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UPLC法同时测定狼毒大戟中岩大戟内酯A和B 预览
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作者 刘雷 马玉坤 +3 位作者 郭丽娜 马德志 孙宇 刘吉成 《中成药》 CSCD 北大核心 2018年第7期1547-1550,共4页
目的建立UPLC法同时测定狼毒大戟Euphorbia fischeriana Steud.中岩大戟内酯A和B的含有量。方法狼毒大戟甲醇提取物的分析采用Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;检测波长25... 目的建立UPLC法同时测定狼毒大戟Euphorbia fischeriana Steud.中岩大戟内酯A和B的含有量。方法狼毒大戟甲醇提取物的分析采用Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;检测波长250 nm;柱温35℃。结果岩大戟内酯A和B分别在1.80454.12μg/mL(r=0.999 5)和9.663209.8μg/mL(r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.3%、98.6%,RSD分别为0.76%、0.77%。结论该方简便准确,重复性好,可用于狼毒大戟的质量控制。 展开更多
关键词 狼毒大戟 岩大戟内酯A 岩大戟内酯B UPLC
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细胞自噬对岩大戟内酯B诱导的白血病细胞HL-60凋亡的影响 预览
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作者 王佳贺 王超 《中国医药导报》 CAS 2018年第28期13-16,共4页
目的探讨自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和自噬激动剂雷帕霉素(RAPA)对岩大戟内酯B诱导的人白血病细胞系HL-60细胞凋亡的影响。方法采用Western blot分析检测不同浓度的岩大戟内酯B作用不同时间后LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和自噬调节因子... 目的探讨自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和自噬激动剂雷帕霉素(RAPA)对岩大戟内酯B诱导的人白血病细胞系HL-60细胞凋亡的影响。方法采用Western blot分析检测不同浓度的岩大戟内酯B作用不同时间后LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和自噬调节因子Beclin-l等的表达;将HL-60细胞分为空白对照组、岩大戟内酯B组、岩大戟内酯B联合5mmol/L3-MA组、岩大戟内酯B联合10mmol/L3-MA组、岩大戟内酯B联合10nmol/LRAPA组和岩大戟内酯B联合20nmol/LRAPA组。采用AnnexinV—FITC/PI双染流式细胞仪检测人白血病细胞系HL-60细胞的凋亡情况;检测Caspase-3蛋白酶的活性。结果岩大戟内酯B能够诱导白血病细胞HL-60自噬,增加LC3-Ⅱ和自噬调节因子Beclin-1的表达(P〈0.05):3-MA可降低岩大戟内酯B诱导的HL-60细胞凋亡和Caspase-3的活性(P〈0.05),而RAPA则提高了岩大戟内酯B诱导的HL-60细胞凋亡率及Caspase-3的活性(P〈0.05)。结论岩大戟内酯B可诱导HL-60细胞自噬,细胞白噍在岩大戟内酯B诱导的HL-60细胞凋亡中起到了非常重要的作用。 展开更多
关键词 岩大戟内酯B 白血病 HL-60细胞 细胞凋亡 自噬
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正交试验法优选狼毒大戟中活性成分的提取工艺
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作者 房俊龙 李文静 洪博 《中国药师》 CAS 2018年第4期623-625,687共4页
目的:优选狼毒大戟中活性成分的最佳提取工艺。方法:选用L_9(3~4)正交试验设计,以提取物中岩大戟內酯B和狼毒乙素的含量为指标,考察乙醇浓度、溶剂用量、提取温度和提取时间对提取效果的影响。结果:最佳提取工艺为料液比1∶10,加... 目的:优选狼毒大戟中活性成分的最佳提取工艺。方法:选用L_9(3~4)正交试验设计,以提取物中岩大戟內酯B和狼毒乙素的含量为指标,考察乙醇浓度、溶剂用量、提取温度和提取时间对提取效果的影响。结果:最佳提取工艺为料液比1∶10,加入浓度为70%的乙醇溶液,以70℃为提取温度,加热回流提取1 h。结论:优选得到的提取工艺稳定、合理、可行,操作简单,能耗低,大大提高了岩大戟内酯B和狼毒乙素的提取率。 展开更多
