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补肾、活血中药复方对去卵巢骨质疏松症模型大鼠股骨和肾组织IHH mRNA及蛋白表达的影响
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作者 邓洋洋 孙鑫 +3 位作者 李佳 蒋宁 林庶茹 郑洪新 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1401-1404,共4页
目的:观察去卵巢骨质疏松症大鼠模型股骨和肾组织中IHH mRNA和蛋白活性变化,探究中药防治骨质疏松症的分子生物学机制。方法:采用切除雌性SD大鼠双侧卵巢的方式建立骨质疏松症模型,运用补肾中药复方、活血中药复方对模型大鼠进行干预12... 目的:观察去卵巢骨质疏松症大鼠模型股骨和肾组织中IHH mRNA和蛋白活性变化,探究中药防治骨质疏松症的分子生物学机制。方法:采用切除雌性SD大鼠双侧卵巢的方式建立骨质疏松症模型,运用补肾中药复方、活血中药复方对模型大鼠进行干预12周,用骨疏康颗粒作为阳性对照药物。RT-PCR检测各组股骨和肾组织IHH mRNA相对表达量;ELISA法检测各组股骨和肾组织IHH蛋白含量。结果:与正常组比较,模型组股骨和肾组织IHH mRNA和蛋白表达量显著减少(P<0.01);与模型组比较,各用药组股骨和肾组织IHH mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.01),且补肾组显著高于活血组(P<0.01)。结论:骨质疏松症的发生机制可能与Hedgehog信号传导通路中IHH含量降低有关;补肾、活血中药复方可以激活IHH信号传导通路,促进骨形成,抑制骨吸收,起到防止骨质疏松症的作用,且补肾中药复方优于活血中药复方。 展开更多
关键词 骨质疏松症 补肾 活血 HEDGEHOG IHH
基于Cre/LoxP系统建立软骨组织特异性印第安刺猬蛋白基因敲除小鼠模型 预览
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作者 袁涛 王勇卓 +3 位作者 黄远章 席刚 魏垒 张民 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第19期3013-3018,共6页
背景:印第安刺猬蛋白(Ihh)条件性基因敲除小鼠动物模型的建立,实现了印第安刺猬蛋白条件性基因敲除能够在时间和组织上具有选择性,能够为进一步研究与生长板有关的严重遗传病提供实验基础。目的:基于Cre/LoxP系统建立软骨组织特异性印... 背景:印第安刺猬蛋白(Ihh)条件性基因敲除小鼠动物模型的建立,实现了印第安刺猬蛋白条件性基因敲除能够在时间和组织上具有选择性,能够为进一步研究与生长板有关的严重遗传病提供实验基础。目的:基于Cre/LoxP系统建立软骨组织特异性印第安刺猬蛋白基因敲除小鼠模型,并进一步观察其表型变化差异。方法:SPF级亲代Ihhfl/fl小鼠与Col2a1-CreERT2小鼠,均由美国布朗大学魏垒教授赠予。将亲代Ihhfl/fl小鼠与Col2a1-CreERT2小鼠杂交,获得基因型Col2a1-CreERT2,Ihhfl/-小鼠;再将此基因型小鼠自交,获得刚出生的小鼠。通过琼脂糖凝胶电泳对刚出生小鼠进行基因鉴定,随机分为2组:实验组小鼠于出生后第1天开始腹腔注射玉米油溶解的20 g/L他莫昔芬10μL,连续注射3 d;对照组小鼠腹腔注射等量玉米油。出生后第6天RT-qPCR检测印第安刺猬蛋白基因的敲除率;第8天小鼠膝关节行番红固绿染色、Von Kassa染色进行初步表型观察;第8周行小鼠大体形态观察、记录后肢股骨/胫骨长度,后肢X射线片观察。结果与结论:①通过RT-qPCR证实了印第安刺猬蛋白条件性基因敲除率为76.83%,8周龄小鼠大体形态表现为肢体短小畸形(P <0.01);②X射线显示敲除小鼠胫骨明显缩短且骨骺端发育异常;③番红固绿染色显示印第安刺猬蛋白条件性敲除表达在发育中的小鼠胫骨生长板软骨组织这一特定区域;④Von Kassa染色显示Ihhd/d小鼠生长板过早闭合;⑤初步建立了印第安刺猬蛋白条件性基因敲除小鼠模型,印第安刺猬蛋白条件性基因敲除后引起小鼠生长板区软骨细胞增殖紊乱,生长板区软骨细胞提前矿化,生长板过早骨化闭合,小鼠表现为肢体短小畸形。 展开更多
