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乳腺癌转移淋巴结T细胞克隆性分析
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作者 张建波 吕晓东 +4 位作者 楚广民 宋魏 冯稳 刘明阁 于庆凯 《河南医学研究》 CAS 2015年第1期8-11,共4页
目的分析乳腺癌患者转移淋巴结中TCR BV亚家族T细胞的克隆性分布特点。方法选取2例反应性增生淋巴结及10例乳腺癌转移淋巴结标本,应用RT-PCR方法扩增T细胞24个TCRβ链可变区(BV)亚家族的互补决定区3(CDR3)基因,经基因扫描确定T细胞... 目的分析乳腺癌患者转移淋巴结中TCR BV亚家族T细胞的克隆性分布特点。方法选取2例反应性增生淋巴结及10例乳腺癌转移淋巴结标本,应用RT-PCR方法扩增T细胞24个TCRβ链可变区(BV)亚家族的互补决定区3(CDR3)基因,经基因扫描确定T细胞克隆性。结果乳腺癌转移淋巴结中T细胞存在克隆性增生,增生形式包括单、寡克隆及多克隆。不同患者增生T细胞克隆中均存在TCR谱型偏移,仅表达2~5个BV亚家族。结论乳腺癌转移淋巴结内克隆性T细胞TCR BV亚家族存在选择性取用特点,可能与机体对乳腺癌相关抗原的特异性免疫反应有关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 T细胞受体 基因扫描 互补决定区
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B-ALL患者外周血γδT细胞TCR亚家族谱系分布和增殖特点 被引量:1
2
作者 胡峻岩 吴秀丽 +4 位作者 陈少华 杨力建 李萡 王亮 李扬秋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期147-151,共5页
目的了解急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者外周血T细胞的T细胞受体(TCR)Vγ和Vδ亚家族的T细胞谱系分布和克隆性增殖情况。方法利用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测14例B-ALL患者外周血单个核细胞中3个TCR Vγ和8个TCR Vδ亚家族... 目的了解急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者外周血T细胞的T细胞受体(TCR)Vγ和Vδ亚家族的T细胞谱系分布和克隆性增殖情况。方法利用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测14例B-ALL患者外周血单个核细胞中3个TCR Vγ和8个TCR Vδ亚家族基因谱系的分布情况;进一步经荧光素标记和基因扫描分析TCR Vγ和TCR Vδ亚家族基因的互补决定区3(CDR3),以检测T细胞克隆性。10例健康成人外周血作为对照。结果 B-ALL患者外周血中TCR Vγ亚家族表达率降低,其中VγII亚家族表达率降低与健康对照组的差异具有统计学意义(P=0.006)。B-ALL患者外周血中Vδ1(57.1%)、Vδ2(42.9%)和Vδ3(14.3%)亚家族表达率均低于健康对照组,且差异有统计学意义(P=0.024,0.006,0.001)。此外,在B-ALL患者外周血中可以检测到在健康人中未检测到的Vδ4(14.3%)和Vδ5(14.3%)亚家族;且Vδ6(28.6%)、Vδ7(21.4%,)和Vδ8(35.7%)亚家族表达率也高于健康对照组。B-ALL患者外周血中存在克隆性增殖的Vγ和Vδ亚家族T细胞,其中,Vδ8亚家族T细胞寡克隆增殖的发生频率最高(35.7%),其次为Vδ6(28.6%)和Vδ7(21.4%)亚家族T细胞。结论 B-ALL患者外周血TCR Vγ和TCR Vδ亚家族T细胞出现限制性表达和克隆性增殖,其中高频率出现的寡克隆性增殖的Vδ亚家族T细胞可能与体内存在的白血病抗原相关。 展开更多
关键词 急性B淋巴细胞白血病 γδT细胞 T细胞受体 基因扫描 克隆性
抗人卵巢癌/抗人 CD3 单链双特异性抗体介导的αβ T 细胞 CDR3谱系漂移 被引量:4
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作者 罗微 温茜 +1 位作者 周明乾 马骊 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期 919-923,共5页
