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电针“足三里”穴对脾气虚大鼠肌肉组织内NRF1及NRF2表达的影响
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作者 薛亚楠 董佳梓 +2 位作者 曲怡 许环宇 张立德 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第4期886-889,共4页
目的:观察电针双侧'足三里'穴对脾气虚模型大鼠肌肉组织内核呼吸因子1(NRF1)和2(NRF2)基因及蛋白表达的影响。方法:将32只SD雄性大鼠随机分为正常组、脾气虚组、足三里组、非经非穴组。除正常组外,其余3组均采用劳倦过度和不规... 目的:观察电针双侧'足三里'穴对脾气虚模型大鼠肌肉组织内核呼吸因子1(NRF1)和2(NRF2)基因及蛋白表达的影响。方法:将32只SD雄性大鼠随机分为正常组、脾气虚组、足三里组、非经非穴组。除正常组外,其余3组均采用劳倦过度和不规则饮食复合法建立脾气虚证大鼠模型。造模成功后,对足三里组、非经非穴组大鼠分别电针'足三里'穴、非经非穴点干预处理7 d。采用蛋白质免疫印迹法(WB)检测大鼠胃及骨骼肌组织内NRF1及NRF2蛋白含量变化,荧光定量PCR法检测大鼠胃及骨骼肌组织NRF1及NRF2 mRNA表达水平。结果:脾气虚组和非经非穴组大鼠胃及骨骼肌组织内NRF1及NRF2蛋白和基因表达水平均明显低于正常组(P<0.01);足三里组大鼠胃及骨骼肌组织内NRF1及NRF2蛋白和基因表达水平相比于脾气虚组有所升高(P<0.01),非经非穴组未见显著性差异(P<0.01)。结论:电针'足三里'穴可以调节脾气虚大鼠肌肉组织内NRF1及NRF2基因及蛋白的异常表达,参与线粒体能量代谢的调控作用进而改善脾气虚证。 展开更多
关键词 足三里 肌肉 NRF1 NRF2
糖络宁含药血清对高糖环境下RSC96细胞Keapl/Nrf2/Bcl-2途径的作用机制研究
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作者 朱笳悦 姚伟洁 +1 位作者 许利平 杨鑫伟 《北京中医药》 2019年第2期106-113,共8页
目的针对糖尿病周围神经病变氧化应激的核心发病机制,以Keapl/Nrf2/Bcl-2途径为切入点,观察糖络宁对高糖环境下雪旺细胞的氧化应激和细胞凋亡的影响,探讨糖络宁防治DPN的可能作用机制。方法采用150mmol/L葡萄糖培养雪旺细胞,随机分为空... 目的针对糖尿病周围神经病变氧化应激的核心发病机制,以Keapl/Nrf2/Bcl-2途径为切入点,观察糖络宁对高糖环境下雪旺细胞的氧化应激和细胞凋亡的影响,探讨糖络宁防治DPN的可能作用机制。方法采用150mmol/L葡萄糖培养雪旺细胞,随机分为空白对照组(Control).高糖组(HighGlucose),α-硫辛酸含药血清组(ALA)、糖络宁含药血清组(TLN)。干预36h后,应用流式细胞仪检测高糖环境下雪旺细胞超氧自由基和细胞凋亡,应用JC.1探针观察高糖环境下雪旺细胞线粒体膜电势(MMP),应用高内涵分析(HCA)法和WesternBlot分析高糖环境下雪旺细胞Keapl/Nrf2通路中Keapl、Nrf2、H0.l和γGCS蛋白表达的变化及细胞凋亡调节蛋白Bcl-2.Bax、CytoC和Caspase.3的蛋白表达的变化。结果高糖干预36h后,与空白对照组比较,高糖组细胞凋亡、ROS含量增加,MMP降低(P<0.01);与高糖组比较,糖络宁组能够降低细胞凋亡和ROS含量,增加MMP(P<0.05或P<0.01)。HCA和WesternBlot分析结果显示,与空白对照组比较,高糖组Keapl、Nrf2、H0-1和yGCS增加(PvO.Ol或Pv0.05);与高糖组比较,糖络宁组能进一步增加Keapl、Nrf2、H0-1和γGCS蛋白表达(PvO.Ol或Pv0.05)。与空白组比较,高糖组Bcl-2.Bax、CytoC和Caspase.3蛋白表达增加(PvO.Ol或PV0.05);与高糖组比较,糖络宁组能够增加Bcl-2蛋白表达,降低Bax、CytoC和Caspase.3蛋白表达(P<0.01或P<0.05)。结论糖络宁能够抑制高糖环境下雪旺细胞的氧化应激和细胞凋亡,与上调Keapl/Nrf2通路的蛋白表达对抗氧化应激,调控Bcl-2相关细胞凋亡通路的蛋白表达从而抑制细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 糖络宁 糖尿周围神经病变 雪旺细胞 氧化应激 细胞凋亡 NRF2 BCL-2
黄芩汤调控Nrf2通路对溃疡性结肠炎大鼠氧化应激作用的影响
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作者 马旭冉 王彦礼 +4 位作者 邹迪新 刘佳星 宋红新 杨伟鹏 李彧 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期653-659,共7页
研究黄芩汤对溃疡性结肠炎大鼠的氧化应激作用的影响,探讨其抗氧化作用机制。经中国中医科学院中药研究所伦理委员会审议同意后,运用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic,TNBS)联合乙醇造模法建立大鼠溃疡性结肠炎(ulcera... 研究黄芩汤对溃疡性结肠炎大鼠的氧化应激作用的影响,探讨其抗氧化作用机制。经中国中医科学院中药研究所伦理委员会审议同意后,运用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic,TNBS)联合乙醇造模法建立大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型,将SD大鼠按体重随机分为正常组、模型组、柳氮磺砒啶组(salazosulfapyridine,SASP,0.5 g·kg-1)、黄芩汤高、中、低剂量组(20、10、5 g·kg-1)。