关键词 组织构建 骨组织工程 软骨生长板 条件基因敲除 动物模型 他莫昔芬 小鼠 IHH
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CRISPR/Cas9介导鸡IHH基因载体构建及其敲除效率检测 被引量:1
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作者 邱桂如 金四华 +3 位作者 王政 毕慧娟 侯卓成 杨宁 《中国家禽》 北大核心 2017年第19期6-10,共5页
为了揭示IHH(Indian hedgehog)基因在鸡匍匐性状形成过程中的作用机制,利用在线sgRNA平台设计4条IHHsgRNA序列,构建了sgRNA—PX459表达载体,分别命名为sgRNAl、sgRNA2、sgRNA3和sgRNA4。采用脂质体转染至鸡DF-1成纤维细胞后,通过... 为了揭示IHH(Indian hedgehog)基因在鸡匍匐性状形成过程中的作用机制,利用在线sgRNA平台设计4条IHHsgRNA序列,构建了sgRNA—PX459表达载体,分别命名为sgRNAl、sgRNA2、sgRNA3和sgRNA4。采用脂质体转染至鸡DF-1成纤维细胞后,通过嘌呤霉素筛选4d后收集阳性细胞,采用试剂盒法提取基因组DNA,利用T7E1内切酶和TA克隆测序方法检测4个表达载体的打靶效率。结果表明:4务sgRNA表达载体构建成功,并且都能高效地在DF-1细胞中表达,其中sgRNA1表达载体能有效地打靶IHH基因,通过测序分析发现打靶效率为75.0%,测序结果表明这些突变都以碱基缺失为主。研究结果为揭示IHH基因在鸡匍匐性状中作用机制奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 IHH CRISPR/Cas9 载体构建 效率检测
补肾、健脾、活血法对绝经后骨质疏松症大鼠骨骼、骨骼肌印第安刺猬蛋白(Ihh)含量影响的比较研究 被引量:4
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作者 姜奥 金成日 杨芳 《中华中医药学刊》 北大核心 2017年第9期2392-2394,共3页
目的:观察中医不同治法对骨质疏松症大鼠骨骼、骨骼肌印第安刺猬蛋白(Ihh)含量变化的影响,为临床中医防治骨质疏松症的提供理论依据。方法:将SD雌性大鼠分为正常组、模型组、补肾组、健脾组、活血组。采用酶联免疫法测定小鼠骨骼、... 目的:观察中医不同治法对骨质疏松症大鼠骨骼、骨骼肌印第安刺猬蛋白(Ihh)含量变化的影响,为临床中医防治骨质疏松症的提供理论依据。方法:将SD雌性大鼠分为正常组、模型组、补肾组、健脾组、活血组。采用酶联免疫法测定小鼠骨骼、骨骼肌Ihh含量浓度变化。结果:(1)与正常组比较,模型组大鼠骨骼的Ihh含量降低明显(P〈0.01);与模型组比较,补肾组和健脾组骨骼的Ihh含量明显升高(P〈0.01)。(2)与正常组比较,模型组大鼠骨骼肌的Ihh含量显著降低(P〈0.01);与模型组比较,补肾组和健脾组骨骼肌的Ihh含量明显升高(P〈0.01)。结论:(1)骨质疏松症的形成,可能与骨骼、骨骼肌协调性下降有关。(2)补肾、健脾方法通过提高骨质疏松症大鼠的骨骼、骨骼肌Ihh含量,对骨质疏松症具有一定的防治作用。 展开更多
关键词 骨质疏松症 印第安刺猬蛋白 补肾 健脾
免疫组织化学技术检测新生乳鼠颞下颌关节软骨基质与Ihh表达的实验研究 预览
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作者 邵翔 陈后煌 +4 位作者 陈达 马玉环 郑文伟 叶蕻芝 李西海 《风湿病与关节炎》 2016年第11期5-7,11共4页