关键词 狼毒大戟 岩大戟内酯B 狼毒乙素 高效液相色谱法 正交试验 提取工艺
岩大戟内酯A和岩大戟内酯B通过Akt信号通路影响MCF-7细胞的增殖和凋亡 预览 被引量:1
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作者 沈雷 张善强 +3 位作者 刘雷 吴雨轩 刘树民 刘吉成 《天然产物研究与开发》 CSCD 北大核心 2017年第8期1374-1379,共6页
观察岩大戟内酯A(Jolkinolide A,JA)和岩大戟内酯B(Jolkinolide B,JB)二萜类单体对MSC-7乳腺癌细胞的增殖、凋亡影响,并分析JA或JB的作用机制。若分别用40、60、80 μg/mL浓度的JA(或JB)刺激MCF-7细胞,则为不同浓度的JA刺激组... 观察岩大戟内酯A(Jolkinolide A,JA)和岩大戟内酯B(Jolkinolide B,JB)二萜类单体对MSC-7乳腺癌细胞的增殖、凋亡影响,并分析JA或JB的作用机制。若分别用40、60、80 μg/mL浓度的JA(或JB)刺激MCF-7细胞,则为不同浓度的JA刺激组或JB刺激组,正常培养的MCF-7为对照组。分别用CCK-8细胞增殖实验检测JA刺激组或JB刺激组的细胞增殖OD值,Western Blot实验检测JA刺激组或JB刺激组MCF-7细胞中Caspase 9蛋白表达,Annexin V-FITC/PI双染检测MCF-7细胞凋亡,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测JA刺激组或JB刺激组细胞中Akt、STAT3蛋白的含量。结果发现,与40、60、80 μg/mL的JA刺激组MCF-7细胞分别相比,相应浓度JB刺激组的MCF-7细胞增殖OD值均明显降低,但是JB刺激组MCF-7细胞的Caspase 9蛋白相对吸光度、凋亡率显著升高;相对于40、60、80 μg/mL JA刺激组,相应浓度的JB-刺激组MCF-7细胞上清液中的VEGF含量分别均降低,相应浓度JB刺激组MCF-7细胞的Akt、STAT3蛋白表达均降低。实验结果表明:岩大戟内酯B明显地通过抑制Akt-STAT3信号通路而抑制MCF-7细胞增殖,促进MCF-7凋亡。 展开更多
关键词 岩大戟内酯A 岩大戟内酯B MCF-7细胞 细胞增殖 AKT信号通路
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不同炮制方法对蒙古族药狼毒毒效的影响
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作者 李佟拉嘎 于欢 +2 位作者 龚千锋 奥·乌力吉 王秀兰 《中国实验方剂学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第22期27-31,共5页
目的:探讨蒙古族药狼毒炮制减毒药性理论的科学性,了解其炮制前后药效变化,并建立各样品中岩大戟内酯B和狼毒乙素含量测定的RP-HPLC。方法:采用HPLC-Q-TOF/MS技术比较蒙古族药狼毒炮制前后的成分差异;通过正常小鼠的急性毒性作用及泻... 目的:探讨蒙古族药狼毒炮制减毒药性理论的科学性,了解其炮制前后药效变化,并建立各样品中岩大戟内酯B和狼毒乙素含量测定的RP-HPLC。方法:采用HPLC-Q-TOF/MS技术比较蒙古族药狼毒炮制前后的成分差异;通过正常小鼠的急性毒性作用及泻下作用比较炮制对该药材毒性和药效的影响,利用RP-HPLC测定蒙古族药狼毒及其炮制品中岩大戟内酯B和狼毒乙素的含量,流动相乙腈(A)-0.1%冰乙酸水溶液(B)梯度洗脱(0-5 min,40%A;5-10 min,40%-50%A;10-30 min,50%-55%A;30-40 min,55%-60%A;40-45 min,60%-70%A),检测波长250 nm,柱温30℃。结果:与生品相比,蒙古族药狼毒在炮制后奶制品、诃子汤制品、酒制品中分别有30,20,21个峰的含量降低。狼毒生品及奶、酒、诃子汤制品粉末的半数致死量分别为2.694,3.642,3.461,4.309 g·kg^-1。药效试验表明药物粉末给药剂量为0.53,0.133 g·kg^-1时,狼毒生品及其各炮制品均能明显提高小鼠小肠墨汁推进率。狼毒中狼毒乙素和岩大戟内酯B的线性范围分别为0.060 12-1.202 4,0.060 72-1.214 4μg,平均加样回收率分别为107.55%(RSD 4.7%)和103.03%(RSD 3.6%)。结论:蒙古族药狼毒不同方法炮制后其化学成分含量会不同程度降低,进而可能会降低部分刺激性成分含量或使其转化为毒性较小成分,从而降低了其毒性。蒙古族药狼毒炮制后的粉末较未经炮制的粉末毒性降低,炮制后对该药材的泻下作用无影响,即炮制可减毒保效。狼毒炮制机制可能与炮制后化学成分含量变化有关。建立的HPLC准确可靠、重复性好,可用于蒙古族药狼毒及其炮制品中岩大戟内B和狼毒乙素的含量测定。 展开更多
