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miRNA-373在MDA-MB-231乳腺癌细胞中的表达及对生物学行为的影响研究 预览
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作者 沈凯 邵芳 +1 位作者 冯同保 戚春建 《癌症进展》 2019年第14期1647-1651,共5页
目的探讨miRNA-373对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭等生物学行为的影响及其机制。方法采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测MDA-MB-231、MDA-MB-435、MCF-7、ZR-75-1乳腺癌细胞株中miRNA-373的表达情况;MDA-MB-231细胞株中分别转染miRNA-37... 目的探讨miRNA-373对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭等生物学行为的影响及其机制。方法采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测MDA-MB-231、MDA-MB-435、MCF-7、ZR-75-1乳腺癌细胞株中miRNA-373的表达情况;MDA-MB-231细胞株中分别转染miRNA-373(NC组)和miRNA-373mimics(miRNA-373mimics组),采用CCK-8实验和Transwell实验检测乳腺癌细胞增殖和侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Westernblot法检测蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的表达情况。结果MDA-MB-231乳腺癌细胞中miRNA-373的表达量相对MDA-MB-435、MCF-7、ZR-75-1细胞较低。miRNA-373mimics组乳腺癌细胞中miRNA-373、p-AKT表达量均高于NC组细胞,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。CCK8实验检测结果显示,细胞在转染24、48、72h时,NC组和miRNA-373mimics组细胞的吸光度值比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。流式细胞仪检测NC组和miRNA-373mimics组细胞的凋亡情况,两组细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。转染24、48h时,NC组细胞迁移距离分别短于miRNA-373mimics组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论miRNA-373可诱导乳腺癌细胞侵袭及迁移,其机制可能是通过增强AKT信号通路的磷酸化水平来促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 乳腺癌 MDA-MB-231 miRNA-373 侵袭 迁移 增殖 凋亡
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多硫代二酮哌嗪类化合物1004体外对MDA-MB-231细胞转移能力的影响及机制研究
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作者 陈奥 甘琪 +2 位作者 戚欣 顾谦群 李静 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2019年第4期11-18,共8页
目的检测多硫代二酮哌嗪类化合物1004体外对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞转移能力的影响,并初步研究其作用机制。方法利用磺酰罗丹明染色法(SRB)检测1004作用于MDA-MB-231细胞24和72h的细胞毒活性;细胞黏附实验检测1004对MDA-MB-231细胞... 目的检测多硫代二酮哌嗪类化合物1004体外对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞转移能力的影响,并初步研究其作用机制。方法利用磺酰罗丹明染色法(SRB)检测1004作用于MDA-MB-231细胞24和72h的细胞毒活性;细胞黏附实验检测1004对MDA-MB-231细胞与细胞外基质黏附的影响;划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测1004对MDA-MB-231细胞迁移和侵袭的影响;明胶酶谱法检测1004对MDA-MB-231细胞基质金属蛋白酶MMP9活性的影响;Western Blot检测1004对MDA-MB-231细胞N-cadherin、Snail、c-Myc和FGFR1的蛋白表达的影响,检测蛋白激酶B(PKB,亦称AKT)和细胞外蛋白调节激酶(ERK)的表达和活化水平。结果 1004作用于MDA-MB-231细胞72h的IC50为(6.28±1.25)μmol·L^-1,而1004作用于MDA-MB-231细胞24h的IC50超过100μmol·L^-1。1004作用于MDA-MB-231细胞可增加细胞黏附,并抑制细胞的迁移和侵袭。1004可以显著降低N-cadherin、c-Myc及Snail的表达水平,并抑制MMP9的活性。1004作用于MDA-MB-231细胞可以浓度依赖性地引起FGFR1的表达下调,并抑制下游ERK和AKT的活化。结论1004体外对MDA-MB-231细胞具有转移抑制活性,其机制可能与下调FGFR1的蛋白水平并抑制FGFR信号通路有关。 展开更多
关键词 MDA-MB-231 转移 信号通路 AKT ERK
沉默CXCL1基因抑制三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的迁移、侵袭的研究
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作者 杨诚诚 陶凯 +3 位作者 喻浩宸 蹇磊 柳满然 刘胜春 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期455-460,共6页