连续给药5天后,取血清以及结肠组织,生化法检测大鼠血清中过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-px)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性,ELISA法测定大鼠血清中过氧化脂(lipid peroxide,LPO)的浓度,免疫组织化学法观察核因子E2相关因子Nrf2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2)的阳性表达,利用Western blot技术检测Nrf2下游抗氧化酶血红素氧化酶1(heme oxygenase,HO-1)、醌氧化还原酶1(NAD[P]H:quinone oxidoreductase 1,NQO-1)的蛋白表达。与正常组相比,模型组血清SOD、CAT、GSH-px活性均有显著性下降,而模型组血清MPO活性有显著性增加(P<0.05或P<0.01),与模型组相比,黄芩汤高、中剂量组中CAT的活性增加有显著性差异(P<0.05或P<0.01),黄芩汤高、中、低剂量组中GSH-px活性均显著增加(P<0.05);与正常组相比,模型组血清中LPO的含量显著升高(P<0.01),而与模型组相比,黄芩汤高、中剂量组均能显著降低LPO的含量(P<0.05);免疫组化检测发现,阳性药柳氮磺胺吡啶组与黄芩汤高剂量组Nrf2表达有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,与模型组相比,黄芩汤各给药组与柳氮磺胺吡啶组均能够增加组织内HO-1和NQO1的表达,并且呈现一定的剂量依赖关系。黄芩汤具有显著的抗氧化应激作用,能明显改善UC大鼠的体征、精神状况及排便情况,其对于UC的治疗作用机制可能与激活N 展开更多
关键词 黄芩汤 溃疡性结肠炎 氧化应激 NRF2 作用机制
Nrf2/ARE信号通路与多发性硬化预后的相关性研究 预览
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作者 柴竞艳 吴向斌 +2 位作者 夏忠斌 鲍兵 陈志颖 《中国现代医生》 2019年第7期11-14,共4页
目的探讨Nrf2/ARE信号通路与多发性硬化预后的相关性研究。方法将我院2014年6月~2017年6月收治的40例多发性硬化症患者作为研究对象,随机分为观察1组、观察2组,各20例。选择同期我院20例健康体检者作为对照组。观察1组给予糖皮质激素联... 目的探讨Nrf2/ARE信号通路与多发性硬化预后的相关性研究。方法将我院2014年6月~2017年6月收治的40例多发性硬化症患者作为研究对象,随机分为观察1组、观察2组,各20例。选择同期我院20例健康体检者作为对照组。观察1组给予糖皮质激素联合常规营养神经治疗,观察2组采用单纯营养神经治疗。采用流式细胞仪检测三组入组Nrf2、HO-1、TNF-α表达水平,分析ADL及神经功能评分。结果随访6个月、随访12个月,观察1组Nrf2、HO-1表达水平、ADL评分高于观察2组,而其TNF-α表达水平、神经功能评分低于观察2组(P<0.05),观察1组、观察2组Nrf2、HO-1表达水平、ADL评分高于治疗前,而其TNF-α表达水平、神经功能评分低于治疗前(P<0.05),观察1组、观察2组Nrf2、HO-1、TNF-α表达水平高于对照组(P<0.05);随访6个月、随访12个月,观察1组、观察2组ADL评分低于对照组,神经功能评分高于对照组(P<0.05)。结论糖皮质激素联合常规营养神经改善多发性硬化症患者神经功能损伤,其可能通过上调Nrf2、HO-1表达,下调TNF-α表达而发挥作用。 展开更多
关键词 Nrf2/ARE 信号通路 多发性硬化 预后 相关性
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姜黄素抑制氧化应激减轻单侧输尿管梗阻大鼠肾脏间质纤维化 预览
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作者 韩铁岭 石燕霞 +5 位作者 安彩红 杨昊 宋元明 张学明 闫巧梅 丁海麦 《黑龙江农业科学》 2019年第4期90-94,共5页
为研究姜黄素对单侧输尿管阻塞大鼠肾间质纤维化可能的干预机制。将SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、对照组(UUO)、UUO+50mg·kg^-1姜黄素组,UUO+75mg·kg^-1姜黄素组,每组6只,均于手术当天晚上灌胃给药,每24h给药1次。第14天处... 为研究姜黄素对单侧输尿管阻塞大鼠肾间质纤维化可能的干预机制。将SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、对照组(UUO)、UUO+50mg·kg^-1姜黄素组,UUO+75mg·kg^-1姜黄素组,每组6只,均于手术当天晚上灌胃给药,每24h给药1次。第14天处死取肾组织,Masson染色光学显微镜下肾脏组织病理变化、试剂盒检测肾组织匀浆液丙二醛(MDA)含量,谷胱甘肽S转移酶(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力;RT-PCR法检测核转录相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶(HO-1)mRNA表达。结果表明:与Sham组比较,UUO组和姜黄素干预组MDA含量均升高,GSH、SOD、CAT活力均显著降低,Nrf2和HO-1mRNA表达显著升高;UUO组与姜黄素干预组比较,姜黄素干预组MDA含量显著降低,GSH、SOD、CAT显著升高,Nrf2和HO-1mRNA表达显著升高;UUO组肾小球球囊间隙增大,排列紊乱,胶原纤维增多,明显纤维化变性,姜黄素干预组病理表现较UUO组明显减轻。姜黄素能减轻单侧输尿管梗阻大鼠肾脏间质纤维化,其机制可能是通过诱导肾组织Nrf2表达,上调HO-1、SOD等抗氧化酶水平,提高肾组织抗氧化应激水平。 展开更多
关键词 姜黄素 NRF2 间质纤维化 氧化应激
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基于“有故无殒”莪术对正常和血瘀证小鼠毒性差异机制的研究
