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创伤性脑损伤模型研究进展 预览
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作者 赵清辉 琚芳迪 +6 位作者 苏泽华 罗秋丽 仪杨 张晓康 张鑫 谢飞 马雪梅 《生物技术进展》 2019年第1期6-12,共7页
创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)不仅发病率和死亡率较高,而且也会导致其幸存者的认知活动和感觉运动功能产生不同程度的障碍。建立合理的TBI模型有助于理解TBI病理生理机制并探索其治疗方案。许多创伤性脑损伤动物模型(属体... 创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)不仅发病率和死亡率较高,而且也会导致其幸存者的认知活动和感觉运动功能产生不同程度的障碍。建立合理的TBI模型有助于理解TBI病理生理机制并探索其治疗方案。许多创伤性脑损伤动物模型(属体内模型,in vivo TBI model)已被用来复制人类各种创伤性脑损伤,遗憾的是,在动物实验中具有神经保护作用的治疗方案在临床研究中大多无效。由于体外培养的细胞未掺杂体内复杂的影响因素,各种创伤性脑损伤体外模型(in vitro TBI model)被逐步建立起来。根据致伤方式的不同,可将常用的体内动物模型和体外细胞模型分为机械作用力损伤模型、压力损伤模型、爆炸伤模型、反复性轻度损伤模型。对上述常用TBI模型的特点进行了综述和比较分析,以期为寻找在临床上具有神经保护效果的策略提供帮助。 展开更多
关键词 创伤性脑损伤 体内模型 体外模型 动物模型 细胞模型
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单细胞转录组测序分析人类胚胎发育阻滞的潜在机制
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作者 许常龙 李春苑 +3 位作者 杨华 吕波 薛志刚 丘映 《同济大学学报:医学版》 CAS 2019年第1期28-33,共6页
目的探讨胚胎发育阻滞的分子机制,为提高辅助生殖成功率提供新思路。方法单细胞转录组测序技术研究发育阻滞胚胎(包括体外受精和胞质内单精子注射过程)及对照组的转录组情况,利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)等生物信息学手段分析与... 目的探讨胚胎发育阻滞的分子机制,为提高辅助生殖成功率提供新思路。方法单细胞转录组测序技术研究发育阻滞胚胎(包括体外受精和胞质内单精子注射过程)及对照组的转录组情况,利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)等生物信息学手段分析与胚胎阻滞相关的信号通路和关键基因。结果阻滞胚胎中与细胞分裂、细胞周期等相关的信号通路表达异常。与ICSI组相比,IVF组阻滞胚胎的细胞骨架、氧化磷酸化等通路表达异常。结论通过单细胞转录组测序技术分析阻滞胚胎转录组的结果说明细胞分裂、周期、代谢等通路可能影响胚胎正常发育,ICSI过程影响了线粒体功能、结构的变化。 展开更多
关键词 体外受精 胚胎发育阻滞 单细胞转录组
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基于荧光法纸基器件在体外疾病检测中的应用进展
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作者 吴美容 赖琼宇 +5 位作者 周佳 倪赟 吴琼 张承武 于海东 李林 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期48-55,共8页
在发展中国家的贫困地区,由于缺乏医疗设备,很多疾病的诊断只能依靠医疗工作者根据病人的症状进行估诊,往往延误了治疗。每年仍有多达五亿的疟疾患者由于未显示出病症而没能在感染早期被诊断出来,导致更多人被传染。因此,这些地区的居... 在发展中国家的贫困地区,由于缺乏医疗设备,很多疾病的诊断只能依靠医疗工作者根据病人的症状进行估诊,往往延误了治疗。每年仍有多达五亿的疟疾患者由于未显示出病症而没能在感染早期被诊断出来,导致更多人被传染。因此,这些地区的居民亟需操作简单、廉价实用、可随身携带、无需辅助器材(如电、泵、光学器件等)的纸基器件检测常见疾病。纸基器件常用的检测方法有比色法、荧光法、化学发光法、电化学法、电化学发光法等。不同的检测方法可实现疾病的早期诊断以及食品质量检测和环境监测。因此,纸基器件的高检测速率、高选择性、高灵敏性,以及相对较低的成本和无污染优势,使其受到体外检测及相关应用检测的青睐。然而,纸基器件检测仍存在一些问题,尚待突破。例如,如何提高纸基器件检测的多样性、稳定性、重复性以及检测设备的便携性等。在不同的检测方法中比色法是最直观、最常用的一种方法,该方法通过显色反应,利用肉眼观察进行半定量分析,但通常会因为检测者的视觉感官不同而产生误差。该方法的局限性在于易受光线的影响,灵敏度和选择性不及电化学法。荧光法的选择性好、检出限低,但是在检测器件的便携性上还有很大的发展空间。化学发光法、电化学法以及电化学发光法在检测灵敏性、选择性上有一定的优势,但是限于电极易污染以及背景信燥比高等原因不能得到广泛应用。因此,近年来,除了对纸基器件的材料性质和器件性能有所研究外,研究者在高通量快速检测多种疾病检测应用中也取得了较好的成果。本文归纳了建立在荧光纸基器件方法上的发展应用,分别对荧光材料包括有机染料、量子点、金属纳米簇、上转换纳米颗粒、碳点等进行介绍,举例说明其在体外检测中的应用。例如,核酸检测、蛋白� 展开更多