为探讨CXCL1基因对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的迁移、侵袭作用的影响,该研究设计针对CXCL1基因的小干扰RNA,用实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附测定试验分别在RNA和蛋白质水平上检测干扰效率;采用流式细胞术学技术检测细胞的周期和凋亡... 为探讨CXCL1基因对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的迁移、侵袭作用的影响,该研究设计针对CXCL1基因的小干扰RNA,用实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附测定试验分别在RNA和蛋白质水平上检测干扰效率;采用流式细胞术学技术检测细胞的周期和凋亡情况;采用transwell迁移和侵袭试验分别检测细胞的迁移及侵袭能力。结果显示,与siRNA-NC组细胞相比,siCXCL1-1、siCXCL1-2、siCXCL1-3细胞中CXCL1基因的mRNA和蛋白表达均下调,且si CXCL1-3干扰效率最高,mRNA及蛋白表达水平分别降低了75%(p<0.01)和46%(p<0.01)。细胞凋亡试验和细胞周期试验结果显示,沉默CXCL1基因后对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞的凋亡和周期无明显影响,差异无统计学意义(p>0.05)。transwell小室迁移和侵袭试验显示,沉默CXCL1基因能够显著抑制三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的迁移和侵袭能力(p<0.01)。研究成果为临床乳腺癌中以CXCL1基因为靶点的分子治疗提供了理论依据。 展开更多
关键词 小干扰RNA CXCL1 MDA-MB-231 迁移和侵袭
转录因子21对乳腺癌细胞增殖、迁移、血管生成的影响
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作者 李丕武 王海燕 徐岭岭 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期307-311,共5页
目的探讨转录因子21(transcription factor 21,TCF21)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)增殖、凋亡、侵袭迁移和血管生成的影响。方法利用脂质体转染的方式将TCF21过表达质粒转染到人乳腺癌细胞MDA-MB-231中,通过Western blot检测是否转染成功... 目的探讨转录因子21(transcription factor 21,TCF21)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)增殖、凋亡、侵袭迁移和血管生成的影响。方法利用脂质体转染的方式将TCF21过表达质粒转染到人乳腺癌细胞MDA-MB-231中,通过Western blot检测是否转染成功;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、DAPI法、Transwell实验、鸡胚尿囊膜实验检测TCF21过表达对MDA-MB-231增殖、凋亡、侵袭迁移和血管生成的影响。结果Western blot对TCF21蛋白表达的结果表明TCF21过表达质粒成功转染到MDA-MB-231细胞中。过表达TCF21后可以抑制肿瘤细胞的增殖,在转染48 h后开始发挥抑制作用,抑制肿瘤的侵袭迁移能力和血管生成能力,促进肿瘤细胞的凋亡。Western blot结果显示过表达TCF21后,基质金属蛋白酶9、血管内皮生长因子A、磷酸化血管内皮生长因子受体2的蛋白表达量显著降低。结论TCF21可以抑制MDA-MB-231细胞的增殖、侵袭迁移和血管的生成,促进其凋亡的发生,提示TCF21可作为临床诊断和治疗乳腺癌潜在的一个作用位点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 转录因子 细胞增殖 MDA-MB-231
Effect of Marsdenia tenacissima extract on G2/M cell cycle arrest by upregulating 14-3-3σ and downregulating c-myc in vitro and in vivo
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作者 Li Sun Qurat UI Ain +3 位作者 Ying-sheng Gao Ghulam Jilany Khan Sheng-tao Yuan Debmalya Roy 《中草药:英文版》 CAS 2019年第2期169-176,共8页
Objective: Marsdenia tenacissima extract(MTE) is a traditional Chinese herbal medicine with anti-cancer activity. In some previous studies, different mechanism actions of the anti-cancer effect of MTE have been reveal... Objective: Marsdenia tenacissima extract(MTE) is a traditional Chinese herbal medicine with anti-cancer activity. In some previous studies, different mechanism actions of the anti-cancer effect of MTE have been revealed. In this study, we first observed that MTE exhibited G2/M cell cycle arrest on two different human breast cancer cell lines, MDA-MB-231 and MCF-7 by mediating 14-3-3σ and c-myc.Methods: The effect of MTE on G2/M cell cycle arrest was evaluated in MDA-MB-231 and MCF-7 cell lines. MTT assay was done for evaluation of cell viability. Flow cytometry was employed for cell cycle analysis. Western blotting analysis and immunohistochemistry were performed to analyze the expression of G2/M cell cycle-related key protein in cells and tissue samples. Animal studies have been conducted to elucidate the anti-tumor effect of MTE.Results: Cell cycle is the backbone for developing cancer. Cell cycle proteins play a major role in the progression of cell cycle and cell proliferation. However, some key protein directly or indirectly modulate the action of cell cycle protein that highly affect cell cycle regulation. In order to investigate cellular proliferation of cancer, we observed that MTE induced the upregulation of 14-3-3σ and downregulation of c-myc,and then reduced the expression of G2/M cell cycle associated key protein, leading to the inhibition of cellular entry into mitosis phase. We also confirmed that MTE exerted a significant antitumor effect on the MDA-MB-231 xenograft model in vivo.Conclusion: G2/M cell cycle arrest occurred by the action of MTE, mediated by the upregulation of 14-3-3σ as well as downregulation of c-myc in MDA-MB-231 and MCF-7 cell lines. 展开更多