目的:探讨颞下颌关节发育的分子生物学机制。方法:选取5只BAL B/C新生乳鼠,取头,常规固定、脱钙、脱水、包埋,采用免疫组织化学技术检测颞下颌关节CollagenⅡ(ColⅡ)、CollagenⅠ(ColⅠ)、Aggrecan和印度豪猪蛋白(Ihh)的表达。... 目的:探讨颞下颌关节发育的分子生物学机制。方法:选取5只BAL B/C新生乳鼠,取头,常规固定、脱钙、脱水、包埋,采用免疫组织化学技术检测颞下颌关节CollagenⅡ(ColⅡ)、CollagenⅠ(ColⅠ)、Aggrecan和印度豪猪蛋白(Ihh)的表达。结果:颞下颌关节盘中,ColⅠ和ColⅡ表达阳性,Ihh表达强阳性,Aggrecan未见明显表达;髁状突软骨中,ColⅡ表达阳性,Aggrecan表达强阳性,Ihh和ColⅠ少量表达。结论:ColⅡ、ColⅠ、Aggrecan和Ihh正常表达,在颞下颌关节形成与发育过程中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 颞下颌关节 软骨基质 免疫组织化学技术 印度豪猪蛋白 小鼠
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中医不同治法对骨质疏松症小鼠骨骼、骨骼肌 Ihh 含量影响的比较研究 预览 被引量:4
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作者 杨芳 孙鑫 +2 位作者 郑洪新 林庶如 王拥军 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期550-552,共3页
目的:观察不同治法对骨质疏松症小鼠骨骼、骨骼肌Ihh含量变化的影响,探讨中医防治骨质疏松症的作用机制。方法除正常组外,将OPG基因敲除小鼠随机分为5组,即模型对照组(模型组)、补肾中药组(补肾组)、健脾中药组(健脾组)、活... 目的:观察不同治法对骨质疏松症小鼠骨骼、骨骼肌Ihh含量变化的影响,探讨中医防治骨质疏松症的作用机制。方法除正常组外,将OPG基因敲除小鼠随机分为5组,即模型对照组(模型组)、补肾中药组(补肾组)、健脾中药组(健脾组)、活血化瘀中药组(活血组)和对照药组(福善美组)。采用酶联免疫法测定小鼠骨骼、骨骼肌Ihh含量变化。结果①与正常组比较,模型组小鼠骨骼肌的Ihh含量显著降低( P<0.01);与模型组比较,补肾组小鼠骨骼肌的Ihh含量明显升高( P<0.05),其次为健脾组(P<0.05)。②与正常组比较,模型组小鼠骨骼的Ihh含量显著降低(P<0.01);与模型组比较,补肾组小鼠骨骼肌的Ihh含量明显升高(P<0.01),其次为健脾组(P<0.01),活血组和福善美组升高程度也比较明显(P<0.01)。结论①骨质疏松症的形成,可能与骨骼、骨骼肌Ihh含量异常变化有关。②补肾、健脾方法通过提高骨质疏松症大鼠的骨骼、骨骼肌Ihh的含量,对骨质疏松症具有一定的防治作用。 展开更多
关键词 骨质疏松症 IHH 骨骼肌
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日粮能量对动物HPG轴中Kiss-1/GPR54系统影响进展 预览
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作者 王志强 张君 《青海畜牧兽医杂志》 2015年第2期51-53,共3页
本文着重从HPG轴对生殖过程的调节、kiss-1/GPR54系统的发现及在动物体内的表达、IHH与kiss-1/GPR54系统的关系以及kiss-1/GPR54系统与日粮能量平衡等方面简要综述了近年来国内外的研究进展。
关键词 HPG轴 kiss-1/GPR54系统 IHH 日粮能量
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Ihh-PTHrP信号轴介导髁突软骨细胞对压力微环境改变的调控研究 预览 被引量:3
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作者 黄林剑 李辉 +4 位作者 谢千阳 张旻 黄锦梅 杨驰 蔡协艺 《口腔医学》 CAS 2014年第7期481-485,共5页