关键词 体外诊断 纸基器件 荧光法 即时诊断 核酸检测 细胞检测
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大鼠胚胎睾丸组织体外培养方法的建立
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作者 张同殿 张连栋 +4 位作者 许丽丽 李和程 马玉波 吴治中 王子明 《中华男科学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期967-973,共7页
目的:建立大鼠胚胎睾丸组织体外培养方法。方法:取SPF级性成熟(体重200~250 g) SD雄性大鼠3只、雌性6只,根据阴道涂片判断雌鼠所属的发情时期,在其发情期及发情前期按照1∶2合笼,发现精子则记为怀孕0. 5 d(0. 5 dpc)。解剖显微... 目的:建立大鼠胚胎睾丸组织体外培养方法。方法:取SPF级性成熟(体重200~250 g) SD雄性大鼠3只、雌性6只,根据阴道涂片判断雌鼠所属的发情时期,在其发情期及发情前期按照1∶2合笼,发现精子则记为怀孕0. 5 d(0. 5 dpc)。解剖显微镜下分离出15. 5 dpc胚胎睾丸,一式2份,1份直接进行HE染色,另1份置于软琼脂糖培养系统,37℃、5%CO_2进行培养,分为对照组和hC G组。培养当天为d0,倒置显微镜记录培养睾丸生长情况,每天更换并收集d1、d2、d3、d4培养液及d4的睾丸组织。检测培养液睾酮浓度,培养结束后睾丸固定脱水包埋进行组织学研究。结果:应用阴道涂片方法可高效获得15. 5 dpc大鼠,HE染色提示能准确分离出15. 5 dpc胚胎睾丸。倒置显微镜下可见培养睾丸发育良好,体积逐渐增大,生精小管逐渐增粗、迂曲、清晰。培养液中可检测到睾酮,且睾酮浓度逐渐增高,d3时达到峰值; hC G可刺激睾酮分泌。HE染色可见培养后睾丸组织结构完整,无中央坏死现象发生,组织内有典型的生精小管,可见生殖母细胞、支持细胞及间质细胞;透射电镜下可见生精小管管腔中的生殖母细胞、支持细胞以及管腔外的间质细胞,细胞内的线粒体、内质网等细胞器,未见明显肿胀。结论:大鼠胚胎睾丸组织可在软琼脂糖培养系统中生长良好、保持活性,并向培养液中分泌睾酮。 展开更多
关键词 胚胎睾丸 体外培养 软琼脂糖培养系统 生殖细胞 大鼠
柑橘黄烷酮对β-胡萝卜素胶束化的影响 预览
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作者 聂梅梅 张钟元 +3 位作者 刘春泉 李大婧 王晓燕 黄午阳 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2018年第23期31-36,共6页
采用体外消化法结合细胞吸收模型,以胶束化率为指标,研究了4种柑橘黄烷酮对β-胡萝卜素胶束化的影响。结果表明,β-胡萝卜素的胶束化率随胆盐浓度升高而增加,当胆盐浓度为15 mmol/L时,添加卵磷脂能显著增加β-胡萝卜素胶束化率(p <0.... 采用体外消化法结合细胞吸收模型,以胶束化率为指标,研究了4种柑橘黄烷酮对β-胡萝卜素胶束化的影响。结果表明,β-胡萝卜素的胶束化率随胆盐浓度升高而增加,当胆盐浓度为15 mmol/L时,添加卵磷脂能显著增加β-胡萝卜素胶束化率(p <0.05)。橙皮苷对β-胡萝卜素胶束化的促进作用显著(p <0.05),橙皮素、柚皮素次之,柚皮苷作用不显著(p> 0.05)。4种柑橘黄烷酮增加了β-胡萝卜素胶束极性,降低了胶束颗粒粒径,提高了胶束稳定性。在调控β-胡萝卜素的生物可利用率和细胞吸收方面,橙皮苷显著提高β-胡萝卜素的生物可利用率(p <0.05),橙皮苷、橙皮素、柚皮素均显著促进β-胡萝卜素的细胞吸收(p <0.05),而柚皮苷对β-胡萝卜素的细胞吸收促进作用不显著(p> 0.05)。由此可见,类黄酮的加入会提高β-胡萝卜素的生物利用率。 展开更多
关键词 柑橘黄烷酮 Β-胡萝卜素 胶束化 体外消化 CACO-2细胞 生物利用率
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体外模型的发展及其在鲸豚研究中的应用
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作者 于学颖 杨峰 +4 位作者 朱静敏 明瑶 李鼎 刘文华 王京真 《兽类学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期597-607,共11页
