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Similarities and differences between mesenchymal stem/progenitor cells derived from various human tissues 预览
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作者 Urszula Kozlowska Agnieszka Krawczenko +4 位作者 Katarzyna Futoma Tomasz Jurek Marta Rorat Dariusz Patrzalek Aleksandra Klimczak 《世界干细胞杂志:英文版(电子版)》 2019年第6期347-374,共28页
BACKGROUND Mesenchymal stromal/stem cells (MSCs) constitute a promising tool in regenerative medicine and can be isolated from different human tissues. However, their biological properties are still not fully characte... BACKGROUND Mesenchymal stromal/stem cells (MSCs) constitute a promising tool in regenerative medicine and can be isolated from different human tissues. However, their biological properties are still not fully characterized. Whereas MSCs from different tissue exhibit many common characteristics, their biological activity and some markers are different and depend on their tissue of origin. Understanding the factors that underlie MSC biology should constitute important points for consideration for researchers interested in clinical MSC application. AIM To characterize the biological activity of MSCs during longterm culture isolated from: bone marrow (BM-MSCs), adipose tissue (AT-MSCs), skeletal muscles (SMMSCs), and skin (SK-MSCs). METHODS MSCs were isolated from the tissues, cultured for 10 passages, and assessed for: phenotype with immunofluorescence and flow cytometry, multipotency with differentiation capacity for osteo-, chondro-, and adipogenesis, stemness markers with qPCR for mRNA for Sox2 and Oct4, and genetic stability for p53 and c-Myc;27 bioactive factors were screened using the multiplex ELISA array, and spontaneous fusion involving a co-culture of SM-MSCs with BM-MSCs or AT-MSCs stained with PKH26 (red) or PKH67 (green) was performed. RESULTS All MSCs showed the basic MSC phenotype;however, their expression decreased during the follow-up period, as confirmed by fluorescence intensity. The examined MSCs express CD146 marker associated with proangiogenic properties;however their expression decreased in AT-MSCs and SM-MSCs, but was maintained in BM-MSCs. In contrast, in SK-MSCs CD146 expression increased in late passages. All MSCs, except BM-MSCs, expressed PW1, a marker associated with differentiation capacity and apoptosis. BM-MSCs and AT-MSCs expressed stemness markers Sox2 and Oct4 in long-term culture. All MSCs showed a stable p53 and c-Myc expression. BM-MSCs and AT-MSCs maintained their differentiation capacity during the follow-up period. In contrast, SK-MSCs and SM-MSCs had a limited ability to d 展开更多
关键词 MESENCHYMAL stem/progenitor cells Bone marrow MSCS ADIPOSE tissue MSCS Muscle-derived MSCS Skin-derived MSCS Cytokines and TROPHIC factors of MSCS Spontaneous fusion of MSCS
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MSCs-CM对人增生性瘢痕成纤维细胞的影响及其作用机制的研究 预览