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作者 于春磊 徐天娇 +2 位作者 张晓杰 董妙先 牛英才 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期329-334,共6页
为了明确正常和血瘀证的孕鼠子代莪术神经发育毒性的差异及其生物机制,采用冰水浸入法制备寒凝血瘀证小鼠模型,雌性小鼠随机分为正常对照组、血瘀证对照组、正常+莪术(2.5、5、10 g·kg-1)组、血瘀证+莪术(2.5、5、10 g·kg-1)... 为了明确正常和血瘀证的孕鼠子代莪术神经发育毒性的差异及其生物机制,采用冰水浸入法制备寒凝血瘀证小鼠模型,雌性小鼠随机分为正常对照组、血瘀证对照组、正常+莪术(2.5、5、10 g·kg-1)组、血瘀证+莪术(2.5、5、10 g·kg-1)组、血瘀证Nrf2敲除组、血瘀证Nrf2敲除+莪术(10 g·kg-1)组、正常+tBHQ (Nrf2的激动剂)组和正常+莪术(10 g·kg-1)+tBHQ组,共12组。交配成功的莪术暴露组小鼠于妊娠期第5~18天灌胃给予莪术水煎液。行为学方法检测子代小鼠断崖回避达标日龄,分光光度法检测子代小鼠脑组织谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量,实时定量PCR检测子代小鼠脑组织Nrf2、谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(glutamate cysteine ligase catalytic subunit,GCLc)和修饰亚基(glutamate cysteine ligase modifier subunit, GCLm) mRNA表达,蛋白质印迹法检测子代小鼠脑组织Nrf2、GCLc和GCLm蛋白表达。动物福利和实验过程均遵循齐齐哈尔医学院动物伦理委员会的规定执行。结果显示,正常小鼠灌胃莪术水煎液(10.0 g·kg-1)导致子代断崖回避达标日龄显著延长(P<0.05),而血瘀证小鼠子代无显著差异(P>0.05)。与正常对照组比较,血瘀证孕小鼠显著增加子代脑组织GSH含量、GCLc、Nrf2 mRNA和蛋白表达(均P<0.05),而莪术处理对GSH含量、GCLc、Nrf2 mRNA和蛋白表达并没有影响(均P>0.05)。Nrf2基因敲除显著延长血瘀证孕小鼠子代断崖回避的达标日龄(P<0.05)。总之,莪术对正常小鼠子代神经发育毒性效应较血瘀证小鼠明显, Nrf2分子参与莪术'有故无殒'现象。 展开更多
关键词 莪术 神经发育毒性 血瘀证 基因敲除小鼠 氧化应激 NRF2
连翘苷元对老年大鼠氧化应激和肾功能的改善作用
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作者 杨捷玲 李琛 +2 位作者 刘青 黄秋雁 冯颖 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第1期77-82,共6页
目的研究连翘苷元对老年大鼠氧化应激和肾功能的影响及相关机制。方法将15只SD雌性老年大鼠(24月龄)随机分成3组,每组5只,老年对照组(Aged rats),老年连翘苷元低剂量组[Aged rats+FA(20 mg/kg)],老年连翘高剂量组[Aged rats+FA(100 mg/k... 目的研究连翘苷元对老年大鼠氧化应激和肾功能的影响及相关机制。方法将15只SD雌性老年大鼠(24月龄)随机分成3组,每组5只,老年对照组(Aged rats),老年连翘苷元低剂量组[Aged rats+FA(20 mg/kg)],老年连翘高剂量组[Aged rats+FA(100 mg/kg)]。另取5只12周龄SD雌性大鼠为青年对照组(Young rats)。连翘苷元低、高剂量组大鼠灌胃给药60 d。考马斯亮蓝检测24 h尿液总蛋白并分析血清肌酐和尿素氮水平。HE染色和TUNEL染色检测肾组织病理损伤情况。Western Blot检测Caspase-3和Caspase-9的表达。检测氧化应激标记物超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的水平。ELISA检测血清中炎症因子IL-18和IL-1β水平。Western Blot检测核因子E2相关因子(Nrf 2)、血红素氧合酶1(HO-1)和还原型辅酶/醌氧化还原酶(NQO-1)的表达。结果老年对照组与青年对照组相比,尿中蛋白含量显著提升,血清中肌酐和尿素氮含量显著上升;肾组织细胞排列不规则,出现大量炎性细胞浸润,凋亡细胞比率显著提高;Caspase-3和Caspase-9的表达水平显著上调;SOD活性显著降低,MDA含量显著上升,GSH含量显著下降;血清中IL-18和IL-1β含量显著升高;Nrf 2、HO-1和NQO-1的表达显著下调。连翘苷元低、高剂量组与老年对照组相比,尿液中蛋白含量显著降低,血清肌酐和尿素氮含量显著下降;肾组织细胞排列趋向规则,炎性细胞浸润明显减弱,凋亡细胞比率显著下降;Caspase-3和Caspase-9的表达水平显著下调;SOD活性显著提高,MDA含量显著降低,GSH含量显著上升;血清中IL-18和IL-1β含量显著降低;Nrf 2、HO-1和NQO-1的表达显著上调。结论连翘苷元抑制老年大鼠氧化应激反应,改善老年大鼠肾功能,其作用机制可能与Nrf 2-ARE通路激活相关。 展开更多
关键词 连翘苷元 氧化应激 肾功能 细胞凋亡 Nrf 2-ARE
Keap1-Nrf2信号通路参与子宫内膜癌细胞增殖、转移、耐药机制的研究
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作者 顾佩蓓 吴婷婷 +1 位作者 杨婷 张箴波 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第1期6-12,共7页
