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F10基因过表达及沉默对绒癌细胞系JEG-3侵袭性的影响 被引量:1
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作者 苏晓华 庞战军 《中华实用诊断与治疗杂志》 2015年第5期444-447,共4页
目的探讨F10基因过表达及沉默对绒癌细胞系JEG-3侵袭相关蛋白酶表达的影响。方法采用细胞转染技术及RNA干扰技术,分别建立和筛选出F10基因稳定过表达及沉默的绒癌细胞系JEG-3。将SPF级裸鼠(4~5周龄)30只随机分为F10过表达组、F10沉默... 目的探讨F10基因过表达及沉默对绒癌细胞系JEG-3侵袭相关蛋白酶表达的影响。方法采用细胞转染技术及RNA干扰技术,分别建立和筛选出F10基因稳定过表达及沉默的绒癌细胞系JEG-3。将SPF级裸鼠(4~5周龄)30只随机分为F10过表达组、F10沉默组和未处理组各10只,分别接种F10基因过表达的JEG-3细胞、F10基因沉默的JEG-3细胞和未处理的JEG-3细胞。于接种5周后处死裸鼠取皮下肿瘤,采用免疫组织化学法和Western blot法检测各组瘤体组织中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase,TIMP-1),血浆纤溶酶原激活物抑制因子(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)等侵袭相关蛋白酶的表达,并进行比较。结果免疫组织化学结果显示,F10过表达组成瘤组织中MMP-2、MMP-8、MMP-11、MMP-16、MMP-19蛋白表达水平(0.332±0.037、0.473±0.089、0.441±0.031、0.470±0.040、0.548±0.062)高于未处理组(0.209±0.021、0.314±0.108、0.207±0.025、0.400±0.057、0.466±0.038)和F10沉默组(0.049±0.013、0.168±0.034、0.149±0.024、0.240±0.024、0.175±0.029)(P〈0.05),未处理组高于F10沉默组(P〈0.05);F10过表达组TIMP-1(0.191±0.027)和PAI-1蛋白(0.130±0.020)表达水平低于未处理组(0.249±0.036、0.284±0.020)和F10沉默组(0.310±0.018、0.463±0.115)(P〈0.05),未处理组低于F10沉默组(P〈0.05)。wesrern blot检测结果显示,上述侵袭相关蛋白酶在3组间比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 F10通过上调MMP-2、MMP-8、MMP-11、MMP-16、MMP-19表达,下调TIMP-1、PAI-1表达,促进绒癌细胞增殖、侵袭和转移。 展开更多
关键词 绒癌 F10基因 基质金属蛋白酶 血浆纤溶醇原激活物抑制因子 JEG-3细胞
葡萄胎病理相关新基因F10与绒癌细胞系JEG-3成瘤性的关系 被引量:1
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作者 苏晓华 庞战军 苏桂栋 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期707-711,共5页
目的:探讨葡萄胎病理相关新基因F10与绒癌细胞系JEG-3裸鼠皮下成瘤的关系。方法通过细胞转染技术及RNA干扰技术,分别建立和筛选出F10基因稳定过表达及沉默的绒癌细胞系JEG-3。取SPF级裸鼠(4~5周龄)30只,随机均分为JEG-3 F10过表达... 目的:探讨葡萄胎病理相关新基因F10与绒癌细胞系JEG-3裸鼠皮下成瘤的关系。方法通过细胞转染技术及RNA干扰技术,分别建立和筛选出F10基因稳定过表达及沉默的绒癌细胞系JEG-3。取SPF级裸鼠(4~5周龄)30只,随机均分为JEG-3 F10过表达组、JEG-3 F10沉默组、JEG-3未处理组(n=10),分别接种F10基因过表达的JEG-3细胞、F10基因沉默的JEG-3细胞和未处理的JEG-3细胞株5×107个于颈背部皮下。接种后每3~4 d称量裸鼠质量观察,记录肿瘤发生时间,观察皮下肿瘤的生长情况。绘制在体肿瘤生长曲线,计算各组裸鼠的成瘤率。结果3组的成瘤率均为100%(10/10)。