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基质金属蛋白酶MMP-26能有效促进人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3浸润能力 预览 被引量:4
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作者 吴晓秋 李玉侠 +3 位作者 付雅媛 李殿俊 SANG Qing-Xiang 王雁玲 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第6期 524-530,共7页
胚胎植入过程中,滋养层细胞浸润与肿瘤的迁移过程非常相似,但显著的区别在于前者是受严格调控的有节制的浸润,基质金属蛋白酶(MMPs)的许多成员在其中起重要的作用.MMP-26是近年来发现的MMPs家族的新成员,它在滋养层细胞中的作用... 胚胎植入过程中,滋养层细胞浸润与肿瘤的迁移过程非常相似,但显著的区别在于前者是受严格调控的有节制的浸润,基质金属蛋白酶(MMPs)的许多成员在其中起重要的作用.MMP-26是近年来发现的MMPs家族的新成员,它在滋养层细胞中的作用所知甚少.利用国际常用的人滋养层细胞模型——人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)作为体外实验模型,探讨MMP-26在人滋养层细胞浸润调节中的作用.将含有MMP-26全长cDNA的pCR3.1质粒转染到JEG-3细胞中,获得过量表达MMP-26基因的稳定细胞系JEG-3/MMP-26;细胞浸润分析表明JEG/MMP-26细胞的浸润能力较母本细胞明显增强;RT-PCR和明胶酶谱分析显示JEG-3/MMP-26细胞中MMP-9的表达和分泌水平提高:双荧光免疫细胞化学进一步显示MMP-26和MMP-9蛋白在细胞中有共定位现象.上述结果表明MMP-26能有效促进人滋养层细胞浸润,其作用可能是通过与其他MMP分子(如MMP-9)的协调来实现的. 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶 jeg-3细胞 细胞浸润 人滋养层细胞
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TGF-β1对绒毛膜癌JEG-3细胞基质金属蛋白酶-9基质金属蛋白酶抑制剂-1蛋白表达的影响 被引量:3
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作者 胡亚涛 刘绍晨 +2 位作者 许倩 李玉红 李晓茹 《河北医学》 CAS 2014年第2期177-180,共4页
目的:观察转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对绒毛膜癌JEG-3细胞系基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinases,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达的影响。方法:体外培养人绒毛膜癌JEG-... 目的:观察转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对绒毛膜癌JEG-3细胞系基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinases,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达的影响。方法:体外培养人绒毛膜癌JEG-3细胞,分别给予不同浓度及不同作用时间的TGF-β1进行诱导,Western Blotting法检测MMP-9、TIMP-1蛋白的表达变化。结果:与对照组相比,100、200μg/L TGF-β1作用后,检测各组细胞MMP-9及TIMP-1蛋白的相对表达量均增加(P〈0.01);与0h比较,12、24、48、72h各组细胞MMP-9及TIMP-1蛋白的相对表达量均增加(P〈0.05),且各组MMP-9/TIMP-1大于1。结论:绒癌的浸润转移与MMP-9及TIMP-1的表达变化密切相关。 展开更多
关键词 外源性TGF-Β1 绒癌jeg-3 MMP-9 TIMP-1 蛋白印迹法
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Expression of matrix metallo-proteinase-28 in human normal cytotrophoblast cells and a choriocarcinoma cell line,JEG-3 被引量:2
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作者 Zhang, J Cao, YJ +3 位作者 Liu, WM Zhao, BS Zeng, GQ Duan, EK 《中国科学通报:英文版》 SCIE CAS 2002年第9期732-736,共5页
There are striking similiarities present between the behavior of invasive placentaL cells and that of invasive cancer cells. Matrix metalloproteinases (MMPs) are one of the most important mediators. MMP-28, the new m... There are striking similiarities present between the behavior of invasive placentaL cells and that of invasive cancer cells. Matrix metalloproteinases (MMPs) are one of the most important mediators. MMP-28, the new member of MMPs, was sequenced and identified recently. Expression of MMP-28 mRNA and protein in the cytotrophoblast cells and a choriocarcinoma cell line, JEG-3 cell, was conducted by zymography, RT-PCR and Northern blot. There is MMP-28 mRNA expression in both the cytotrophoblast cells and JEG-3 cells by RT-PCR. The activity of MMP-28 in cytotrophoblast cells was significantly weaker than that in JEG-3 (P 【 0.01) by zymography. Furthermore, mRNA expression of MMP-28 was significantly stronger (P 【 0.001) in JEG-3 than in human cytotrophoblast cells in a time-dependent way by Northern Blot. Our results suggest that MMP-28 may play a role in some of the tissue-remodeling events associated with normal pregnancy and tumor progression. 展开更多
关键词 cytotrophoblast CELL CHORIOCARCINOMA CELL line jeg-3 MATRIX METALLOPROTEINASES MMP-28.