目的:研究Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)-核转录因子E2相关因子(Nrf2)信号通路对子宫内膜癌细胞生长、转移及耐药的影响。方法:选择代表I型子宫内膜癌细胞的KLE细胞株和代表II型子宫内膜癌的ARK2细胞株,采用real-time PCR和Western... 目的:研究Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)-核转录因子E2相关因子(Nrf2)信号通路对子宫内膜癌细胞生长、转移及耐药的影响。方法:选择代表I型子宫内膜癌细胞的KLE细胞株和代表II型子宫内膜癌的ARK2细胞株,采用real-time PCR和Western blot法测定两细胞株Keap1和Nrf2基因m RNA、蛋白表达,MTT法检测两细胞株对顺铂耐药性。对Keap1表达更低、耐药性更强的ARK2细胞株的Keap1基因过表达。Real-time PCR、Western blot、平板克隆实验、MTT法、Transwell迁徙、侵袭实验等方法研究ARK2细胞中Keap1过表达对Nrf2及下游靶基因表达、细胞生长、侵袭、耐药的影响。结果:在ARK2和KLE细胞中Nrf2基因m RNA表达无明显差异,ARK2细胞中Keap1基因表达无论是m RNA还是蛋白水平在的表达均要低于KLE细胞株,而Nrf2蛋白水平的表达在ARK2细胞株中则要明显高于KLE细胞株。Keap1表达较低的ARK2细胞较Keap1高表达的KLE细胞耐药性更高。ARK2细胞株中Keap1过表达能够明显下调Nrf2蛋白及下游基因ABCC2、γ-GCS表达;MTT实验和平板克隆实验表明Keap1过表达能够降低ARK2细胞增殖能力;Keap1过表达能够降低ARK2细胞迁徙和侵袭能力;Keap1过表达能够显著提高ARK2细胞对顺铂的敏感性。结论:Keap-Nrf2信号通路在子宫内膜浆液性癌细胞株ARK2中活化程度显著高于子宫内膜样癌细胞株KLE,Keap1对Nrf2蛋白表达调控是基于转录后的,且低表达的Keap1及高表达的Nrf2蛋白和肿瘤细胞的高耐药性有关。在子宫内膜浆液性癌细胞株ARK2中上调Keap1基因表达能够有效的下调Nrf2蛋白及其下游基因的表达,并降低肿瘤细胞的生长、迁徙、侵袭能力,且能提高肿瘤细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 KEAP1 NRF2 增殖 转移 耐药
Lepr^db/db小鼠肾损伤机制探讨
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作者 阎婷婷 徐光翠 +3 位作者 彭强 吴卫东 易宪文 赵英政 《四川大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期334-338,共5页
目的探讨瘦素受体完全缺陷的Lepr^db/db小鼠肾损伤机制.方法选取28周龄瘦素受体杂合缺陷的Lepr^db/+(作为对照)与Lepr^db/db雄性小鼠各10只,禁食8h后,分别测量两组小鼠体质量、空腹血糖(FBG)和糖化血红蛋白(HbA1c)水平.小鼠经股动脉采... 目的探讨瘦素受体完全缺陷的Lepr^db/db小鼠肾损伤机制.方法选取28周龄瘦素受体杂合缺陷的Lepr^db/+(作为对照)与Lepr^db/db雄性小鼠各10只,禁食8h后,分别测量两组小鼠体质量、空腹血糖(FBG)和糖化血红蛋白(HbA1c)水平.小鼠经股动脉采血后处死.采用试剂盒检测血清中肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的水平.酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中炎性细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平.取肾进行病理观察.Western blot检测肾组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)及核因子-κB(NF-κB)蛋白表达.提取肾组织细胞线粒体,Western blot检测线粒体中硫辛酸合成酶(lipoic acid synthase,LIAS)蛋白的表达水平.结果与Lepr^db/+小鼠相比,Lepr^db/db小鼠体质量、FPG、HbA1c、CRE、BUN水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05).病理观察发现,Lepr^db/+小鼠肾细胞结构完整,而Lepr^db/db小鼠肾小球体积增大,基底膜及毛细血管壁增厚,系膜细胞和系膜基质增多.与Lepr^db/+小鼠相比,Lepr^db/db小鼠血清中GSH水平降低,MDA和炎性因子MCP-1、IL-1β、TNF-α水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);Lepr^db/db组小鼠肾脏线粒体内LIAS和肾组织中Nrf2蛋白表达量均降低,而NF-κB蛋白水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论28周龄Lepr^db/db小鼠存在氧化应激和炎症反应,肾损伤机制可能与LIAS调控Nrf2和NF-κB有关. 展开更多
关键词 Lepr^db/db小鼠 肾损伤 LIAS NRF2 NF-ΚB
穿心莲内酯调控HaCaT细胞中Nrf2/ARE通路的抗氧化作用机制研究
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作者 何思蓉 余黄合 +1 位作者 杨珍 曾嵘 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期777-782,共6页
目的探讨穿心莲内酯通过诱导Ha Ca T细胞中Nrf2/ARE信号通路介导的HO-1、NQO1、AKR1C1的表达,减少细胞因氧化应激而受到的损伤。方法通过CCK-8方法检测穿心莲内酯对Ha Ca T细胞的活力影响以及过氧化氢诱导的细胞存活率的影响。用穿心莲... 目的探讨穿心莲内酯通过诱导Ha Ca T细胞中Nrf2/ARE信号通路介导的HO-1、NQO1、AKR1C1的表达,减少细胞因氧化应激而受到的损伤。方法通过CCK-8方法检测穿心莲内酯对Ha Ca T细胞的活力影响以及过氧化氢诱导的细胞存活率的影响。用穿心莲内酯不同浓度预处理Ha Ca T细胞24 h,分别通过Western blot以及实时荧光定量PCR分析检测Ha Ca T细胞中Nrf2、HO-1、AKR1C1、NQO1的表达水平;通过胞质胞核分离以及免疫荧光的方法分析Nrf2蛋白核内表达情况。结果穿心莲内酯不影响细胞存活率,并剂量依赖性的降低H2O2诱导的细胞死亡,差异具有统计学意义。穿心莲内酯能显著增强抗氧化酶Nrf2、HO-1、AKR1C1、NQO1的蛋白和mRNA表达,增加Nrf2的细胞核内的分布,并上调ARE的表达活性。穿心莲内酯能够上调上游蛋白激酶AMPKα的磷酸化(p-AMPKα)水平。结论穿心莲内酯降低H2O2诱导的细胞死亡,其作用机制可能是通过激活Nrf2/ARE信号通路,从而调控HO-1、AKR1C1、NQO1的表达水平。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 抗氧化 HO-1 NQO1 AKR1C1 Nrf2/ARE
