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Kv1.5蛋白与脂多糖诱导的血管内皮细胞损伤的相关性
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作者 许关霞 崔乐 +2 位作者 王必蓉 余和平 许涛 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期755-757,共3页
目的探讨Kv1.5蛋白与脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞损伤的相关性。方法LPS以浓度梯度(0.5、1.0、5.0、10.0 μg/ml)及时间梯度(0、6、12、24、48 h)作用于人脐静脉内皮细胞(HUVECs),应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,建立内皮... 目的探讨Kv1.5蛋白与脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞损伤的相关性。方法LPS以浓度梯度(0.5、1.0、5.0、10.0 μg/ml)及时间梯度(0、6、12、24、48 h)作用于人脐静脉内皮细胞(HUVECs),应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,建立内皮细胞损伤模型,并通过Western blot法检测内皮细胞中Kv1.5蛋白水平;分别予以75、125、250、500 mmol/L浓度的Kv1.5特异性通道阻滞剂(MT)预处理30 min阻断Kv1.5通道后,运用流式细胞术检测内皮细胞凋亡率,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定内皮细胞损伤标志物内皮细胞特异性分子-1(endocan)、血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)的浓度。结果LPS浓度为0.5、1.0、5.0、10.0 μg/ml刺激HUVECs 24 h,内皮细胞凋亡率分别为(33.530±1.266)%、(35.530±0.551)%、(48.270±0.901)%、(51.600±2.179)%,与对照组比较差异有统计学意义(P值分别为0.025、0.027、0.011、0.004),且在LPS 5.0 μg/ml时作用最显著;LPS(5.0 μg/ml)处理内皮细胞6、12、24、48 h,内皮细胞凋亡率分别为(30.200±1.113)%、(32.470±0.814)%、(46.630±0.513)%、(50.870±1.498)%,与对照组比较差异有统计学意义(P值分别为0.027、0.025、0.012、0.006),并且在24 h时作用最明显;建立内皮细胞损伤模型适宜的条件为5.0 μg/ml LPS刺激HUVECs 24 h;同时可见不同浓度LPS组Kv1.5蛋白表达明显上调(P值分别为0.036、0.027、0.008、0.005),12、24、48 h时LPS组Kv1.5蛋白表达亦上升(P值分别为0.004、0.036、0.007),Kv1.5蛋白表达与LPS呈一定的浓度及时间依赖性。与LPS组比较,不同浓度梯度MT组(75、125、250、500 mmol/L)内皮细胞凋亡率明显降低(P值均为0.000),且细胞损伤标志物endocan(P值分别为0.001、0.000、0.001、0.006)及VCAM-1分泌减少(P值分别为0.006、0.000、0.000、0.000)。结论内毒素诱导损伤的血管内皮细胞表达Kv1.5蛋 展开更多
关键词 KV1.5 人脐静脉内皮细胞 Kv1.5通道特异性阻滞剂 血管内皮细胞损伤
槲皮素通过激活Kv1.5保护糖尿病大鼠冠脉损伤 预览 被引量:3
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作者 侯晓敏 秦小江 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2017年第10期1442-1445,共4页
