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miR-369-3p通过调控VEGFC基因表达对膀胱癌细胞增殖及凋亡的影响
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作者 赵振伶 邵焕军 +1 位作者 郝丽娜 刘军 《中国医师杂志》 CAS 2018年第1期92-95,99共5页
目的观察miR-369-3p对膀胱癌细胞EJ和5637中血管内皮细胞生长因子c(VEG-FC)基因的调控作用,并观察其对细胞增殖及凋亡的影响。方法转染miR.NC(对照组)或转染miR-369-3p(观察组)至膀胱癌细胞株EJ和5637;采用Targetscan靶基因预... 目的观察miR-369-3p对膀胱癌细胞EJ和5637中血管内皮细胞生长因子c(VEG-FC)基因的调控作用,并观察其对细胞增殖及凋亡的影响。方法转染miR.NC(对照组)或转染miR-369-3p(观察组)至膀胱癌细胞株EJ和5637;采用Targetscan靶基因预测软件预测miR-369-3p的靶基因;采用荧光实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测VEGFCmRNA表达变化;Westernblotting检测VEGFC、p-Raf-1和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERKl/2)在蛋白水平的变化;采用细胞计数试剂盒(CCK-8法)和克隆形成实验检测miR-369-3p对膀胱癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测miR-369-3p对细胞凋亡的影响。结果转染miR-369-3p后,EJ、5637细胞中VEGFC在mRNA水平和蛋白水平的表达均明显下降(P〈0.05),P-Raf-1和p-ERKl/2蛋白表达明显降低,细胞的增殖能力明显降低(P〈0.05),细胞形成的克隆数明显减少(P〈0.05),细胞凋亡明显增加(P〈0.01)。结论miR-369-3p可通过干扰VEGFC基因的表达,抑制膀胱癌细胞的增殖及促进膀胱癌细胞的凋亡,可能为膀胱癌的生物治疗提供一个新的靶标。 展开更多
关键词 微RNAs/药理学 血管内皮生长因子c/药物作用/代谢 膀胱肿瘤/药物疗法/病 理学/代谢 细胞增殖/药物作用 细胞凋亡/药物作用
新型骨靶向纳米复合物抗前列腺癌骨转移细胞增殖作用研究 被引量:1
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作者 郝钊 黎志宏 《中国医师杂志》 CAS 2015年第8期1174-1178,共5页
目的 通过构建可携带具有抗前列腺癌增殖作用的基因miR-15-a和miR-16-1的适体-去端胶原(APT-ATE),探讨载体系统的转染效率及其对前列腺癌细胞的抑制作用.方法 运用流式细胞仪,得出APT-ATE基因载体结构;利用粒径电位仪对APT-ATE/miRNA... 目的 通过构建可携带具有抗前列腺癌增殖作用的基因miR-15-a和miR-16-1的适体-去端胶原(APT-ATE),探讨载体系统的转染效率及其对前列腺癌细胞的抑制作用.方法 运用流式细胞仪,得出APT-ATE基因载体结构;利用粒径电位仪对APT-ATE/miRNA(适体-去端胶原/微小RNA)纳米复合物进行表征;利用基因转染考察APT-ATE/miRNA复合物在前列腺癌细胞(PC3和LNCaP)上的表达效果;CCK-8增殖抑制实验,考察APT-ATE/miRNA对前列腺癌细胞的抑制效果.结果 利用结构鉴定证明APT-ATE合成成功.定性定量转染效率实验证明APT修饰后的ATE对LNCaP细胞转染效率显著增加,证明APT的靶向作用.CCK-8细胞增殖实验证明,APT-ATE/miRNA可抑制前列腺癌细胞.裸鼠体内靶向性实验证明,APT-ATE/miRNA具有较好的骨靶向作用.结论 APT-ATE/miRNA有望成为今后靶向治疗骨转移性前列腺癌的基因药物. 展开更多
关键词 微RNAs/药理学 纳米复合物/治疗应用 前列腺肿瘤/药物疗法 肿瘤转移/药物疗法 骨肿瘤/继发性/药物疗法
