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miRNA-23靶向gremlin1调节肝癌细胞的生物学功能分析 预览
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作者 陈智慧 张昌艳 +1 位作者 杨红春 马海 《河北医药》 CAS 2019年第21期3316-3318,3322共4页
目的探讨miRNA-23靶向gremlin1调节肝癌细胞的生物学功能。方法将人肝癌细胞株HSMMC-7721分为高表达组、抑制组和对照组,高表达组转染miRNA-23mimics,抑制组转染miRNA-23inhibitor,对照组不进行转染。MTT实验检测细胞增殖,流式细胞仪实... 目的探讨miRNA-23靶向gremlin1调节肝癌细胞的生物学功能。方法将人肝癌细胞株HSMMC-7721分为高表达组、抑制组和对照组,高表达组转染miRNA-23mimics,抑制组转染miRNA-23inhibitor,对照组不进行转染。MTT实验检测细胞增殖,流式细胞仪实验检测细胞周期,Transwell小室实验检测细胞侵袭,Western blot检测gremlin1表达。结果高表达组的miRNA-23相对表达量显著高于抑制组和对照组(P<0.05),抑制组和对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与抑制组和对照组相比,高表达组的细胞增殖率显著降低,S期与G2/M期比例显著增加,GO/G1期比例显著减少,细胞侵袭数显著减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。与抑制组和对照组相比,高表达组的gremlin1蛋白相对表达量显著下降(P<0.05)。结论 miRNA-23高表达能抑制gremlin1的表达,调节肝癌细胞周期,抑制肝癌细胞增殖与侵袭,可为防治肝癌提供新的思路和治疗靶点。 展开更多
关键词 miRNA-23 gremlin1 肝癌细胞 细胞周期 细胞侵袭
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miR-92a通过下调RAB3B表达促进肝癌细胞增殖、迁移的机制分析 预览
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作者 单留群 方征 +1 位作者 刘洪 罗昆仑 《临床和实验医学杂志》 2019年第12期1266-1270,共5页
目的分析miR-92a通过下调RAB3B表达促进肝癌细胞增殖、迁移的机制。方法将miR-92a mimics及miRNA control分别转染至肝癌细胞SKHep-1,分别设为miR-92a组及miR-92a NC组,未经转染的SKHep-1细胞为对照组。采用荧光素酶报告基因检测miR-92a... 目的分析miR-92a通过下调RAB3B表达促进肝癌细胞增殖、迁移的机制。方法将miR-92a mimics及miRNA control分别转染至肝癌细胞SKHep-1,分别设为miR-92a组及miR-92a NC组,未经转染的SKHep-1细胞为对照组。采用荧光素酶报告基因检测miR-92a与RAB3B的靶向关系,利用实时荧光定量PCR(q PT-PCR)分析各组细胞miR-92a与RAB3B的表达水平,MTT法检测细胞增殖情况,划痕实验分析细胞迁移,Western blot检测各蛋白表达水平。结果 RAB3B是miR-92a的下游靶基因。相比较于对照组及miR-92a NC组,miR-92a组细胞miR-92a表达量明显升高,而相应的RAB3B表达量明显降低(P <0.05)。miR-92a组细胞不同时间细胞增殖数及划痕愈合率均明显高于对照组及miR-92a NC组(P <0.05)。相比较于对照组及miR-92a NC组细胞,miR-92a组细胞中RAB3B蛋白表达量明显降低(P <0.05),而Ki67、VEGF、MMP-2及MMP-9蛋白对表达量明显升高(P <0.05)。结论MiR-92a可通过靶向下调RAB3B表达实现对肝癌细胞增殖及迁移的促进作用,而其作用机制可能与提升Ki67、VEGF、MMP-2及MMP-9蛋白表达有关。 展开更多
关键词 肝癌细胞 MiR-92a RAB3B 增殖 迁移
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健脾解毒方对过表达HBx肝癌HepG2细胞PI3K/AKT通路的影响 预览
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作者 张斌 王晓薇 +3 位作者 徐春江 丁慎华 朱薇珊 钱雪梅 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2019年第3期56-59,共4页