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作者 崔晓丽 孙治国 +4 位作者 赵胜超 任帅 钟烺 郭海峰 武艳 《牡丹江医学院学报》 2019年第2期1-5,共5页
目的研究骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblasts,Fbs)的影响及作用机制。方法分离培养Fbs后,将其分成正常组(N组)和MSCs培养上清组(mesenchymal stem cell-conditioned m... 目的研究骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblasts,Fbs)的影响及作用机制。方法分离培养Fbs后,将其分成正常组(N组)和MSCs培养上清组(mesenchymal stem cell-conditioned medium,MSCs-CM组)。采用CellCounting Kit-8(CCK8)和免疫荧光染色检测增殖能力,采用细胞划痕实验检测迁移能力,采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测转化生长因子β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)基因表达水平,采用酶联免疫分析(ELISA)检测各实验组中白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)表达情况。结果与N组相比,MSCs-CM组Fbs的增殖能力、迁移能力和TGF-β1的基因表达水平均受到抑制(P<0.05),但是两组IL-10的表达水平比较,其在MSCs-CM组中表达明显升高(P<0.05)。结论MSCs可能通过旁分泌作用释放IL-10对Fbs产生抑制作用。 展开更多
关键词 MSCS 纤维化 瘢痕成纤维细胞 旁分泌作用 IL-10
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DMOG对间充质干细胞生物学特性影响的研究 预览
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作者 姜丽霞 葛婷婷 +4 位作者 周丽萍 刘丽珍 竺璐婕 周斌杰 余勤 《浙江中医药大学学报》 CAS 2019年第2期111-121,共11页
[目的]探讨二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxaloylglycine,DMOG)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)生物学特性的影响。[方法]以DMOG作用于P4代MSCs,分为DMOG 0、20、40和80μmol·L-1组,以CCK-8法、流式细胞术、Transwel... [目的]探讨二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxaloylglycine,DMOG)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)生物学特性的影响。[方法]以DMOG作用于P4代MSCs,分为DMOG 0、20、40和80μmol·L-1组,以CCK-8法、流式细胞术、Transwell迁移法和Real-time q PCR依次检测不同浓度的DMOG对MSCs增殖能力、细胞周期、迁移能力以及成骨、成脂、成软骨和成神经分化能力的影响。[结果]DMOG各浓度组细胞生长曲线均接近S型,与DMOG 0μmol·L-1组比较,20μmol·L-1对MSCs增殖能力具有促进作用,40μmol·L-1促进作用最明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。与DMOG0μmol·L-1组比较,DMOG处理可提高处于S期+G2/M期的MSCs细胞比例,差异具有统计学意义(P<0.05)。与DMOG 0μmol·L-1组比较,DMOG20μmol·L-1时促迁移作用显著(P<0.05)。DMOG处理后,MSCs仍保留了原有的成骨、成脂、成软骨、成神经分化能力,DMOG 20μmol·L-1可显著促进MSCs成骨和成软骨分化能力,抑制MSCs成脂分化能力,差异具有统计学意义(P<0.05),对MSCs成神经分化能力无显著影响(P>0.05)。[结论]不同浓度DMOG处理后,MSCs仍保留了原有的多向分化能力,其中20μmol·L-1DMOG可促进MSCs成骨和成软骨分化能力,抑制其成脂分化能力,对其成神经分化能力无显著影响,同时可显著提高MSCs增殖、迁移能力。 展开更多
关键词 MSCS DMOG 增殖 细胞周期 迁移 分化
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CdS magic-size clusters exhibiting one sharp ultraviolet absorption singlet peaking at 361 nm
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作者 Junbin Tang Juan Hui +6 位作者 Meng Zhang Hongsong Fan Nelson Rowell Wen Huang Yingnan Jiang Xiaoqin Chen Kui Yu 《纳米研究:英文版》 SCIE EI CAS CSCD 2019年第6期1437-1444,共8页