核因子-E2相关因子2(Nrf2)与核呼吸因子2(NRF2)的区别与联系
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作者 寇蕊蕊 王淑娥 +1 位作者 徐永生 宋福永 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期151-156,共6页
核因子-E2相关因子2 (Nuclearfactor erythroidderived 2-like 2,Nrf2)是机体抗氧化防御系统的主要调节因子,能够增强细胞对氧化应激的抵抗。核呼吸因子2(Nuclearrespiratoty factor 2,NRF2)又叫GA结合蛋白转录因子(GA binding protein ... 核因子-E2相关因子2 (Nuclearfactor erythroidderived 2-like 2,Nrf2)是机体抗氧化防御系统的主要调节因子,能够增强细胞对氧化应激的抵抗。核呼吸因子2(Nuclearrespiratoty factor 2,NRF2)又叫GA结合蛋白转录因子(GA binding protein transcription factor,GABPA),是细胞重要的转录因子,能激活线粒体呼吸、DNA转录及复制所需的调控基因,调节细胞生长。尽管Nrf2与NRF2主要的生物学作用不同,但是大量研究表明二者存在功能上的交互作用及密切联系。本文阐述了Nrf2和NRF2在功能上的异同及联系,重点论述二者在功能和疾病发生过程中的作用机制。 展开更多
关键词 NRF2 NRF2 过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同刺激因子(PGC-1α)
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对H2O2诱导细胞氧化损伤的保护作用 预览
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作者 刘迪 孙宏宇 +3 位作者 时文艳 陈为 马爱新 冯宪敏 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第6期273-278,共6页
目的:研究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对人胚肾HEK-293细胞氧化损伤的保护作用。方法:通过检测细胞活力、活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)水平考察C3G对氧化损伤细胞的影响,并采用Western blot法和q RTPCR检测Nrf2和Keap1的蛋白表达量和m ... 目的:研究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对人胚肾HEK-293细胞氧化损伤的保护作用。方法:通过检测细胞活力、活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)水平考察C3G对氧化损伤细胞的影响,并采用Western blot法和q RTPCR检测Nrf2和Keap1的蛋白表达量和m RNA表达量变化。结果表明:C3G预处理氧化应激细胞后,细胞活力显著高于H2O2损伤组(p <0.05),并呈浓度依赖性提高;H2O2损伤组的DCF荧光强于对照组,ROS相对含量增加到近2倍,1.25、5、20μmol/L C3G预处理后细胞荧光强度逐渐减弱,ROS相对量呈浓度依赖性降低;C3G预处理后细胞MDA水平呈浓度依赖性降低;1.25、5、20μmol/L C3G处理后,Nrf2的m RNA表达和蛋白表达量均呈浓度依赖性上调,Keap1蛋白表达量显著低于H2O2损伤组(p <0.05),5和20μmol/L C3G对Keap1的m RNA下调作用明显。结论:矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对HEK-293细胞有保护作用,可降低细胞ROS和MDA水平,其作用机制可能是通过激活Nrf2/Keap1信号通路以抵抗H2O2导致的细胞氧化损伤。 展开更多
关键词 矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G) 氧化应激 NRF2 信号通路
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加兰他敏通过激活Nrf2/ROS通路缓解大鼠脑缺血再灌注后免疫反应和诱导神经再生相关蛋白的表达 预览
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作者 吕娟 赵红梅 +1 位作者 孙桂芳 王润青 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期965-969,975共6页