关键词 蒙古族药 狼毒 炮制 毒性 药效 岩大戟内酯B
岩大戟内酯B刺激MCF-7细胞条件培养基降低人脐静脉血管内皮细胞的增殖和迁移
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作者 沈雷 李永涛 +3 位作者 张善强 孙宇 刘树民 刘吉成 《中国实验方剂学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第22期102-107,共6页
目的:观察岩大戟内酯B(jolkinolide B,JB)刺激MCF-7条件培养基对人脐静脉血管内皮细胞的影响,并分析岩大戟内酯B的作用机制。方法:分别用25,55,85 mg·L^-1岩大戟内酯B刺激MCF-7人乳腺癌细胞为JB刺激组,正常培养的MCF-7细胞为MC... 目的:观察岩大戟内酯B(jolkinolide B,JB)刺激MCF-7条件培养基对人脐静脉血管内皮细胞的影响,并分析岩大戟内酯B的作用机制。方法:分别用25,55,85 mg·L^-1岩大戟内酯B刺激MCF-7人乳腺癌细胞为JB刺激组,正常培养的MCF-7细胞为MCF-7组。获得25,55,85 mg·L^-1JB刺激的MCF-7细胞上清液为相应浓度的条件培养基。利用各组条件培养基分别培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)为25,55,85 mg·L^-1JB组,正常培养的HUVEC为非条件培养基组。分别用噻唑蓝(MTT)比色法,Annexin V-FITC细胞凋亡实验,细胞划痕实验和transwell细胞小室迁移实验观察25,55,85 mg·L^-1JB组HUVEC增殖、凋亡、迁移的变化;并利用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JB对MCF-7细胞的作用机制,酶联免疫吸附试验(ELISA)分析各组条件培养基中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的含量变化。结果:与正常组比较,25,55,85 mg·L^-1JB组HUVEC细胞凋亡数目逐渐升高(P〈0.01),HUVEC增殖显著降低(P〈0.01);25,55,85 mg·L^-1JB组HUVEC细胞划痕面积闭合率和细胞迁移率较非条件培养基组均显著降低(P〈0.01)。与MCF-7比较,25,55,85 mg·L^-1JB均能够明显抑制MSC-7细胞蛋白激酶B/信号传导及转录激活因子3/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Akt/STAT3/m TOR)信号通路表达,下调MCF-7细胞表达的VEGF因子。结论:岩大戟内酯B通过抑制Akt/STAT3/m TOR信号通路下调MCF-7细胞旁分泌VEGF,抑制血管内皮细胞的增殖或迁移活性。 展开更多
关键词 岩大戟内酯B MCF-7乳腺癌细胞 人脐静脉血管内皮细胞 增殖 迁移 AKT信号通路
JAK2/STAT3信号转导通路在岩大戟内酯B诱导的前列腺癌细胞PC-3凋亡中的作用 预览 被引量:3
7
作者 王贻兵 刘丹 王佳贺 《实用药物与临床》 CAS 2016年第9期1065-1068,共4页
目的 探讨岩大戟内酯B诱导的人前列腺癌细胞系PC-3细胞凋亡以及JAK2/STAT3信号转导通路在此过程中的作用。方法 不同浓度的岩大戟内酯B处理人前列腺癌细胞系PC-3细胞0、24、48、72 h后,采用台盼蓝染色法检测PC-3细胞存活率;采用Annexin ... 目的 探讨岩大戟内酯B诱导的人前列腺癌细胞系PC-3细胞凋亡以及JAK2/STAT3信号转导通路在此过程中的作用。方法 不同浓度的岩大戟内酯B处理人前列腺癌细胞系PC-3细胞0、24、48、72 h后,采用台盼蓝染色法检测PC-3细胞存活率;采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测PC-3细胞凋亡率;Western blot分析检测岩大戟内酯B作用不同时间后JAK2/STAT3信号转导通路的表达;预先用不同浓度的JSI-124(选择性STAT3途径抑制剂)处理PC-3细胞60 min,观察岩大戟内酯B作用不同时间后PC-3细胞的凋亡情况。结果 岩大戟内酯B能够诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡,降低磷酸化-JAK2/STAT3的表达,JSI-124可以提高岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡率。结论 JAK2/STAT3信号转导通路参与了岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡过程。JSI-124通过特异性地抑制STAT3活性提高了岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡率。 展开更多
