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单纯疱疹病毒Ⅰ型基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒减毒活疫苗Oka株感染小鼠的生物学特性比较
1
作者 柳蕾 徐兴丽 +4 位作者 冯敏 何玉凤 王丽春 张莹 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期249-254,共6页
目的比较单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus typeⅠ,HSV-Ⅰ)基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)减毒活疫苗Oka株感染BALB/c小鼠的生物学特性。方法用不同剂量(103、104、105 PFU/只)的HSV-ⅠM3株及疫... 目的比较单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus typeⅠ,HSV-Ⅰ)基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)减毒活疫苗Oka株感染BALB/c小鼠的生物学特性。方法用不同剂量(103、104、105 PFU/只)的HSV-ⅠM3株及疫苗剂量的VZV Oka株以不同方式(腹腔、肌肉、鼻腔、足垫)感染小鼠后,对小鼠的急性临床反应、体重变化、病毒增殖、组织病理损伤及病毒重激活等生物学特性进行比较。结果 HSV-ⅠM3及VZV Oka组小鼠均未见弓背、倒毛、单侧眼失明等急性临床症状,体重均呈逐渐上升趋势;器官组织中病毒拷贝数均处于较低水平,且两组差异无统计学意义(P> 0. 05);小鼠脑组织出现轻微局部炎症细胞浸润、出血、胶质小结或无异常,两组差异较小,脊髓组织均未出现明显异常;神经组织与Vero细胞共培养,均未观察到细胞病变(CPE)。结论 HSV-ⅠM3株与VZV Oka株感染小鼠后的生物学特征无明显差异。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒 突变株 水痘带状疱疹病毒 减毒活疫苗 小鼠 生物学特性
The Importance of Heparan Sulfate in Herpesvirus Infection 预览
2
作者 Christopher D. O'Donnell Deepak Shukla 《中国病毒学:英文版》 CAS CSCD 2008年第6期 383-393,共11页
疱疹单一的病毒 type-1 (HSV-1 ) 是把房间表面 glycosaminoglycan heparan 用作受体的许多病原体之一。Heparan 高度在表面和细胞外基质上被表示几乎,所有房间打字使它成为理想的受体。Heparan 在 HSV-1 入口期间在起始的附件步期间与... 疱疹单一的病毒 type-1 (HSV-1 ) 是把房间表面 glycosaminoglycan heparan 用作受体的许多病原体之一。Heparan 高度在表面和细胞外基质上被表示几乎,所有房间打字使它成为理想的受体。Heparan 在 HSV-1 入口期间在起始的附件步期间与 HSV-1 信封 glycoproteins gB 和 gC 交往。另外, heparan 的一种修改形式,作为 3-O-sulfated heparan 知道,与 HSV-1 gD 交往导致在病毒的信封和宿指胞膜之间的熔化。heparan 的 3-O-sulfation 是发生在被作为 3-O-sulfotransferases 知道的酶的一个家庭执行的 heparan 的生合成期间的稀罕修正。由于它在感染进程的多重步的参与, heparan 是一个主要目标让代理人的开发禁止 HSV 入口。理解 heparan 怎么在 HSV-1 感染期间工作不能仅仅为由这个病毒禁止感染是批评的,但是它可能也也在对许多另外的病原体的战斗是关键的。 展开更多
关键词 硫酸乙酰肝素 疱疹病毒 临床分析 皮肤病 治疗方法
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单纯疱疹病毒1型US11蛋白结合DNA甲基转移酶3A的作用研究 预览
3
作者 钟霞 潘建华 童坚 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期56-60,共5页
目的通过免疫共沉淀联合质谱分析筛查与单纯疱疹病毒1型(HSV-1)中US11蛋白存在潜在相互作用的宿主蛋白。方法使用荧光标记的HSV-1病毒感染人成纤维细胞(HFF),通过免疫共沉淀(IP)方法对US11及其相互作用蛋白进行提取和纯化,并与质谱(MS)... 目的通过免疫共沉淀联合质谱分析筛查与单纯疱疹病毒1型(HSV-1)中US11蛋白存在潜在相互作用的宿主蛋白。方法使用荧光标记的HSV-1病毒感染人成纤维细胞(HFF),通过免疫共沉淀(IP)方法对US11及其相互作用蛋白进行提取和纯化,并与质谱(MS)联用来鉴定相关蛋白。结果利用IP-MS分析技术成功筛选出7个与US11存在潜在相互作用宿主蛋白,其中DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)被定性为一种新的US11结合蛋白。结论HSV-1病毒US11蛋白与哺乳动物DNA甲基转移酶机制的功能关联,DNMT3A是HSV-1感染所需的有效宿主因子。 展开更多
关键词 免疫共沉淀 质谱 单纯疱疹病毒1型 US11蛋白 DNA甲基转移酶3A