Let-7b和miR-199a对B16F10细胞增殖生长的影响 被引量:1
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作者 周建大 谭建湘 +9 位作者 谢慧清 蒋碧梅 周鸣 刘海航 李明 张彦文 徐丹 陈继业 李雄 罗成群 《中国医师杂志》 CAS 2011年第6期721-726,共6页
目的研究let-7b和miR.199a对黑色素瘤增殖生长的影响。方法设计靶向let-7b和miR.199a基因的过表达质粒和inhibitor干扰片段,将同一株系B16FIO细胞分为七组:空白组、let-7b质粒组、miR-199a质粒组、空质粒组、let-7binhibitor组、miR... 目的研究let-7b和miR.199a对黑色素瘤增殖生长的影响。方法设计靶向let-7b和miR.199a基因的过表达质粒和inhibitor干扰片段,将同一株系B16FIO细胞分为七组:空白组、let-7b质粒组、miR-199a质粒组、空质粒组、let-7binhibitor组、miR-199ainhibitor组、inhibitor对照组,运用基因转染技术将对应组别的外源基因导人B16F10细胞中,从RNA水平、蛋白水平和细胞水平三方面检测let-7b和miR-199a基因对B16F10细胞的影响。结果let-7b质粒组和miR-199a质粒组B16FIO细胞中对应基因的表达为3.8776±0.1372和2.8660±O.2821,明显高于空白组(P〈0.05);let-7binhibitor组和miR-199ainhibitor组B16F10细胞中对应基因的表达为0.2057±0.0263和0.2656±0.0253,明显低于空白组(P〈0.05);B16F10细胞中cyclinDl的表达let-7b质粒组(2.023±0.315)和let-7binhibitor组(1.857±0.377)明显高于空白组(0.997±0.041)(P〈0.05),而B16F10细胞中Met的表达中miR.199a质粒组(5.19±0.309)和miR-199ainhibitor组(4.87±0.044)明显高于空白组(2.2±0.198)(P〈0.05);let-7b质粒组和miR-199a质粒组B16FIO细胞的生长趋势较空白组缓慢,尤其到转染后第3天,此生长趋势下降至最低值(P〈0.05),此后又缓慢趋近正常;此外,let-7b质粒组和miR-199a质粒组B16FlO细胞凋亡率分别为(11.8-4-1.19)%和(11.3±1.59)%,明显高于空白组(5.77±1.74)%(P〈0.05)。结论let-7b和miR-199a可负调控黑色素瘤细胞的增殖生长。 展开更多
关键词 微RNAs/药理学 黑色素瘤/病理学/药物疗法 细胞增殖 细胞生长过程
MicroRNA-9通过下调TGFBR2表达抑制肝星状细胞增殖和胶原合成
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作者 付荣泉 马志权 +1 位作者 胡益冰 胡丹平 《中国医师杂志》 CAS 2017年第6期833-835,共3页
目的探讨MicroRNA-9(miR-9)对肝星状细胞增殖和胶原合成的影响并研究其相关机制。方法设计合成miR-9特异性模拟物(miR-9mimics),将其转入肝星状细胞中,培养48h后收集细胞,采用实时定量PCR技术(qRT—PCR)验证miR-9mimics转染细... 目的探讨MicroRNA-9(miR-9)对肝星状细胞增殖和胶原合成的影响并研究其相关机制。方法设计合成miR-9特异性模拟物(miR-9mimics),将其转入肝星状细胞中,培养48h后收集细胞,采用实时定量PCR技术(qRT—PCR)验证miR-9mimics转染细胞中miR-9的变化水平、Westernblot检测I型胶原、Ⅲ型胶原蛋白表达、噻唑蓝(MTY)法检测细胞增殖情况;通过qRT—PCR和Westernblot检测转染miR-9mimics后其潜在靶点转化生长因子-01受体2(TGFBR2)韵表达水平。结果与对照组相比,转染miR-9mimics后,检测肝星状细胞中miR-9表达量明显升高(P〈0.05)。过表达miR-9后I型胶原、Ⅲ型胶原蛋白分别降低约(44±2)%和(50±3)%(P〈0.05),细胞增殖活性降低约(48±4)%(P〈0.01),TGFBR2的表达水平降低(P〈0.05)。结论过表达miR-9可抑制肝星状细胞胶原合成和细胞增殖,此机制可能是通过下调TGFBR2的表达来实现。 展开更多