目的研究槲皮素对糖尿病大鼠CA损伤的改善作用及该作用与Kv1.5的关系。方法 30只♂SD大鼠,随机分为3组:空白对照组、糖尿病组、"糖尿病+槲皮素"组。通过大鼠冠脉流量(coronary flow,CF)测定,观察槲皮素对糖尿病所致CF变化的影响;... 目的研究槲皮素对糖尿病大鼠CA损伤的改善作用及该作用与Kv1.5的关系。方法 30只♂SD大鼠,随机分为3组:空白对照组、糖尿病组、"糖尿病+槲皮素"组。通过大鼠冠脉流量(coronary flow,CF)测定,观察槲皮素对糖尿病所致CF变化的影响;利用冠状动脉(coronary artery,CA)张力测定,观察槲皮素对糖尿病所致CA张力变化的影响;应用膜片钳记录CA血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)电压依赖性钾通道(voltage gated potassium channel,Kv)电流及测定CA VSMC Kv1.5 mRNA表达水平,探讨槲皮素改善糖尿病所致CA损伤的机制。结果糖尿病组CF较空白组明显下降,糖尿病大鼠饮食中补充槲皮素,可使得其CF有所增加;膳食补充槲皮素可减弱糖尿病大鼠CA对KCl的收缩反应(P〈0.05);与糖尿病组相比,"糖尿病+槲皮素"组CA对Kv阻断剂4-AP的收缩幅度明显降低;糖尿病组大鼠CA VSMC Kv电流较空白组明显降低(P〈0.05),膳食补充槲皮素可减小其降低幅度;RT-PCR结果表明,Kv1.5 mRNA相对表达量空白组最高,"糖尿病+槲皮素"组次之,糖尿病组最少。结论槲皮素对糖尿病CA损伤有保护作用,该作用与激活Kv1.5存在一定相关性。 展开更多
关键词 槲皮素 KV1.5 糖尿病 离子通道 冠状动脉 血管损伤
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Kv1.5在心房颤动中的作用研究进展 预览
3
作者 唐雪娇 肖骅 《心血管病学进展》 CAS 2015年第3期273-276,共4页
心房颤动是临床上最常见的心律失常,有较高的发病率及病死率,严重威胁人类健康。国内外研究表明,Kv1.5钾通道在人类心房肌细胞特异性表达,是心房肌细胞超速延迟整流钾电流的分子基础,此电流在心房复极过程中发挥重要作用,是心房颤动药... 心房颤动是临床上最常见的心律失常,有较高的发病率及病死率,严重威胁人类健康。国内外研究表明,Kv1.5钾通道在人类心房肌细胞特异性表达,是心房肌细胞超速延迟整流钾电流的分子基础,此电流在心房复极过程中发挥重要作用,是心房颤动药物治疗的重要靶点。现对Kv1.5在心房颤动中的作用研究进展进行阐述。 展开更多
关键词 心房颤动 KV1.5 超速延迟整流钾电流
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苯甲酰胺类Kv1.5钾离子通道阻滞剂的研究 被引量:1
4
作者 郭小可 沈征 +3 位作者 于鹏 褚红喜 汤依群 尤启冬 《中国药学:英文版》 CAS 2012年第6期553-560,共8页
文献报道Kv1.5钾离子通道为治疗心房颤动的一个安全有效的靶点。在前期研究中我们证明化合物CPUY11018有中等的抑制Kv1.5钾离子通道的作用, 但其稳定性较差。为了改善其稳定性同时为了探讨构效关系, 本文利用骨架迁越原理, 合成了4个系... 文献报道Kv1.5钾离子通道为治疗心房颤动的一个安全有效的靶点。在前期研究中我们证明化合物CPUY11018有中等的抑制Kv1.5钾离子通道的作用, 但其稳定性较差。为了改善其稳定性同时为了探讨构效关系, 本文利用骨架迁越原理, 合成了4个系列共17个苯甲酰胺类衍生物并测定其Kv1.5阻滞活性。其中, 化合物8c显示出良好的Kv1.5阻滞活性。 展开更多
关键词 KV1.5 超速延迟整流钾离子通道 钾离子通道 心房颤动
电压门控型钾通道蛋白Kv1.5抗血清的制备及特性鉴定 预览
5
作者 于学薇 李淑珍 +1 位作者 鄢成伟 唐晓波 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第4期 319-321,325,共4页