关键词 C-MYC G2/M ARREST Marsdenia tenacissima EXTRACT MCF-7 MDA-MB-231 14-3-3σ
Methanolic extract of Abrus precatorius promotes breast cancer MDA-MB-231 cell death by inducing cell cycle arrest at G0/G1 and upregulating Bax
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作者 Wan Suriyani Wan-Ibrahim Norzila Ismail +3 位作者 Siti Farhanah Mohd-Salleh Aidy Irman Yajid Michael Pak-KaiWong Mohd Nizam Md Hashim 《亚太热带生物医学杂志:英文版》 CAS 2019年第6期249-256,共8页
Objective:To determine the anti-proliferative activity of Abrus precatorius(A.precatorius)leaf extracts and their effect on cell death.Methods:A.precatorius leaves were extracted successively with hexane,ethyl acetate... Objective:To determine the anti-proliferative activity of Abrus precatorius(A.precatorius)leaf extracts and their effect on cell death.Methods:A.precatorius leaves were extracted successively with hexane,ethyl acetate and methanol by Soxhlet extraction.Aqueous extract was prepared by decoction at 50 ℃.Extracts of A.precatorius leaves were used to treat selected cancer and normal cell lines for72 h.Furthermore,3-(4,5-dimethyl thiazol-2-yl)2,5-diphenyl tetrazolium bromide assay was performed to determine cell viability.Analysis of cell cycle arrest,apoptosis assay and apoptosis protein expressions were determined by flow cytometry.Results:Methanolic extract of A.precatorius leaves showed the lowest IC50 on MDA-MB-231 cells at(26.40±5.40)μg/mL.Flow cytometry analysis revealed that cell arrest occurred at G0/G1 phase and the apoptosis assay showed the occurrence of early apoptosis at 48 h in MDAMB-231 cells treated with methanolic extract of A.precatorius leaves.Methanolic extract of A.precatorius leaves induced apoptosis by upregulation of Bax,p53 and caspase-3 and downregulation of Bcl-2.Conclusions:Methanolic extract of A precatorius leaves promotes MDA-MB-231 cell death by inducing cell cycle arrest and apoptosis possibly via the mitochondrial-related pathway. 展开更多
关键词 Abrus precatorius MDA-MB-231 Apoptosis Cell cycle BREAST cancer
ID7 Isolated from Bauhinia variegata Stem Inhibits Tumor Progression and Metastatic Mechanisms of Triple Negative Breast Cancer in Vivo 预览
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作者 Kamilla Monteiro dos Santos Izabela Natalia Faria Gomes +10 位作者 Renato JoséSilva Oliveira Fernanda E.Pinto Bruno Oliveira Fabrício P.Batista Rafael Cesar Russo Chagas Hélio B.Santos Ralph G.Thomé Wanderson Romao Rui Manuel Reis Maria Luiza Vilela Oliva Rosy Iara Maciel de Azambuja Ribeiro 《药剂与药理学:英文版》 2019年第7期368-384,共17页
