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杂色鲍一种编码CRAD功能域基因的克隆及其在发育和应激中的表达 预览
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作者 张丽莉 和四梅 +1 位作者 王国栋 王艺磊 《水产学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期1520-1530,共11页
为探讨Caspase募集功能域(CRAD)在鲍发育和应激中的作用,实验通过比对杂色鲍转录组序列和RACE扩增的方法,获得了杂色鲍一条含CRAD的基因全长cDNA,命名为HdCRAD;采用实时定量PCR的方法获得了该基因在发育和应激中的表达谱。结果显示,HdC... 为探讨Caspase募集功能域(CRAD)在鲍发育和应激中的作用,实验通过比对杂色鲍转录组序列和RACE扩增的方法,获得了杂色鲍一条含CRAD的基因全长cDNA,命名为HdCRAD;采用实时定量PCR的方法获得了该基因在发育和应激中的表达谱。结果显示,HdCRAD的cDNA全长1 371 bp,开放阅读框735 bp,编码244个氨基酸。编码蛋白具有保守的CRAD功能域。该基因在各检测组织中均可表达,在黏液腺中表达量最高;在发育各阶段也均有表达,面盘幼虫晚期表达量最高。在细菌感染、高温或缺氧应激处理后,血细胞的HdCRAD表达水平均有显著性变化。在担轮幼虫时期,RNA干扰该基因会显著提高幼虫畸形率;幼虫的caspase-8和DAD1的表达水平会显著上升,而caspase-3的表达水平会下降。研究表明,该基因参与了鲍幼虫发育过程;在成体免疫、耐高温和抗低氧中发挥了一定作用。 展开更多
关键词 杂色鲍 Caspase募集功能域(CRAD) 基因表达 发育 应激 RNAi
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杂色鲍幼虫变态及TR干扰下内参基因的筛选
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作者 张丽莉 徐建波 +1 位作者 王国栋 王艺磊 《集美大学学报:自然科学版》 CAS 2018年第2期91-98,共8页
内参基因的稳定性对实时定量PCR的结果影响巨大。采用Ge Norm、norm Finder和Ref Finder三款软件比较了鲍变态和干扰幼虫甲状腺激素受体(TR)两种情况下内参基因的稳定性。软件分析了EIF5A、OAZ1、YB1、RPL3、RPS9和ACT等6个候选内参... 内参基因的稳定性对实时定量PCR的结果影响巨大。采用Ge Norm、norm Finder和Ref Finder三款软件比较了鲍变态和干扰幼虫甲状腺激素受体(TR)两种情况下内参基因的稳定性。软件分析了EIF5A、OAZ1、YB1、RPL3、RPS9和ACT等6个候选内参基因的C_t值,据此获得各基因的稳定值。在杂色鲍幼虫的变态过程中,EIF5A稳定性最高,排名平均数为1,表明该基因可以作为这一阶段实时定量PCR的内参基因,但是在干扰TR情况下,EIF5A的稳定性下降,排名平均数为3.91。RPS9则与之相反,在变态过程该基因表达稳定性最差,而在干扰TR时表达稳定性最好。ACT在两种情况下稳定性较好,排名平均数均位列第二位,可以作为这两种情况下的通用内参基因。其他基因的稳定性在这两种情况下也发生剧烈变换。这表明内参基因的稳定与样品具体处理情况关系密切。为了保证定量PCR结果的准确性,需要针对具体处理情况相应地进行内参基因的稳定性评估。 展开更多
关键词 杂色鲍 内参基因 稳定性
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杂色鲍HSP90基因启动子的功能分析 预览 被引量:1
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作者 张涛 张子平 +3 位作者 贾锡伟 王淑红 王国栋 王艺磊 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期490-497,共8页
