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中国攀西地区HPV16病毒E6/E7基因多态性分析 预览
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作者 周建平 杨依锦 +2 位作者 李懿 文韬 周丽萍 《现代医药卫生》 2019年第12期1769-1771,1775共4页
目的研究中国攀西地区人乳头瘤病毒16型(HPV16)突变株的E6、E7基因变异情况及其与世界主要HPV16突变谱系间的亲缘关系。方法从攀枝花学院附属医院采集来自攀西地区的女性宫颈细胞标本进行HPV分型检测,对含HPV16型病毒的57例标本进行E6... 目的研究中国攀西地区人乳头瘤病毒16型(HPV16)突变株的E6、E7基因变异情况及其与世界主要HPV16突变谱系间的亲缘关系。方法从攀枝花学院附属医院采集来自攀西地区的女性宫颈细胞标本进行HPV分型检测,对含HPV16型病毒的57例标本进行E6、E7基因的碱基序列分析,并绘制其分子进化树。结果攀西地区HPV16变体均属于亚欧突变谱系,从其E6、E7基因序列中检测到16种核苷酸变异,包含9种错义突变和7种同义突变。E6基因突变率为12.3%(7/57),其中6种均为错义突变。E7基因突变率为94.7%(54/57),其中3种均为错义突变,A86G突变可能明显改变病毒的致癌能力。结论攀西地区HPV16E6、E7基因突变类型丰富,突变株均属亚欧谱系,但系统分支较多,以东亚谱系为主。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 E6基因 E7基因 多态性 攀西地区
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人乳头瘤病毒致癌蛋白E6的结构与功能研究进展
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作者 王致萍 柳欣林 +2 位作者 王大宁 夏宁邵 李少伟 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期292-299,共8页
人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)是一类无包膜的小DNA 病毒,主要感染人皮肤上皮细胞和黏膜,持续感染HPV 会引起良性和恶性肿瘤,如尖锐湿疣和宫颈癌等多种疾病。HPV 早期蛋白E6 是引起宿主细胞发生恶性转化的关键致癌蛋白,其参... 人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)是一类无包膜的小DNA 病毒,主要感染人皮肤上皮细胞和黏膜,持续感染HPV 会引起良性和恶性肿瘤,如尖锐湿疣和宫颈癌等多种疾病。HPV 早期蛋白E6 是引起宿主细胞发生恶性转化的关键致癌蛋白,其参与调节宿主细胞内多个关键的生理生化过程,如促使抑癌蛋白p53 的降解、激活端粒酶和降解细胞凋亡相关蛋白Bak(Bcl‐2 homologous antagonist/killer)等,进而干扰宿主细胞的生长因子依赖性、细胞凋亡、细胞转录、DNA 损伤反应、细胞周期和宿主细胞分化等一系列生命活动。因此,分析阐述HPV 致癌蛋白E6 的结构与功能,有助于阐明HPV 诱发宫颈癌等恶性肿瘤的分子机理,为今后设计治疗性HPV 疫苗奠定理论基础。本文就HPV 致癌蛋白E6 的结构及其生物学功能进行综述。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒(HPV) 致癌蛋白E6 宫颈癌 P53蛋白
人乳头瘤病毒早期癌蛋白E6/E7稳定表达细胞系的构建及其对Rab12表达的影响
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作者 张文浩 乔立君 +2 位作者 郑静怡 陈健行 张魏芳 《山东大学学报:医学版》 北大核心 2018年第12期1-6,共6页
目的探究人乳头瘤病毒(HPV)编码的早期癌蛋白E6/E7对小GTP酶蛋白Rab12表达的影响。方法利用逆转录病毒包装系统获得含p Babe-Vector质粒和p Babe-16E7质粒的高滴度病毒颗粒,感染细胞,并用嘌呤霉素筛选获得稳定表达HPV16E7的UMSCC 10A-1... 目的探究人乳头瘤病毒(HPV)编码的早期癌蛋白E6/E7对小GTP酶蛋白Rab12表达的影响。方法利用逆转录病毒包装系统获得含p Babe-Vector质粒和p Babe-16E7质粒的高滴度病毒颗粒,感染细胞,并用嘌呤霉素筛选获得稳定表达HPV16E7的UMSCC 10A-16E7细胞系,Western blotting检测E7相关蛋白p53和E2F1的表达变化,比较UMSCC 10A-Vector细胞系和UMSCC 10A-16E7细胞系的Rab12蛋白表达水平。用同样方法在Ha CaT、RPE1细胞系中进一步验证。用siRNA干扰SiHa、Caski细胞(HPV-16阳性的宫颈癌细胞)中16E6/E7及He La细胞(HPV-18阳性的宫颈癌细胞)中18E6/E7的表达,通过Western blotting比较siRNA干扰前后E6和E7相关蛋白(E2F1、p53和Rab12)的表达差异。结果利用逆转录病毒包装系统成功构建稳定表达的细胞系,过表达E6/E7的细胞系中Rab12表达升高,干扰E6/E7的细胞系中Rab12的表达降低。结论 HPV编码的早期癌蛋白E6/E7可调控Rab12的表达。 展开更多
