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乌索酸体外通过激活Nrf2信号通路抑制人肝星状细胞的增殖和细胞外基质相关基因的表达 认领
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作者 白庆云 《世界科学技术:中医药现代化》 CSCD 北大核心 2020年第1期140-146,共7页
目的乌索酸(Ursolic acid,UA)具有抗肝纤维化作用,但是其机制尚不完全清楚。由于肝纤维化与氧化应激有关,因此本文通过对乌索酸抗氧化作用的研究以阐释其抗肝纤维化机制。方法实验用实时定量聚合酶链反应(real time polymerase chain re... 目的乌索酸(Ursolic acid,UA)具有抗肝纤维化作用,但是其机制尚不完全清楚。由于肝纤维化与氧化应激有关,因此本文通过对乌索酸抗氧化作用的研究以阐释其抗肝纤维化机制。方法实验用实时定量聚合酶链反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)法和Western blot法检测氧化应激状态下LX2中α平滑肌肌动蛋白(alpha muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagen type I,COL1A1)、Ⅲ型胶原(collagen type Ⅲ,COL3A1)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinase 1,TIMP1)mRNA和蛋白表达的变化以及UA对这些变化的影响;通过测定还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量以观察UA的抗氧化作用,并检测了核因子E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)及其下游基因血红素加氧酶(heme oxygenase 1,HO1)蛋白表达的变化,探察UA抗肝纤维化作用的可能机制。结果实验结果显示H2O2可引起LX2的活化和氧化应激,使细胞中的ECM mRNA表达增加。UA可抑制LX2的活化,减少细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的表达,显著升高GSH含量,降低MDA含量,并增加Nrf2的转核和HO1的表达。结论实验结果提示UA通过激活Nrf2信号通路发挥抗氧化作用从而抑制LX2的活化和ECM的产生。 展开更多
关键词 乌索酸 肝星状细胞LX2 肝纤维化 H2O2 抗氧化 NRF2
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丁苯酞对大鼠脑缺血再灌注损伤中氧化应激炎性通路的影响 认领
2
作者 黄优 陈海云 +5 位作者 何超明 庞明武 颜博 王景 李华坚 高唯一 《西安交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期201-205,共5页
目的探讨丁苯酞对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其相关机制。方法实验分为假手术组、模型组和低、中、高剂量丁苯酞组及全反式维甲酸(ATRA)组。神经功能损伤评分(NDS)评价神经功能,2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTC)染色计算缺血脑组织体... 目的探讨丁苯酞对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其相关机制。方法实验分为假手术组、模型组和低、中、高剂量丁苯酞组及全反式维甲酸(ATRA)组。神经功能损伤评分(NDS)评价神经功能,2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTC)染色计算缺血脑组织体积,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD),硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛(MDA),ELISA检测白介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α,Real-time PCR检测血红素加氧酶(HO-1)基因表达,Western blot检测NF-E2相关因子2(Nrf2)和HO-1蛋白表达。结果低、中、高剂量丁苯酞组大鼠NDS评分、脑梗死体积、MDA、IL-6和TNF-α表达水平、HO-1基因2-△△Ct值、Nrf2和HO-1蛋白表达均明显低于模型组(P<0.05)。低、中、高剂量丁苯酞组大鼠SOD明显高于模型组(P<0.05)。低、中、高剂量丁苯酞组大鼠NDS评分、脑梗死体积、MDA、IL-6和TNF-α表达水平、HO-1基因2-△△Ct值、Nrf2和HO-1蛋白表达呈计量依赖性减低,而SOD呈计量依赖性升高(P<0.05)。结论丁苯酞可同过上调Nrf2/HO-1通路发挥抗氧化作用,对脑缺血再灌注大鼠起到神经保护作用。 展开更多
关键词 丁苯酞 脑缺血再灌注损伤 NF-E2相关因子2(Nrf2) 血红素加氧酶(HO-1) 氧化应激
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黄连素对2型糖尿病大鼠肝脏Nrf2介导的氧化应激反应的影响 认领
3
作者 张韫 赵宗江 +6 位作者 李平 李忻 张浩军 赵婷婷 杨鑫 赵海玲 严美花 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期150-154,共5页