为探索启动子在热休克蛋白90表达调控中的作用,本研究在课题组已有杂色鲍HSP90基因cDNA的基础上,通过Genome walking、Tail-PCR和常规PCR等技术克隆获得该基因的5′调控区序列。在翻译起始位点(ATG)和第一外显子(长度94 bp)之间有一... 为探索启动子在热休克蛋白90表达调控中的作用,本研究在课题组已有杂色鲍HSP90基因cDNA的基础上,通过Genome walking、Tail-PCR和常规PCR等技术克隆获得该基因的5′调控区序列。在翻译起始位点(ATG)和第一外显子(长度94 bp)之间有一个809bp的内含子,第一外显子之前的5′调控区共2800 bp,从预测的转录起始位点(A)起,共2811 bp。在转录起始位点(A)上游–30 bp处存在TATA box。潜在的转录因子结合位点包括ATF、TBP、Sp1、Oct-1、C/EBPalpha、NF-1、NF-κappa B、GATA-1、Sox-2等。CpG岛预测软件分析其含1个CpG岛,长度为131 bp。实验构建了8个启动子缺失片段的萤火虫荧光素酶表达载体,通过瞬时转染293T细胞并进行双荧光素酶报告基因活性检测,确定杂色鲍HSP90基因核心启动子区位于–98~83 bp。在–624~–539 bp,Oct-1、C/EBPalpha、NF-1这3个转录因子都起到一定的抑制作用。 展开更多
关键词 杂色鲍 HSP90 启动子 瞬时转染 功能分析
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杂色鲍DAD1的克隆及在发育、弧菌感染、高温和缺氧下的表达分析 预览 被引量:2
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作者 王国栋 和四梅 +1 位作者 张丽莉 王艺磊 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1018-1027,共10页
抗细胞凋亡因子(DAD1)是细胞凋亡的负调控因子。在杂色鲍转录组测序的基础上,通过RACE的方法,获得了杂色鲍DAD1基因的全长c DNA,命名为HdDAD1。该序列全长553 bp,开放阅读框339 bp,编码112个氨基酸。编码蛋白具有保守的DAD功能域和3... 抗细胞凋亡因子(DAD1)是细胞凋亡的负调控因子。在杂色鲍转录组测序的基础上,通过RACE的方法,获得了杂色鲍DAD1基因的全长c DNA,命名为HdDAD1。该序列全长553 bp,开放阅读框339 bp,编码112个氨基酸。编码蛋白具有保守的DAD功能域和3段跨膜区。实时定量PCR结果表明,HdDAD1在杂色鲍所检测组织中均有表达,消化道、鳃、血细胞、粘液腺和肾脏中表达量最高。同样,HdDAD1在发育各阶段均有表达,幼虫阶段表达量最高,原肠胚次之,其他胚胎发育阶段和稚鲍表达量最低。HdDAD1能够响应细菌感染、高温和缺氧应激。在弧菌注射12 h后,表达量显著上升。当水温由最适的25°C上升到28°C时,HdDAD1表达量升高;在31°C持续4和96 h时HdDAD1表达量显著上升。在低氧处理4和96 h时,HdDAD1的表达量也显著上升。 展开更多
关键词 杂色鲍 抗细胞凋亡因子(DAD1) 基因表达 发育 应激
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杂色鲍AP-1的克隆及在发育和弧菌感染后的表达分析 预览 被引量:1
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作者 王国栋 和四梅 +1 位作者 张丽莉 王艺磊 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期227-233,共7页
激活蛋白1(AP-1)是具有亮氨酸拉链功能域的转录因子,参与了发育和免疫等多个生物学过程。为研究该基因在杂色鲍发育和免疫中的作用,本研究克隆了杂色鲍AP-1基因的全长cDNA(命名为HdAP-1),并分析了HdAP-1在各组织、各发育时期以及副... 激活蛋白1(AP-1)是具有亮氨酸拉链功能域的转录因子,参与了发育和免疫等多个生物学过程。为研究该基因在杂色鲍发育和免疫中的作用,本研究克隆了杂色鲍AP-1基因的全长cDNA(命名为HdAP-1),并分析了HdAP-1在各组织、各发育时期以及副溶血弧菌刺激后的表达特征。结果表明,HdAP-1cDNA全长为1482bp,5′非编码区域(5′UTR)为133bp,3′UTR为401bp,开放阅读框为948bp。该基因编码蛋白预测分子量为34.83ku,等电点为9.43,具有典型AP-1蛋白家族的Jun转录因子功能域和bZIP功能域。HdAP-1在所检测7个组织中均有表达,其中血淋巴表达量最高,鳃、肾、肠和黏液腺的表达量次之,肝胰腺和外套膜表达量最低。自受精卵至囊胚期HdAP-1的表达量显著低于原肠胚(P〈0.05),由原肠胚到担轮幼虫该基因表达量继续上升,担轮幼虫至匍匐幼虫期均维持较高的表达水平,变态后在稚鲍中的表达量下降。在副溶血弧菌感染24h后,HdAP-1表达量显著上升(P〈0.05)。其他时段该基因的表达量与对照组相比差异不显著(P〉0.05)。 展开更多