目的:探究加兰他敏(GAL)对大鼠脑缺血再灌注后免疫反应和神经再生的影响。方法:SD大鼠随机分为5组(n=30):健康对照组,假手术组,I/R模型组,I/R加低剂量GAL组,I/R加高剂量GAL组。采用改良线栓法建立I/R大鼠模型。HE检测病理组织变化。免... 目的:探究加兰他敏(GAL)对大鼠脑缺血再灌注后免疫反应和神经再生的影响。方法:SD大鼠随机分为5组(n=30):健康对照组,假手术组,I/R模型组,I/R加低剂量GAL组,I/R加高剂量GAL组。采用改良线栓法建立I/R大鼠模型。HE检测病理组织变化。免疫组化检测神经丝蛋白200(NF-200)的表达。Westernblot检测NF-200、生长相关蛋白43(GAP-43)、排斥导向分子(RGMa)的表达水平。ELISA检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6、IL-18的含量。Westernblot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)、还原型辅酶氧化还原酶1(NQ01)的表达。试剂盒检测脑组织活性氧(ROS)的含量。结果:I/R模型组与假手术组相比,大鼠CA1区出现明显缺血病变;NF-200密度下降,NF-200蛋白表达显著下调,GAP-43蛋白表达显著下调,RGMa表达显著上调;血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18的含量显著上升;Nrf2、HO-1、NQO-1的表达显著下调;ROS的含量显著上升。GAL加药组与I/R模型组相比,大鼠CA1区缺血病变明显改善;NF-200密度上升,NF-200蛋白表达显著上调,GAP-43蛋白表达显著上调,RGMa表达显著下调;血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18的含量显著降低;Nrf2、HO-1、NQO-1的表达显著上调;ROS的含量显著降低。结论:GAL激活Nfr2/ROS细胞信号通路,缓解大鼠脑缺血再灌注后免疫应激反应,诱导神经再生相关蛋白的表达。 展开更多
关键词 加兰他敏 NRF2 脑缺血再灌注 免疫反应 神经再生
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基于p62-NRF2通路探讨黄芪甲苷对白血病耐药细胞株化疗敏感性的影响
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作者 杨小娟 康意 +2 位作者 刘志强 王晓玲 汪涛 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期771-774,共4页
目的基于p62-NRF2通路探讨黄芪甲苷(AST)对白血病耐药细胞株化疗敏感性的影响机制。方法复制白血病细胞模型,cck-8法测L1210、L1210/DDP细胞株对DDP的敏感性;将L1210/DDP细胞随机分成5组,即L1210组、L1210/DPP组、给药1组(L1210/DDP+8μ... 目的基于p62-NRF2通路探讨黄芪甲苷(AST)对白血病耐药细胞株化疗敏感性的影响机制。方法复制白血病细胞模型,cck-8法测L1210、L1210/DDP细胞株对DDP的敏感性;将L1210/DDP细胞随机分成5组,即L1210组、L1210/DPP组、给药1组(L1210/DDP+8μg/ml DDP)、给药2组(L1210/DDP+8μg/ml DDP+100μg/ml AST)、给药3组(L1210/DDP+8μg/ml DDP+70μg/ml verapamil组),评价AST对L1210/DDP耐药性的逆转作用;流式细胞仪检测各组细胞周期、凋亡率变化,DCFH-DA荧光探针检测各组细胞内ROS变化;real time RT-PCR检测p62-NRF2通路各节点基因的表达变化。结果L1210/DDP细胞对DDP的敏感性明显弱于L1210细胞,相对耐药指数为2.56;100μg/ml AST作用24h后,相对逆转倍数为13.67,70μg/ml verapamil的相对逆转倍数为20.46;与L1210组相比,含L1210/DDP各组内ROS水平低(P<0.05);与L1210/DDP组相比,给药2、3组肿瘤细胞G1期阻滞,S期缩短,细胞增殖受到抑制(P<0.05);给药各组细胞p62、NRF2基因mRNA表达下调,除给药1组外,细胞HO-1基因mRNA表达均下调,而各给药组细胞cyclinD、Caspase3 mRNA表达均上调,但无统计学意义。结论AST具有增强L1210/DDP细胞株对DDP敏感性,逆转L1210/DDP细胞株耐药的功效,其机制可能通过调控p62-NRF2通路及其靶基因的表达有关。 展开更多
关键词 P62 NRF2 黄芪甲苷 肿瘤耐药
通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤大鼠Keap1-Nrf2/ARE信号通路的影响 预览
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作者 杨丽梦 熊旭东 《中国中医急症》 2019年第2期209-212,247共5页
目的观察通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤大鼠核因子E2相关因子(Nrf2)表达的影响,探讨通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤抗氧化应激的作用机制。方法采用CLP制作脓毒症模型,将40只成年雄性SD大鼠随机分为正常组、中药组、模型组及假手术组4组... 目的观察通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤大鼠核因子E2相关因子(Nrf2)表达的影响,探讨通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤抗氧化应激的作用机制。方法采用CLP制作脓毒症模型,将40只成年雄性SD大鼠随机分为正常组、中药组、模型组及假手术组4组,每组10只。正常组于6h、12h后予以0.9%氯化钠注射液灌胃。假手术组开腹后将盲肠取出后再回纳到腹腔,术后6h、12h予以0.9%氯化钠注射液灌胃。模型组CLP术后立即予以0.9%氯化钠注射液灌胃,术后6h、12h予以0.9%氯化钠注射液灌胃。中药组CLP术后立即予以通腑平喘方灌胃,术后6h、12h再次予以通腑平喘方灌胃。以上各组均在24h后麻醉并行腹主动脉采血致死,取出肺组织。术后观察大鼠一般情况,检测各组血清Nrf2、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,RT-PCR法检测肺组织中Nrf2mRNA表达量。结果中药组的血清Nrf2含量及Nrf2mRNA表达水平高于模型组(P<0.01)。模型组大鼠血清MDA含量与正常组、假手术组及中药组相比明显升高(P<0.05),血清SOD含量及血清GSH含量与正常组、假手术组及中药组相比明显降低(P<0.05)。结论通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤大鼠有保护作用,其机制可能与其激活Nrf2,上调SOD、GSH有关,起到抑制氧化应激反应、减轻肺组织损伤的作用。 展开更多
