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4',5,7-三羟基异黄酮对LPS同时诱导的THP-1细胞向HAEC细胞迁移的影响 预览
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作者 周雪冰 《基层医学论坛》 2019年第17期2374-2376,共3页
目的探讨4',5,7-三羟基异黄酮对脂多糖(LPS)同时诱导的人单核细胞(THP-1)向人主动脉内皮细胞(HAEC)迁移能力的影响。方法用不同浓度4',5,7-三羟基异黄酮预处理两种细胞30min,然后用LPS同时作用两种细胞4h,Transwell迁移实验检测... 目的探讨4',5,7-三羟基异黄酮对脂多糖(LPS)同时诱导的人单核细胞(THP-1)向人主动脉内皮细胞(HAEC)迁移能力的影响。方法用不同浓度4',5,7-三羟基异黄酮预处理两种细胞30min,然后用LPS同时作用两种细胞4h,Transwell迁移实验检测THP-1细胞向HAEC细胞的迁移能力;将THP-1细胞加入到HAEC细胞中共培养1h,用酶联免疫吸附法检测共培养细胞培养液上清中MCP-1蛋白的浓度。结果加入不同浓度4',5,7-三羟基异黄酮预处理两种细胞30min后,THP-1细胞的迁移数量及共培养细胞上清液中MCP-1含量和细胞MCP-1mRNA的表达水平与LPS组比较均呈浓度依赖性减少(P<0.01)。结论LPS可诱导THP-1细胞与HAEC细胞迁移且促进MCP-1表达;4',5,7-三羟基异黄酮预处理后可明显抑制LPS诱导的THP-1细胞向HAEC细胞的迁移,并明显降低THP-1细胞与HAEC细胞MCP-1的表达。 展开更多
关键词 4' 5 7-三羟基异黄酮 脂多糖 人单核细胞 人主动脉内皮细胞 迁移
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人单核细胞对煤焦沥青烟提取物诱导BEAS-2B细胞TRAF2 mRNA表达的影响
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作者 闫英洁 宋金燕 +4 位作者 刘文佳 梁肖 王威 周舫 燕贞 《卫生研究》 CSCD 北大核心 2017年第3期439-442,460共5页
目的探讨人单核细胞(THP-1)对煤焦沥青烟提取物(CTPE)诱导BEAS-2B细胞肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)mRNA表达的影响。方法构建THP-1细胞和BEAS-2B细胞的共培养模型,用终浓度3μg/m L的CTPE处理共培养模型,细胞培养至第9代时... 目的探讨人单核细胞(THP-1)对煤焦沥青烟提取物(CTPE)诱导BEAS-2B细胞肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)mRNA表达的影响。方法构建THP-1细胞和BEAS-2B细胞的共培养模型,用终浓度3μg/m L的CTPE处理共培养模型,细胞培养至第9代时加入肿瘤坏死因子-α(TNF-α)中和抗体和C-Jun氨基端激酶(JNK)抑制剂SP600125,继续培养至第15代(CC15),设立共培养模型CC15组、TNF-α中和抗体组、JNK激酶抑制剂SP600125组,同代培养的BEAS-2B细胞为对照组,用Real-time PCR方法检测各组细胞中TRAF2 mRNA的相对表达水平。结果与CC10组相比,TNF-α中和抗体对共培养细胞作用不同时间时TRAF2 mRNA的相对表达量均降低(P〈0.001),作用48 h时TRAF2 mRNA相对表达水平达到最低(0.19±0.02)。SP600125抑制剂作用共培养细胞不同时间时c-Jun mRNA的相对表达水平与CC10组相比差异均有统计学意义(P〈0.001),36 h组表达水平最低(0.03±0.02)。TNF-α中和抗体组和SP600125抑制剂组TRAF2 mRNA相对表达水平(分别为1.73±0.04和1.88±0.05)均高于对照组(1.07±0.06),低于CC15组(2.23±0.09),差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 THP-1可通过TNF-α上调了CTPE诱导的BEAS-2B细胞中TRAF2 mRNA的表达水平,TRAF2和AP-1之间可能存在负反馈作用。 展开更多
关键词 人单核细胞 煤焦沥青烟提取物 肿瘤坏死因子 肿瘤坏死因子受体相关因子2 激活蛋白-1
DHA对猪血液单核细胞炎症的影响 预览