关键词 杂色鲍 激活蛋白(AP-1) 基因表达 发育 细菌感染
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哈维弧菌和鲍类疱疹病毒刺激对杂色鲍免疫相关因子的影响 预览 被引量:2
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作者 赵曼曼 姜敬哲 +2 位作者 何健 孙永婵 王江勇 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期39-48,共10页
以哈维弧菌(Vibrio harveyi)、鲍类疱疹病毒(Abalone herpesvirus,Ab HV)悬液对杂色鲍(Haliotis diversicolor)注射刺激,研究其血淋巴中可溶性总蛋白浓度,免疫相关酶超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、酸性磷酸酶(Aci... 以哈维弧菌(Vibrio harveyi)、鲍类疱疹病毒(Abalone herpesvirus,Ab HV)悬液对杂色鲍(Haliotis diversicolor)注射刺激,研究其血淋巴中可溶性总蛋白浓度,免疫相关酶超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、酸性磷酸酶(Acid Phosphatase,ACP)、碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,AKP)活性的变化,杂色鲍外套膜、鳃、肝胰腺、腹足中血蓝蛋白(Hemocyanin,Hc)基因Hc1、Hc2相对表达量的变化以及感染后杂色鲍无细胞血浆的抑菌性。结果显示:(1)杂色鲍血淋巴中可溶性总蛋白浓度变化显著,呈现出先升高后降低的趋势。(2)无细胞血浆中的SOD、ACP、AKP活性与对照组相比变化显著,哈维弧菌注射组的SOD活性在感染后第6小时显著升高;Ab HV注射组SOD活性与对照组比较在注射后的各个时相均呈下降趋势,从注射后6 h各个时相的SOD活性与对照组相比均差异显著(P〈0.05)。哈维弧菌注射组ACP活性在注射后的第48小时显著升高;Ab HV注射组ACP活性在注射后的第12小时显著升高。哈维弧菌注射组AKP活性在注射后48 h显著升高;AbHV注射组AKP活性在注射后第12小时显著升高。(3)杂色鲍外套膜、鳃、肝胰腺以及腹足中血蓝蛋白两个基因Hc1、Hc2的相对表达量均在注射后的不同时间点出现升高。(4)杂色鲍无细胞血淋巴对哈维弧菌、创伤弧菌和溶珊瑚弧菌这三种贝类病原均表现出了不同程度的抑菌性增强的作用。这些结果表明细菌和病毒的刺激引起了杂色鲍免疫相关因子的变化,使得血淋巴的抑菌性增强。本研究为今后进一步研究杂色鲍的非特异性免疫以及在生产实践中应用免疫技术防治病害提供参考。 展开更多
关键词 哈维弧菌(Vibrio harveyi) 鲍类疱疹病毒(Abalone herpesvirus AbHV) 注射 杂色鲍(Haliotis diversicolor) 免疫相关因子
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杂色鲍精氨酸激酶基因的克隆及其在不同应激条件下的表达 被引量:1
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作者 李文辉 张鑫 +2 位作者 朱友芳 张子平 王艺磊 《厦门大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期315-323,共9页
采用cDNA末端快速扩增(SMART-RACE)技术克隆了杂色鲍(Haliotis diversicolor)精氨酸激酶(HdAK)基因;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测了HdAK基因在各组织中的表达量,并分析了高水温、低溶氧、高水温与低溶氧联合应激及副... 采用cDNA末端快速扩增(SMART-RACE)技术克隆了杂色鲍(Haliotis diversicolor)精氨酸激酶(HdAK)基因;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测了HdAK基因在各组织中的表达量,并分析了高水温、低溶氧、高水温与低溶氧联合应激及副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)感染对鳃组织和血细胞HdAK基因表达量的影响.