目的观察健脾解毒方对过表达乙型肝炎病毒 X蛋白(HBx)的肝癌细胞增殖及 PI3K/AKT信号通路相关因子表达的影响。方法构建过表达HBx肝癌的HepG2细胞,给予不同浓度健脾解毒方药物血清进行干预,实验分为肝癌细胞空白组、pcDNA3.1组、pcDNA3.... 目的观察健脾解毒方对过表达乙型肝炎病毒 X蛋白(HBx)的肝癌细胞增殖及 PI3K/AKT信号通路相关因子表达的影响。方法构建过表达HBx肝癌的HepG2细胞,给予不同浓度健脾解毒方药物血清进行干预,实验分为肝癌细胞空白组、pcDNA3.1组、pcDNA3.1-HBx组和健脾解毒方低、中、高剂量组。采用MTT法及流式细胞仪检测细胞增殖及凋亡水平,采用Westernblot检测肝癌细胞 p-PI3K、p-AKT蛋白表达。结果成功构建过表达 HBx的肝癌HepG2细胞,发现有促进肝癌细胞增殖及上调 p-PI3K及p-AKT表达的作用。健脾解毒方药物血清干预后,可不同程度抑制肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡,以及下调p-AKT、p-PI3K表达的作用,而健脾解毒方低剂量组对 p-PI3K表达作用不显著。结论健脾解毒方有抑制肝癌细胞增殖及促进凋亡的作用,其机制与下调 PI3K/AKT通路相关因子表达有关。 展开更多
关键词 肝癌细胞 PI3K/AKT信号通路 乙型肝炎病毒X蛋白 健脾解毒方
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沉默肝癌细胞BEL-7404中驱动蛋白家族成员21B表达对细胞生物学行为的影响
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作者 董晓骅 赵慧琪 +3 位作者 董保龙 何雨 高鹏 杨晓军 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1991-1994,共4页
目的检测肝癌组织/正常组织样本以及肝癌细胞株中驱动蛋白家族成员21B(KIF21B)基因的差异表达及对细胞生物学行为的影响。方法采用TCGA数据库筛查KIF21B基因的差异表达;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝癌细胞株中KIF21B基因的表... 目的检测肝癌组织/正常组织样本以及肝癌细胞株中驱动蛋白家族成员21B(KIF21B)基因的差异表达及对细胞生物学行为的影响。方法采用TCGA数据库筛查KIF21B基因的差异表达;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝癌细胞株中KIF21B基因的表达水平;构建靶向沉默KIF21B基因的短发夹RNA(shRNA),感染BEL-7404细胞,获得稳定沉默细胞株,检测转染后肝癌细胞中KIF21B的mRNA表达水平及蛋白表达水平变化;Celigo检测KIF21B基因消减对细胞增殖的影响;噻唑蓝(MTT)检测KIF21B基因消减对细胞增殖的影响;流式细胞荧光分选(FACS)检测KIF21B基因消减对细胞凋亡的影响;克隆形成实验检测KIF21B基因消减对细胞克隆形成能力的影响。计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用t检验。结果与正常组织比较,KIF21B基因在31份肝癌组织中表达上调,14份无变化,5份下调。KIF21B在4种肝癌细胞株表达水平高于正常肝组织细胞Chang Liver(P<0.05)。靶向KIF21B的shRNA可有效沉默KIF21B的表达,MTT法检测KIF21B消减后BEL-7404细胞实验组与未处理组的增长率(P<0.05)受到显著抑制;凋亡显著增加(P<0.05);克隆形成能力检测KIF21B细胞的克隆形成能力显著下降(25.3±3.7比418.2±26.5,P<0.05)。结论沉默KIF21B基因后,肝癌细胞凋亡增加,增殖及克隆形成能力明显下降。 展开更多
关键词 肝癌细胞 驱动蛋白家族成员21B 凋亡 增殖
敲低EN2诱导肝癌细胞凋亡并提高PTEN蛋白的表达 预览
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作者 杨启 万春 吕新远 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2019年第4期316-321,共6页