JEG-3 F10过表达组、JEG-3 F10沉默组、JEG-3未处理组的成瘤时间分别为6.2±0.78、7±2.49、6.3±0.67 d,组间比较无统计学差异(F=0.781,P=0.468)。JEG-3 F10过表达组肿瘤的在体生长速度较JEG-3 F10沉默组、JEG-3未处理组增快,差异有统计学意义(P〈0.05),JEG-3 F10未处理组肿瘤的在体生长速度较JEG-3 F10沉默组快(P〈0.05)。细胞接种5周后处死小鼠,取瘤组织称重,JEG-3 F10过表达组、JEG-3 F10沉默组、JEG-3未处理组肿瘤重量分别为571.1±221.10 mg、136.2±66.25 mg、354.5±116.23 mg,组间比较存在统计学差异(F=21.199,P=0.000)。结论 F10基因与绒癌细胞系JEG-3的增殖调节有关,可增强JEG-3细胞系在裸鼠体内的致瘤性。 展开更多
关键词 绒癌 F10基因 JEG-3细胞 成瘤性试验
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MiR-30a-3p对人滋养肿瘤细胞系JEG-3细胞侵袭功能的影响
3
作者 孙晓娈 尹国武 +1 位作者 延佳佳 朱晓明 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第18期3422-3425,共4页
目的:MiRNAs对于胎盘的形成和正常妊娠的维持起着至关重要的作用,它在胎盘中的表达失衡的可能导致了妊娠相关疾病的发生,我们前期研究发现miR-30a-3p在子痫前期患者胎盘上特异性高表达,推测miR-30a-3p可能参与了子痫前期的发生发展过程... 目的:MiRNAs对于胎盘的形成和正常妊娠的维持起着至关重要的作用,它在胎盘中的表达失衡的可能导致了妊娠相关疾病的发生,我们前期研究发现miR-30a-3p在子痫前期患者胎盘上特异性高表达,推测miR-30a-3p可能参与了子痫前期的发生发展过程,本课题通过观察miR-30a-3p对人滋养肿瘤细胞系JEG-3细胞侵袭能力的影响,深入探讨miR-30a-3p在子痫前期发病过程中的作用。方法:应用瞬时转染技术在人滋养肿瘤细胞系JEG-3细胞中分别转染miR-30a-3p mimics、mimics NC为miR-30a-3p过表达组和阴性对照组,空白转染组为空白对照组,利用荧光实时定量PCR技术检测各组细胞中miR-30a-3p的表达,Transwell实验检测各组细胞侵袭能力的差别。结果:荧光实时定量PCR结果显示miR-30a-3p过表达组与阴性对照组、空白对照组相比miR-30a-3p的表达量明显升高,差异具有统计学意义(P〈0.05);Transwell实验结果显示miR-30a-3p过表达组细胞的侵袭能力与阴性对照组、空白对照组相比均有降低,差异具有统计学意义(P〈0.05)。阴性对照组与空白对照组的侵袭能力差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:miR-30a-3p可以显著下调JEG-3细胞的侵袭力,miR-30a-3p有可能通过降低滋养细胞的浸润能力,导致滋养细胞对子宫肌层和螺旋动脉的浸润不足,造成"胎盘浅着床",从而在子痫前期的发病过程中发挥了重要的作用,miR-30a-3p有望成为诊治子痫前期疾病的靶点。 展开更多
关键词 miR-30a-3p JEG-3细胞 侵袭
转化生长因子β1作用下绒毛膜癌JEG-3细胞c-myc mRNA表达 预览 被引量:1
4
作者 毛晓丹 谭宇思 +3 位作者 李玉红 许倩 刘绍晨 张孔雁 《临床和实验医学杂志》 2014年第3期168-171,共4页
目的 观察在转化生长因子β1(TGF-β1)、-β1受体Ⅰ抑制剂(LY364947)和p38MAPK抑制剂(SB203580)作用下,绒毛膜癌JEG- 3细胞中c-myc mRNA的表达变化.方法 用5 ng/ml的TGF-β1以及1 μM 、3 μM TGF受体Ⅰ抑制剂(LY364947)和1 μM... 目的 观察在转化生长因子β1(TGF-β1)、-β1受体Ⅰ抑制剂(LY364947)和p38MAPK抑制剂(SB203580)作用下,绒毛膜癌JEG- 3细胞中c-myc mRNA的表达变化.方法 用5 ng/ml的TGF-β1以及1 μM 、3 μM TGF受体Ⅰ抑制剂(LY364947)和1 μM 、3 μM p38MAPK抑制剂(SB203580)作用JEG- 3细胞,用qRT-PCR技术检测各组细胞中c-myc mRNA的表达差异.结果 与正常对照组比较,5 ng/ml TGF-β1组细胞中c-myc mRNA的表达水平升高(P〈0.05);p38 MAPK抑制剂(SB203580)和TGF-β受体Ⅰ抑制剂(LY364947)均抑制了c-myc mRNA的表达,且抑制作用与应用浓度呈正相关(P〈0.05).结论 c-myc作为TGFβ1/Smads通路的下游靶基因,其调控有赖于TGFβ1与受体Ⅰ的结合,同时,在绒毛膜癌JEG-3细胞中,TGF-β1介导的Smad途径与 p38 MAPK信号转导存在交互作用. 展开更多