结果显示:HdAK基因的cDNA全长1 595bp,编码354个氨基酸.所测定的各组织中HdAK基因均有表达,与其他组织相比在肝胰腺中的表达量显著提高(p〈0.05).在高水温、低溶氧、高水温与低溶氧联合应激及副溶血弧菌感染实验中,杂色鲍鳃组织和血细胞的HdAK基因在实验的部分时段显著高于对照组,说明杂色鲍HdAK不但参与能量代谢调节,而且参与了杂色鲍对高水温、低溶氧等不利环境的适应过程及机体免疫反应过程.研究结果可为揭示高水温、低溶氧、高水温与低溶氧联合应激及副溶血弧菌感染对杂色鲍的生理影响的机制提供理论依据. 展开更多
关键词 杂色鲍 精氨酸激酶基因 高水温应激 低溶氧应激 高水温与低溶氧联合应激 副溶血弧菌感染
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杂色鲍(Haliotis diversicolor)硒结合蛋白1基因的克隆及其应激表达 预览
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作者 张鑫 蔡秀红 +5 位作者 黄贻涛 张子平 王国栋 邹志华 王淑红 王艺磊 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期454-462,共9页
硒结合蛋白1(selenium-binding protein 1,SBP1)是一种高度保守的蛋白,广泛参与了机体的多个理化过程。本研究首次获得了杂色鲍(Haliotis diversicolor)SBP1基因的全长c DNA序列2269 bp,并命名为Hd SBP1,ORF为1494 bp,共编码497个氨基... 硒结合蛋白1(selenium-binding protein 1,SBP1)是一种高度保守的蛋白,广泛参与了机体的多个理化过程。本研究首次获得了杂色鲍(Haliotis diversicolor)SBP1基因的全长c DNA序列2269 bp,并命名为Hd SBP1,ORF为1494 bp,共编码497个氨基酸。荧光定量PCR结果显示,Hd SBP1基因在杂色鲍各组织中均有表达,其中在鳃和肾中的表达量相对较高。缺氧处理后,Hd SBP1在鳃组织和血细胞中的表达量分别在处理24 h和192 h后显著升高(P【0.05);高温应激之后,在鳃组织中,Hd SBP1的表达量在第1时相与第3时相显著升高(P【0.05),而在血细胞中只有在第3时相表现出显著性差异;缺氧和高温联合应激之后,鳃组织中Hd SBP1的表达量在192 h显著上调(P【0.05),在血细胞中Hd SBP1的表达量在0 h、4 h和24 h时均显著升高(P【0.05);副溶血弧菌注射感染之后,在鳃组织中Hd SBP1的表达量在6 h和24 h时显著性上调(P【0.05),而血细胞中Hd SBP1基因的表达量在每个时相的实验组都显著高于对照组(P【0.05)。以上不同的应激条件均会导致Hd SBP1在不同组织中的表达量的显著变化,说明Hd SBP1在杂色鲍的免疫反应中可能扮演着重要的角色。 展开更多
关键词 杂色鲍 SBP1基因 高温应激 缺氧诱导 高温和缺氧联合应激 副溶血弧菌感染
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杂色鲍血细胞分类、结构和免疫功能的流式细胞术分析 预览 被引量:3
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作者 冼健安 钱坤 +5 位作者 郭慧 王冬梅 张秀霞 苗玉涛 潘训彬 王安利 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期8-14,共7页
应用流式细胞术对杂色鲍(Haliotis diversicolor Reeve)血细胞的分类、结构和免疫功能进行分析。根据细胞前向角散射光(FSC)和侧向角散射光(SSC)强度的不同,可将血细胞分为三个亚群:透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞,组成比例... 应用流式细胞术对杂色鲍(Haliotis diversicolor Reeve)血细胞的分类、结构和免疫功能进行分析。根据细胞前向角散射光(FSC)和侧向角散射光(SSC)强度的不同,可将血细胞分为三个亚群:透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞,组成比例分别为32.71%、58.17%和8.55%。血细胞的平均总凋亡和死亡率为3.76%。血细胞对荧光微球的总吞噬率为63.67%,其中吞噬1个、2个、3个及以上荧光微球的血细胞分别占22.31%、16.39%、24.96%。线粒体数量、溶酶体数量、非特异性酯酶活性和非诱导性活性氧(ROS)含量均在大颗粒细胞中最高,透明细胞最低。结果表明,杂色鲍三类血细胞在结构和功能上均存在差异,两类颗粒细胞可能在鲍类免疫过程中发挥着更为重要的作用。 展开更多
