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IKCa1通道对HeLa细胞迁移、侵袭及miRNA表达谱的影响 预览
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作者 程慧 高兰阳 +1 位作者 詹平 毛熙光 《山东医药》 北大核心 2017年第41期24-27,共4页
目的探讨钙激活钾离子(IKCa1)通道对宫颈癌He La细胞迁移、侵袭及miRNA表达谱的影响。方法取生长期He La细胞,随机分为观察1-5组及DMSO组,分别给予0、10.0、20.0、30.0、40.0μmol/L TRAM-34及等体积DMSO(TRAM-34溶剂)处理24、48和7... 目的探讨钙激活钾离子(IKCa1)通道对宫颈癌He La细胞迁移、侵袭及miRNA表达谱的影响。方法取生长期He La细胞,随机分为观察1-5组及DMSO组,分别给予0、10.0、20.0、30.0、40.0μmol/L TRAM-34及等体积DMSO(TRAM-34溶剂)处理24、48和72 h,用划痕实验检测He La细胞迁移特性;用Transwell侵袭实验检测48 h细胞侵袭特性。用高通量测序法检测IKCa1通道阻断前后miRNA表达谱的差异,并用qRT-PCR法对部分差异表达miRNAs进行验证。运用miRanda软件预测差异miRNA可能调控的靶基因,并对这些靶基因进行通路富集分析。结果划痕实验,TRAM-34干预后He La细胞迁移受抑制,随着TRAM-34浓度增加及作用时间延长,抑制迁移作用越明显(P〈0.001)。Transwell侵袭实验显示,He La细胞的侵袭率随TRAM-34浓度增加呈递减趋势(F=384.050,P〈0.001)。通过高通量测序筛选出15个差异有统计学意义而表达上调的miRNA,5个表达下调的miRNA。qRT-PCR结果显示差异性miRNA的表达趋势与测序结果一致。生物信息学分析发现,hsa-miR-143-5p的靶基因在癌症相关通路、p53基因信号通路及MAPK信号通路上出现聚集;而hsa-miR-421的靶基因在肿瘤蛋白多糖、Rap1信号通路和Wnt信号通路出现聚集。结论阻断IKCa1通道可抑制He La细胞迁移和侵袭,影响miRNAs表达谱。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 HELA细胞 IKCa1通道 细胞迁移 侵袭 微小RNA
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钾通道在系统性红斑狼疮T细胞中的作用研究 预览
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作者 邱红霞 赵阴环 +3 位作者 朱桂启 赵海慧 付冰冰 刘鑫钰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期936-939,共4页
目的:研究SLE患者外周血活化T细胞中Kv1.3和IKCa1通道的表达情况,以及阻断Kv1.3通道后对SLE患者T细胞增殖的影响。方法:①病例选择:SLE患者33例,健康对照组12例;②分离外周血T细胞,采用抗CD3单克隆抗体刺激T细胞活化,培养72小时;③... 目的:研究SLE患者外周血活化T细胞中Kv1.3和IKCa1通道的表达情况,以及阻断Kv1.3通道后对SLE患者T细胞增殖的影响。方法:①病例选择:SLE患者33例,健康对照组12例;②分离外周血T细胞,采用抗CD3单克隆抗体刺激T细胞活化,培养72小时;③荧光实时定量RT-PCR检测SLE患者活化T细胞中Kv1.3和IKCa1通道的mRNA表达;④CCK-8法检测阻断Kv1.3通道对SLE患者T细胞增殖的影响;⑤应用统计软件SPSS17.0进行数据统计分析;对Kv1.3和IK-Ca1通道mRNA相对表达量与补体C3、C4、抗dsDNA抗体、SLEDAI积分及尿蛋白间进行相关性分析。结果:①SLE患者外周血T细胞活化后Kv1.3通道mRNA的表达与正常对照组相比明显增高(P〈0.0001),IKCa1通道mRNA的表达与正常对照组相比降低(P=0.006),SLE患者Kv1.3及IKCa1 mRNA表达水平均与补体C3、C4、抗dsDNA抗体、SLEDAI积分及尿蛋白无相关性。②Kvl.3通道阻断剂ShK可明显抑制SLE患者外周血T细胞的增殖(P〈0.001)。结论:Kv1.3通过是SLE患者TEM细胞活化的主要离子通道,Kv1.3通道可成为SLE免疫治疗的一个新起点。 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 Kv1.3通道 IKCa1通道 T细胞
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IKCa1通道阻滞剂TRAM-34对HUVEC增殖作用的影响 预览 被引量:2
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作者 郭洪宇 张雅芳 +3 位作者 林芳 遇春林 杨慧科 李晓冬 《解剖学研究》 CAS 2011年第6期 417-421,共5页
目的体外应用IKCa1通道阻滞剂TRAM-34干预人脐静脉内皮细胞(HUVEC),探讨其抑制HUVEC增殖作用的影响。方法采用免疫荧光和RT-PCR法观察HUVEC细胞IKCa1的表达,常规MTT法分析不同浓度TRAM-34作用24、48、72 h后HUVEC细胞增殖的变化。结... 目的体外应用IKCa1通道阻滞剂TRAM-34干预人脐静脉内皮细胞(HUVEC),探讨其抑制HUVEC增殖作用的影响。方法采用免疫荧光和RT-PCR法观察HUVEC细胞IKCa1的表达,常规MTT法分析不同浓度TRAM-34作用24、48、72 h后HUVEC细胞增殖的变化。结果免疫荧光和RT-PCR法均证实HUVEC细胞表达IKCa1。TRAM-34浓度低于10μmol/L时作用不明显,而高于10μmol/L时能明显抑制HUVEC增殖,并随药物浓度升高而抑制作用增强,呈显著浓度依赖性。TRAM-34抑制作用呈时间依赖性,处理细胞72 h作用明显强于48 h,而24 h无明显变化。结论 HUVEC细胞表达IKCa1。TRAM-34能显著抑制HUVEC细胞增殖,其抑制作用呈浓度和时间依赖性。 展开更多
关键词 IKCa1通道 TRAM-34 人脐静脉内皮细胞
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