关键词 岩大戟内酯B 前列腺癌 PC-3细胞 细胞凋亡
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蒙药塔日奴中岩大戟内酯B和狼毒乙素的RP-HPLC法分析
8
作者 许良 包勿兰 +2 位作者 李桂花 王曦烨 刘景林 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期19-21,共3页
目的建立反相高效液相法同时测定蒙药塔日奴中岩大戟内酯B和狼毒乙素含量。方法采用90%的乙醇溶液回流提取制备供试品。分析色谱柱为Century SIL C_(18)BDS(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~60 min;... 目的建立反相高效液相法同时测定蒙药塔日奴中岩大戟内酯B和狼毒乙素含量。方法采用90%的乙醇溶液回流提取制备供试品。分析色谱柱为Century SIL C_(18)BDS(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~60 min;98%~0%B;2%~100%A),流速0.8 ml·min~(-1),检测波长227 nm。结果蒙药塔日奴中岩大戟内酯B及狼毒乙素标准曲线的回归方程依次为Y=458411X+1704565(r=0.9999),Y=127938X-168409(r=0.9998),在1.871~9.355μg,0.1856~0.928μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.5%和95.5%,RSD分别为3.2%和1.0%。结论所建立的HPLC含量测定法快捷、准确、重现性好,可用于蒙药塔日奴中岩大戟内酯B和狼毒乙素的含量测定。 展开更多
关键词 岩大戟内酯B 狼毒乙素 反相高效液相色谱法 蒙药塔日奴
岩大戟内酯B对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响 被引量:4
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作者 林宇 岳丽玲 蒋丽艳 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期132-136,共5页
目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B,JB)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及生长周期的影响。方法:取对数生长期的MDA-MB-231细胞,加入JB,使终质量浓度分别为0,2.5,5,10,20,40,80 mg·L-1,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测岩大戟内... 目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B,JB)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及生长周期的影响。方法:取对数生长期的MDA-MB-231细胞,加入JB,使终质量浓度分别为0,2.5,5,10,20,40,80 mg·L-1,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测岩大戟内酯B对MDA-MB-231细胞的生长抑制率。另设10,20,40,80 mg·L-1组的JB,采用流式检测技术分析岩大戟内酯B对MDA-MB-231细胞的细胞周期,RT-PCR及Western blot检测真核细胞翻译起始因子(e IF4E),细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)基因mRNA表达及蛋白水平。结果:随着岩大戟内酯B浓度增加可显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖,G1期细胞阻滞。与空白组比较,20,40μmol·L-1的岩大戟内酯B可抑制Cyclin D1和e IF4E的mRNA表达,转染e IF4E-siRNA组Cyclin D1的mRNA表达及蛋白水平也被抑制,同时细胞周期阻滞在G1期(P〈0.05,P〈0.01)。结论:岩大戟内酯B可通过下调e IF4E及Cyclin D1的表达而阻滞细胞周期于G1期。 展开更多