关键词 杂色鲍 流式细胞术 血细胞 免疫
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“东优1号”杂色鲍及其亲本群体肌肉营养成分的比较分析
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作者 颜孙安 姚清华 +2 位作者 林香信 林虬 苏德森 《福建农业学报》 北大核心 2015年第3期228-234,共7页
对日本、台湾杂色鲍及其杂交后代(“东优1号”)足肌的营养成分进行比较分析。结果表明,“东优1号”的粗蛋白含量显著低于日本群体但高于台湾群体,粗脂肪含量高于双亲;“东优1号”和日本群体足肌的EAA、总氨基酸及呈味氨基酸的含量... 对日本、台湾杂色鲍及其杂交后代(“东优1号”)足肌的营养成分进行比较分析。结果表明,“东优1号”的粗蛋白含量显著低于日本群体但高于台湾群体,粗脂肪含量高于双亲;“东优1号”和日本群体足肌的EAA、总氨基酸及呈味氨基酸的含量均显著高于台湾群体(P <0.05);3种鲍足肌的 SRCAA 均大于80%,且E/T、E/N 均符合 FAO/WHO 的蛋白模式;“东优1号”的饱和脂肪酸(SFA)和必需脂肪酸(EFA)总量均显著低于双亲,不饱和脂肪酸总量显著低于台湾群体而高于日本群体,多不饱和脂肪酸(PUFA)n-6和 n-3的比值低于双亲,ΣPUFA 与ΣSFA 的比值高于双亲。3种鲍足肌均含有种类齐全、比例合理的氨基酸,脂肪酸营养丰富、结构均衡,具有较高的营养价值,是优质的蛋白源。“东优1号”的营养成分较好地综合了双亲的优良性状,部分性状优于双亲,更符合人类健康饮食的要求。 展开更多
关键词 杂色鲍 日本群体 台湾群体 东优 1 营养成分
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杂色鲍原代细胞培养方法的优化及其在基因功能研究中的应用 预览
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作者 李敏 张丽莉 +2 位作者 王国栋 张龙辉 王艺磊 《安徽农业科学》 CAS 2015年第15期146-150,共5页
优化了杂色鲍原代细胞的培养条件,并利用原代细胞进行了RNAi和外源基因表达。结果表明,较高的渗透压对血淋巴细胞培养起重要作用,淋巴细胞分离液分离血淋巴细胞更利于其生长。原代细胞培养至第5天,在细胞培养液中添加50μg My D88 dsRNA... 优化了杂色鲍原代细胞的培养条件,并利用原代细胞进行了RNAi和外源基因表达。结果表明,较高的渗透压对血淋巴细胞培养起重要作用,淋巴细胞分离液分离血淋巴细胞更利于其生长。原代细胞培养至第5天,在细胞培养液中添加50μg My D88 dsRNA,能够显著降低My D88 mRNA的表达。p EGFP-N1转染培养5 d的鳃细胞,5 d后可以检测到绿色荧光。该研究表明可以成功培养杂色鲍血和鳃原代细胞,并且利用原代细胞可以进行功能基因表达量调低或调研究,为功能基因注释提供了便利条件。 展开更多
关键词 杂色鲍 原代细胞培养 RNAI 转染
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维甲酸X受体在杂色鲍性腺发育中的调控作用研究 预览 被引量:2
12
作者 王鑫 王淑红 《安徽农业科学》 CAS 2015年第23期140-142,150共4页
[目的]研究维甲酸X受体在杂色鲍性腺发育中的调控作用。[方法]采用实时定量PCR技术和RNA干扰技术,分析RXR基因在杂色鲍性腺发育过程中的表达情况。[结果]RXR基因在性腺发育增殖期的不同组织的表达量与其他发育时期相比均存在显著差异,... [目的]研究维甲酸X受体在杂色鲍性腺发育中的调控作用。[方法]采用实时定量PCR技术和RNA干扰技术,分析RXR基因在杂色鲍性腺发育过程中的表达情况。[结果]RXR基因在性腺发育增殖期的不同组织的表达量与其他发育时期相比均存在显著差异,这表明增殖期是RXR在杂色鲍性腺分化与发育发挥作用的窗口期。注射dsRXR后,dsRXR注射组维甲酸X受体在卵巢中的表达量与绿色荧光阴性对照组和空白对照组相比显著下调。这些结果证实了对杂色鲍进行活体注射双链RNA可以让体内的目的基因产生基因沉默现象。[结论]RXR基因在杂色鲍性腺发育过程中起到关键作用,并且增殖期为RXR发挥作用的窗口期。 展开更多