目的探讨EN2对肝癌细胞凋亡及细胞中PTEN蛋白表达的影响。方法用EN2 siRNA慢病毒感染肝癌细胞HuH-7,qRT-PCR和Western blot方法检测干扰效果。MTT方法测定细胞活力变化,PI单染法测定细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双染法测定细胞凋亡变... 目的探讨EN2对肝癌细胞凋亡及细胞中PTEN蛋白表达的影响。方法用EN2 siRNA慢病毒感染肝癌细胞HuH-7,qRT-PCR和Western blot方法检测干扰效果。MTT方法测定细胞活力变化,PI单染法测定细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双染法测定细胞凋亡变化,Western blot测定细胞中激活型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)、激活型Caspase-9(Cleaved Caspase-9)、第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)及细胞周期素B 1(Cyclin B 1)蛋白水平,JC-1法测定线粒体膜电位变化,Western blot测定胞浆中细胞色素C(Cytochrome C)蛋白水平。结果 EN2 siRNA慢病毒感染可明显下调肝癌细胞中EN2的表达。沉默EN2表达后的肝癌细胞活力降低,细胞凋亡率升高,细胞G2/M期比例升高,细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、PTEN蛋白水平明显升高,Cyclin B1蛋白水平明显降低,线粒体膜电位下降,胞质中Cytochrome C蛋白水平升高。结论敲低EN2可以阻滞肝癌细胞周期,诱导肝癌细胞凋亡,其作用机制可能与PTEN、线粒体凋亡途径有关。 展开更多
关键词 肝癌细胞 EN2 PTEN 凋亡
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不同炮制方法对人参皂苷含量及肝癌细胞凋亡的影响 预览 被引量:1
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作者 杜瑞雪 郗艳丽 +2 位作者 张洋婷 冯小雨 李善姬 《中国兽医杂志》 北大核心 2018年第2期94-96,100共4页
为了探讨不同炮制方法对人参皂苷含量及肝癌细胞凋亡的影响,采用HPLC法测定人参液中单体皂苷Rg1、Re、Rb1(三者合为总皂苷)和稀有皂苷Rg3的含量;MTT法检测不同人参提取液对人肝癌细胞HepG2的抑制率,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果... 为了探讨不同炮制方法对人参皂苷含量及肝癌细胞凋亡的影响,采用HPLC法测定人参液中单体皂苷Rg1、Re、Rb1(三者合为总皂苷)和稀有皂苷Rg3的含量;MTT法检测不同人参提取液对人肝癌细胞HepG2的抑制率,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果表明,在人参炮制过程中,人参总皂苷含量由0.56%下降到0.13%,稀有皂苷Rg3含量由0.17%增加到0.30%;抑制率检测结果表明,浓度为28.8 g/L时3种提取液对细胞的抑制作用最强,黑参组对肝癌细胞的抑制作用高于人参组和红参组;凋亡实验发现,黑参提取液对细胞的促进凋亡作用明显,人参提取液的促凋亡作用不明显。表明红参和黑参提取液可以抑制人肝癌细胞HepG2增殖并促进其凋亡,可能与参液中的稀有皂苷Rg3含量有关。 展开更多
关键词 红参 黑参 稀有皂苷Rg3 肝癌细胞 细胞凋亡
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青蒿素在肝癌细胞中的作用及对基因、功能的影响研究 预览
7
作者 桂思吟 《世界最新医学信息文摘(电子版)》 2018年第15期11-12,共2页
目的探讨青蒿素在肝癌细胞中的作用及对基因、功能的影响。方法购置Hep G2肝癌细胞株,随机分为对照组与青蒿素组。对照组细胞进行常规培养,青蒿素组采用浓度50 umol/L青蒿素对细胞连续处理24 h,提取总RNA并进行lnc RNA芯片杂交技术检测l... 目的探讨青蒿素在肝癌细胞中的作用及对基因、功能的影响。方法购置Hep G2肝癌细胞株,随机分为对照组与青蒿素组。对照组细胞进行常规培养,青蒿素组采用浓度50 umol/L青蒿素对细胞连续处理24 h,提取总RNA并进行lnc RNA芯片杂交技术检测lnc RNA表达谱的变化情况,完成lnc RNA的筛选;采用MTT法测定2种细胞的增殖能力;利用TUNEL对肝癌细胞进行染色,观察肝癌细胞凋亡情况。结果青蒿素组细胞经过青蒿素处理后24 h、36 h、48 h及72 h细胞的增殖抑制率,均低于对照组(P〈0.05);肝癌细胞经过青蒿素处理后lnc RNA表达谱发生明显的改变,表达谱中AK125910上调7.61倍,可能参与青蒿素诱导肝癌细胞的作用进程;荧光显微镜下结果表明:对照组细胞未经任何措施处理,细胞未发生调亡,未见绿色荧光;青蒿素组细胞经处理后可见大量绿色荧光,细胞发生凋亡。结论青蒿素在肝癌细胞中能引起lnc RNA表达谱的改变,可能参与肝癌细胞凋亡的进程,能抑制肿瘤的侵袭、转移。 展开更多
关键词 青蒿素 肝癌细胞 lncRNA表达谱 基因、功能 侵袭、转移