关键词 氧化应激 NRF2 脓毒症 急性肺损伤
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黄连素激活Nrf2通路缓解新生大鼠哮喘模型氧化应激反应和对心肺组织的保护作用
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作者 郑怜玉 陈骏 徐丛荣 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期1002-1006,共5页
目的:探讨黄连素(berberine,BB)对新生大鼠哮喘模型氧化应激反应的影响和对心肺组织的保护作用以及潜在的分子机制。方法:将新生SD雄性大鼠随机分成健康对照组、健康加药组、哮喘模型组和模型加药组;卵清蛋白诱导新生大鼠哮喘模型;收集... 目的:探讨黄连素(berberine,BB)对新生大鼠哮喘模型氧化应激反应的影响和对心肺组织的保护作用以及潜在的分子机制。方法:将新生SD雄性大鼠随机分成健康对照组、健康加药组、哮喘模型组和模型加药组;卵清蛋白诱导新生大鼠哮喘模型;收集肺泡灌洗液(broncho alveokar lavage fluid,BALF)并分析细胞类型和细胞数目;苏木伊红(hematoxylin eosin,HE)染色观察心肌组织和肺组织病理变化;末端标记法(terminal deoxynucleoitidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)染色检测心肌组织和肺组织细胞凋亡情况;试剂盒检测血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)的含量;蛋白质印记检测肺组织中Kelch样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)、NFE2相关因子2(NF-E2 related factor 2,Nrf2)和血红素氧合酶1(heme oxygenase 1,HMOX-1)的表达水平。结果:哮喘模型组与对照组相比,肺泡灌洗液中炎性细胞的数目显著增加;心肌组织细胞排列不规则,部分细胞结构不清晰;肺组织中有大量的炎性细胞浸润,黏膜下水肿,气道上皮断裂脱落,支气管壁明显增厚;心肌组织和肺组织中凋亡细胞比例显著增加;血清中SOD的活性显著降低,MDA和NO的含量显著增加;肺组织中Keap1、Nrf2和HMOX-1的表达水平显著升高。模型加药组与模型组相比,肺泡灌洗液中炎性细胞的数目明显减少;心肌组织较规则,细胞排列较整齐;肺组织中仍有部分炎性细胞浸润,部分肺泡壁增厚;心肌组织和肺组织中凋亡细胞比例显著降低;SOD的活性显著升高,MDA和NO的含量显著降低;Keap1、Nrf2和HMOX-1的表达水平显著升高。结论:黄连素可激活Nrf2通路,缓解新生大鼠哮喘模型的氧化应激反应,对心肺组织具有保护作用。 展开更多
关键词 支气管哮喘 黄连素 氧化应激 NRF2
甲基苯丙胺滥用致肺动脉平滑肌细胞氧化性损伤
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作者 梁立业 刘明 +2 位作者 赵伟 王怀良 王韵 《解剖科学进展》 2019年第2期170-172,176共4页
目的研究甲基苯丙胺(methamphetamine, MA)滥用是否可以诱导肺动脉平滑肌细胞发生氧化应激反应,引起氧化性损伤。方法取7日龄Wistar大鼠肺主动脉段进行肺动脉平滑肌细胞原代培养。将原代细胞(十代以内)给予不同浓度的MA(0.1, 0.5, 1, 3,... 目的研究甲基苯丙胺(methamphetamine, MA)滥用是否可以诱导肺动脉平滑肌细胞发生氧化应激反应,引起氧化性损伤。方法取7日龄Wistar大鼠肺主动脉段进行肺动脉平滑肌细胞原代培养。将原代细胞(十代以内)给予不同浓度的MA(0.1, 0.5, 1, 3, 5mM)持续刺激36h后,采用流式细胞术检测ROS的含量,并采用western blot检测Nrf2、GCS和SOD2蛋白表达的变化。结果与对照组相比,ROS的产生随给药浓度的增大而增加;而抗氧化因子Nrf2和抗氧化酶GCS蛋白随着给药浓度的增加表达水平明显减弱,而氧化酶SOD2蛋白随着MA浓度的升高表达水平明显增加(P<0.05)。结论甲基苯丙胺持续刺激肺动脉平滑肌细胞能抑制抗氧化作用,引起氧化/抗氧化系统失衡,诱导细胞产生氧化应激反应,产生氧化性损伤。 展开更多
关键词 甲基苯丙胺 ROS NRF2 氧化作用 抗氧化 肺动脉平滑肌细胞 WISTAR大鼠
铁皮石斛粗多糖对刀豆蛋白A诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及机制研究
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作者 于静 段博文 +3 位作者 赵佩 高进贤 石磊 吴树金 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期82-87,共6页