目的:观察黄连素对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏氧化损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用高脂饲料加低剂量链脲佐菌素(STZ)建立T2DM大鼠模型,将其随机分为模型组和黄连素组,同性别、周龄的未造模动物作为正常组。连续灌胃给药20周,... 目的:观察黄连素对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏氧化损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用高脂饲料加低剂量链脲佐菌素(STZ)建立T2DM大鼠模型,将其随机分为模型组和黄连素组,同性别、周龄的未造模动物作为正常组。连续灌胃给药20周,实验结束时检测肝重指数、血糖、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平。Real-time PCR检测转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、SOD、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、血红素氧合酶1(HO1)mRNA表达。免疫组化和Western Blot检测Nrf2、Keap1、SOD、CAT、GSH-Px、HO1蛋白的表达情况。结果:黄连素可降低模型大鼠的肝重指数和MDA水平(P<0.05),升高SOD活性(P<0.05),显著上调肝脏中Nrf2、SOD、CAT、GSH-Px、HO1 mRNA及蛋白水平的表达(P<0.01,P<0.05)。结论:黄连素可对T2DM大鼠的肝脏具有保护作用,其作用机制可能是通过Nrf2介导的抗氧化来实现的。 展开更多
关键词 黄连素 2型糖尿病 肝损伤 NRF2 氧化应激
杜仲黄酮对糖尿病肾病小鼠Nrf2/HO-1氧化应激信号通路的影响 认领
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作者 许碧琪 戴燕青 +1 位作者 傅倩云 梁韬 《吉林中医药》 2020年第6期788-791,共4页
目的探讨杜仲黄酮对糖尿病肾病(DN)小鼠肾脏氧化应激及其Nrf2/HO-1信号通路的影响。方法 昆明种小鼠经静脉注射链脲佐菌素诱导糖尿病肾病模型,成功诱导的DN小鼠随机分组为模型对照组、缬沙坦对照组、杜仲黄酮低、高剂量组[80、160 mg/(k... 目的探讨杜仲黄酮对糖尿病肾病(DN)小鼠肾脏氧化应激及其Nrf2/HO-1信号通路的影响。方法 昆明种小鼠经静脉注射链脲佐菌素诱导糖尿病肾病模型,成功诱导的DN小鼠随机分组为模型对照组、缬沙坦对照组、杜仲黄酮低、高剂量组[80、160 mg/(kg·d)],并以健康昆明小鼠为正常对照。各组小鼠灌胃给药连续60 d,末次给药后收集小鼠血清和肾组织标本用于检测空腹血糖、肾功能指标、氧化应激相关指标和核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)信号通路蛋白表达。结果与模型组比较,杜仲黄酮给药组空腹血糖有不同程度下降,肾功能指标也明显改善。此外,杜仲黄酮组肾脏组织中超氧化物歧化酶活性升高,而丙二醛下降,Nrf2和HO-1蛋白表达升高(P<0.05)。结论杜仲黄酮对糖尿病肾病小鼠具有降低空腹血糖和改善肾功能作用,其作用机制可能与其能通过调节Nrf2/HO-1信号通路,进而改善肾脏组织氧化应激状态有关。 展开更多
关键词 杜仲黄酮 糖尿病肾病 氧化应激 NRF2
左归丸对成骨细胞氧化应激损伤的保护作用 认领 被引量:1
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作者 乔久涛 关德宏 +1 位作者 王冬艳 刘艾芸 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第7期1052-1056,共5页
背景:最新研究发现氧化应激在骨质疏松症中发挥着重要作用,衰老、雌激素缺乏、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1与活性氧的产生和骨质疏松发病有着重要的关系。目的:分析左归丸对成骨细胞氧化应激损伤的保护作用机制。方法:实验... 背景:最新研究发现氧化应激在骨质疏松症中发挥着重要作用,衰老、雌激素缺乏、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1与活性氧的产生和骨质疏松发病有着重要的关系。目的:分析左归丸对成骨细胞氧化应激损伤的保护作用机制。方法:实验方案经哈尔滨医科大学附属第二医院伦理委员会批准。分离培养SD乳鼠颅骨成骨细胞,实验分为空白组、模型组(300μmol/L H2O2)、左归丸组(300μmol/L H2O2+10%左归丸含药血清)。用H2O2建立成骨细胞氧化应激损伤模型;在成骨细胞氧化应激损伤同时,用左归丸含药血清培养成骨细胞,空白组不做任何处理。测定各组成骨细胞中丙二醛和超氧化物歧化酶含量;Western blot检测成骨细胞中核因子E2相关因子2和血红素加氧酶1蛋白表达。结果与结论:①与空白组比较,模型组中丙二醛含量明显升高,超氧化物歧化酶的含量明显降低;与模型组比较,左归丸组中丙二醛含量明显降低,超氧化物歧化酶的含量明显升高;②与空白组比较,模型组成骨细胞中血红素加氧酶1和核因子E2相关因子2表达明显增加;左归丸组成骨细胞中血红素加氧酶1和核因子E2相关因子2表达明显高于模型组;③结果说明,左归丸对成骨细胞氧化损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 左归丸 成骨细胞 NRF2 HO-1 血红素加氧酶1 超氧化物歧化酶 丙二醛 氧化应激