关键词 岩大戟内酯B 真核细胞翻译起始因子 细胞周期
岩大戟内酯B诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究 预览 被引量:2
10
作者 林宇 田华 《齐齐哈尔医学院学报》 2015年第30期4527-4528,共2页
目的探讨岩大戟内酯B对乳腺癌细胞MDA-MB-435S凋亡的影响。方法将不同浓度的岩大戟内酯B作用于MDA-MB-435S细胞,采用流式细胞仪检测其诱导的细胞凋亡情况;电镜观察细胞形态。结果随着岩大戟内酯B浓度增加,细胞凋亡率明显增加;电镜显示... 目的探讨岩大戟内酯B对乳腺癌细胞MDA-MB-435S凋亡的影响。方法将不同浓度的岩大戟内酯B作用于MDA-MB-435S细胞,采用流式细胞仪检测其诱导的细胞凋亡情况;电镜观察细胞形态。结果随着岩大戟内酯B浓度增加,细胞凋亡率明显增加;电镜显示药物处理后细胞出现核固缩,细胞器空泡变性,出现凋亡小体,甚至坏死。结论岩大戟内酯B可诱导乳腺癌细胞凋亡,为临床开发新药提供理论依据。 展开更多
关键词 岩大戟内酯B MDA-MB-435S 细胞凋亡
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狼毒商品药材中岩大戟内酯B含量的高效液相色谱法测定及其品质评价
11
作者 刘阳熙 卢燕 陈道峰 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1814-1816,共3页
目的以岩大戟内酯B的含量为指标,评价21批狼毒商品药材的质量。方法采用HPLC法测定21批月腺大戟或狼毒大戟来源的狼毒药材中岩大戟内酯B的含量,Agilent C18色谱柱(5μm,250mm×4.6mm),乙腈-水(65∶35)为流动相,流速1.0 ml·... 目的以岩大戟内酯B的含量为指标,评价21批狼毒商品药材的质量。方法采用HPLC法测定21批月腺大戟或狼毒大戟来源的狼毒药材中岩大戟内酯B的含量,Agilent C18色谱柱(5μm,250mm×4.6mm),乙腈-水(65∶35)为流动相,流速1.0 ml·min^-1,柱温30℃,238nm紫外线检测。结果岩大戟内酯B在2.125-27.2μg·ml^-1范围内浓度与峰面积成良好线性关系(r=0.9999),按干燥品计算21批狼毒药材中岩大戟内酯B的含量为0.00910%-0.04161%,其中狼毒大戟中的岩大戟内酯B的含量高于月腺大戟。结论岩大戟内酯B可作为狼毒药材鉴定和质量控制的指标成分,研究结果为完善其质量标准提供了科学依据。 展开更多
关键词 狼毒 岩大戟内酯B 月腺大戟 狼毒大戟 质量评价
岩大戟内酯B对耐阿霉素白血病细胞株HL-60/ADR细胞凋亡的影响及其机制 预览 被引量:1
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作者 白雪 赵鹤 何平 《新乡医学院学报》 CAS 2014年第12期990-993,共4页
目的探讨死亡受体通路在岩大戟内酯B诱导的耐阿霉素白血病细胞株HL-60/ADR细胞凋亡中的作用。方法采用Annexin V异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(FITC/PI)双染流式细胞术检测HL-60/ADR细胞凋亡;利用Western blot检测Fas/Fas L蛋白的表达;采... 目的探讨死亡受体通路在岩大戟内酯B诱导的耐阿霉素白血病细胞株HL-60/ADR细胞凋亡中的作用。方法采用Annexin V异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(FITC/PI)双染流式细胞术检测HL-60/ADR细胞凋亡;利用Western blot检测Fas/Fas L蛋白的表达;采用荧光比色法测定细胞内caspase-8和caspase-3蛋白酶活性。结果 HL-60/ADR细胞的凋亡率随着岩大戟内酯B浓度的增加及作用时间的延长而逐渐增加。当岩大戟内酯B浓度为40 mg·L^-1时,作用24、48及72 h后早期凋亡率和总凋亡率与0 h比较,差异均有统计学意义(P〈0.05或P〈0.001);当浓度为20、40、80 mg·L^-1时,作用48 h后早期凋亡率和总凋亡率与0 mg·L^-1比较,差异均有统计学意义(P〈0.05或P〈0.001)。Fas/Fas L蛋白的表达随着岩大戟内酯B作用时间的延长逐渐增加;caspase-8和caspase-3蛋白酶的活性亦逐渐增加。作用24、48及72 h后caspase-3和caspase-8蛋白酶活性与0 h比较,差异均有统计学意义(P〈0.05或P〈0.001)。结论岩大戟内酯B能够诱导耐阿霉素白血病细胞株HL-60/ADR细胞凋亡,Fas/Fas L通路参与了岩大戟内酯B诱导的HL-60/ADR细胞凋亡过程。 展开更多