目的 制备电压门控型钾通道蛋白Kv 1.5的多克隆抗体,对其特性进行鉴定.方法 利用生物信息学方法分析Kv 1.5蛋白的序列,根据亲水性结构、柔韧区、抗原指数及表面概率结构等指标选择一段8个氨基酸序列,据此合成Kv 1.5多肽片段,并将其与载... 目的 制备电压门控型钾通道蛋白Kv 1.5的多克隆抗体,对其特性进行鉴定.方法 利用生物信息学方法分析Kv 1.5蛋白的序列,根据亲水性结构、柔韧区、抗原指数及表面概率结构等指标选择一段8个氨基酸序列,据此合成Kv 1.5多肽片段,并将其与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)偶联作为免疫抗原,免疫新西兰白兔制备抗Kv 1.5抗血清.辛酸-硫酸铵法纯化抗血清,对纯化后的抗血清进行 ELISA、Western blot鉴定.结果 成功获得抗Kv 1.5合成肽的抗血清,该抗血清效价为1∶ 64 000,可与Kv 1.5合成肽及天然Kv 1.5蛋白出现特异性反应,该抗血清识别的相应抗原的相对分子质量(Mr)为59 kD.同时,Western blot结果显示,所制备的抗血清能识别大鼠心脏天然Kv 1.5蛋白.结论 合成的多肽-KLH复合物具有免疫原性,可用于制备相应的抗血清,并且制备的抗血清经 ELISA、Western blot鉴定后特异性较好. 展开更多
关键词 KV1.5 合成肽 多克隆抗体
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抗人Kv1.5胞外环肽段E215抗体的制备与鉴定
6
作者 戴芝银 刘坤 +8 位作者 曾秋棠 刘金平 祝聪聪 杨晓芳 廖玉华 王敏 陈志坚 黄丹 刘鸿涛 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期389-392,共4页
目的:为研究新的人Kv1.5(hKv1.5)通道/超快激活延迟整流钾通道(Ikur)阻滞剂,通过免疫法制备抗hKv1.5胞外环肽段E215的特异性抗体,并进行鉴定。方法:雄性新西兰大白兔,随机分为免疫组和假性免疫组。从hKv1.5胞外环中筛选出一段短肽... 目的:为研究新的人Kv1.5(hKv1.5)通道/超快激活延迟整流钾通道(Ikur)阻滞剂,通过免疫法制备抗hKv1.5胞外环肽段E215的特异性抗体,并进行鉴定。方法:雄性新西兰大白兔,随机分为免疫组和假性免疫组。从hKv1.5胞外环中筛选出一段短肽E215作为抗原肽免疫动物。免疫组予抗原免疫,2周1次,假性免疫组予0.9%氯化钠溶液免疫,方法同前。实验63 d处死,留取血清,亲合层析法提取、纯化抗肽段E215抗体。酶联免疫吸附法(ELISA)动态地观察抗体在体内的产生及效价,免疫荧光组织化学及免疫印迹(Western-blot)观察制备的抗体与人心房肌细胞膜及hKv1.5/Ikur通道蛋白的结合。结果:ELISA结果表明,免疫组于实验第28、42、56、63 d血清抗体滴度分别达到1∶6 400、1∶6 400、1∶6 400、1∶12 800;免疫荧光组织化学显示,制备的抗体能结合于人心房肌细胞的细胞膜;Western-blot结果表明,此抗体能特异性结合人心房肌细胞膜上分子量为75000的蛋白(hKv1.5/Ikur通道蛋白)。而假性免疫组未发现相同抗体产生。结论:所制备胞外环肽段E215的抗体能与人心房肌细胞膜上hKv1.5/Ikur通道特异性结合,为下一步实验提供了新的药理学干预手段。 展开更多
关键词 抗体 人心房肌细胞 KV1.5 胞外环
Open channel block of Kv1.5 currents by citalopram
7
作者 Hyang Mi LEE Sang June HAHN Bok Hee CHOI 《中国药理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2010年第4期429-435,共7页
关键词 西酞普兰 电流 通道 全细胞膜片钳技术 浓度依赖性 时间依赖性 电压范围 相互作用
反义Kv1.5寡核苷酸转染对人气道平滑肌增殖的影响
8
