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国产甲型肝炎减毒活疫苗安全性及免疫效果比较
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作者 郭雪 陈海平 +5 位作者 姜崴 石煊雯 肖艳慧 丁丽丽 赵淑洁 罗林云 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第5期508-511,共4页
目的比较国产甲型肝炎减毒活疫苗的安全性及免疫原性。方法选择出生后未接种过甲型肝炎疫苗的18~24月龄儿童,按照随机、对照的原则分为实验组和对照组,每组接种不同的国产甲型肝炎减毒活疫苗。观察接种后30d局部及全身反应;免疫后30 d采... 目的比较国产甲型肝炎减毒活疫苗的安全性及免疫原性。方法选择出生后未接种过甲型肝炎疫苗的18~24月龄儿童,按照随机、对照的原则分为实验组和对照组,每组接种不同的国产甲型肝炎减毒活疫苗。观察接种后30d局部及全身反应;免疫后30 d采血,分离血清,检测抗体滴度。结果306名受试者共观察到109例不良反应,实验组及对照组不良反应发生率分别为34.4%和36.8%,差异无统计学意义(P> 0.05);实验组及对照组免疫后甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)抗体阳性率分别为99.3%和99.4%,抗体几何平均滴度(GMT)分别为211.3和224.6 mIU/mL,差异均无统计学意义(P> 0.05)。结论两种国产甲型肝炎减毒活疫苗均具有良好的安全性及免疫原性。 展开更多
关键词 甲型肝炎 减毒活疫苗 安全性 免疫原性
单纯疱疹病毒Ⅰ型基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒减毒活疫苗Oka株感染小鼠的生物学特性比较
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作者 柳蕾 徐兴丽 +4 位作者 冯敏 何玉凤 王丽春 张莹 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期249-254,共6页
目的比较单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus typeⅠ,HSV-Ⅰ)基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)减毒活疫苗Oka株感染BALB/c小鼠的生物学特性。方法用不同剂量(103、104、105 PFU/只)的HSV-ⅠM3株及疫... 目的比较单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus typeⅠ,HSV-Ⅰ)基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)减毒活疫苗Oka株感染BALB/c小鼠的生物学特性。方法用不同剂量(103、104、105 PFU/只)的HSV-ⅠM3株及疫苗剂量的VZV Oka株以不同方式(腹腔、肌肉、鼻腔、足垫)感染小鼠后,对小鼠的急性临床反应、体重变化、病毒增殖、组织病理损伤及病毒重激活等生物学特性进行比较。结果 HSV-ⅠM3及VZV Oka组小鼠均未见弓背、倒毛、单侧眼失明等急性临床症状,体重均呈逐渐上升趋势;器官组织中病毒拷贝数均处于较低水平,且两组差异无统计学意义(P> 0. 05);小鼠脑组织出现轻微局部炎症细胞浸润、出血、胶质小结或无异常,两组差异较小,脊髓组织均未出现明显异常;神经组织与Vero细胞共培养,均未观察到细胞病变(CPE)。结论 HSV-ⅠM3株与VZV Oka株感染小鼠后的生物学特征无明显差异。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒Ⅰ型 突变株 水痘带状疱疹病毒 减毒活疫苗 小鼠 生物学特性
SKLZΔspiC鸡白痢沙门菌减毒活疫苗候选株的遗传稳定性分析
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作者 王耀楠 王虎强 +4 位作者 蔡媛 张健 潘志明 焦新安 耿士忠 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期129-133,共5页
