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基于两种分析方法优化红花中羟基红花黄色素A提取工艺
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作者 虞立 万海同 +4 位作者 何昱 周惠芬 金伟锋 李畅 杨洁红 《中药材》 北大核心 2018年第11期2627-2631,共5页
目的:采用响应面设计、遗传-神经网络模型两种分析方法对红花中羟基红花黄色素A进行提取工艺优化。方法:在单因素试验的基础上,采用响应面试验设计法对红花进行提取;HPLC检测提取液中羟基红花黄色素A的含量,计算提取率。再分别采用响应... 目的:采用响应面设计、遗传-神经网络模型两种分析方法对红花中羟基红花黄色素A进行提取工艺优化。方法:在单因素试验的基础上,采用响应面试验设计法对红花进行提取;HPLC检测提取液中羟基红花黄色素A的含量,计算提取率。再分别采用响应面及遗传-神经网络模型两种分析方法对实验结果进行寻优。结果:响应面分析方法得到的最佳提取工艺为:提取时间:1.6 h、乙醇浓度:48%、提取温度:91℃、液料比:13∶1,该方法下的预测值为1 621.78μg/g,验证试验的平均值为1 604.46μg/g,RSD为0.30%;遗传-神经网络模型处理得到的最优结果为提取时间:0.52 h、乙醇浓度:43%、提取温度:94℃、液料比:5∶1,该模型的预测值为1 884.11μg/g,验证试验的平均值为1 717.43μg/g,RSD为1.41%。结论:遗传-神经网络模型的结果更符合实际,可用于红花中羟基红花黄色素A提取工艺的优化及预测,为单味及复方中药的单成分提取分析提供了参考。 展开更多
关键词 红花 提取优化 羟基红花黄色素A 响应面法 遗传-神经网络
羟基红花黄色素A、芍药苷单用及联合对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织NF-κB及炎症因子的影响
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作者 廖金明 余梦黎 +2 位作者 秦莎莎 姚晖 张继平 《中药药理与临床》 CSCD 北大核心 2018年第3期51-55,共5页
目的:探讨羟基红花黄色素A、芍药苷单用及联合用药对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:120只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、银杏内酯5mg/kg组、羟基红花黄色素A 5mg/kg组、芍药苷5mg/kg组和羟基红花黄色素A与芍药苷... 目的:探讨羟基红花黄色素A、芍药苷单用及联合用药对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:120只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、银杏内酯5mg/kg组、羟基红花黄色素A 5mg/kg组、芍药苷5mg/kg组和羟基红花黄色素A与芍药苷联合用药组(5mg/kg+5mg/kg)。采用线栓法建立大鼠局部脑缺血再灌注模型(MCAO)。脑缺血1h再灌注6h后进行神经功能缺失评分及尾静脉注射给药;给药7天后,再次进行神经功能缺失评分;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测梗死面积;酶联免疫法(ELISA)测定脑组织中IL-1β和TNF-α含量;免疫组化法(ICH)检测缺血脑组织中核转录因子NF-κB/p65的表达情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠治疗前神经功能评分均明显高于假手术组;用药7天后,与模型组比较,银杏内酯组(5mg/kg)、羟基红花黄色素A组(5mg/kg)、芍药苷组(5mg/kg)和合用组(5mg/kg+5mg/kg)的神经功能评分均降低,脑梗死面积显著减少,脑组织IL-1β和TNF-α含量明显减少,海马组织NF-κB p65表达明显减弱;且合用组对炎症因子表达的抑制效应更加明显。结论:羟基红花黄色素A与芍药苷联合用药对脑缺血再灌注大鼠的脑损伤具有协同保护作用,且显著优于单独使用,协同作用与下调脑组织中NF-κB的表达,减少炎性因子IL-1β和TNF-α的生成,从而减轻脑缺血后脑组织的继发性炎症反应,发挥对脑组织的保护作用有关。 展开更多
关键词 羟基红花黄色素A 芍药苷 脑缺血再灌注损伤 IL-1β TNF-α NF-ΚB
羟基红花黄色素A调控Wnt/bβ-catenin通路保护脑缺血小鼠血脑屏障的机制研究
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作者 付龙生 吕燕妮 徐彭 《国际中医中药杂志》 2018年第3期226-230,共5页