关键词 岩大戟内酯B HL-60/ADR细胞 细胞凋亡
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岩大戟内酯B对小鼠内毒素血症模型的保护作用研究 预览
13
作者 王慧 李晓鸥 +2 位作者 张晓伟 潘晨宇 刘宁 《中国实验诊断学》 2014年第11期1752-1754,共3页
目的研究岩大戟内酯B(jolkinolide B,JB)对内毒素血症模型小鼠的治疗作用。方法采用腹腔注射内毒素制备小鼠内毒素血症模型,观察不同脓毒JB(10、5和2.5mg/kg)对内毒素血症模型小鼠的治疗效果。用ELISA法检测LPS刺激后8h小鼠血清中... 目的研究岩大戟内酯B(jolkinolide B,JB)对内毒素血症模型小鼠的治疗作用。方法采用腹腔注射内毒素制备小鼠内毒素血症模型,观察不同脓毒JB(10、5和2.5mg/kg)对内毒素血症模型小鼠的治疗效果。用ELISA法检测LPS刺激后8h小鼠血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量并检测腹腔灌洗液中白细胞数目。结果JB以浓度依赖的方式降低内毒素血症模型小鼠死亡率,并显著降低血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量以及腹腔灌洗液中白细胞数目。结论 JB通过抑制内毒素血症小鼠炎性细胞因子表达以及炎性细胞浸润发挥其保护作用,可以成为内毒素血症治疗的候选药物。 展开更多
关键词 岩大戟内酯B 内毒素血症 肿瘤坏死因子-Α 白介素-1Β 白介素-6
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岩大戟内酯B对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响 被引量:4
14
作者 林宇 崔红霞 +3 位作者 许惠玉 周丽 牛英才 刘吉成 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期 780-783,共4页
目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B)诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡及其可能机制。方法:分别应用MTT和AnnexinV-FITC/PI双染法检测jolkinolide B对Bcap37细胞的生长抑制率和细胞凋亡率;用流式细胞仪检测线粒体膜电位和细胞内游离Ca2... 目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B)诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡及其可能机制。方法:分别应用MTT和AnnexinV-FITC/PI双染法检测jolkinolide B对Bcap37细胞的生长抑制率和细胞凋亡率;用流式细胞仪检测线粒体膜电位和细胞内游离Ca2+浓度的变化;RT-PCR检测jolkinolide B对Bcap37细胞caspase-3mRNA表达的影响。结果:jolkinolide B可显著抑制Bcap37细胞的增殖,呈剂量和时间效应关系;随jolkinolide B剂量增加,细胞凋亡率明显增加;线粒体膜电位下降,并伴有细胞内游离钙浓度增加,与对照组相比差异显著(P〈0.01),同时caspase-3mRNA表达水平明显增高。结论:jolkinolide B可通过提高细胞游离Ca2+水平,激活内源性线粒体信号转导途径而诱导Bcap37细胞凋亡。 展开更多
关键词 岩大戟内酯B BCAP37 凋亡 线粒体膜电位 钙离子
岩大戟内酯B对人卵巢癌Skov3细胞的增殖抑制作用 预览 被引量:2
15
作者 周珊珊 许宗斌 鲁伟 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期567-570,共4页
