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利用共转化方法创制携带Pi9抗稻瘟病基因的无选择标记转基因水稻
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作者 潘龙玉 李军 +6 位作者 王歆 刘中来 赵建华 刘雄伦 戴良英 毛雪琴 瞿绍洪 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期433-443,共11页
水稻稻瘟病是由子囊菌(Magnaporthe oryzae)引起的水稻灾害性病害。培育抗病品种是防治稻瘟病最经济有效的措施之一。水稻Pi9抗稻瘟病基因来源于小粒野生稻并已被克隆和应用于转基因育种。为了提高无选择标记转基因植株的选择效率,将绿... 水稻稻瘟病是由子囊菌(Magnaporthe oryzae)引起的水稻灾害性病害。培育抗病品种是防治稻瘟病最经济有效的措施之一。水稻Pi9抗稻瘟病基因来源于小粒野生稻并已被克隆和应用于转基因育种。为了提高无选择标记转基因植株的选择效率,将绿色荧光蛋白(GFP)用作可视遗传标记,对双菌株共转化系统进行改良:目的基因载体携带Pi9抗稻瘟病基因;标记基因载体用潮霉素磷酸转移酶(HPT)作为植物转化选择标记,用GFP作为负选择标记,筛除标记基因分离植株。两种载体的农杆菌转化株混合,分别与水稻品种‘浙恢414’、‘浙粳22’、‘浙11B’、‘日本晴’、‘空育131’和‘粤泰B’的愈伤组织共培养,然后从5%~38.3%的起始愈伤组织筛选获得了转化愈伤组织(HPT+GFP+)。对T0植株进行Pi9基因PCR检测,11.8%~77.8%的T0植株为共转化植株(HPT+GFP+Pi9+)。对共转化植株T1代进行绿色荧光检测,筛选阴性植株(GFP-),再通过PCR筛选Pi9+植株。根据13个T1群体的研究结果,61%的共转化植株在T1代分离出无选择标记转基因植株(HPT-GFP-Pi9+)。转Pi9的无选择标记植株和后代株系对水稻稻瘟病呈抗病反应。因此,本研究通过GFP标记提高了双菌株共转化系统的选择效率,转Pi9的无选择标记水稻株系为水稻抗稻瘟病育种提供了有用的遗传资源。 展开更多
关键词 水稻(Oryza sativa) 共转化 稻瘟病(Magnaporthe oryzae) 转基因植物 选择标记
稻瘟病抗性基因对安徽省稻瘟病菌种群抗性的影响 预览
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作者 张海珊 杨雪 +3 位作者 章东方 严丹侃 顾江涛 张爱芳 《中国稻米》 2020年第1期50-53,共4页
为分析抗稻瘟病基因对安徽省稻瘟病菌株的抗性水平的影响,采用10个水稻抗稻瘟病单基因品系对安徽不同地区的稻瘟病菌株进行致病力测定,同时对201份水稻品种的抗稻瘟病基因Pi9进行扩增,结合田间抗性表现,分析抗性基因Pi9的利用价值。抗... 为分析抗稻瘟病基因对安徽省稻瘟病菌株的抗性水平的影响,采用10个水稻抗稻瘟病单基因品系对安徽不同地区的稻瘟病菌株进行致病力测定,同时对201份水稻品种的抗稻瘟病基因Pi9进行扩增,结合田间抗性表现,分析抗性基因Pi9的利用价值。抗性基因Pi9、Pik、Pizt等对安徽地区的稻瘟病菌株具有较好的抗性,抗性频率分别为66%、60%和54%,其中携带Pi9抗性基因的水稻品种的田间抗性表现也较好,说明Pi9可直接作为分子标记辅助安徽地区水稻品种选育抗原基因。 展开更多
关键词 水稻 稻瘟病菌 致病力 抗性基因
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黑龙江省稻瘟病菌育性及其交配型分析
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作者 张晓玉 张亚玲 +3 位作者 靳学慧 周弋力 孟峰 武菁菁 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期93-100,共8页