关键词 杂色鲍 维甲酸X受体 性腺发育 RNA干扰
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杂色鲍黄壳色突变体的形态学参数及营养成分分析 被引量:4
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作者 王波 柯才焕 +1 位作者 李卫东 游伟伟 《厦门大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期478-484,共7页
以杂色鲍(Haliotis diversicolor)正常壳色个体与黄壳色突变个体为研究对象,对二者的形态学参数及营养成分进行了比较.结果表明,二种壳色的杂色鲍在体型、质量等主要的表型指标和壳型及密度相关的参数上并无显著差异,颜色的突变并未... 以杂色鲍(Haliotis diversicolor)正常壳色个体与黄壳色突变个体为研究对象,对二者的形态学参数及营养成分进行了比较.结果表明,二种壳色的杂色鲍在体型、质量等主要的表型指标和壳型及密度相关的参数上并无显著差异,颜色的突变并未造成二者形态学上的差异.两个壳色群体足肌组织中水分、灰分、粗蛋白和粗脂肪等一般营养成分的含量以及氨基酸和脂肪酸的种类和含量也基本一致.但足肌、内脏团与鲍壳的矿物质元素含量比较结果显示,黄壳色个体鲍壳中Cu元素的含量是正常壳色的4倍,这或是引起壳色变化的一个主要因素. 展开更多
关键词 杂色鲍 壳色 形态学参数 营养成分
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不同浓度苯并(a)芘对杂色鲍抗氧化酶活性的影响 预览 被引量:1
14
作者 刘洁 林智勇 王克坚 《应用海洋学学报》 CAS CSCD 2014年第4期486-491,共6页
为阐释不同浓度苯并(a)芘[B(a)P]对杂色鲍(Haliotis diversicolor)的毒性效应,以0.02、0.04和0.08 mg/dm^33个质量浓度的B(a)P对杂色鲍进行水体暴露胁迫,7d后检测肌肉、外套膜、鳃、性腺、肾和肝胰腺的超氧化物歧化酶(SOD)、... 为阐释不同浓度苯并(a)芘[B(a)P]对杂色鲍(Haliotis diversicolor)的毒性效应,以0.02、0.04和0.08 mg/dm^33个质量浓度的B(a)P对杂色鲍进行水体暴露胁迫,7d后检测肌肉、外套膜、鳃、性腺、肾和肝胰腺的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)含量.结果显示:0.02 mg/dm^3的B(a)P暴露对杂色鲍抗氧化系统的影响不明显,而0.04、0.08 mg/dm^3的B(a)P则显著抑制了SOD、CAT和GPx酶活性以及GSH含量,同时对GST酶活性具有显著的诱导作用;实验还发现,不同组织抗氧化酶活性对B(a)P胁迫的敏感性响应存在较大差异,其中鳃、肾脏和肝胰腺的敏感性响应明显高于肌肉和外套膜.上述结果表明,苯并(a)芘暴露对杂色鲍抗氧化酶活性的影响具有明显的剂量-效应关系及组织差异性,杂色鲍的鳃、肾脏或者肝胰腺的抗氧化酶响应多环芳香烃胁迫的更敏感,可作为B(a)P污染的生物标志物. 展开更多
关键词 海洋生物学 杂色鲍 苯并(A)芘 抗氧化酶活性
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血蓝蛋白在杂色鲍各组织中的分布研究 预览 被引量:1
15
作者 张晗 姜敬哲 +2 位作者 何健 谷露 王江勇 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期34-38,共5页
利用Western blotting方法对血蓝蛋白(hemocyanin)抗体浓度进行优化,进而运用免疫组化方法对杂色鲍(Haliotis diversicolor)血蓝蛋白在肝胰脏、外套膜、鳃、消化道、腹足中的分布规律进行了研究。免疫组织学检测发现血蓝蛋白在杂色... 利用Western blotting方法对血蓝蛋白(hemocyanin)抗体浓度进行优化,进而运用免疫组化方法对杂色鲍(Haliotis diversicolor)血蓝蛋白在肝胰脏、外套膜、鳃、消化道、腹足中的分布规律进行了研究。免疫组织学检测发现血蓝蛋白在杂色鲍各组织中均有分布,其中肝胰脏、外套膜和鳃中分布较多,消化道和腹足中相对较少。 展开更多