目的探讨岩大戟内酯B(JB)对人卵巢癌Skov3细胞的增殖抑制作用及可能机制。方法采用不同浓度的JB处理卵巢癌Skov3细胞48 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Skov3细胞的增殖抑制率,Hoechst法检测Skov3细胞凋亡指数,Western blot检测Akt... 目的探讨岩大戟内酯B(JB)对人卵巢癌Skov3细胞的增殖抑制作用及可能机制。方法采用不同浓度的JB处理卵巢癌Skov3细胞48 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Skov3细胞的增殖抑制率,Hoechst法检测Skov3细胞凋亡指数,Western blot检测Akt、P-Akt(Ser473)、Bax、Caspase-3和Bcl-2蛋白水平。结果 0.1,1.0,5.0,10.0,20.0,50.0μmol/L的JB可呈剂量依赖的方式抑制Skov3细胞的增殖,IC50为5.28μmol/L;20.0μmol/L JB和30.0μmol/L LY294002(PI3K抑制剂)均可增加Skov3细胞凋亡指数,降低P-Akt(Ser473)/Akt水平,增加促凋亡基因(Bax、Caspase-3)的蛋白水平,降低抑制凋亡基因(Bcl-2)的蛋白水平,且均与对照组有显著差异;而LY294002可增强JB的效应,且与JB组有显著差异。结论 JB可抑制人卵巢癌Skov3细胞的增殖,促进细胞凋亡,可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路和诱导死亡受体表达来发挥抗肿瘤作用的。 展开更多
关键词 岩大戟内酯B 人卵巢癌SKOV3细胞 增殖抑制 PI3K/AKT途径
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狼毒质量标准改进研究 被引量:2
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作者 严小红 王灿坚 +2 位作者 毕福钧 顾利红 江英桥 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期321-324,共4页
目的研究和完善狼毒药材的质量标准。方法采用薄层色谱法对狼毒药材中的24-次甲基环木菠萝烷醇和岩大戟内酯B进行了鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法对狼毒乙素和岩大戟内酯B进行了含量测定。结果狼毒薄层鉴别专属性强,方法可行;狼毒乙... 目的研究和完善狼毒药材的质量标准。方法采用薄层色谱法对狼毒药材中的24-次甲基环木菠萝烷醇和岩大戟内酯B进行了鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法对狼毒乙素和岩大戟内酯B进行了含量测定。结果狼毒薄层鉴别专属性强,方法可行;狼毒乙素线性范围为0.013~0.863μg(r=0.9999),平均回收率为96.4%(RSD=1.4%,n=θ);岩大戟内酯B线性范围为0.007~0.496μg(r=0.9999),平均回收率为96.0%(RSD=2.1%,n=θ)。结论此方法准确、可靠,为狼毒药材的质量评价提供了依据。 展开更多
关键词 狼毒 质量标准 狼毒乙素 岩大戟内酯B
岩大戟内酯B诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的实验研究 预览 被引量:1
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作者 许惠玉 陈志伟 +2 位作者 郭洪英 徐浩 刘吉成 《中国医学创新》 2012年第13期 1-3,共3页
目的:探讨岩大戟内酯B 对MCF-7 乳腺癌细胞生长抑制作用及其机理.方法:通过MTT 法观察各组细胞增殖能力;采用流式检测技术分析细胞周期;利用Annexin V/PI 双染检测细胞凋亡情况;电镜观察细胞形态.结果:随着岩大戟内酯B 浓度增加对MCF... 目的:探讨岩大戟内酯B 对MCF-7 乳腺癌细胞生长抑制作用及其机理.方法:通过MTT 法观察各组细胞增殖能力;采用流式检测技术分析细胞周期;利用Annexin V/PI 双染检测细胞凋亡情况;电镜观察细胞形态.结果:随着岩大戟内酯B 浓度增加对MCF-7 的抑瘤率增高;G2/M 期细胞减少,S 期细胞增多,出现S 期阻滞;晚期凋亡和死亡的细胞增加;电镜显示加药后细胞出现核固缩,细胞器空泡变性,凋亡小体形成,甚至出现坏死.结论:岩大戟内酯B 对乳腺癌MCF-7 细胞生长明显抑制作用,并诱导肿瘤细胞凋亡,为临床开发新药提供理论依据. 展开更多
关键词 岩大戟内酯B MCF-7 细胞凋亡
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RP-HPLC法测定狼毒中狼毒乙素和岩大戟内酯B的含量 被引量:7
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作者 王灿坚 江英桥 +3 位作者 毕福钧 林彤 严小红 刘东辉 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期839-842,共4页