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沉默GRP94基因对肝癌细胞的影响 预览 被引量:1
8
作者 和小华 林兰 +2 位作者 顾健美 张小霞 王秋红 《蚌埠医学院学报》 CAS 2018年第9期1129-1133,共5页
目的: 探讨GRP94基因对肝癌细胞的影响。方法: 用脂质体法转染GRP94 siRNA序列及阴性对照序列,采用实时荧光定量PCR及Western blotting方法检测转染后GRP94的mRNA和蛋白表达水平。以CCK-8和流式细胞仪来检测细胞增殖和细胞凋亡的情... 目的: 探讨GRP94基因对肝癌细胞的影响。方法: 用脂质体法转染GRP94 siRNA序列及阴性对照序列,采用实时荧光定量PCR及Western blotting方法检测转染后GRP94的mRNA和蛋白表达水平。以CCK-8和流式细胞仪来检测细胞增殖和细胞凋亡的情况。以划痕实验和Transwell方法检测转染后细胞的迁移和侵袭能力。结果: 在肝癌细胞HepG2中瞬时转染siRNA-GRP94序列及阴性对照序列后,其mRNA 和蛋白表达显著减低;转染48 h后,细胞增殖能力明显下降,而细胞凋亡率明显上升。划痕实验检测发现24 h细胞愈合率明显抑制,Transwell实验发现迁移和侵袭至下室的细胞数目显著减少。结论: GRP94基因对肝癌细胞 HepG2凋亡有抑制作用,促进增殖、迁移和侵袭能力,为进一步研究 GRP94在肝细胞肝癌发生和进展中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 肝癌细胞 葡萄糖调节蛋白 增殖 凋亡 迁移 侵袭
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溪黄草黄酮对肝癌细胞增殖,迁移和侵袭的影响及相关机制 预览
9
作者 李晨瑜 张喜红 《世界华人消化杂志》 CAS 2018年第17期1029-1035,共7页
目的探讨溪黄草黄酮[Flavonoids from Rabdosia serra(Maxim.)Hara]对人肝癌细胞株Hep G2的增殖、迁移与侵袭能力的影响,并研究初步机制.方法 CCK-8法检测不同浓度溪黄草黄酮(0、1、5、10、20和40μmol/L)对Hep G2细胞活性的影响;... 目的探讨溪黄草黄酮[Flavonoids from Rabdosia serra(Maxim.)Hara]对人肝癌细胞株Hep G2的增殖、迁移与侵袭能力的影响,并研究初步机制.方法 CCK-8法检测不同浓度溪黄草黄酮(0、1、5、10、20和40μmol/L)对Hep G2细胞活性的影响;划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blot检测Notch-1,Cyclin D1,MMP-2和MMP-9蛋白表达水平变化.结果 CCK-8法检测结果显示溪黄草黄酮呈浓度依赖性抑制Hep G2细胞的生长,当浓度到达20μmol/L时,抑制作用达到最大;经溪黄草黄酮干预后,Hep G2细胞迁移和侵袭能力显著下降,Notch-1,Cyclin D1,MMP-2和MMP-9蛋白表达水平显著下降.结论溪黄草黄酮具有抑制肝癌细胞株Hep G2增殖、迁移和侵袭的作用,其作用机制可能与溪黄草黄酮抑制Notch-1-MMP-2/-9和Notch-1-Cyclin D1信号通路相关. 展开更多
关键词 溪黄草黄酮 增殖 迁移 侵袭 肝癌细胞
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TLR4基因多态性对索拉菲尼治疗肝癌的影响及相关分子机制
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作者 黄萃园 张洪 +2 位作者 白瑞丹 吕舰 王丽 《中国医院药学杂志》 北大核心 2018年第16期1712-1715,共4页
目的:研究TLR4基因多态性对索拉菲尼治疗肝癌的影响并探讨其相关分子机制。方法:CCK-8法检测索拉菲尼对各细胞的抑制率,并计算索拉菲尼在不同组细胞的IC50;Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞使用索拉菲尼后的凋亡情况,再与未使用... 目的:研究TLR4基因多态性对索拉菲尼治疗肝癌的影响并探讨其相关分子机制。方法:CCK-8法检测索拉菲尼对各细胞的抑制率,并计算索拉菲尼在不同组细胞的IC50;Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞使用索拉菲尼后的凋亡情况,再与未使用索拉菲尼时各组细胞的凋亡率进行比较;Western-blot检测TLR4信号通路蛋白JNK、P-JNK、ERK及P-ERK的表达水平。结果:与野生型细胞株相比,突变型细胞株能够显著性促进索拉菲尼对肝癌细胞HepG2的抑制率,并且索拉菲尼在突变型细胞组的IC50值显著性低于野生型细胞组,流式凋亡检测表明,索拉菲尼对突变型细胞株的促凋亡作用较野生型细胞株更强。Western blot结果表明野生型细胞株中P-JNK和P-ERK的表达水平较突变型细胞高,差异具有显著性(P〈0.05)。结论:TLR4基因多态性可以通过调控JNK及ERK信号通路来促进肝癌细胞HepG2对索拉菲尼的敏感性。 展开更多