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1型单纯疱疹病毒疫苗的研究进展 被引量:1
4
作者 徐兴丽 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第4期445-448,共4页
1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染可导致口唇疱疹、生殖器疱疹、脑炎等症状,并可长期潜伏于神经系统。目前尚无干预手段能有效预防疱疹病毒原发感染以及控制疱疹病毒潜伏感染和复发性感染。疫苗依然被认为是... 1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染可导致口唇疱疹、生殖器疱疹、脑炎等症状,并可长期潜伏于神经系统。目前尚无干预手段能有效预防疱疹病毒原发感染以及控制疱疹病毒潜伏感染和复发性感染。疫苗依然被认为是控制病毒感染的理想方式。本文就HSV-1疫苗的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 1型单纯疱疹病毒 疫苗
单纯疱疹病毒Ⅱ型CTCF结合位点抑制启动子功能 被引量:2
5
作者 何丹 杨慧兰 《病毒学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期558-564,共7页
为了找到CTCF在单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)中的结合位点,并探讨其基因表达调控作用。对比HSV-1与HSV-2全基因组中CTCF结合序列区别;生物信息学分析HSV-2全基因组;Jaspar在线预测CTCF结合位点;依据CTCF结合的序列特点预测结合位置;PCR扩... 为了找到CTCF在单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)中的结合位点,并探讨其基因表达调控作用。对比HSV-1与HSV-2全基因组中CTCF结合序列区别;生物信息学分析HSV-2全基因组;Jaspar在线预测CTCF结合位点;依据CTCF结合的序列特点预测结合位置;PCR扩增预测位点并插入pGL3-promoter构建重组载体;重组载体转染人胚胎肾细胞(293T)双荧光检测验证预测位点转录调控效应。预测得到三个CTCF结合位点分别位于潜伏相关转录本(LAT)上游(CTUL)、下游(CTa’m)及内含子(CTRL)位置;扩增目的片段并构建重组载体,双酶切及测序验证成功;双荧光检测显示LAT内含子(pGL3-promoter-CTRL)及下游(pGL3-promoter-CTa’m)结合位点重组载体转染组与pGL3-promoter载体转染组相比,荧光强度明显减弱,差异有统计学意(P〈0.001),但与pGL3-basic组相比,并没有完全沉默荧光霉素的表达;上游结合位点重组载体(pGL3-promoter-CTUL)转染组与pGL3-promoter相比无明显差异(P〉0.05)。HSV-2LAT序列内含子及下游序列上存在CTCF结合位点,具有减弱基因启动子功能的效应,可能在HSV-2维持潜伏中发挥作用。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2) 潜伏复发机制 CTCF 基因表达调控
1型单纯疱疹病毒经不同途径感染小鼠建立病理模型的比较分析 被引量:1
6
作者 范胜涛 冯敏 +4 位作者 徐兴丽 王丽春 廖芸 张莹 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期472-476,共5页
目的比较分析1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)经不同途径感染小鼠所建立的病理模型。方法将成年鼠分别经眼角膜、牙龈、鼻黏膜、皮下及尾静脉感染HSV-1,50μl/只,临床观察60 d,感染后第3和6天,取脑组织及脊髓,进... 目的比较分析1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)经不同途径感染小鼠所建立的病理模型。方法将成年鼠分别经眼角膜、牙龈、鼻黏膜、皮下及尾静脉感染HSV-1,50μl/只,临床观察60 d,感染后第3和6天,取脑组织及脊髓,进行组织病理学观察,并检测病毒载量。将乳鼠经脑内和后肢注射感染HSV-1,10~7 CCID_(50)/(ml·g),临床观察2周,感染后第3天,取脑及后肢肌肉组织,进行组织病理学观察,并检测病毒载量。结果鼻黏膜组成年鼠感染20 d后,面部皮肤溃烂,眼角膜组感染47 d后,眼部出现红肿、充血;除尾静脉组和牙龈组外,其他组小鼠体重均呈升高趋势;未出现死亡情况。各组成年鼠脑组织和脊髓中均出现出血及炎性细胞浸润,感染后第3天脑中病毒载量最高。1、3、7日龄乳鼠经脑及后肢注射后均出现后肢麻痹症状,经脑部注射后死亡率分别为100%、100%和91.7%,经后肢注射后死亡率分别为90.9%、78.5%和72.7%。病毒感染后第3天,各组乳鼠均出现脑出血、血管袖套及少量炎性细胞浸润,个别乳鼠脑部见针迹灶;后腿肌肉仅见少量炎性细胞浸润现象,大脑和后腿肌肉组织中的病毒滴度为3.5~4.5 1og10CCID50/100 mg。结论乳鼠对HSV-1普遍易感,且病理损伤与成年鼠相似,本研究建立的乳鼠模型可用于疫苗株或减毒株的筛选和评价,为HSV-1疫苗的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 1型单纯疱疹病毒 小鼠 动物模型
霍乱病毒B亚单位作为基因佐剂对单纯疱疹病毒2型DNA疫苗免疫效果的影响
7