体外补充替代模型“细胞系”为生命科学研究提供了新的平台,在一定程度上突破了科学研究中伦理、法律、动物福利和动物保护等的限制,从细胞和分子视角更深层次地揭示复杂生命体的生物效应和调控机制。尤其对于濒危动物,细胞系的建立... 体外补充替代模型“细胞系”为生命科学研究提供了新的平台,在一定程度上突破了科学研究中伦理、法律、动物福利和动物保护等的限制,从细胞和分子视角更深层次地揭示复杂生命体的生物效应和调控机制。尤其对于濒危动物,细胞系的建立与超低温冷冻技术相结合,既可以保存濒危动物具有生物表达活性的遗传种质,又可以提供体外保育研究的新平台(如动物毒理学实验),对动物保护意义重大。目前细胞培养体系已作为多功能平台被应用于鲸豚类细胞遗传学、病毒学和毒理学的相关研究中,但从物种和组织来源以及细胞类型来看,能长期稳定传代的鲸豚类细胞系仍较单一。优化细胞培养条件,运用鲸豚类体外细胞揭示更多的生命机制问题,仍是当前鲸豚类体外细胞模型研究所面临的挑战。本文对动物体外模型及其在鲸豚研究中的应用进行了概述,以期推动该技术在鲸豚保育研究中的创新和发展。 展开更多
关键词 鲸豚类 体外模型 细胞系 毒理学
异补骨脂素纳米结构脂质载体的体外溶出及其抗白癜风活性研究 被引量:1
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作者 庞建云 沈成英 +5 位作者 周敏 申宝德 刘肖 刘娟 许润春 袁海龙 《中草药》 CSCD 北大核心 2018年第8期1796-1801,共6页
目的评价异补骨脂素纳米结构脂质载体(IPRN-NLC)的体外溶出行为,并考察其对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖、黑色素合成及酪氨酸酶活性的影响。方法采用透析袋法测定IPRN-NLC在72 h内的累积溶出量并绘制溶出曲线,MTT法测定B16F10细胞增... 目的评价异补骨脂素纳米结构脂质载体(IPRN-NLC)的体外溶出行为,并考察其对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖、黑色素合成及酪氨酸酶活性的影响。方法采用透析袋法测定IPRN-NLC在72 h内的累积溶出量并绘制溶出曲线,MTT法测定B16F10细胞增殖情况,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,GENMED细胞黑色素含量比色法测定黑色素合成。结果在72 h时体外累积溶出量IPRN-NLC为67.31%,IPRN-物理混合物为90.30%,IPRN-DMSO为98.67%,IPRN-混悬液为53.34%。IPRN在一定质量浓度范围内可以促进B16F10细胞增殖,提高酪氨酸酶活性,增加黑色素的合成,且同质量浓度的IPRN-NLC对B16F10的作用显著高于IPRN溶液(P〈0.05)。结论 IPRN-NLC不仅具有缓释作用,还可以增加药物的溶解度;在一定质量浓度范围内与细胞具有较好的生物相容性,能显著提高细胞酪氨酸酶活性,促进黑色素合成。 展开更多
关键词 异补骨脂素 纳米结构脂质载体 体外释放 黑色素瘤B16F10细胞 白癜风 酪氨酸酶 细胞增殖 黑色素 MTT法 多巴氧化法
体内外染色体畸变实验检测朱砂的遗传毒性
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作者 赵源 吴文斌 +4 位作者 米金霞 张超超 樊海艇 顾祖曦 汤家铭 《中国实验方剂学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第22期143-147,共5页
目的:用仓鼠的骨髓细胞与CHL细胞经行体内外染色体畸变实验评价朱砂的遗传毒性。方法:体内染色体畸变实验用毛足属仓鼠给予朱砂混悬液(2.0,4.0,8.0 g·kg-1)连续灌胃5 d,处死前2 h腹腔注射秋水仙素。处死后取骨髓细胞制备染色... 目的:用仓鼠的骨髓细胞与CHL细胞经行体内外染色体畸变实验评价朱砂的遗传毒性。方法:体内染色体畸变实验用毛足属仓鼠给予朱砂混悬液(2.0,4.0,8.0 g·kg-1)连续灌胃5 d,处死前2 h腹腔注射秋水仙素。处死后取骨髓细胞制备染色体。油镜下观察每只动物骨髓细胞的有丝分裂指数和100个中期分裂相细胞的畸变类型。CHL细胞染色体畸变实验用朱砂浸出液终质量浓度为6.3,12.5,25.0 g·L-1作用于CHL细胞,培养24,48 h,终止培养前4 h加入秋水仙素。收获细胞,制备染色体,油镜下观察CHL细胞的200个中期分裂相细胞的畸变类型。结果:(1)与空白组比较,朱砂浸出液12.5,25.0 g·L-1给药组的CHL细胞染色体畸变率均升高(P〈0.05,P〈0.01),且有明显的量效关系。(2)仓鼠体内实验与朱砂血清给药CHL细胞的畸变率无显著性差异。结论:(1)在本实验中朱砂浸出液在12.5 g·L-1以上时能致体外CHL细胞染色体畸变,而朱砂混悬液在8.0 g·kg-1下仓鼠体内染色体畸变实验未出现阳性结果。(2)仓鼠体内染色体畸变实验可作为研究中药新药遗传毒性评价实验方法之一。 展开更多
关键词 遗传毒性 染色体畸变 朱砂 体内实验 体外实验 毛足属仓鼠 CHL细胞
体外受精与体外培养对小鼠囊胚发育潜能的影响
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作者 郭翔宇 陈书强 李博 《生殖医学杂志》 CAS 2018年第2期171-177,共7页