目的 观察羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A, HSYA)对脑缺血模型小鼠血脑屏障的影响,探讨其作用机制。方法 将72只C57/BL小鼠按随机数字表法分为假手术组、TLR4阻断组、缺血模型组、TLR4阻断+缺血模型组、HSYA干预+缺血模... 目的 观察羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A, HSYA)对脑缺血模型小鼠血脑屏障的影响,探讨其作用机制。方法 将72只C57/BL小鼠按随机数字表法分为假手术组、TLR4阻断组、缺血模型组、TLR4阻断+缺血模型组、HSYA干预+缺血模型组、HSYA干预+TLR4阻断+缺血模型组。其中缺血模型组采用大脑中动脉栓塞法制备脑缺血模型,Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)阻断采用右侧颈总动脉内注入10 μg/ml TLR4抗体0.1 ml进行干预,HSYA干预组于缺血前0.5 h尾静脉注射2 mg/kg HSYA溶液。采用RT-PCR、Western blot检测各组Wnt3a、b-catenin、Occludin和Claudin-5的mRNA和蛋白表达变化。结果 与缺血模型组比较,TLR4阻断+缺血模型组、HSYA干预+缺血模型组、HSYA干预+TLR4阻断+缺血模型组TLR4 mRNA[(1.63±0.05)、(1.53±0.04)、(1.84±0.03)比(1.97±0.05)]表达降低(P<0.05或P<0.01),Wnt3a mRNA [(0.56±0.01)、(0.58±0.01)、(0.50±0.04)比(0.42±0.03)]、b-catenin mRNA[(0.61±0.03)、(0.74±0.02)、(0.58±0.04)比(0.50±0.03)]、Claudin-5 mRNA [(0.54±0.02)、(0.58±0.01)、(0.47±0.01)比(0.46±0.02)]mRNA表达升高(P<0.05或P<0.01),TLR4蛋白[(1.73±0.05)、(1.57±0.03)、(1.79±0.08)比(1.89±0.02)]表达降低(P<0.05或P<0.01),Wnt3a蛋白[(0.67±0.03)、(0.74±0.03)、(0.57±0.01)比(0.46±0.01)]、Occludin蛋白[(0.66±0.02)、(0.73±0.02)、(0.67±0.01)比(0.53±0.01)]、Claudin-5蛋白[(0.71±0.01)、(0.73±0.01)、(0.66±0.01)比(0.64±0.03)]表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论 TLR4对缺血小鼠脑组织中Wnt3a和b-catenin的活化起重要调控作用,HSYA可通过调控Wnt3a和β-catenin的表达对缺血脑组织紧密连接蛋白Occludin和Claudin-5进行干预,从而对缺血脑组织起到保护作用。 展开更多
关键词 羟基红花黄色素A 脑缺血 血脑屏障 WNT蛋白质类 小鼠
UPLC-MS/MS同时测定谷红注射液中7种有效成分 被引量:1
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作者 李宵 吴茵 +4 位作者 支旭然 李倩 李颖 王祁民 董占军 《中国实验方剂学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第21期64-69,共6页
目的:建立同时测定谷红注射液中乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素含量的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。Phenomenex Kinetex C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水... 目的:建立同时测定谷红注射液中乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素含量的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。Phenomenex Kinetex C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.5 m L·min^(-1);质谱采用正负离子同时监测,多反应监测模式(MRM),进样量5μL。