作者 贾岚 傅婷 +2 位作者 陶薇 何卓晶 洪艳 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第5期458-462,468共6页
目的研究霍乱病毒B亚单位(cholera toxin subunit B,CTB)作为基因佐剂对单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)DNA疫苗pg D免疫效果的影响。方法将CTB片段克隆至真核表达质粒pc DNA3Kan(p Kan)中,构建基因佐剂pc DN... 目的研究霍乱病毒B亚单位(cholera toxin subunit B,CTB)作为基因佐剂对单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)DNA疫苗pg D免疫效果的影响。方法将CTB片段克隆至真核表达质粒pc DNA3Kan(p Kan)中,构建基因佐剂pc DNA3Kan-CTB(p CTB)。将BALB/c小鼠随机分为p CTB无疫苗组、pg D/p CTB佐剂组、pg D/p Kan空载体组及PBS对照组,经后腿肌肉多点注射,共免疫3次,每次间隔2周。于末次免疫2周后,经小鼠眼球采血,分离血清,ELISA法检测HSV-2特异性Ig G水平及Ig G1、Ig G2a亚型抗体滴度;制备小鼠脾细胞,MTS法检测小鼠脾脏T细胞增殖能力;将病毒稀释后经腹腔接种小鼠,于免疫2周后,进行HSV-2致死剂量攻毒试验。结果p CTB经双酶切及测序鉴定证明构建正确;pg D/p CTB佐剂组小鼠血清中HSV-2特异性Ig G水平明显高于其他3组(P〈0.001),Ig G1和Ig G2a滴度均明显高于pg D/p Kan空载体组(P〈0.001),其中Ig G2a增幅更明显,Ig G2a/Ig G1比值与pg D/p Kan空载体组相比,由(1.176±0.11)增加至(1.316±0.07)(P〈0.05);pg D/p CTB佐剂组小鼠脾细胞在HSV-2刺激下诱导的特异性T细胞增殖反应明显强于PBS对照组及pg D/p Kan空载体组(P〈0.05);攻毒14 d内,pg D/p CTB佐剂组小鼠存活率高达100%。结论 p CTB作为基因佐剂能够显著提高pg D诱导小鼠产生抗原特异性Ig G抗体水平,增强HSV-2特异性T细胞增殖反应,并介导以细胞免疫为主的Th1/Th2混合型免疫反应。 展开更多
关键词 霍乱病毒B亚单位 单纯疱疹病毒2型(HSV-2) DNA疫苗 基因佐剂
人二倍体细胞对不同病毒感染过程的生物学效应比较分析 被引量:1
8
作者 王辉 张莹 +7 位作者 刘龙丁 廖芸 王建斌 胡雅洁 王丽春 赵婷 王艳翠 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第9期907-912,共6页
目的分析人二倍体细胞对不同病毒感染的生物学反应差异性及相关分子生物学机制。方法用人类肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和人单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染人二倍体细胞,光镜和电镜下观察感染细胞... 目的分析人二倍体细胞对不同病毒感染的生物学反应差异性及相关分子生物学机制。方法用人类肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和人单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染人二倍体细胞,光镜和电镜下观察感染细胞形态学特征;比较两种病毒在人二倍体细胞上的增殖动力学及两种病毒感染后细胞酶谱的变化;采用基因芯片检测两种病毒感染后人二倍体细胞基因反应的差异。结果感染细胞的光镜或电镜的超微结构观察均表现出许多相同的特点,包括细胞变圆、肿胀、折光性增强,以及细胞细微结构的受损,大多数细胞器的破坏等。两种病毒在人二倍体细胞上具有不同滴度峰值的增殖动力学过程;对细胞超氧化物歧化酶的动力学改变趋势有不同影响,但对乳酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶动力学变化趋势无明显影响;两种病毒感染引起人二倍体细胞出现不同的基因反应,其中与信号转导及与天然免疫反应有关的mRNA转录效率具有一定的差异。结论人二倍体细胞对EV71、HSV-1感染过程表现不同的生物学效应。 展开更多
关键词 二倍体细胞 肠道病毒71型 单纯疱疹病毒1型 酶谱 基因表达谱
单纯疱疹病毒2型疫苗的研究进展 被引量:1
9
作者 徐颖之 郑海发 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第9期997-1003,共7页
单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)属于疱疹病毒属α疱疹病毒科,是线性双链DNA病毒,主要通过性传播,是生殖器疱疹的主要病原体,HSV-2的感染还可增加HIV感染的风险。使用安全套和抗病毒治疗等措施虽可使HSV-2的传染... 单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)属于疱疹病毒属α疱疹病毒科,是线性双链DNA病毒,主要通过性传播,是生殖器疱疹的主要病原体,HSV-2的感染还可增加HIV感染的风险。使用安全套和抗病毒治疗等措施虽可使HSV-2的传染降低约50%,但未能从根本上杜绝该病毒的传播。目前,对抗HSV-2最为有效和经济的方法是接种HSV-2疫苗,但尚未获得理想的该疫苗产品。本文结合HSV-2的感染机制,对HSV-2的灭活疫苗、减毒活疫苗、复制缺陷疫苗、亚单位疫苗、多肽疫苗、活载体疫苗及DNA疫苗的最新研究进展作一综述,并对HSV-2预防性及治疗性疫苗的研究方向进行讨论。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒2型 疫苗