作者 赵丽敏 徐永健 +2 位作者 熊盛道 张珍祥 程东军 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期 692-694,共3页
大量研究表明,气道平滑肌的增生对气道阻力和气道高反应性有着显著的影响[1],但目前关于气道平滑肌异常增生的确切机制尚不完全清楚.因此,探讨气道平滑肌的增殖以明确支气管哮喘(以下简称哮喘)的发病机制,并寻找更有效的治疗方法,成为... 大量研究表明,气道平滑肌的增生对气道阻力和气道高反应性有着显著的影响[1],但目前关于气道平滑肌异常增生的确切机制尚不完全清楚.因此,探讨气道平滑肌的增殖以明确支气管哮喘(以下简称哮喘)的发病机制,并寻找更有效的治疗方法,成为目前国内外哮喘研究的热点.本实验通过观察转染反义Kv1.5寡核苷酸(ODNs)对人气道平滑肌细胞(HASMCs)增殖及凋亡的影响,意在阐明K+通道在气道平滑肌增殖中的作用,为临床治疗提供实验资料. 展开更多
关键词 气道高反应性 平滑肌增殖 KV1.5 转染反义 寡核苷酸 气道平滑肌细胞 支气管哮喘 异常增生 实验资料
心房颤动患者Kv1.5mRNA表达的研究 被引量:2
9
作者 田莉莉 黄从新 杨波 《临床心血管病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第6期343-344,共2页
目的:通过对慢性心房颤动患者超速延迟振流性钾通道(Kv1.5)mRNA表达的研究探讨其表达与AERP的关系。方法:心脏标本取自慢性心房颤动患者和窦性心律患者的右心耳组织,用RT—PCR法分析Kv1.5的mRNA的表达变化。结果:慢性心房颤动患者... 目的:通过对慢性心房颤动患者超速延迟振流性钾通道(Kv1.5)mRNA表达的研究探讨其表达与AERP的关系。方法:心脏标本取自慢性心房颤动患者和窦性心律患者的右心耳组织,用RT—PCR法分析Kv1.5的mRNA的表达变化。结果:慢性心房颤动患者的Kv1.5mRNA表达相对于窦性心律患者显著减少(P<0.01)。结论:钾离子通道Kv1.5mRNA的减少可能是对抗AERP的缩短而产生的结果。 展开更多
关键词 心房颤动 超速延迟振流性钾通道 基因表达
心律失常相关基因在蟾蜍卵母细胞上听表达及用于Ⅲ抗心律失常海洋 … 预览 被引量:2
10
作者 许东晖 许实波 《遗传学报》 SCIE CAS CSCD 2000年第3期 195-201,共7页
采用基因克隆、膜片钳和微注射技术,分别将人的心律失常相关基因Kv1.5和Kv4.2cDNA转录为mRNA,然后将其分别注入蟾蜍卵母细胞(Xenopus Oocytes)上:在蟾蜍卵母细胞上分别获得纯净、单一的超速延迟... 采用基因克隆、膜片钳和微注射技术,分别将人的心律失常相关基因Kv1.5和Kv4.2cDNA转录为mRNA,然后将其分别注入蟾蜍卵母细胞(Xenopus Oocytes)上:在蟾蜍卵母细胞上分别获得纯净、单一的超速延迟性整流钾电流(Ikur,ultrarapid delayed rectifier K^+ current)和瞬间外向钾电流(Ito,transient outward K^+ curr 展开更多
关键词 心律失常基因 KV1.5 KV4.2 药理评价
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人心律失常相关基因Kv1.5和Kv4.2在蟾卵母细胞上的表达 预览
11
作者 许东晖 王至国 《中国药学:英文版》 CAS 1999年第4期 233-236,共4页
本文采用基因克隆、膜片钳和微注射技术,分别将人的心律失常相关基因Kv1.5和Kv4.2 cDNA转录入cRNA,将Kv1.5 cRNA和Kv4.2 cRNA分别注射蟾蜍卵母细胞(Xenopus oocytes),分别在蟾蜍卵母细胞上获得纯净,单一的超速延迟性整流钾电流(Iku... 本文采用基因克隆、膜片钳和微注射技术,分别将人的心律失常相关基因Kv1.5和Kv4.2 cDNA转录入cRNA,将Kv1.5 cRNA和Kv4.2 cRNA分别注射蟾蜍卵母细胞(Xenopus oocytes),分别在蟾蜍卵母细胞上获得纯净,单一的超速延迟性整流钾电流(Ikur,ultrarapid delayed rectifier K^+ current)和瞬时外向钾电流(Ito,transient outward K^+ current)表达,克服以往在筛选评价抗心律失常药物时,人新鲜心肌细胞取材困难,以及多种电流在细胞膜上共同表达等缺点,从而建立筛选评价Ⅲ类抗心律失常药物的先进药理模型。 展开更多