为明确黑龙江省采集自不同年份、不同地区的稻瘟病菌Magnaporthe oryzae的育性能力和交配型分布,采用2株标准菌株GUY11(MAT1-2)和KA3(MAT1-1)对2016-2017年黑龙江省西部、东部、中部3个地区经单孢分离的241株稻瘟病菌进行育性测定,并利... 为明确黑龙江省采集自不同年份、不同地区的稻瘟病菌Magnaporthe oryzae的育性能力和交配型分布,采用2株标准菌株GUY11(MAT1-2)和KA3(MAT1-1)对2016-2017年黑龙江省西部、东部、中部3个地区经单孢分离的241株稻瘟病菌进行育性测定,并利用PCR技术对其交配型进行检测。结果表明,黑龙江省西部、东部、中部的241株稻瘟病菌中可育性菌株比例为11.62%,其中雌性菌株、雄性菌株、两性菌株分别占1.66%、4.56%和1.25%,不能判断其性别的未知菌株占4.15%。采集自不同地区、不同年份的稻瘟病菌可育性差异均较大,西部、东部、中部地区可育性菌株出现频率分别为13.25%、7.27%和12.62%;2016年采集的稻瘟病菌可育性较高,可育性菌株出现频率为25.30%。黑龙江省稻瘟病菌群体中同时存在MAT1-1和MAT1-2两种交配型,主要以交配型MAT1-1占优势,出现频率为58.92%,交配型为MAT1-2的菌株出现频率为8.30%。不同地区稻瘟病菌的交配型亦有差异,交配型为MAT1-1的菌株在黑龙江省东部地区出现频率最高,为72.73%,在中部、西部地区的出现频率次之,分别为61.17%和46.99%。表明黑龙江省水稻种植区的稻瘟病菌同时存在2种交配型菌株,其交配型存在丰富的多态性,但其可育性及交配型分布不均衡。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 有性生殖 交配型 育性 PCR
黑龙江省稻瘟病菌无毒基因AVR-Pita及其同源基因的检测与分析 预览
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作者 孟峰 张亚玲 靳学慧 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期143-149,共7页
【目的】为了检测黑龙江省稻瘟病菌无毒基因AVR-Pita及其同源基因分布情况与变异机制,了解其变异类型的致病表型。【方法】采用3个无毒基因AVR-Pita1、AVR-Pita2和AVR-Pita3的特异性引物,对202个采自黑龙江省各稻区的稻瘟病菌单孢分离... 【目的】为了检测黑龙江省稻瘟病菌无毒基因AVR-Pita及其同源基因分布情况与变异机制,了解其变异类型的致病表型。【方法】采用3个无毒基因AVR-Pita1、AVR-Pita2和AVR-Pita3的特异性引物,对202个采自黑龙江省各稻区的稻瘟病菌单孢分离菌株的DNA进行PCR扩增,通过琼脂糖凝胶电泳检测分析,挑选不同带型和不同地区代表菌株的PCR产物进行测序。测序结果与相应无毒基因序列进行碱基与氨基酸序列的比较分析,并利用水稻抗性单基因系,对不同变异类型的稻瘟病菌株进行功能验证【。结果】AVR-Pita1的出现频率为36.14%,AVR-Pita3出现频率为59.41%。AVR-Pita2在黑龙江省202个菌株DNA中未扩增出目的条带。对AVR-Pita1和AVR-Pita3的部分PCR产物进行序列分析,检测出AVR-Pita1有5种变异类型,它们是AVR-Pita1-1、AVR-Pita1-A、AVR-Pita1-B、AVR-Pita1-C和AVR-Pita1-D。经功能验证,AVR-Pita1-1、AVR-Pita1-A、AVR-Pita1-B和AVR-Pita1-D无毒功能丧失。而无毒基因AVR-Pita3未检测出变异菌株。【结论】AVR-Pita1变异能力较强,导致大多数菌株无毒功能丧失,需与其他抗性基因搭配使用。在黑龙江省稻瘟病菌生理小种中未发现AVR-Pita2基因。AVR-Pita3基因序列在菌株中比较稳定。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 AVR-Pita及其同源基因 功能验证
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稻瘟病菌分泌蛋白MoCDIE2诱导植物细胞死亡的功能分析 预览
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作者 吴航 李智强 刘文德 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期15-22,共8页
由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是全球最严重的植物真菌病害之一。稻瘟病菌通过分泌效应蛋白进入与植物相互作用界面或转运到植物细胞内,抑制寄主植物的免疫防卫反应,使病原菌成功侵染。通过农杆菌介导的异源表达策略,筛... 由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是全球最严重的植物真菌病害之一。稻瘟病菌通过分泌效应蛋白进入与植物相互作用界面或转运到植物细胞内,抑制寄主植物的免疫防卫反应,使病原菌成功侵染。通过农杆菌介导的异源表达策略,筛选到能引起非寄主植物烟草细胞死亡的候选效应蛋白MoCDIE2(Cell Death-Inducing Effector)。序列分析表明:MoCDIE2基因编码一个蓖麻毒素B凝集素蛋白;系统发育树构建结果表明MoCDIE2同源蛋白保守存在于丝状真菌中;利用基因敲除的方法获得MoCDIE2的敲除突变体,结果表明MoCDIE2的敲除突变体在菌丝生长和致病性方面与野生型菌株Guy11没有明显差异。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 MoCDIE2 基因敲除 蓖麻毒素B凝集素蛋白