结果:谷红注射液中乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素质量浓度线性范围分别在10.36~663.0,0.500 0~32.00,0.047 8~3.059,0.200 0~12.80,0.032 4~2.074,0.675 0~43.20,0.142 5~9.120μg·L^(-1)线性关系良好;平均加样回收率分别为97.0%~99.2%,RSD〈3.4%(n=6);7种成分在3批样品中的质量浓度依次为乙酰谷酰胺28.5~32.4 g·L^(-1),羟基红花黄色素A 1.02~1.23 g·L^(-1),芦丁14.3~17.6 mg·L^(-1),紫丁香苷101~123 mg·L^(-1),山柰素12.1~14.9μg·L^(-1),山柰酚0.138~0.155 mg·L^(-1),槲皮素73.4~95.6μg·L^(-1)。结论:该方法简、快速、高效、准确、可靠,适用于同时测定乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素7种有效成分,为该制剂建立更全面的质量控制方法提供依据。 展开更多
关键词 谷红注射液 乙酰谷酰胺 羟基红花黄色素A 芦丁 紫丁香苷 山柰素 山柰酚 槲皮素
羟基红花黄色素A对紫外线致人皮肤细胞系损伤的保护作用 预览 被引量:2
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作者 辛蕾 苏欣 +2 位作者 李莎 张迪 李婷 《西北药学杂志》 CAS 2017年第5期636-639,共4页
目的评价羟基红花黄色素A(HSYA)对紫外线(UVA、UVB)辐射损伤人表皮细胞(Hacat)和皮肤成纤维细胞(ESF)的保护作用。方法建立体外紫外线辐射损伤模型,采用MTT法检测培养皮肤细胞活性,分别采用生化测定与ELISA法检测不同剂量HSYA... 目的评价羟基红花黄色素A(HSYA)对紫外线(UVA、UVB)辐射损伤人表皮细胞(Hacat)和皮肤成纤维细胞(ESF)的保护作用。方法建立体外紫外线辐射损伤模型,采用MTT法检测培养皮肤细胞活性,分别采用生化测定与ELISA法检测不同剂量HSYA对紫外损伤模型中活性氧(ROS)和金属基质蛋白酶-1(MMP-1)表达水平的影响。结果 UVA、UVB照射后,ESF、Hacat细胞活性显著下降,ROS、MMP-1表达水平明显上升。细胞培养液加入10,20和40μmol·L-1的HSYA,可不同程度降低UVA、UVB处理后ESF和Hacat细胞中ROS与细胞外MMP-1表达水平。结论 HSYA可抑制紫外线诱导ESF、Hacat细胞氧化损伤,对抗皮肤光老化具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 羟基红花黄色素A 皮肤 紫外辐射 活性氧 金属基质蛋白酶-1
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大黄酸和羟基红花黄色素A单用及配伍对慢性肾病的保护作用研究 被引量:8
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作者 李会会 胡娜平 +5 位作者 刘美佑 楚建杰 孙金 李帆 鹿成韬 文爱东 《药物评价研究》 CAS 2015年第6期607-611,共5页
目的通过对大鼠左侧输尿管结扎(UUO)的动物损伤模型,探讨大黄酸(rhein)和羟基红花黄色素A(HSYA)单用及配伍对肾脏保护的抗炎作用机制。方法采用 UUO 造慢性肾病损伤动物模型,将30 只雄性SD 大鼠随机分为假手术组、模型组、rhein 治疗组[... 目的通过对大鼠左侧输尿管结扎(UUO)的动物损伤模型,探讨大黄酸(rhein)和羟基红花黄色素A(HSYA)单用及配伍对肾脏保护的抗炎作用机制。方法采用 UUO 造慢性肾病损伤动物模型,将30 只雄性SD 大鼠随机分为假手术组、模型组、rhein 治疗组[100 mg/(kg·d)]、HSYA 治疗组[50 mg/(kg·d)]和rhein[100 mg/(kg·d)]+HSYA[50 mg/(kg·d)]治疗组。给药14 d 后处死大鼠,采用试剂盒测定各组大鼠治疗前及治疗后血清中血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定治疗前及治疗后血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平,通过HE 染色观察肾组织变化。结果与模型组相比,rhein 和HSYA 单用及配伍组血清中Scr 和BUN 表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。TNF-α、IL-6、IL-1β及MCP-1 表达亦明显下降,差异有统计学意义(P<0.01),同时肾组织病理学变化亦得到改善,且配伍的效果优于单用。结论rhein 和HSYA 单用及配伍均能对UUO 导致的炎症损伤发挥一定的肾保护作用,配伍效果更好,其作用机制与抗炎作用有关。 展开更多
关键词 大黄酸 羟基红花黄色素A 慢性肾病 抗炎 IL-6 TNF-α
红花有效部位制备工艺研究 预览 被引量:2
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作者 李志峰 王琦 +3 位作者 吴蓓 冯育林 张武岗 杨世林 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期643-645,共3页