We report,for the first time,the synthesis of CdS magic-size clusters (MSCs) which exhibit a single sharp absorption peaking at ~ 361 nm,along with sharp band edge photoemission at ~ 377 nm and broad trap emission pea... We report,for the first time,the synthesis of CdS magic-size clusters (MSCs) which exhibit a single sharp absorption peaking at ~ 361 nm,along with sharp band edge photoemission at ~ 377 nm and broad trap emission peaking at ~ 490 nm.These MSCs are produced in a singleensemble form without the contamination of conventional quantum dots (QDs) and/or other-bandgap clusters.They are denoted as MSC-361.We present the details of several controlled syntheses done in oleylamine (OLA),using C,d(NO3)2 or C,d(OAc)2 as a C,d source and thioacetamide (TAA) or elementary sulfur (S) as a S source.A high synthetic reproducibility of the reaction of Cd(NO3)2 and TAA to single-ensemble MSC-361 is achieved,the product of which is not contaminated by other bandgap clusters and/or QDs.In some cases,the reaction product exhibits an additional absorption peak at ~ 322 nm.We demonstrate that the two peaks,at 361 and 322 nm,do not evolve synchronously.Therefore,the 322 nm peak is not a higher order electronic transition of MSC-361,but due to the presence of another ensemble,namely MSC-322.The present study suggests that there is an outstanding need for the development of a physical model to narrow the knowledge gap regarding the electronic structure in these colloidal semiconductor CdS MSCs. 展开更多
关键词 COLLOIDAL semiconductor CDS magic-size CLUSTERS (MSCs) MSC-361 quantum dots (QDs) electronic structures
p38MAPK抑制剂联合MSC移植治疗大鼠心肌梗死的实验研究 预览
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作者 章志玲 张明 +1 位作者 周淑兰 梅志亮 《广东医学》 CAS 2019年第15期2135-2138,共4页
目的旨在探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)联合p38MAPK抑制剂增强大鼠心肌梗死损伤的保护作用,并揭示其作用机制。方法采用左冠状动脉前降支结扎法建立心肌梗死模型。采用ST段抬高和病理改变对模型进行评价。模型建立后,将... 目的旨在探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)联合p38MAPK抑制剂增强大鼠心肌梗死损伤的保护作用,并揭示其作用机制。方法采用左冠状动脉前降支结扎法建立心肌梗死模型。采用ST段抬高和病理改变对模型进行评价。模型建立后,将大鼠随机分为4组。MSC移植组、p38MAPK抑制剂(SB203580)组、MSC+SB203580组和模型对照组。MSC和SB203580每周注射2次,连续4周。应用HE染色和Tunel法评价病理变化及细胞凋亡。通过实时PCR和Western blot检测p38MAPK和TAK1的表达。结果 HE染色显示,模型大鼠典型损伤包括不规则细胞排列、炎症浸润,MSC治疗或p38MAPK抑制剂能改善病理变化。其中,MSCs联合p38MAPK抑制剂的效果最佳。Tunel法检测表明,与单用MSC或p38MAPK抑制剂相比,MSC联合应用p38MAPK抑制剂有明显增强作用。MSC与p38MAPK抑制剂的联合应用降低了TAK1和p38MAPK的表达。结论 p38MAPK抑制剂增强MSCs对大鼠心肌梗死的保护作用。 展开更多
关键词 P38MAPK 间充质干细胞 心肌梗死
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INH-α对BMP9诱导间充质干细胞成骨分化的作用
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作者 黄敏 成亚琳 +1 位作者 曾继涛 刘宏 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期3396-3401,共6页
为了研究抑制素α亚基(inhibinα-subunit INH-α)对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein9,BMP9)诱导的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化的影响,本研究采用细胞化学染色法检测第3天、第5天、第7天细胞中碱性... 为了研究抑制素α亚基(inhibinα-subunit INH-α)对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein9,BMP9)诱导的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化的影响,本研究采用细胞化学染色法检测第3天、第5天、第7天细胞中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的变化。利用RT-PCR和Western blotting检测细胞中的成骨分化早期标志物(Runx2)和晚期标志物(OPN)的mRNA含量及蛋白表达水平。茜素红S染色法检测第21天细胞中的钙盐沉积变化。发现BMP9组ALP活性明显增高,INH-α组ALP活性与对照组相比无明显变化,但联合运用BMP9和INH-α组ALP活性较BMP9组明显降低。此外,BMP9组Runx2和OPN的mRNA含量和蛋白表达水平明显增高,而联用BMP9和INH-α组中的Runx2和OPN水平较BMP9组显著下降(p<0.01)。同样,在茜素红S染色实验中,BMP9组钙盐结节明显增多,染色深;而在联合运用BMP9和INH-α组钙盐结节较BMP9组明显减少,染色变浅。说明INH-α能够抑制BMP9诱导间充质干细胞成骨分化作用。 展开更多