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丹参注射液通过Nrf2/ARE通路对大隐静脉曲张的影响 认领
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作者 杨世伟 刘平 +6 位作者 胡春芳 孙龙 张荣杰 孙伟 陈尚雄 杜松 郝迎学 《局解手术学杂志》 2020年第3期205-209,共5页
目的探究丹参注射液通过Nrf2/ARE通路对大隐静脉曲张的影响。方法选择2016年1月至2017年12月于我院诊治的大隐静脉曲张患者810例,将其分为对照组(未治疗)、手术组(手术治疗)和丹参组(手术治疗联合丹参注射液注射治疗);观察3组患者色素... 目的探究丹参注射液通过Nrf2/ARE通路对大隐静脉曲张的影响。方法选择2016年1月至2017年12月于我院诊治的大隐静脉曲张患者810例,将其分为对照组(未治疗)、手术组(手术治疗)和丹参组(手术治疗联合丹参注射液注射治疗);观察3组患者色素沉着、浅静脉血栓、皮下硬结等并发症的发生情况,随访观察CIVIQ评分,Western blot法检测各组Nrf2/ARE蛋白含量,qRT-PCR法检测Nrf2/ARE mRNA表达量。结果术后3个月对照组并发症发生率最高,手术组次之,丹参组最低,组间比较差异有极显著性统计学意义(P<0.01);与术后3个月比较,术后6个月对照组并发症发生率继续升高,手术组、丹参组明显降低,差异均有极显著性统计学意义(P<0.01)。术后3个月对照组CIVIQ评分最高,手术组次之,丹参组最低,组间比较差异有极显著性统计学意义(P<0.01);与术后3个月比较,术后6个月对照组CIVIQ评分明显升高,手术组、丹参组明显下降,差异有极显著性统计学意义(P<0.01)。超声检查结果显示,术后3个月,对照组闭塞和反流率最低,丹参组次之,手术组最高,3组比较差异有极显著性统计学意义(P<0.01);与术后3个月比较,术后6个月对照组闭塞和反流率明显下降,手术组、丹参组明显升高,差异有极显著性统计学意义(P<0.01)。CT静脉造影显示,对照组静脉管腔内存在长短不一、持久的类圆柱形或圆柱形密度较低的造影区域,丹参组的静脉管腔不规则狭小情况明显少于手术组,组间比较差异有极显著性统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示,丹参组Nrf2/ARE蛋白含量最高,手术组次之,对照组最低,3组比较差异有极显著性统计学意义(P<0.01)。丹参组血液中Nrf2/ARE mRNA表达量最高,手术组次之,对照组最低,3组比较差异有极显著性统计学意义(P<0.01)。结论丹参注射液能够促进Nrf2/ARE的表达,抑制大隐静脉曲张的发展,对大隐静脉曲张有治疗作用。 展开更多
关键词 丹参 Nrf2/ARE 大隐静脉曲张 静脉血栓
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抑制MicroRNA-27b调控Nrf2/ARE信号通路对高血压性脑出血大鼠模型脑损伤的机制研究 认领
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作者 刘小江 李军 管义祥 《河北医学》 CAS 2020年第1期76-80,共5页
目的: 探讨抑制MicroRNA-27b(miR-27b)对高血压性脑出血(HICH)大鼠模型脑损伤的影响,并通过给予miR-27b拮抗剂干预,检测Nrf2/ARE信号通路及其下游蛋白的表达变化,探索miR-27b在高血压性脑出血中抗氧化和神经炎症的治疗机制。 方法: 高... 目的: 探讨抑制MicroRNA-27b(miR-27b)对高血压性脑出血(HICH)大鼠模型脑损伤的影响,并通过给予miR-27b拮抗剂干预,检测Nrf2/ARE信号通路及其下游蛋白的表达变化,探索miR-27b在高血压性脑出血中抗氧化和神经炎症的治疗机制。 方法: 高血压大鼠自体血脑内注入法建立高血压性脑出血大鼠模型。qRT-PCR检测高血压性脑出血大鼠出血部位脑组织miR-27b和Nrf2 mRNA表达;Western Blot实验检测miR-27b拮抗剂给药前后Nrf2/ARE信号通路蛋白核因子相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶(HO-1)、醌氧化还原酶(Nqo1)表达变化;试剂盒检测高血压性脑出血大鼠给药前后超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)变化;TUNEL法和流式细胞分析法检测高血压性脑出血大鼠给药前后神经细胞凋亡情况。 结果: miR-27b水平受HICH影响呈现出先降低后升高的变化趋势,Nrf2 mRNA水平则呈现出先升高后降低的变化,miR-27b和Nrf2 mRNA水平前后变化具有统计学差异(P<0.05);miR-27b拮抗剂可诱导Nrf2/ARE通路Nrf2、HO-1、Nqo1蛋白表达上升;注射miR-27b拮抗剂可缓解HICH大鼠的氧化应激反应(OS)以及降低炎症因子TNF-α和IL-1β表达;miR-27b拮抗剂具有缓解HICH大鼠神经细胞凋亡、降低脑损伤的作用。 结论: 抑制miR-27b表达可明显减轻大鼠高血压性脑出血脑损伤程度,其机制可能与抗氧化信号通路Nrf2/ARE激活有关。 展开更多
关键词 高血压脑出血 MicroRNA-27b Nrf2/ARE 脑损伤
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五味子酯甲通过调节肝脏Nrf2/ARE抗氧化通路改善小鼠疲劳的作用 认领