UL29shRNA表达质粒与ACV对HSV-2抑制效果的比较
10
作者 仵立佳 吕延成 +2 位作者 兰小凇 潘晓瑜 丁娟 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第11期2057-2060,2086共5页
目的:通过将筛选的UL29shRNA表达质粒与抗病毒药物阿昔洛韦(ACV)的抗病毒效果及细胞毒性进行比较,探讨RNA干扰在细胞水平上对HSV-2病毒的抑制效果。方法:将筛选的干扰效果最好的表达质粒UL29-shRNA1641作为RNA干扰组与抗病毒药ACV... 目的:通过将筛选的UL29shRNA表达质粒与抗病毒药物阿昔洛韦(ACV)的抗病毒效果及细胞毒性进行比较,探讨RNA干扰在细胞水平上对HSV-2病毒的抑制效果。方法:将筛选的干扰效果最好的表达质粒UL29-shRNA1641作为RNA干扰组与抗病毒药ACV进行对HSV-2的抑制效果的比较研究,分为RNAi组、ACV组和RNAi+ACV组。采用实时荧光定量PCR检测UL29mRNA的相对表达量,Karber法检测细胞上清液中病毒滴度的变化、蛋白印迹法(Western blot)检测ICP8的相对表达量,对RNAi与ACV抑制效果进行比较,通过WST-1(Water-Soluble Tetrazolium-1)法对质粒转染复合物(质粒+转染试剂)和ACV的细胞毒性进行比较。结果:RT-PCR检测三组mRNA的相对表达水平,其中RNAi组UL29基因相对表达量高于ACV组(P〈0.05);RNAi+ACV组UL29基因相对表达量明显低于RNAi组和ACV组(P〈0.05)。Karber法检测三组细胞上清液病毒滴度表明,RNAi组病毒滴度高于ACV组(P〈0.05),RNAi+ACV组的病变病毒滴度明显低于RNAi组和ACV组(P〈0.05)。Western blot检测ICP8相对表达量,ACV组的ICP8(UL29编码的单链DNA结合蛋白,主要作用是在HSV-2 DNA复制过程中与复制又产生了单链DNA结合,防止其重新配对形成ds DNA或被核酸酶降解)相对表达量比RNAi组低(P〈0.05)。RNAi+ACV组ICP8相对表达量降低最为明显,与ACV组和RNAi组相比有显著差异(P〈0.05)。WST-1法对转染复合物与ACV的细胞毒性进行比较,其中RNAi中质粒和转染试剂对细胞的毒性明显小于ACV。结论:在RNAi与ACV对HSV-2抑制效果的比较中,ACV要好于RNAi,两者联合使用的抑制效果好于单独使用RNAi或ACV。在抑制效果都较好的情况下比较,RNAi中使用的质粒与转染试剂对细胞的影响比ACV小。 展开更多
关键词 RNA干扰 Ⅱ型单纯疱疹病毒 UL29基因shRNA 阿昔洛韦
检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型荧光定量PCR方法的建立 预览 被引量:1
11
作者 陶薇 傅婷 +3 位作者 何卓晶 洪艳 胡如西 贾岚 《医学研究杂志》 2016年第2期51-54,共4页
目的 建立一种高敏感度的检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)DNA的实时荧光定量PCR方法,为针对HSV-2潜伏感染的治疗性疫苗和抗病毒药物疗效提供一个评价方法。方法依据HSV-2糖蛋白D(gD)基因序列,使用序列比对软件,选取其保守区序... 目的 建立一种高敏感度的检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)DNA的实时荧光定量PCR方法,为针对HSV-2潜伏感染的治疗性疫苗和抗病毒药物疗效提供一个评价方法。方法依据HSV-2糖蛋白D(gD)基因序列,使用序列比对软件,选取其保守区序列设计引物及TaqMan探针并进行筛选;以gD基因重组质粒pcDNA3-HSV-2gD作为标准模板,对该检测方法的反应条件进行优化,提高其检测特异性、敏感度和重现性。结果该检测方法特异性好,检测的最低拷贝数可达到2个拷贝,线性范围为2×10^0~2×10^8拷贝/反应,是普通PCR敏感度的10^3倍。该检测方法组间和组内变异系数均低于5%,说明该检测方法具有良好稳定性。结论本研究建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法用于检测痕量HSV-2DNA具有特异、敏感、定量和重现性好的优点。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒Ⅱ型 荧光定量PCR TAQMAN探针
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CD40L 对单纯疱疹病毒 2 型 DNA 疫苗的免疫增强作用研究 预览
12
作者 胡如西 陶薇 +4 位作者 傅婷 何卓晶 贾岚 洪艳 陈勇 《医学研究杂志》 2015年第10期29-33,37共6页