关键词 杂色鲍 血蓝蛋白 免疫组化 分布
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杂色鲍14-3-3ζ基因的克隆及其在应激下的表达 预览 被引量:2
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作者 张鑫 黄贻涛 +5 位作者 蔡秀红 张子平 王国栋 邹志华 王淑红 王艺磊 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期492-502,共11页
酪氨酸3-加单氧酶/色氨酸5-加单氧酶激活蛋白ξ(14—3—3ξ蛋白)是14—3-3蛋白家族的亚型之一。14—3—3蛋白是一种高度保守的酸性可溶性蛋白,它可以与激酶、磷酸酶等多种信号蛋白结合,并在信号转导和细胞凋亡等过程中发挥相应的... 酪氨酸3-加单氧酶/色氨酸5-加单氧酶激活蛋白ξ(14—3—3ξ蛋白)是14—3-3蛋白家族的亚型之一。14—3—3蛋白是一种高度保守的酸性可溶性蛋白,它可以与激酶、磷酸酶等多种信号蛋白结合,并在信号转导和细胞凋亡等过程中发挥相应的作用。本实验通过SMART—RACE技术首次获得了杂色鲍14—3—3ξ基因的全长,并命名为Hd 14—3—3ξ,其cDNA全长为3010bp,ORF为819bp,共编码272个氨基酸。实时荧光定量PCR结果显示,Hd14—3—3ξ基因在杂色鲍各组织中均有表达,其中在肝胰腺和血细胞中的表达量相对较高。当处于缺氧环境下时,鳃组织中Hd14—3—3ξ的表达在4h时存在显著差异,血细胞中Hd14—3—3ξ在24h和96h时表达量显著上调。高温应激下,Hd14—3—3ξ在血细胞中的表达量无显著变化,而鳃组织中Hd14—3—3ξ在96h的表达量却显著上调。高温缺氧联合应激实验表明,鳃组织中Hd14—3—3ξ在4h、24h和96h均显著上调,而血细胞中的表达量没有显著性变化。经检测发现,副溶血弧菌注射后,鳃组织中Hd14—3-3ξ在3h和24h,血细胞中在6h和24h的表达量显著上调。以上温度、溶氧量等环境因素以及病原菌的刺激均会导致Hd14—3—3ξ在不同组织中表达量的显著变化,说明Hd14-3-3ξ在杂色鲍的免疫反应中可能扮演着重要的角色。 展开更多
关键词 杂色鲍 14—3—3ξ基因 高温应激 缺氧诱导 高温缺氧联合应激 副溶血弧菌
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总汞及无机砷在2种鲍鱼不同组织含量分布研究 预览 被引量:1
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作者 宋凯 郭远明 +1 位作者 尤炬炬 金雷 《广州化工》 CAS 2013年第17期150-152,共3页
捅要:利用微波消解-氢化物发生原子荧光光谱法,测定不同产地皱纹盘鲍与杂交鲍内脏及肌肉中总汞及无机砷的含量,汞的检出限为0.002mg/kg,回收率87.5%~97.5%,RSD〈5%,无机砷检出限为0.05mg/kg,回收率在95.5%~102.5... 捅要:利用微波消解-氢化物发生原子荧光光谱法,测定不同产地皱纹盘鲍与杂交鲍内脏及肌肉中总汞及无机砷的含量,汞的检出限为0.002mg/kg,回收率87.5%~97.5%,RSD〈5%,无机砷检出限为0.05mg/kg,回收率在95.5%~102.5%之间,RSD〈5%,各元素的线性关系均良好(r=0.9990~0.9999),该方法的精密度和准确性良好。检测结果表明,两种鲍鱼内脏及肌肉富集汞与无机砷的能力具有明显的差异,内脏高于肌肉中的含量,无机砷含量远大于汞的含量。 展开更多
关键词 皱纹盘鲍 杂色鲍 内脏 肌肉 无机砷
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杂色鲍后消化道生长相关基因HdEGF1的研究 被引量:2
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作者 张洁 陈志森 +2 位作者 陈军 柯才焕 游伟伟 《厦门大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期560-568,共9页