目的分析鸡白痢沙门菌减毒活疫苗候选株SKLZΔspiC的遗传稳定性。方法将疫苗株SKLZΔspiC与其亲体株S06004进行体外混合培养、体内共同感染,同时将重组质粒pMD20-spiC电转化导入疫苗株SKLZΔspiC,连续传至20代后,进行PCR及测序鉴定。结... 目的分析鸡白痢沙门菌减毒活疫苗候选株SKLZΔspiC的遗传稳定性。方法将疫苗株SKLZΔspiC与其亲体株S06004进行体外混合培养、体内共同感染,同时将重组质粒pMD20-spiC电转化导入疫苗株SKLZΔspiC,连续传至20代后,进行PCR及测序鉴定。结果在体外混合培养、体内混合感染条件下,疫苗株SKLZΔspiC均无法从野生株S06004获得靶基因spiC;疫苗株SKLZΔspiC无法从外源质粒获得靶基因spiC。结论疫苗株SKLZΔspiC具有良好的遗传稳定性。 展开更多
关键词 鸡白痢沙门菌 减毒活疫苗 遗传稳定性
流行性乙型脑炎防控进展及挑战
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作者 王环宇 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期133-135,共3页
流行性乙型脑炎(乙脑)是我国重要的病毒性脑炎,于20世纪40年代证实乙脑在中国流行,1971年的年发病率20.92/10万,2008年乙脑疫苗纳入国家免疫计划,2013年乙脑发病率降至0.16/10万。乙脑病毒分为5个基因型,中国有基因1、3和5型,目前主要... 流行性乙型脑炎(乙脑)是我国重要的病毒性脑炎,于20世纪40年代证实乙脑在中国流行,1971年的年发病率20.92/10万,2008年乙脑疫苗纳入国家免疫计划,2013年乙脑发病率降至0.16/10万。乙脑病毒分为5个基因型,中国有基因1、3和5型,目前主要以基因1型乙脑病毒流行为主。近年来,乙脑发病人群特征出现变化,在我国北方地区主要以成人乙脑为主。乙脑防控面临新的挑战。 展开更多
关键词 脑炎 日本 乙型脑炎病毒 减毒活疫苗
3批乙型脑炎减毒活疫苗病毒全基因序列测定和分析
5
作者 刘欣玉 黄艳秋 +3 位作者 徐宏山 贾丽丽 李玉华 俞永新 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第3期330-333,337共5页
目的对3批乙型脑炎减毒活疫苗病毒进行全基因测序,并与疫苗原始种子序列进行比较。方法随机选取某厂家生产的3批乙脑减毒活疫苗,提取病毒全基因组RNA,逆转录为cDNA后分段PCR扩增并测序。序列拼接后利用MegAlign软件与GenBank中乙脑减毒... 目的对3批乙型脑炎减毒活疫苗病毒进行全基因测序,并与疫苗原始种子序列进行比较。方法随机选取某厂家生产的3批乙脑减毒活疫苗,提取病毒全基因组RNA,逆转录为cDNA后分段PCR扩增并测序。序列拼接后利用MegAlign软件与GenBank中乙脑减毒活疫苗原始种子全基因序列进行同源性比较。结果 3批乙型脑炎减毒活疫苗病毒基因组全长10 977个核苷酸,与乙脑减毒活疫苗原始种子序列同源性为100%。结论三批次乙型脑炎减毒活疫苗遗传特性高度稳定。 展开更多
关键词 乙型脑炎 减毒活疫苗 全基因序列
一株减毒百日咳鲍特菌的构建及生物学特性分析 预览 被引量:1
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作者 田苗苗 张优仪 +2 位作者 王小莲 钟江 李瑞 《微生物与感染》 2018年第1期8-15,共8页
百日咳是传染性强、感染率高的急性呼吸道传染病,主要感染婴幼儿,是婴儿死亡的主要原因之一。百日咳鲍特菌(Bordetella pertussis)是引起百日咳的最主要病原菌。近年来世界各地多次出现百日咳暴发,迫切需研制更加有效的新型百日咳疫... 百日咳是传染性强、感染率高的急性呼吸道传染病,主要感染婴幼儿,是婴儿死亡的主要原因之一。百日咳鲍特菌(Bordetella pertussis)是引起百日咳的最主要病原菌。近年来世界各地多次出现百日咳暴发,迫切需研制更加有效的新型百日咳疫苗。本研究构建了一株减毒百日咳活疫苗BPTM1,利用同源重组方法敲除编码百日咳鲍特菌主要毒力因子百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)和皮肤坏死毒素(dermonecrotic toxin,DNT)的基因,并用大肠埃希菌的同源基因置换了负责气管细胞毒素(tracheal cytotoxin,TCT)转运的基因amp G。通过聚合酶链反应验证毒素及相关基因的敲除和置换,蛋白免疫印迹法检测表明PTX的S1亚基未表达。体外生长曲线和体内定植曲线均表明,相比于野生型百日咳鲍特菌BPMM,减毒BPTM1的生长和定植能力未受影响,其所致肺部病理效应减轻,而所诱导的百日咳鲍特菌特异性Ig G、Ig G1、Ig G2a抗体保持高水平。本研究表明,减毒百日咳鲍特菌BPTM1有可能成为百日咳候选疫苗。 展开更多
关键词 百日咳鲍特菌 减毒活疫苗 定植 免疫反应