关键词 Rab12 人乳头瘤病毒 E6 E7 逆转录病毒包装系统
人乳头瘤病毒E6蛋白通过上调氯离子蛋白通道5的表达促进宫颈癌细胞迁移 预览 被引量:1
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作者 赵凯旋 徐静云 卢春 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2018年第2期135-139,共5页
目的:探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6蛋白与氯离子通道蛋白5(chloride voltage-gated channel 5,CLCN5)之间的关系以及CLCN5对宫颈癌细胞迁移的影响。方法:采用RNA干扰技术敲低HPV E6基因,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋... 目的:探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6蛋白与氯离子通道蛋白5(chloride voltage-gated channel 5,CLCN5)之间的关系以及CLCN5对宫颈癌细胞迁移的影响。方法:采用RNA干扰技术敲低HPV E6基因,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹法检测敲低HPV E6后宫颈癌HeLa细胞中CLCN5 mRNA及蛋白的表达水平。通过PCR扩增CLGV5基因片段,并将其克隆至表达载体PCDNA3.1-3 xFlag(简称PCDNA3.1)质粒中,构建重组质粒PCDNA3.1-CLCN5。将目的质粒PCDNA3.1-CLCN5及其对照PCDNA3.1质粒分别转染宫颈癌HeLa细胞,蛋白质印迹法检测CLCN5蛋白的表达。Tmnswell迁移实验检测过表达CLCN5对宫颈癌HeLa细胞迁移的影响。同时,将CLCN5的小干扰RNA及其阴性对照分别转染宫颈癌HeLa细胞,Tmnswell迁移实验检测敲低CLGV5对宫颈癌HeLa细胞迁移的影响。结果:RT-qPCR和蛋白质印迹检测结果显示,敲低HPV E6可显著降低CLCN5的mRNA和蛋白表达水平。质粒双酶切鉴定以及核酸测序比对结果证实重组质粒PCDNA3.1-CLCN5构建成功。蛋白质印迹检测结果显示CLCN5蛋白在宫颈癌HeLa细胞中被有效过表达或敲低。Tmnswell迁移实验结果表明,过表达CLCN5可促进宫颈癌细胞的迁移,敲低CLGV5可抑制宫颈癌细胞的迁移。结论:HPV E6蛋白通过上调CLCN5的表达促进宫颈癌细胞迁移. 展开更多
关键词 E6 人乳头瘤病毒 氯离子通道蛋白5 宫颈癌 细胞迁移
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宁波市奉化区女陛宫颈人乳头瘤病毒18型感染流行变异谱系分析
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作者 张姝 许国章 +1 位作者 倪红霞 李永东 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2018年第6期401-404,共4页
目的了解宁波市奉化地区妇女感染HPV高危亚型18相关基因E6、E7区基因变异谱系特征。方法采用整群随机抽样方法,收集宁波市奉化区778例妇女的宫颈脱落细胞样本进行HPV分型检测,并对其中HPV18阳性株进行癌相关基因E6、E7区测序和序列分析... 目的了解宁波市奉化地区妇女感染HPV高危亚型18相关基因E6、E7区基因变异谱系特征。方法采用整群随机抽样方法,收集宁波市奉化区778例妇女的宫颈脱落细胞样本进行HPV分型检测,并对其中HPV18阳性株进行癌相关基因E6、E7区测序和序列分析。结果HPV18检出率为1.3%(10/778),HPV18病毒株E6、E7基因序列分别成功获得11和10条,E6区有1个位点发生碱基颠换(C287G),E7区未发现突变;系统进化树分析显示,奉化地区HPV18变异株主要位于该亚型基因变异谱系A的A1亚系。结论宁波市奉化地区妇女HPV18感染率较低,HPV18病毒株癌相关基因变异较小。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒18 E6 E7 基因 变异
人乳头瘤病毒16/18E6蛋白检测在子宫颈癌筛查中的应用 被引量:2
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作者 张玉 孙立新 +6 位作者 赵宏伟 张永贞 王丽霞 马朝辉 许翊 苏芳 张瑞锋 《肿瘤研究与临床》 CAS 2017年第3期164-167,共4页