关键词 抑制素α亚基 骨形态发生蛋白9 间充质干细胞 成骨分化
间充质干细胞在自身免疫性疾病应用中的研究进展 预览
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作者 田云 管剑龙 《老年医学与保健》 CAS 2019年第3期420-423,共4页
间充质干细胞(mesenchymal stromal cells,MSCs)是一类具有多向分化潜能的干细胞,于1968年由Friedenstein[1]描述,因具有较强的体外复制及多向分化潜能,逐渐被广泛应用于再生生物学和实验生物学并逐渐推广于临床。MSCs最早在骨髓基质中... 间充质干细胞(mesenchymal stromal cells,MSCs)是一类具有多向分化潜能的干细胞,于1968年由Friedenstein[1]描述,因具有较强的体外复制及多向分化潜能,逐渐被广泛应用于再生生物学和实验生物学并逐渐推广于临床。MSCs最早在骨髓基质中发现,其内分泌功能及强大的免疫调节功能可以为造血干细胞的发育分化提供必需的微环境。 展开更多
关键词 间充质干细胞 自身免疫性疾病 多向分化潜能 再生生物学 免疫调节功能 MSCS cells 造血干细胞
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Wnt10b与骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化的关系 预览
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作者 胡莹 廖云鹏 +4 位作者 李福书 周娅 李沁 孙文娟 何百成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1420-1428,共9页
目的研究Wnt10b与骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导间充质干细胞(MSCs)骨向分化的关系,以及相关的分子机制。方法利用PCR、Westernblot、组织化学染色等方法,检测BMP9对Wnt10b表达的影响,以及Wnt10b对BMP9诱导的成骨分化的影响。同时,通过定量... 目的研究Wnt10b与骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导间充质干细胞(MSCs)骨向分化的关系,以及相关的分子机制。方法利用PCR、Westernblot、组织化学染色等方法,检测BMP9对Wnt10b表达的影响,以及Wnt10b对BMP9诱导的成骨分化的影响。同时,通过定量PCR、Westernblot、油红O染色、流式细胞术等,分析Wnt10b影响BMP9成骨分化诱导作用的可能机制。结果Wnt10b在C3H10T1/2、C2C12、MEFs和MC3T3-E1细胞中均有表达,BMP9在C3H10T1/2细胞中上调Wnt10b的表达水平。Wnt10b增强BMP9在C3H10T1/2细胞中增加OCN蛋白水平和促进钙盐沉积的能力,沉默Wnt10b减弱BMP9的作用。Wnt10b并不改变BMP9对细胞周期的影响,但能增强BMP9诱导的Smad1/5/8磷酸化,沉默Wnt10b减弱BMP9对Smad1/5/8磷酸化的促进作用。此外,Wnt10b抑制BMP9在C3H10T1/2细胞中诱导的成脂分化,沉默Wnt10b则促进BMP9的成脂分化诱导作用。结论Wnt10b可以促进BMP9诱导的MSCs骨向分化,这种作用可能与增强BMP/Smad信号转导有关。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白9 Wnt10b 间充质干细胞 成骨分化 BMP/Smad信号 成脂分化
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A preliminary study of markers for human hair follicle melanin stem cell
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作者 Xing-Yu Mei Zhou-Wei Wu +2 位作者 Cheng-Zhong Zhang Yue Sun Wei-Min Shi 《中华医学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第9期1117-1119,共3页
To the Editor:Melanocyte stem cells (MSCs),derived from the neural crest,function as the repository of melanocytes (MCs).Currently,most scholars suggest that MSCs mainly exist in the bulge of hair follicles.
关键词 EDITOR MSCS MCS
血红素加氧酶1修饰MSCs的相关研究进展
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作者 孙东 宋红丽 沈中阳 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期901-906,共6页
目的对血红素加氧酶1(Heme oxygenase 1,HO-1)修饰MSCs的相关研究进展进行综述。方法广泛查阅HO-1修饰MSCs的相关研究文献报道,对HO-1修饰MSCs的意义、效应及其相关机制进行总结综述。结果 HO-1修饰MSCs具有重要的研究价值,能够有效增强... 目的对血红素加氧酶1(Heme oxygenase 1,HO-1)修饰MSCs的相关研究进展进行综述。方法广泛查阅HO-1修饰MSCs的相关研究文献报道,对HO-1修饰MSCs的意义、效应及其相关机制进行总结综述。结果 HO-1修饰MSCs具有重要的研究价值,能够有效增强MSCs移植入体内后在复杂内环境下的抗氧化应激、抗凋亡特性,同时有效增强了MSCs的免疫调节功能,在各种疾病模型及研究领域中提高了MSCs的抗损伤、修复及免疫调控效果。结论 HO-1修饰MSCs的基础研究取得显著进展,有望应用于临床试验,并为干细胞治疗提供一定的理论依据及参考价值。 展开更多