关键词 TLR4 基因多态性 肝癌细胞 索拉菲尼
氯化两面针碱对肝癌细胞蛋白表达谱的影响研究 预览
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作者 廖柳凤 欧贤红 +2 位作者 吴琼 雷宇 刘华钢 《内科》 2018年第6期820-822,869共4页
目的通过分析氯化两面针碱(NC)对体外培养肝癌细胞蛋白表达谱的影响,探讨其对肝癌细胞抑制的作用机制。方法应用蛋白芯片飞行时间质谱技术测定NC作用前后肝癌细胞蛋白的表达谱,在蛋白质专家网站(ExPASy)上进行比对,采用单因素方差分析... 目的通过分析氯化两面针碱(NC)对体外培养肝癌细胞蛋白表达谱的影响,探讨其对肝癌细胞抑制的作用机制。方法应用蛋白芯片飞行时间质谱技术测定NC作用前后肝癌细胞蛋白的表达谱,在蛋白质专家网站(ExPASy)上进行比对,采用单因素方差分析比较不同组中相同质荷比的蛋白质含量,对处理前后的质谱变化进行配对t检验分析。结果采用NC处理人肝癌细胞SMMC-7721后,应用蛋白芯片飞行时间质谱技术共筛选出有统计学意义的差异表达蛋白质峰14个,这些差异蛋白主要跟细胞凋亡、细胞周期、信号转导、转录、DNA复制及修复、代谢、免疫等通路有关。结论氯化两面针碱对肝癌细胞的抑制作用,可能是通过免疫、代谢等多条通路综合作用的结果。 展开更多
关键词 氯化两面针碱 肝癌细胞 SELDI-TOF-MS技术 蛋白表达谱
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玉米须黄酮利用肝癌细胞降糖实验研究 预览 被引量:2
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作者 王秋实 李凤林 《吉林农业科技学院学报》 2017年第3期10-13,58共5页
对肝癌HepG2细胞进行玉米须黄酮降糖实验的研究。通过提取得到的黄酮分别设置低、中、高浓度的剂量组以及阳性、模型和空白实验,通过细胞实验得到中高浓度的玉米须黄酮对葡萄糖和甘油三酯进行消耗来起到降糖作用,对葡萄糖-6-磷酸的分... 对肝癌HepG2细胞进行玉米须黄酮降糖实验的研究。通过提取得到的黄酮分别设置低、中、高浓度的剂量组以及阳性、模型和空白实验,通过细胞实验得到中高浓度的玉米须黄酮对葡萄糖和甘油三酯进行消耗来起到降糖作用,对葡萄糖-6-磷酸的分解起到抑制来达到降糖作用,对葡萄糖激酶分解葡萄糖起到促进来达到降糖作用。为缓解糖尿病奠定了基础。 展开更多
关键词 黄酮 肝癌细胞 降糖
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大鼠肝癌细胞照射后非实质细胞影响肝癌细胞基因的变化
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作者 周乐源 张勇 +3 位作者 姚苏芮 殷媛 李杰 黄朝晖 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期1095-1098,共4页
目的探讨照射后微环境对残存的肝癌细胞转移能力影响及分子机制。方法分离大鼠肝脏非实质细胞(NPCs),贴壁后进行照射,然后收集培养上清液与照射过的大鼠肝癌细胞McA-RH7777-6 Gy共培养。经不同培液上清共培养McA-RH7777-6 Gy细胞得... 目的探讨照射后微环境对残存的肝癌细胞转移能力影响及分子机制。方法分离大鼠肝脏非实质细胞(NPCs),贴壁后进行照射,然后收集培养上清液与照射过的大鼠肝癌细胞McA-RH7777-6 Gy共培养。经不同培液上清共培养McA-RH7777-6 Gy细胞得到RH 6 Gy(与未照射NPCs上清液共培养)和RH 6 Gy-R(与照射后NPCs上清液共培养)细胞株。采用基因芯片技术检测RH 6 Gy和RH 6 Gy-R细胞中基因的表达。通过生物信息学对显著变化的基因进行分析,并利用DAVID数据库对这些变化的基因进行功能富集分析(GO-analysis)和信号转导通路富集分析(KEGG-analysis,BIOCARTA-analysis)。进行细胞划痕实验,比较RH 6 Gy细胞和RH 6 Gy-R细胞的运动迁移能力。