目的 探讨抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体(BHL-1)介导的αβT细胞CDR3 谱系漂移,为双特异性抗体介导的T细胞免疫应答机制提供理论基础。方法 采用免疫扫描谱型分析技术,分析6例正常献血员T细胞在人卵巢癌SKOV3细胞联合BHL-1刺... 目的 探讨抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体(BHL-1)介导的αβT细胞CDR3 谱系漂移,为双特异性抗体介导的T细胞免疫应答机制提供理论基础。方法 采用免疫扫描谱型分析技术,分析6例正常献血员T细胞在人卵巢癌SKOV3细胞联合BHL-1刺激前后的TCR库多样性变化(CDR3谱型分布特征)及刺激后T细胞TCR α、β链CDR3优势利用情况,对克隆性增生T细胞的CDR3区进行序列分析。结果 刺激前6例正常献血员TCR CDR3谱型均呈高斯分布,刺激后发生CDR3谱系漂移,部分TCR Vα、Vβ家族出现优势增生,明确了BHL-1介导下单克隆增生T细胞的α、β链CDR3序列。结论 SKOV3联合BHL-1诱导的T细胞CDR3谱系出现明显漂移,提示CDR3的选择性表达可能与BHL-1介导的特异性T细胞免疫反应有关,特异应答T细胞TCR CDR3序列的确定,将为卵巢癌的T细胞免疫治疗提供基础。 展开更多
关键词 双特异性抗体 抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体 T细胞受体 互补决定区3 基因扫描
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职业铅接触工人外周血T细胞Vβ基因谱系明显缺失 被引量:1
4
作者 刘思初 李萡 +5 位作者 牛宇哲 刘薇薇 杨志前 陈少华 杨力建 李扬秋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期 1322-1324,共3页
目的:分析职业铅接触工人外周血中T细胞受体Vβ基因(TCR Vβ)谱系分布和克隆性特点,进一步了解铅接触后对T细胞免疫的影响。方法:利用RT-PCR分别检测6例职业铅接触工人和6例健康体检者的外周血中各TCRVβ亚家族的表达情况;阳性产... 目的:分析职业铅接触工人外周血中T细胞受体Vβ基因(TCR Vβ)谱系分布和克隆性特点,进一步了解铅接触后对T细胞免疫的影响。方法:利用RT-PCR分别检测6例职业铅接触工人和6例健康体检者的外周血中各TCRVβ亚家族的表达情况;阳性产物经荧光素标记和基因扫描分析其CDR3长度以了解T细胞克隆性。结果:所有健康体检者均可检测到24个Vβ亚家族并呈多克隆,而6例职业铅接触工人外周血TCR Vβ亚家族表现明显的限制性利用,仪能检测到1—7个,并且多数所检测到的Vβ亚家族T细胞呈现为寡克隆或双克隆增殖,发生克隆性改变的亚家族主要集中在Vβ1和Vβ16。结论:职业铅接触可能在不同程度上影响机体TCRVβ谱系的利用和克隆性改变,可能与铅的免疫毒性有关。 展开更多
关键词 TCR VΒ基因 基因扫描 T细胞克隆性
复发性外阴阴道念珠菌病患者及性伴侣带菌情况分析 预览 被引量:1
5
作者 宗利丽 王彩丽 +3 位作者 曾俊 王玉凤 赵欣 毛婷 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第1期6-8,共3页
目的研究复发性外阴阴道念珠菌病(RVVC)复发相关因素。方法选择55例RVVC患者及其中45位患者性伴侣,取阴道、肛门、口腔及龟头分泌物分离念珠菌,采用ITS1区单链构型多态性(SSCP)分析和大亚基26SrDNA基因D1/D2区序列分析相结合的方法... 目的研究复发性外阴阴道念珠菌病(RVVC)复发相关因素。方法选择55例RVVC患者及其中45位患者性伴侣,取阴道、肛门、口腔及龟头分泌物分离念珠菌,采用ITS1区单链构型多态性(SSCP)分析和大亚基26SrDNA基因D1/D2区序列分析相结合的方法进行菌种鉴定,应用微卫星CAI位点的SSCP和基因扫描分析相结合的方法进行白色念珠菌的基因型测定。结果 RVVC患者阴道、肛门、口腔及其性伴侣龟头分泌物的念珠菌培养阳性率分别为100.0%(55/55)、61.8%(34/55)、1.8%(1/55)和60.0%(27/45),各部位念珠菌感染均以白色念珠菌为主,且所占比例无明显差异。同一患者阴道与肛门、阴道与性伴侣龟头分泌物的白色念珠菌基因型符合率分别为86.2%和54.5%。结论肠道及性伴侣龟头携带的念珠菌可能是RVVC复发的重要因素之一。 展开更多
关键词 复发性外阴阴道念珠菌病 基因型 单链构象多态性 基因扫描
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白假丝酵母菌基因型和假丝酵母菌群分布与外阴阴道假丝酵母菌病严重程度的相关性分析 被引量:2
6