目的 探究Ihh-PTHrP负反馈信号通路与静压力下髁突软骨细胞生物学响应的关系。方法 体外分离培养4周龄健康雌性新西兰大白兔髁突软骨细胞,100 kPa静压力条件下,分别对P2代髁突软骨细胞进行0、1、2、3、4 h的加压处理;采用Western印迹的... 目的 探究Ihh-PTHrP负反馈信号通路与静压力下髁突软骨细胞生物学响应的关系。方法 体外分离培养4周龄健康雌性新西兰大白兔髁突软骨细胞,100 kPa静压力条件下,分别对P2代髁突软骨细胞进行0、1、2、3、4 h的加压处理;采用Western印迹的方法比较分析髁突软骨细胞COL2A1、Ihh和PTHrP的蛋白表达变化;通过RT-qPCR检测分析静压力对Ihh和PTHrP基因水平表达的影响;选取0 h和3 h组,使用扫描电子显微镜扫描分析静压力对髁突软骨细胞形态的影响;采用SPSS19.0软件包对数据进行统计学分析。结果 Western印迹实验发现:压力加载3 h后,COL2A1出现明显高表达;Ihh蛋白表达在0-2 h内逐渐升高,在2-4 h内却逐渐降低;PTHrP在0-2 h内蛋白表达逐渐升高,并在2-4 h内维持着一个较高水平的表达。RT-qPCR检测发现Ihh在压力加载1 h时出现明显高表达,而PTHrP则在2 h时出现明显高表达。100 kPa静压力加载3 h后,髁突软骨细胞突起增多、变长。结论 兔髁突软骨细胞对压力微环境的改变具有一定的适应能力;适宜的静压力可以提高髁突软骨细胞的成软骨能力;Ihh-PTHrP负反馈信号通路参与髁突软骨细胞对压力微环境改变的适应性改建过程。 展开更多
关键词 颞下颌关节 髁突 软骨细胞 静压力 IHH PTHRP
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婴儿型肝脏血管内皮瘤CT分型及相关影像学表现 被引量:1
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作者 吴梦楠 彭振鹏 +4 位作者 胡晓书 董帜 罗宴吉 冯仕庭 杨旭峰 《CT理论与应用研究》 2014年第4期663-668,共6页
目的:总结婴儿型肝脏血管内皮瘤(IHH)CT表现,以期提高对该病的诊断水平。方法:收集9例经过手术病理证实和2例穿刺活检证实IHH的CT资料,所有的患者均行CT平扫及动脉期、门脉期双期增强扫描,6例加做延时扫描,对其进行分析,比较各型的C... 目的:总结婴儿型肝脏血管内皮瘤(IHH)CT表现,以期提高对该病的诊断水平。方法:收集9例经过手术病理证实和2例穿刺活检证实IHH的CT资料,所有的患者均行CT平扫及动脉期、门脉期双期增强扫描,6例加做延时扫描,对其进行分析,比较各型的CT表现。结果:11例IHH,肿块型6例,直径在5~10cm之间;结节型3例,直径〈5cm;弥漫型2例。平扫各型肿瘤均呈类圆形低密度,肿块型密度不均匀,均见钙化,4例中央区见液化坏死区,1例中央区见出血灶;结节型密度不均匀,1例见钙化;弥漫型密度均匀。肿块型均有分叶,结节型、弥漫型无分叶。增强扫描动脉期:肿块型5例边缘呈花瓣样强化,1例呈结节样强化;结节型3例边缘呈花瓣样强化;弥漫型1例边缘呈花瓣样强化,1例呈环形强化;3例肿块型及1例结节型出现自边缘向中心呈粗条状强化影,强化程度与同层腹主动脉相近;门脉期、延迟期全部肿瘤持续向心性强化,4例肿块型中央坏死区未见强化;结节型、弥漫型全部为全瘤强化。结论:IHH总体表现为向心性强化及延迟强化,但各型的CT分型表现有一定差异。 展开更多
关键词 肝脏 婴儿型血管内皮瘤 分型 体层摄影术 X线计算机
渐进性咬合紊乱大鼠的髁突软骨中Ihh、Smo及Ptch1表达变化 预览 被引量:4
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作者 张杰 刘建林 +2 位作者 匡斌 王庆昱 邵金陵 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2014年第3期14-17,共4页
目的 探讨Indian Hedgehog(Ihh)及其受体Smoothened (Smo)和Patched1 (Ptch1)在渐进性咬合紊乱的大鼠髁突软骨-骨改建中的表达变化情况.方法 选用24只8周龄雌性SD大鼠,实验组施以渐进性咬合紊乱,分别于20和24周后取材,苏木精-伊... 目的 探讨Indian Hedgehog(Ihh)及其受体Smoothened (Smo)和Patched1 (Ptch1)在渐进性咬合紊乱的大鼠髁突软骨-骨改建中的表达变化情况.方法 选用24只8周龄雌性SD大鼠,实验组施以渐进性咬合紊乱,分别于20和24周后取材,苏木精-伊红染色观察组织形态变化,免疫组化及实时定量PCR方法检测Ihh、Smo和Ptch1的表达情况.