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南昌市1例输入性登革热病例的型别鉴定及基因特征
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作者 贺凤兰 夏文 +2 位作者 樊国印 邓志强 倪贤生 《职业与健康》 CAS 2018年第14期1979-1982,共4页
目的通过实验室检测技术分析1名输入性发热病例的病毒性病原体,并判定其型别,为临床防治提供实验室依据。方法将采集到的血标本采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real time PCR)检测登革病毒核酸,使用通用引物和型特异性引物行逆转录-... 目的通过实验室检测技术分析1名输入性发热病例的病毒性病原体,并判定其型别,为临床防治提供实验室依据。方法将采集到的血标本采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real time PCR)检测登革病毒核酸,使用通用引物和型特异性引物行逆转录-套式PCR扩增保守区域特异性核酸片段进行型别鉴定,通过登革病毒E基因扩增和序列测定对登革病毒进行亚型基因分型。结果病例血标本核酸经RT-PCR和逆转录-套式PCR方法鉴定为登革病毒2型(DENV-2),基因分类属于DENV-2全球型。结论该例输入性疑似登革热病例系DENV-2全球型引起。 展开更多
关键词 登革热病毒2型 输入性发热病例 逆转录-套式PCR E基因
施马伦贝格病毒套式RT-PCR检测方法的建立
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作者 杨素 黄海超 +5 位作者 陈轩 许彩芸 沙才华 薄清如 罗宝正 廖秀云 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期923-927,932共6页
根据GenBank公布的施马伦贝格病毒S基因序列,设计特异性引物,构建施马伦贝格病毒S基因重组克隆质粒作为阳性对照,经各反应条件的优化以及特异性、敏感性和重复性试验,建立了施马伦贝格病毒套式RT-PCR检测方法。结果表明,本研究建立的套... 根据GenBank公布的施马伦贝格病毒S基因序列,设计特异性引物,构建施马伦贝格病毒S基因重组克隆质粒作为阳性对照,经各反应条件的优化以及特异性、敏感性和重复性试验,建立了施马伦贝格病毒套式RT-PCR检测方法。结果表明,本研究建立的套式RT-PCR方法可特异性的检测施马伦贝格病毒,且与BTV、EHDV、AKV、BVDV、IBRV等其他病毒的核酸不发生交叉反应。每个反应可检测到相当于6.65×10^2 copies/μL施马伦贝格病毒重组克隆质粒。与传统的病毒分离及血清学方法相比较,不但耗时短(仅需5h),而且费用低廉。本研究建立的套式RT-PCR方法具有特异、敏感、重复性好、快速、费用低廉等优点,是施马伦贝格病毒快速初筛的良好方法。 展开更多
关键词 施马伦贝格病毒 S基因 套式RT-PCR
猪环曲病毒套式RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:3
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作者 王赟 周璐 +4 位作者 周远成 蔡雨函 朱玲 徐志文 郭万柱 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1039-1042,共4页
根据GenBank中猪环曲病毒N基因设计合成2对特异性扩增引物,成功建立了猪环曲病毒的套式RT-PCR快速检测方法。为验证本方法的特异性,以猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、A群猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪嵴病毒、沙门... 根据GenBank中猪环曲病毒N基因设计合成2对特异性扩增引物,成功建立了猪环曲病毒的套式RT-PCR快速检测方法。为验证本方法的特异性,以猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、A群猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪嵴病毒、沙门菌及大肠杆菌作为阴性对照,结果显示只有在猪环曲病毒的核酸作为模板时才能扩增出预期的258bp和198bp 2条片段。敏感性试验显示,该方法能检测到的最低核酸含量为1pg。结果表明,建立的RT-PCR方法特异性强、灵敏度高,可用于猪环曲病毒的临床检测和流行病学调查。利用本方法对采集自四川省部分地区的50份临床样品进行检测,猪环曲病毒阳性率为30%。 展开更多
关键词 猪环曲病毒 套式RT-PCR 检测
兔病毒性出血症病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用 预览 被引量:3
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作者 王景儒 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期86-89,共4页