5-杂氮脱氧胞苷对JEG-3细胞及印迹基因H19效应的初步研究 预览 被引量:1
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作者 卢林杉 李力 +5 位作者 俞丽丽 易萍 李平 陈星云 刘苹 周元国 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2008年第5期 342-345,349,共5页
目的:研究甲基化酶抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-aza-2‘-deoxycytidine,ADC)对人绒毛膜上皮癌细胞株JEG-3细胞的生物学作用,观察JEG-3细胞H19表达变化与滋养细胞增殖、分化和侵袭等行为的相关性,从表观遗传学角度探讨滋养细胞侵袭行... 目的:研究甲基化酶抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-aza-2‘-deoxycytidine,ADC)对人绒毛膜上皮癌细胞株JEG-3细胞的生物学作用,观察JEG-3细胞H19表达变化与滋养细胞增殖、分化和侵袭等行为的相关性,从表观遗传学角度探讨滋养细胞侵袭行为的调控。方法:应用MTT法检测不同浓度5-杂氮脱氧胞苷在不同时相下对JEG-3细胞增殖的影响。体外小室迁移实验观察5-杂氮脱氧胞苷对JEG-3细胞迁移的影响。荧光定量RT—PCR检测5-杂氮脱氧胞苷作用下JEG-3细胞H19mRNA表达的变化。结果:5-杂氮脱氧胞苷对JEG-3细胞增殖起抑制作用,在一定范围内与时间和剂量呈正相关。经100μmoL/L5-杂氮脱氧胞苷作用24h后的JEG-3细胞迁移能力明显受限,迁移细胞数较对照组差异显著(P〈0.01)。经5-杂氮脱氧胞苷作用后JEG-3细胞中H19mRNA表达增高,在一定范围内与时间和剂量呈正相关。结论:甲基化酶抑制剂5-杂氮脱氧胞苷可致H19 mRNA过量表达,并进一步抑制滋养细胞的增殖和迁移能力。H19印迹基因表达上调与滋养细胞增殖抑制和迁移能力降低有关。 展开更多
关键词 绒毛膜癌 脱氧胞苷 印迹基因H19 细胞jeg-3 迁移 细胞系
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滋养细胞体外分离、培养及纯化研究进展 预览
5
作者 侯佩琴 王永红 《世界最新医学信息文摘(电子版)》 2018年第28期54-56,共3页
滋养细胞来自于胚胎外胚层,其生长迅速,侵袭能力强,参与多种胎盘相关疾病,许多产科疾病的发生,如妊娠期高血压疾病及胎儿生长受限等。体外分离培养的滋养层细胞为研究以上疾病的具体发病机制奠定了细胞学基础,广泛应用于病因及发病机制... 滋养细胞来自于胚胎外胚层,其生长迅速,侵袭能力强,参与多种胎盘相关疾病,许多产科疾病的发生,如妊娠期高血压疾病及胎儿生长受限等。体外分离培养的滋养层细胞为研究以上疾病的具体发病机制奠定了细胞学基础,广泛应用于病因及发病机制的研究。近年来,国内外已分离并培养出多种滋养细胞系,包括JEG-3、HTR-8/Svneo、.BeWo等。本文就近年国内外研究滋养细胞培养方法的进展进行综述。 展开更多
关键词 滋养细胞 体外培养 jeg-3 HTR-8/Svneo BEWO
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hCG促进绒癌细胞系中HLA-G的表达 预览 被引量:2
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作者 陈春玲 廖秦平 《中国妇产科临床杂志》 2004年第2期 113-115,共3页
目的探讨hCG对绒癌细胞系中HLA-G的调节作用.方法选用表达HLA-G的绒癌细胞系JEG-3,应用hCG(5 IU/ml)连续处理此细胞系12、24、48、72 h,用Real-time RT-PCR方法检测HLA-G的mRNA水平;通过Western 杂交及流式细胞学测定HLA-G的蛋白水平.结... 目的探讨hCG对绒癌细胞系中HLA-G的调节作用.方法选用表达HLA-G的绒癌细胞系JEG-3,应用hCG(5 IU/ml)连续处理此细胞系12、24、48、72 h,用Real-time RT-PCR方法检测HLA-G的mRNA水平;通过Western 杂交及流式细胞学测定HLA-G的蛋白水平.结果 hCG作用48和72 h后可以显著上调HLA-G的mRNA及蛋白的表达.结论 hCG在HLA-G的表达调节上具有重要的作用,高表达的hCG可能在绒癌中通过上调HLA-G参与免疫逃逸方面具有重要意义. 展开更多