目的:观察铁皮石斛粗多糖(Dendrobium Officinale,DO)对刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用并探讨相关机制。方法:利用ConA(20 mg/kg)制备小鼠急性肝损伤模型,分别给予300、600、1200 mg/kg剂量的铁皮石斛多... 目的:观察铁皮石斛粗多糖(Dendrobium Officinale,DO)对刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用并探讨相关机制。方法:利用ConA(20 mg/kg)制备小鼠急性肝损伤模型,分别给予300、600、1200 mg/kg剂量的铁皮石斛多糖(DOPS)连续灌胃20天。全自动生化分析仪检测血清ALT、AST、Alb、TP及A/G比;ELISA试剂盒检测TNF-α、INF-γ;肝组织HE染色进行肝组织病理学损伤分级评价;试剂盒检测SOD、GSH、MDA水平;TUNEL染色法检测肝细胞凋亡情况;Western blot检测Nrf2、HO-1、p-JNK、BCl-2的蛋白表达情况。结果:与ConA诱导的小鼠急性肝损伤模型组相比,铁皮石斛组小鼠血清ALT、 AST、TNF-α、INF-γ值明显降低,Alb、TP及A/G比明显升高;肝组织病理损伤分级明显降低;肝组织的SOD、GSH水平明显升高,MDA水平明显降低。与模型组相比,铁皮石斛组小鼠肝细胞凋亡明显减少;Nrf2、HO-1、BCl-2的蛋白表达明显升高,p-JNK明显降低。结论:本研究表明铁皮石斛对ConA诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与铁皮石斛上调Nrf2信号通路,抑制氧化应激,进而抑制JNK信号通路相关。 展开更多
关键词 铁皮石斛粗多糖 刀豆蛋白A 急性肝损伤 Nrf2 ROS JNK
大株红景天对心肌细胞缺糖缺氧损伤的作用及机制研究
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作者 孙晓萍 顾少莉 +1 位作者 周军 肖伟 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期87-90,共4页
目的:研究大株红景天对心肌细胞缺糖缺氧(OGD/R)损伤的保护作用及机制,探讨其与Akt/Nrf2信号通路的关系。方法:以大株红景天对氧化损伤心肌细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、丙二醛(MDA)含量、一氧化氮(NO)含量、超氧化物歧化酶(SOD... 目的:研究大株红景天对心肌细胞缺糖缺氧(OGD/R)损伤的保护作用及机制,探讨其与Akt/Nrf2信号通路的关系。方法:以大株红景天对氧化损伤心肌细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、丙二醛(MDA)含量、一氧化氮(NO)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响为评价指标,研究大株红景天对OGD/R心肌细胞的保护作用,利用PI3K抑制剂联合药物处理细胞,Western blot法检测细胞中p-Akt、Akt、Nrf-2、HO-1蛋白的表达。结果:与模型组相比,大株红景天100μg/ml组能明显降低OGD/R损伤心肌细胞LDH漏出、MDA含量、NO含量,显著升高SOD活性和细胞存活率,同时上调缺糖缺氧诱导的p-Akt、Nrf-2、HO-1蛋白表达的升高,并能够被PI3K信号通路抑制剂抑制。结论:大株红景天对OGD/R损伤的H9C2细胞损伤具有显著的抑制作用,其作用机制可能与激活Akt/Nrf2信号通路有关。 展开更多
关键词 大株红景天 OGD 氧化应激 AKT NRF2
葛根素对病毒性心肌炎的保护机制研究
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作者 张晓梅 孙景辉 +2 位作者 朱华 孟晓波 窦忠霞 《国际儿科学杂志》 2019年第2期140-143,F0003共5页
目的探讨Nrf2在病毒性心肌炎小鼠中的表达及葛根素(Pue)治疗后Nrf2的变化及作用。方法将130只BALB/c纯种4周龄雄性小鼠,随机分成对照组(20只)、VMC组(30只)、Nrf2激活剂组(20只)、不同浓度Pue组(各20只),用柯萨奇B3型病毒(CVB3),通过VM... 目的探讨Nrf2在病毒性心肌炎小鼠中的表达及葛根素(Pue)治疗后Nrf2的变化及作用。方法将130只BALB/c纯种4周龄雄性小鼠,随机分成对照组(20只)、VMC组(30只)、Nrf2激活剂组(20只)、不同浓度Pue组(各20只),用柯萨奇B3型病毒(CVB3),通过VMC经典造模方法进行造模。分别在实验第0、4、7、14、28天采血、杀鼠,留取心肌组织。采用流式细胞术检测小鼠心肌细胞的凋亡情况,应用Real-TimePCR法检测Nrf2mRNA、HO-1mRNA、FasmRNA、TGF-β1mRNA的水平及用Westernblot法检测Nrf2、HO-1、Fas、TGF-β1的蛋白表达情况。应用统计软件SPSS19.0对结果进行统计学分析,计量资料以均值±标准差(±s)表示,配对样本用均值t检验,成组资料用双向方差分析,相关性分析应用Spearman相关检验,P<0.05为差异有显著性。结果Nrf2mRNA及其蛋白在各组均有表达。通过CPDT以及Pue分析Nrf2与HO-1、Fas、TGF-β1之间的相关关系,得出完全一致的结果,说明Nrf2与HO-1、Fas、TGF-β1之间的关系,不因干预措施的改变而变化。CPDT及Pue组HO-1的转录及蛋白表达明显升高,且与Nrf2呈正相关(r=0.969,P<0.01)。在一定Pue剂量梯度(≤45mg/kg)下,HO-1的转录及蛋白表达呈剂量依赖性;CPDT及Pue组心肌细胞凋亡数减少,Nrf2与Fas呈负相关(r=-0.968,P<0.01);CPDT及Pue组中TGF-β1在一定的剂量梯度下,随着剂量的增大,TGF-β1表达降低,Nrf2与TGF-β1呈负相关(r=-0.753,P<0.01)。结论Nrf2在VMC中表达增高,参与VMC的发生、发展过程。Nrf2在VMC中通过上调抗氧化酶HO-1达到抗氧化作用;通过抑制Fas/FasL信号通路实现抗心肌凋亡作用;通过抑制TGF-β1的转录及蛋白表达,抑制心肌纤维化。Pue对VMC的治疗作用是通过激活Nrf2,进而产生抗氧化、抗心肌凋亡和抗心肌纤维化作用。 展开更多
关键词 病毒性心肌炎 BALB /c鼠 柯萨奇病毒B3 NRF2 葛根素
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