Background:The breast cancer has been the most common form of cancer among women.The triple negative subtype represents 20%of all breast cancer cases in the world and is standing out by affecting young women and being... Background:The breast cancer has been the most common form of cancer among women.The triple negative subtype represents 20%of all breast cancer cases in the world and is standing out by affecting young women and being aggressive.The main cause of death of patients with cancer is due to metastasis,which can reach the liver and lungs.Objective:The activities of ID7 fraction of the stems of Bauhinia variegata L.on breast cancer,lung metastasis and liver inflammatory process were evaluated.Method:ID7 was characterized by mass-spectrometry.The viability of murine mammary cells(4T1)treated with ID7 was assessed by MTT,trypan blue and fluorescence assay and viability of BT-20,MDA-MB-231 and MCF-7 human breast cancer tumor lines by MTS.The cell migration,invasion using matrigel and adhesion were performed.The expression of cell death proteins was quanitified by western blot and the gelatinases by zimogram.The ID7 activity of the tumor(4T1)and metastatic progession in vivo was evaluated.Results:ID7 reduced the 4T1 and MDA-MB-231viability and increased the late apoptosis,inhibited the 4T1 migration and invasion,increased the 4T1 adhesion and decreased the secreted active gelatinases.ID7 also increased the expression of PARP,caspase-7 and caspase-8,RIP and TNF-R1.In vivo,the ID7 decreased the volume and weight of the tumors and decreased lung metastasis and inflammation in the liver.The characterization showed mainly the presence of oleic acid,myricetin,quercetin and kaempferol in ID7.Conclusion:Thus,it was found that ID7 fraction exhibits selective antitumor and on the mechanisms of breast cancer metastasis activity,preventing lung metastasis and inflammation in the liver.It is suggested that fatty acids and flavonoids are correlated with such activities. 展开更多
关键词 4T1 cells MDA-MB-231 MEDICINAL plants KAEMPFEROL GELATINASES apoptosis cell viabilty in vivo
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Meclizine Chloridrate and Methyl-β-Cyclodextrin Associated with Monophosphoester Synthetic Phosphoethanolamine Modulating Proliferative Potential in Triple-Negative Breast Cancer Cells 预览
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作者 Manuela Garcia Laveli da Silva Luciana Bastianelli Knop Durvanei Augusto Maria 《药剂与药理学:英文版》 2019年第7期408-420,共13页
Synthetic phosphoethanolamine(Pho-s)is a monophosphoester ester with anti-inflammatory and pro-apoptotic properties.Meclizine chloridrate(MC)is a histamine H1 receptor blocker that is also able to inhibit cellular res... Synthetic phosphoethanolamine(Pho-s)is a monophosphoester ester with anti-inflammatory and pro-apoptotic properties.Meclizine chloridrate(MC)is a histamine H1 receptor blocker that is also able to inhibit cellular respiration.However,MC does not inhibit cellular respiration in isolated mitochondria such as antimycin and rotenone.Methyl-β-cyclodextrin(MβCD)belongs to theβ-cyclodextrin family,which is capable of removing cholesterol from the plasma membrane.The aim of this study was to evaluate the proliferative effects of meclizine chloridrate and methyl-β-cyclodextrin compounds associated with synthetic phosphoethanolamine in a triple-negative human breast tumor line,MDA-MB-231 Cell viability of the