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作者 张馨芸 林慧娇 +7 位作者 李欣 敬舒 孙微 蒋维海 王春梅 孙靖辉 李贺 陈建光 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第1期190-195,共6页
目的:观察五味子酯甲(schisantherin A,SCA)抗小鼠疲劳作用及其相关机制。方法:将雄性ICR小鼠分为4组:空白对照组(CON组,蒸馏水灌胃,静坐实验)、慢性疲劳模型组(MOD组,蒸馏水灌胃,力竭性运动实验)、SCA(C)组(2.5 mg/kg SCA灌胃,静坐实验... 目的:观察五味子酯甲(schisantherin A,SCA)抗小鼠疲劳作用及其相关机制。方法:将雄性ICR小鼠分为4组:空白对照组(CON组,蒸馏水灌胃,静坐实验)、慢性疲劳模型组(MOD组,蒸馏水灌胃,力竭性运动实验)、SCA(C)组(2.5 mg/kg SCA灌胃,静坐实验)及SCA(M)组(2.5 mg/kg SCA灌胃,力竭性运动实验),连续给药4周,每天一次。通过负重游泳实验及转棒实验观察SCA对小鼠运动耐力的影响;化学比色法检测小鼠血清中尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、乳酸(lactic acid,LA)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肝糖原(liver glycogen,LG)、肌糖原(muscle glycogen,MG)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)以及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)水平;酶联免疫吸附测定法检测8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHdG)水平;Western blot法检测小鼠肝组织中Keap1、Nrf2及HO-1蛋白表达水平。结果:与CON组及MOD组相比,SCA(C)及SCA(M)组的运动耐力均显著增强(P<0.05);BUN、LA、LDH、CK、MDA以及8-OHdG水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);LG、MG、SOD以及GSH-Px水平均显著增加(P<0.05或P<0.01);肝脏中Keap1表达极显著降低(P<0.01);Nrf2、HO-1表达均极显著增加(P<0.01)。结论:SCA能够增强疲劳小鼠的运动耐力,该作用可能与其提高小鼠能量储备、抗氧化能力及调节肝脏Nrf2/ARE抗氧化通路有关。 展开更多
关键词 五味子酯甲 提高运动耐力 KEAP1 NRF2 HO-1
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姜黄素对四氯化碳诱导鲤肝脏损伤的修复作用 认领
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作者 张媛媛 宋理平 +1 位作者 郭辉 王晓丽 《广东海洋大学学报》 CAS 2020年第5期1-11,共11页
【目的】研究姜黄素对四氯化碳诱导的鲤(Cyprinus carpio)肝脏损伤的修复作用,为筛选治疗鱼类肝脏综合征的绿色药物提供理论依据。【方法】在基础饲料中分别添加0、60、120、240 mg/kg姜黄素,制备4种等氮、等能饲料。试验设5组,阴性对... 【目的】研究姜黄素对四氯化碳诱导的鲤(Cyprinus carpio)肝脏损伤的修复作用,为筛选治疗鱼类肝脏综合征的绿色药物提供理论依据。【方法】在基础饲料中分别添加0、60、120、240 mg/kg姜黄素,制备4种等氮、等能饲料。试验设5组,阴性对照组注射橄榄油,饲喂基础饲料,阳性对照组和各姜黄素组注射体积分数15%的CCl4溶液,分别以添加0、60、120、240 mg/kg姜黄素饲料饲喂14 d,测定各组谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活力,丙二醛(MDA)含量,血浆总蛋白(TP)含量,总能氧化能力(T-AOC),肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,以及肝细胞核相关转录因子2(Nrf2)含量等指标,并对各组肝脏细胞进行组织学观察,研究姜黄素对鲤肝损伤的修复作用。【结果】在四氯化碳诱导初期,阳性对照组,60、120、240 mg/kg姜黄素组的GPT、GOT活力和MDA含量显著高于阴性对照组(P <0.05),随着投喂时间的增加,各姜黄素组GPT、GOT活力和MDA含量平均值均有不同程度的降低,其中,120 mg/kg组的GPT、GOT活力和MDA含量以及240mg/kg组的GPT活力差异显著(P<0.05);TP含量,T-AOC、SOD、GSH-Px活力,GSH含量的变化趋势与GPT和GOT等相反,且随着投喂时间的增加,120mg/kg组的T-AOC、SOD、GSH-Px活力和TP、GSH含量以及240 mg/kg组的SOD、GSH-Px活力和GSH含量呈先降后升趋势(P <0.05),其余各组差异均不显著(P> 0.05);肝脏组织切片显示,饲料中添加姜黄素可一定程度上修复鲤鱼幼鱼的肝脏损伤,且以120 mg/kg组效果最佳;饲料中添加姜黄素可提高鲤鱼肝脏Nrf2 mRNA表达量,促使Nrf2由肝细胞质转至细胞核中。【结论】姜黄素可通过介导Nrf2提高鲤鱼相关抗氧化酶的活力,对鱼体的肝脏损伤进行修复。当姜黄素的添加水平为120 mg/kg时,机体的抗氧化功能最强,对肝脏损伤的修复作用最强。 展开更多
关键词 肝脏损伤 修复 姜黄素 NRF2
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胶质瘤细胞miR-153上调对树突状细胞分化成熟及Nrf2表达的影响 认领