关键词 心律失常相关基因 KV1.5 KV4.2 蟾蜍卵母细胞 表达 抗心律失常药 药理模型
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亚急性缺氧通过内源性15-HETE抑制大鼠肺动脉Kv1.5通道的表达 预览
12
作者 唐晓波 朱大岭 《中国药理通讯》 2009年第2期 39,共1页
目的:缺氧通过抑制Kv通道引起肺血管收缩,但是机制不清楚。我们的研究表明缺氧激活肺动脉远端15-脂氧酶(15-LOX)增加15-羟基二十碳四烯酸(15--HETE)的产量。15-HETE诱导的肺血管收缩是通过抑制Kv通道实现的(Kv1.5,Kv2.1andKv3... 目的:缺氧通过抑制Kv通道引起肺血管收缩,但是机制不清楚。我们的研究表明缺氧激活肺动脉远端15-脂氧酶(15-LOX)增加15-羟基二十碳四烯酸(15--HETE)的产量。15-HETE诱导的肺血管收缩是通过抑制Kv通道实现的(Kv1.5,Kv2.1andKv3.4).然而,目前还没有将缺氧、15-HETE和Kv通道亚型抑制直接联系起来的报道。因此,我们研究了15-LOX/15-HETE通路是否参与了缺氧诱导的Kv下调表达。由于Kv1.5是氧敏感通道,我们首先研究它的作用。结果:我们发现使用NDGA抑制15-LOX的活性显著降低了缺氧的肺血管环对苯肾上腺素的响应。缺氧条件下,脂氧酶抑制剂显著上调了肺动脉和肺动脉平滑肌细胞Kv1.5通道mRNA和蛋白质的表达。抑制15-LOX的活性部分恢复了IKV。结论:15-HETE参与了缺氧条件下Kv1.5通道的下调表达、IKV抑制及肺动脉张力增加。缺氧通过15-LOX/15-HETE通路抑制Kv1.5。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 15-HETE KV1.5 急性缺氧 通道 内源性 羟基二十碳四烯酸 肺血管收缩
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触发心房颤动的突变 预览
13
作者 Olson T 余国膺(摘译) 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2006年第5期 426,共1页
美国科学家通过一例早年发病,通常治疗无效的孤立性心房颤动(AF)患者识别出KCN45基因(编码钾通道电压门控KV1.5蛋白)的一种无义突变,断裂心房特异的KV1.5通道,提供一种电不稳定性和易患AF的分子底物。
关键词 孤立性心房颤动 无义突变 KV1.5 触发 美国科学家 电压门控 不稳定性 钾通道
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人心律失常相关基因Kv1.5和Kv4.2在蟾蜍卵母细胞上的表达(英文)
14
作者 许东晖 许实波 +1 位作者 王至国 StanleyNattel 《中国药学:英文版》 CAS 1999年第4期233-236,
本文采用基因克隆、膜片钳和微注射技术,分别将人的心律失常相关基因Kv1.5和Kv4.2cDNA转录入cRNA,将Kv1.5cRNA和Kv4.2cRNA分别注射蟾蜍卵母细胞(Xenopusoocytes),分别在蟾蜍孵... 本文采用基因克隆、膜片钳和微注射技术,分别将人的心律失常相关基因Kv1.5和Kv4.2cDNA转录入cRNA,将Kv1.5cRNA和Kv4.2cRNA分别注射蟾蜍卵母细胞(Xenopusoocytes),分别在蟾蜍孵母细胞上获得纯净、单一的超速延迟性整流钾电流(I(Kur),ultrarapiddelayedrectifierK+ currsent)和瞬时外向钾电流(I(to),transient outwardK+ current)表达,克服以往在筛选评价抗心律失常药物时,人新鲜心肌细胞取材困难,以及多种电流在细胞膜上共同表达等缺点,从而建立筛选评价Ⅲ类抗心律失常药物的先进药理模型。 展开更多