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稻瘟病菌对丙环唑和醚菌酯的敏感性检测
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作者 赵琪君 刘世江 +3 位作者 丁怡 李荣玉 李明 吴小毛 《农药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期462-464,468共4页
[目的]明确稻瘟病菌对防治药剂的敏感性。[方法]采用菌丝生长速率法测定丙环唑与醚菌酯及其组合对南方稻区稻瘟病菌菌株的抑菌活性。[结果]丙环唑和醚菌酯对供试菌株的EC50值分别为0.48~8.46、1.27~29.44 mg/L,且敏感性频率呈正态分布,... [目的]明确稻瘟病菌对防治药剂的敏感性。[方法]采用菌丝生长速率法测定丙环唑与醚菌酯及其组合对南方稻区稻瘟病菌菌株的抑菌活性。[结果]丙环唑和醚菌酯对供试菌株的EC50值分别为0.48~8.46、1.27~29.44 mg/L,且敏感性频率呈正态分布,因此可将病菌对丙环唑和醚菌酯的EC50均值(3.99±2.06)、(12.08±6.91) mg/L作为2种药剂的敏感基线。丙环唑·醚菌酯以有效成分比为5:1时协同增效作用明显,其CTC值为165.48,EC50值为0.85 mg/L。[结论]研究结果为田间防治提供参考。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 丙环唑 醚菌酯 敏感性检测 协同增效
稻瘟病菌产孢技术和防治方法概述 预览
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作者 韩玉 吴尧 +2 位作者 王林 揭春玉 吴双清 《安徽农学通报》 2019年第7期57-59,共3页
该文总结了稻瘟病菌的分离方法、适合产孢的培养基、温度和pH、保存方法以及主要防治技术的研究进展,以期为稻瘟病菌生理小种的鉴定和治病机理的研究提供参考。
关键词 稻瘟病菌 分离方法 保存方法 防治方法
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MoFbc1调控稻瘟病菌生长与致病机制初探
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作者 张梦园 潘锐 +1 位作者 谭乐勇 郭敏 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2019年第1期98-103,共6页
真核生物体内,F-box蛋白作为泛素连接酶复合物(Skp1-Cullin1-F-box,SCF)的调节亚基,参与降解底物的特异性识别。为探究F-box家族基因MoFbc1在稻瘟病菌生长发育及侵染致病中的功能,采用生物信息学方法分析MoFbc1蛋白结构域并构建进化树... 真核生物体内,F-box蛋白作为泛素连接酶复合物(Skp1-Cullin1-F-box,SCF)的调节亚基,参与降解底物的特异性识别。为探究F-box家族基因MoFbc1在稻瘟病菌生长发育及侵染致病中的功能,采用生物信息学方法分析MoFbc1蛋白结构域并构建进化树。利用同源重组方法获得MoFbc1基因敲除及其回补菌株并进行表型分析。结果表明,MoFbc1敲除菌株在产孢、附着胞形成及致病性等方面与野生型菌株均无显著差异。但其在MM和RDC培养基上生长速率下降,表明MoFbc1基因可能参与调控稻瘟病菌对部分营养物质的利用;突变体对细胞壁胁迫因子CFW、CR敏感,提示其细胞壁结构可能发生改变。结果为进一步揭示基因MoFbc1调控稻瘟病菌生长发育机制奠定基础。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 F-BOX 基因敲除 功能分析
武陵山区稻瘟病菌生理小种分子鉴定体系的建立 预览
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作者 刘松青 郑洁 +1 位作者 王春台 徐鑫 《安徽农业科学》 CAS 2019年第9期144-150,167共8页