目的 评估体外受精和体外培养对囊胚期胚胎细胞数及发育潜能的影响。方法 (1)雌性ICR小鼠,自然交配获取囊胚为In vivo组,体内受精-体外培养获取囊胚为IVC组,体外受精获取囊胚为IVF组;(2)对三组囊胚行免疫杀伤法检测并在荧光显微镜... 目的 评估体外受精和体外培养对囊胚期胚胎细胞数及发育潜能的影响。方法 (1)雌性ICR小鼠,自然交配获取囊胚为In vivo组,体内受精-体外培养获取囊胚为IVC组,体外受精获取囊胚为IVF组;(2)对三组囊胚行免疫杀伤法检测并在荧光显微镜下计数总细胞数、内细胞团细胞数、内细胞团与总细胞数的比值;(3)提取三组小鼠囊胚mRNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测Pou5f1等细胞因子的mRNA表达水平;(4)三组囊胚移植入D3.5假孕鼠,取D10.5胚胎进行形态学检测,计算胚胎植入率、成活率、流产率。结果 (1)IVF组和IVC组囊胚与In vivo组相比,细胞总数、滋养外胚层(TE)细胞数、内细胞团(ICM)细胞数均显著降低(P〈0.01),TE/ICM细胞数的比值三组之间无显著差异(P〉0.05);(2)IVF组和IVC组囊胚与In vivo组相比,多潜能基因OCT4、Nanog、Sox2表达水平相对上调,而早期细胞命运分化相关基因Fgf4、Gata4、Sox17、Eomes、Elf5、Lif表达水平下调,差异有统计学意义(P〈0.05);(3)三组间胚胎植入率无显著性差异(P〉0.05),而IVC组、IVF组活产率显著低于In vivo组,流产率显著高于In vivo组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 体外受精会导致囊胚质量下降,并影响胚胎植入后的进一步发育,导致胚胎成活率降低。 展开更多
关键词 体外受精 囊胚 滋养外胚层 内细胞团 植入率 SOX2
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注射用磷酸川芎嗪及注射用盐酸川芎嗪体外细胞毒性研究
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作者 李海剑 张婷婷 《医药论坛杂志》 2018年第8期61-64,共4页
目的采用L929细胞体外培养方法研究国家评价性抽验品种注射用磷酸川芎嗪和注射用盐酸川芎嗪及其中的杂质、原料、辅料的细胞毒性。方法选取L929细胞,将注射用磷酸川芎嗪和注射用盐酸川芎嗪及其杂质、原料、辅料,分别与L929细胞孵育48 h... 目的采用L929细胞体外培养方法研究国家评价性抽验品种注射用磷酸川芎嗪和注射用盐酸川芎嗪及其中的杂质、原料、辅料的细胞毒性。方法选取L929细胞,将注射用磷酸川芎嗪和注射用盐酸川芎嗪及其杂质、原料、辅料,分别与L929细胞孵育48 h,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT Assay)测得各各样品的细胞存活率。结果乳糖和1.3.5-三甲基吡嗪对L929细胞无明显毒性;盐酸川芎嗪原料的细胞毒性低于磷酸川芎嗪原料;注射用盐酸川芎嗪的细胞毒性低于注射用磷酸川芎嗪。结论细胞毒性试验方法结果表明该方法具有较高的可靠性和灵敏度,可用该方法对川芎嗪注射剂进行安全性评价。 展开更多
关键词 注射用磷酸川芎嗪 注射用盐酸川芎嗪 体外细胞毒性 L929细胞
反义抑制miRNA-155对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、凋亡及侵袭力的影响 预览
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作者 时磊 魏明 《天津医药》 CAS 2017年第9期902-906,共5页
目的 观察转染反义微小核糖核酸(miRNA)-155对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭力的影响.方法 采用脂质体介导对皮肤鳞状细胞癌A431细胞转染miRNA-155无义序列(阴性对照组)、转染反义miRNA-155(转染组),空白对照... 目的 观察转染反义微小核糖核酸(miRNA)-155对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭力的影响.方法 采用脂质体介导对皮肤鳞状细胞癌A431细胞转染miRNA-155无义序列(阴性对照组)、转染反义miRNA-155(转染组),空白对照组细胞不作处理.实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测转染后A431细胞miRNA-155的相对表达水平;采用四甲基偶氨唑盐(MTT)检测转染后皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖活性;采用流式细胞术(FCM)检测转染后皮肤鳞状细胞癌A431细胞周期改变和凋亡变化;采用Transwell法检测侵袭力与细胞迁移能力.结果 转染组A431细胞中miRNA-155 mRNA的相对表达水平低于空白对照组和阴性对照组(F=634.57,P〈0.01),但空白对照组和阴性对照组比较差异无统计学意义.转染72 h后,转染组较空白对照组和阴性对照组细胞存活率明显降低,转染120 h降低最为明显(P〈0.05).转染组G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,整体细胞增殖指数降低,A431细胞凋亡率、细胞迁移和侵袭力升高(P〈0.05),但各组G2/M期细胞周期变化、后2组A431细胞凋亡率、细胞迁移和侵袭力差异无统计学意义.结论 皮肤鳞状细胞癌A431细胞转染反义miRNA-155可减少miRNA-155的表达,有效抑制A431细胞增殖,促进其凋亡.miRNA-155可能成为治疗皮肤鳞状细胞癌基因表达调控的新靶点. 展开更多