关键词 绒毛膜癌 JEG-3细胞 TGF-Β1 TGF-β1受体Ⅰ抑制剂 P38MAPK抑制剂 C-MYC
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紫杉醇对绒癌JEG-3细胞增殖与凋亡的影响 预览
5
作者 李岑 刘惠宁 《安徽医药》 2014年第5期930-933,共4页
目的该文围绕紫杉醇对人绒毛膜癌细胞JEG-3的增殖与凋亡的影响进行研究。方法通过MTT法检测细胞增殖及流式细胞术检测不同浓度紫杉醇作用下细胞的凋亡及其对细胞周期的影响。结果随紫杉醇浓度的增加或时间的延长,JEG-3细胞增殖抑制率及... 目的该文围绕紫杉醇对人绒毛膜癌细胞JEG-3的增殖与凋亡的影响进行研究。方法通过MTT法检测细胞增殖及流式细胞术检测不同浓度紫杉醇作用下细胞的凋亡及其对细胞周期的影响。结果随紫杉醇浓度的增加或时间的延长,JEG-3细胞增殖抑制率及凋亡率均增大,各组间比较有统计学意义(P〈0.05)。结论该次实验的结果显示紫杉醇在抑制绒癌细胞JEG-3增殖及促凋亡方面均有显著的作用。 展开更多
关键词 紫杉醇 JEG-3细胞 增殖 凋亡
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miR-152对HLA-G的作用靶点预测与验证 预览
6
作者 朱晓明 韩涛 +3 位作者 苏小花 黄琴莉 常春子 姚元庆 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第10期2180-2182,共3页
目的:预测miR-152分子对HLA-G的作用靶点并进行实验验证.方法:采用PITA软件分析miR-152与HLA-G的相互作用位点,构建含有该作用位点的HLA-G 3UTR真核表达质粒pMIR-UTR.转染实验分为3组:pMIR-UTR与pre-miR-152共转染JEG-3滋养细胞(实... 目的:预测miR-152分子对HLA-G的作用靶点并进行实验验证.方法:采用PITA软件分析miR-152与HLA-G的相互作用位点,构建含有该作用位点的HLA-G 3UTR真核表达质粒pMIR-UTR.转染实验分为3组:pMIR-UTR与pre-miR-152共转染JEG-3滋养细胞(实验组),仅转染pMIR-UTR质粒(空白对照),共转染pMIR-UTR与pre-miR-control分子(阴性对照),所有细胞均转染pMIR-β-gal质粒以标准化实验背景,转染48h后进行荧光素酶检测.结果:JEG-3细胞中HLA-G的3'UTR存在与miR-152的种子序列完全互补的结构.荧光素酶报告系统结果显示:与空白对照组和阴性对照组相比,转染pre-miR-152的实验组其荧光素酶活性显著降低(P<0.05).结论:miR-152可以通过作用于HLA-G的3 'UTR区从而抑制HLA-G的表达. 展开更多
关键词 miR-152 JEG-3细胞 人类白细胞抗原-G
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脂质体法介导EGFP基因在细胞中的表达分析
7
作者 张旭 马红 +4 位作者 孙亚蒙 汪亮 付博 李忠秋 刘娣 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第4期12-13,16共3页
为了研究增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)在上皮细胞中的表达情况,试验采用脂质体法介导真核表达质粒EGFP—C1转染PK15细胞和JEG-3细胞,分别在转染的24小时和48小时观察荧光的表达情况。结果表明:在荧... 为了研究增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)在上皮细胞中的表达情况,试验采用脂质体法介导真核表达质粒EGFP—C1转染PK15细胞和JEG-3细胞,分别在转染的24小时和48小时观察荧光的表达情况。结果表明:在荧光显微镜下,EGFP蛋白在PK15细胞和JEG-3细胞中均得到表达,相同条件下PK15细胞的转染效率高于JEG-3细胞,且在JEG-3细胞中EGFP均一表达,而在部分PK15细胞中EGFP表达主要聚集于细胞核区域,细胞状态对亚细胞定位存在重要的影响。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 脂质体 PK15细胞 JEG-3细胞