[目的]建立武陵山区稻瘟病菌生理小种分子鉴定体系。[方法]选用RAPD、REMAP、Rep-PCR3种分子标记和无毒基因检测,对武陵山区稻瘟病菌生理小种文库中2013—2015年分离的220个菌株进行指纹图谱的构建和聚类分析。[结果]共统计26对引物扩... [目的]建立武陵山区稻瘟病菌生理小种分子鉴定体系。[方法]选用RAPD、REMAP、Rep-PCR3种分子标记和无毒基因检测,对武陵山区稻瘟病菌生理小种文库中2013—2015年分离的220个菌株进行指纹图谱的构建和聚类分析。[结果]共统计26对引物扩增得到的3年样本中稳定出现的97条具有多态性的条带。聚类分析结果显示,在0.75的相似性水平上可将220个菌株分为12个遗传谱系,谱系10为优势谱系,不同年份的稻瘟病菌群体遗传结构存在一定差异,但并未发生明显演化。[结论]建立了新的武陵山区稻瘟病菌生理小种分子鉴定体系,为该地区抗稻瘟病菌品种的选育和布局提供参考。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 遗传谱系 鉴定体系 武陵山区
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江苏省稻瘟病菌致病力分化及无毒基因组成分析 预览
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作者 沈乐融 齐中强 +3 位作者 杜艳 于俊杰 俞咪娜 刘永锋 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期42-47,共6页
针对2013-2017年从江苏省采集标样并分离得到的共计621个稻瘟病菌[Magnaporthe oryzae(Hebert)Barr]单孢菌株,利用10对稻瘟病菌无毒基因(ACE1、PWL1、Avr-Pita、Avr1-CO39、Avr-Pizt、Avr-Pib、Avr-Pia、Avr-Pii、Avr-Pik、Avr-Pi9)特... 针对2013-2017年从江苏省采集标样并分离得到的共计621个稻瘟病菌[Magnaporthe oryzae(Hebert)Barr]单孢菌株,利用10对稻瘟病菌无毒基因(ACE1、PWL1、Avr-Pita、Avr1-CO39、Avr-Pizt、Avr-Pib、Avr-Pia、Avr-Pii、Avr-Pik、Avr-Pi9)特异性引物进行扩增,分析江苏省稻瘟病菌无毒基因的分布及频率。结果表明:上述10个无毒基因在江苏省均有分布,但出现频率不同,其中平均扩增频率最高的为Avr-Pib,达到74.56%,最低的是Avr-Pia,只有9.34%。Avr-Pib、Avr-Pik、Avr-Pizt连续5年扩增频率较高且稳定遗传。此外,采用日本清泽鉴别品种对稻瘟病菌供试菌株进行致病力测定,结果表明供试菌株对Pi-zt、Pi-z、Pi-ta、Pi-ta^2、Pi-i表现为弱毒力。综上所述,江苏省稻瘟病菌群体组成较为复杂,且存在较大易变性;无毒基因的分布存在较大差异,且与地理区域密切相关。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 致病力分化 无毒基因 毒力频率
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稻瘟病菌精氨酸甲基转移酶基因MoHMT1的功能分析 预览
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作者 张文泽 张艳丽 +5 位作者 门彦明 张玉娇 孙志昕 李文慧 鲁国东 齐尧尧 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期38-44,共7页
由蛋白质精氨酸甲基转移酶(Protein arginine methyltransferases,PRMTs)调控的精氨酸甲基化是真核生物中普遍存在的翻译后修饰。为研究稻瘟病菌MoHMT1(hnRNP arginine N-methyltransferase,PRMT1的同源蛋白)基因的功能,本研究根据同源... 由蛋白质精氨酸甲基转移酶(Protein arginine methyltransferases,PRMTs)调控的精氨酸甲基化是真核生物中普遍存在的翻译后修饰。为研究稻瘟病菌MoHMT1(hnRNP arginine N-methyltransferase,PRMT1的同源蛋白)基因的功能,本研究根据同源重组的原理获得Mohmt1的敲除突变体,并对突变体进行了初步的表型分析。结果表明,与野生型相比,MoHMT1基因的缺失导致稻瘟病菌的菌落变小,表面气生菌丝变薄,生长速率明显减慢。虽然MoHmt1突变体的产孢量明显下降,仅为野生型的20%左右,但是产生的分生孢子能正常萌发产生附着胞,并成功侵入洋葱表皮细胞。进一步利用孢子悬浮液接种水稻叶片,发现Mohmt1缺失突变体病斑数显著减少,致病能力减弱。以上实验结果表明MoHMT1蛋白可能在稻瘟病菌菌丝生长发育和侵染致病过程中发挥了重要的调控作用。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 MoHMT1 基因敲除 生长发育 致病性