目的通过比较不同提取方法以及不同型号大孔树脂对红花黄色素的提取与纯化效果,探讨红花黄酮类有效部位制备工艺的可行性。方法采用紫外分光光度法测定所得提取物中红花黄色素的含量;采用高效液相色谱法测定提取物中羟基红花黄色素A的含... 目的通过比较不同提取方法以及不同型号大孔树脂对红花黄色素的提取与纯化效果,探讨红花黄酮类有效部位制备工艺的可行性。方法采用紫外分光光度法测定所得提取物中红花黄色素的含量;采用高效液相色谱法测定提取物中羟基红花黄色素A的含量,考察工艺的稳定性。结果红花药材加12倍量纯水,70℃时浸渍提取2次,每次90 min,上样于AB-8型号大孔树脂以6倍量(相对生药材量)纯水洗去杂质,再以10倍量40%乙醇洗脱红花黄色素其红花黄色素含量均大于40.0%。结论该工艺稳定可行,可用于红花复方制剂制备,同时又为五类新药研究提供依据。 展开更多
关键词 红花黄色素 羟基红花黄色素A 大孔树脂
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用RP-HPLC法测定七厘散中羟基红花黄色素A的含量 预览 被引量:1
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作者 谭生建 李艳蕾 +2 位作者 王杰松 陈曦 张学辉 《药学服务与研究》 CAS CSCD 2013年第6期467-469,共3页
目的:建立RP-HPLC法测定七厘散中羟基红花黄色素A的含量。方法:采用Mucleodur C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液 (11∶89);流速:1.0 ml/min;检测波长:403 nm;柱温:35 ℃。结果:羟基红花... 目的:建立RP-HPLC法测定七厘散中羟基红花黄色素A的含量。方法:采用Mucleodur C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液 (11∶89);流速:1.0 ml/min;检测波长:403 nm;柱温:35 ℃。结果:羟基红花黄色素A保留时间约为19 min,与相邻峰的分离度〉1.5。羟基红花黄色素A在8.0~160.0 μg/ml范围内线性关系良好,回归方程:Y=0.016 11 X+1.217(r=0.999 9)。平均加样回收率为99.5%,RSD为0.94%。结论:该方法准确、灵敏、重现性好,可用于七厘散中羟基红花黄色素A的含量测定。 展开更多
关键词 七厘散 羟基红花黄色素A 色谱法 高效液相
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HPLC测定胡日查六味丸中羟基红花黄色素A的含量 被引量:3
9
作者 武晓兰 邰文泉 +1 位作者 斯日棍其其格 白玉霞 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第19期143-145,共3页
目的:建立蒙药胡日查六味丸中羟基红花黄色素A的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,以DiamonsilC18柱(4.6mm×200mm,5μm)为分离柱,以甲醇-乙腈旬-7%磷酸溶液(26:2:72)为流动相,流速1.0mL·min^-1,检测波... 目的:建立蒙药胡日查六味丸中羟基红花黄色素A的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,以DiamonsilC18柱(4.6mm×200mm,5μm)为分离柱,以甲醇-乙腈旬-7%磷酸溶液(26:2:72)为流动相,流速1.0mL·min^-1,检测波长403nm,柱温30℃。结果:羟基红花黄色素A在70~420ng呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率99.27%,RSD0.86%。结论:方法简便、准确、重复性好,适合羟基红花黄色素A类样品的分析测定。 展开更多
关键词 胡日查六味丸 羟基红花黄色素A 高效液相色谱法
红花黄色素缓释骨架片质量控制方法的研究 预览
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作者 刘中垒 李国玉 +2 位作者 刘金荣 谭勇 王金辉 《中国现代中药》 CAS 2009年第2期 29-31,共3页