miR-152影响NK细胞对JEG-3细胞的杀伤效应 预览
8
作者 朱晓明 韩涛 +4 位作者 王华 王鑫 刘成娟 师增增 黄剑磊 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第6期1202-1203,共2页
目的:研究miR-152分子对NK细胞杀伤JEG-3细胞效应的影响。方法:在滋养细胞肿瘤细胞系JEG-3细胞中分别转染pre-miR-152(实验组),Cy3标记的pre-miRNA-control(阴性对照),空白对照(NC)为未转染的JEG-3细胞。转染48h进行NK细胞的细... 目的:研究miR-152分子对NK细胞杀伤JEG-3细胞效应的影响。方法:在滋养细胞肿瘤细胞系JEG-3细胞中分别转染pre-miR-152(实验组),Cy3标记的pre-miRNA-control(阴性对照),空白对照(NC)为未转染的JEG-3细胞。转染48h进行NK细胞的细胞毒测定,观察各组NK细胞对JEG-3细胞的杀伤效应。结果:与对照组相比,实验组NK细胞对JEG-3细胞的平均杀伤率显著增高(P〈0.05),且随着效靶比的增高,杀伤率也增大。空白对照组与阴性对照组之间的NK细胞杀伤能力无显著差异(P〉0.05)。结论:miR-152可以提高NK细胞对滋养细胞的杀伤作用。 展开更多
关键词 miR-152 JEG-3细胞 细胞
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siRNA抑制PPARγ表达对绒癌细胞JEG-3侵袭力的影响 被引量:2
9
作者 许华 陈丽君 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期829-833,共5页
目的:采用小分子干扰RNA(siRNA)技术特异性地抑制绒癌细胞株JEG-3中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达,研究PPARγ影响JEG-3细胞侵袭力的机制.方法:将实验设为实验组(转染PPARγ基因的特异性siRNA)、阴性对照组(转... 目的:采用小分子干扰RNA(siRNA)技术特异性地抑制绒癌细胞株JEG-3中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达,研究PPARγ影响JEG-3细胞侵袭力的机制.方法:将实验设为实验组(转染PPARγ基因的特异性siRNA)、阴性对照组(转染阴性对照siRNA)和空白对照组(不转染任何siRNA片段,其它试剂与另两组相同),采用实时定量PCR技术从mRNA水平检测PPARγ及黏蛋白-1(MUC1)的表达;利用Transwell侵袭实验观察siRNA转染JEG-3细胞后细胞侵袭力的变化.结果:siRNA使PPARγ mRNA的表达水平下调了(75.0±0.8)% (P〈0.05),MUC1 mRNA的表达水平下调了(65.0±1.3)% (P〈0.05),JEG-3细胞侵袭Matrigel的能力显著增强(P〈0.05).结论:PPARγ表达水平的下降能相应下调MUC1的表达水平,并增强滋养细胞的侵袭能力,推测PPARγ可能通过调节MUC1基因影响滋养细胞的侵袭能力,从而参与了子痫前期等病理妊娠的发生. 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 小干扰RNA 黏蛋白-1 JEG-3细胞
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不同剂量IL-12对绒毛膜癌JEG-3细胞增殖的影响 预览 被引量:2
10
作者 张卓 李玉红 许倩 《临床和实验医学杂志》 2011年第3期 161-162,164,共3页
目的观察不同剂量白细胞介素-12(IL-12)对绒毛膜癌JEG-3细胞增殖能力的影响。方法体外培养人绒毛膜癌JEG-3细胞,分别给予不同剂量的IL-12进行诱导,四甲基氮唑(MTT)比色法检测细胞增殖能力的变化。结果 5 ng/ml、10 ng/ml、25 ng/ml... 目的观察不同剂量白细胞介素-12(IL-12)对绒毛膜癌JEG-3细胞增殖能力的影响。方法体外培养人绒毛膜癌JEG-3细胞,分别给予不同剂量的IL-12进行诱导,四甲基氮唑(MTT)比色法检测细胞增殖能力的变化。结果 5 ng/ml、10 ng/ml、25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml、200 ng/ml IL-12作用后,细胞增殖率显著降低(P〈0.01)。且绒毛膜癌JEG-3细胞对IL-12的诱导作用表现为良好的浓度效应。结论外源性IL-12能够抑制绒毛膜癌JEG-3细胞的增殖,具有良好的浓度依赖效应。其相关机制有待进一步探讨。 展开更多