tumor line and normal cells FN1 was evaluated by MTT colorimetric test;the production of free radicals was determined by lipoperoxidation(LPO)test;and the percentage of cell cycle phases and proliferative index was evaluated by flow cytometry.Cell viability demonstrated a significant decrease with the treatments of MβCD,MC and Pho-s associated with MC.The production of free radicals decreases significantly in all treatments.In addition,a significant increase of DNA fragment and decrease in G0/G1 cell cycle phase were observed in cellular percentage with concentrations of 20 and 30 mM of Pho-s in association with MC and MβCD,respectively. 展开更多
关键词 Human TRIPLE-NEGATIVE breast cancer MDA-MB-231 SYNTHETIC PHOSPHOETHANOLAMINE MECLIZINE chloridrate methyl-β-cyclodextrin cell cycle
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CK18对沉默HIF-1α的人“三阴”乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响 预览
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作者 海玲 杜华 +1 位作者 赵静 师永红 《山西医科大学学报》 CAS 2018年第12期1451-1455,共5页
目的研究CK18对HIF-1α干扰后的人"三阴"乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响.方法采用shRNA干扰技术沉默MDA-MB-231细胞中的HIF-1α基因,选择RT-PCR及Western blot技术确定HIF-1α干扰效果.构建真核表达载体CK18-PEGFP-C1,以脂... 目的研究CK18对HIF-1α干扰后的人"三阴"乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响.方法采用shRNA干扰技术沉默MDA-MB-231细胞中的HIF-1α基因,选择RT-PCR及Western blot技术确定HIF-1α干扰效果.构建真核表达载体CK18-PEGFP-C1,以脂质体转染法将其转染入HIF-1α干扰后的MDA-MB-231细胞中,荧光显微镜下评估转染效率,Western blot检测CK18蛋白的表达情况.同时以空载体PEGFP-C1转染HIF-1α干扰后的MDA-MB-231细胞为阴性对照组.实验分别通过流式细胞术及Hoechst凋亡检测试剂盒检测CK18对细胞周期及凋亡的影响.结果构建了CK18-PEGFP-C1真核表达载体,基因测序结果与GenBank报道的完全一致,并转染了封闭HIF-1α基因的MDA-MB-231细胞,Westernblot显示CK18蛋白表达上调.AnnexinⅤ-FITC/PI双染细胞凋亡检测分析CK18转染组早期凋亡率[(4.9±0.17)%]高于对照转染组[(3.09±0.25)%],差异有统计学意义(P<0.05).Hoechst染色试剂盒检测细胞凋亡显示CK18转染组的细胞凋亡率[(53±11)%]高于对照转染组[(21±13)%],差异有统计学意义(P<0.05).结论成功构建了CK18真核表达载体,并在HIF-1α干扰后的人"三阴"乳腺癌MDA-MB-231细胞中稳定表达后,可促进细胞凋亡. 展开更多
关键词 细胞角蛋白18 缺氧诱导因子-1Α “三阴”乳腺癌 MDA-MB-231 细胞凋亡
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β-榄香烯对人乳腺癌细胞侵袭和迁移作用的研究 被引量:1
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作者 郭婷婷 黄炜平 +5 位作者 胡晨霞 杨科 李建国 王剑 张奉学 王洪琦 《中药药理与临床》 CSCD 北大核心 2018年第1期76-80,共5页
目的:研究β-榄香烯对不同分子亚型人乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的作用。方法:以不同转移潜能MCF-7、MDAMB-231乳腺癌细胞作为研究对象,设空白对照组及药物组,药物组以不同浓度β-榄香烯溶液作用细胞24h与48h后,CCK8法检测其对细胞... 目的:研究β-榄香烯对不同分子亚型人乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的作用。方法:以不同转移潜能MCF-7、MDAMB-231乳腺癌细胞作为研究对象,设空白对照组及药物组,药物组以不同浓度β-榄香烯溶液作用细胞24h与48h后,CCK8法检测其对细胞活力的影响。应用细胞克隆形成实验进一步检测β-榄香烯对两种细胞增殖和克隆形成能力的影响。此外,Transwell实验和划痕实验检测β-榄香烯对高转移性细胞株MDA-MB-231细胞侵袭和迁移能力的作用。结果:β-榄香烯对MCF-7、MDA-MB-231乳腺癌细胞的活力均有抑制作用,且对高转移细胞MDA-MB-231抑制作用更强,对于MCF-7细胞24h,48h的半数抑制浓度(IC50)分别为(43.45±0.43),(43.05±0.56)μg/ml,对MDA-MB-231细胞24h,48h的半数抑制浓度(IC50)分别为(12.20±0.61),(8.30±0.27)μg/ml。克隆形成实验结果表明β-榄香烯能够抑制乳腺癌细胞的克隆形成率,与空白对照组相比具有显著性差异。当β-榄香烯浓度为25μg/ml时,对MDA-MB-231细胞的抑制率达到49.2%,对MCF-7只有15.5%。此外,Transwell实验和划痕实验结果显示当β-榄香烯浓度达到10μg/ml时就能抑制高转移性细胞株MDA-MB-231的侵袭和迁移能力。结论:β-榄香烯能够抑制MCF-7、MDA-MB-231的细胞活力、增殖和克隆形成,且对高转移性细胞株MDA-MB-231的侵袭和迁移能力显示出很强的抑制作用,其具体作用机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 Β-榄香烯 MCF-7 MDA-MB-231 乳腺癌
BLNK基因慢病毒载体构建及其稳定表达的人乳腺癌MDA-MB-231细胞株的筛选 预览
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作者 肖斌 庄玉格 +4 位作者 侯贤德 刘萍 陈建芸 孙朝晖 李林海 《实用医学杂志》 北大核心 2018年第13期2137-2140,共4页