关键词 肿瘤 鳞状细胞 皮肤肿瘤 细胞系 肿瘤 体外研究 细胞增殖 细胞凋亡 微小核糖核酸-155 反义寡核糖核酸 microRNA-155
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康力欣胶囊对人脐静脉血管内皮细胞周期和凋亡的影响
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作者 张娜 刘学芳 +1 位作者 董浩然 冯素香 《吉林中医药》 2017年第12期1245-1248,共4页
目的研究抗肿瘤药康力欣胶囊对人脐静脉血管内皮HUVEC细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法以康力欣胶囊接种于细胞12、24、36、48 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞抑制率,采用流式细胞仪检测细胞周期各时相比率的变化,... 目的研究抗肿瘤药康力欣胶囊对人脐静脉血管内皮HUVEC细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法以康力欣胶囊接种于细胞12、24、36、48 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞抑制率,采用流式细胞仪检测细胞周期各时相比率的变化,荧光显微镜观察法检测各组细胞凋亡的形态变化。结果 MTT检测结果显示康力欣胶囊能够明显抑制HUVEC的增殖,其抑制率与药物浓度呈正相关;细胞周期检测结果显示,康力欣胶囊将HUVEC细胞周期阻滞在S期;荧光显微镜观察结果显示,康力欣胶囊作用HUVEC后出现大量凋亡细胞。结论康力欣胶囊对HUVEC有明显的抑制作用,该作用可以通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡实现。 展开更多
关键词 康力欣胶囊 人脐静脉血管内皮 体外抑制 细胞周期 细胞凋亡
槲皮素PLGA-TPGS纳米粒在肝癌细胞中的摄取及其细胞抑制率的研究
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作者 徐红 高萌 +5 位作者 关欣 严迪 印紫夷 贾续东 张成鸿 田燕 《中国医院药学杂志》 北大核心 2017年第15期1448-1453,共6页
目的:考察槲皮素(quercetin,QT)/香豆素-6(coumarin-6,C6)乙交酯丙交酯共聚物-维生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯(polylactide-co-glycolide-D-α-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate,PLGA-TPGS)纳米粒(QT/C6-loaded PLG... 目的:考察槲皮素(quercetin,QT)/香豆素-6(coumarin-6,C6)乙交酯丙交酯共聚物-维生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯(polylactide-co-glycolide-D-α-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate,PLGA-TPGS)纳米粒(QT/C6-loaded PLGATPGS nanoparticles,QCPTN)体外分别被人肝癌细胞株HepG2和小鼠腹水型高淋巴道转移肝癌细胞HCa-F的摄取情况,以及研究槲皮素PLGA-TPGS纳米粒(QT-loaded PLGA-TPGS nanoparticles,QPTN)体外对HepG2细胞的生长抑制率。方法:用激光共聚焦显微镜考察2种肝癌细胞HepG2和HCa-F对QCPTN的体外细胞摄取情况。采用WST-1法体外研究QPTN和槲皮素PLGA纳米粒(QT-loaded PLGA nanoparticles,QPN)对HepG2细胞生长的抑制性。试验分为6组,分别为阴性对照组、空白纳米粒(empty PLGA-TPGS nanoparticles,EPTN)组、氟尿嘧啶溶液(fluorouracil solutions,FS)组、槲皮素溶液(quercetin solutions,QTS)组、QPN组、QPTN组,分别在培育24、48、72 h加入WST-1后在酶标仪上450 nm下测定吸光度值,计算对HepG2细胞的生长抑制率。结果:在2种不同类型肝癌细胞摄取试验中,激光共聚焦显微镜镜下均可见显绿色荧光的QCPTN分布在2种肝癌细胞的细胞核周围,表明QCPTN可被HepG2和HCa-F细胞分别摄取进入细胞内。体外肝癌细胞生长抑制率试验结果表明,自制材料PLGA-TPGS对HepG2细胞生长无明显的抑制性;QPN和QPTN的体外对HepG2细胞生长抑制率有浓度依赖性和时间依赖性;QPTN对HepG2细胞的抑制率大于QPN、QTS和FS。结论:QCPTN通过细胞摄取作用可将模型药物QT和荧光标记物C6同时带入HepG2和HCa-F细胞内,QPTN体外显示对HepG2细胞生长具有较强的抑制性,与QPN、QTS和FS相比,具有较好的抑制肝癌细胞生长的作用。 展开更多