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人用疫苗生产用细胞、胰酶及疫苗成品中猪细环病毒PCR检测方法的建立及验证
7
作者 任芳芳 钱兴丽 +5 位作者 宋彩花 陈巍 赵勇 刘信毅 洪超 杨晓蕾 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期656-661,共6页
目的建立人用疫苗生产用细胞、胰酶及疫苗成品中猪细环病毒(Torque teno sus virus,TTSu V)的PCR检测方法,并进行验证。方法根据Gen Bank中登录的TTSu V1(JN688927)及TTSu V2(AY823991)的序列,合成TTSu V1及TTSu V2基因组部分DNA... 目的建立人用疫苗生产用细胞、胰酶及疫苗成品中猪细环病毒(Torque teno sus virus,TTSu V)的PCR检测方法,并进行验证。方法根据Gen Bank中登录的TTSu V1(JN688927)及TTSu V2(AY823991)的序列,合成TTSu V1及TTSu V2基因组部分DNA序列,连接于PUC57质粒上,制备重组质粒,以重组阳性质粒DNA为模板,PCR扩增316 bp的TTSu V1片段及252 bp的TTSu V2片段,同时验证方法的灵敏度和特异性。并采用该方法对2批0.1%胰酶、Vero、KMB17、MRC5、Hep2、BT细胞及6批疫苗[3批Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine made from Sabin strain,SIPV)收获液、1批SIPV成品、1批冻干甲型肝炎减毒活疫苗[hepatitis A(live)vaccine,freezedried,f HAV]成品、1批肠道病毒71型(enterovivus type 71,EV71)灭活疫苗成品]进行检测。结果建立的PCR法最低分别可检出10 fg/μL TTSu V1和0.01 fg/μL TTSu V2的目的基因;该方法可特异性扩增出TTSu V1和TTSu V2的目的基因条带。2批0.1%胰酶、Vero、KMB17、MRC5、Hep2、BT细胞及6批疫苗均未检出TTSu V1及TTSu V2。结论成功建立了疫苗生产用原材料、细胞、疫苗收获液及成品中TTSu V的PCR检测方法,且该方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于本所疫苗生产中对TTSu V的检测。 展开更多
关键词 猪细环病毒 细胞 胰酶 减毒活疫苗 灭活疫苗 聚合酶链式反应
减毒活疫苗的应用及其研究进展 被引量:2
8
作者 李征 刘晔 李春阳 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第2期205-209,共5页
减毒活疫苗可引发机体免疫反应,刺激机体产生特异性的记忆B和T细胞,获得长期或终生保护作用,与灭活疫苗比较,减毒活疫苗具有免疫力强及作用时间长的优点。减毒活疫苗在疫苗史的初期就发挥了关键作用,如通过接种牛痘预防天花;后续... 减毒活疫苗可引发机体免疫反应,刺激机体产生特异性的记忆B和T细胞,获得长期或终生保护作用,与灭活疫苗比较,减毒活疫苗具有免疫力强及作用时间长的优点。减毒活疫苗在疫苗史的初期就发挥了关键作用,如通过接种牛痘预防天花;后续开发的麻风腮减毒活疫苗、乙脑减毒活疫苗、水痘减毒活疫苗、轮状病毒减毒活疫苗、登革热减毒活疫苗及卡介苗等均具有良好的免疫效果;新开发减毒活疫苗还可用于预防和治疗肿瘤、糖尿病、肺炎及新结核病等疾病,具有广泛的应用前景。本文就减毒活疫苗在传染性疾病、肿瘤及其他疾病中的应用及研究进展作一综述。 展开更多
关键词 减毒活疫苗 病毒 细菌
猪乙型脑炎病毒基因Ⅰ型弱毒株免疫小鼠后诱导INF-γ 的能力 预览
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作者 王侨 柴春霞 +7 位作者 冯瑶 曹钰莹 邓李霜 曹三杰 黄小波 文翼平 赵勤 伍锐 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期233-237,共5页