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黑龙江省稻瘟病菌无毒基因AVR-Pib、AVR-Pik和AvrPiz-t的检测与分析 预览
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作者 孟峰 张亚玲 +2 位作者 靳学慧 张晓玉 姜军 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第23期4262-4273,共12页
【目的】检测黑龙江省稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)无毒基因AVR-Pib、AVR-Pik和AvrPiz-t在不同地区、年份间流行菌株的分布情况与变异机制,了解其等位基因的致病表型,为黑龙江省抗瘟品种布局提供参考依据。【方法】利用NCBI中公布的无... 【目的】检测黑龙江省稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)无毒基因AVR-Pib、AVR-Pik和AvrPiz-t在不同地区、年份间流行菌株的分布情况与变异机制,了解其等位基因的致病表型,为黑龙江省抗瘟品种布局提供参考依据。【方法】利用NCBI中公布的无毒基因序列对3个无毒基因AVR-Pib、AVR-Pik和AvrPiz-t的基因全长和编码序列(coding sequence,CDS)分别设计特异性引物,将2016年和2017年采自黑龙江省不同地区335个稻瘟病菌单孢分离菌株的DNA进行PCR扩增,通过琼脂糖凝胶电泳检测分析,并挑选不同带型和不同地区代表菌株的PCR产物进行测序。测序结果与相应无毒基因序列进行碱基与氨基酸序列的比较分析,并利用水稻抗性单基因系,对不同变异类型的稻瘟病菌菌株进行致病型测定。【结果】在PCR电泳检测中AVR-Pib、AVR-Pik和AvrPiz-t均出现特异性条带,说明这3个无毒基因在黑龙江省均有分布,并以不同分布频率与突变类型出现。3个无毒基因平均扩增频率分别为75.52%、87.16%和85.67%。其中AVR-Pib通过电泳检测与PCR产物测序检测出4种带型(无带、高带、中高带与低带)和5种变异类型AVR-Pib(1-1、1-2、2、3、3-1),基因型AVR-Pib-1-1、AVR-Pib-1-2、AVR-Pib-2和AVR-Pib-3-1为新发现的变异类型,其中基因型AVR-Pib-1-1和AVR-Pib-1-2均为转座子Pot2的插入,但插入位点不同;基因型AVR-Pib-2在阅读框上游存在小片段的插入;基因型AVR-Pib-3-1碱基序列与原序列比对有4处差异,即32(C/G)35(T/A)36(T/A)38(T/A),导致氨基酸翻译提前终止。对检测到的5种等位基因型进行致病型测定,分析发现除正常基因型AVR-Pib-3外,其他变异基因型无毒功能均已丧失。而AVR-Pik经PCR产物测序检测出7种等位基因型,AVR-Pik(D、A、B、C、E、F、F2),碱基序列的变化均导致氨基酸错义突变,7种等位基因型均已见报道。无毒基因AvrPiz-t通过电泳检测和PCR产物测序分析,发现2种带型(高 展开更多
关键词 黑龙江省 稻瘟病菌 无毒基因 AVR-Pib AVR-Pik AvrPiz-t
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稻瘟病菌对咪鲜胺的抗药性风险评估 预览
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作者 赵东磊 辛文静 +4 位作者 杨莹 卢飞 效雪梅 段亚冰 周明国 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期440-447,共8页