目的:建立红花黄色素缓释骨架片的质量控制方法。方法:采用紫外一可见分光光度法和高效液相色谱法分别测定红花黄色素(SY)和羟基红花黄色素A(HSYA)的含量。结果:分光光度法测定SY样品含量的回归方程:A=13.326C+0.0008,在0.... 目的:建立红花黄色素缓释骨架片的质量控制方法。方法:采用紫外一可见分光光度法和高效液相色谱法分别测定红花黄色素(SY)和羟基红花黄色素A(HSYA)的含量。结果:分光光度法测定SY样品含量的回归方程:A=13.326C+0.0008,在0.01598~0.04795mg·mL^-1线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为99.6%;高效液相色谱法测定HSYA样品含量的回归方程:A=3.16×10^6W-2.42×10^4,在0.06689~0.7358μg线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为96.3%。结论:本实验方法简便,准确,重复性好,可作为红花黄色素缓释骨架片的质量控制方法。 展开更多
关键词 红花黄色素 羟基红花黄色素A 分光光度法 高效液相色谱法
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HPLC法同时测定舒胸速释微丸中4种化学成分的含量 被引量:1
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作者 付妍 付春旺 +2 位作者 陈晓辉 宋洪涛 毕开顺 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期629-632,共4页
目的建立同时测定舒胸速释微丸中羟基红花黄色素A、阿魏酸、三七皂苷R1和人参皂苷Rg14种化学成分含量的高效液相色谱法。方法采用Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)和质量分数为0.05%的磷酸水溶液(B)作流动相,... 目的建立同时测定舒胸速释微丸中羟基红花黄色素A、阿魏酸、三七皂苷R1和人参皂苷Rg14种化学成分含量的高效液相色谱法。方法采用Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)和质量分数为0.05%的磷酸水溶液(B)作流动相,梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1.0 mL.min-1;检测波长:203 nm。结果羟基红花黄色素A、阿魏酸、三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的线性范围分别为1.88-37.50 mg.L-1(r=0.999 7),0.91-18.20 mg.L-1(r=0.999 5),2.25~45.00 mg.L-1(r=0.999 5)和15.10-302.00 mg.L-1(r=0.999 8),平均加样回收率(n=9)分别为97.3%、97.8%、98.7%和98.5%,RSD为1.8%、1.5%、1.4%和1.8%。结论HPLC法可为舒胸速释微丸提供含量测定的方法。 展开更多
关键词 舒胸速释微丸 羟基红花黄色素A 阿魏酸 三七皂苷R1 人参皂苷RG1 高效液相色谱法 含量测定
高效液相色谱法同时测定注射用丹红(粉针剂)中4种有效成分 预览 被引量:4
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作者 齐丹丹 贾英 +1 位作者 谭晓杰 毕开顺 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期 1165-1167,共3页
目的:同时测定注射用丹红(粉针剂)中丹参素、原儿茶醛、羟基红花黄色素A和丹酚酸B的含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:Luna C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:0.05%磷酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱程序为:... 目的:同时测定注射用丹红(粉针剂)中丹参素、原儿茶醛、羟基红花黄色素A和丹酚酸B的含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:Luna C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:0.05%磷酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱程序为:0~80min,A:100%→67%,B:0%→33%;流速:1.0mL·min^-1;检测波长:280nm。结果:建立了同时测定注射用丹红(粉针剂)中4种成分含量的方法。丹参素、原儿茶醛、羟基红花黄色素A和丹酚酸B的线性范围分别为56.3~338μg·mL^-1(r=0.9997),7.92~47.2μg·mL^-1(r=0.9996),16.4~98.2μg·mL^-1(r=0.9997),32.0~193μg·mL^-1(r=0.9999);平均回收率(n=9)分别为99.7%,99.3%,99.2%,98.8%。结论:该方法简便、准确,重复性好,为注射用丹红(粉针剂)的质量控制提供了定量方法。 展开更多