目的评价检测人乳头瘤病毒(HPV)16/18 E6蛋白诊断子宫颈癌前病变及子宫颈癌的准确性和有效性.方法选取2014年5月至2015年1月在山西省肿瘤医院妇科就诊的有性生活史的女性439例,其中子宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅱ及以上(CINⅡ、CINⅢ及... 目的评价检测人乳头瘤病毒(HPV)16/18 E6蛋白诊断子宫颈癌前病变及子宫颈癌的准确性和有效性.方法选取2014年5月至2015年1月在山西省肿瘤医院妇科就诊的有性生活史的女性439例,其中子宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅱ及以上(CINⅡ、CINⅢ及子宫颈癌)患者299例(病例组),其余患者为对照组(140例),所有研究对象均接受了液基薄层细胞检测(TCT)、HPV DNA、HPV 16/18 E6蛋白检测和阴道镜检查.结果病例组TCT、HPV DNA、HPV 16/18 E6蛋白检测的阳性率分别为97.0%(290/299)、94.3%(282/299)、66.9%(200/299),对照组分别为44.3%(62/140)、21.4%(30/140)、2.9%(4/140),两组差异均有统计学意义(均P〈0.05);HPV DNA与HPV 16/18 E6蛋白检测对诊断的灵敏度分别为94.3%、66.9%,特异度分别为78.6%和97.1%;一致率为71.9%(κ=0.21).病例组中,TCT与HPV DNA联合检测灵敏度为98.9%,特异度为82.8%,准确度为81.7%;TCT与HPV 16/18 E6蛋白联合检测灵敏度为97.9%,特异度为97.1%,准确度为95.0%.结论HPV 16/18 E6蛋白检测可提高子宫颈癌筛查的特异度,可作为HPV DNA检测无法开展或开展困难的欠发达地区的初筛方法,或作为HPV DNA阳性患者分流的方法,以更合理地分配有限的卫生资源. 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 人乳头瘤病毒18 宫颈肿瘤 普查 E6蛋白
人乳头瘤病毒16及其变异体感染者宫颈E6、P53、E7和视网膜母细胞瘤蛋白表达研究 被引量:3
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作者 陶萍萍 杨宾烈 +3 位作者 张爱 陆宇萍 孙丽艳 王宇华 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2017年第5期306-311,共6页
目的 探讨E6、E7、P53、视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)表达变化在HPV16单一型持续感染者宫颈病变早期进展中的作用.方法 选择2013年10月至2015年6月在上海市浦东新区人民医院宫颈疾病患者档案中登记的HPV16单一型持续阳性,但病理学正常的患... 目的 探讨E6、E7、P53、视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)表达变化在HPV16单一型持续感染者宫颈病变早期进展中的作用.方法 选择2013年10月至2015年6月在上海市浦东新区人民医院宫颈疾病患者档案中登记的HPV16单一型持续阳性,但病理学正常的患者140例,行DNA序列分析检测HPV16变异体,按照是否存在变异体分为HPV16变异体组(变异体组)和HPV16非变异体组(非变异体组),随访1年对HPV16阳性者复测变异体,对同一变异体持续阳性或非变异体持续阳性者同时行宫颈活检,并用免疫组织化学法检测宫颈组织E6、E7、P53和pRb蛋白表达,进行分析比较.结果 得到同一变异体持续感染53例,非变异体持续感染51例,最终得到完整的免疫组化染色结果各50例.变异体组21例进展为CIN,非变异体组19例进展为CIN,差异无统计学意义(χ^2=0.166,P>0.05).50例变异体持续感染患者中,34例(68.00%)的HPV16变异体属亚洲原型(As.P),3例(6.00%)属欧洲原型(EP),4例(8.00%)属亚洲变异休,7例(14.00%)属欧洲变异体,1例(2.00%)属非洲1变异体(Af1).E7在变异体组与非变异体组CIN患者的阳性率分别为81.00%和84.21%,均高于慢性宫颈炎,差异有统计学意义(χ^2=12.150和19.090,P<0.01);而pRb在两组的慢性宫颈炎患者中阳性率为82.76%和80.65%,高于CIN患者,差异有统计学意义(χ^2=6.912和4.402,P<0.05).结论 在宫颈病变早期,E7可能更早参与了其发生和进展,E7表达上升且pRb表达下降对HPV持续感染患者早期宫颈病变进展可能起一定预测作用.但E6、E7、P53和pRb表达在宫颈病变进展早期变异体与非变异体感染患者间并无差异. 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 变异体 E6 E7 P53 视网膜母细胞瘤蛋白
妊娠期女性人乳头瘤病毒感染情况以及白细胞介素-6、10表达水平 预览
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作者 祝琴 梁有卓 杜丽艳 《广西医学》 CAS 2017年第11期1667-1669,共3页
目的了解妊娠期女性人乳头瘤病毒(HPV)感染情况以及白细胞介素(IL)-6、10表达水平。方法选取1 456例妊娠期女性为观察组、1 077例非妊娠期女性为对照组。检测所有研究对象HPV-DNA以及血清IL-6、IL-10水平。结果观察组HPV总阳性率为2... 目的了解妊娠期女性人乳头瘤病毒(HPV)感染情况以及白细胞介素(IL)-6、10表达水平。方法选取1 456例妊娠期女性为观察组、1 077例非妊娠期女性为对照组。检测所有研究对象HPV-DNA以及血清IL-6、IL-10水平。结果观察组HPV总阳性率为25.5%,高于对照组的16.4%(P〈0.05);观察组HPV11及HPV16亚型阳性率均高于对照组(P〈0.05)。观察组血清IL-6、IL-10水平均高于对照组(P〈0.05)。结论妊娠期女性HPV感染比例较高,可能与妊娠期女性IL-6和IL-10长期高表达有关。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 白细胞介素-6 白细胞介素-10 妊娠