目的 研究重组质粒pcDNA3-Kan/CD40L辅佐HSV-2 DNA疫苗增强小鼠体液免疫和细胞免疫的作用效果,探讨其作为HSV-2 DNA疫苗佐剂的潜力. 方法 (1)构建鼠CD40L基因的重组真核表达质粒pcDNA3-Kan/CD40L. (2)体外细胞实验:检测重组质粒pCD... 目的 研究重组质粒pcDNA3-Kan/CD40L辅佐HSV-2 DNA疫苗增强小鼠体液免疫和细胞免疫的作用效果,探讨其作为HSV-2 DNA疫苗佐剂的潜力. 方法 (1)构建鼠CD40L基因的重组真核表达质粒pcDNA3-Kan/CD40L. (2)体外细胞实验:检测重组质粒pCD40L刺激小鼠外周血淋巴细胞增殖情况和脾细胞分泌IFN-γ的能力. (3)体内动物实验:48只雌性BALB/c小鼠随机分为4个免疫组pK组、pgD组、pcCD40L+pgD组和pK+pgD组. 小鼠后腿肌内注射,共免疫2次,间隔3周. 末次免疫3周后,每组随机取4只小鼠进行致死剂量攻毒实验验证疫苗的保护作用.ELISA检测小鼠血清抗HSV-2 IgG抗体水平和趋化因子RANTES;流式细胞术检测全血中CD4 +和CD8 +T细胞百分率以及分泌IFN-γ和IL-4的T细胞的百分率;MTS法检测小鼠脾脏T细胞的增殖能力. 结果 (1)体外实验结果:重组质粒pcDNA3-Kan/CD40L对小鼠外周血淋巴细胞的增殖能力和刺激脾细胞分泌IFN-γ的能力均显著大于空质粒pcDNA3-Kan(P〈0.05). (2)体内实验结果:小鼠血清抗HSV-2 IgG水平、趋化因子RANTES、脾淋巴细胞刺激指数和外周血CD4 +T细胞数和分泌IFN-γ的Th1细胞数均高于其他免疫组(P〈0.05). pcDNA3-Kan/CD40L+pgD组预防小鼠感染HSV-2效果好于其他免疫组. 结论 (1)重组质粒pcDNA3-Kan/CD40L能够诱导外周血淋巴细胞增殖并刺激脾细胞分泌IFN-γ具有作为疫苗佐剂的潜力. (2) pcDNA3-Kan/CD40L可以辅助HSV-2 DNA疫苗诱导BALB/c小鼠产生特异性抗HSV-2的体液免疫和细胞免疫,具备作为HSV -2 DNA疫苗免疫佐剂的能力. 展开更多
关键词 CD40配体(CD40L) 单纯疱疹病毒2型(HSV-2)疫苗佐剂
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Antiviral activity of Basidiomycete mycelia against influenza type A(serotype H1N1) and herpes simplex virus type 2 in cell culture 预览
13
作者 Tetiana Krupodorova Svetlana Rybalko Victor Barshteyn 《中国病毒学:英文版》 CAS CSCD 2014年第5期284-290,共7页
In this study, we investigated the in vitro antiviral activity of the mycelia of higher mushrooms against influenza virus type A(serotype H1N1) and herpes simplex virus type 2(HSV-2), strain BH. All 10 investigated mu... In this study, we investigated the in vitro antiviral activity of the mycelia of higher mushrooms against influenza virus type A(serotype H1N1) and herpes simplex virus type 2(HSV-2), strain BH. All 10 investigated mushroom species inhibited the reproduction of influenza virus strain A/FM/1/47(H1N1) in MDCK cells reducing the infectious titer by 2.0–6.0 lg ID50. Four species, Pleurotus ostreatus, Fomes fomentarius, Auriporia aurea, and Trametes versicolor, were also determined to be effective against HSV-2 strain BH in RK-13 cells, with similar levels of inhibition as for influenza. For some of the investigated mushroom species—Pleurotus eryngii, Lyophyllum shimeji, and Flammulina velutipes—this is the first report of an anti-influenza effect. This study also reports the first data on the medicinal properties of A. aurea, including anti-influenza and antiherpetic activities. T. versicolor 353 mycelium was found to have a high therapeutic index(324.67), and may be a promising material for the pharmaceutical industry as an anti-influenza and antiherpetic agent with low toxicity. Mycelia with antiviral activity were obtained in our investigation by bioconversion of agricultural wastes(amaranth flour after CO2 extraction), which would reduce the cost of the final product and solve some ecological problems. 展开更多