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作者 王首杰 冯达云 许春旺 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第16期2735-2740,共6页
目的:探讨胶质瘤细胞miR-153上调对树突状细胞分化成熟及Nrf2表达的影响。方法:体外培养小鼠胶质瘤细胞系GL261,随机分为对照组、miR-153 mimics阴性对照组、miR-153 mimics组,以miR-153 mimics阴性对照、miR-153 mimics分别处理GL261,... 目的:探讨胶质瘤细胞miR-153上调对树突状细胞分化成熟及Nrf2表达的影响。方法:体外培养小鼠胶质瘤细胞系GL261,随机分为对照组、miR-153 mimics阴性对照组、miR-153 mimics组,以miR-153 mimics阴性对照、miR-153 mimics分别处理GL261,以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组GL261细胞miR-153、VEGF-A及IL-10 mRNA水平;以蛋白免疫印迹法检测各组GL261细胞VEGF-A、IL-10、Nrf2蛋白表达;以流式细胞仪检测DC2.4细胞表面共刺激分子MHC-II、CD80、CD86、CD40表达水平;将小鼠T淋巴细胞系与上述各组DC2.4细胞共培养,以CCK-8检测T细胞增殖情况。结果:与对照组相比,miR-153 mimics组GL261细胞miR-153、VEGF-A及IL-10 mRNA水平,VEGF-A及IL-10蛋白表达明显降低(P<0.05)。DC2.4表面共刺激分子MHC-II、CD80、CD86及CD40表达水平,DC2.4细胞Nrf2蛋白表达,T细胞活力明显升高(P<0.05);miR-153 mimics阴性对照组细胞各指标无明显变化(P>0.05)。结论:上调miR-153可抑制胶质瘤细胞分泌免疫抑制性因子VEGF-A、IL-10,促进树突状细胞分化成熟并上调其Nrf2蛋白表达。 展开更多
关键词 胶质瘤 miR-153 树突状细胞 分化成熟 NRF2
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慢病毒载体介导的Nrf2表达下调对肝星状细胞生物学行为的影响 认领
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作者 蔡陈效 鉏莉 +2 位作者 王晓晗 韩丰 陈一鹏 《中国现代医生》 2020年第13期15-18,26,I0002,共6页
目的观察重组慢病毒载体介导Nrf2表达下调对肝星状细胞生物学行为的影响,同时探讨其可能的作用机制。方法利用重组DNA技术将特异性shRNA序列插入慢病毒表达载体pGLV3.GFP中,形成pGLV3.GFP.Nrf2.shRNA,将其转染至293T细胞中,随后进行病... 目的观察重组慢病毒载体介导Nrf2表达下调对肝星状细胞生物学行为的影响,同时探讨其可能的作用机制。方法利用重组DNA技术将特异性shRNA序列插入慢病毒表达载体pGLV3.GFP中,形成pGLV3.GFP.Nrf2.shRNA,将其转染至293T细胞中,随后进行病毒包装、滴度测定、转染率计算。采用实时荧光定量、Western blot测定转染肝星状细胞株(HSC-T6细胞)Nrt2 mRNA及蛋白的表达情况,利用Tunel染色法检测HSC-T6细胞的凋亡情况,同时对HSC-T6细胞中PI3K、Akt、p-Akt、p-Bad、Bcl-2、Bax蛋白水平进行测定。结果构建的重组病毒载体LV3-H1-GFP-shRNA可有效感染293T细胞。激光共聚焦显示空白组细胞凋亡率低于A组和B组,与A组比较,B组的细胞凋亡率降低(P<0.05)。实时荧光定量PCR法结果显示空白组Nrf2 mRNA水平高于A组和B组(P<0.05),与A组比较,B组mRNA水平升高(P<0.05)。Western blot法显示空白组Nrf2蛋白水平高于A组和B组(P<0.05),与A组比较,B组蛋白水平升高(P<0.05)。与空白组相比,A组和B组PI3K、p-Akt、p-bad、Bcl-2的蛋白表达量增加(P<0.05),Bax蛋白减少(P<0.05),其中A组PI3K、p-Akt、p-Bad、Bcl-2的蛋白水平较B组增加(P<0.05),Bax蛋白水平低于B组(P<0.05)。结论Nrf2基因的shRNA慢病毒载体pGLV3.GFP.Nrf2.shRNA在体外可抑制肝星状细胞活化,其作用机制可能与通过抑制PI3K-Akt通路促肝星状细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 慢病毒载体 HSC-T6细胞 NRF2 PI3K-Akt通路 凋亡
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高强度间歇运动通过调控Nrf2/ARE和NF-κB信号通路调节高脂饮食诱导肥胖大鼠的氧化应激和炎症反应 认领
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作者 王蒙 张海峰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期2324-2331,共8页