[目的]由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是一种毁灭性病害,严重威胁全球水稻生产。麦角甾醇生物合成抑制剂(EBI)咪鲜胺在中国被用于防治稻瘟病。本文研究稻瘟病菌对咪鲜胺的抗药性风险,旨在为该杀菌剂的科学使用及抗性治理... [目的]由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是一种毁灭性病害,严重威胁全球水稻生产。麦角甾醇生物合成抑制剂(EBI)咪鲜胺在中国被用于防治稻瘟病。本文研究稻瘟病菌对咪鲜胺的抗药性风险,旨在为该杀菌剂的科学使用及抗性治理提供理论依据。[方法]将稻瘟病菌敏感菌株S-1菌碟接种于含有最低抑制浓度咪鲜胺的PDA平板上,抗药性驯化培养20 d,测定抗药性变异频率及突变体的适合度,包括菌丝生长速率、产孢量、致病力以及在低温和高温条件下的生长特征。[结果]驯化培养获得30个抗药性突变体,突变频率为1%。所有突变体均属低抗水平,并且其抗药性可稳定遗传。咪鲜胺抗药性突变体对氟环唑、戊唑醇和己唑醇表现不完全交互抗性,而对嘧菌酯不存在交互抗性。对抗药性突变体进行适合度测定,发现40%的抗药性突变体的菌丝生长速率显著降低,而60%的抗药性突变体无显著变化;所有抗药性突变体分生孢子产量出现不同程度下降。抗药性突变体对15℃低温或30℃高温更加敏感,线性生长速率显著下降。接种离体大麦叶片,1/3的突变体完全丧失了致病力,其余2/3的抗药性突变体致病力也显著下降。[结论]稻瘟病菌对咪鲜胺的抗性风险属于低抗水平。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 咪鲜胺 抗药性 适合度
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稻瘟病菌F-box蛋白MoFbr7生物学功能分析 预览
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作者 张梦园 潘锐 +1 位作者 谭乐勇 郭敏 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期19-24,43共7页
F-box蛋白在泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)中参与调控胞内蛋白降解、受体识别、信号传导等生物学过程。本研究从稻瘟病菌中克隆了F-box基因 MoFbr7 ,序列分析表明,该基因编码产物具有 1个 F-box结构域(N-端)和8... F-box蛋白在泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)中参与调控胞内蛋白降解、受体识别、信号传导等生物学过程。本研究从稻瘟病菌中克隆了F-box基因 MoFbr7 ,序列分析表明,该基因编码产物具有 1个 F-box结构域(N-端)和8个连续的WD40重复序列(C-端),在丝状真菌中高度保守。利用基因敲除方法,获得4个MoFbr7基因敲除突变体,同时构建了回补菌株。表型分析结果显示,MoFbr7基因缺失突变体在产孢量、附着胞形态、原生质体释放、致病性等方面均无异常。突变体在MM、RDC培养基上生长速率下降;对细胞壁胁迫因子CFW(Calcofluor white)、刚果红敏感。以上结果表明MoFbr7参与稻瘟病菌的营养生长与细胞壁完整性,为进一步揭示其生物学功能奠定基础。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 F-BOX蛋白 基因敲除 功能分析
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湖南桃江稻瘟病菌遗传多样性分析及无毒基因的鉴定 预览
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作者 贺雄 丁朝辉 +6 位作者 周瑚 朱华珺 李俊俊 丁宇倩 胡立冬 任佐华 刘二明 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第9期2040-2045,共6页
【目的】为明确湖南桃江地区稻瘟病菌遗传多样性和无毒基因的组成及变化趋势。【方法】利用8对SSR引物对2017年从湖南桃江病圃多个晚稻品种上分离纯化的29个稻瘟病单孢菌株进行遗传多样性分析,并利用18个已知抗瘟基因的水稻近等基因系(N... 【目的】为明确湖南桃江地区稻瘟病菌遗传多样性和无毒基因的组成及变化趋势。【方法】利用8对SSR引物对2017年从湖南桃江病圃多个晚稻品种上分离纯化的29个稻瘟病单孢菌株进行遗传多样性分析,并利用18个已知抗瘟基因的水稻近等基因系(NILs)对其中的19个特异性稻瘟病菌株进行无毒基因鉴定。【结果】在相似系数0.70,差异系数0.30水平下,29个供试菌株可划分为7个宗谱,优势宗谱Ⅰ有12个菌株,占参测菌数的41.3%,宗谱Ⅴ有7个菌株,占总菌数的24.1%,其余5个宗谱分别有1?3个菌株,占总菌数的34.6%;通过无毒基因鉴定18个菌株致病频率(致病频率=感病水稻数/所有测试水稻品种数XlOO%)在35%?75%。