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作者 苏欣 沈立 张宇 《中国饲料》 北大核心 2015年第21期16-18,共3页
为研究二十二碳六烯酸(DHA)对猪血液单核细胞(PPBMCs)炎症反应的影响,本试验从猪外周血中分离PPBMCs,采用CCK-8法,观察不同浓度DHA(5、10、20μmol/L)对细胞活力的影响:采用荧光定量PCR和Elisa方法,观察不同浓度DHA(5μmol... 为研究二十二碳六烯酸(DHA)对猪血液单核细胞(PPBMCs)炎症反应的影响,本试验从猪外周血中分离PPBMCs,采用CCK-8法,观察不同浓度DHA(5、10、20μmol/L)对细胞活力的影响:采用荧光定量PCR和Elisa方法,观察不同浓度DHA(5μmol/L和10μmol/L)对PPBMCs中IL-6、TNF-α和MCP-1表达和分泌的影响:并检测不同浓度DHA(5μmol/L和10μmol/L)对LPS诱导的细胞炎症的影响。结果表明,5μmol/L和10μmol/LDHA对PPBMCs活力没有显著影响;DHA呈浓度依赖性地抑制PPBMCs中促炎因子(IL-6、TNF-α和MCP-1)的基础表达和分泌,并可抑制LPS诱导的促炎因子表达和分泌的增加。由此可见,DHA在一定浓度范围内可抑制PPBMCs的炎症反应. 展开更多
关键词 二十二碳六烯酸 猪血液单核细胞 炎症因子
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妊高征患者外周血清及单核细胞内镁,钙含量测定 被引量:10
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作者 戚庆炜 李慰玑 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期 15-18,共4页
探讨镁、钙代谢在妊高征病理生理变化中的作用。方法:采用原子吸收分光光度测定法,测定了26例妊高征患者产前外周血清及单核细胞内镁,钙含量,以27例同期住院的正常晚期妊娠妇女作对照。结论:镁、钙含量降低可能在妊高征病理生... 探讨镁、钙代谢在妊高征病理生理变化中的作用。方法:采用原子吸收分光光度测定法,测定了26例妊高征患者产前外周血清及单核细胞内镁,钙含量,以27例同期住院的正常晚期妊娠妇女作对照。结论:镁、钙含量降低可能在妊高征病理生理变化中起重要作用。 展开更多
关键词 妊娠高血压 综合征 单核细胞 测定
模拟微重力对单核细胞增殖及组织因子mRNA表达的影响 预览
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作者 于霞 郑磊 +2 位作者 熊石龙 蔡贞 王前 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1020-1022,共3页
目的探讨模拟微重力对单核细胞增殖及组织因子(TF)mRNA表达的影响。方法将单核细胞株THP-1细胞置于RCCS系统中进行培养,以细胞计数和流式细胞术测定THP-1细胞的增殖能力;RT-PCR检测THP-1细胞TFmRNA的表达。结果模拟微重力条件下THP-1... 目的探讨模拟微重力对单核细胞增殖及组织因子(TF)mRNA表达的影响。方法将单核细胞株THP-1细胞置于RCCS系统中进行培养,以细胞计数和流式细胞术测定THP-1细胞的增殖能力;RT-PCR检测THP-1细胞TFmRNA的表达。结果模拟微重力条件下THP-1细胞计数显著低于静止组(P〈0.01)。培养24h后,微重力组G0/G1期细胞(67.64±2.71)%明显高于静止组(46.57±1.64)%(P〈0.05)。THP-1细胞未受LPS刺激时,微重力组和静止组均低表达TFmRNA,两者间无统计学差异;加入LPS培养4h后,微重力组和静止组THP-1细胞TF mRNA表达均增加,但微重力组(2.301±0.179)明显低于静止LPS刺激组(9.210±1.328)(P〈0.05)。结论模拟微重力可抑制单核细胞的增殖以及LPS刺激下TFmRNA表达的增加 展开更多
关键词 微重力 单核细胞 细胞增殖 组织因子 MRNA
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晚期糖基化终产物刺激单核细胞产生活性氧的信号传导机制 预览
6
作者 刘阳 刘尚喜 《实用临床医学(江西)》 CAS 2011年第9期 1-3,共3页