为了揭示高强度间歇运动对肥胖大鼠的氧化应激和炎症反应的调节作用及机制,本研究将60只大鼠随机分为对照组、肥胖组、中强度持续运动组(MICE)和高强度间歇运动组(HIIE)。对照组大鼠采用标准饲料喂养,其他组大鼠采用高脂饲料喂养以建立... 为了揭示高强度间歇运动对肥胖大鼠的氧化应激和炎症反应的调节作用及机制,本研究将60只大鼠随机分为对照组、肥胖组、中强度持续运动组(MICE)和高强度间歇运动组(HIIE)。对照组大鼠采用标准饲料喂养,其他组大鼠采用高脂饲料喂养以建立肥胖大鼠模型。MICE组大鼠进行中强度持续运动,HIIE组大鼠进行高强度间歇运动,共运动4周。采用苏木精-伊红(HE)染色检测大鼠骨骼肌形态。采用TUNEL法检测骨骼肌细胞凋亡。通过商用试剂盒检测活性氧(ROS)水平。通过RT-PCR或Western blotting检测大鼠骨骼肌组织中Nrf2、SOD、GSH-PX、CAT、p65、p-p65、IκB、p-IκB、TNF-α、IL-1β和IL-6的表达。研究显示,与肥胖组比较,MICE组和HIIE组大鼠骨骼肌组织中的ROS水平均显著降低,HIIE组大鼠骨骼肌组织中的ROS水平显著低于MICE组。MICE组和HIIE组大鼠的骨骼肌形态基本正常,仅少量肌纤维排列异常。与肥胖组比较,MICE组和HIIE组大鼠骨骼肌细胞凋亡率均显著降低,HIIE组大鼠骨骼肌细胞凋亡率显著低于MICE组。与肥胖组比较,MICE组和HIIE组大鼠骨骼肌组织中Nrf2、SOD、GSH-PX和CAT的蛋白水平均显著升高,HIIE组均显著高于MICE组。与肥胖组比较,MICE组和HIIE组大鼠骨骼肌组织中p-p65、p-IκB、TNF-α、IL-1β和IL-6的蛋白水平均显著降低,HIIE组均显著低于MICE组。总之,HIIE运动可通过抑制NF-κB信号通路来抑制肥胖引起的慢性炎症。HIIE运动可通过激活Nrf2/ARE信号通路来提高机体抗氧化能力并减弱氧化应激损伤。 展开更多
关键词 肥胖 高强度间歇运动 氧化应激 炎症 Nrf2/ARE NF-ΚB
天麻素对镉诱导的星形胶质细胞损伤的保护效应 认领
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作者 周翠红 薛姗姗 +3 位作者 刘江正 王化宁 顾婷婷 彭正午 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第6期1015-1021,共7页
目的:探讨氯化镉(CdCl2)和天麻素(GAS)对小鼠星形胶质细胞活力及神经营养因子GDNF和抗氧化基因Nrf2,HO-1,SOD-1表达的影响。方法:首先,给予体外培养的小鼠星形胶质细胞不同浓度的CdCl2(Con,2.5μM,5μM,10μM,20μM)处理24 h或48 h,随... 目的:探讨氯化镉(CdCl2)和天麻素(GAS)对小鼠星形胶质细胞活力及神经营养因子GDNF和抗氧化基因Nrf2,HO-1,SOD-1表达的影响。方法:首先,给予体外培养的小鼠星形胶质细胞不同浓度的CdCl2(Con,2.5μM,5μM,10μM,20μM)处理24 h或48 h,随后检测细胞活力筛选出造成星形胶质细胞损伤的CdCl2浓度和时间。然后使用上述筛选的CdCl2作用浓度(5μM)构建星形胶质细胞损伤的同时再给予不同浓度的天麻素(0,20μg/mL,30μg/mL,40μg/mL,50μg/mL)处理24 h或48 h,随后检测细胞活力并提取细胞RNA检测其caspase3,GDNF(胶质源性神经营养因子Glial cell-derived neurotrophic factor,GDNF)和Nrf2(Nuclear factor erythroid2-related factor2),HO-1(Heme oxygenase 1),SOD-1(superoxide dismutase 1)等抗氧化基因的mRNA表达的变化。结果:(1)2.5μM CdCl2处理24 h后星形胶质细胞活力已经有明显下降(P<0.05),5μM CdCl2处理24 h后,星形胶质细胞活力显著下降(P<0.01);(2)CdCl2浓度越大,细胞损伤严重;(3)一定浓度的天麻素处理可以缓解CdCl2造成的星形胶质损伤,恢复其细胞活力,下调caspase3 mRNA水平;(4)CdCl2下调了星形胶质细胞的GDNF,Nrf2,HO-1和SOD-1的mRNA水平,天麻素可以抑制CdCl2对上述基因的mRNA水平的调节作用,且浓度越高调节作用越强。结论:天麻素可能通过调节小鼠星形胶质细胞的GDNF,Nrf2,HO-1和SOD-1基因表达缓解CdCl2导致的细胞损伤。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 GDNF Nrf2 HO-1 SOD-1
Hrd1在博来霉素诱导大鼠肺纤维化中的表达 认领
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作者 姚宇 王文军 梁玉灵 《河北医药》 CAS 2020年第15期2264-2267,2272,共5页
目的探讨Hrd1在博来霉素诱导的大鼠肺纤维化中的表达及其与Ⅰ型胶原、Nrf2的关系。方法将60只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、溶剂组、LS-102组,每组15只。气管内注射博来霉素复制肺纤维化模型,LS-102组每日腹腔注射LS-102溶液... 目的探讨Hrd1在博来霉素诱导的大鼠肺纤维化中的表达及其与Ⅰ型胶原、Nrf2的关系。方法将60只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、溶剂组、LS-102组,每组15只。气管内注射博来霉素复制肺纤维化模型,LS-102组每日腹腔注射LS-102溶液,溶剂组、对照组及模型组分别腹腔注射等体积DMSO及0.9%氯化钠溶液。分别于第7天、第14天、第28天每组各处死5只大鼠。HE染色、Masson染色观察肺组织炎症及纤维化,免疫组化检测Hrd1、Ⅰ型胶原、Nrf2的表达。结果造模后第7天、第14天、第28天模型组、溶剂组、LS-102组大鼠肺组织,肺泡炎、肺纤维化程度及Hrd1、Ⅰ型胶原、Nrf2的表达均较对照组明显增强(P均<0.05)。LS-102组于造模第7天、第14天肺泡炎性程度以及肺纤维化程度均较模型组和溶剂组明显减弱(P均<0.05)。LS-102组Hrd1的表达在3个时间点均较模型组、溶剂组明显减少,LS-102组第14天、第28天大鼠肺组织Ⅰ型胶原的表达较模型组、溶剂组明显减少(P<0.05)。LS-102组于第7天肺组织Nrf2表达量较模型组、溶剂组明显增加(P<0.05)。结论Hrd1可能通过促进Ⅰ型胶原表达及抑制Nrf2的生成参与肺纤维化的发生、发展过程。 展开更多