关键词 心律失常基因 KV1.5 KV4.2 蟾蜍卵母细胞 药理模型
全文增补中
Kv1.5蛋白对内毒素致血管内皮细胞氧化应激损伤的影响 预览
15
作者 许美霞 邹丽绢 +2 位作者 张晓霞 杨涛 许涛 《华中科技大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第3期305-308,共4页
目的研究Kv1.5蛋白对内毒素(LPS)所致血管内皮细胞氧化应激损伤的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),给予5μg/mL LPS刺激建立脓毒症细胞模型,并分为:空白对照组、LPS组、LPS+MT1组(以Kv1.5特异性通道阻滞剂MT 250nmo... 目的研究Kv1.5蛋白对内毒素(LPS)所致血管内皮细胞氧化应激损伤的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),给予5μg/mL LPS刺激建立脓毒症细胞模型,并分为:空白对照组、LPS组、LPS+MT1组(以Kv1.5特异性通道阻滞剂MT 250nmol/L预处理30min)及LPS+MT2组(MT浓度为500nmol/L)。采用MTT法检测内皮细胞存活率;ELISA法检测细胞上清液中内皮细胞E-选择素(E-selectin)、细胞间粘附分子(ICAM-1)浓度变化;激光共聚焦显微镜观察内皮细胞内ROS水平;比色法检测脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与空白对照组比较,LPS组内皮细胞存活率明显下降[(32.54±1.87)%vs.(98.64±0.92)%,P〈0.01],而LPS+MT1组及LPS+MT2组内皮细胞存活率分别为(77.39±1.15)%、(93.22±1.15)%,均较LPS组上升(均P〈0.01);LPS组内皮细胞E-selectin、ICAM-1分泌增加(均P〈0.01),予以250、500nmol/L MT预处理后,E-selectin、ICAM-1分泌减少(均P〈0.01);激光共聚焦显微镜观察内皮细胞内ROS水平发现,LPS组细胞内ROS水平升高为空白对照组的(3.39±0.42)倍(P〈0.05),予以250、500nmol/L MT预处理后,ROS水平分别为空白对照组的(1.88±0.36)倍、(1.46±0.47)倍,与LPS组比较,差异有统计学意义(均P〈0.05);且LPS组较空白对照组MDA水平上升、SOD活性降低(均P〈0.01),而MT预处理可降低MDA含量、增加SOD活性(均P〈0.01)。结论 Kv1.5蛋白与内毒素诱导的血管内皮细胞损伤密切相关;MT通过阻断Kv1.5通道可减轻内皮细胞脂质过氧化损伤。 展开更多
关键词 Kv1.5蛋白 活性氧 人脐静脉内皮细胞 内皮细胞氧化应激损伤
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Kv1.5蛋白在内毒素致血管内皮细胞损伤中的作用机制 预览 被引量:1
16
作者 许美霞 邹丽绢 +2 位作者 张晓霞 杨涛 许涛 《华中科技大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2017年第4期449-452,共4页
目的研究Kv1.5蛋白在内毒素致血管内皮细胞损伤中的作用机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),给予脂多糖(LPS)刺激建立脓毒症模型,并分为:空白对照组、LPS组、LPS+Kv1.5蛋白通道特异性阻滞剂MT1(250nmol/L)组及LPS+MT2... 