关键词 绒毛膜癌 细胞介素-12 JEG-3细胞 细胞增殖 MTT法
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miR-152调节JEG-3细胞中HLA—G的表达 被引量:1
11
作者 朱晓明 王晓红 +2 位作者 姜锋 肖西峰 尹国武 《中华全科医学》 2011年第2期171-172,共2页
目的研究miR.152分子对JEG-3细胞中HIA—G表达水平的调控。方法在滋养细胞肿瘤细胞系JEG-3细胞中分别转染pre-miR-152(实验组),Cy3标记的pre—miRNA—control(阴性对照),空白对照(NC)为未转染的JEG-3细胞。转染48h、72h分别进... 目的研究miR.152分子对JEG-3细胞中HIA—G表达水平的调控。方法在滋养细胞肿瘤细胞系JEG-3细胞中分别转染pre-miR-152(实验组),Cy3标记的pre—miRNA—control(阴性对照),空白对照(NC)为未转染的JEG-3细胞。转染48h、72h分别进行RT.PCR与Westernblot实验检测细胞中miR-152、HLA—GmRNA与蛋白的表达水平。结果RT-PCR结果显示在细胞中转染pre—miR-152分子后miR-152的表达显著增高(P〈0.05);转染后HLA—GmRNA的表达水平在各组之间差异无统计学意义(P〉0.05)。Westernblot结果显示与对照组相比,实验组的HLA—G蛋白表达水平显著降低(P〈0.05)。结论miR-152可能在翻译水平抑制HLA-G的表达。 展开更多
关键词 miR-152 JEG-3细胞 HLA-G
转化生长因子-β1对人绒癌JEG-3细胞增殖及基质金属蛋白酶抑制剂-1的作用研究 预览
12
作者 李玉红 李晓茹 +2 位作者 许倩 史长华 张卓 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2010年第27期 3048-3050,共3页
目的观察转化生长因子(TGF)-β1不同作用时间对绒癌JEG-3细胞增殖及基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1的影响。方法以100μg/LTGF-β1处理JEG-3细胞,分别于不同时间收获细胞,采用MTT法于0、12、24、48h检测细胞的增殖活力,采用Western B... 目的观察转化生长因子(TGF)-β1不同作用时间对绒癌JEG-3细胞增殖及基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1的影响。方法以100μg/LTGF-β1处理JEG-3细胞,分别于不同时间收获细胞,采用MTT法于0、12、24、48h检测细胞的增殖活力,采用Western Blotting及RT-PCR技术于0、12、24、48、72h分析TIMP-1在蛋白和转录水平的表达情况。结果随着100μg/LTGF-β1作用时间的延长,各实验组的细胞增殖率逐渐升高,差异有统计学意义(P〈0.05);TIMP-1蛋白和TIMP-1 mRNA的表达随着100μg/LTGF-β1作用时间的延长均呈明显的增加趋势(P〈0.05)。结论绒癌JEG-3细胞对外源性的TGF-β1有良好的反应性并呈时间依赖性,100μg/LTGF-β1可促进JEG-3细胞增殖及TIMP-1蛋白及其mRNA的表达。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β1 JEG-3细胞 细胞增殖 基质金属蛋白酶-1
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17β-雌二醇调节JEG-3细胞的microRNA表达研究 预览 被引量:1
13
作者 赵俊丽 李鹏飞 侯亚义 《南京晓庄学院学报》 2010年第3期 52-56,共5页