目的:建立同时测定狼毒药材中狼毒乙素和岩大戟内酯B的HPLC定量分析方法。方法:采用Lichrospher C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0-5 min,40%A;5-10 min,40%A→50%A;10-30 min,50%A→55%... 目的:建立同时测定狼毒药材中狼毒乙素和岩大戟内酯B的HPLC定量分析方法。方法:采用Lichrospher C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0-5 min,40%A;5-10 min,40%A→50%A;10-30 min,50%A→55%A;30-40 min,55%A→60%A;40-45 min,60%A→70%A),流速1.0 mL·min^-1;检测波长226 nm,柱温30℃。结果:狼毒乙素线性范围为0.005-0.863μg(r=0.9999),平均回收率为96.4%(RSD=1.4%,n=6);岩大戟内酯B线性范围为0.003-0.496μg(r=0.9999),平均回收率为96.0%(RSD=2.1%,n=6)。结论:本方法专属性强,结果准确,简便可行,可用于狼毒药材的质量控制。 展开更多
关键词 狼毒 狼毒乙素 岩大戟内酯B 高效液相色谱法 含量测定
反相高效液相色谱法测定狼毒中岩大戟内酯B的含量 被引量:10
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作者 王灿坚 严小红 +3 位作者 谢演晖 江英桥 刘东辉 马双成 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期521-524,共4页
目的建立狼毒药材中岩大戟内酯B的含量测定方法。方法狼毒药材经粉碎后利用乙醇超声提取,采用高效液相色谱法对岩大戟内酯B的含量进行测定,色谱条件如下:C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水(65:35),流速:1.0mL/min,... 目的建立狼毒药材中岩大戟内酯B的含量测定方法。方法狼毒药材经粉碎后利用乙醇超声提取,采用高效液相色谱法对岩大戟内酯B的含量进行测定,色谱条件如下:C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水(65:35),流速:1.0mL/min,检测波长为238nm,进样量10μL,外标法定量。结果岩大戟内酯B在4.070~32.560μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为98.02%,RSD为1.02%。结论该方法专属性强,快速简便,可作为狼毒药材中岩大戟内酯B的含量测定方法,可为狼毒质量标准的制定提供相关依据。 展开更多
关键词 狼毒 岩大戟内酯B 高效液相色谱法 含量测定
超声波辅助提取狼毒大戟中二萜类物质Jolkinolide B 预览 被引量:3
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作者 简丽 贾慧凯 +2 位作者 庞丽纹 丁立军 张前程 《精细化工》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期 972-974,共3页
以ω(C2H5OH)=95%的乙醇为提取剂,HPLE法测定的Jolkinolide B提取率为指标,考察了利用超声波辅助技术提取狼毒大戟中二萜类物质的适宜提取条件。测定出狼毒大戟中训(Jolkinolide B)=0.0216%。考察了提取时间、提取温度、料液... 以ω(C2H5OH)=95%的乙醇为提取剂,HPLE法测定的Jolkinolide B提取率为指标,考察了利用超声波辅助技术提取狼毒大戟中二萜类物质的适宜提取条件。测定出狼毒大戟中训(Jolkinolide B)=0.0216%。考察了提取时间、提取温度、料液质量比等因素对Jolkinolide B提取率的影响。室温下,提取时间从10min到60min,Jolkinolide B的提取率由0.014%提高至0.0149%;温度从室温到85℃,提取率从0.014%提高到0.0205%;超声波辅助提取10min,提取率与浸泡提取200h的提取率相当;超声波辅助提取中适宜的m(狼毒大戟):m(提取剂)=1:8。该文报告工作的新颖性已为内蒙古自治区科学技术信息技术研究所2007年3月12日出具的第20071500100031号《科技查新报告》所证实。 展开更多
关键词 狼毒大戟 超声辅助提取 二萜 Jolkinolide B 中药现代化技术
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