关键词 槲皮素 纳米粒 乙交酯丙交酯共聚物-维生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯 肝癌细胞 体外 抑制率
体外受精胚胎细胞数量和碎片率对囊胚形成的影响 预览
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作者 李娜 韦静 《中国医药导报》 CAS 2017年第36期93-96,128共5页
目的探讨体外受精胚胎细胞数量和碎片比例对囊胚形成的影响。方法 选择2016年1~10月柳州市工人医院妇产科200例患者在体外受精后3 d得到的胚胎。根据囊胚数将其分为2~3c组(2~3个细胞),4c组(4个细胞),5c组(5个细胞),6c组(6个细胞... 目的探讨体外受精胚胎细胞数量和碎片比例对囊胚形成的影响。方法 选择2016年1~10月柳州市工人医院妇产科200例患者在体外受精后3 d得到的胚胎。根据囊胚数将其分为2~3c组(2~3个细胞),4c组(4个细胞),5c组(5个细胞),6c组(6个细胞),7c组(7个细胞),8c组(8个细胞),9c组(9个细胞),10c组(10个细胞),11c组(11个细胞),12c组(12个细胞),≥13c组(≥13个细胞)。分析胚胎移植时细胞数及碎片等级(碎片等级为1级,碎片率≤5%;2级:碎片率〉5%~20%;3级:碎片率〉20%~30%;4级:碎片率〉30%)对囊胚质量的影响。结果碎片等级1~2级的囊胚与3~4级的囊胚中,均为8 c组有效囊胚形成率与优质囊胚形成率最高(χ2=200.760、119.162、243.532、136.395,均P〈0.01)。结论 在体外受精胚胎移植中,碎片等级1~2级与3~4级的均为8c组囊胚质量最好,此结果对于指导选取高质量胚胎具有参考价值。 展开更多
关键词 体外受精 胚胎细胞数量 碎片比例 囊胚形成
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人角膜上皮细胞体外培养的研究进展 预览
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作者 王宇静 杨燕宁 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第4期384-387,391共5页
角膜上皮细胞位于角膜外表面,人角膜上皮细胞体外培养有助于充分了解角膜细胞的生物学特性、构建体外疾病模型以及更好地发挥其临床作用。我们就近年来关于人角膜上皮细胞体外培养提取部位,提取方法,培养基、细胞因子与底物以及鉴别... 角膜上皮细胞位于角膜外表面,人角膜上皮细胞体外培养有助于充分了解角膜细胞的生物学特性、构建体外疾病模型以及更好地发挥其临床作用。我们就近年来关于人角膜上皮细胞体外培养提取部位,提取方法,培养基、细胞因子与底物以及鉴别方法研究进展进行综述。 展开更多
关键词 人角膜上皮细胞 体外培养 细胞培养
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罗勒多糖对顺铂等三种化疗药物抑瘤增效作用的实验研究
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作者 肖丽 刘淑娟 +3 位作者 朱庆均 王萍 张丹 李兰 《山东中医药大学学报》 2017年第6期557-560,共4页
目的 :研究罗勒多糖与顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶三种化疗药物合用对不同组织来源的肿瘤细胞株的生长抑制作用,以期明确罗勒多糖对化疗药物抑瘤增效适用范围。方法:体外培养人肺腺癌A549细胞株、人喉癌Hep-2细胞株和人胃癌SGC-790... 目的 :研究罗勒多糖与顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶三种化疗药物合用对不同组织来源的肿瘤细胞株的生长抑制作用,以期明确罗勒多糖对化疗药物抑瘤增效适用范围。方法:体外培养人肺腺癌A549细胞株、人喉癌Hep-2细胞株和人胃癌SGC-7901细胞株,采用MTT法测定罗勒多糖对顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶抑制上述肿瘤细胞生长的增效作用。结果:罗勒多糖联合顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶共同作用48 h可明显提高三种化疗药物对A549细胞、Hep-2细胞和SGC-7901细胞的生长抑制作用,且其作用具有一定的剂量依赖性。结论:罗勒多糖对多种化疗药物抑制不同组织来源的肿瘤细胞株的生长具有增效作用,提示罗勒多糖对化疗药物抑瘤增效具有广泛适用性。罗勒多糖是一种潜在的化疗增效药物,也可以作为化疗辅助的功能食品开发应用。 展开更多