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植酸酮对宫颈癌细胞株中HPV16/18 E6/E7 mRNA及蛋白表达的影响 预览 被引量:1
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作者 王侃 高晓丽 +1 位作者 田文艳 岳天孚 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第7期10-12,共3页
目的观察植酸酮对宫颈癌细胞株中HPV16/18 E6/E7 mRNA及蛋白表达的影响。方法体外培养Caski细胞株(含HPV16)与Hela细胞株(含HPV18),将所有细胞分成实验1、2、3、4组和对照组,每组均包含Caski细胞和Hela细胞。实验1、2、3、4组分别... 目的观察植酸酮对宫颈癌细胞株中HPV16/18 E6/E7 mRNA及蛋白表达的影响。方法体外培养Caski细胞株(含HPV16)与Hela细胞株(含HPV18),将所有细胞分成实验1、2、3、4组和对照组,每组均包含Caski细胞和Hela细胞。实验1、2、3、4组分别加入含58.6、117、586、5 860 mg/L植酸酮的培养液,对照组加入不含植酸酮的培养液。各组培养72 h后,采用real-time PCR法分别检测HPV16/18 E6/E7 mRNA,采用Western blotting法检测E6/E7蛋白。结果实验1、2、3、4组同一型别细胞中E6/E7 mRNA及蛋白相对表达量低于对照组,且实验1、2、3、4组E6/E7 mRNA及蛋白相对表达量依次降低(P均〈0.05)。各实验组内,Caski细胞中E6/E7 mRNA相对表达量低于Hela细胞(P均〈0.05)。各实验组内同一型别细胞中,E6 mRNA相对表达量低于E7 mRNA(P均〈0.05)。结论植酸酮可下调人宫颈癌细胞株中HPV16/18 E6/E7 mRNA及蛋白表达,且作用呈剂量依赖性;植酸酮对HPV16 E6/E7 mRNA的抑制作用强于HPV18 E6/E7 mRNA,并可能以抑制E6 mRNA表达为主导。 展开更多
关键词 植酸酮 人乳头瘤病毒16 人乳头瘤病毒18 E6蛋白 E7蛋白 宫颈癌 Caski细胞株 HELA细胞株
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HPV16 E6对Hippo途径效应分子YAP表达和定位的影响 被引量:1
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作者 龙洪清 向赟 +1 位作者 张振 郑义 《肿瘤学杂志》 CAS 2016年第2期125-128,共4页
[目的]研究HPV16 E6和Hippo途径效应分子YAP的相关性。[方法]用Western Blot、RT-PCR和激光共聚焦显微镜观察HPV16 E6过表达或敲减后YAP的表达和定位,以及其直接作用的下游基因结缔组织生长因子(CTGF)的表达。[结果]HPV16 E6敲减或过... [目的]研究HPV16 E6和Hippo途径效应分子YAP的相关性。[方法]用Western Blot、RT-PCR和激光共聚焦显微镜观察HPV16 E6过表达或敲减后YAP的表达和定位,以及其直接作用的下游基因结缔组织生长因子(CTGF)的表达。[结果]HPV16 E6敲减或过表达时YAP相应地表达减少或增加,磷酸化的YAP增加或减少,YAP主要定位于胞浆或胞浆和胞核中,YAP下游CTGF的表达相对应减少或增加。[结论]HPV16 E6诱导Hippo途径失常,YAP的表达升高,可能提升HPV16 E6的致癌性,Hippo途径可能是治疗高危性HPV感染相关疾病的候选药物作用靶标。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 E6蛋白 Hippo信号途径 YAP
HPV16E6对Hippo途径的效应分子YAP的影响 预览
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作者 龙洪清 向赟 +1 位作者 张振 郑义 《湖北科技学院学报:医学版》 2016年第1期1-4,F0002共5页
目的研究HPV16E6和Hippo途径的效应分子YAP的相关性。方法用Western Blot、Real-Time qRTPCR和激光扫描共聚焦显微镜观察Caski细胞HPV16E6过表达或被敲减后YAP的表达和定位及其直接作用的下游基因结缔组织生长因子(CTGF)的表达。结果 ... 目的研究HPV16E6和Hippo途径的效应分子YAP的相关性。方法用Western Blot、Real-Time qRTPCR和激光扫描共聚焦显微镜观察Caski细胞HPV16E6过表达或被敲减后YAP的表达和定位及其直接作用的下游基因结缔组织生长因子(CTGF)的表达。结果 Caski细胞HPV16E6被敲减或过表达时,YAP相应地表达减少或增加,磷酸化YAP增加或减少,YAP下游分子CTGF的mRNA表达相对应减少或升高。YAP主要定位于胞浆或胞核胞浆中,磷酸化YAP主要定位于胞浆,非磷酸化YAP主要定位于胞核。结论 HPV16E6诱导Hippo途径失常,胞核YAP表达升高,CTGF表达相应增多,提升HPV16E6的致癌性。Hippo途径可能是治疗高危性HPV16感染相关疾病的候选药物作用途径之一。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 E6蛋白 Hippo信号途径 YAP