目的:探讨17β-雌二醇(E2)调节人绒毛癌细胞系JEG-3的microRNA的表达.方法:定量PCR检测E2对microRNA的表达.结果E2能够促进JEG-3 miR16、miR126、miR335、miR451、miR491-5p、miR-520g和miR612的表达,降低miR-26b和miR-29b的表达.... 目的:探讨17β-雌二醇(E2)调节人绒毛癌细胞系JEG-3的microRNA的表达.方法:定量PCR检测E2对microRNA的表达.结果E2能够促进JEG-3 miR16、miR126、miR335、miR451、miR491-5p、miR-520g和miR612的表达,降低miR-26b和miR-29b的表达.结论:E2能够对JEG-3细胞的microRNA表达产生调节作用,提示我们在妊娠过程中E2可以通过调节microRNA来影响滋养层细胞增殖、迁移、浸润和血管重塑等功能,并可能为探讨子痫前期等的发病机制提供线索. 展开更多
关键词 17Β-雌二醇 JEG-3细胞 MICRORNA
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印迹基因H19对人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3侵袭能力的影响 预览 被引量:1
14
作者 俞丽丽 李力 +6 位作者 陈鸣 张伟 卢林杉 赵丹 陈星云 李平 周元国 《中华医院感染学杂志》 CAS 北大核心 2008年第3期 332-335,共4页
目的探讨印迹基因H19对滋养细胞侵袭能力的影响,以期从分子遗传学角度来阐明滋养细胞侵袭行为的调控机制。方法含人全长H19 cDNA重组真核表达质粒pRc/CMV经测序鉴定正确后,转染滋养细胞株JEG-3,观察其H19 mRNA表达和细胞侵袭力的变化。... 目的探讨印迹基因H19对滋养细胞侵袭能力的影响,以期从分子遗传学角度来阐明滋养细胞侵袭行为的调控机制。方法含人全长H19 cDNA重组真核表达质粒pRc/CMV经测序鉴定正确后,转染滋养细胞株JEG-3,观察其H19 mRNA表达和细胞侵袭力的变化。结果质粒转染JEG-3细胞的转染效率〉50%,转染目的基因H19后mRNA表达较对照组显著升高;转染目的基因后JEG-3细胞穿膜细胞数明显少于未转染组和空载体转染组。结论H19基因过表达可抑制JEG-3的侵袭能力,为H19调控滋养细胞侵袭行为提供了直接的实验证据。 展开更多
关键词 H19基因 JEG-3细胞 侵袭
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RNA干扰技术抑制JEG-3细胞中HMGA1的表达 预览 被引量:1
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作者 肖西峰 张平 李磊 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第9期 1466-1468,共3页
目的:以人类高迁移率蛋白A1(HMGA1)为靶基因,采用RNA干扰(RNAi)技术特异性地抑制JEG-3细胞中HMGA1的表达。方法:针对HMGA1基因设计、合成一段小干扰RNA(siRNA),用脂质体lipofectamine2000将该siRNA转染JEG-3细胞,采用RT—PCR... 目的:以人类高迁移率蛋白A1(HMGA1)为靶基因,采用RNA干扰(RNAi)技术特异性地抑制JEG-3细胞中HMGA1的表达。方法:针对HMGA1基因设计、合成一段小干扰RNA(siRNA),用脂质体lipofectamine2000将该siRNA转染JEG-3细胞,采用RT—PCR和Westernblot分别从mRNA和蛋白质水平检测该siRNA对HMGA1表达的影响。结果:针对HMGA1的siRNA能够明显下调JEG-3细胞中HMGA1的表达水平,并具有良好的特异性。结论:在JEG-3细胞系中采用RNAi技术特异性下调了HMGA1基因的表达,为研究HMGA1基因在肿瘤细胞中的作用奠定实验基础,也为进一步研究HMGA1在治疗人类绒毛膜细胞癌的临床应用提供了有益帮助。 展开更多
关键词 HMGA1 RNA干扰 小分子扰核糖核酸 JEG-3细胞
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HLA-G基因siRNA真核表达质粒的构建及其对转染JEG-3细胞株HLA-G表达的抑制作用 被引量:1
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作者 陈建辉 姚元庆 +3 位作者 侯开波 王晓蓉 雷迎峰 尹文 《实用医学杂志》 CAS 2007年第15期 2295-2298,共4页