关键词 注射用丹红(粉针剂) 丹参素 原儿茶醛 羟基红花黄色素A 丹酚酸B 高效液相色谱法
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羟基红花黄色素A在大鼠体内的药代动力学 预览 被引量:34
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作者 张海防 郭健新 +1 位作者 黄罗生 平其能 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期 456-460,共5页
目的:研究羟基红花黄色素A在大鼠体内的药代动力学.方法:羟基红花黄色素A大鼠尾静脉注射给药和灌胃给药,HPLC测定血浆中药物的含量,3P97计算药代动力学参数;大鼠胆管插管收集给药后24h胆汁;代谢笼收集大鼠给药后24h尿样和粪便。... 目的:研究羟基红花黄色素A在大鼠体内的药代动力学.方法:羟基红花黄色素A大鼠尾静脉注射给药和灌胃给药,HPLC测定血浆中药物的含量,3P97计算药代动力学参数;大鼠胆管插管收集给药后24h胆汁;代谢笼收集大鼠给药后24h尿样和粪便。结果:静脉注射给药符合二室开放模型,胆汁累积排泄量为1.32%,尿中24h累积排泄率为88.6%,粪便中没有检测到药物。灌胃给药绝对生物利用度是1.2%;胆汁累积排泄量为0.062%;尿中24h累积排泄率为2.9%;粪便24h累积排泄率为48%。结论:羟基红花黄色素A大鼠口服吸收较差,有胆汁外排效应;血中药物以肾排泄为主。 展开更多
关键词 羟基红花黄色素A 药代动力学 绝对生物利用度 吸收 排泄
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羟基红花黄色素A促犬胸主动脉内皮细胞增殖及其机制初探 预览 被引量:4
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作者 宋艳 张岭 +2 位作者 渠凯 李长龄 朱海波 《中国药学:英文版》 CAS 2005年第3期 181-185,共5页
目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对常氧/低氧两种条件下体外培养的犬胸主动脉内皮细胞增殖的影响,且探讨其增殖作用是否与血管内皮生长因子(VEGF)有关.方法采用内膜消化刮取法获取犬胸主动脉内皮细胞;分别在常氧(21%)/低氧(10%)两种条件... 目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对常氧/低氧两种条件下体外培养的犬胸主动脉内皮细胞增殖的影响,且探讨其增殖作用是否与血管内皮生长因子(VEGF)有关.方法采用内膜消化刮取法获取犬胸主动脉内皮细胞;分别在常氧(21%)/低氧(10%)两种条件下,以噻唑蓝(MTT)法观察HSYA对血管内皮细胞(VEC)增殖的影响,VEGF作为阳性对照;并且观察VEGF抗体及其两种酪氨酸受体(Flt-1和KDR)的抗体对HSYA促VEC增殖及分泌VEGF的影响,采用ELISA法检测VEGF水平.结果 HSYA 1×10-3 mol·L-1、 1×10-4 mol·L-1在常氧条件下孵育72 h、 96 h和120 h或在低氧条件下孵育24 h、 48 h、 72 h对VEC都有明显促增殖作用,并具有浓度和时间依赖性,HSYA 1×10-3 mol·L-1与VEGF 2.6×10-7 mol·L-1在同样条件下对VEC的促增殖作用强度相当;10 μg·mL-1的VEGF、Flt-1和KDR的抗体均能明显抑制1×10-3 mol·L-1 HSYA的促VEC增殖作用,尤其10 μg·mL-1的VEGF抗体和Flt-1抗体能明显抑制1×10-3 mol·L-1 HSYA的促VEC分泌VEGF作用.结论在常氧/低氧两种条件下,HSYA均具有明显促VEC增殖作用,尤其在低氧条件下更为明显;而且HSYA的促VEC增殖作用可能与VEGF或VEGF受体有关. 展开更多
关键词 羟基红花黄色素A 血管内皮细胞 血管新生 血管内皮生长因子 低氧
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羟基红花黄色素A联合黄芪甲苷-Ⅳ对TNF-α诱导内皮细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 卢芬萍 苏宁 +4 位作者 朱明明 征宗梅 申毓军 刘亭宇 施洪飞 《中国实验方剂学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期88-94,共7页