目的 :探讨晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGE)诱导单核细胞产生活性氧的机制。方法采用密度梯度离心法分离健康成人外周血单核细胞,经AGE修饰的人血清白蛋白(AGE-HSA)刺激后,用化学发光法测定活性氧(reactiv... 目的 :探讨晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGE)诱导单核细胞产生活性氧的机制。方法采用密度梯度离心法分离健康成人外周血单核细胞,经AGE修饰的人血清白蛋白(AGE-HSA)刺激后,用化学发光法测定活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成;分别应用超氧化物歧化酶(SOD)、NADPH氧化酶特异性抑制剂apocynin、抗AGE受体(RAGE)抗体预处理单核细胞,观察AGE-HSA刺激单核细胞生成ROS的变化。结果 AGE-HSA可以诱导单核细胞产生ROS。SOD可以有效的清除AGE刺激单核细胞后分泌的大量的ROS;抗RAGE抗体、apocynin通过阻断AGE与RAGE的结合及抑制NADPH氧化酶的活性可以有效地抑制ROS产生。结论 AGE可通过RAGE激活NADPH氧化酶产生ROS。 展开更多
关键词 晚期糖基化终产物 单核细胞 活性氧 NADPH氧化酶
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两种细胞系中内源性C-反应蛋白的表达和定位分析 预览
7
作者 陈腾祥 李红梅 +4 位作者 胡水旺 杨婷 刘亚伟 刘靖华 姜勇 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期 675-678,共4页
目的观察在不同刺激条件下,不同组织来源细胞系中内源性C-反应蛋白(ERP)的表达及定位情况。方法培养人单核细胞系THP-1和人肝细胞系LO2。用佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞;使用内毒素(LPS)对两种细胞进行刺激。同时收... 目的观察在不同刺激条件下,不同组织来源细胞系中内源性C-反应蛋白(ERP)的表达及定位情况。方法培养人单核细胞系THP-1和人肝细胞系LO2。用佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞;使用内毒素(LPS)对两种细胞进行刺激。同时收集LPS刺激后的THP-1细胞的培养液上清加入到LO2细胞的培养液中进行孵育,运用Westernblot和免疫细胞化学技术检测上述刺激条件下CRP在两种细胞中的表达及其定位情况。结果Westernblot检测表明,在未受到刺激时,两种细胞的裂解物中均检测到一定量的CRP,在细胞培养液上清中没有检测到;受到LPS刺激后,THP-1细胞内的CRP表达增加,且在培养液上清中也检测到少量的CRP.但对于LO2细胞.刺激前后CRP的表达和分泌没有明显变化;当用LPS刺激后的THP-1细胞的培养液上清处理LO2细胞后.在LO2的细胞裂解物和培养液上清中均检测到CRP。免疫细胞化学检测结果显示。整个THP-1细胞中均可检测到标记的CRP的荧光信号.其中以核内的最明显,LPS刺激可以增加该蛋白的表达,使其核定位更加明显;在LO2细胞中.CRP定位于核外.LPS刺激对其表达和定位没有明显影响,而给予LPS刺激的THP-1细胞培养液上清处理后.LO2细胞中标记CRP的荧光信号增强,尤其以细胞膜上的增强明显。结论LPS不能直接上调肝细胞LO2内的CRP表达,却可以诱导THP-1表达分泌某些细胞因子来增加CRP的合成分泌;CRP在肝细胞系LO2和单核.巨噬细胞系THP-1中的定位有明显不同.在LO2中主要表现为分泌型蛋白的定位特征.而在THP-1细胞中却有明显的核定位表现。 展开更多
关键词 C-反应蛋白 蛋白表达 蛋白定位 单核细胞 肝细胞 佛波酯 内毒素
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不同PPAR配体对LPS诱导的人单核细胞组织因子表达的影响
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作者 董春霞 胡豫 +4 位作者 王华芳 孙春艳 王雅丹 何文娟 张小平 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期144-146,共3页