结果 髁突软骨后部20周实验组明显增厚(F=4.39,P=0.003),但24周组有所缓解.免疫组化检测24周实验组Ihh的表达水平高于对照组(F=3.78,P=0.02),而20周实验组Smo的表达水平高于对照组(F=5.16,P=0.04).实时定量PCR结果显示,20周实验组Ihh (F=7.80,P=0.012)和Smo(F=15.67,P=0.003)的mRNA水平均高于对照组;24周实验组Ihh的mRNA水平表达水平显著高于对照组(F=13.34,P=0.013),Ptch1的表达差异无统计学意义(F=1.34,P=2.13).结论 渐进性咬合紊乱促进了大鼠髁突软骨中Ihh及其受体Smo的高表达. 展开更多
关键词 IHH SMO Ptch1 软骨 颞下颌关节 咬合
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Ihh-PTHrP信号轴调控髁突软骨内成骨相关机制的研究进展 预览 被引量:5
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作者 黄林剑 蔡协艺 《口腔医学》 CAS 2014年第1期62-64,共3页
Ihh-PTHrP信号轴调控软骨内成骨过程。近年来,国内外学者对Ihh-PTHrP信号通路的调控机制给予了广泛的关注,相关的调控机制屡见报道,对髁突软骨内成骨机制研究的需求日趋迫切。国内外许多文献报道了相关因子在Ihh-PTHrP信号轴中的重... Ihh-PTHrP信号轴调控软骨内成骨过程。近年来,国内外学者对Ihh-PTHrP信号通路的调控机制给予了广泛的关注,相关的调控机制屡见报道,对髁突软骨内成骨机制研究的需求日趋迫切。国内外许多文献报道了相关因子在Ihh-PTHrP信号轴中的重要角色,发现了一些具有指导意义的成果。通过对近几年国内外相关文献的总结归纳,对该信号轴调控髁突软骨内成骨的相关机制研究做一综述。 展开更多
关键词 IHH PTHRP 髁突 软骨内成骨
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机械应力相关基因在骨关节炎软骨下骨的表达 预览 被引量:5
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作者 方航 张荣凯 +2 位作者 陈郁鲜 宋炎成 蔡道章 《中国组织工程研究》 CSCD 2013年第22期4084-4090,共7页
背景:机械应力改变是骨关节炎发生发展的关键因素。目的:观察机械应力相关基因在关节不稳所致的骨关节炎大鼠模型中软骨下骨的表达情况,为阐述机械应力因素在骨关节炎发病中的重要作用提供依据。方法:将SD大鼠分为实验组和对照组,... 背景:机械应力改变是骨关节炎发生发展的关键因素。目的:观察机械应力相关基因在关节不稳所致的骨关节炎大鼠模型中软骨下骨的表达情况,为阐述机械应力因素在骨关节炎发病中的重要作用提供依据。方法:将SD大鼠分为实验组和对照组,每组30只。实验组行右膝内侧半月板及内侧副韧带切除术,对照组仅切开关节囊。分别于术后1,2,4周取右膝关节标本,提取软骨下骨的RNA,并采用全基因表达谱芯片技术研究软骨下骨全基因表达,根据现有文献报道,探索机械应力相关基因在该大鼠模型软骨下骨中的表达情况,并通过qRT—PCR对结果进行验证。结果与结论:发现3个重要的与机械应力相关的差异表达基因:Postn,Ihh,Bmp5,并由qRT—PCR得到验证:实验组中,Postn在术后第1周显著高表达,与对照组比较差异有显著性意义(P〈0.05),术后第2周也出现高表达的趋势,但与对照组比较差异无显著性意义(P〉0.05)。Bmp5也在术后第1周显著高表达,与对照组比较差异有显著性意义(P〈0.05),第2周及第4周也有高表达的趋势,但与对照组比较差异无显著性意义(P〉0.05)。lhh在术后第1周及第2周同时出现高表达,与对照组比较差异有显著性意义(P〈0.05)。结果可见机械应力因素是骨关节炎发病的重要因素,深入研究与其相关的基因或其通路,可能为揭示骨关节炎发病机制提供更多的依据,从而发现早期诊断及早期治疗的靶点。 展开更多