目的构建人BLNK基因慢病毒载体,筛选稳定表达BLNK的人乳腺癌MDA-MB-231细胞株,为探讨BLNK对乳腺癌的调控作用提供细胞株模型。方法采用PCR法从3×Flag-BLNK质粒中扩增BLNK基因片段,连接到带有绿色荧光蛋白,GFP)标签的慢病毒载体表... 目的构建人BLNK基因慢病毒载体,筛选稳定表达BLNK的人乳腺癌MDA-MB-231细胞株,为探讨BLNK对乳腺癌的调控作用提供细胞株模型。方法采用PCR法从3×Flag-BLNK质粒中扩增BLNK基因片段,连接到带有绿色荧光蛋白,GFP)标签的慢病毒载体表达质粒中,与包膜质粒pMD2.G、包装质粒psPAX2共转染293T包装细胞48 h,获得携带FLAG-BLNK的重组慢病毒,同时以慢病毒空载体FLAG-vector作为阴性对照。以重组慢病毒及阴性对照慢病毒分别感染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,1周后在高倍镜100×视野下观察被感染细胞数及细胞状态,在荧光显微镜下通过观察GFP的表达情况,筛选稳定表达BLNK的细胞株。采用反转录实时荧光定量PCR,RT-qPCR)的方法和Western Blotting法检测该细胞系中BLNK基因的表达情况。结果PCR成功扩增出BLNK基因片段,插入慢病毒表达载体后,利用核酸序列测定证实重组慢病毒质粒构建成功。通过慢病毒包装三质粒表达系统获得表达BLNK的重组慢病毒,感染MDA-MB-231细胞后,在荧光显微镜下能够明显观察到绿色荧光且细胞形态正常。RT-qPCR检测结果显示,感染表达BLNK慢病毒的MDA-MB-231细胞中BLNK表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义,P<0.01)。Western blotting检测结果表明,筛选出的GFP阳性的人乳腺癌MDA-MB-231细胞株可过表达BLNK。结论成功构建了含BLNK基因的慢病毒表达载体,并筛选出稳定表达BLNK的人乳腺癌MDA-MB-231细胞株,为进一步明确乳腺癌的发生、发展机制奠定了基础。 展开更多
关键词 BLNK 慢病毒载体 乳腺癌 MDA-MB-231
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肿节风中迷迭香酸成分对乳腺癌细胞增殖、迁移能力及凋亡相关基因表达影响 被引量:1
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作者 李宏 庄海林 +5 位作者 林俊锦 张月芬 黄慧 罗霆 余文桃 倪峰 《中国中药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第16期3335-3340,共6页
迷迭香酸是中药肿节风Sarcandra glabra中抗肿瘤有效成分之一。该研究首先采用了CCK-8法和细胞划痕实验的方法观察了0,10,30,90,270,810μmol·L^-1迷迭香酸给药24,48,72h后对MCF-7和MDA-MB-231的作用,结果表明90~810 μmo... 迷迭香酸是中药肿节风Sarcandra glabra中抗肿瘤有效成分之一。该研究首先采用了CCK-8法和细胞划痕实验的方法观察了0,10,30,90,270,810μmol·L^-1迷迭香酸给药24,48,72h后对MCF-7和MDA-MB-231的作用,结果表明90~810 μmol·L^-1的迷迭香酸对MCF-7细胞的增殖和迁移无显著影响,而90,270,810 μmol·L^-1“迷迭香酸能显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖和迁移,并呈剂量效应关系,抑制效果随着时间的延长而增强。研究进一步采用了流式细胞术检测AnnexinV-FITC/PI染色后迷迭香酸对MDA-MB-231细胞凋亡的影响,结果显示90,270,810 μmol·L^-1迷迭香酸给药48h即能诱导该细胞凋亡。为探究其原因,研究进一步采用了实时荧光定量PCR和Western blot法检测凋亡关键基因Bcl-2与Bax的mRNA与蛋白表达水平,结果表明,上述剂量的迷迭香酸能显著下调Bcl-2的表达并上调Bax基因的表达。研究最终提示,迷迭香酸对MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞作用的效果完全不同,其能显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖、迁移,诱导其产生凋亡,其机制可能与诱导细胞内Bcl-2基因的下调和Bax基因的上调有关。以上结果对三阴性乳腺癌临床治疗及相关中药药物研发具有一定意义。 展开更多
关键词 肿节风 迷迭香酸 MDA-MB-231 MCF-7 细胞凋亡 Bcl-2 BAX
eEF2K对MDA-MB-231细胞增殖的影响与初步机制研究 预览
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作者 肖敏 王根柱 +1 位作者 戚欣 李静 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2018年第8期1061-1065,共5页
目的 研究在不同培养条件下,真核延伸因子2激酶(eEF2K)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响,并初步探讨其机制。方法 慢病毒感染构建eEF2K表达抑制的MDA-MB-231稳定细胞株以及对应的空载体对照细胞株。在完全、无糖和无血清的培... 目的 研究在不同培养条件下,真核延伸因子2激酶(eEF2K)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响,并初步探讨其机制。方法 慢病毒感染构建eEF2K表达抑制的MDA-MB-231稳定细胞株以及对应的空载体对照细胞株。在完全、无糖和无血清的培养条件下,SRB法测定细胞增殖曲线,平板克隆实验评价细胞的克隆形成能力,Western blot检测增殖相关蛋白的表达和活性。结果 贫营养条件下,抑制MDA-MB-231细胞中eEF2K的表达能够促进细胞生长。而在完全培养条件下,抑制eEF2K表达则抑制细胞的增殖和克隆形成,并降低Akt和mTOR蛋白的活性,对其它增殖相关分子如PI3K、Src、ERK、JAK无明显影响。结论 不同培养条件下,eEF2K对MDA-MB-231细胞生长影响不同,其功能值得进一步研究。 展开更多
关键词 eEF2K MDA-MB-231 增殖 信号通路 AKT MTOR
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Ghrelin促进乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的分子机制 预览
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作者 朱建华 贾珉 +1 位作者 王月芹 黄炎 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第10期1488-1491,共4页
