice. Overexpression of Hoxa10 in mouse endometrium can increase litter size. Moreover,... Homeobox A10(Hoxa10) gene is one of the most important candidate genes associated with the reproductive performance of humans and mice. Overexpression of Hoxa10 in mouse endometrium can increase litter size. Moreover, Hoxa10 plays a key role in regulating the embryo implantation of sows. This study aimed to generate transgenic pigs using Hoxa10 via somatic cell nuclear transfer(SCNT). We established seven Hoxa10-transgenic cell lines, and two of the cell lines were selected as nuclear donors for the transfer. A total of 1 270 cloned embryos were generated and transferred to five surrogate mothers(Landrace×Yorkshire). Eight cloned male piglets were produced including one with cryptorchidism. Six transgenic piglets grew up healthy and produced 56 offspring. Finally, we obtained six transgenic male pigs and 26 transgenic positive offspring that can be used to further study the regulatory mechanism of Hoxa10 on the reproductive performance of pigs. 展开更多
关键词 HOXA10 GENE transgenic pig SOMATIC cell nuclear transfer fetal FIBROBLASTS OOCYTE
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黄芪甲苷对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的影响
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作者 边志超 徐志山 +4 位作者 林时秀 回蔷 郭冰玉 常鹏 陶凯 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2019年第7期389-392,共4页
目的探讨黄芪甲苷对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的作用。方法获取患者经手术切除的增生性瘢痕组织,从中提取成纤维细胞进行培养。采用MTT试验检测不同浓度的黄芪甲苷对成纤维细胞增殖的影响,并应用流式细胞技术对黄芪甲苷作用后的成纤... 目的探讨黄芪甲苷对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的作用。方法获取患者经手术切除的增生性瘢痕组织,从中提取成纤维细胞进行培养。采用MTT试验检测不同浓度的黄芪甲苷对成纤维细胞增殖的影响,并应用流式细胞技术对黄芪甲苷作用后的成纤维细胞的周期进行分析。通过Annexin V-FITC/PI双染色法,观察经黄芪甲苷处理的成纤维细胞的凋亡情况。采用Western blot和RT-PCR验证黄芪甲苷对细胞周期蛋白Cyclin D1和凋亡调节蛋白Bcl-2的作用。结果不同浓度的黄芪甲苷对成纤维细胞增殖均有一定的抑制作用,且随着药物浓度增加和作用时间的延长,其抑制作用愈发明显。大多数的成纤维细胞阻滞于G1期,而进入S期的细胞比例呈下降趋势,且细胞周期受到阻断;通过黄芪甲苷对抑制细胞周期蛋白Cyclin D1和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达来影响细胞周期的进程并诱导成纤维细胞的凋亡,从而实现对细胞生长的抑制作用。结论黄芪甲苷能够抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,并诱导其凋亡,适于对增生性瘢痕的预防和治疗。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 黄芪甲苷 成纤维细胞 增殖 凋亡
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