强致病力菌株(致病频率≥70%)3株,占总菌数的15.7%;较强致病力菌株(70%)致病频率≥50%)7株,占总菌数36.8%;中等致病力菌株(50%>致病频率3=20%)9株,占总菌数的47.5%;供试菌株平均致病频率为49.86%。19个菌株对NILs水稻品系毒力频率(毒力频率=对测试水稻品系有毒力的菌株数/所有菌株数XlOO%)超过70%的抗性基因为Pi-k^s、Pi-z^t、Pi-ta,属强毒力菌株;毒力频率介于50%?70%的抗性基因为Pi-k^p、Pi-z^5、Pi-t、Pi-sh、Pi-5,,属于中等毒力菌株;对其余抗性基因的毒力频率低于50%。【结论】湖南桃江稻瘟病菌群体具有丰富的遗传多样性,而且存在复杂的致病性分化;抗性基因Pi-3、Pi-i、Pi-11、Pi-19、Pi-12对桃江地区稻瘟病菌抗性优良,可在抗病育种中加以利用。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 SSR分子标记 遗传多样性 无毒基因
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根癌农杆菌介导的遗传转化及其在稻瘟病菌中的应用 预览
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作者 何丽云 张树林 +3 位作者 崔百元 朱庆锋 刘圣杰 刘文华 《广东农业科学》 CAS 2019年第3期93-100,共8页
根癌农杆菌介导的遗传转化(ATMT)技术是近20年发展起来的真菌研究中最具变革性的技术之一,它作为一种转化工具已被广泛应用于真菌基因功能研究中,使人们对真菌基因组学的理解有了很大的改变。利用ATMT获得随机的T-DNA插入突变体库,结合... 根癌农杆菌介导的遗传转化(ATMT)技术是近20年发展起来的真菌研究中最具变革性的技术之一,它作为一种转化工具已被广泛应用于真菌基因功能研究中,使人们对真菌基因组学的理解有了很大的改变。利用ATMT获得随机的T-DNA插入突变体库,结合突变体菌株表型筛选,使许多过程的遗传基础得到阐明。ATMT法具有操作简单,转化受体广泛,转化效率高以及转化子遗传稳定性高等优势。稻瘟病菌是植物十大重要真菌之一,是引发水稻稻瘟病的病原真菌。目前,培育水稻抗病品种是控制稻瘟病最经济和环保的方法。通过克隆稻瘟病菌相关致病基因并研究其功能,在解释致病机理和生理特性,以及培育抗病品种方面具有重要的理论和实践意义。以根癌农杆菌为介导的遗传转化为稻瘟病菌的插入突变、基因敲除和标记克隆等方面研究提供了一个重要工具。针对根癌农杆菌介导的遗传转化原理、特点、步骤、影响因素以及该技术在稻瘟病菌功能基因组学研究中的应用进行综述,以期能够为稻瘟病菌等真菌的遗传转化方面研究提供相关的参考。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 遗传转化 稻瘟病菌 功能基因 突变体库
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特基拉芽孢杆菌JN-369的分离鉴定及其抑菌物质分析
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作者 周瑚 邹秋霞 +3 位作者 胡玲 朱华珺 任佐华 刘二明 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期52-58,共7页
为筛选可用于防治由稻瘟病菌所致水稻稻瘟病的生防菌株资源,采用稀释涂布平板法,从感病水稻品种湘早籼24号的健康植株茎叶中分离获得了1株拮抗细菌JN-369,结合形态学观察、生理生化鉴定及16S rDNA序列分析对其菌种进行了鉴定,采用平板... 为筛选可用于防治由稻瘟病菌所致水稻稻瘟病的生防菌株资源,采用稀释涂布平板法,从感病水稻品种湘早籼24号的健康植株茎叶中分离获得了1株拮抗细菌JN-369,结合形态学观察、生理生化鉴定及16S rDNA序列分析对其菌种进行了鉴定,采用平板对峙法研究了JN-369菌株的抑菌谱,并初步测定了JN-369中挥发性有机物(VOCs)、蛋白类粗提物及脂肽类粗提物对稻瘟病菌的抑制作用。结果表明:JN-369菌株为特基拉芽孢杆菌Bacillus tequilensis,其对稻瘟病菌具有显著抑制作用,对菌丝生长的抑制率达80.46%±0.83%;同时该菌株对供试的辣椒胶孢炭疽菌、烟草赤星病菌及黄瓜疫病菌等植物病原真菌和卵菌均有抑制作用;但对供试病原细菌则均无抑制作用;1×10~8 cfu/mL的JN-369菌悬液产生的挥发性有机物对稻瘟病菌的抑制效果最强,抑制率达72.92%±3.01%,1.454 mg/mL的蛋白类提取物和1.026 mg/mL的脂肽类提取物对稻瘟病菌的抑制率分别为24.68%±0.80%和14.34%±1.08%。研究表明,菌株JN-369具有一定的开发应用潜力。 展开更多