结果基因芯片检测结果显示,RH 6 Gy-R与RH 6 Gy细胞比较,周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、丝裂原活化蛋白激酶9(MAPK9)、细胞周期蛋白(Cyclin) A、Toll/白细胞介素-1受体相关蛋白(TIRAP)、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1/2(PDK1/2)、磷酸肌醇3激酶(PI3K)等15个肿瘤发生发展相关基因的表达都显著高于未照射上清共培养组,且这些表达差异显著的基因多数富集在肿瘤转移相关通路,如腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路、磷脂酰肌醇信号通路、Ras信号转导通路等。体外划痕实验显示,细胞划痕培养48 h后,RH 6 Gy细胞面积愈合率为(9.00±1.35)%,RH 6 Gy-R细胞面积愈合率为(41.30±6.32)%。结论经照射后的残存的肝癌表现出更强的转移能力,可能与其微环境中的NPCs相关,我们推测照射后的NPCs释放的某些细胞因子促进了肝癌残存细胞转移相关mRNA的表达,从而激活相关癌转移通路。 展开更多
关键词 肝非实质细胞 肝癌细胞 转移 功能富集分析 信号转导通路富集分析
基于AFM肝癌细胞图像的纹理特征分析 预览
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作者 张桐 《数字技术与应用》 2017年第12期232-233,共2页
针对原子力显微镜AFM正常肝细胞和肝癌细胞图像,提出一种基于灰度共生矩阵的肝癌细胞识别方法。该研究采用灰度共生矩阵的方法对正常肝细胞和肝癌细胞的AFM扫描图像提取纹理特征。对比分析特征参数,实现肝癌细胞的识别。以此纹理特征进... 针对原子力显微镜AFM正常肝细胞和肝癌细胞图像,提出一种基于灰度共生矩阵的肝癌细胞识别方法。该研究采用灰度共生矩阵的方法对正常肝细胞和肝癌细胞的AFM扫描图像提取纹理特征。对比分析特征参数,实现肝癌细胞的识别。以此纹理特征进行的肝癌细胞识别方法,操作简单,精确度高。 展开更多
关键词 肝癌细胞 纹理特征 灰度共生矩阵 细胞识别
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TLR4基因多态性对肝癌细胞HepG2增殖、迁移及凋亡的影响 预览
15
作者 黄萃园 张洪 白瑞丹 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第22期3578-3582,共5页
目的:研究TLR4基因多态性对人肝癌细胞HepG2细胞增殖、迁移及凋亡的影响,并探讨其相关分子机制。方法:构建TLR4野生型(WT)、1196(C/T)位点及896(A/G)位点突变型质粒并将其稳转HepG2细胞株中;CCK-8法检测、AnnexinV-PE/7-AAD流... 目的:研究TLR4基因多态性对人肝癌细胞HepG2细胞增殖、迁移及凋亡的影响,并探讨其相关分子机制。方法:构建TLR4野生型(WT)、1196(C/T)位点及896(A/G)位点突变型质粒并将其稳转HepG2细胞株中;CCK-8法检测、AnnexinV-PE/7-AAD流式细胞仪及Transwell小室实验检测TLR4基因多态性对HepG2细胞增殖、迁移及凋亡的影响;Western blot检测NF-κBp65(nuclear factor κBp65)表达水平的差异。结果:Western blot结果表明三组TLR4过表达细胞株中TLR4的含量显著高于正常组。与正常HepG2细胞相比,三组TLR4过表达细胞株增殖能力、迁移能力及p65表达量均增加;与TLR4野生型组相比,两组突变型细胞株增殖能力、迁移能力及p65表达量均减弱,且凋亡率增加,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:TLR4可能通过影响NF-κBp65相关蛋白的表达促进肝癌细胞HepG2的增殖及迁移,其基因1196(C/T)位点及896(A/G)位点的突变会减弱肝癌细胞的增殖及迁移能力。 展开更多
关键词 TLR4 肝癌细胞 基因多态性 增殖 迁移
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麒麟菜提取物对HepG2、H22肝癌细胞的抗癌作用及机制研究 预览 被引量:1
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作者 全香花 赵园园 +1 位作者 崔萌纳 隋忠国 《实用药物与临床》 CAS 2017年第1期19-22,共4页