作者 曾俊 宗利丽 +2 位作者 毛婷 黄郁馨 徐正美 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期 1649-1653,共5页
探讨致病假丝酵母菌菌群分布以及白假丝酵母菌基因型与外阴阴道假丝酵母菌病症状严重程度的关系。方法我们对2009年9月~2010年10月在我院就诊的,以及生活习惯、饮食、既往用药及工作环境相似的急性VVC患者,利用聚合酶链反应-单链构象多... 探讨致病假丝酵母菌菌群分布以及白假丝酵母菌基因型与外阴阴道假丝酵母菌病症状严重程度的关系。方法我们对2009年9月~2010年10月在我院就诊的,以及生活习惯、饮食、既往用药及工作环境相似的急性VVC患者,利用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术(PCR-SSCP)对其阴道来源的假丝酵母菌进行分子水平的菌种鉴定,结合SSCP和基因扫描(GeneScan)对白假丝酵母菌CAI区进行多态性分析确定其基因型,对VVC的严重程度进行临床症状体征的评分。结果从获得的198份标本中分离白假丝酵母菌140株(70.7%);58株非白假丝酵母菌(29.3%)。198名患者中重度VVC 95人,轻中度VVC 103人。白假丝酵母菌在重度VVC和轻中度VVC患者中所占比列分别为62.1%和76.6%(P=0.011)。140株C.albican共检出38种CAI基因型且集中分布于少数几种,其中基因型30-45(44株,31.43%)和32-46(23株,16.43%)最常见,其次为基因型30-46(4株,2.86%)和32-47(9株,6.42%)。以上4种优势基因型菌株在重度VVC和轻中度VVC患者中的分布差异有统计学意义(77.9%vs 42.0%,P〈0.001)。结论白假丝酵母菌仍然是VVC的主要致病菌,但非白假丝酵母菌与白假丝酵母菌相比更容易引起重度VVC,白假丝酵母菌的基因型与VVC严重程度有关。 展开更多
关键词 外阴阴道假丝酵母菌病 白假丝酵母菌 CAI基因型 单链构象多态性分析 基因扫描
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早期蕈样肉芽肿采用激光捕获显微切割及基因扫描分子诊断基因重排的研究 预览
7
作者 张凡 涂平 +1 位作者 卜定方 武玲慎 《临床皮肤科杂志》 CAS 北大核心 2010年第5期 275-278,共4页
目的:研究激光捕获显微切割及基因扫描定性检测T细胞受体(TCR)γ基因重排在早期蕈样肉芽肿(MF)细胞中表达的可行性.方法:激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)分离早期MF中的肿瘤细胞,荧光标记引物双重聚合酶... 目的:研究激光捕获显微切割及基因扫描定性检测T细胞受体(TCR)γ基因重排在早期蕈样肉芽肿(MF)细胞中表达的可行性.方法:激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)分离早期MF中的肿瘤细胞,荧光标记引物双重聚合酶链反应(PCR)和基因扫描(GeneScan)分析TCRγ基因重排.结果:9例早期MF的TCRγ/基因重排检出率为66.7%(6/9).2例肿瘤期MF的检出率为100%.结论:激光捕获显微切割技术可用于诊断早期MF的TCRγ基凶重排检测. 展开更多
关键词 激光捕获显微切割 基因扫描 蕈样肉芽肿 基因重排
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外周T细胞淋巴瘤TCR基因重排及CDR3谱型分析 被引量:2
8
作者 张建波 宋永平 +4 位作者 于庆凯 白睿华 宋魏 胡俊 董涛 《肿瘤研究与临床》 CAS 2009年第10期657-659,共3页
目的分析外周T细胞淋巴瘤穿刺标本中T细胞受体(TCR)β链克隆性基因重排及互补决定区3(CDR3)谱型。方法应用RT—PCR扩增TCR Vβ24个亚家族的CDR3基因,并经基因扫描确定T细胞克隆性,对提示单克隆或寡克隆增生亚家族的PCR产物测序分... 目的分析外周T细胞淋巴瘤穿刺标本中T细胞受体(TCR)β链克隆性基因重排及互补决定区3(CDR3)谱型。方法应用RT—PCR扩增TCR Vβ24个亚家族的CDR3基因,并经基因扫描确定T细胞克隆性,对提示单克隆或寡克隆增生亚家族的PCR产物测序分析其CDR3序列。结果4例淋巴瘤患者TCR表达受到明显抑制,仅表达1~4个Vβ亚家族。所有患者均存在1个或多个Vβ亚家族的克隆增生T细胞,增生形式包括单克隆、双克隆及寡克隆增生趋势。CDR3区序列分析证实增生的T细胞克隆具有不同的氨基酸序列。结论外周T细胞淋巴瘤患者存在T细胞克隆性增生,其TCR Vβ呈限制性取用,不同克隆T细胞具有不同的CDR3谱型。 展开更多