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高危HPV病毒阳性宫颈上皮细胞P16、Ki-67的表达 预览
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作者 帅丽华 王敏 +3 位作者 胡志坚 李婷 黎美仁 陈萍 《江西医药》 CAS 2016年第11期1170-1172,共3页
目的研究人乳头瘤病毒(HPV)高危型HPV-DNA阳性宫颈上皮细胞不典型增生和低级别宫颈上皮内瘤变(Lowgrade Squamous Intraepithelial Lesion,LSIL)患者pl6、Ki-67表达情况。方法用Hybrid CaptureⅡ(HC2)或FQ-PCR体外扩增技术检测宫... 目的研究人乳头瘤病毒(HPV)高危型HPV-DNA阳性宫颈上皮细胞不典型增生和低级别宫颈上皮内瘤变(Lowgrade Squamous Intraepithelial Lesion,LSIL)患者pl6、Ki-67表达情况。方法用Hybrid CaptureⅡ(HC2)或FQ-PCR体外扩增技术检测宫颈上皮细胞高危型HPV﹣DNA,同时行液基细胞学检查。对97例高危型HPV-DNA阳性且液基细胞学诊断为不典型增生(ASCUS)或CINⅠ或CINⅡ的患者,行阴道镜检查取可疑宫颈组织标本多点活检并En Vision两步法进行免疫组化标记pl6、Ki-67。结果 97例宫颈上皮细胞高危HPV-DNA阳性患者中,宫颈组织CINⅡ级38例,CINⅠ级35例,炎症和(或)ASCUS 24例。P16标记结果 :3例+++,30例++,39例+,P16阳性表达率为74.2%;Ki-67标记结果 :3例+++,30例++,30例+,Ki-67阳性表达率为64.9%。炎症和(或)ASCUS、CINⅠ、CINⅡ三者比较,P16和Ki-67的阳性率和阳性程度具有极显著性差异(P〈0.01)。结论高危HPV病毒阳性宫颈上皮细胞随着病情严重程度增加pl6、Ki-67的阳性率和阳性程度均升高,pl6、Ki-67的检测对CIN的准确分级有利。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 pl6 KI-67 宫颈上皮内瘤变 宫颈癌
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抗 HPV18 E6多肽单克隆抗体的制备及鉴定 预览
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作者 孔倩倩 唐振华 +4 位作者 相芬芬 詹月萍 许健 吴蓉 康向东 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第3期30-32,35共4页
目的制备特异性抗人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)18 E6多肽抗体。方法通过在线分析软件AB-Cpred和Bcepred预测 HPV 18E6特异性多肽序列,将多肽序列与牛血清蛋白(bovine albumin,BSA)偶联,以偶联后多肽为抗原免疫BALB/... 目的制备特异性抗人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)18 E6多肽抗体。方法通过在线分析软件AB-Cpred和Bcepred预测 HPV 18E6特异性多肽序列,将多肽序列与牛血清蛋白(bovine albumin,BSA)偶联,以偶联后多肽为抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗 HPV18 E6多肽单克隆抗体;以 HPV18阳性分泌物标本DNA为模板,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)获得 HPV 18 E6基因,将该基因插入表达质粒 pET-28a,转化大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导目的蛋白表达;采用 Western Blot方法鉴定抗 HPV18 E6多肽抗体与目的蛋白的反应性。结果建立的杂交瘤细胞株能稳定产生 HPV18 E6多肽单克隆抗体;重组表达质粒 pET-28a-HPV18 E6测序证明构建正确,成功表达 HPV18 E6蛋白;纯化后的抗 HPV 18 E6多肽抗体可特异性识别原核表达 HPV 18 E6蛋白。结论成功制备抗 HPV18 E6多肽序列,该抗体具有较好的特异性。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 18E6 多肽 单克隆抗体