关键词 antiviral activity Basidiomycetes mycelium INFLUENZA A virus(H1N1) herpes simplex VIRUS TYPE 2(HSV2)
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单纯疱疹Ⅱ型病毒UL29基因shRNA表达载体的干扰效应 预览 被引量:4
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作者 黄畅 潘晓瑜 +1 位作者 袁俊杰 吕延成 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第5期691-694,共4页
目的:应用RNA干扰技术,针对单纯疱疹Ⅱ型病毒(HSV-2)UL29基因构建短发夹RNA重组表达载体,观察其对HSV-2的干扰效应。方法:针对HSV-2UL29基因筛选出4条拟干扰靶位点序列.分别设计、合成4组靶向UL29基因shRNA的基因真核表达栽体。... 目的:应用RNA干扰技术,针对单纯疱疹Ⅱ型病毒(HSV-2)UL29基因构建短发夹RNA重组表达载体,观察其对HSV-2的干扰效应。方法:针对HSV-2UL29基因筛选出4条拟干扰靶位点序列.分别设计、合成4组靶向UL29基因shRNA的基因真核表达栽体。通过脂质体转染到HEK293细胞。再将HSV-2接种到HEK293细胞中。采用终点滴定法检测病毒滴度.RT—PCR检测shRNA对转录水平的影响.Western-blot检测shRNA对蛋白质表达水平的影响。结果:终点滴定法结果显示UL29shRNA各组均可不同程度降低病毒感染滴度,与空白组(未转染重组表达载体)比较差异显著(P〈0.01)。RT.PCR结果显示,与空白组比较,4组抑制率分别为28.80%、59.95%、66.08%、36.27%,差异均具有显著性(P〈0.05),shRNANC(不针对任何基因的序列)与空白组相比差异无显著性.其中以UL29shRNA1461组效果为最佳。Western.blot检测表明UL29shRNA各组ICP8蛋白表达水平比阴性对照组明显降低。结论:UL29shRNA能有效干扰HSV.2UL29基因的表达.抑制HSV-2在HEK293细胞中的复制。 展开更多
关键词 疱疹病毒2型 RNA干扰 SHRNA UL29基因
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A cellular response protein induced during HSV-1 infection inhibits viral replication by interacting with ATF5
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作者 WU LianQiu ZHANG XueMei +7 位作者 CHE YanChun ZHANG Ying TANG SongQing LIAO Yun NA RuiXiong XIONG XiangLin LIU LongDing LI QiHan 《中国科学:生命科学英文版》 SCIE CAS 2013年第12期1124-1133,共10页
Studies of herpes simplex virus type 1(HSV-1)infection have shown that many known and unknown cellular molecules involved in viral proliferation are up-regulated following HSV-1 infection.In this study,using two-dimen... Studies of herpes simplex virus type 1(HSV-1)infection have shown that many known and unknown cellular molecules involved in viral proliferation are up-regulated following HSV-1 infection.In this study,using two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis,we found that the expression of the HSV-1 infection response repressive protein(HIRRP,GI 16552881)was up-regulated in human L02 cells infected with HSV-1.HIRRP,an unknown protein,was initially localized in the cytoplasm and then translocated into the nucleus of HSV-1-infected cells.Further analysis showed that HIRRP represses HSV-1proliferation by inhibiting transcription of the viral