关键词 基因重排 互补决定区 淋巴瘤 T细胞 基因扫描
CML患者外周血TCR Vγ亚家族T细胞的谱系变化研究 预览
9
作者 李志雄 张翼婷 +3 位作者 杨毅 陈少华 杨力建 李扬秋 《广东医学》 CAS 北大核心 2009年第8期 1049-1051,共3页
目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)慢性期(CP)和缓解期(CR)患者外周血T细胞中T细胞受体(TCR)Vγ基因谱系的分布和克隆性情况。方法利用RT—PCR检测8例CML—CP和8例CML—CR患者外周血T细胞3个TCR Vγ亚家族的表达,了解TCR Vγ亚家... 目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)慢性期(CP)和缓解期(CR)患者外周血T细胞中T细胞受体(TCR)Vγ基因谱系的分布和克隆性情况。方法利用RT—PCR检测8例CML—CP和8例CML—CR患者外周血T细胞3个TCR Vγ亚家族的表达,了解TCR Vγ亚家族T细胞的分布和利用情况;阳性产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析CDR3长度,从而了解其克隆性。10例健康成人外周血作为对照。结果8例CP期和8例CR期的CML患者外周血T细胞平均分别为(1.88±0.64,2.13±0.83)个亚家族,两者比较尚无统计学差异,但均明显低于健康对照组(P=0.000,P=0.036)。CP和CR期患者TCR VγⅢ的表达率明显低于健康对照组(2.9±0.32)(P=0.013,P=0.043),基因扫描显示CML—CP和CML—CR出现克隆模式的改变主要集中在TCR VγⅡ亚家族。结论CP期患者外周血TCR Vγ基因谱系出现限制性利用和克隆性增殖T细胞,主要可能与患者处于细胞免疫抑制状态有关,即使CR期患者其T细胞仍处于一定程度的免疫抑制状态。 展开更多
关键词 TCR Vγ基因 慢性粒细胞白血病 基因扫描 克隆性
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弥漫大B型非霍奇金淋巴瘤患者外周血TCR Vβ亚家族T细胞分布和克隆性增生特点 预览 被引量:3
10
作者 叶静梅 谭获 +4 位作者 李扬秋 陈少华 岑东芝 陈思 吴秀丽 《临床血液学杂志》 CAS 2009年第6期594-596,共3页
目的:了解弥漫大B淋巴瘤(DLBL)患者外周血T细胞的TCRVβ基因谱系及克隆性增殖情况。方法:利用RT-PCR方法扩增6例DLBL患者外周血单个核细胞中24个TCRVβ基因的互补决定区3(CDR3),PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而... 目的:了解弥漫大B淋巴瘤(DLBL)患者外周血T细胞的TCRVβ基因谱系及克隆性增殖情况。方法:利用RT-PCR方法扩增6例DLBL患者外周血单个核细胞中24个TCRVβ基因的互补决定区3(CDR3),PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。结果:6例DLBL患者分别表达9-20个TCRVβ亚家族。患者均存在1个或多个Vβ亚家族的克隆增殖T细胞,增殖形式包括寡克隆、寡克隆增殖趋势及双克隆。Vβ13和Vβ15亚家族出现克隆增殖性T细胞的频率较高(66.7%)。结论:DLBL患者外周血TCRVβ亚家族T细胞的分布具有特点,表现为TCRVβ亚家族T细胞呈限制性选用和克隆性增殖,这可能是淋巴瘤患者机体对淋巴瘤相关抗原产生的特异性免疫反应。 展开更多
关键词 弥漫大B细胞性淋巴瘤 T细胞受体VΒ基因 T细胞克隆性 基因扫描
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去甲基化KG1a细胞DNA对人外周血单个核细胞杀伤活性和T细胞受体VαβT细胞增殖的影响
11
作者 贾振薇 郭坤元 +2 位作者 黄迎 曲佳 余秒容 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第18期 2996-2999,共4页