【目的】 评估基因玉型猪乙型脑炎病毒弱毒株(SCYA201201 株) 作为候选疫苗诱发机体产生细胞免疫的能力.【方法】 将基因玉型猪乙型脑炎弱毒株(SCYA201201株 F122 代次) 腹腔免疫小鼠后使用 ELISA检测试剂盒测定早期的INF-γ 水平,... 【目的】 评估基因玉型猪乙型脑炎病毒弱毒株(SCYA201201 株) 作为候选疫苗诱发机体产生细胞免疫的能力.【方法】 将基因玉型猪乙型脑炎弱毒株(SCYA201201株 F122 代次) 腹腔免疫小鼠后使用 ELISA检测试剂盒测定早期的INF-γ 水平, 之后测定INF-γ 在小鼠体内的持续时间. 【结果】 结果显示 猪乙型脑炎SCYA201201弱毒株(F122代次) 经腹腔免疫小鼠后,小鼠血清中的INF-酌在免疫后6h就可上升到一个较高水平, 且 INF-γ 在血清和小鼠脾脏淋巴细胞中均可持续14d以上. 【结论】 猪乙型脑炎SCYA201201弱毒株(F122代次) 免疫小鼠后能够在早期诱发INF-γ 产生, 并且能够维持14d以上, 有作为候选疫苗的潜力. 展开更多
关键词 基因Ⅰ型乙型脑炎病毒 弱毒株 INF-Γ
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中国乙型脑炎病毒株的毒力变异和减毒活疫苗的研究 被引量:1
10
作者 俞永新 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2018年第5期449-457,共9页
1949年以来中国学者在自然界分离到数百株乙型脑炎(乙脑)病毒株,并对这些病毒株进行神经毒力的研究,发现毒株问存在明显的毒力差异,特别是神经外毒力,差异的原因与自然界环境如媒介、宿主和气候等有关。乙脑的显性和隐性感染则与... 1949年以来中国学者在自然界分离到数百株乙型脑炎(乙脑)病毒株,并对这些病毒株进行神经毒力的研究,发现毒株问存在明显的毒力差异,特别是神经外毒力,差异的原因与自然界环境如媒介、宿主和气候等有关。乙脑的显性和隐性感染则与病毒株的毒力强弱密切相关。对乙脑病毒的变异进行研究,发现病毒可以通过小鼠脑内或不同的细胞传代而毒力逐步减弱,特别是神经外毒力降低更快,并且可以通过空斑把强弱病毒分离从而挑选到低毒力的弱毒株。通过不同减毒试验,获得多株不同毒力的弱毒株用于人体、猪和马的免疫。特别是其中发现病毒通过实验动物体内的非神经组织传代,能够进一步降低病毒的残余毒力并提高其免疫性,应用该创新性技术成功筛选到1株高度减毒而稳定并保持高免疫性的SA14-14-2株,用该株病毒生产的活疫苗,自1989年取得生产许可证以来已在国内外广泛应用,证实其安全高效达到国际领先水平,并于2013年取得WHO的预认证。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎病毒 分离株 毒力 减毒活疫苗
以乙脑减毒活疫苗SA14-14-2为骨架的重组嵌合登革4病毒的构建与鉴定 预览
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作者 解东洋 祝琴 +5 位作者 刘忠钰 赵慧 邓永强 叶青 李晓峰 秦成峰 《寄生虫与医学昆虫学报》 2018年第2期80-86,共7页
登革4型病毒近年来在我国东南沿海地区时有流行,威胁人民健康与公共卫生安全.本研究以乙脑减毒活疫苗SA14-14-2为骨架,通过反向遗传学技术构建了携带登革4型病毒主要结构蛋白prM/E基因重组嵌合病毒(ChinDENV4);进一步通过蚀斑、 生长... 登革4型病毒近年来在我国东南沿海地区时有流行,威胁人民健康与公共卫生安全.本研究以乙脑减毒活疫苗SA14-14-2为骨架,通过反向遗传学技术构建了携带登革4型病毒主要结构蛋白prM/E基因重组嵌合病毒(ChinDENV4);进一步通过蚀斑、 生长曲线、 动物实验等对其生物学特征进行了鉴定.结果显示,重组嵌合病毒ChinDENV4可高效表达登革4型病毒的结构蛋白,蚀斑大小与亲本株类似;ChinDENV4并能够在BHK-21、C6/36等细胞中高效复制,滴度分别达到1.26×105和1.58×106 PFU/mL.更重要的是,嵌合病毒ChinDENV4在乳鼠模型中的神经毒力显著弱于亲本株.本研究成功构建了乙脑/登革4型嵌合病毒,为下一步四价嵌合登革减毒活疫苗研究奠定了重要基础. 展开更多
关键词 乙脑病毒 登革4型病毒 反向遗传学 减毒活疫苗 嵌合病毒
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人3型副流感病毒减毒活疫苗的研究进展 预览
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作者 王斌 白慕群 《微生物学免疫学进展》 2017年第2期103-108,共6页