关键词 HCG 绒癌 癌细胞 HLA-G 检测
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HBxAg对胎盘滋养细胞凋亡的影响及其作用机制 预览 被引量:1
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作者 王慰敏 袁永兴 +3 位作者 李琛 潘怡霞 徐娜 白桂芹 《西安交通大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2017年第6期809-814,共6页
目的探讨乙型肝炎病毒X(HBx)蛋白对胎盘滋养层细胞凋亡水平的影响及可能的作用机制。方法将已构建好的HBx基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx瞬时转染人绒毛膜癌细胞株JEG-3及HTR-8,分别以转染空载体pcDNA3.1(+)和未转染作为阴... 目的探讨乙型肝炎病毒X(HBx)蛋白对胎盘滋养层细胞凋亡水平的影响及可能的作用机制。方法将已构建好的HBx基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx瞬时转染人绒毛膜癌细胞株JEG-3及HTR-8,分别以转染空载体pcDNA3.1(+)和未转染作为阴性对照组和空白对照组,转染后48h,以逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)鉴定HBx-mRNA,间接免疫荧光法和蛋白印迹法(Western blot)鉴定HBxAg的表达;流式细胞仪AnnexinⅤ+PI双染方法检测细胞凋亡状态;间接免疫荧光法、流式细胞仪及Western blot检测PI3K、pAKT的表达。结果JEG-3及HTR-8转染组中均有HBx蛋白表达,而在对照组未被检测到;转染组JEG-3、HTR-8细胞早期凋亡率小于阴性对照组(P〈0.05),PI3K和pAKT1的表达水平高于阴性对照组(P〈0.05),然而AKT1蛋白表达水平在转染组、阴性对照组和空白对照组间无显著性差别。结论 HBx基因可以成功地转入JEG-3及HTR-8细胞,HBx转染后可抑制滋养细胞凋亡,这可能与HBx激活PI3K/pAKT信号通路有关。 展开更多
关键词 jeg-3 HTR-8 乙型肝炎病毒X 瞬时转染 细胞凋亡 人胎盘滋养细胞
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吲哚胺2,3双加氧酶对人绒毛膜癌JEG-3细胞增殖及迁移能力的影响 被引量:1
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作者 宗姗姗 赵鑫 +3 位作者 罗成凤 李春青 王凯 周倩 《同济大学学报:医学版》 CAS 2016年第2期31-34,共4页
目的 观察吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)对人绒毛膜癌JEG-3细胞体外增殖、迁移能力的影响。方法 通过IDO抑制剂(1-L-MT)及短发夹RNA基因干扰抑制IDO表达,利用MTS增殖实验、Transwell迁移试验检测对细胞增殖... 目的 观察吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)对人绒毛膜癌JEG-3细胞体外增殖、迁移能力的影响。方法 通过IDO抑制剂(1-L-MT)及短发夹RNA基因干扰抑制IDO表达,利用MTS增殖实验、Transwell迁移试验检测对细胞增殖和迁移能力的影响。结果 基因敲减能明显降低IDO表达水平。1-L-MT和基因敲减的JEG-3细胞与对照组相比,细胞的增殖和迁移能力明显下降。结论 抑制IDO能够降低绒癌细胞系JEG-3细胞的增殖和迁移能力。 展开更多
关键词 绒毛膜肿瘤 吲哚胺2 3双加氧酶 jeg-3 细胞增殖 细胞迁移
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RNA干扰技术抑制JEG-3细胞中HMGA1的表达 预览 被引量:1
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作者 肖西峰 张平 李磊 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第9期 1466-1468,共3页