附着变态是许多海洋无脊椎动物幼体生长发育的一个必经过程,是幼体性状消失而成体性状展开的关键阶段.报道了与附着变态密切相关的杂色鲍HdEGFl基因的克隆、序列分析及其时空表达模式.运用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆了HdEGFl... 附着变态是许多海洋无脊椎动物幼体生长发育的一个必经过程,是幼体性状消失而成体性状展开的关键阶段.报道了与附着变态密切相关的杂色鲍HdEGFl基因的克隆、序列分析及其时空表达模式.运用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆了HdEGFl基因全长cDNA序列.该基因全长1239bp,含1个343个氨基酸残基的开放阅读框(ORF),推测的蛋白序列包含3个Ca2+结合类表皮生长因子(EGF—CA)结构域和1个血管性血友病因子(vWFA)结构域.通过序列相似性比较,确定其为新型表皮生长因子1(EGFl)相关蛋白.荧光定量PCR(qPCR)结果显示HdEGFl基因在幼体附着后的表达量比附着前任一时期均高19倍以上;全胚原位杂交(WMISH)结果显示HdEGFl基因集中表达在变态后幼体后消化道的表皮细胞.HdEGFl基因的这种时空表达模式表明HdEGFl受严格的时空调控,直接参与了附着后杂色鲍幼体后消化道的生长和细胞分化.推测HdEGFl蛋白与某未知的vWFA一结合蛋白一道调控着杂色鲍幼体后消化道的空间走向.因此,HdEGFl蛋白很可能在后肠的形态建成中起着非常核心的作用.本研究为贝类肠道形态建成机制的深入研究提供了切入点,HdEGFl基因可以作为重要的标志分子,用于深入研究肠道形态建成过程中的信号通路、细胞分化和细胞迁移. 展开更多
关键词 杂色鲍 附着变态 表皮生长因子相关蛋白 HdEGF1基因 消化道末端
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杂色鲍及其杂交后代的氨基酸含量和组成分析 被引量:6
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作者 颜孙安 林香信 +1 位作者 姚清华 林虬 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第6期249-256,共8页
目的:分析日本、台湾杂色鲍及其杂交后代("东优1号")足肌和壳的氨基酸含量及组成。方法:采用水解法和磺基水杨酸提取法进行氨基酸分析,以氨基酸比值系数分(SRCAA)进行评价。结果:3种鲍足肌含有18种蛋白质氨基酸和3种非蛋白质... 目的:分析日本、台湾杂色鲍及其杂交后代("东优1号")足肌和壳的氨基酸含量及组成。方法:采用水解法和磺基水杨酸提取法进行氨基酸分析,以氨基酸比值系数分(SRCAA)进行评价。结果:3种鲍足肌含有18种蛋白质氨基酸和3种非蛋白质氨基酸;其SRCAA均大于80%,且E/T、E/N符合FAO/WHO的蛋白模式;"东优1号"和日本群体足肌的EAA、总氨基酸(TAA)及其他功能性氨基酸的含量均显著高于台湾群体(P〈0.05);3种鲍壳蛋白中含有18种氨基酸,"东优1号"鲍壳的TAA和EAA含量均高于双亲。结论:3种鲍足肌蛋白中的氨基酸种类齐全,比例合理,具有较高的营养价值,是一种优质的蛋白源。"东优1号"的足肌和壳在氨基酸营养方面,较好地综合了双亲的优良性状,且部分性状优于双亲。 展开更多
关键词 杂色鲍 日本群体 台湾群体 东优1号 氨基酸
重金属对杂色鲍离体血细胞活性的影响 被引量:1
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作者 冼健安 苗玉涛 +1 位作者 潘训彬 王安利 《四川动物》 CSCD 北大核心 2013年第3期415-418,共4页
对杂色鲍Haliotis diversicolor的离体血细胞进行不同浓度(10-3~10-9M)的重金属离子(Cd2+、Hg2+、Cu2+和Zn2+)胁迫,应用PI染色的流式细胞术测定血细胞活性的变化。结果显示胁迫6h后,10-3M和10-4MCd2+,10-3M、10-4M和10-5MHg2... 对杂色鲍Haliotis diversicolor的离体血细胞进行不同浓度(10-3~10-9M)的重金属离子(Cd2+、Hg2+、Cu2+和Zn2+)胁迫,应用PI染色的流式细胞术测定血细胞活性的变化。结果显示胁迫6h后,10-3M和10-4MCd2+,10-3M、10-4M和10-5MHg2+,10-3MCu2+,10-3M和10-4MZn2+导致血细胞的死亡率显著上升(P〈0.05);当浓度为10-3M时,Cd2+、Hg2+、Cu2+和Zn2+组的死亡率分别为41.76%、48.75%、23.28%和28.52%。四种重金属对杂色鲍血细胞的毒性依次为:Hg2+〉Cd2+〉Zn2+〉Cu2+。 展开更多
关键词 杂色鲍 血细胞 细胞活性 流式细胞术
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