genome by interacting with the cellular transcription factor,ATF5,via its N-terminal domain.ATF5 represses the transcription of many host genes but can also act as an activator of genes containing a specific motif.We found that ATF5 promotes the proliferation of HSV-1 via a potential mechanism by which ATF5 enhances the transcription of viral genes during the course of an HSV-1 infection;HIRRP then induces feedback repression of this transcription by interacting with ATF5. 展开更多
关键词 HSV-1 感染细胞 细胞反应 相互作用 抑制蛋白 病毒复制 聚丙烯酰胺凝胶电泳 病毒基因组
板蓝根多糖抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的实验研究 被引量:7
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作者 左娅 朱慧娟 +1 位作者 刘军 代明 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期267-269,共3页
目的研究板蓝根多糖抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的作用。方法用MTT法和小鼠阴道HSV-Ⅱ感染模型分别进行体外和体内抗HSV-Ⅱ实验。结果 MTT法测得的板蓝根多糖LC50为3.97 mg.mL^-1,EC50为0.05 mg.mL^-1,治疗指数TI为79.4。与无环鸟苷相... 目的研究板蓝根多糖抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的作用。方法用MTT法和小鼠阴道HSV-Ⅱ感染模型分别进行体外和体内抗HSV-Ⅱ实验。结果 MTT法测得的板蓝根多糖LC50为3.97 mg.mL^-1,EC50为0.05 mg.mL^-1,治疗指数TI为79.4。与无环鸟苷相比,抑制HSV-Ⅱ的作用无显著差异;小鼠阴道HSV-Ⅱ感染模型研究表明:板蓝根多糖治疗组(1、0.5 mg.d^-1)均明显降低小鼠的发病率、死亡率,延长其平均存活天数。小鼠外周血CD4+、CD8+细胞略有升高,但CD4+/CD8+比值维持在正常水平。结论板蓝根多糖具有良好的抗HSV-Ⅱ感染的作用,可能通过调节机体免疫功能提高小鼠抗HSV-Ⅱ感染的能力。 展开更多
关键词 板蓝根多糖 单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ) 抗病毒作用
靶向UL27shRNA抑制Ⅱ型单纯疱疹病毒在HEK293细胞中的复制 被引量:5
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作者 吕延成 潘晓瑜 +2 位作者 周丹丹 袁俊杰 黄畅 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期759-766,共8页
按照shRNA(small hairpin RNA)设计原则,针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type2,HSV-2)的UL27基因序列保守区域筛选设计、合成4条干扰靶序列并构建表达UL27序列特异性siRNA(short interfering RNA)的质粒载体pGPU6/GFP... 按照shRNA(small hairpin RNA)设计原则,针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type2,HSV-2)的UL27基因序列保守区域筛选设计、合成4条干扰靶序列并构建表达UL27序列特异性siRNA(short interfering RNA)的质粒载体pGPU6/GFP/Neo.通过脂质体介导重组表达载体转染HEK293细胞(human embryonic kidney 293 cell)再接种HSV-2.采用实时荧光定量PCR(real-timefluorescent quantitative PCR)技术检测UL27各组的mRNA转录水平,终点滴定法检测细胞上清液中的病毒滴度,四甲基偶氮唑盐(four methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞存活率,Western印迹法检测蛋白表达效果.结果显示,UL27shRNA75组对UL27基因mRNA表达抑制效果最佳,同时能显著抑制感染细胞的CPE(cytopathic effect,CPE),降低上清液中的病毒感染滴度,提高细胞的生存率,抑制UL27基因的蛋白表达.提示本研究构建的pGPU6/GFP/Neo-UL27表达载体能在细胞水平上不同程度地干扰HSV-2 UL27基因表达,抑制HSV-2在HEK293细胞中复制. 展开更多
关键词 RNA干扰 Ⅱ型单纯疱疹病毒 UL27基因
306例患者单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体检测结果分析 被引量:2