目的:以人类高迁移率蛋白A1(HMGA1)为靶基因,采用RNA干扰(RNAi)技术特异性地抑制JEG-3细胞中HMGA1的表达。方法:针对HMGA1基因设计、合成一段小干扰RNA(siRNA),用脂质体lipofectamine2000将该siRNA转染JEG-3细胞,采用RT—PCR... 目的:以人类高迁移率蛋白A1(HMGA1)为靶基因,采用RNA干扰(RNAi)技术特异性地抑制JEG-3细胞中HMGA1的表达。方法:针对HMGA1基因设计、合成一段小干扰RNA(siRNA),用脂质体lipofectamine2000将该siRNA转染JEG-3细胞,采用RT—PCR和Westernblot分别从mRNA和蛋白质水平检测该siRNA对HMGA1表达的影响。结果:针对HMGA1的siRNA能够明显下调JEG-3细胞中HMGA1的表达水平,并具有良好的特异性。结论:在JEG-3细胞系中采用RNAi技术特异性下调了HMGA1基因的表达,为研究HMGA1基因在肿瘤细胞中的作用奠定实验基础,也为进一步研究HMGA1在治疗人类绒毛膜细胞癌的临床应用提供了有益帮助。 展开更多
关键词 HMGA1 RNA干扰 小分子扰核糖核酸 jeg-3细胞
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黄荆子乙酸乙酯提取物对人绒毛膜癌JEG-3细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制 预览 被引量:1
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作者 邓君 张怡 谭智慧 《中南大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期476-482,共7页
目的:观察黄荆子乙酸乙酯提取物(purified vitexin compound2,VB2)对人类绒毛膜癌JEG-3细胞体外增殖及凋亡活性,及对凋亡相关基因mTOR/4E-BPlmRNA表达的影响。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTF)法检测不同浓度的VB2对JEG-3细胞的... 目的:观察黄荆子乙酸乙酯提取物(purified vitexin compound2,VB2)对人类绒毛膜癌JEG-3细胞体外增殖及凋亡活性,及对凋亡相关基因mTOR/4E-BPlmRNA表达的影响。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTF)法检测不同浓度的VB2对JEG-3细胞的体外增殖活性;Hoechst 33258染色观察细胞形态学变化;流式细胞分析方法定量检测不同浓度药物作用后细胞凋亡率;RT-PCR法检测mTOR/4E-BPlmRNA水平表达的变化。 展开更多
关键词 绒毛膜癌 jeg-3 黄荆子乙酸乙酯提取物 MTOR 4E-BP1
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存活素在人绒癌细胞株表达及沉默相关研究 被引量:1
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作者 王璟 庞义存 +1 位作者 赵向寨 李萍 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2014年第5期791-793,共3页
目的:观察在人绒癌JEG-3细胞株中应用短发夹RNA抑制存活素表达的效果。方法:选取已证实有效的靶向Survivin的shRNA序列,将其转染JEG-3细胞后检测SurvivinmRNA水平的变化,同时进行荧光报告检查。结果:shRNA表达载体构建成功,转染JE... 目的:观察在人绒癌JEG-3细胞株中应用短发夹RNA抑制存活素表达的效果。方法:选取已证实有效的靶向Survivin的shRNA序列,将其转染JEG-3细胞后检测SurvivinmRNA水平的变化,同时进行荧光报告检查。结果:shRNA表达载体构建成功,转染JEG-3报告细胞后转染组24h孔中均有弱荧光表达,48h荧光表达增强,转染率60%-75%,测序证实构建的表达载体序列正确,转染后转染组JEG-3细胞中的Survivin mRNA和蛋白的表达明显减弱。结论:靶向Survivin短发夹RNA表达载体构建成功,并能有效下调Survivin的表达水平。 展开更多
关键词 妊娠滋养细胞肿瘤 绒癌 凋亡抑制蛋白 存活素 jeg-3 短发夹RNA
PPARγ及配体对JEG-3细胞系浸润能力的影响 预览
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作者 国玉寒 李淑娟 尚涛 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2007年第11期 808-810,881,共4页