目的从麒麟菜中提取天然海藻色素糖蛋白(NSPG),并观察其抗肿瘤作用。方法应用溶剂浸提法从麒麟菜中提取NSPG,应用IR、UV、液相-质谱法、凝胶色谱法测定NSPG样品的分子量及结构特征等。采用MTT比色法测定NSPG作用后HepG2人肝癌细胞、小... 目的从麒麟菜中提取天然海藻色素糖蛋白(NSPG),并观察其抗肿瘤作用。方法应用溶剂浸提法从麒麟菜中提取NSPG,应用IR、UV、液相-质谱法、凝胶色谱法测定NSPG样品的分子量及结构特征等。采用MTT比色法测定NSPG作用后HepG2人肝癌细胞、小鼠H22肝癌细胞的体外活性。结果本研究建立了常温下从麒麟菜中提取NSPG的方法,并测定其理化性质。人HepG2肝癌细胞体外实验结果显示,50、100 mg/L NSPG组培养48 h的细胞增殖活性分别为0.62±0.02、0.54±0.01,低于空白对照组(0.87±0.01),差异有统计学意义(P〈0.05);小鼠H22肝癌细胞体外实验结果显示,NSPG对肿瘤细胞的增殖活性随NSPG浓度的升高而逐渐降低,抑制率逐渐升高,低、中剂量组的增殖活性、抑制率与高剂量组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 NSPG对HepG2人肝癌细胞、小鼠H22肝癌细胞表现出不同程度的肿瘤抑制作用。 展开更多
关键词 天然海藻色素糖蛋白 肝癌细胞 体外抗肿瘤活性
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Survivin启动子控制自杀基因HSV-TK真核表达载体对肝癌细胞杀伤活性的研究 预览 被引量:1
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作者 李勇芳 张英敏 +9 位作者 赵娜 孟凡秀 张琪 高然朋 张悦红 于保锋 郭睿 王海龙 解军 徐钧 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2016年第2期229-233,共5页
目的研究自杀基因单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)对人肝癌细胞的特异性杀伤作用,推进该自杀基因治疗原发性肝癌的可行性,从而为肝癌靶向基因治疗奠定一定的基础。方法将pc DNA3.1-p Survivin-TK质粒转染人肝癌细胞Hep G2中,RT-PCR法检... 目的研究自杀基因单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)对人肝癌细胞的特异性杀伤作用,推进该自杀基因治疗原发性肝癌的可行性,从而为肝癌靶向基因治疗奠定一定的基础。方法将pc DNA3.1-p Survivin-TK质粒转染人肝癌细胞Hep G2中,RT-PCR法检测自杀基因m RNA水平,Western blot法检测自杀基因蛋白量的表达;再次转染上述质粒到肝癌细胞Hep G2中,随着更昔洛韦(GCV)剂量的增加,来监测pc DNA3.1-p Survivin-TK重组载体对细胞的杀伤效果,CCK-8法检测GCV对肝癌细胞的毒性作用,流式细胞术检测细胞凋亡的情况。结果通过RT-PCR法、Western blot法表明了转染该重组质粒的Hep G2细胞可以成功表达TK基因;此外,在外源药物GCV作用下也实现了对肝癌细胞的特异杀伤,CCK-8法表明,随着药物浓度的增高质粒转染组细胞存活率逐渐下降;流式细胞术检测得知,细胞经GCV处理48 h后,转染pc DNA3.1-p Survivin-TK重组质粒的肝癌细胞组凋亡率约为(37.37±4.02)%,而未转染质粒组细胞凋亡率约为(1.00±0.62)%,两组间比较有统计学差异(P〈0.01)。结论 HSV-TK/GCV自杀基因的毒性作用随着GCV浓度的增高而上升,并且HSV-TK/GCV系统对人肝癌细胞具有特异性靶向杀伤作用。 展开更多
关键词 胸苷激酶 阳离子脂质体 肝癌细胞 SURVIVIN启动子 基因治疗
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白头翁皂苷D联合索拉非尼对人肝癌细胞侵袭与转移的影响 被引量:4
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作者 贺武斌 苏荣健 《山东大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2016年第7期18-22,共5页
目的探讨白头翁皂苷D联合索拉非尼对人肝癌细胞株侵袭和转移的影响。方法以人肝癌细胞株SM M C-7721细胞为研究对象,分为白头翁皂苷D组(浓度为11.9μg/L)、索拉非尼组(浓度为2.15μmol/L)、联合组(白头翁皂苷D 11.9μg/L+索拉非尼... 目的探讨白头翁皂苷D联合索拉非尼对人肝癌细胞株侵袭和转移的影响。方法以人肝癌细胞株SM M C-7721细胞为研究对象,分为白头翁皂苷D组(浓度为11.9μg/L)、索拉非尼组(浓度为2.15μmol/L)、联合组(白头翁皂苷D 11.9μg/L+索拉非尼2.15μmol/L)以及对照组(普通培养液)。通过MTT法、Transwell小室实验观察白头翁皂苷D、索拉非尼单药和联合对SMMC-7721细胞的侵袭和转移的抑制作用,并用免疫组织化学方法检测CD44V6、血管内皮生长因子C(VEGF-C)、基质金属蛋白酶MMP-9基因蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,白头翁皂苷D、索拉非尼单药和联合对SMMC-7721细胞的增殖均有抑制作用,且24 h的抑制率都〈15%;Transw ell小室实验结果显示,联合组的黏附抑制率与单药组相比,具有协同抑制作用,但未呈现时间依赖关系;联合组的侵袭抑制率和迁移抑制率均显著高于单药组(P〈0.01);免疫组织化学结果表明,联合组在下调CD44V6、VEGF-C、MMP-9方面均高于单药组(P〈0.05)。结论白头翁皂苷D和索拉非尼联合可协同抑制SM M C-7721细胞侵袭和转移,联合效果整体优于单药。 展开更多