目的:研究去甲基化的急性髓性白血病细胞KG1a的DNA体外诱导人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)的杀伤活性和T细胞受体Vαβ(αβ chain variable gene of T cell receptor,TCR Vαβ)谱系的表达和克... 目的:研究去甲基化的急性髓性白血病细胞KG1a的DNA体外诱导人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)的杀伤活性和T细胞受体Vαβ(αβ chain variable gene of T cell receptor,TCR Vαβ)谱系的表达和克隆情况。方法:去甲基化试剂盒对KG1a细胞去甲基化处理.并提取其DNA。应用乳酸脱氢酶释放法检测DNA诱导前后PBMC杀伤KG1a细胞的活性.应用RT—PCR方法扩增各组外周血T细胞的32个TCR Vα亚家族和24个TCR Vβ亚家族的CDR3,并用基因扫描分析扩增产物以确定T细胞的克隆性。结果:基因扫描显示去甲基化的KG1a细胞DNA可以诱导出呈单克隆、寡克隆或寡克隆趋势生长的亚家族T细胞.且在效靶比为20:1时去甲基化的KG1a细胞DNA诱导前后PBMC杀伤KG1a细胞的活性差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:去甲基化的KG1a细胞DNA可提高PBMC杀伤活性.且诱导T细胞呈克隆性增殖。 展开更多
关键词 受体 抗原 T细胞 α-β KG1a细胞 去甲基化 基因扫描 T细胞克隆
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超抗原SEA联合PML-RARα对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响 预览 被引量:5
12
作者 林晨 高珂 +3 位作者 白雪 陈少华 杨力建 李扬秋 《免疫学杂志》 CAS 北大核心 2008年第5期 530-533,共4页
目的探讨超抗原SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR邯亚家族基因表达的影响。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,20d后收集增殖细胞,利用RT-PCR及基因扫描技术分析诱导后增殖... 目的探讨超抗原SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR邯亚家族基因表达的影响。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,20d后收集增殖细胞,利用RT-PCR及基因扫描技术分析诱导后增殖T细胞TCR Vβ亚家族的利用和克隆性增殖的特点。结果单纯SEA诱导后,T细胞表达了11个TCR Vβ亚家族,且仍为多克隆增殖。单纯PML-RARα多肽诱导后,T细胞限制性表达8个Vβ亚家族,其中Vβ13、Vβ14表现出寡克隆或寡克隆趋势。PML-RARα多肽联合SEA共同诱导,其T细胞表达TCR Vβ亚家族依然呈明显的限制性,且Vβ13、Vβ 14亚家族呈寡克隆、双克隆及寡克隆趋势。结论SEA能协同PML-RARα多肽诱导的T细胞克隆性活化与增殖。 展开更多
关键词 超抗原SEA PML-RARΑ 细胞受体 克隆性
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陕西汉族人群2号和11号染色体15个STR基因座的遗传多态性 预览
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作者 史晓薇 任峰玲 +1 位作者 耿东 郭雄 《中南大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2008年第7期 587-591,共5页
目的:分析陕西汉族人群2号和11号染色体上15个短串联重复序列(shorttandem repeat,STR)住点的多态性。方法:采用荧光标记基因扫描技术对15个STR基因座在175例无血缘关系的陕西汉族人中的遗传多态性进行分析。结果:D2S335,D2S396... 目的:分析陕西汉族人群2号和11号染色体上15个短串联重复序列(shorttandem repeat,STR)住点的多态性。方法:采用荧光标记基因扫描技术对15个STR基因座在175例无血缘关系的陕西汉族人中的遗传多态性进行分析。结果:D2S335,D2S396,D2S338,D2S2382.D2S305.D25151,D2S2368,D2S391,D115912,D11S4090,D11S4147,D1154190,D11S4149.D11S4126.D11S4094分别检出11,11,11,10,8,8,9,12,7,11,8,10,5,5,6个等位基因,各位点等位基因型分布符合Hardy—Weinberg平衡,杂和度(heterozygosity,H)为0.4216~0.8517,个体识别力(power of discrimination,DP)为0.6568~0.9598,多态信息量(polymorphism information content,PIC)为0.4078~0.8366,非父排除率(probability of paternity exclusion,EPP)为0.3135~0,8537。结论:15个STR基因座在陕西汉族人群中具有较好的多态性,表明了陕西汉族人群15个STR基因座结构特征,为人类学、法医学研究提供了数据。 展开更多