关键词 MSCS 血红素加氧酶1 抗凋亡 免疫调控 研究进展
Effects of Short-Term Mechanical Stretch on the Proliferation and Osteogenic Differentiation of Mesenchymal Stem Cell and TRPC1 Expression
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作者 Yangbi Huang Yufan Zheng +2 位作者 Shuwen Zhang Xinlan Chen Xiaoling Jia 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第A01期66-67,共2页
Objective Mechanical stretch regulates mesenchymal stem cell(MSC)function,which much more emphasis has been placed its prolonged effect on lineage differentiation,especially osteogenic differentiation.In contrast,ther... Objective Mechanical stretch regulates mesenchymal stem cell(MSC)function,which much more emphasis has been placed its prolonged effect on lineage differentiation,especially osteogenic differentiation.In contrast,there are few reports about its short term effect on MSC proliferation.In the present study,effects of short-term mechanical stretch on the proliferation and osteogenic differentiation of mesenchymal stem cell proliferation were investigated.In addition,the stretchinfluenced expression of transient receptor potential cation channel,subfamily C,member 1(TRPC1)was also investigated due to its mechanosensitivity and positive correlation with MSC proliferation.Methods MSCs,harvested from rat bone marrow,were seeded on collagen l-coated silicone chamber and exposed to mechanical stretch with various magnitude(0%,5%,10%and 15%)or various duration(2 h,6 h,12 h and 24 h).Cell proliferation was examined by cell counting kit-8(CCK-8)assay and cell cycle analysis.The gene and protein expression of two makers for osteogenic differentiation,collagen I and Cbfα1,and TRPC1 were determined by RT-PCR and western blotting,respectively.BMSC were harvested,and total RNA was isolated with Trizol reagent.A 2μg portion of total RNA was synthesized to cDNA according to the manufacturer s instructions.cDNA was used as a template for each PCR amplification.BMSC were solubilized in RIPA lysis buffer on ice for 30 min.Phenylmethane sulfonyl fluoride(PMSF)was added to avoid proteolysis.Equal portions of the cell lysates were separated on 10%sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)and transferred to polyvinylidene fluoride(PVDF)membranes.The membranes were incubated with primary antibodies to TRPC1 and GAPDH at4℃overnight to identify the specific proteins.The PVDF membranes were washed with TBST three times and incubated with a horseradish peroxidase(HRP)-conjugated secondary antibody.Immunoreactive bands were visualized using an enhanced chemiluminescent(ECL)system.Results The OD value for the three st 展开更多
关键词 mechanical STRETCH MSCS PROLIFERATION TRPC1
MSCs线粒体转移对脑缺血后损伤修复的作用研究 预览
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作者 叶伟 葛忆秦 徐侃 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2019年第3期173-181,共9页