目的研究Kv1.5蛋白在内毒素致血管内皮细胞损伤中的作用机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),给予脂多糖(LPS)刺激建立脓毒症模型,并分为:空白对照组、LPS组、LPS+Kv1.5蛋白通道特异性阻滞剂MT1(250nmol/L)组及LPS+MT2(500nmol/L)组,DAPI染色免疫荧光观察各组HUVECs凋亡情况,Western blot检测Caspase-3及Bcl-2蛋白的表达,RT-PCR检测Caspase-3及Bcl-2基因的表达。结果 DAPI染色免疫荧光显示,LPS组内皮细胞核固缩、凋亡小体形成,凋亡小体形成率由空白对照组的(4.2±0.7)%增加至(26.7±0.8)%(P〈0.01),而250nmol/L、500nmol/L MT预处理后,凋亡小体形成率从LPS组(26.7±0.8)%分别下降至(12.4±1.0)%、(8.5±0.9)%(均P〈0.01);Western blot检测结果显示,LPS组较空白对照组Bcl-2蛋白表达减少、Caspase-3蛋白表达增加(均P〈0.01),给予500nmol/L MT预处理后,与LPS组比较,Bcl-2蛋白表达上调、Caspase-3蛋白表达下调(均P〈0.01);RT-PCR检测结果显示,LPS组较空白对照组Bcl-2mRNA表达下调、Caspase-3mRNA表达上调(均P〈0.01),给予500nmol/L MT预处理后,与LPS组比较,Bcl-2mRNA表达上调、Caspase-3mRNA表达下调(均P〈0.01)。结论Kv1.5介导脓毒症相关内皮细胞损伤可能与线粒体凋亡途径有关。 展开更多
关键词 Kv1.5蛋白 人脐静脉内皮细胞 MT(mephetyl tetrazole) 血管内皮细胞损伤
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房颤患者心房肌细胞的原代培养与应用
17
作者 卞誉豪 张飞 《生命科学研究》 CAS CSCD 2017年第1期51-54,共4页
探索成功培养房颤(atrial fibrillation,AF)患者原代心房肌细胞的方法,能够为房颤发病机制的研究奠定实验基础。取心胸外科行迷宫手术患者的左心耳,利用I型胶原蛋白酶消化法培养房颤患者的原代心房肌细胞,通过免疫组化进行鉴定,同时... 探索成功培养房颤(atrial fibrillation,AF)患者原代心房肌细胞的方法,能够为房颤发病机制的研究奠定实验基础。取心胸外科行迷宫手术患者的左心耳,利用I型胶原蛋白酶消化法培养房颤患者的原代心房肌细胞,通过免疫组化进行鉴定,同时对培养的心房肌细胞进行初步研究。与动物实验相反,房颤患者心房肌细胞缝隙连接蛋白40(connexin40,Cx40)及Kv1.5钾离子通道蛋白的表达量均降低。由此可见直接研究成人房颤患者的心房肌细胞具有更高的可靠性,同时也证明了房颤患者心房肌细胞的培养是研究其发病机制的基础。 展开更多
关键词 心房颤动(AF) 心房肌细胞 细胞培养 缝隙连接蛋白40(Cx40) 钾离子通道(Kv1.5)
电压门控钾离子通道Kv1.5与肿瘤 被引量:2
18
作者 陈志达 曾文容 +2 位作者 林斌 吴欣宇 吴进 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2016年第2期130-132,共3页
电压门控钾离子通道Kv1.5广泛表达于多种类型肿瘤并参与肿瘤细胞增殖、凋亡、周期等过程.某些抗肿瘤药物可通过影响Kv1.5通道的表达进而影响肿瘤的生物进程.Kv1.5通道是肿瘤治疗的新靶点,研究Kv1.5通道可以进一步了解肿瘤细胞发生、发... 电压门控钾离子通道Kv1.5广泛表达于多种类型肿瘤并参与肿瘤细胞增殖、凋亡、周期等过程.某些抗肿瘤药物可通过影响Kv1.5通道的表达进而影响肿瘤的生物进程.Kv1.5通道是肿瘤治疗的新靶点,研究Kv1.5通道可以进一步了解肿瘤细胞发生、发展的机制,并有助于研制出新的抗肿瘤药物,为肿瘤治疗提供新的更好的方法. 展开更多
关键词 肿瘤 抗肿瘤药 Kv1.5钾通道
骨肉瘤Kv1.5钾离子通道表达意义的研究 被引量:1
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作者 陈志达 刘庆军 +3 位作者 曾文容 钟渊福 林斌 吴进 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2016年第9期573-581,共9页