关键词 短串联重复序列 遗传多态性 基因扫描 Hardy—Weinberg平衡
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脐带血和成人外周血TCR Vγ和Vδ亚家族的分布和克隆性研究 被引量:1
14
作者 陈少华 李扬秋 +1 位作者 杨力建 林锦绒 《免疫学杂志》 CAS 北大核心 2008年第6期625-629,共5页
目的探讨脐带血和健康成人外周血TCR Vγ和Vδ基因谱系的分布情况及克隆性特点。方法利用RT-PCR法检测16例脐带血和10例健康成人外周血单个核细胞TCR Vγ(Ⅰ~Ⅲ)和Vδ(1—8)各亚家族的表达,了解各亚家族的分布和利用情况;阳性的... 目的探讨脐带血和健康成人外周血TCR Vγ和Vδ基因谱系的分布情况及克隆性特点。方法利用RT-PCR法检测16例脐带血和10例健康成人外周血单个核细胞TCR Vγ(Ⅰ~Ⅲ)和Vδ(1—8)各亚家族的表达,了解各亚家族的分布和利用情况;阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析其CDR3长度,了解T细胞的克隆性。2例成人胸腺组织作为对照。结果脐带血T细胞的Vγ基因表达主要集中在VγⅠ和VγⅡ,而Vδ基因则平均表达(4.63±1.03)个亚家族,主要集中在Vδ1、2、3、8中表达。健康成人外周血T细胞除了1例不表达VγⅢ之外,其余均表达全部Vγ基因,而在Vδ基因中则平均表达(3.6±0.52)个亚家族,并以Vδ1、2和3为多见,Vδ4和Vδ5未能在外周血中检测到,而Vδ5和Vδ8的表达则明显低于脐带血(P=0.009,P=0.001);2例成人胸腺组织表达除Vδ4和Vδ6之外的其他Vγ和Vδ亚家族。基因扫描显示16例脐带血中有1例在VγⅠ和5例分别在Vδ2、Vδ4和Vδ6中出现寡克隆性,10例成人外周血中有9例在不同亚家族中出现克隆性T细胞,其余均呈多克隆性。结论脐带血TCR Vγ和Vδ亚家族T细胞和健康成人外周血Vδ亚家族T细胞的分布均存在选择性,TCR Vδ亚家族在健康成人外周血中有一定的限制性,其出现克隆性T细胞的频率较脐带血高。 展开更多
关键词 脐带血 外周血 T细胞受体 基因扫描 克隆性
基因扫描分析人T细胞受体CDR3谱型检测T细胞克隆技术的建立 预览 被引量:1
15
作者 周健 胡亮杉 +5 位作者 郭坤元 黄迎 郭爱林 吴远彬 王杨 涂三芳 《山东医药》 CAS 北大核心 2007年第32期 7-9,共3页
目的建立人T细胞受体(TCR)互补决定区3(CDR3)基因谱型的基因扫描分析术,为分析T细胞克隆提供研究方法。方法分别以Jurkat和Raji细胞作为阳性和阴性对照,应用RT-PCR方法扩增5例健康志愿者外周血T细胞的34个TCR Vα亚家族和26个TCR ... 目的建立人T细胞受体(TCR)互补决定区3(CDR3)基因谱型的基因扫描分析术,为分析T细胞克隆提供研究方法。方法分别以Jurkat和Raji细胞作为阳性和阴性对照,应用RT-PCR方法扩增5例健康志愿者外周血T细胞的34个TCR Vα亚家族和26个TCR Vβ亚家族的CDR3,并用基因扫描分析扩增产物以确定T细胞的克隆性。结果T细胞株Jurkat细胞仅表达TCR Vα1.1和Vβ8基因,且为单克隆,而B细胞株Raji细胞则不表达所有的TCR Vα和Vβ基因。5例健康人表达所有的TCR Vα和Vβ基因,均为多克隆T细胞。结论基因扫描分析人TCRCDR3基因谱型是检测T细胞克隆性的精确敏感方法。 展开更多
关键词 T细胞受体 互补决定区3 基因扫描 T细胞克隆
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异基因造血干细胞移植患者外周血TCR Vβ亚家族克隆性增殖动态变化及其与GVHD的关系 预览 被引量:1
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作者 贾新颜 王健民 +3 位作者 李扬秋 陈少华 章卫平 陈莉 《中国实验血液学杂志》 CAS 2007年第4期 795-800,共6页