目的:探讨过氧化物酶增殖物激活受体PPARγ(Peroxisome proliferator—activatedreceptor-1)及其配体对滋养细胞肿瘤细胞系JEG一3浸润能力的影响。方法:通过免疫荧光细胞化学方法检测JEG-3细胞系中PPARγ的表达,采用TransweH侵入... 目的:探讨过氧化物酶增殖物激活受体PPARγ(Peroxisome proliferator—activatedreceptor-1)及其配体对滋养细胞肿瘤细胞系JEG一3浸润能力的影响。方法:通过免疫荧光细胞化学方法检测JEG-3细胞系中PPARγ的表达,采用TransweH侵入系统检测PPARγ的天然激动配体15脱氧-前列腺素J2(15d—PGJ2)对滋养细胞浸润能力的影响。结果:在JEG-3滋养细胞系中有PPARγ蛋白表达,PPARγ激动配体15d·PGJ2处理后浸润穿膜细胞数明显减少,与对照比较差异有统计学意义(P〈0.01),且具有剂量依赖关系。结论:PPA脚被配体15d—PGJ2激活后抑制JEG-3滋养细胞浸润能力,为今后PPARγ配体在滋养细胞浸润异常有关的妊娠并发症治疗中可能的临床应用提供理论和实验基础。 展开更多
关键词 PPARΓ 15d—PGJ2 滋养细胞浸润 jeg-3
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过表达和抑制miR-133a对JEG-3中HLA-G表达的影响 预览
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作者 陈蕊 井航 +2 位作者 李雷 杨洋 延佳佳 《安徽医科大学学报》 北大核心 2017年第12期1810-1813,共4页
目的研究微小miR-133a在人绒癌细胞株(JEG-3)中对人类白细胞抗原G(HLA-G)的表达调控作用。方法用脂质体包裹化学合成的miR-133a前体分子并转染JEG-3,从而过表达及抑制miR-133a,逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测转染后miR-133a... 目的研究微小miR-133a在人绒癌细胞株(JEG-3)中对人类白细胞抗原G(HLA-G)的表达调控作用。方法用脂质体包裹化学合成的miR-133a前体分子并转染JEG-3,从而过表达及抑制miR-133a,逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测转染后miR-133a及HLA-G在mRNA水平的表达情况。Western blot法检测转染miR-133a后细胞中HLA-G蛋白水平的表达。结果 JEG-3细胞中抑制miR-133a后HLA-G在mRNA及蛋白水平均表达增加;在JEG-3细胞中过表达miR-133a后HLA-G在mRNA及蛋白水平均表达下降,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论在JEG-3细胞中miR-133a能够负性调控HLA-G的表达,进一步验证了miR-133a与自然流产、子痫前期等疾病的相关性,并为进一步探索相关疾病机制及临床诊治提供了一定的实验基础。 展开更多
关键词 微小RNA jeg-3 HLA-G
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5-杂氮脱氧胞苷对JEG-3细胞侵袭力的影响及相关机制探讨 预览 被引量:1
14
作者 卢林杉 李力 +5 位作者 俞丽丽 赵丹 易萍 李平 陈星云 周元国 《重庆医学》 CAS CSCD 2008年第9期 933-934,F0003,共3页
目的研究甲基化酶抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycyt.dine,ADC)对人绒毛膜上皮癌细胞株JEG-3细胞侵袭能力及其对JEG-3细胞H19甲基化状态的影响,从表观遗传学角度探讨滋养细胞侵袭行为的相关调控机制。方法Matrigel侵袭小室... 目的研究甲基化酶抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycyt.dine,ADC)对人绒毛膜上皮癌细胞株JEG-3细胞侵袭能力及其对JEG-3细胞H19甲基化状态的影响,从表观遗传学角度探讨滋养细胞侵袭行为的相关调控机制。方法Matrigel侵袭小室模型观察ADC处理JEG-3细胞24h后细胞侵袭能力的变化。亚硫酸氢盐修饰后测序法检测ADC对JEG-3细胞中H19基因甲基化的影响。结果经100μmol/LADC作用24h后的JEG-3细胞侵袭能力明显降低,较对照组差异有统计学意义(P〈0.01)。经ADC作用后的JEG3细胞中H19基因甲基化程度降低。结论甲基化酶抑制剂ADC可降低H19基因甲基化程度,并抑制滋养细胞侵袭能力。H19甲基化状态改变可能参与调控滋养细胞侵袭能力。 展开更多