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自行制备的HPV6b和11型E7蛋白多克隆抗体检测尖锐湿疣皮损的研究 被引量:2
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作者 曹蕾 程浩 +5 位作者 王惠 周强 汤怡 姜少杰 丁杨 陈贤祯 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期774-777,共4页
目的 采用自行制备的HPV6b和11型E7蛋白多克隆抗体检测外生殖器尖锐湿疣皮损组织中HPV6b和11型E7蛋白的表达,探讨该抗体在临床检验中的应用价值。 方法 55例经临床和病理确诊的尖锐湿疣皮损石蜡标本,用自行制备的HPV6b和11型E7蛋白多... 目的 采用自行制备的HPV6b和11型E7蛋白多克隆抗体检测外生殖器尖锐湿疣皮损组织中HPV6b和11型E7蛋白的表达,探讨该抗体在临床检验中的应用价值。 方法 55例经临床和病理确诊的尖锐湿疣皮损石蜡标本,用自行制备的HPV6b和11型E7蛋白多克隆抗体进行免疫组化检测,其中18例皮损冰冻标本用RT-PCR法测定HPV6b和11型E7蛋白mRNA表达,分析与免疫组化结果的符合率。 结果 55例尖锐湿疣皮损的免疫组化染色显示,HPV6b和11型E7蛋白为胞核染色,且皮损全层表皮细胞均有阳性表达,但基底层阳性细胞较多。HPV6b和11型E7蛋白阳性表达率分别为76.36%(42/55)和58.18%(32/55),总阳性表达率为94.55%(52/55),两蛋白双阳性率为40.00%(22/55),两蛋白均阴性表达为3例(5.45%)。18例尖锐湿疣冰冻标本经RT-PCR法检测,HPV6b和11型E7 mRNA阳性表达分别为15例和10例,双阳性表达7例,其阳性表达型别与免疫组化结果完全一致,符合率均为100%。 结论 该自行制备的HPV6b和11型E7蛋白多克隆抗体免疫组化法检测尖锐湿疣皮损,检测结果直观,可以观察到HPV6b和11型感染细胞在病损中的分布位置。 展开更多
关键词 尖锐湿疣 人乳头瘤病毒6 人乳头瘤病毒11 乳头瘤病毒E7蛋白质类
HPV16-E6-DNA对宫颈癌预后预测价值分析 被引量:17
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作者 宋晓玲 蔡红兵 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期416-420,共5页
目的 探讨宫颈癌组织中高危型人乳头瘤病毒(high risk human papillomavirus,HR HPV) 16型的致癌基因E6(HPV16-E6-DNA)病毒载量情况及其对肿瘤预后的影响.方法 收集2000-06-04-2006-12-08武汉大学中南医院妇瘤科134例宫颈癌患者,均... 目的 探讨宫颈癌组织中高危型人乳头瘤病毒(high risk human papillomavirus,HR HPV) 16型的致癌基因E6(HPV16-E6-DNA)病毒载量情况及其对肿瘤预后的影响.方法 收集2000-06-04-2006-12-08武汉大学中南医院妇瘤科134例宫颈癌患者,均首次诊断为宫颈癌,行宫颈癌根治性切除术,术后经病理确诊,且随访资料完整.提取石蜡组织DNA,将HPV16-E6亚克隆到pcDNA3.1-myc HisA载体上,利用荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测宫颈癌组织中HPV16-E6-DNA病毒载量,并采用Spearman相关分析、Kaplan-Meier和多因素Cox比例风险回归模型分析HPV16-E6-DNA病毒载量与各临床病理特征的相关性,及其对总生存率的影响.结果 HPV16-E6成功克隆到pcDNA3.1 myc-HisA载体上.相关性分析显示,HPV16-E6-DNA病毒载量在宫颈癌组织的表达水平与宫颈癌患者年龄(P<0.001)、FIGO分期(P<0.001)和淋巴结转移(P<0.001)相关.Kaplan-Meier生存分析显示,HPV16-E6-DNA病毒拷贝数>10 7组5年总生存率为39.4%,105~107组为44.0%,<10 5组为86.3%,差异有统计学意义,P<0.001.单因素分析显示,年龄(P<0.001)、HPV16-E6-DNA病毒载量(P<0.001)、病理分级(P=0.049)、FIGO分期(P<0.001)、深肌层浸润(P=0.001)、宫旁阳性(P=0.010)和淋巴结转移(P=0.012)是影响预后的主要因素.Cox回归分析显示,淋巴结转移(P=0.002)和HPV16-E6-DNA病毒载量(P=0.010)是预后的独立危险因素.结论 宫颈癌组织中,HPV16-E6-DNA病毒载量明显增加,其表达是宫颈癌根治性切除术后的总体生存率的独立预后因素,可作为宫颈癌根治性切除术后的预后预测因子之一. 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 人乳头瘤病毒 E6 预后
携人乳头瘤病毒6型全基因细胞的组织工程皮片培养的初步研究
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作者 王飞 郭宗科 +6 位作者 张红叶 潘永正 董正邦 陈梅 单莹 严翘 余卫平 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期321-325,共5页