目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferater-activated receptors,PPAR)α的配体——非诺贝特、WY14643,PPARγ配体——匹格列酮对脂多糖(LPS)诱导的人单核细胞株-THP-1细胞表达组织因子(TF)的影响。方法... 目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferater-activated receptors,PPAR)α的配体——非诺贝特、WY14643,PPARγ配体——匹格列酮对脂多糖(LPS)诱导的人单核细胞株-THP-1细胞表达组织因子(TF)的影响。方法:采用RT-PCR法检测单核细胞THP-1的TFmRNA表达水平,用免疫细胞化学法检测细胞TF蛋白表达量。结果:PPAR配体处理组中THP-1细胞TFmRNA水平以及蛋白表达量均较单纯LPS刺激组明显降低。结论:3种PPAR配体均可抑制单核细胞TFmRNA以及蛋白表达,可能经此机制减轻动脉粥样硬化病变的发生。 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖物激活受体的配体 组织因子 动脉粥样硬化 单核细胞
绞股蓝总皂甙对氧化修饰低密度脂蛋白损伤小牛主动脉内皮细胞的防治作用 预览 被引量:6
9
作者 许士凯 何红 王福俤 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2002年第5期 389-392,共4页
目的:探讨绞股蓝总皂甙(GYP)对氧化修饰低密度脂蛋白(oxidatively modified low density lipoprotein,oxLDL) 损伤小牛主动脉内皮细胞的防治作用及可能机制.方法:在体外培养的小牛主动脉内皮细胞(bovine aortic endothelial cell,BAEC)... 目的:探讨绞股蓝总皂甙(GYP)对氧化修饰低密度脂蛋白(oxidatively modified low density lipoprotein,oxLDL) 损伤小牛主动脉内皮细胞的防治作用及可能机制.方法:在体外培养的小牛主动脉内皮细胞(bovine aortic endothelial cell,BAEC)中加入oxLDL(终浓度为0.1 g pr*L-1)及GYP低、中、高剂量组( 5.0, 10.0, 20.0 mg*L-1),培养24 h后,采用细胞毒试验、丙二醛(MDA)测定及细胞计数等方法,分别对其贴壁细胞及培养液进行检测.结果:①细胞毒试验发现,oxLDL对BAEC的生长增殖有明显的抑制作用( 20.63%),GYP组( 10.0, 20.0 mg*L-1)为 9.14%和 6.56%(P< 0.01);②加oxLDL组和GYP组BAEC粘附的HL60细胞数明显多于对照组(P< 0.01);③MDA检测发现oxLDL促进BAEC脂质过氧化物生成,并高于GYP组和对照组(P<0.01).结论:绞股蓝总皂甙具有对氧化修饰低密度脂蛋白损伤小牛主动脉内皮细胞的防治作用. 展开更多
关键词 绞股蓝总皂甙 内皮细胞 氧化低密度脂蛋白 细胞增殖 脂质过氧化 主动脉 丙二醛 动脉粥样硬化 细胞毒试验 AS
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氧化修饰LDL对体外培养的主动脉壁内皮细胞的影响 预览 被引量:4
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作者 和红 傅中滇 +1 位作者 蔡梅雪 王福俤 《上海铁道大学学报》 CAS 1998年第9期 1-5,共5页
目的 探讨氧化修饰低密度脂蛋白导致动脉粥样化形成的途径及可能机制。方法 在体外培养的小牛主动脉内皮细胞中加入oxLDL,终浓度为0.1mg Pr/ml,培养24h后,采用细胞毒试验,流式细胞仪,丙二醛(MDA)测定及... 目的 探讨氧化修饰低密度脂蛋白导致动脉粥样化形成的途径及可能机制。方法 在体外培养的小牛主动脉内皮细胞中加入oxLDL,终浓度为0.1mg Pr/ml,培养24h后,采用细胞毒试验,流式细胞仪,丙二醛(MDA)测定及细胞计数等方法分别对其贴壁细胞及培养液进行了检测。结果 加oxLDL组与对照组(未加oxLDL组)相比,发现:(1)在相差显微镜下,oxLDL组细胞形态明显拉长,发生脱落,并存在大片脱 展开更多
关键词 内皮细胞 动脉粥样硬化 OXLDL 氧化修饰
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波尔定对破骨细胞分化及骨吸收功能的影响 预览
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作者 徐慧慧 赵宏艳 +3 位作者 王贵 黄晶 郭明慧 肖诚 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期265-270,共6页