关键词 肺纤维化 Hrd1 Ⅰ型胶原 NRF2
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柚皮素对糖尿病视网膜病变大鼠氧化损伤、细胞凋亡及Nrf2-ARE的影响 认领
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作者 徐辉勇 陈金鹏 章剑 《临床和实验医学杂志》 2020年第2期128-132,共5页
目的探讨柚皮素对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠氧化损伤、细胞凋亡及核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)的影响。方法随机数字表法将健康雄性SD大鼠分为空白对照组、模型组、阳性对照组、低剂量柚皮素组、中剂量柚皮素组、高剂... 目的探讨柚皮素对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠氧化损伤、细胞凋亡及核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)的影响。方法随机数字表法将健康雄性SD大鼠分为空白对照组、模型组、阳性对照组、低剂量柚皮素组、中剂量柚皮素组、高剂量柚皮素组。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法建立DR大鼠模型。阳性对照组灌胃150 mg·kg^-1·d^-1羟苯磺酸钙,低、中、高剂量柚皮素组分别灌胃25 mg·kg^-1·d^-1、50 mg·kg^-1·d^-1、100 mg·kg^-1·d^-1柚皮素,空白对照组和模型组灌胃1%二甲基亚砜(DMSO),连续灌胃60 d。取各组大鼠视网膜组织,试剂盒检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)活力,TUNEL染色法检测视网膜组织的神经节细胞凋亡情况,Western blot法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、醌氧化还原酶-1(NQO1)和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达。结果与空白对照组比,模型组大鼠视网膜组织MDA含量、细胞凋亡指数显著升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活力、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比,中、高剂量柚皮素组和阳性对照组大鼠视网膜组织MDA含量、细胞凋亡指数显著降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活力、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达显著降低显著升高(P<0.05),但低剂量组各指标均无显著差异(P>0.05)。结论柚皮素可能通过激活Nrf2-ARE信号通路降低糖尿病视网膜病变大鼠氧化应激损伤,其作用呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 大鼠 糖尿病视网膜病变 柚皮素 氧化损伤 细胞凋亡 Nrf2-ARE
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基于活性氧调控的抗肿瘤药物研究进展 认领
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作者 牟伊 文帅 +3 位作者 高新星 张蕊 王燕 姜正羽 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1453-1465,共13页
活性氧(reactive oxygen species,ROS)是氧的部分代谢物,具有高度反应性,不同浓度ROS对肿瘤的发展具有不同作用。肿瘤细胞的ROS水平较高,抗氧化系统处于高度活化状态,这种独特的生物化学特性为肿瘤药物的开发提供了潜在途径。通过小分... 活性氧(reactive oxygen species,ROS)是氧的部分代谢物,具有高度反应性,不同浓度ROS对肿瘤的发展具有不同作用。肿瘤细胞的ROS水平较高,抗氧化系统处于高度活化状态,这种独特的生物化学特性为肿瘤药物的开发提供了潜在途径。通过小分子破坏氧化还原平衡的治疗方法能优先杀伤肿瘤细胞。本文概述了基于ROS调控开发抗肿瘤药物主要思路,并按作用机制对代表性药物和研究进展做了重点介绍,从而为围绕ROS调控开发抗肿瘤药物提供借鉴及思路。 展开更多
关键词 活性氧簇 肿瘤化疗 氧化还原平衡 谷胱甘肽 NRF2
Nrf2与心血管系统疾病的相关性研究 认领
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作者 王茂 王光英 +1 位作者 王迪 魏玲 《心血管病学进展》 CAS 2020年第2期175-178,共4页