目的:建立人乳头瘤病毒6型(HPV6)全基因体外组织工程皮片培养模型,为进一步研究 HPV病毒周期奠定基础。方法用电转的方法,将 HPV6全长线性基因和质粒 pEGFP-▲EGFP 共转染 hTERT 细胞,G418抗性筛选,Southern 印迹法检测细胞内 H... 目的:建立人乳头瘤病毒6型(HPV6)全基因体外组织工程皮片培养模型,为进一步研究 HPV病毒周期奠定基础。方法用电转的方法,将 HPV6全长线性基因和质粒 pEGFP-▲EGFP 共转染 hTERT 细胞,G418抗性筛选,Southern 印迹法检测细胞内 HPV 病毒含量;3T3 J2滋养层细胞、I 型鼠尾胶原与含 HPV6基因的 hTERT 细胞(HPV6.hTERT 细胞)混合后,在金属网格上共同培养,逐渐形成皮片样结构。 HE 染色和免疫组化检测皮片的组织结构和 HPV6 L1蛋白表达,电镜检查皮片病毒颗粒。结果 HPV6全长线性基因成功转入 hTERT 细胞,Southern 印迹法检测细胞内含 HPV6 DNA;与3T3 J2细胞、I 型鼠尾胶原共同培养的 HPV6. hTERT 细胞随时间而增殖分化,逐渐形成具有疣状增生外观的皮片。皮片 HE 染色显示,培养7 d 即出现典型的皮肤分层结构;培养21 d 皮片可见明显乳头瘤样增生、空泡细胞、角化过度、角化不全等 HPV 感染组织病理表现。免疫组化显示皮片上部有 HPV6 L1蛋白表达。电镜检测发现皮片中存在 HPV6病毒颗粒。结论 HPV6全基因组织工程皮片培养模型为 HPV 的生物学研究提供了一个平台,但在应用上有一定的局限性。 展开更多
关键词 人乳头状瘤病毒6 培养技术 病理学 病毒包膜蛋白质类 皮片培养
HPV16相关宫颈癌组织中MUC16和E6表达的关系 预览 被引量:4
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作者 吴余 崔静 +8 位作者 王虹 付琳琳 李航 田明振 冯思佳 杨璐 赵二趁 千新来 原志庆 《郑州大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2015年第1期41-44,共4页
目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)16相关宫颈癌组织中粘蛋白抗原16(MUC16)与E6表达的关系。方法:以HPV16 E6阳性和阴性的宫颈癌细胞系和宫颈鳞状细胞癌(简称鳞癌)组织(184例)为研究对象,采用Western blot和免疫组化方法检测HPV16 E... 目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)16相关宫颈癌组织中粘蛋白抗原16(MUC16)与E6表达的关系。方法:以HPV16 E6阳性和阴性的宫颈癌细胞系和宫颈鳞状细胞癌(简称鳞癌)组织(184例)为研究对象,采用Western blot和免疫组化方法检测HPV16 E6和MUC16的表达。结果:Western blot结果显示:C-33A细胞中HPV16 E6无表达,Ca Ski细胞和Si Ha细胞中可见HPV16 E6表达;C-33A细胞中MUC16的表达低于Ca Ski细胞和Si Ha细胞(P〈0.05),Ca Ski细胞和Si Ha细胞中MUC16的表达差异无统计学意义(P〉0.05)。免疫组化结果显示:HPV16E6阳性的宫颈鳞癌组织中MUC16的表达高于HPV16 E6阴性的宫颈鳞癌组织(χ2=43.670,P〈0.001)。结论:宫颈癌细胞系和鳞癌组织中MUC16与E6表达可能有关。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 宫颈鳞状细胞癌 E6基因 粘蛋白抗原16
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人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA表达水平与宫颈病变病理级别的相关性分析 预览 被引量:2
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作者 韦彩素 李建湘 +2 位作者 蓝燕 班婷 潘琦文 《广西医学》 CAS 2015年第11期1559-1561,共3页
目的探讨人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA表达水平与宫颈病变病理级别的相关性。方法选取宫颈病变患者500例,收集宫颈口及宫颈管的脱落细胞行E6/E7 mRNA定量检测,阴道镜下宫颈多点取活组织病理检查,根据病理学结果明确诊断并进行分组,分析E6/E7 ... 目的探讨人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA表达水平与宫颈病变病理级别的相关性。方法选取宫颈病变患者500例,收集宫颈口及宫颈管的脱落细胞行E6/E7 mRNA定量检测,阴道镜下宫颈多点取活组织病理检查,根据病理学结果明确诊断并进行分组,分析E6/E7 mRNA表达量与宫颈病变病理级别的关系。结果共228例患者E6/E7 mRNA阳性,检出率为45.6%。在炎症组、宫颈上皮内瘤变(CIN)组及癌组中,E6/E7 mRNA阳性检出率随组织学诊断的严重程度增高而升高(P〈0.05)。宫颈高级别组(≥CINⅡ)E6/E7 mRNA阳性检出率为78.75%,明显高于宫颈低级别组(≤CINⅠ)的24.76%(P〈0.05)。不同病理诊断组间E6/E7 mRNA基因表达量比较,差异有统计学意义(P〈0.05),E6/E7 mRNA基因表达量与宫颈病变病理级别呈正相关(P〈0.05)。结论 E6/E7 mRNA癌基因表达量随着宫颈病变病理级别升高而升高。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 宫颈癌 E6 E7 mRNA 宫颈病变 病理 宫颈上皮内瘤变