目的探索骨髓基质细胞(MSCs)中线粒体转移在脑缺血后的损伤保护作用。方法采用小鼠骨髓MSCs分离与原代培养方法,培养MSCs并通过流式细胞仪进行鉴定;取出生后第0天(P0)SD幼鼠的皮层,进行原代神经元培养,并进行氧糖剥夺(OGD)处理,将含有... 目的探索骨髓基质细胞(MSCs)中线粒体转移在脑缺血后的损伤保护作用。方法采用小鼠骨髓MSCs分离与原代培养方法,培养MSCs并通过流式细胞仪进行鉴定;取出生后第0天(P0)SD幼鼠的皮层,进行原代神经元培养,并进行氧糖剥夺(OGD)处理,将含有线粒体的MSCs培养基(MCM)组和不含有线粒体的MSCs培养基(mdMCM)组与OGD神经元进行共培养,另以未经过OGD处理的神经元(Neuron组)和经过OGD处理的神经元(OGD组)作为对照;通过MitoTracker追踪线粒体,分析线粒体从MSCs向OGD神经元的转移情况;通过检测试剂盒对神经元内ATP含量和神经元活性进行分析;通过对线粒体膜电势检测,分析线粒体的功能;采用Western Blot分析线粒体Miro1蛋白的表达水平;通过MCAO造模和计算梗死体积,分析MSCs移植对脑缺血的保护作用。采用方差分析和t检验进行统计学分析。结果原代培养的骨髓MSCs纯度达到99%以上。取原代培养MSCs的培养基分别去除线粒体(mdMCM)与不去除线粒体(MCM),与OGD神经元共培养,在MCM组,观察到神经元中存在MSCs来源的线粒体;经过OGD处理的神经元,其胞内ATP水平降低至0.634±0.023,给予MCM处理后,神经元胞内ATP水平上升至1.623±0.039,当给予mdMCM处理后,神经元胞内ATP水平降低至0.645±0.011,ATP比率变化的差异具有统计学意义(F=3413.62,P <0.01);经过OGD处理,神经元活性降低至(73.7±1.12)%;给予MCM处理后,神经元活升高到(83.3±1.57)%,当给予mdMCM处理后,神经元活性降低至(72.9±1.25)%,与MCM组相比差异具有统计学意义(F=654.280,P <0.01)。在未经过处理的对照组中,线粒体膜电势丢失1.7%;经过OGD处理后,膜电势丢失70.3%;添加MCM后的OGD神经元,线粒体膜电势丢失44.7%,与OGD组相比,差异具有统计学意义(P=0.036);而添加mdMCM的OGD处理神经元,线粒体膜电势丢失67.7%,与OGD+MCM组相比,差异具有统计学意义(P=0.041)。给予CCCP处理后的阳性对照神经元,膜� 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 脑缺血 Miro1 线粒体转移
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间充质干细胞治疗糖尿病周围神经病的研究进展
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作者 王伟 孔姿莉 +4 位作者 王翔 邱铭月 胡建霞 王颜刚 赵志刚 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期434-436,共3页
糖尿病周围神经病变(DPN)是糖尿病最常见的并发症之一,尤其慢性疼痛、麻木及自主神经功能障碍严重降低了糖尿病患者的生活质量。间充质干细胞(MSCs)尤其脐带间充质干细胞的免疫调节、组织修复和神经营养作用近年来倍受关注,本文将对MSC... 糖尿病周围神经病变(DPN)是糖尿病最常见的并发症之一,尤其慢性疼痛、麻木及自主神经功能障碍严重降低了糖尿病患者的生活质量。间充质干细胞(MSCs)尤其脐带间充质干细胞的免疫调节、组织修复和神经营养作用近年来倍受关注,本文将对MSCs治疗DPN及其可能的机制进行综述。 展开更多
关键词 糖尿病周围神经病变 脐带间充质干细胞 干细胞治疗 自主神经功能障碍 神经营养作用 MSCS 慢性疼痛 生活质量
人诱导性多能干细胞来源的间充质干细胞促进成体造血发生研究
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作者 张秀秀 王蓓蕊 +7 位作者 陈谊金 薛原 周涯 边国慧 赖默温 周琼秀 张勇刚 马峰 《中国输血杂志》 CAS 2019年第2期117-122,共6页
目的探讨人诱导性多能干细胞(hiPSCs)在神经分化因子作用下生成的间充质干细胞(N-MSCs)对成体造血的影响。方法 1)与神经发育相关的MSCs的获得:hiPSCs在向前脑类器官培养过程中分离纯化出1个性质稳定的细胞系,命名为N-MSCs,通过形态学... 目的探讨人诱导性多能干细胞(hiPSCs)在神经分化因子作用下生成的间充质干细胞(N-MSCs)对成体造血的影响。方法 1)与神经发育相关的MSCs的获得:hiPSCs在向前脑类器官培养过程中分离纯化出1个性质稳定的细胞系,命名为N-MSCs,通过形态学观察、流式检测和脂肪、成骨、软骨细胞分化实验对其进行鉴定。2)N-MSCs对成体造血的影响:人胚胎干细胞(hESCs)与鼠AGM-S3细胞共培养获得的CD34^+细胞分别与AGM-S3、N-MSCs(2×10^4个)共培养,单独悬浮培养为对照组(CD34^+组,1×10^4个),流式检测关于造血干/祖细胞(CD34^+CD45^+)和巨噬细胞(Mφ)表面标记的变化。3)N-MSCs对人脐带血来源的巨噬细胞(CB-Mφ)的影响:Mφ分别与脐带MSCs(UC-MSCs)、N-MSCs(2.5×10^5个)在transwell中共培养,Mφ单独培养为对照组(5×10^5个),再用IL-4对Mφ做刺激试验。用MGG染色、流式检测、qRT-PCR等方法分析Mφ形态学、M2型Mφ相关表面标记CD206和IL-10基因表达情况。结果 CD34^+组及其分别与AGM-S3、N-MSCs 2个共培养组培养10 d时收获的CD34^+CD45^+细胞数量(×10^3个)分别为:0.44±0.045 vs 0.63±0.170 vs 2.93±0.190(P<0.01);Mφ数量(×10^4个)分别为1.70±0.046 vs 1.49±0.057 vs 2.46±0.086(P<0.05)。Mφ与UC-MSCs共培养组及与N-MSCs共培养组CB-Mφ的CD206占比(%)为56.1±1.15 vs 60.0±1.76(P<0.05)、IL-10的相对表达量为6.8±0.748 vs 8.10±0.804(P<0.01)。结论 N-MSCs能促进成体造血和CB-Mφ向M2型Mφ的转变。 展开更多