目的研究波尔定对NF-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的小鼠单核细胞(RAW264.7)向破骨细胞(OC)分化及骨吸收功能的影响。方法采用RANKL(50 ng/ml)诱导RAW264.7细胞向OC分化,不同浓度波尔定(1、10、20、40、80μmol/L)联合分... 目的研究波尔定对NF-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的小鼠单核细胞(RAW264.7)向破骨细胞(OC)分化及骨吸收功能的影响。方法采用RANKL(50 ng/ml)诱导RAW264.7细胞向OC分化,不同浓度波尔定(1、10、20、40、80μmol/L)联合分化培养。培养第4d采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,计算OC样细胞数量;比色法测定TRAP活性;Real-time PCR法检测各组OC标志性基因核因子κB受体活化因子(RANK)、活化T细胞核因子1(NFATc1)和c-fos基因的表达;CCK-8法检测波尔定对OC的毒性。培养至第9d,采用甲苯胺蓝染色并用Leica Qwin图像分析系统计算骨吸收陷窝面积。结果与对照组比较,TRAP阳性OC数量、TRAP活性、OC标志性基因RANK、NFATc1和c-fos的表达量及骨陷窝面积,随着波尔定浓度增加而减少,与对照组比较,20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L波尔定可明显减少OC数量和TRAP活性(P〈0.05,P〈0.01),下调OC标志性基因RANK、NFATc1和c-fos的表达量及骨陷窝面积(P〈0.05),但以上浓度波尔定对OC均未产生毒性。结论波尔定对RANKL诱导的RAW264.7细胞向OC的分化及骨吸收功能具有抑制作用。 展开更多
关键词 波尔定 破骨细胞 骨吸收 小鼠单核细胞 核因子ΚB受体活化因子
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柴油机排放颗粒对急性冠状动脉综合征患者外周血单个核细胞白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α表达的影响 预览 被引量:2
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作者 李方方 王丽华 +4 位作者 刘影影 王守英 刘玲玲 刘志强 吴卫东 《新乡医学院学报》 CAS 2016年第4期288-290,296共4页
目的探讨柴油机排放颗粒(DEP)对急性冠状动脉综合征(ACS)患者与非冠状动脉粥样硬化性心脏病(NCHD)患者外周血单个核细胞(PBMC)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法采用密度梯度离心法分离AC... 目的探讨柴油机排放颗粒(DEP)对急性冠状动脉综合征(ACS)患者与非冠状动脉粥样硬化性心脏病(NCHD)患者外周血单个核细胞(PBMC)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法采用密度梯度离心法分离ACS和NCHD患者PBMC,用不同浓度的DEP(0、10、50、100 mg·L-1)刺激PBMC 24 h。收集PBMC培养液上清,用酶联免疫吸附试验法检测PBMC培养液上清中IL-1β和TNF-α水平。结果随着DEP浓度的增加,PBMC释放IL-1β和TNF-α的量也随之增高,其中以50 mg·L-1组水平最高(P〈0.05);在同一DEP浓度下,ACS患者PBMC中IL-1β和TNF-α的相对增加量较NCHD患者高,提示ACS对DEP毒性作用易感。结论 DEP刺激可增加受试患者尤其是ACS患者的PBMC产生过量炎性因子。 展开更多
关键词 空气污染 柴油机排放颗粒 外周血单个核细胞 白细胞介素-1Β 肿瘤坏死因子-α 急性冠状动脉综合征
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三峡区域特色药材宜昌润楠正丁醇提取物体外抗炎活性研究 预览
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作者 张秀 付雪娇 +2 位作者 王桂萍 程凡 陈剑锋 《三峡大学学报:自然科学版》 CAS 2013年第3期98-102,共5页