关键词 印迹基因 H19 jeg-3 侵袭 甲基化
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hcG对JEG—3滋养细胞系表达细胞因子的影响 预览 被引量:1
15
作者 庞战军 邢福祺 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期 37-40,共4页
目的揭示人类绒毛膜促性腺激素(hCG)是否通过改变细胞因子的生成而影响滋养细胞的侵袭性.方法以永生化的滋养细胞系JEG-3为研究对象,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法,观察了hCG对JEG-3细胞与细胞侵袭力调节有关的多种细胞因子表达... 目的揭示人类绒毛膜促性腺激素(hCG)是否通过改变细胞因子的生成而影响滋养细胞的侵袭性.方法以永生化的滋养细胞系JEG-3为研究对象,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法,观察了hCG对JEG-3细胞与细胞侵袭力调节有关的多种细胞因子表达的影响.结果 JEG-3细胞表达HGF、IGF-II、VEGF和TGF-β3,且VEGF的表达以VEGF121和VEGF165为主,而不表达IGF TGF-1β、TGF-β2、IL-β 1.25 U/mL hCG处理50 h可显著降低JEG-3细胞中HGF的表达,同时强烈诱导VEGF121和VEGF165的表达,而其它基因的表达未发生明显变化.结论 HGF对滋养细胞的侵入起促进作用,而VEGF则具有抑制效应.说明,高浓度的hCG可能通过这两种细胞因子的自分泌机制对滋养细胞的侵入起抑制作用. 展开更多
关键词 滋养细胞 人绒毛膜促性腺激素 细胞因子 HCG jeg-3
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HLA-G反义寡核苷酸对绒癌细胞免疫逃逸的影响 预览
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作者 温见燕 张玲 +5 位作者 王芸 毛海婷 温培娥 崔树龄 李登华 顾洪涛 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期 109-112,共4页
采用非经典MHC I类免疫耐受分子HLA-G反义基因,封闭和阻断肿瘤细胞上HLA-G分子的释放,逆转肿瘤细胞的免疫抑制作用,为肿瘤生物治疗提供新的理论和实验依据.利用反义核酸技术,合成HLA-G反义寡核苷酸(ASODN),硫代化修饰与脂质体形成复合物... 采用非经典MHC I类免疫耐受分子HLA-G反义基因,封闭和阻断肿瘤细胞上HLA-G分子的释放,逆转肿瘤细胞的免疫抑制作用,为肿瘤生物治疗提供新的理论和实验依据.利用反义核酸技术,合成HLA-G反义寡核苷酸(ASODN),硫代化修饰与脂质体形成复合物,转导入表达HLA-G的绒毛膜癌细胞系JEG-3.采用RT-PCR方法检测HLA-G mRNA表达水平的变化.流式细胞术检测细胞表面HLA-G蛋白表达水平的变化;ASODN处理后,对JEG-3诱导外周血单个核细胞凋亡的影响;MTT法检测ASODN作用后,JEG-3作为第3种抑制细胞对同种异体混合淋巴细胞反应的影响.结果表明,HLA-G ASODN可显著抑制JEG-3细胞HLA-G mRNA和蛋白水平的表达,逆转HLA-G分子诱导的免疫效应细胞的凋亡作用,逆转HLA-G分子对同种异体混合淋巴细胞反应的抑制作用. 展开更多
关键词 HLA-G 反义寡核苷酸 绒癌 肿瘤细胞 免疫逃逸 外周血
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Hypericum caprifoliatum and Hypericum connatum affect human trophoblast-like cells differentiation and Ca~(2+) influx
17
作者 Aline O.da Conceio Gilsane Lino von Poser +1 位作者 Benoit Barbeau Julie Lafond 《亚太热带生物医学杂志:英文版》 2014年第5期367-373,共7页