关键词 骨关节植入物 骨与关节生物力学 骨关节炎 软骨下骨 机械应力 Postn Bmp5 IHH 大鼠骨关 节炎模型 关节不稳 基因芯片 全基因组 863项目
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IHH基因多点突变病毒载体构建及表达
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作者 刘燕芳 陶一昕 +1 位作者 贺林 马钢 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期13-18,共6页
目的:构建携带IHHwT和E95K、E95G、/XE95、D100E突变体的RCAS病毒载体,并验证其有效性;优化RCAS病毒收集方法。方法:PCR扩增得到人IHH基因,采用原位杂交和半定量PCR的方法来验证上述载体能否过表达IHHmRNA;采用细胞裂解法收集RCA... 目的:构建携带IHHwT和E95K、E95G、/XE95、D100E突变体的RCAS病毒载体,并验证其有效性;优化RCAS病毒收集方法。方法:PCR扩增得到人IHH基因,采用原位杂交和半定量PCR的方法来验证上述载体能否过表达IHHmRNA;采用细胞裂解法收集RCAS—GFP病毒,通过鸡胚注射、冰冻切片观察的方法了解鸡胚感染情况。结果:构建的上述RCAS病毒载体在鸡胚细胞成功表达;优化了RCAS病毒收集方法,使最终滴度达10^8IU/ml。结论:该研究为在鸡胚肢芽中过表达不同IHH突变体蛋白打好了基础。 展开更多
关键词 A1型短指(趾)症 IHH基因 点突变 RCAS 鸡胚 病毒收集
PTHrP-Ihh信号轴对软骨内成骨的调控作用 被引量:3
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作者 马荣生 周振雷 侯加法 《畜牧与兽医》 北大核心 2013年第7期96-99,共4页
长骨的生长主要经过软骨内成骨和膜内成骨。软骨内成骨即长骨干骺端生长板的发育过程,生长板软骨细胞从静止期到增殖期再到肥大期及钙化期的排列、增殖、分化、矿化、血管化等一系列过程调节着长骨的生长。生长板软骨细胞的分化和成熟... 长骨的生长主要经过软骨内成骨和膜内成骨。软骨内成骨即长骨干骺端生长板的发育过程,生长板软骨细胞从静止期到增殖期再到肥大期及钙化期的排列、增殖、分化、矿化、血管化等一系列过程调节着长骨的生长。生长板软骨细胞的分化和成熟的过程受全身或者局部多种激素,细胞因子的调控。其中印第安刺猬蛋白(Indian hedgehog,Ihh)与甲状旁腺激素相关肽(Parathyroid hormone-related peptide,PTHrP)所形成的信号系统在骨骼生长板中软骨细胞的增殖、分化、肥大、凋亡及软骨基质钙化过程中,具有重要的调控作用。 展开更多
关键词 甲状旁腺激素相关肽 PTHRP IHH 软骨内成骨
反转录病毒载体介导Indian hedgehog信号蛋白在C3H10T1/2细胞中的表达及成骨诱导潜能 预览 被引量:3
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作者 邹沙沙 陈婷婷 +4 位作者 张玲玲 田汝辉 杨施 李铮 胡洪亮 《中国组织工程研究》 CSCD 2012年第24期 4381-4386,共6页
背景:目前大量研究证实Indian hedgehog(Ihh)信号通路在骨发育中发挥着重要的调控作用.目的:克隆Ihh重组反转录病毒载体,观察Ihh在C3H10T1/2细胞中的表达及其成骨诱导效果.方法:采用分子克隆技术将Ihh基因与增强型绿色荧光蛋白基... 背景:目前大量研究证实Indian hedgehog(Ihh)信号通路在骨发育中发挥着重要的调控作用.目的:克隆Ihh重组反转录病毒载体,观察Ihh在C3H10T1/2细胞中的表达及其成骨诱导效果.方法:采用分子克隆技术将Ihh基因与增强型绿色荧光蛋白基因克隆到反转录病毒载体pSFG上,包装出假病毒转染C3H10T1/2细胞,在共聚焦显微镜下观察其绿色荧光蛋白强度及转染效率.运用Western blot方法检测Ihh蛋白的表达,观察C3H10T1/2细胞形态学变化,碱性磷酸酶染色检测成骨活性.结果与结论:共聚焦显微镜下观察到大量的绿色荧光表达,Western blot检测结果显示Ihh基因及增强型绿色荧光蛋白基因在C3H10T1/2中呈显著共表达.在体外培养过程中,Ihh能诱导C3H10T1/2细胞形态学发生改变,增加碱性磷酸酶活性,提示Ihh具有诱导C3H10T1/2细胞向骨细胞分化的潜能. 展开更多