关键词 生防菌 稻瘟病菌 特基拉芽孢杆菌 JN-369 分离鉴定 抑菌活性 生物防治
鄂西南地区稻瘟病菌最适生长培养基筛选 预览
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作者 郑洁 安乐 +3 位作者 邓森文 黎艳艳 王春台 徐鑫 《安徽农业科学》 CAS 2019年第1期127-129,共3页
[目的]筛选鄂西南地区稻瘟病菌的最适生长培养基。[方法]从鄂西南地区稻瘟病菌生理小种文库中选择优势菌株,在米糠培养基、燕麦培养基、马铃薯培养基,以及以上3种材料按比例混配的4种组合培养基上进行培养,观察其生长状态。[结果]同种... [目的]筛选鄂西南地区稻瘟病菌的最适生长培养基。[方法]从鄂西南地区稻瘟病菌生理小种文库中选择优势菌株,在米糠培养基、燕麦培养基、马铃薯培养基,以及以上3种材料按比例混配的4种组合培养基上进行培养,观察其生长状态。[结果]同种菌株在不同培养基上生长速率不同,不同菌株在同一种培养基上生长速率不同,在含有米糠、燕麦、马铃薯3种成分的M7培养基上稻瘟菌生长量最大。[结论]M7培养基为鄂西南地区稻瘟菌的最适生长培养基。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 生长速率 培养基 鄂西南地区
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基于PCR的两步法丝状真菌基因敲除方法 预览
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作者 谢鑫 蒋君梅 +1 位作者 王勇 任明见 《种子》 北大核心 2019年第4期15-19,共5页
基因敲除是研究真菌基因功能的重要方法之一,目前,丝状真菌敲除多采用基因两侧的同源臂对基因组的靶标进行同源替换,然后采用抗生素对转化子进行筛选,但这存在着筛选效率低、假阳性率高、操作复杂等问题。本研究以稻瘟菌为研究对象,采... 基因敲除是研究真菌基因功能的重要方法之一,目前,丝状真菌敲除多采用基因两侧的同源臂对基因组的靶标进行同源替换,然后采用抗生素对转化子进行筛选,但这存在着筛选效率低、假阳性率高、操作复杂等问题。本研究以稻瘟菌为研究对象,采取以下步骤对此进行优化:1)构建HPH-GFP(潮霉素-绿色荧光蛋白)融合表达载体;2)分别用带有接头序列的引物克隆待敲除基因上、下游片段;3)克隆上、下游片段与HPH-GFP组成嵌合体片段;4)嵌合体片段转化真菌原生质体;5)对敲除突变体进行筛选。结果表明,该法操作简便、高效,除了用潮霉素HPH作为筛选标记外,还可用GFP作为荧光筛选标记,极大提高了筛选效率,可用作丝状真菌基因功能研究。 展开更多
关键词 丝状真菌 基因敲除 稻瘟菌 PCR扩增
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近十年广东稻瘟病菌生理小种变化分析 预览 被引量:1
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作者 钟宝玉 黄德超 +4 位作者 朱小源 陈玉托 邹寿发 杨伟新 赖信红 《仲恺农业工程学院学报》 CAS 2018年第1期24-29,共6页
从2006-2015年近10年间收集的来自广东各地的7 225份穗颈瘟样本中分离出稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)单孢菌株3 690个,经接种到中国水稻稻瘟病菌鉴别品种上共鉴定出8群51个生理小种,其中以ZB群、ZC群和ZG群为主要优势种群,而ZB群出... 从2006-2015年近10年间收集的来自广东各地的7 225份穗颈瘟样本中分离出稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)单孢菌株3 690个,经接种到中国水稻稻瘟病菌鉴别品种上共鉴定出8群51个生理小种,其中以ZB群、ZC群和ZG群为主要优势种群,而ZB群出现频率最高,为48.44%~75.35%;病菌生理小种以ZB13、ZB15、ZC15、ZC13和ZG1为主要优势小种,其中ZB13出现频率最高,为32.47%. 展开更多
关键词 稻瘟病 稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae) 生理小种 变化动态
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