Objective:To study the effect of crude methanol and n-hexane extracts of Hypericum connatum(H.connatum) and Hypericum caprifoliatum on trophoblast-like cells.Methods:BeWo and JEG-3 trophoblast-like cells were submi... Objective:To study the effect of crude methanol and n-hexane extracts of Hypericum connatum(H.connatum) and Hypericum caprifoliatum on trophoblast-like cells.Methods:BeWo and JEG-3 trophoblast-like cells were submitted to different extract concentrations(1.5,10 and 15 μg/mL) and evaluated in relation to cell viability and in titro trophoblast differentiation and function.Cell viability was evaluated using WST-1 reagent.Differentiation was measured by luciferase production,hCG production/release,and mitogenactivated protein kinase signaling pathway activation.The function of the trophoblast-like cells was measured by<sup>25</sup>Ca<sup>2*</sup> influx evaluation.Results:The results showed a decrease in cell viability/proliferation.Both plants and different extracts induced a significant decrease in hCG production/release and luciferase production.H.connatum did not cause mitogen-activated protein kinase signaling pathway disturbance;however,Hypericum caprifoliatum n-hexane extract at 15 μg/mL inhibited extracellular signalregulated kinase 1/2 activation.The significant increase in Ca<sup>2+</sup> influx by JEG-3 cells was seen after short and long incubation times with H.connatum methanolie extract at 15 μg/mL.Conclusions:The results indicated that these two Hypericum species extracts can interfere on trophoblast differentiation and Ca<sup>2+</sup>influx,according to their molecular diversity.Although in vivo experiments are necessary to establish their action on placental formation and function,this study suggests that attention must be paid to the potential toxic effect of these plants. 展开更多
关键词 BEWO jeg-3 Hypericaceae ERK1/2 p38 Ca2+influx
JEG-3细胞分泌孕激素与HLA—GmRNA表达的相关性研究 预览
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作者 黄仲英 颜静 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第7期 1270-1271,1279,共3页