目的:探讨宜昌润楠正丁醇提取物(MCB)的体外抗炎活性.方法:利用细菌脂多糖(LPS)刺激经佛波酯(PMA)诱导的人单核细胞THP-1建立体外炎症模型,MTT法检测样品的细胞毒性,ELISA方法检测药物干预前后细胞上清液中IL-1β、IL-6、TN... 目的:探讨宜昌润楠正丁醇提取物(MCB)的体外抗炎活性.方法:利用细菌脂多糖(LPS)刺激经佛波酯(PMA)诱导的人单核细胞THP-1建立体外炎症模型,MTT法检测样品的细胞毒性,ELISA方法检测药物干预前后细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF—α和NO的分泌量,综合评价MCB对炎性细胞因子和介质的抑制作用.结果:MCB显著性地抑制了IL-6和TNF—a以及NO的产生,并且其抑制作用具有时间和剂量依耐性,但对IL-1β没有明显的抑制效果.结论:本研究初步验证了宜昌润楠的体外抗炎作用,为其民间应用提供了理论依据,也为进-步分离生物活性物质提供了方向. 展开更多
关键词 宜昌润楠 体外抗炎活性 人单核细胞THP-1
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人外周血单个核细胞热原检测法的研究 被引量:5
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作者 贺庆 高华 +4 位作者 谭德讲 张媛 陈晨 刘倩 王军志 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1711-1717,共7页
目的:针对现有热原检测法存在的问题,研究建立人外周血单个核细胞热原(PBMC)检测法。方法:新方法依据人体发热机理设计,用人外周血单个核细胞模拟人体,将其分别与热原标准品(细菌内毒素)、受试品溶液进行孵育,通过酶联免疫吸附试... 目的:针对现有热原检测法存在的问题,研究建立人外周血单个核细胞热原(PBMC)检测法。方法:新方法依据人体发热机理设计,用人外周血单个核细胞模拟人体,将其分别与热原标准品(细菌内毒素)、受试品溶液进行孵育,通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测并比较其孵育体系中内源性热原白细胞介素(IL-6)的含量从而反映受试品的致热活性及热原污染情况。结果:①本方法孵育时间可选择17~24 h;②PBMC—IL-6法可检测多种热原[如革兰氏阴性菌来源的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、革兰氏阳性菌来源的脂磷壁酸(lipoteichoic acid,LTA)、真菌来源的酵母多糖(zymosan)],其对上述热原的反应总体较家兔法灵敏;③PBMC—IL-6法对细菌内毒素最低检测限为0.0125 EU.mL-1,IL-6在LPS(0.0125~0.4 EU.mL-1)范围内与LPS浓度间有较好的量效关系;④本试验中,PBMC—IL-6法可应用于甲型H1N1流感疫苗、双黄莲注射液、氯化钠注射液、葡萄糖注射液、甘露醇注射液、氟康唑注射液、棕榈酸帕利哌酮注射液的热原检测中;⑤本方法在4个实验室内重复性分别为100%,86.7%,91.7%,91%,在实验室间重复性分别为95.7%,90.5%,84%,86.7%,78.5%,80%;⑥PBMC—IL-6法灵敏度(即真阳性率)为90.1%(100/111),特异度(即真阴性率)为92.3%(72/78)。结论:PBMC—IL-6法具有对热原的检测谱宽、灵敏度高、应用范围广、可靠性强等特点,作为现有热原检测方法的补充该方法应得到进一步应用。 展开更多
关键词 热原检测法 细菌内毒素 细胞因子 白细胞介素6(IL-6) 人外周血单个核细胞(PBMC) 酶联免疫吸附试验
差速贴壁法培养大鼠骨髓内皮祖细胞的实验研究 预览 被引量:5
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作者 李辰运 陈剑秋 +1 位作者 孙晋津 张晓宇 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第4期 353-356,共4页
目的:探索一种经济、可靠、稳定、高纯度的内皮祖细胞培养方法。方法:采用密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓血管内皮祖细胞,于包被人纤连蛋白的25mL培养瓶中贴壁培养,收集48h后的未贴壁细胞培养至第7天,通过细胞摄取DiL-acLDL、结合FIT... 目的:探索一种经济、可靠、稳定、高纯度的内皮祖细胞培养方法。方法:采用密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓血管内皮祖细胞,于包被人纤连蛋白的25mL培养瓶中贴壁培养,收集48h后的未贴壁细胞培养至第7天,通过细胞摄取DiL-acLDL、结合FITC-UEA-1的荧光双染阳性率从功能角度鉴定细胞,并通过流式细胞术动态测定细胞表面抗原CD133、flk-1、VE-cadherin(CD144)及CD31进一步鉴定。结果:48h未贴壁细胞培养,细胞呈短梭形、多角形,胞体小;可见到大量典型的内皮祖细胞克隆;细胞摄取DiL-acLDL,结合FITC-UEA-1荧光双染阳性率为(87.0±6.0)%。细胞表面抗原CD133、flk-1、CD144和CD31阳性率分别为61.01%、8.55%、6.18%和8.20%。结论:差速贴壁法是一种经济、可靠、稳定、高纯度的内皮祖细胞培养方法。 展开更多