本研究观察异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者外周血T细胞受体(TCR)Vβ亚家族克隆性增殖的动态变化,分析T细胞的克隆性演变与GVHD的关系。利用RT-PCR方法扩增70例次allo-HSCT后患者(其中17例次出现GVHD)外周血单个核细胞中24个... 本研究观察异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者外周血T细胞受体(TCR)Vβ亚家族克隆性增殖的动态变化,分析T细胞的克隆性演变与GVHD的关系。利用RT-PCR方法扩增70例次allo-HSCT后患者(其中17例次出现GVHD)外周血单个核细胞中24个TCRVβ基因的互补决定区3(CDR3),PCR产物经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度,确定T细胞的克隆性。结果表明:移植患者T细胞增殖一般都经历由单克隆向多克隆演变的过程,在移植后60-90天时,逐渐由单克隆转为单克隆和多克隆表达大致各占一半。120天以后,无GVHD患者大多转为多克隆性表达;而GVHD患者受免疫抑制剂和GVHD的影响,直到1年以上仍有部分呈单克隆表达趋势。GVHD患者发生GVHD或靶器官受累最明显的时候,外周血TCRVβ亚家族的表达主要呈现单/双克隆的表现,而经过免疫抑制治疗病情好转后,部分患者出现由寡克隆表达转为多克隆增殖趋势。结论:移植后早期患者尤其是合并GVHD的患者,T细胞呈克隆性增殖和T细胞受体的倾向性利用;随着造血和免疫的恢复,TCRVβ亚家族表达重新恢复趋向正常的多克隆性演变。 展开更多
关键词 造血干细胞移植 移植物抗宿主病 T细胞受体Vβ亚家族 T细胞克隆性 基因扫描
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Analysis of the CDR3 Length Repertoire and the Diversity of TCRα Chain in Human Peripheral Blood T Lymphocytes
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作者 Xinsheng Yao Ying Diao +3 位作者 Wanbang Sun Junmin Luo Ming Qin Xianying Tang 《中国免疫学杂志:英文版》 SCIE CAS 2007年第3期 215-220,共6页
决定区域 3 的补充(CDR3 ) 的分析一些由 immunoscope spectratyping 技术的 T 淋巴细胞受体(TCR ) 成功地被使用了在自体免疫的疾病和感染疾病调查 TCR 的差异。在这研究,我们由 immunoscope spectratyping 技术在四个正常志愿者的人... 决定区域 3 的补充(CDR3 ) 的分析一些由 immunoscope spectratyping 技术的 T 淋巴细胞受体(TCR ) 成功地被使用了在自体免疫的疾病和感染疾病调查 TCR 的差异。在这研究,我们由 immunoscope spectratyping 技术在四个正常志愿者的人的外部血淋巴细胞为所有 32 个 TCR AV 基因家庭调查了 CDR3 长度分发的模式。PCR 产品在 1.5% agarose 胶化电气泳动上展出了一个卑微的乐队,这被发现。每个 TCR AV 家庭在 6% 上展出了超过 8 个乐队定序胶化电气泳动。所有 TCR AV 家庭的 CDR3 spectratyping 与不同 CDR3 长度显示出标准 Gaussian 分布,并且 CDR3 的表示频率在基因家庭之中是类似的。大多数在 TCR AV 家庭的 CDR3 在框架重新结合。然而,一些 CDR3 显示出外面框架基因重新整理。另外,我们发现在一些 TCR AV 家庭,在最长的 CDR3 和最短的 CDR3 之间有 18 氨基酸差异。这些结果可能是有用的进一步在健康人和疾病状态学习人的 TCR 基因, TCR CDR3 基因全部剧目,和全部剧目飘移的再结合机制。 展开更多
关键词 基因多态性 免疫机制 淋巴细胞 治疗机制
CML相关TCRVα亚家族T细胞的克隆性分布特点 预览 被引量:5
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作者 陈思 李扬秋 +2 位作者 陈少华 杨力建 卢育洪 《肿瘤防治研究》 CAS 北大核心 2007年第3期 168-170,共3页