关键词 罗勒多糖 顺铂 盐酸吡柔比星 氟尿嘧啶 肿瘤 抑瘤增效 体外培养 肿瘤细胞株
Silibinin induces hepatic stellate cell cycle arrest via enhancing p53/p27 and inhibiting Akt downstream signaling protein expression 预览
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作者 Devaraj Ezhilarasan Jonathan Evraerts +4 位作者 Brice Sid Pedro Buc Calderon Sivanesan Karthikeyan Etienne Sokal Mustapha Najimi 《国际肝胆胰疾病杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第1期80-87,共8页
BACKGROUND: Proliferation of hepatic stellate cells(HSCs) plays a pivotal role in the progression of liver fibrosis consequent to chronic liver injury. Silibinin, a flavonoid compound,has been shown to possess anti-fi... BACKGROUND: Proliferation of hepatic stellate cells(HSCs) plays a pivotal role in the progression of liver fibrosis consequent to chronic liver injury. Silibinin, a flavonoid compound,has been shown to possess anti-fibrogenic effects in animal models of liver fibrosis. This was attributed to an inhibition of cell proliferation of activated HSCs. The present study was to gain insight into the molecular pathways involved in silibinin anti-fibrogenic effect. METHODS: The study was conducted on LX-2 human stellate cells treated with three concentrations of silibinin(10, 50 and 100 μmol/L) for 24 and 96 hours. At the end of the treatment cell viability and proliferation were evaluated. Protein expression of p27, p21, p53, Akt and phosphorylated-Akt was evaluated by Western blotting analysis and Ki-67 protein expression was by immunocytochemistry. Sirtuin activity was evaluated by chemiluminescence based assay. RESULTS: Silibinin inhibits LX-2 cell proliferation in doseand time-dependent manner; we showed that silibinin upregulated the protein expressions of p27 and p53. Such regulation was correlated to an inhibition of both downstream Akt and phosphorylated-Akt protein signaling and Ki-67 protein expression. Sirtuin activity also was correlated to silibinininhibited proliferation of LX-2 cells. CONCLUSION: The anti-proliferative effect of silibinin on LX-2 human stellate cells is via the inhibition of the expressions of various cell cycle targets including p27, Akt and sirtuin signaling. 展开更多
关键词 细胞周期阻滞 水飞蓟宾 信号蛋白 AKT 肝损伤 P53 P27 细胞增殖