关键词 骨髓细胞 细胞分离 细胞 培养的 单核细胞 内皮细胞 大鼠 Wistar
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IL-6在人单核细胞和脂肪细胞共培养体系中水平的相关变化
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作者 沈海军 欧红芹 +1 位作者 沈捷 马向华 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期649-652,共4页
目的:研究人单核/巨噬细胞系THP-1与人原代脂肪细胞共培养体系中白细胞介素(IL-6)分泌水平的变化,以探讨炎症和肥胖的相关性。方法:建立THP-1与人原代脂肪细胞共培养体系,并用JNK抑制剂干预共培养体系24h后,用酶联免疫吸附法(ELIS... 目的:研究人单核/巨噬细胞系THP-1与人原代脂肪细胞共培养体系中白细胞介素(IL-6)分泌水平的变化,以探讨炎症和肥胖的相关性。方法:建立THP-1与人原代脂肪细胞共培养体系,并用JNK抑制剂干预共培养体系24h后,用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定单核细胞组、脂肪细胞组、共培养组及共培养加JNK抑制剂组上清中IL-6的水平。结果:共培养组较单核细胞组、脂肪细胞组IL-6水平升高(P〈0.05),共培养加入JNK抑制剂后,IL-6水平有所下降(P=0.114)。结论:人单核/巨噬细胞系THP-1与人原代脂肪细胞共培养促进炎症因子IL-6的释放,选择性阻断炎症介导的信号传导途径,IL-6的释放减少,对症使用抗炎介质及JNK抑制剂有望成为肥胖治疗的新靶点。 展开更多
关键词 IL-6 肥胖 炎症 单核/巨噬细胞系THP-1 人原代脂肪细胞
重组hIFN-α-2b-卡介苗激活杀伤细胞抗膀胱肿瘤作用的体外研究 预览 被引量:2
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作者 范晓东 韩瑞发 《天津医药》 CAS 北大核心 2007年第1期 1-3,共3页
目的:研究重组hIFN-α-2b-卡介苗(hIFN-α-2b-BCG)对人外周血单个核细胞(perioheral blood monocytes,PBMC)活化增殖,以及BCG激活杀伤细胞(bacilli Calmette-Guérin activated killer cell,BAK细胞)对膀胱肿瘤细胞的杀... 目的:研究重组hIFN-α-2b-卡介苗(hIFN-α-2b-BCG)对人外周血单个核细胞(perioheral blood monocytes,PBMC)活化增殖,以及BCG激活杀伤细胞(bacilli Calmette-Guérin activated killer cell,BAK细胞)对膀胱肿瘤细胞的杀伤效应。方法:分别利用野生型BCG、野生型BCG+干扰素作为对照诱导活化PBMC。比较重组BCG对PBMC的活化增殖效应,采用噻唑兰比色分析法(Mar法),分别在不同时间点检测上述各成分对PBMC增殖活化效果;采用乳酸脱氢酶释放试验(LDH法)研究不同浓度重组BCG活化PBMC后对膀胱肿瘤细胞的不同杀伤效果。结果:MTT测定表明,重组BCG诱导PBMC活化增殖的能力明显强于同浓度的对照组刺激效果(P〈0.05),且重组BCG在72h仍保持较强的活化能力;乳酸脱氢酶释放试验显示,不同浓度重组BCG诱导的BAK细胞抗癌效应均高于对照组诱导的抗癌效果(P〈0.05)。结论:重组BCG对人PBMC具有较强的活化增殖作用,增强PBMC对肿瘤细胞的杀伤效应。 展开更多
关键词 卡介苗 单核细胞 杀伤细胞 重组 遗传 膀胱肿瘤
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人外周血单核细胞体外诱导树突状细胞的形态学观察与功能研究 预览 被引量:3
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作者 史毓杰 江振友 董军 《实用医学杂志》 CAS 2005年第4期 361-363,共3页