人副流感病毒(human parainfluenza viruses,HPIVs)是引起婴幼儿支气管炎和肺炎的主要病原体,人3型副流感病毒(human parainfluenza viruses type 3,HPIV-3)是HPIVs中最主要的型别。目前尚无针对HPIVs的上市疫苗和有效的抗病毒药物... 人副流感病毒(human parainfluenza viruses,HPIVs)是引起婴幼儿支气管炎和肺炎的主要病原体,人3型副流感病毒(human parainfluenza viruses type 3,HPIV-3)是HPIVs中最主要的型别。目前尚无针对HPIVs的上市疫苗和有效的抗病毒药物,研发减毒活疫苗是目前开发HPIVs疫苗的方向。本文主要对HPIV-3减毒活疫苗的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 人副流感病毒3型 减毒活疫苗 冷适应 反向遗传学技术
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一种具有CaPi矿化外壳的新型肺炎链球菌减毒活疫苗的构建
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作者 崔晶晶 吴凯峰 +5 位作者 孙潇雨 王继超 张心愿 邱喻兰 莫云钧 胥文春 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期241-247,共7页
为构建肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1矿化菌,并进一步探究其自身稳定性、热稳定性等生物学特性的改变,本研究以肺炎链球菌D39基因组DNA为模板设计合成构建突变体lyt A基因所需引物,采用插入失活的方法构建SPY1-△lyt A突变株,并以缺陷菌的... 为构建肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1矿化菌,并进一步探究其自身稳定性、热稳定性等生物学特性的改变,本研究以肺炎链球菌D39基因组DNA为模板设计合成构建突变体lyt A基因所需引物,采用插入失活的方法构建SPY1-△lyt A突变株,并以缺陷菌的生长特性以及PCR的方法进行鉴定;将SPY1-△lyt A突变株于富钙环境中培养,用不同浓度的磷酸盐进行滴定,使其形成磷酸钙矿化壳,通过扫描电镜以及直接荧光反应来检测疫苗菌株矿化情况;并将矿化菌株与未矿化菌株同时置于37℃不同时间后通过比较其存活率来评价矿化菌的热稳定性。PCR结果以及细菌长时间不溶解的生长特性表明成功构建了SPY1-△lyt A突变株;扫描电镜以及直接荧光反应结果显示细菌表面形成Ca Pi矿化外壳,并且SPY1-△lyt A-Ca Pi矿化菌具有较好的热稳定性。本研究为肺炎链球菌活菌疫苗的进一步研发奠定了基础。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 减毒活疫苗 插入失活 生物矿化 热稳定性
Construction of Live Attenuated Vaccine against Vib- rio alginolyticus and the Evaluation on Its Immuno- protection Effect 预览
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作者 Yuan Yonghong Pang Huanying +4 位作者 Zhou Zejun Song Dawei Ding Yu Jian Jichang Wu Zaohe 《动物与饲料科学:英文版》 CAS 2016年第2期85-89,93共6页
Vibrio alginolyticus,a gram-negative bacterium has been described to be one of the most common and economically important aquatic pathogens of fish and shellfish. Vaccine immunization is an effective approach preventi... Vibrio alginolyticus,a gram-negative bacterium has been described to be one of the most common and economically important aquatic pathogens of fish and shellfish. Vaccine immunization is an effective approach preventing V. alginolyticus infection. Attenuated vaccine stimulates systemic immune response in the host,but few attenuated vaccine against V. alginolyticus