关键词 微RNAs/药理学/代谢 肝细胞/细胞学/药物作用 星形细胞/药物作用 细胞增殖/药物作用 胶原/代谢
let-7a通过调控BAFF参与嗜酸粒细胞型CRSwNP发病机制的初步研究
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作者 张心浩 王男 +1 位作者 冯启苗 龙小博 《中国医师杂志》 CAS 2015年第8期1160-1163,共4页
目的 初步探讨嗜酸粒细胞型的伴有鼻息肉的慢性鼻-鼻窦炎(Eos CRSwNP)发病过程中miRNA对B淋巴细胞刺激因子(BAFF)的调控影响.方法 收集2012年1月至2013年2月在本院治疗的Eos CRSwNP患者鼻黏膜标本10例和正常鼻黏膜标本10例.运用生... 目的 初步探讨嗜酸粒细胞型的伴有鼻息肉的慢性鼻-鼻窦炎(Eos CRSwNP)发病过程中miRNA对B淋巴细胞刺激因子(BAFF)的调控影响.方法 收集2012年1月至2013年2月在本院治疗的Eos CRSwNP患者鼻黏膜标本10例和正常鼻黏膜标本10例.运用生物信息学软件(Pictar、TargetScan及miRanda)预测对BAFF进行调控的miRNA.运用实时定量PCR检测Eos CRSwNP鼻黏膜中let-7a的表达;采用免疫组化方法检测BAFF蛋白质表达水平;应用Spearman's检验分析let-7a与BAFF的相关性.结果 let-7a在Eos CRSwNP表达明显下降(P<0.05),BAFF蛋白质表达升高(P<0.05),两者均表达于上皮细胞且呈负相关(r=-0.66,P<0.05).结论 let-7a可能通过调控BAFF,参与EosCRSwNP中嗜酸粒细胞的活化. 展开更多
关键词 微RNAs/药理学/代谢 膜蛋白质类/药理学/代谢 鼻息肉/并发症/药物疗法/代谢 鼻窦炎/药物疗法/代谢
miR-218对胃癌细胞增殖及周期影响的研究 被引量:3
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作者 刘美媛 胡晓晔 +1 位作者 马磊 邹青峰 《中国医师杂志》 CAS 2015年第7期1017-1018,1023共3页
目的 探讨miR-218对胃癌细胞增殖及细胞周期的影响.方法 将miR-218 mimics转染胃癌细胞株SGC-7901和MGC-803细胞,以无关序列(Scramble mimics)作为阴性对照.采用qRT-PCR技术验证miR-218 mimics转染细胞中miR-218的表达水平;通过细胞... 目的 探讨miR-218对胃癌细胞增殖及细胞周期的影响.方法 将miR-218 mimics转染胃癌细胞株SGC-7901和MGC-803细胞,以无关序列(Scramble mimics)作为阴性对照.采用qRT-PCR技术验证miR-218 mimics转染细胞中miR-218的表达水平;通过细胞计数法及MTS[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2氢-四唑,内盐]法观察miR-218过表达对胃癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术观察miR-218过表达对胃癌细胞周期的影响.结果 转染miR-218 mimics胃癌细胞中miR-218的表达量较对照细胞显著升高.过表达miR-218的胃癌癌细胞增殖速度明显减慢(P<0.05).通过流式细胞术分析细胞周期发现,过表达miR-218的胃癌细胞阻滞于G1期.结论 miR-218能抑制胃癌细胞生长增殖,阻止胃癌细胞周期进程,它可能在胃癌的发生发展中发挥重要作用. 展开更多
关键词 微RNAs/药理学/代谢 胃肿瘤/药物疗法/代谢 细胞增殖/药物作用 细胞周期/药物作用
miRNA-577对胃癌细胞生物学行为的影响 被引量:2