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人乳头瘤病毒E6/E7mRNA检测在宫颈病变筛查中的应用价值 预览 被引量:17
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作者 张生枝 邵华江 马建婷 《中国实验诊断学》 2014年第4期582-585,共4页
目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA 检测在宫颈病变筛查中的应用价值。方法2012年6月至2013年4月在余姚市人民医院因宫颈炎症、阴道异常出血或排液的720例门诊患者行宫颈 TCT 和 HPV DNA 检测,对 TCT 结果≥ASC-US 或(和)高危... 目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA 检测在宫颈病变筛查中的应用价值。方法2012年6月至2013年4月在余姚市人民医院因宫颈炎症、阴道异常出血或排液的720例门诊患者行宫颈 TCT 和 HPV DNA 检测,对 TCT 结果≥ASC-US 或(和)高危 HPV DNA 阳性者行宫颈 HPV E6/E7mRNA 检测和组织病理学检查。以病理学结果为标准,与 HPV DNA 检测相比较,评价 HPV E6/E7 mRNA 检测对 CIN2+诊断价值,并用受试者工作特征(ROC)曲线评价其准确性。结果在 CIN 和宫颈浸润癌中,HPV E6/E7 mRNA 总体阳性率为78.7%,低于 HPV DNA 总体阳性率(92.6%),差异有统计学意义(P <0.001)。HPV E6/E7 mRNA 检测诊断 CIN2+的灵敏度为83.0%,低于 HPV DNA(94.5%),差异有统计学意义(P <0.01);特异度为51.1%,高于 HPV DNA(22.8%),差异有统计学意义(P <0.001)。 HPV E6/E7 mRNA、HPV DNA 对诊断 CIN2+的 ROC 曲线下面积分别为0.670、0.587, HPV E6/E7 mRNA 检测对 CIN2+的诊断的准确性高于 HPV DNA,差异有统计学意义(P <0.01)。结论 HPV E6/E7 mRNA 检测诊断 CIN2+特异度和准确性高于 HPV DNA,对宫颈病变的筛查有一定应用价值。 展开更多
关键词 E6 E7 mRNA 人乳头瘤病毒 DNA 人乳头瘤病毒 宫颈病变
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宫颈细胞 HPV E6/E7 mRNA 检测在宫颈病变诊断中的价值 预览 被引量:5
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作者 严雪梅 洪颖 《山东医药》 CAS 2014年第23期60-63,共4页
目的:评价高危型人乳头状瘤病毒( HPV) E6/E7 mRNA检测对宫颈病变的诊断价值。方法520例患者采用b-DNA技术检测HPV E6/E7 mRNA,并用宫颈液基细胞学( TCT)行宫颈细胞学检查,对其中任何一项阳性者做阴道镜下宫颈活组织检查,以组... 目的:评价高危型人乳头状瘤病毒( HPV) E6/E7 mRNA检测对宫颈病变的诊断价值。方法520例患者采用b-DNA技术检测HPV E6/E7 mRNA,并用宫颈液基细胞学( TCT)行宫颈细胞学检查,对其中任何一项阳性者做阴道镜下宫颈活组织检查,以组织病理为金标准,计算HPV E6/E7 mRNA阳性对高级别宫颈上皮内瘤样病变( CIN)、宫颈浸润癌诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值,并与TCT检查进行比较。结果520例患者中HPV E6/E7 mRNA阳性158例, TCT异常222例。 TCT 异常者中HPV E6/E7 mRNA阳性率较TCT 正常者中HPV E6/E7 mRNA阳性率高(P<0.05)。146例慢性宫颈炎、CINⅠ级患者与124例高级别CIN、宫颈浸润癌患者中HPV E6/E7 mRNA阳性率比较,P<0.05。 HPV E6/E7 mRNA阳性对高级别CIN及宫颈浸润癌诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为74.19%、83.33%、58.23%、71.43%,TCT 检查分别为81.53%、69.44%、81.45%、92.28%,两者特异度及阳性预测值比较, P均<0.05。结论在宫颈癌筛查中检测高危型HPV E6/E7 mRNA对预测高级别CIN,尤其对评估癌症风险有重要的临床价值。 展开更多
关键词 b-DNA技术 人乳头状瘤病毒 E6基因 E7基因 宫颈高度上皮内瘤样病变
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