目的:探讨生长激素释放肽(Ghrelin)促进乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的分子机制。方法:乳腺癌细胞MDA-MB-231经Ghrelin、Ghrelin受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)抑制剂[DLys3]-GHRP-6或哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mam... 目的:探讨生长激素释放肽(Ghrelin)促进乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的分子机制。方法:乳腺癌细胞MDA-MB-231经Ghrelin、Ghrelin受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)抑制剂[DLys3]-GHRP-6或哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of Rapamycin,m TOR)抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)处理后,MTT或Brd U实验检测MDA-MB-231细胞的增殖能力;Western blot检测MDA-MB-231细胞GHSR表达及m TOR、p70S6K和S6磷酸化水平。结果:增殖实验结果表明Ghrelin增强MDA-MB-231细胞增殖能力;Western blot检测发现Ghrelin激活MDA-MB-231细胞m TOR、p70S6K和S6磷酸化,[DLys3]-GHRP-6或Rapamycin消除Ghrelin促进MDA-MB-231细胞增殖效应,同时抑制Ghrelin诱导的m TOR、p70S6K和S6磷酸化。结论:Ghrelin通过与GHSR结合激活MDA-MB-231细胞m TOR/p70S6K/S6信号途径促进MDA-MB-231细胞增殖。 展开更多
关键词 MDA-MB-231细胞 生长激素释放肽(Ghrelin) 增殖 GHSR mTOR
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青蒿琥酯对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响及其可能机制 预览
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作者 温丽娟 余韬 魏凤香 《暨南大学学报:自然科学与医学版》 CSCD 北大核心 2018年第4期299-305,共7页
目的:探讨青蒿琥酯(ART)对人类三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移、侵袭和细胞周期的影响及其可能机制.方法:MTT法检测ART对MDA-MB-231细胞增殖情况的影响,结晶紫染色法观察细胞形态、数量变化;细胞划痕实验及Transwell实验分别检... 目的:探讨青蒿琥酯(ART)对人类三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移、侵袭和细胞周期的影响及其可能机制.方法:MTT法检测ART对MDA-MB-231细胞增殖情况的影响,结晶紫染色法观察细胞形态、数量变化;细胞划痕实验及Transwell实验分别检测ART对细胞迁移及侵袭能力的影响;流式细胞术检测ART对细胞周期的影响;Western blotting检测DNA损伤反应通路相关蛋白γH2AX(S139)、phospho-ATM(S1981)、phospho-CHK2(T68)的表达.结果:与对照组相比,实验组MDA-MB-231细胞的增殖受到抑制,并失去原有细胞形态,实验组迁移细胞数量明显减少,侵袭细胞数量显著减少,实验组G2/M期细胞数显著增加,且γH2AX(S139)、phospho-ATM(S1981)、phospho-CHK2(T68)蛋白表达显著增高.结论:ART能够抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭,并使该细胞阻滞于G2/M期,可能与γH2AX(S139)、phospho-ATM(S1981)、phospho-CHK2(T68)等蛋白的激活引起DNA损伤反应通路的激活有关. 展开更多
关键词 青蒿琥酯 三阴乳腺癌 MDA-MB-231 DNA损伤反应
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ST3GAL4对MDA-MB-231增殖及c-met通路的影响探究 预览
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作者 高志康 李孝杰 +1 位作者 于魁魁 谢凯 《徐州医科大学学报》 CAS 2018年第11期711-714,共4页
目的 探讨唾液酸转移酶ST3GAL4对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖和c-met通路的影响。方法 分别设计3段针对ST3GAL4编码区的siRNA,通过RT-PCR和Western blot两种方法分别对其mRNA水平和蛋白水平进行检测;接着通过敲减ST3GAL4观察MDA-MB-23... 目的 探讨唾液酸转移酶ST3GAL4对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖和c-met通路的影响。方法 分别设计3段针对ST3GAL4编码区的siRNA,通过RT-PCR和Western blot两种方法分别对其mRNA水平和蛋白水平进行检测;接着通过敲减ST3GAL4观察MDA-MB-231平板克隆形成能力和c-met磷酸化水平。结果 向胞内转染siRNA 之后40小时,ST3GAL4的mRNA 水平和蛋白质水平较对照组(siNC)均有降低;相较于对照组,敲减组(si ST3GAL4) MDA-MB-231克隆形成能力明显减弱(p<0.05),c-met通路活化受到抑制。 结论 ST3GAL4可能参与MDA-MB-231的增殖与关键信号通路c-met的激活。 展开更多
关键词 ST3GAL4 MDAMB231 克隆形成 c—met
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异甘草酸镁对乳腺癌细胞系生物学行为的影响及作用机制 被引量:2
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作者 李弋 彭静 +1 位作者 张蕾 陆劲松 《山东大学学报:医学版》 北大核心 2018年第1期38-44,共7页