核因子E2相关因子2(Nrf2)属于碱性亮氨酸转录家族成员,是抵抗细胞氧化应激的重要转录因子。Nrf2参与众多病理生理过程,Nrf2及下游靶基因的激活不仅能调控细胞氧化应激,还参与炎症反应和细胞自噬的调节。研究显示,Nrf2在心血管系统疾病... 核因子E2相关因子2(Nrf2)属于碱性亮氨酸转录家族成员,是抵抗细胞氧化应激的重要转录因子。Nrf2参与众多病理生理过程,Nrf2及下游靶基因的激活不仅能调控细胞氧化应激,还参与炎症反应和细胞自噬的调节。研究显示,Nrf2在心血管系统疾病的发生发展中发挥着重要作用。现就Nrf2与心血管系统疾病的相关性研究做一综述。 展开更多
关键词 NRF2 血管老化 心血管系统疾病
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安五脂素对D-半乳糖致衰老小鼠心肌损伤的保护作用及机制研究 认领
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作者 刘春娜 王瑶 +5 位作者 张羽翀 袁瑞 张馨芸 李欣 陈建光 李贺 《吉林医药学院学报》 2020年第1期11-14,共4页
目的研究安五脂素对D-半乳糖致小鼠心肌损伤的保护作用。方法将雄性ICR小鼠随机分为5组,即空白对照组(CON),衰老模型组(D-gal)和低、中、高三个剂量的安五脂素给药组(AN-L、AN-M、AN-H),连续给药7周。造模成功后,使用试剂盒测定各组小... 目的研究安五脂素对D-半乳糖致小鼠心肌损伤的保护作用。方法将雄性ICR小鼠随机分为5组,即空白对照组(CON),衰老模型组(D-gal)和低、中、高三个剂量的安五脂素给药组(AN-L、AN-M、AN-H),连续给药7周。造模成功后,使用试剂盒测定各组小鼠心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,通过免疫蛋白印迹法测定心肌组织Nrf2、血红素氧合酶1(HO-1)水平。结果与D-gal组相比,AN-M、AN-H显著升高小鼠心肌组织SOD活性(P<0.05或P<0.01),显著降低MDA含量(P<0.05或P<0.01)。与CON组相比,D-gal模型组Nrf2(P>0.05)、HO-1表达升高(P<0.05);与D-gal组相比,AN-H的Nrf2及HO-1表达显著升高(P<0.01,P<0.05)。结论安五脂素通过其抗氧化作用对D-半乳糖所致衰老小鼠心肌损伤具有显著的保护作用。 展开更多
关键词 安五脂素 D-半乳糖 衰老 氧化损伤 NRF2 血红素氧合酶1
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“嗅三针”疗法对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及Nrf2表达的影响 认领
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作者 李杰 王渊 +2 位作者 鲁刚 牛文民 王强 《现代中医药》 CAS 2020年第2期29-32,共4页
目的研究"嗅三针"疗法对VD模型大鼠的干预作用及其与海马Nrf2蛋白含量的关系。方法选取45只成年SD雄性大鼠,体重为200~220g。随机分为3组,即正常组、模型组(VD模型组)、嗅三针组,每组15只。制作模型,运用嗅三针进行干预治疗,... 目的研究"嗅三针"疗法对VD模型大鼠的干预作用及其与海马Nrf2蛋白含量的关系。方法选取45只成年SD雄性大鼠,体重为200~220g。随机分为3组,即正常组、模型组(VD模型组)、嗅三针组,每组15只。制作模型,运用嗅三针进行干预治疗,然后,运用水迷宫实验测试大鼠学习记忆能力,并采用western blot法、ELISA等法测定海马Nrf2蛋白含量。结果水迷宫试验结果显示关于平均游泳路程和平均逃避潜伏期数据统计,模型组大鼠逃脱潜伏期增加(定位航行实验)、目标平台象限占用平均时间减少,与空白组大鼠比较具有显著性差异(P﹤0.01);经"嗅三针"干预后,大鼠逃脱潜伏期减少、目标平台象限占用平均时间增加,与模型组比较具有显著性差异(P﹤0.05);与空白组大鼠比较,模型组大鼠Nrf2表达增加,具有显著性差异(P﹤0.01);"嗅三针"组与模型组比较,Nrf2表达增加,与模型组比较具有显著性差异(P﹤0.05)。结论 "嗅三针"疗法可明显改善VD大鼠的学习记忆能力,该疗效机理与大脑海马Nrf2的激活密切相关。 展开更多
关键词 嗅三针 血管性痴呆 NRF2
Nrf2及其介导的适应性抗氧化反应在砷致癌效应中的作用 认领
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作者 陈诗敏 徐晓杭 徐苑苑 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期69-72,共4页
砷是一种广泛存在于自然环境中的全身性毒物,长期砷暴露可导致多种癌症发生。砷致癌机制复杂,其中氧化应激是较为公认的重要机制。核因子E2相关因子2(Nrf2)是调控细胞抗氧化防御系统的关键转录因子,在抵御细胞氧化应激中发挥重要作用。... 砷是一种广泛存在于自然环境中的全身性毒物,长期砷暴露可导致多种癌症发生。砷致癌机制复杂,其中氧化应激是较为公认的重要机制。核因子E2相关因子2(Nrf2)是调控细胞抗氧化防御系统的关键转录因子,在抵御细胞氧化应激中发挥重要作用。然而,越来越多的证据显示环境性砷暴露可通过诱导Nrf2介导的适应性抗氧化反应,引起抗氧化酶及解毒酶表达,使细胞在不良环境中获得生存优势,进而促进癌症形成与发展。因此,阐明Nrf2及其介导的适应性抗氧化反应在砷致癌过程中的作用对预防和治疗砷暴露相关癌症具有重要意义。 展开更多
关键词 NRF2 适应性抗氧化反应 致癌效应
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