目的:构建针对人类白细胞抗原-G基因(human leukocyte antigen-G,HLA-G)基因siRNA表达质粒,观察其对转染JEG-3细胞的HLA-G基因表达的抑制作用。方法:选择RNA干涉靶序列,体外合成两段互补的寡核苷酸,通过与线性化pSuppressor-U6-neo... 目的:构建针对人类白细胞抗原-G基因(human leukocyte antigen-G,HLA-G)基因siRNA表达质粒,观察其对转染JEG-3细胞的HLA-G基因表达的抑制作用。方法:选择RNA干涉靶序列,体外合成两段互补的寡核苷酸,通过与线性化pSuppressor-U6-neo连接、转化大肠杆菌,扩增、纯化得到所需质粒,通过琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列。将重组真核表达质粒pSuppressor-U6-neo-HLA-G用脂质体法转染JEG-3绒癌细胞株。应用RT-PCR、Western-blot方法检测转染的JEG-3细胞中HLA-G基因的表达水平。结果:双酶切鉴定及测序图显示,插入的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符。RT-PCR和Western-blot结果均表明瞬时转染重组pSuppressor-U6-neo-HLA-G质粒明显抑制了JEG-3细胞中HLA-G基因的表达。结论:本试验成功构建了针对HLA-G基因的siRNAs表达质粒pSuppressor-U6-neo-HLA-G,瞬时转染JEG-3细胞后可以明显抑制HLA-G基因的表达。 展开更多
关键词 HLA抗原 RNA 小分子干扰 转染 JEG-3细胞
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基质金属蛋白酶MMP-26能有效促进人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3浸润能力 预览 被引量:4
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作者 吴晓秋 李玉侠 +3 位作者 付雅媛 李殿俊 SANG Qing-Xiang 王雁玲 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS 北大核心 2006年第6期 524-530,共7页
胚胎植入过程中,滋养层细胞浸润与肿瘤的迁移过程非常相似,但显著的区别在于前者是受严格调控的有节制的浸润,基质金属蛋白酶(MMPs)的许多成员在其中起重要的作用.MMP-26是近年来发现的MMPs家族的新成员,它在滋养层细胞中的作用... 胚胎植入过程中,滋养层细胞浸润与肿瘤的迁移过程非常相似,但显著的区别在于前者是受严格调控的有节制的浸润,基质金属蛋白酶(MMPs)的许多成员在其中起重要的作用.MMP-26是近年来发现的MMPs家族的新成员,它在滋养层细胞中的作用所知甚少.利用国际常用的人滋养层细胞模型——人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)作为体外实验模型,探讨MMP-26在人滋养层细胞浸润调节中的作用.将含有MMP-26全长cDNA的pCR3.1质粒转染到JEG-3细胞中,获得过量表达MMP-26基因的稳定细胞系JEG-3/MMP-26;细胞浸润分析表明JEG/MMP-26细胞的浸润能力较母本细胞明显增强;RT-PCR和明胶酶谱分析显示JEG-3/MMP-26细胞中MMP-9的表达和分泌水平提高:双荧光免疫细胞化学进一步显示MMP-26和MMP-9蛋白在细胞中有共定位现象.上述结果表明MMP-26能有效促进人滋养层细胞浸润,其作用可能是通过与其他MMP分子(如MMP-9)的协调来实现的. 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶 JEG-3细胞 细胞浸润 人滋养层细胞
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RNA干扰技术抑制JEG-3细胞中HLA-G的表达 被引量:4
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作者 侯开波 姚元庆 +4 位作者 雷迎峰 王晓红 赵宏喜 尹文 朱晓明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS 北大核心 2006年第2期 255-257,共3页