is available. The type III secretion system( T3SS),an important pathogenic factor of V. alginolyticus,is used by bacterial pathogens to inject effector proteins into the cytoplasm of their host cells. The T3 SS forms a structure called needle complex with a multi-ring base that spans the bacteria and a needle-like extension that protrudes several nanometers from the bacterial surface. vscO locates at the ' needle' site of T3 SS,playing the role of escorting the molecular chaperone and effector proteins into host cells and further inducing the death of host cells. In this paper,an in-frame deletion mutant of vscO was constructed using overlap PCR and homologous recombination technology combining with chloramphenicol( Cm) and sucrose screening. The LD50 changes of ZJ03ΔvscO mutant strains compared with the strain ZJ03 were examined in grouper( Epinephelus coioides). The ZJ03ΔvscO mutant showed about 150 times decrease in virulence in E. coioides compared with wide type ZJ03. After vaccination with ZJ03ΔvscO in E. coioides through injection and immersion,the specific antibody titers were markedly higher than that in the saline control group( P < 0. 05). The titers of injection and immersion group on the forth week reached the maximums at 1∶ 2 048 and 1∶ 128,respectively. The relative percentage survival( RPS) of injection group was 84%,while that in immersion group was 68%.These results indicate that the ZJ03ΔvscO of V. alginolyticus has a high immunogenicity,and can be used as live attenuated vaccine. In addition,RPS may be affected by vaccination and infection methods. This study can provide technical support for controlling fish diseases caused 展开更多
关键词 减毒活疫苗 溶藻弧菌 免疫保护效果 斜带石斑鱼 评价 宿主系统 宿主细胞 水产病原菌
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人呼吸道合胞病毒减毒活疫苗的研究进展 预览 被引量:1
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作者 韦钦钦 朱传凤 高雪军 《微生物学免疫学进展》 2016年第3期60-66,共7页
人呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是一种可引起严重下呼吸道疾病的病原体,易感人群为婴幼儿、老年人及免疫力低下者。目前尚无针对RSV的疫苗和特异而有效的抗病毒药物。研究发现,减毒活疫苗不产生疾病增强效应,在... 人呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是一种可引起严重下呼吸道疾病的病原体,易感人群为婴幼儿、老年人及免疫力低下者。目前尚无针对RSV的疫苗和特异而有效的抗病毒药物。研究发现,减毒活疫苗不产生疾病增强效应,在母传抗体的存在下仍可复制,且有较强的免疫原性,被认为是最有希望的RSV疫苗。就RSV减毒活疫苗的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 人呼吸道合胞病毒 减毒活疫苗 传统生物学方法 反向遗传学技术
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霍乱疫苗株溶血素hlyA基因敲除及绿色荧光蛋白构建 预览
16
作者 杨秋 周妍妍 +1 位作者 阚飙 芮勇宇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期362-366,共5页
目的:探讨霍乱疫苗株NFYY101溶血素htya基因敲除及绿色荧光蛋白的构建。方法:将hlya基因上游片段(hlyAup)、hlyA下游片段(hlyAdown),克隆入pUC18中,再在两者间插入绿色荧光蛋白(laczGFPuv)基因,获得重组质粒pUC18一hlyAup-la... 目的:探讨霍乱疫苗株NFYY101溶血素htya基因敲除及绿色荧光蛋白的构建。方法:将hlya基因上游片段(hlyAup)、hlyA下游片段(hlyAdown),克隆入pUC18中,再在两者间插入绿色荧光蛋白(laczGFPuv)基因,获得重组质粒pUC18一hlyAup-laczGFPuv-hlyAdown,再构建重组自杀质粒pCVD442-hlyA uplaczGFPuv-hlradown,接合入霍乱疫苗株NFYY101中,进行同源重组。结果:正确构建重组自杀质粒pCVD442-hlyaup—laczGFPuv-hlyadown表达绿色荧光蛋白,成功缺失了疫苗株候选株NFYY101的hlya基因,在敲除位置同源重组入绿色荧光蛋白基因并表达。结论:成功构建表达绿色荧光蛋白的重组自杀质粒,可用于O1群及O139群霍乱疫苗株hlrA基因敲除及绿色荧光蛋白构建。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 减毒活疫苗 基因重组 绿色荧光蛋白
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布鲁氏菌病疫苗研究进展 预览 被引量:7
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作者 景志刚 严家瑞 范伟兴 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期188-199,共12页
使用疫苗免疫是防控布氏菌病(简称布病)的重要措施之一,但对人群使用疫苗免疫一直存有争议,世界上主要是俄罗斯(前苏联)和中国使用19-BA疫苗和104M疫苗对布病高危人群进行免疫。对于动物布病,早期曾使用灭活疫苗进行免疫,目前主要使... 使用疫苗免疫是防控布氏菌病(简称布病)的重要措施之一,但对人群使用疫苗免疫一直存有争议,世界上主要是俄罗斯(前苏联)和中国使用19-BA疫苗和104M疫苗对布病高危人群进行免疫。对于动物布病,早期曾使用灭活疫苗进行免疫,目前主要使用S19、Rev.1、RB51、S2和M5等弱毒活疫苗,其中Rev.1和S19是预防小反刍动物和奶牛布病最有效的疫苗,其它疫苗的使用也比较广泛。初步研究表明基因工程疫苗等新型布病疫苗具有良好的应用前景,但尚未被官方认可用于人和动物的布病免疫。特对人布病疫苗和动物布病疫苗进行介绍,并对基因工程疫苗以及其它新型布病疫苗的最新研究进展进行概述。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 灭活疫苗 弱毒活疫苗 基因工程疫苗 新型疫苗
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麻腮风水痘联合减毒活疫苗病毒滴定中混合抗血清对异种病毒的干扰
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作者 于立芹 张安宁 +5 位作者 李淑云 刘晓琳 史晓莉 李瓯 张建军 陈晓梅 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第12期1246-1248,1254共4页