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作者 李彩虹 张振国 +1 位作者 苏宗义 乐宏元 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2012年第9期2156-2157,共2页
目的:了解本市STD人群单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的感染状况。方法:采用ELISA方法检测HSV-Ⅱ型IgM和IgG抗体。结果:306例患者的单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体阳性检出率:HSV-ⅡIgM 26.1%,其中男性为22.0%、女性为32.5%;HSV-ⅡIgG为59.8%,... 目的:了解本市STD人群单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的感染状况。方法:采用ELISA方法检测HSV-Ⅱ型IgM和IgG抗体。结果:306例患者的单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体阳性检出率:HSV-ⅡIgM 26.1%,其中男性为22.0%、女性为32.5%;HSV-ⅡIgG为59.8%,其中男性为59.1%、女性为60.8%;HSV-ⅡIgM与HSV-ⅡIgG同时阳性的检出率为15.0%,其中男性为12.9%、女性为18.3%。结论:本地区STD人群HSV的感染比例不低,IgG抗体的阳性率明显高于IgM抗体,HSV-Ⅱ隐性感染及复发的可能性较大,是性病的重要病原体之一。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ) ELISA IGM和IGG抗体
Molecular Determinants Responsible for the Subcellular Localization of HSV-1 UL4 Protei 预览
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作者 Wei-wei Pan Jing Long Jun-ji Xing Chun-fu Zheng 《中国病毒学:英文版》 CAS CSCD 2011年第5期 347-356,共10页
疱疹的功能单一的病毒类型 1 (HSV-1 ) UL4 蛋白质仍然是逃犯的。我们的目的是调查 UL4 蛋白质的 subcellular 运输机制。在这研究,荧光显微镜学被采用调查 UL4 的 subcellular 本地化并且在生活房间描绘运输机制。由构造与提高的黄熔... 疱疹的功能单一的病毒类型 1 (HSV-1 ) UL4 蛋白质仍然是逃犯的。我们的目的是调查 UL4 蛋白质的 subcellular 运输机制。在这研究,荧光显微镜学被采用调查 UL4 的 subcellular 本地化并且在生活房间描绘运输机制。由构造与提高的黄熔化的一系列删除异种荧光灯蛋白质(EYFP ) , UL4 的原子出口信号(NES ) 第一次被印射到氨基酸残余 178 ~ 186。另外, N 终端 19 氨基酸被识别为 UL4 的像小粒的细胞质的模式被要求。而且, UL4 蛋白质被表明在 chromosomal 区域维护通过 NES 被出口到细胞质 1 (CRM1 ) 依赖举止包含 RanGTP 水解作用。 展开更多
关键词 亚细胞定位 HSV 黄色荧光蛋白 氨基酸残基 分子 单纯疱疹病毒 传输机制 荧光显微镜
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Effect of siRNAs on HSV-1 Plaque Formation and Relative Expression Levels of RR mRNA 预览 被引量:1
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作者 Zhe Ren Shen Li +7 位作者 Qiao-li Wang Yang-fei Xiang Yun-xia Cui Yi-fei Wang Ren-bin Qi Da-xiang Lu Shu-min Zhang Pei-zhuo Zhang 《中国病毒学:英文版》 CAS CSCD 2011年第1期 40-46,共7页
RNA 干扰(RNAi ) 是 RNA (siRNA ) 能与相同序列引起 mRNA 的特定的降级的由哪个介绍了小介入的一个过程。人的疱疹单一的病毒类型 1 (HSV-1 ) RR 由 UL39 和 UL40 分别地编码的二个不同 homodimeric 子单元组成。在这研究,我们使用了... RNA 干扰(RNAi ) 是 RNA (siRNA ) 能与相同序列引起 mRNA 的特定的降级的由哪个介绍了小介入的一个过程。人的疱疹单一的病毒类型 1 (HSV-1 ) RR 由 UL39 和 UL40 分别地编码的二个不同 homodimeric 子单元组成。在这研究,我们使用了指向 HSV-1 的 UL39 和 UL40 基因的 siRNAs。我们有效地并且明确地显示出那合成 siRNA silenced UL39 和 UL40 mRNA 表示和禁止的 HSV-1 复制。我们的工作为 HSV-1 复制的抑制作为一个基因工具为 RNAi 提供新可能性。 展开更多
关键词 基因表达水平 单纯疱疹病毒 siRNA RNA干扰 斑块 MRNA降解 复制工具 RNA沉默
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