关键词 人诱导性多能干细胞 间充质干细胞 成体造血 神经分化因子 人胚胎干细胞 AGM-S3 人脐带血 巨噬细胞
miR-148a通过靶定DNMT1调节大鼠间充质干细胞向心肌细胞的分化
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作者 张文才 宫俊龙 +1 位作者 杨帆 赵洛沙 《武汉大学学报:医学版》 CAS 2019年第1期11-16,共6页
目的:探讨miR-148a对间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化的调控作用。方法:将miR-148a及对照分别转染入大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),与新生大鼠心室心肌细胞(NRVMs)共培养,观察BMSCs的分化,通过增强及抑制miR-148a的表达水平观察miR-148... 目的:探讨miR-148a对间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化的调控作用。方法:将miR-148a及对照分别转染入大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),与新生大鼠心室心肌细胞(NRVMs)共培养,观察BMSCs的分化,通过增强及抑制miR-148a的表达水平观察miR-148a对BMSCs向心肌细胞分化的调控作用。运用荧光素酶报告实验、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫印迹(WesternBlot)验证miR-148a靶向下调DNA甲基转移酶1(DNMT1)参与调节该过程。结果:过表达miR-148a有利于BMSCs向心肌细胞的分化,而当利用抑制剂下调miR-148a的表达,则阻止BMSCs向心肌细胞的分化。荧光素酶报告实验、qRT-PCR和WesternBlot实验发现miR-148a可以靶向下调DNMT1的表达,且DNMT1参与调节上述过程。结论:miR-148a通过靶向下调DNMT1促进MSCs向心肌细胞的分化过程。 展开更多
关键词 miR-148a DNMT1 间充质干细胞 分化 心肌细胞
快速诱导人骨髓间充质干细胞成脂培养基的研发 预览
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作者 姜增誉 陈丹 +1 位作者 韩英 李健丁 《中国药物与临床》 CAS 2019年第13期2162-2164,共3页
间充质干细胞(MSCs)是在正常组织中发现的一种多能祖细胞[1],因其具有独特的自我更新能力和分化成脂肪细胞、骨细胞、心肌细胞、神经元细胞等组织特异性细胞的潜能[2-4],广泛用于再生医学研究,MSCs在组织损伤修复[4]、缺血性心肌病[5]... 间充质干细胞(MSCs)是在正常组织中发现的一种多能祖细胞[1],因其具有独特的自我更新能力和分化成脂肪细胞、骨细胞、心肌细胞、神经元细胞等组织特异性细胞的潜能[2-4],广泛用于再生医学研究,MSCs在组织损伤修复[4]、缺血性心肌病[5]、急性心肌梗死[6]、肝纤维化[7]等疾病治疗中发挥着重要作用。目前,面临的主要挑战是实现MSCs的大量来源及保证安全性,MSCs定义的主要特征是它的自我更新潜力、表面标记的表达以及多谱系分化能力,因此,向成脂肪细胞分化是鉴别MSCs不可少的部分。此外,MSCs的脂肪分化在再生医学研究中具有重要意义。从临床的角度来看,外科医生面临着患者软组织吸收重建的挑战。例如,烧伤患者经常遭受软组织萎缩问题。利用MSCs分化成脂肪细胞,能很好的重建患者不足的脂肪组织[8]。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 成脂肪细胞 快速诱导 培养基 自我更新能力 MSCS 正常组织 缺血性心肌病
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BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶对BMSCs成骨活性的体外研究 预览
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作者 罗叙文 聂涛 《江西医药》 CAS 2019年第9期1030-1033,1062共5页
目的探究BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶联合BMSCs体外成骨活性。方法制备BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶可发挥BMP-9的缓控释放,通过增殖、电泳、Western Blot、迁移等实验观察BMSCs的迁移、增殖、分化及成骨的影响。结果BMP-9/壳聚... 目的探究BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶联合BMSCs体外成骨活性。方法制备BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶可发挥BMP-9的缓控释放,通过增殖、电泳、Western Blot、迁移等实验观察BMSCs的迁移、增殖、分化及成骨的影响。结果BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶发挥BMP-9的缓控释放,促进BMSCs定向迁移、增殖、定向分布、分化和骨形成活性。结论体外实验证实BMP-9/壳聚糖/I型胶原蛋白水凝胶缓控释放BMP-9可促进BMSCs定向迁移、增殖、定向分布、分化和成骨活性。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白9 水凝胶 MSCS 成骨活性
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BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统复合羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷与诱导多能干细胞来源MSCs的体外研究
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作者 柴乐 全仁夫 +5 位作者 胡劲涛 黄小龙 吕建兰 张灿 邱锐 蔡兵兵 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期252-258,共7页