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黄芪甲苷对OVA诱导哮喘小鼠Th细胞亚群的影响 被引量:1
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作者 王嵩 郤庆 +3 位作者 李国文 昌军 俞培忠 沈朝斌 《上海中医药杂志》 2017年第12期67-70,共4页
目的观察黄芪甲苷(AST IV)对卵白蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠脾源性Th1及Th2的免疫调节作用。方法建立OVA诱导的小鼠哮喘模型,分离培养脾单个核细胞,加入不同浓度的黄芪甲苷。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液上清液细胞因子... 目的观察黄芪甲苷(AST IV)对卵白蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠脾源性Th1及Th2的免疫调节作用。方法建立OVA诱导的小鼠哮喘模型,分离培养脾单个核细胞,加入不同浓度的黄芪甲苷。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液上清液细胞因子IFN-γ、IL-4及IL-13的表达;流式细胞术(FCM)在单个核细胞内测定IFN-γ、IL-4及IL-13的百分含量。结果与OVA组比较,不同剂量黄芪甲苷(25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L)对OVA诱导的哮喘小鼠Th细胞亚群分泌的细胞因子IFN-γ、IL-4及IL-13均有一定的抑制作用(P〈0.05)。结论黄芪甲苷对OVA诱导的Th2细胞应答有抑制作用,通过抑制Th1及Th2细胞达到免疫调节作用。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 免疫调节 体外实验 TH细胞亚群
体外模型在药源性肾毒性评价中的研究进展 被引量:2
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作者 邱宣 周晓冰 李波 《中国新药杂志》 CSCD 北大核心 2017年第15期1792-1796,共5页
由于肾毒性物质的靶器官选择性,药物诱导的肾毒性是目前新药开发和临床应用中存在的重要问题,高通量肾毒性体外评价模型可以提高大量化合物的筛选效率,节约时间和成本,已经逐渐成为肾毒性研究的主要研究方法。虽然肾毒性体外评价模型的... 由于肾毒性物质的靶器官选择性,药物诱导的肾毒性是目前新药开发和临床应用中存在的重要问题,高通量肾毒性体外评价模型可以提高大量化合物的筛选效率,节约时间和成本,已经逐渐成为肾毒性研究的主要研究方法。虽然肾毒性体外评价模型的研究热度不断升温,但由于肾毒性的特异性,仍未能建立标准的体外评价模型。目前,肾毒性体外评价的研究主要基于传统的2D细胞模型,3D细胞模型尚在初级阶段。本文对近年来高通量肾毒性体外评价模型的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 肾毒性 体外模型 生物标志物 高通量筛选 3D细胞模型
“药辅合一”茶多酚-蜂毒肽纳米复合物的制备及抗肿瘤研究 被引量:2
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作者 方栋 张蕾 +3 位作者 孙娟 吴文瀚 乔宏志 狄留庆 《中草药》 CSCD 北大核心 2017年第16期3300-3307,共8页
目的制备具有协同抗肿瘤作用的茶多酚-蜂毒肽纳米复合物(EMN),并考察其抗肿瘤活性。方法通过拜耳反应合成了多聚表没食子儿茶素没食子酸酯(poly EGCG),-1H-NMR和MS表征其结构和相对分子质量。通过正交试验优化EMN的制备工艺,并考察... 目的制备具有协同抗肿瘤作用的茶多酚-蜂毒肽纳米复合物(EMN),并考察其抗肿瘤活性。方法通过拜耳反应合成了多聚表没食子儿茶素没食子酸酯(poly EGCG),-1H-NMR和MS表征其结构和相对分子质量。通过正交试验优化EMN的制备工艺,并考察在不同p H值条件下蜂毒肽(Mel)的体外释放。通过流式细胞仪比较异硫氰酸荧光素(FITC)标记的Mel和EMN的细胞摄取情况。MTT法考察poly EGCG和Mel在B16F10和A549细胞的协同抗肿瘤效应。结果合成的poly EGCG用-1H-NMR和MS确证了结构,正交试验优化的EMN最佳制备工艺为将0.5 mg/m L poly EGCG溶液逐滴加入到1 mg/m L等体积的Mel溶液中,边滴加边搅拌,室温孵育30 min,即得。体外释放实验表明EMN释放具有酸响应性。摄取实验表明Mel和EMN均能被肿瘤细胞摄取,摄取量相当。MTT实验结果表明,poly EGCG和Mel联合使用的协同系数(CI)小于1.0,具有协同抗肿瘤效果。结论采用自组装的方式制备EMN,工艺简单,粒径适宜,且具有协同抗肿瘤的效果,值得深入研究。 展开更多
关键词 药辅合一 蜂毒肽 茶多酚 纳米复合物 表没食子儿茶素没食子酸酯 体外释放 细胞摄取 抗肿瘤 协同效应 正交试验 MTT法 自组装
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