目的:探讨从人外周血单核细胞体外培养扩增的树突状细胞 (dendritic cell, DC)形态学特征及其活性.方法:人外周血常规分离单个核细胞,粘附 6 h后去除悬浮细胞,以细胞因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 (GM- CSF)、白细胞介素-4(IL- 4)... 目的:探讨从人外周血单核细胞体外培养扩增的树突状细胞 (dendritic cell, DC)形态学特征及其活性.方法:人外周血常规分离单个核细胞,粘附 6 h后去除悬浮细胞,以细胞因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 (GM- CSF)、白细胞介素-4(IL- 4)进行诱导培养 7 d,并进行形态学特征,细胞表型和淋巴细胞刺激能力鉴定.结果:培养 1周即可得到大量 DC,形态学观察可见细胞形态不规则,细胞表面大量突起,为典型的 DC特征,免疫组化和间接免疫荧光显示 CD1a阳性表达率达 80%~95%,并能刺激同种淋巴细胞增殖反应.结论:人外周血单核细胞可经 GM- CSF、IL- 4诱导培养成 DC,具有典型的树突状细胞的形态学特征及抗原呈递能力. 展开更多
关键词 人外周血单核细胞 树突状细胞 形态学观察 DC GM-CSF IL-4 体外诱导 能力 结论 培养
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脂多糖通过TLRs信号途径诱导树突状细胞成熟机理初探 预览
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作者 董薇 张兵 +2 位作者 朱月明 蔡美英 魏大鹏 《四川大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期 513-515,共3页
目的探讨脂多糖(LPS)通过TLRs信号途径进一步促进人外周血单核细胞来源树突状细胞(DC)成熟的机理.方法从外周血分离单核细胞,加入rhGM-CSF及rhIL-4,在培养的第6 d,实验组加入LPS刺激24 h,对照组不加.分别提取细胞总RNA,行半定量RT-PCR,... 目的探讨脂多糖(LPS)通过TLRs信号途径进一步促进人外周血单核细胞来源树突状细胞(DC)成熟的机理.方法从外周血分离单核细胞,加入rhGM-CSF及rhIL-4,在培养的第6 d,实验组加入LPS刺激24 h,对照组不加.分别提取细胞总RNA,行半定量RT-PCR,产物进行琼脂糖凝胶电泳分析.激光扫描共聚焦显微镜检测DC内NF-κB表达情况.结果单核细胞经GM-CSF及IL-4诱导7 d后的DC表达较高水平TLR2、3、4.LPS刺激24 h后,TLR2、3、4表达下降,TLR4几乎测不到.激光扫描共聚焦显微镜检测到,未刺激组DC胞浆染色阳性,胞核为阴性.LPS刺激组的细胞核染色为强阳性, 胞浆染色为阳性.结论 DC在受LPS刺激前后TLRs的表达有显著变化,NF-κB也从胞浆移位至核内.这标志着经LPS刺激后DC在功能上进一步成熟.为下一步研究DC的功能奠定了基础. 展开更多
关键词 单核细胞 树突状细胞 Toll样受体 半定量RT-PCR 核转录因子
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树突状细胞提呈凋亡癌细胞抗原的实验研究 预览
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作者 吴刚 裴雪涛 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2000年第11期 808-811,共4页
目的:建立从人外周血诱导扩增树突状细胞(DC)及吞噬凋亡小体负载抗原。方法:从正常人外周血分离获得单核细胞,加入50mg/ml rhGM-CSF,1000ng/ml rhIL-4,隔天一次,共4次,培养第三天,加入γ... 目的:建立从人外周血诱导扩增树突状细胞(DC)及吞噬凋亡小体负载抗原。方法:从正常人外周血分离获得单核细胞,加入50mg/ml rhGM-CSF,1000ng/ml rhIL-4,隔天一次,共4次,培养第三天,加入γ射线照射过的胆管癌细胞,再继续体外培养一周后,用树突细胞富集柱收集DC。结果:见DC高表达共刺激分子B7和CD1a,表面具有典型不规划突起,DC还可捕捉凋亡小体、吞噬凋亡小体。负载抗原 展开更多
关键词 树突状细胞 RHGM-CSF 胆管癌 提呈凋亡
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