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作者 颜美珠 崔英 +4 位作者 黄继英 沈曼茹 唐鄂 徐林芳 高振军 《中国医师杂志》 CAS 2017年第1期72-74,78共4页
目的探讨微小RNA(microRNA)-577对胃癌细胞功能的影响,并讨论其可能的作用机制。方法通过实时荧光定量PCR检测miRNA.577在胃癌细胞SGC-7901和正常胃黏膜细胞中的表达水平。将转染miRNA-577病毒的SGC-7901细胞作为实验组,转染空载... 目的探讨微小RNA(microRNA)-577对胃癌细胞功能的影响,并讨论其可能的作用机制。方法通过实时荧光定量PCR检测miRNA.577在胃癌细胞SGC-7901和正常胃黏膜细胞中的表达水平。将转染miRNA-577病毒的SGC-7901细胞作为实验组,转染空载体组为阴性对照组,PCR检测两组细胞的miRNA-577表达水平。通过Transwell小室法检测两组细胞的迁移侵袭能力,MTY试验检测两组细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期。Westernblot法检测细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)在两组细胞中的蛋白表达水平。结果胃癌SGC-7901细胞的miRNA-577表达量明显低于正常胃黏膜上皮细胞(P〈0.01)。PCR验证实验组细胞的miRNA-577的表达量较阴性对照组明显上升(P〈0.01)。转染miRNA-577的细胞增殖明显减慢(P〈0.05),G1期细胞比例显著增加(P〈0.01)。实验组细胞的CDK4表达明显低于对照组(P〈0.01)。结论miRNA-577在胃癌细胞中低表达,可能通过下调CDK4的表达,抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖。 展开更多
关键词 微RNAs/代谢/药理学 胃肿瘤/代谢/药物疗法 细胞周期蛋白依赖激酶4/代谢
特异性miRNA-200b抑制剂对肝星状细胞生物学特性的影响 被引量:2
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作者 付荣泉 丁继光 +2 位作者 洪亮 胡丹平 吴金国 《中国医师杂志》 CAS 2015年第5期682-684,688共4页
目的 观察特异性miRNA-200b抑制剂对肝星状细胞增殖、活化、胶原合成的影响.方法 设计并合成miR-200b抑制剂,利用脂质体将miRNA-200b抑制剂转入肝星状细胞中,培养48 h后,收集肝星状细胞和上清液,采用qRT-PCR探针的方法检测miR-200b的表... 目的 观察特异性miRNA-200b抑制剂对肝星状细胞增殖、活化、胶原合成的影响.方法 设计并合成miR-200b抑制剂,利用脂质体将miRNA-200b抑制剂转入肝星状细胞中,培养48 h后,收集肝星状细胞和上清液,采用qRT-PCR探针的方法检测miR-200b的表达水平、Westernblotting检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达、噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性和放射免疫法检测培养上清液中Ⅲ型前胶原和透明质酸含量.结果 与阴性对照组相比,miRNA-200b抑制剂转染48 h后HSC-T6细胞miR-200b组表达下调82%;α-SMA蛋白表达降低(19±3)%(P<0.05);细胞增殖活性降低(33±5)%(P<0.01);培养上清中Ⅲ型前胶原和透明质酸含量分别降低(35±4)%和(31±2)%(均P <0.01).结论 miRNA-200b抑制剂下调HSC-T6细胞中miR-200b表达,抑制肝星状细胞增殖与活化,减少细胞外基质的合成和分泌. 展开更多
关键词 微RNAs/拮抗剂和抑制剂/药理学/代谢 肝细胞/细胞学/药物作用 星形细胞/药物作用 细胞增殖/药物作用 胶原/代谢 肌动蛋白类/代谢 透明质酸/代谢
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