目的研究表明,Kv1.5钾离子通道参与了多种肿瘤的生物学行为,但其在骨肉瘤中的表达和作用尚未明确。本研究拟检测Kv1.5钾离子通道在骨肉瘤中的表达,并探讨小干扰RNA(small interfering,siRNA)沉默Kv1.5表达后对骨肉瘤细胞增殖... 目的研究表明,Kv1.5钾离子通道参与了多种肿瘤的生物学行为,但其在骨肉瘤中的表达和作用尚未明确。本研究拟检测Kv1.5钾离子通道在骨肉瘤中的表达,并探讨小干扰RNA(small interfering,siRNA)沉默Kv1.5表达后对骨肉瘤细胞增殖、周期和凋亡的影响及可能的调控机制。方法实验分组,Kv1.5-siRNA转染细胞为实验组,control—siRNA转染细胞为对照组,未处理细胞为空白组。采用siRNA抑制Kv1.5的表达,并分别采用CCK-8法、克隆形成率、流式细胞仪和Tunel法检测MG-63细胞增殖、生长、周期和凋亡的变化。采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测骨肉瘤细胞中周期和凋亡相关基因的表达水平。结果Kv1.5在骨肉瘤细胞和组织中均异常高表达。CCK-8法检测结果示,Kv1.5-siRNA组细胞增殖水平为(53.87±5.91)%,与control—siRNA组的(99.14±7.87)%相比差异有统计学意义,Z=-3.49,P〈0.001;与空白组(100.00±8.37)%相比差异有统计学意义,Z=-3.57,P〈0.001。克隆形成实验结果示,Kv1.5-siRNA组克隆形成数为164.00±7.66,与control—siRNA组(223.20±11.41)相比,Z=-2.61,P=0.008;与空白组(228.20±12.62)相比,Z=-2.40,P=0.016。流式细胞周期结果示,Kv1.5-siRNA组Go/Gl期所占比例为(68.81±0.55)Vo,与control—siRNA组(41.22±0.61)%相比,Z=-2.15,P=0.031;与空白组(40.79±0.52)%相比,Z=-2.31,P=0.029。流式细胞凋亡结果示,Kv1.5-siRNA组(30.23±1.74)%与control—siRNA组(14.10±1.27)%相比,Z=-2.04,P=0.039;与空白组(12.85±1.02)%相比,Z=-2.09,P=0.035。Tunel法结果示,Kv1.5-siRNA组凋亡指数为(35.20±3.14)%,与control—siRNA组(8.03±1.50)%相比,Z=-2.41,P=0.015;与空白组(8.22±1.32)%相比,Z=-2.25,P=0.019。沉默Kv1.5表达 展开更多
关键词 Kv1.5钾通道 骨肉瘤 细胞增殖 细胞周期 凋亡
Kv1.5钾离子通道阻滞剂的研究进展
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作者 董超 高洁 +1 位作者 翟晓晨 吴捷 《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第10期1097-1101,共5页
Kv1.5钾离子通道仅在人心房肌中表达,因而特异性Kv1.5通道阻滞剂对心房具有高度选择性,不引发室性心律失常,故极有可能成为未来房颤治疗的新型主导药物之一。研究发现,Kv1.5通道阻滞剂对阵发性、持续性和永久性3种不同类型的房颤均有治... Kv1.5钾离子通道仅在人心房肌中表达,因而特异性Kv1.5通道阻滞剂对心房具有高度选择性,不引发室性心律失常,故极有可能成为未来房颤治疗的新型主导药物之一。研究发现,Kv1.5通道阻滞剂对阵发性、持续性和永久性3种不同类型的房颤均有治疗作用,作用机制主要涉及延长心肌细胞动作电位复极时程和有效不应期。本文就Kv1.5通道的结构特点及其阻滞剂的研究进展进行综述,希望能为新型房颤治疗药物的研发提供一定线索和启示。 展开更多
关键词 KV1.5通道 钾通道阻滞剂 心房颤动
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