目的:观察羟基红花黄色素A(hydroxysafflower yellow A,HSYA)联合黄芪甲苷-Ⅳ(astragaloside-Ⅳ,As-Ⅳ)对人重组肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导人脐静脉内皮细胞EA.hy926凋亡的影响。方法:噻唑蓝(MTT... 目的:观察羟基红花黄色素A(hydroxysafflower yellow A,HSYA)联合黄芪甲苷-Ⅳ(astragaloside-Ⅳ,As-Ⅳ)对人重组肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导人脐静脉内皮细胞EA.hy926凋亡的影响。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度TNF-α(0,10,20,50μg·L~(-1)),HSYA(0,1×10~(-6),5×10~(-6),1×10~(-5),1×10~(-4)mol·L~(-1)),As-Ⅳ(0,1×10-6,5×10~(-6),1×10~(-5),1×10~(-4)mol·L~(-1))对细胞活力的影响以及HSYA联合As-Ⅳ(1×10-5mol·L~(-1))对TNF-α(20μg·L~(-1))损伤细胞活力的影响。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同浓度TNF-α对B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),活化的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3),活化的天冬氨酸蛋白水解酶-9(cleaved Caspase-9)蛋白表达的影响,以及HSYA联合As-Ⅳ对上述蛋白表达是否具有改善作用。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测HSYA联合As-Ⅳ对TNF-α诱导Bcl-2基因表达的影响,免疫荧光技术分析HSYA联合As-Ⅳ对TNF-α诱导Bcl-2,Bax蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,TNF-α在20μg·L~(-1)时可诱导EA.hy926细胞活力下降,上调Bax,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达;与TNF-α组比较,HSYA联合As-Ⅳ预处理组可减少TNF-α诱导的细胞活力下降,抑制Bax,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9蛋白的表达,增加Bcl-2蛋白的表达,且HSYA联合As-Ⅳ预处理组对上述指标的改善效果优于HSYA或As-Ⅳ单独预处理组。结论:HSYA联合As-Ⅳ对TNF-α诱导的EA.hy926细胞凋亡具有抑制作用,且效果优于单药,其机制可能与其下调Bax,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9和上调Bcl-2的表达有关。 展开更多
关键词 羟基红花黄色素A 黄芪甲苷-Ⅳ 内皮细胞 细胞凋亡
HPLC-DAD法同时测定谷红注射液中7个组分的含量 被引量:8
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作者 何昱 周惠芬 +3 位作者 黄丽娜 赵涛 付巍 万海同 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期954-959,共6页
目的:建立HPLC-DAD法同时测定谷红注射液中乙酰谷酰胺、尿苷、腺苷、鸟苷、紫丁香苷、羟基红花黄色素A和脱水红花黄色素B 7个有效成分的含量。方法:采用AlltimaTMC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相... 目的:建立HPLC-DAD法同时测定谷红注射液中乙酰谷酰胺、尿苷、腺苷、鸟苷、紫丁香苷、羟基红花黄色素A和脱水红花黄色素B 7个有效成分的含量。方法:采用AlltimaTMC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.9 m L·min-1,柱温30℃,检测波长为210、260、403 nm。结果:7个组分的峰面积与浓度的线性关系良好(r≥0.999 6);加样回收率为99.12%-100.7%。10个批次谷红注射液中7个组分的含量分别为27.26-27.89、62.23-84.30、44.38-58.71、40.15-43.18、63.20-69.45、410.69-436.09、0.99-1.78μg·m L-1。结论:所建立的方法用于谷红注射液多组分的含量测定准确、可靠,重复性好,可作为谷红注射液质量控制的参考。 展开更多
关键词 高效液相色谱-二极管阵列检测法 谷红注射液 乙酰谷酰胺 尿苷 腺苷 鸟苷 紫丁香苷 羟基红花黄色素A 脱水红花黄色素B 方法验证
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