关键词 骨发育 IHH 反转录病毒 C3H10T1/2 成骨
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血管内皮生长因子调节成骨细胞中Ihh和p38 MAPK的表达 预览 被引量:4
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作者 赵恒伍 张锦程 李长有 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期113-116,共4页
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对大鼠成骨细胞Ihh和p38 MAPK的调节作用。方法取胎鼠颅盖骨分离培养成骨细胞,采用实时PCR检测成骨细胞中Ihh及其受体Ptch1和p38 MAPK的表达,检测成骨细胞在不同浓度(0,2,20 ng/ml)及不同时间(0,12,... 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对大鼠成骨细胞Ihh和p38 MAPK的调节作用。方法取胎鼠颅盖骨分离培养成骨细胞,采用实时PCR检测成骨细胞中Ihh及其受体Ptch1和p38 MAPK的表达,检测成骨细胞在不同浓度(0,2,20 ng/ml)及不同时间(0,12,24 h)的VEGF作用下Ihh和p38 MAPK的表达情况。结果成骨细胞表达Ihh及其受体Ptch1,同时表达p38 MAPK。随着VEGF浓度的增加I,hh和p38 MAPK的表达量均明显增加;随着VEGF作用时间的增加I,hh和p38 MAPK的表达量与对照组相比有明显的增长趋势。结论 Ihh与其受体Ptch1在成骨细胞中共表达I,hh以自分泌方式调节成骨细胞功能;VEGF上调成骨细胞中Ihh和p38 MAPK的表达,并且VEGF可能通过调节p38 MAPK的表达而影响Ihh的表达,可能存在VEGF-p38 MAPK-Ihh通路。 展开更多
关键词 成骨细胞 大鼠 IHH 血管内皮生长因子
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卵巢和卵巢肿瘤中Hedgehog信号通路的表达 预览 被引量:4
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作者 杨永彬 刘玲 +2 位作者 王炎秋 杨懿霞 万小平 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期 426-430,共5页
目的探讨正常卵巢和卵巢肿瘤中Hedgehog信号通路的表达。方法采用RT—PCR和免疫组织、细胞化学染色检测26例卵巢肿瘤组织、3例卵巢癌细胞株(SKOV3、A2780和COC1)和7例正常卵巢组织中Hedgehog信号通路的信号分子SHH、IHH、PTCH、SMO和G... 目的探讨正常卵巢和卵巢肿瘤中Hedgehog信号通路的表达。方法采用RT—PCR和免疫组织、细胞化学染色检测26例卵巢肿瘤组织、3例卵巢癌细胞株(SKOV3、A2780和COC1)和7例正常卵巢组织中Hedgehog信号通路的信号分子SHH、IHH、PTCH、SMO和GLI1的mRNA和蛋白表达情况;通过实时定量RT—PCR对随机抽取的11例卵巢肿瘤组织和5例正常卵巢组织进行PTCH和GLI1 mRNA水平的比较。结果SHH、IHH、PTCH、SMO和GLI1的mRNA在卵巢肿瘤组织中均有表达;SHH mRNA在正常卵巢组织中不表达,而IHH、PTCH、SMO和GLI1的mRNA在正常卵巢组织中有表达;在卵巢肿瘤组织中,PTCH和GLI1的mRNA表达水平高于正常组织(P〈0.05)。SHH、IHH、PTCH、SMO和GLI1蛋白在卵巢肿瘤组织中均呈阳性表达,在正常卵巢组织中不表达。卵巢癌细胞株SKOV3、A2780和COC1均有IHH、PTCH、SMO和GLI1的mRNA和蛋白的表达;SHH仅在SKOV3和A2780中表达。结论卵巢肿瘤中存在Hedgehog信号通路,在部分卵巢肿瘤中有Hedgehog信号通路过度激活的现象。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 HEDGEHOG信号通路 SHH IHH PTCH SMO GLI1