目的构建BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统,与诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)来源MSCs复合种植至羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)/二氧化锆(zirconium dioxide,ZrO2)生物多孔泡沫陶瓷材料,体外共培养,探索缓释系统对... 目的构建BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统,与诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)来源MSCs复合种植至羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)/二氧化锆(zirconium dioxide,ZrO2)生物多孔泡沫陶瓷材料,体外共培养,探索缓释系统对iPS-MSCs成骨分化的作用。方法运用油包水相溶液制备BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶微球,检测微球的药物包封率、载药率和体外缓释速率。建立HA/ZrO2多孔生物泡沫陶瓷材料复合iPS-MSCs及BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统共培养体系,作为实验组;以未复合BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统的细胞-支架复合物作为对照组。两组培养3、7、10、14 d,检测细胞的ALP分泌量,RT-PCR检测核心结合因子α1(core binding factorα1,Cbfa1)、Ⅰ型胶原和锌指结构转录因子(Osterix,OSX)基因表达水平;培养14 d时行免疫组织化学染色观察Ⅰ型胶原表达,并通过扫描电镜观察细胞爬行及黏附状态。结果 BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统具有较好的药物包封率及载药率,可延长BMP-2的活性时间。共培养体系体外培养各时间点实验组ALP分泌量及Cbfa1、Ⅰ型胶原、OSX基因相对表达量均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色观察示,实验组荧光数量明显多于对照组,即Ⅰ型胶原表达水平高于对照组;细胞能较均匀地分布于材料上,细胞形态良好。扫描电镜观察示缓释系统能较好地黏附于细胞之间。结论 iPS-MSCs具有促成骨分化能力,在BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统作用下其促成骨能力显著增强。iPS-MSCs与缓释系统结合后能良好黏附于材料上,且细胞活性较好。 展开更多
关键词 羟基磷灰石 二氧化锆 BMP.2 诱导多能干细胞 MSCS 缓释系统
三维培养策略提高间充质干细胞的治疗潜能 预览
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作者 浦燕姗(综述) 海冰(审校) 《临床肺科杂志》 2019年第2期323-326,共4页
间充质干细胞(MSCs)源于发育早期的中胚层和外胚层,是一种具有自我复制能力和多向分化潜能的成体干细胞,可以在各种条件下诱导和分化成各种组织[1]。MSCs可以从包括脂肪组织、肝脏、肌肉、羊水、胎盘、脐带、脐带血、牙髓等很多组织中获... 间充质干细胞(MSCs)源于发育早期的中胚层和外胚层,是一种具有自我复制能力和多向分化潜能的成体干细胞,可以在各种条件下诱导和分化成各种组织[1]。MSCs可以从包括脂肪组织、肝脏、肌肉、羊水、胎盘、脐带、脐带血、牙髓等很多组织中获取[2],可分泌多种细胞因子及生长因子,具有造血支持、调节免疫、抗炎和组织修复作用。由于这些细胞相对容易获得,在培养物中可快速30次以上群体倍增,可在体外和体内分化成若干细胞表型,并且它们没有致瘤性[3],近年来MSCs移植作为可行的细胞治疗已显示出对疾病的治疗潜力。传统上,二维(2D单层)培养方案被用作MSCs的体外培养扩增,但在2D条件下,细胞的结构,分化,增殖和功能及体内重要的细胞特异性属性将逐渐丧失[4]。为了克服2D培养系统的局限性,三维(3D,球体)培养作为调控MSCs治疗相关性质的新型策略被提出。3D培养形成多细胞聚集体(MSCs球体),这样的三维培养环境能更好地模拟体内微环境,使得细胞更接近体内的天然形态,现已被应用于包括癌症治疗[5]、组织工程[6]、再生医学[7]和干细胞生物学[8]等领域,在许多体外实验及临床前动物研究中均显示出良好的效果。下面就三维培养增强MSCs球体多效性从而提高其治疗潜能进行综述。 展开更多
关键词 间充质干细胞 细胞治疗 三维培养 培养策略 多向分化潜能 MSCS 脂肪组织 体内分化
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MSCs来源外泌体在创面修复中的研究进展
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作者 王江文 易阳艳 朱元正 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期634-639,共6页
目的总结近年来MSCs来源外泌体(exosomes,EXOs)在创面修复中的研究进展。方法广泛查阅国内外有关MSCs-EXOs在创面修复中作用的文献,总结分析MSCs-EXOs在创面修复过程中的作用机制及其临床应用前景。结果 MSCs-EXOs在创面愈合过程中可抑... 目的总结近年来MSCs来源外泌体(exosomes,EXOs)在创面修复中的研究进展。方法广泛查阅国内外有关MSCs-EXOs在创面修复中作用的文献,总结分析MSCs-EXOs在创面修复过程中的作用机制及其临床应用前景。结果 MSCs-EXOs在创面愈合过程中可抑制早期的炎性反应,促进血管新生和上皮细胞的增殖与迁移,后期调控胶原合成并抑制瘢痕增生。与MSCs相比,MSCs-EXOs具有高稳定性、易于储存、不易致瘤、无需增殖、便于定量使用等优点,有着广阔的临床应用前景。结论 MSCs-EXOs能够促进创面修复,且有希望发展成为临床上一种促进急性或慢性创面修复的产品。 展开更多
关键词 MSCS 外泌体 创面修复 炎症 血管新生
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