目的:探讨JEG-3细胞自身分泌孕激素与其HLA—GmRNA表达的相关性,为进行滋养叶细胞HLA—G分子表达的调控研究提供线索和依据。方法:培养JEG-3细胞,在不同时点(1,2,3,4,6,12,24h)收集细胞和培养上清液,分别采用实时定量PCR... 目的:探讨JEG-3细胞自身分泌孕激素与其HLA—GmRNA表达的相关性,为进行滋养叶细胞HLA—G分子表达的调控研究提供线索和依据。方法:培养JEG-3细胞,在不同时点(1,2,3,4,6,12,24h)收集细胞和培养上清液,分别采用实时定量PCR方法和EIA方法测定JEG-3细胞的HLA—GmRNA的表达及孕激素的浓度。结果:JEG-3细胞培养上清液中孕激素浓度与JEG-3细胞HLA—GmRNA表达的强度随时间进程具有相似变化趋势,经Spearman等级相关分析,JEG-3细胞自身孕激素的分泌与其HLA-GmRNA的表达量呈显著正相关(r=0.964,P〈0.05)。结论:JEG-3细胞孕激素的分泌与其HLA-GmRNA的表达量具有高度相关性,进一步体外研究孕激素对滋养叶细胞HLA—G分子表达的调节作用时,应考虑到JEG-3细胞自身孕激素分泌的影响。 展开更多
关键词 孕激素 HLA-G jeg-3 滋养叶细胞
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HLA-G反义基因增强免疫效应细胞杀伤活性的研究 预览
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作者 温见燕 张玲 +5 位作者 王芸 毛海婷 温培娥 崔树龄 李登华 顾洪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第2期 124-128,共5页
目的:研究HLA-G反义寡核苷酸逆转肿瘤细胞免疫逃逸,提高免疫效应细胞识别杀伤活性的作用和机制.方法:采用反义核酸技术合成HLA-G反义寡核苷酸(ASODN),硫代化修饰与脂质体形成复合物,转导入高表达HLA-G的绒毛膜癌细胞系JEG-3.采用RT-PCR... 目的:研究HLA-G反义寡核苷酸逆转肿瘤细胞免疫逃逸,提高免疫效应细胞识别杀伤活性的作用和机制.方法:采用反义核酸技术合成HLA-G反义寡核苷酸(ASODN),硫代化修饰与脂质体形成复合物,转导入高表达HLA-G的绒毛膜癌细胞系JEG-3.采用RT-PCR方法检测HLA-G mRNA表达水平的变化;流式细胞术检测细胞表面HLA-G蛋白表达水平的变化;MTT法检测:NK杀伤活性、CD3AK杀伤、增殖活性的变化;ELISA方法探讨ASODN调节CD3AK细胞因子IFN-γ产生的变化.结果:HLA-G ASODN可显著抑制HLA-G mRNA和蛋白水平的表达,逆转可溶型HLA-G分子对NK细胞杀伤活性的抑制作用;可部分逆转HLA-G分子对CD3AK细胞产生IFN-γ的抑制作用,并增强CD3AK的增殖活性,增强JEG-3细胞对CD3AK的杀伤敏感性.结论:HLA-G ASODN通过抑制肿瘤细胞HLA-G mRNA和蛋白水平的表达,增强NK,CD3AK的杀伤作用和机制,发挥逆转肿瘤细胞免疫逃逸作用. 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 HLA-G 肿瘤免疫逃逸 jeg-3
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子痫前期体外细胞系研究进展 预览
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作者 杨涛涛 王丽红 王永红 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2016年第16期2461-2463,共3页
子痫前期重度是造成孕妇及胎婴儿患病及死亡的主要原因。关于子痫前期重度的病因及发病机制目前尚未明确。目前对其发病机制研究的方法包括在体细胞研究、体外细胞培养研究、动物模型研究等。其中,体外细胞培养研究是众多学者常用的方... 子痫前期重度是造成孕妇及胎婴儿患病及死亡的主要原因。关于子痫前期重度的病因及发病机制目前尚未明确。目前对其发病机制研究的方法包括在体细胞研究、体外细胞培养研究、动物模型研究等。其中,体外细胞培养研究是众多学者常用的方法。本文对近年来有关子痫前期发病机制的体外细胞研究进展进行综述。 展开更多
关键词 子痫前期重度 体外细胞 HTR-8/SVnea jeg-3 DNK
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