目的观察异甘草酸镁对乳腺癌生物学行为的影响,并初步探讨其作用机制。方法将三阴性乳腺癌细胞株MDA—MB-231与ER阳性乳腺癌细胞株MCF-7用不同浓度(0、50、500μmol/L)异甘草酸镁处理,分别采用CCK-8法、划痕实验、LDH活性检测观察... 目的观察异甘草酸镁对乳腺癌生物学行为的影响,并初步探讨其作用机制。方法将三阴性乳腺癌细胞株MDA—MB-231与ER阳性乳腺癌细胞株MCF-7用不同浓度(0、50、500μmol/L)异甘草酸镁处理,分别采用CCK-8法、划痕实验、LDH活性检测观察异甘草酸镁对两种细胞株细胞增殖、迁移、死亡的作用:利用Western blotting检测异甘草酸镁对细胞不同凋亡蛋白(Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9、HSP70与HSP90)的表达。结果不同浓度异甘草酸镁处理后,乳腺癌细胞的增殖、迁移能力被明显抑制,细胞自噬、凋亡增加;与化疗药物顺铂联合使用后,异甘草酸镁能够提高顺铂对乳腺癌细胞迁移能力的抑制作用。在MDA—MB-231细胞株中,异甘草酸镁能够降低HSP90蛋白的表达,促进Bax蛋白的表达;在MCF-7细胞株中,异甘草酸镁能够降低HSPT0蛋白的表达。结论异甘草酸镁对乳腺癌细胞株的生物学行为存在一定抑制作用,与化疗药物顺铂联合使用,能够提高顺铂对肿瘤细胞的抑制作用。异甘草酸镁在MCF-7及MDA-MB-231细胞株中的作用机制存在一定差异。 展开更多
关键词 乳腺癌 异甘草酸镁 增殖 迁移 凋亡 MDAMB-231 MCF-7
人乳腺癌细胞MDA-MB-231三维培养模型的构建 预览
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作者 彭雪梅 刘永文 张海燕 《山西大同大学学报:自然科学版》 2018年第4期34-38,共5页
本研究旨在摸索一种体外构建人乳腺癌细胞MDA-MB-231三维(3D)培养的新方法,以期建立一种能够模拟体内肿瘤细胞真实形态的理想模型。利用该培养模型比较分析MDA-MB-231与正常乳腺上皮细胞MCF-10A 3D形态发生过程中极性形成的差异,主要... 本研究旨在摸索一种体外构建人乳腺癌细胞MDA-MB-231三维(3D)培养的新方法,以期建立一种能够模拟体内肿瘤细胞真实形态的理想模型。利用该培养模型比较分析MDA-MB-231与正常乳腺上皮细胞MCF-10A 3D形态发生过程中极性形成的差异,主要是采用3D腺泡免疫荧光染色技术对顶部极性标记GM130和底部极性标记Laminin-5的定位进行比较研究,结果发现在3D培养10 d,MDA-MB-231形成了一种近似体内的球形结构,confocol层切MDA-MB-231球体的赤道轴发现,相对于MCF-10A形态发生形成的极性空腔腺泡,MDA-MB-231形成的是一种极性紊乱的实心球结构,其顶部极性标记GM130呈无规则分布、底部极性标记Laminin-5向球体中心内渗,这些结果与体内乳腺癌细胞去极性的特征相吻合,表明该3D培养模型可为深入阐明乳腺癌细胞MDA-MB-231恶化转移及抗癌药物作用机制等研究提供可靠的实验模型。 展开更多
关键词 乳腺癌 MDA-MB-231 3D培养 极性
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西黄丸联合紫杉醇抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的作用机制研究 预览
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作者 郑利华 程实 +5 位作者 庞博 安成 孙士鹏 李山虎 王健 刘贵建 《世界中西医结合杂志》 2018年第2期194-199,共6页
目的研究西黄丸(Xihuang wan,XHW)联合紫杉醇(paclitaxel,PTX)对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法首先,通过低温浸提法获得西黄丸浸液,用不同浓度的西黄丸浸液单独或联合紫杉醇处理MDA-MB-231细胞系,通过C... 目的研究西黄丸(Xihuang wan,XHW)联合紫杉醇(paclitaxel,PTX)对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法首先,通过低温浸提法获得西黄丸浸液,用不同浓度的西黄丸浸液单独或联合紫杉醇处理MDA-MB-231细胞系,通过CCK8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测其凋亡的变化,ELISA检测细胞上清中前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)含量。结果单独使用西黄丸即可抑制MDA-MB-231增殖,联用紫杉醇抑制细胞增殖效果更明显;单用西黄丸可诱导MDA-MB-231凋亡,联用紫杉醇诱导凋亡效果也可获得提高;紫杉醇会诱导细胞外液中PGE2含量升高,联用西黄丸可降低升高的PGE2。结论西黄丸联合紫杉醇可更好地诱导人乳腺癌细胞系MDA-MB-231发生凋亡并抑制其增殖,同时还可以抑制受紫杉醇诱导而升高的PGE2,这可能是西黄丸联用化疗药防止肿瘤复发、转移的重要分子机制之一。 展开更多
关键词 西黄丸(Xihuang wan XHW) 紫杉醇(paclitaxel PTX) MDA-MB-231 凋亡 前列腺素E2(prostaglandin E2 PGE2)
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Bcl-9基因敲除对乳腺癌细胞株侵袭及迁移能力作用研究 预览
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作者 刘爽 邵茜 +3 位作者 牛群丽 安杰 张文 刘明亮 《解放军医药杂志》 CAS 2018年第4期41-45,共5页
目的初步研究Bcl-9基因在3种乳腺癌细胞株中的表达情况,探讨Bcl-9基因的敲除对乳腺癌细胞株侵袭及迁移能力的影响及意义。方法 分析3种不同表型的人乳腺癌细胞株,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)... 目的初步研究Bcl-9基因在3种乳腺癌细胞株中的表达情况,探讨Bcl-9基因的敲除对乳腺癌细胞株侵袭及迁移能力的影响及意义。方法 分析3种不同表型的人乳腺癌细胞株,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测人乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MCF-7和MDA-MB-453中Bcl-9 mRNA及蛋白表达水平,筛选出高表达Bcl-9的细胞株;构建Bcl-9慢病毒质粒shRNA,针对高表达Bcl-9的细胞株做Bcl-9基因敲除实验;采用Transwell细胞小室及细胞划痕实验进一步研究Bcl-9基因的敲除对乳腺癌细胞株侵袭及迁移能力的影响。结果 MDA-MB-231细胞株Bcl-9 mRNA和蛋白表达水平均高于MCF-7和MDA-MB-453,且MCF-7高于MDA-MB-453(P<0.05)。实验组Bcl-9 mRNA和蛋白表达水平、MDA-MB-231穿膜细胞数、划痕愈合率均低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。结论 Bcl-9基因的敲除可有效抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231侵袭及迁移能力,提示其可能成为抑制乳腺癌细胞侵袭及转移新的分子靶点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 B细胞淋巴因子9 MDA-MB-231 肿瘤浸润
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