目的了解慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血TCR Vα亚家族T细胞的克隆性分布特点。方法采用RT-PCR扩增10例CML患者外周血的单个核细胞的TCR Vα29个亚家族基因,分析其TCR Vα亚家族的利用情况。PCR产物进一步经基因扫描分析,了解其C... 目的了解慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血TCR Vα亚家族T细胞的克隆性分布特点。方法采用RT-PCR扩增10例CML患者外周血的单个核细胞的TCR Vα29个亚家族基因,分析其TCR Vα亚家族的利用情况。PCR产物进一步经基因扫描分析,了解其CDR3长度以判断T细胞的克隆性。结果不同病人外周血中所能检测出的Vα亚家族数量不等(1~21个),以Vα3、Vα4、Vα8、Vα10和Vα14为常见,并在Vα1、Vα2、Vα3、Vα4、Vα5、Vα8、Vα10、Vα12、Vα14、Vα15、Vα16、Vα19、Vα21和Vα23中发现克隆性生长T细胞。结论CML病人外周血T细胞的TCR Vα亚家族选用呈现明显的选择性并出现克隆性T细胞,这可能与机体对白血病相关抗原产生特异性免疫有关,且克隆性增殖Vα亚家族分布以个体特异性为主。 展开更多
关键词 TCRVα基因 T细胞克隆性 慢性粒细胞白血病 RT-PCR 基因扫描
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正常脐血TCR Vα亚家族的分布和克隆性表达 被引量:2
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作者 陈少华 李扬秋 +3 位作者 杨力建 岑东芝 陈思 卢育洪 《暨南大学学报:自然科学与医学版》 CAS 北大核心 2007年第4期 355-359,共5页
目的:了解正常脐血中T细胞受体(TCR)Vα亚家族T细胞的分布和克隆性情况。方法:利用RT-PCR分别扩增10例正常脐血单个核细胞的TCR Vα29个亚家族基因,了解各Vα亚家族的利用情况。阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物... 目的:了解正常脐血中T细胞受体(TCR)Vα亚家族T细胞的分布和克隆性情况。方法:利用RT-PCR分别扩增10例正常脐血单个核细胞的TCR Vα29个亚家族基因,了解各Vα亚家族的利用情况。阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度,了解T细胞的克隆性。9例健康成人外周血和T细胞株Jurkat作为对照。结果:正常脐血T细胞平均表达17.30±5.48个Vα亚家族,占全部家族的59.65%±18.89%,以Vα3,4,5,6,8,10,12,13,15,17,21和Vα25为多见,健康成人外周血T细胞则大部分表达Vα亚家族,Vα1,6和Vα13在脐血中的表达率高于健康成人对照组,而Vα14和Vα16的表达率则低于对照组。T细胞株Jur-kat则仅表达Vα1亚家族。基因扫描显示10例脐血中有2例在Vα24和Vα28 T细胞出现寡克隆性,其余均为多克隆性。结论:脐血中TCR Vα亚家族T细胞分布存在倾斜性,绝大部分TCR Vα亚家族T细胞均呈多克隆性,极个别可出现寡克隆性。 展开更多
关键词 脐血 T细胞受体 基因扫描 克隆性
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微卫星三重PCR基因扫描技术在中国明对虾家系标识中的应用 预览 被引量:14
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作者 孔杰 高焕 +5 位作者 于飞 罗坤 王伟继 孟宪红 刘萍 张天时 《中国水产科学》 CAS 北大核心 2007年第1期 59-66,共8页
在开发中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)微卫星引物的基础上,利用3对微卫星引物,克隆编号分别为H081、RS0683和RS1101,构建中国明对虾的三重PCR稳定扩增体系。在此基础上,进一步利用荧光标记引物的基因扫描技术(Genescan)... 在开发中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)微卫星引物的基础上,利用3对微卫星引物,克隆编号分别为H081、RS0683和RS1101,构建中国明对虾的三重PCR稳定扩增体系。在此基础上,进一步利用荧光标记引物的基因扫描技术(Genescan)对利用精荚移植技术建立的中国明对虾7个半同胞家系和16个全同胞家系进行识别研究。结果表明,该项技术可以准确地把7个半同胞家系的子代个体间、16个全同胞家系的子代个体间以及总的31个全同胞家系的子代个体间区别开,且能准确把这些家系产生的任意子代个体定位到各个家系。该技术可以满足大批量家系材料样本的分析,具有较好的应用价值。 展开更多
关键词 微卫星 三重PCR 基因扫描 中国明对虾 家系识别
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