目的检测麻腮风水痘(measles,mumps,rubella and varicella,MMRV)联合减毒活疫苗病毒滴定中混合血清对异种病毒的干扰作用。方法滴定MMRV联合减毒活疫苗各病毒成分时,根据各种抗病毒血清的使用浓度,通过不同滴度水平的异种病毒,采用9... 目的检测麻腮风水痘(measles,mumps,rubella and varicella,MMRV)联合减毒活疫苗病毒滴定中混合血清对异种病毒的干扰作用。方法滴定MMRV联合减毒活疫苗各病毒成分时,根据各种抗病毒血清的使用浓度,通过不同滴度水平的异种病毒,采用96孔微量版滴定法(麻疹、腮腺炎、风疹病毒)和改良蚀斑法(水痘病毒)检测混合抗血清对其滴度的影响。结果 1∶320抗腮腺炎病毒血清、1∶40抗风疹病毒血清和1∶128抗水痘病毒血清的混合血清对不同滴度的麻疹病毒无干扰作用;1∶320抗麻疹病毒血清、1∶40抗风疹病毒血清和1∶128抗水痘病毒血清的混合血清对不同滴度的腮腺炎病毒无干扰作用;1∶320抗麻疹病毒血清、1∶320抗腮腺炎病毒血清和1∶128抗水痘病毒血清的混合血清对不同滴度的风疹病毒无干扰作用;1∶80抗麻疹病毒血清、1∶40抗腮腺炎病毒血清和1∶40抗风疹病毒血清的混合血清对不同滴度的水痘病毒无干扰作用。结论在MMRV联合减毒活疫苗病毒滴定中,混合抗血清对异种病毒无干扰作用。 展开更多
关键词 麻腮风水痘联合减毒活疫苗 抗血清 病毒 干扰
流行性乙型脑炎减毒活疫苗两针免疫法免疫效果研究 被引量:3
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作者 杨波 甘标 +1 位作者 王军 苏家立 《中国卫生检验杂志》 2015年第8期1212-1213,1249共3页
目的了解流行性乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗当前使用的两针免疫法的免疫效果。方法在广州市海珠区选取未接种过乙脑疫苗且未患过乙脑的8月龄~10月龄儿童,按当前8月龄始初免、24月龄始加强的程序先后进行两针次免疫,并于免疫前和免疫后... 目的了解流行性乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗当前使用的两针免疫法的免疫效果。方法在广州市海珠区选取未接种过乙脑疫苗且未患过乙脑的8月龄~10月龄儿童,按当前8月龄始初免、24月龄始加强的程序先后进行两针次免疫,并于免疫前和免疫后1个月各采集静脉血(共4次)进行乙脑中和抗体检测。结果 176名儿童的初免前抗体阳性率为9.6%,抗体几何平均滴度(GMT)为1:1.27;初免后抗体阳性率为86.9%,GMT为1:19.35;至加强免疫前抗体阳性率降至75.0%,GMT降至1:9.38;加强免疫后抗体阳性率为96.0%,GMT为1:40.92;免疫后抗体应答强弱与免疫前抗体滴度高低呈负相关关系。结论我国当前使用的乙脑减毒活疫苗两针免疫法的免疫效果良好。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎 减毒活疫苗 两针免疫 效果
鼠伤寒沙门菌双缺失株SL1344ΔcrpΔsipB的构建及其生物学特性的初步研究 被引量:3
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作者 陈松彪 李静 +6 位作者 颜云飞 张春杰 程相朝 郁川 何雷 余祖华 赵战勤 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期61-67,共7页
为研制更加安全有效且遗传背景清晰的减毒鼠伤寒沙门菌活疫苗候选株,在单缺失株SL1344Δcrp的基础上,运用自杀性质粒介导的细菌同源重组技术敲除sipB基因,构建了双缺失株SL1344ΔcrpΔsipB。PCR及测序结果表明SL1344ΔcrpΔsipB构建成... 为研制更加安全有效且遗传背景清晰的减毒鼠伤寒沙门菌活疫苗候选株,在单缺失株SL1344Δcrp的基础上,运用自杀性质粒介导的细菌同源重组技术敲除sipB基因,构建了双缺失株SL1344ΔcrpΔsipB。PCR及测序结果表明SL1344ΔcrpΔsipB构建成功。生物学特性研究表明,SL1344ΔcrpΔsipB血清型未发生变化,遗传性稳定。与亲本株SL1344相比,双缺失株的生长速度明显减慢,毒力降低了约99.9%以上。免疫保护效力试验显示,6周龄昆明小鼠口服免疫SL1344ΔcrpΔsipB后第17天,利用鼠伤寒沙门菌野生株攻毒,保护率为60%;免疫后第21天血清抗体效价达到峰值。上述结果为进一步研制安全有效的鼠伤寒沙门菌疫苗弱毒株奠定了基础。 展开更多
关键词 SL1344Δcrp缺失株 SL1344ΔcrpΔsipB缺失株 重组自杀性质粒 毒力 减毒活疫苗
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