目的: 以人类白细胞抗原G基因(HLA-G)为靶基因, 采用RNA干扰(RNAi)技术特异性地抑制JEG-3细胞中HLA-G的表达.方法: 针对HLA-G基因设计一段小干扰RNA(siRNA), 由Ambion公司化学合成, 用脂质体lipofectamine2000将该siRNA转染JEG-... 目的: 以人类白细胞抗原G基因(HLA-G)为靶基因, 采用RNA干扰(RNAi)技术特异性地抑制JEG-3细胞中HLA-G的表达.方法: 针对HLA-G基因设计一段小干扰RNA(siRNA), 由Ambion公司化学合成, 用脂质体lipofectamine2000将该siRNA转染JEG-3细胞, 采用RT-PCR、流式细胞术和Western blot 分别从mRNA和蛋白质水平检测该siRNA对HLA-G表达的影响.结果: 针对HLA-G的siRNA能够明显下调JEG-3细胞中HLA-G的表达水平, 并具有良好的特异性.结论: 在JEG-3细胞系中采用RNAi技术特异性下调了HLA-G基因的表达, 为进一步研究HLA-G在人类的母胎免疫耐受、正常妊娠的维持及助孕技术应用等方面的作用奠定了实验基础. 展开更多
关键词 HLA-G RNA干扰 JEG-3细胞
绒毛膜癌细胞株JEG-3细胞中DLX4基因的表达 预览 被引量:3
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作者 孙云燕 鹿欣 +3 位作者 殷莲花 赵凤娣 易晓芳 丰有吉 《中华妇产科杂志》 CAS 北大核心 2004年第10期 703-704,共2页
同源异型盒基因(homeobox genes, Hbx 基因)是控制细胞分化和发育的一系列转录因子[1,2].DLX4基因是Hbx基因家族的成员之一,同其他Hbx基因功能类似,调节上皮和间充质细胞的相互作用,在胚胎发育中起重要的作用.近年来的研究发现,DLX4基... 同源异型盒基因(homeobox genes, Hbx 基因)是控制细胞分化和发育的一系列转录因子[1,2].DLX4基因是Hbx基因家族的成员之一,同其他Hbx基因功能类似,调节上皮和间充质细胞的相互作用,在胚胎发育中起重要的作用.近年来的研究发现,DLX4基因的表达异常与乳腺癌[3]、结肠癌以及白血病[4]的发生有关.本研究检测了DLX4基因在绒毛膜癌(绒癌)细胞株JEG-3细胞中的表达,以探讨其与绒癌发生的关系. 展开更多
关键词 HBX基因 JEG-3细胞 绒毛膜癌 表达 细胞 DLX 绒癌 异型 转录因子 发育
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人绒毛膜促性腺激素对JEG—3细胞表达VEGF的影响 被引量:2
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作者 庞战军 邢福祺 《中国病理生理杂志》 CAS 北大核心 2003年第1期 51-54,共4页
目的:揭示人绒毛膜促性腺激素(hCG)对滋养层细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法: 以滋养层细胞来源的JEG-3细胞系为研究对象,采用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测VEGF mRNA的表达.结果:分别用(0、50、500、5 000、25 ... 目的:揭示人绒毛膜促性腺激素(hCG)对滋养层细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法: 以滋养层细胞来源的JEG-3细胞系为研究对象,采用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测VEGF mRNA的表达.结果:分别用(0、50、500、5 000、25 000) U/L hCG处理48 h后,JEG-3细胞中VEGF的表达被诱导增高,且包括VEGF121、VEGF165、VEGF189在内的VEGF亚型均受到诱导.另外,观察VEGF在25 000 U/L hCG处理的JEG-3细胞中表达的时间变化,结果发现VEGF在JEG-3细胞中的表达在经过短暂的诱导后略降低. 结论: hCG可能通过调节VEGF在滋养层细胞或滋养层细胞来源的绒癌细胞中的表达,进而影响细胞的增殖、迁移或浸润转移. 展开更多
关键词 人绒毛膜促性腺激素 JEG-3细胞 滋养层 肿瘤侵犯 内皮生长因子 滋养层细胞
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