关键词 白头翁皂苷D 索拉非尼 肝癌细胞 侵袭 转移
黄芩苷-金属配合物键合肝癌细胞SMMC-7721DNA的微观电学机制研究 被引量:2
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作者 谭贤 郭明 高小艳 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第19期3447-3455,共9页
目的 探讨黄芩苷-金属(钇、镧、铈,Y3+、La3+、Ce3+)配合物(baicalin-metal complexes,BMC)与肝癌细胞DNA结合能力的强弱。方法 以提取的SMMC-7721肝癌细胞DNA为靶点,采用循环伏安法和交流阻抗法研究BMC与DNA的相互作用,探讨二... 目的 探讨黄芩苷-金属(钇、镧、铈,Y3+、La3+、Ce3+)配合物(baicalin-metal complexes,BMC)与肝癌细胞DNA结合能力的强弱。方法 以提取的SMMC-7721肝癌细胞DNA为靶点,采用循环伏安法和交流阻抗法研究BMC与DNA的相互作用,探讨二者的作用机制。结果 BMC与肝癌细胞DNA通过静电作用形成非电活性超分子化合物,结合数(m)为1,结合常数(βBC)为1.27×105 L/mol、βBC-Y为3.46×105 L/mol、βBC-La为6.24×105 L/mol、βBC-Ce为7.29×106 L/mol,黄芩苷(BC)与金属离子配位后与DNA的结合能力明显增强,强弱顺序:BC-Ce〉BC-La〉BC-Y〉BC。结论 BMC进入细胞后与DNA结合,阻滞DNA的复制,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,进而表现出抗肿瘤活性。BMC与DNA结合能力与其细胞毒性一致,具有关联性。 展开更多
关键词 黄芩苷 金属配合物 肝癌细胞 DNA 电化学法
新城疫病毒通过上调小鼠NK细胞TRAIL表达杀伤Novikoff小鼠肝癌细胞 被引量:3
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作者 宋德志 梁莹 +4 位作者 樊晓晖 殷君 宫金伶 赖振屏 高灵茜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期599-604,共6页
目的观察经腹腔注射的新城疫病毒(NDV)对小鼠脾脏NK细胞表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及杀伤Novikoff小鼠肝癌细胞的影响,并探讨其与γ干扰素(IFN-γ)的关系。方法给予BALB/c小鼠和IFN-γR-/-B6.129S7小鼠腹腔注射NDV,... 目的观察经腹腔注射的新城疫病毒(NDV)对小鼠脾脏NK细胞表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及杀伤Novikoff小鼠肝癌细胞的影响,并探讨其与γ干扰素(IFN-γ)的关系。方法给予BALB/c小鼠和IFN-γR-/-B6.129S7小鼠腹腔注射NDV,12 h后,用ELISA检测小鼠外周血IFN-γ浓度;分离小鼠脾脏NK细胞,用反转录PCR法检测NK细胞中TRAIL mRNA转录水平,Western blot法检测脾脏NK细胞中TRAIL蛋白水平,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞对Novikoff肝癌细胞的杀伤作用。结果腹腔注射NDV可以提高BALB/c小鼠外周血IFN-γ浓度,上调小鼠脾脏NK细胞TRAIL mRNA和蛋白表达水平,增强小鼠脾脏NK细胞体外条件下对Novikoff肝癌细胞的杀伤活性。TRAIL中和抗体能抑制NK细胞对Novikoff肝癌细胞的杀伤作用。IFN-γR-/-B6.129S7小鼠接受NDV注射后脾脏NK细胞的TRAIL表达无显著增加,NDV激活的NK细胞对Novikoff肝癌细胞的杀伤活性显著低于IFN-γ受体正常的BALB/c小鼠。结论腹腔注射NDV可增强脾脏NK细胞的体外抗肿瘤活性,其机制之一是通过IFN-γ受体途径上调NK细胞表面TRAIL蛋白表达来发挥作用。 展开更多
关键词 新城疫病毒 NK细胞 肿瘤坏死因子相关凋亡配体 肝癌细胞
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