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脉冲式注射LHRH治疗特发性低促性腺激素型性功能低下(附5例报告) 预览
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作者 罗佐杰 冼苏 +1 位作者 刘广钊 梁季鸿 《广西医科大学学报》 CAS 1993年第1期76-77,共2页
用自动注射泵脉冲式皮下注射LHRH治疗5例IHH,结果5例症状明显改善,男性征增进;睾丸体积增大。一个月左右LH、FSH及T明显升高达正常水平。2例于治后3个月出现第一次梦遗。1例10个月射出成熟精子。本文对IHH和脉冲式注射方法、效果及有... 用自动注射泵脉冲式皮下注射LHRH治疗5例IHH,结果5例症状明显改善,男性征增进;睾丸体积增大。一个月左右LH、FSH及T明显升高达正常水平。2例于治后3个月出现第一次梦遗。1例10个月射出成熟精子。本文对IHH和脉冲式注射方法、效果及有关问题进行了讨论。 展开更多
关键词 LHRH IHH FSH LH T 睾丸 脉冲式注射
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两种类型的特发性低促性腺激素性腺功能减退症 预览
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作者 李江源 田慧 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期 223-225,共3页
<正> 特发性低促性腺激素性腺功能减退症(IHH)的临床表现除性幼稚和嗅觉异常外,身体畸形可累及多系统。性幼稚的程度亦因患者而异,睾丸容积有的停留在青春期前状态(≤2ml),有的≥8ml,达到青春期Ⅱ~Ⅲ期的水平。这种差异的病理生... <正> 特发性低促性腺激素性腺功能减退症(IHH)的临床表现除性幼稚和嗅觉异常外,身体畸形可累及多系统。性幼稚的程度亦因患者而异,睾丸容积有的停留在青春期前状态(≤2ml),有的≥8ml,达到青春期Ⅱ~Ⅲ期的水平。这种差异的病理生理基础值得深入研 展开更多
关键词 IHH 性腺功能减退 男性
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脉冲式注射LHRH诱发特发性低促性腺激素型性功能... 预览 被引量:13
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作者 张桂元 贾孟春 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期 10-13,共4页
本文首次在国内用自制YED-1型自动注射泵脉冲式皮下注射LHRH(5μg/脉冲/90分)治疗4例低促性腺激素型性功能低下(IHH)。所有4例经治疗后症状明显改善,性激素水平明显提高,睾丸体积增大,其中2例达正常成年男子水平,并在治疗的第250和330... 本文首次在国内用自制YED-1型自动注射泵脉冲式皮下注射LHRH(5μg/脉冲/90分)治疗4例低促性腺激素型性功能低下(IHH)。所有4例经治疗后症状明显改善,性激素水平明显提高,睾丸体积增大,其中2例达正常成年男子水平,并在治疗的第250和330天时精液中出现成熟精子,精子计数分别为4×10~6/ml和10×10~6/ml,第3例睾丸由治前的4ml增大到8ml。2例已结婚。第4例经治疗4个月,症状及激素水平明显好转后,出现耐药现象,血清T水平又下降到治疗前的极低水平,阴茎停止勃起,推测可能与出现抗LHRH抗体有关。 展开更多
关键词 IHH 脉冲式注射 LHRH 精子发生
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