为建立一种快速的兔病毒性出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)病原检测方法,本研究根据Gen-Bank上登录的RHDVVP60基因序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测RHDV的巢式RT-PCR方法。该方法对兔轮状病... 为建立一种快速的兔病毒性出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)病原检测方法,本研究根据Gen-Bank上登录的RHDVVP60基因序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测RHDV的巢式RT-PCR方法。该方法对兔轮状病毒、仙台病毒、健康兔肝脏组织的扩增结果均为阴性;该方法第1次扩增的敏感性是10ng,第2次扩增的敏感性是0.1ng,第2次比第1次扩增的敏感性高100倍。建立的巢式RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,可以准确快速检测出极低含量的RHDV,将为兔病毒性出血症的病原检测及分子流行病学调查等提供一种快速、简单、高效、特异、灵敏的检测方法。 展开更多
关键词 兔病毒性出血症病毒 巢式RT-PCR 检测
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新型鸭病毒性肝炎病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:3
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作者 李娇 王文秀 +3 位作者 祖立闯 王艳 苗立中 沈志强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期341-344,351共5页
根据GenBank上登录的新型鸭病毒性肝炎病毒(N-DHV)基因组序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测新型鸭肝炎病毒的巢式RT-PCR方法。结果显示,该方法对Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)、新城疫病毒(ND)、传染性法氏囊... 根据GenBank上登录的新型鸭病毒性肝炎病毒(N-DHV)基因组序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测新型鸭肝炎病毒的巢式RT-PCR方法。结果显示,该方法对Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)、新城疫病毒(ND)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、鸭病毒性肠炎病毒(DEV)、鸭细小病毒(DPV)的扩增结果均为阴性;该方法第1次扩增的敏感性是10pg,第2次扩增的敏感性是0.1pg,第2次比第1次扩增的敏感性高100倍。结果表明,建立的巢式RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,可以准确快速检测出极低含量的N-DHV,解决了新型鸭肝炎病毒不易在组织病料中检出困难的难题,为新型鸭病毒性肝炎的快速诊断、净化及深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 新型鸭病毒性肝炎病毒 巢式RT-PCR 检测
新型黄病毒在种鹅中垂直传播的研究 预览 被引量:15
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作者 赵冬敏 黄欣梅 +2 位作者 刘宇卓 张敬峰 李银 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期 99-102,共4页
【目的】证实新型黄病毒在种鹅中是否存在垂直传播,为控制该病提供可靠的流行病学依据。【方法】采用巢式RT-PCR和病毒分离技术,对患病种鹅病料、不同孵化阶段死胚、出雏蛋壳内部冲洗液、弱雏样品进行黄病毒分离及基因检测。【结果】在... 【目的】证实新型黄病毒在种鹅中是否存在垂直传播,为控制该病提供可靠的流行病学依据。【方法】采用巢式RT-PCR和病毒分离技术,对患病种鹅病料、不同孵化阶段死胚、出雏蛋壳内部冲洗液、弱雏样品进行黄病毒分离及基因检测。【结果】在患病种鹅、孵化过程中死亡鹅胚尿囊液、出雏蛋壳内壁洗液和雏鹅中均能检测和分离到黄病毒,其中患病种鹅病料的黄病毒阳性率为100.0%,孵化死亡鹅胚黄病毒阳性率为39.6%,出雏蛋壳内部冲洗液黄病毒阳性率为45.0%;1日龄和15日龄弱雏黄病毒阳性率为80.0%。【结论】黄病毒可以通过鹅胚传到下一代,即新型黄病毒在种鹅中存在垂直传播的现象。 展开更多
关键词 黄病毒 巢式RT-PCR 垂直传播
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巢式RT-PCR分析急性髓系白血病患者融合基因
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作者 高飞 陈成璇 +1 位作者 李景岗 林秀平 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2012年第11期2619-2620,2624共3页
目的:探讨巢式RT-PCR在急性髓系白血病(AML)融合基因检测中的应用价值。方法:收集2008年1月-2010年1月在我院初治的227例AML患者的骨髓细胞,提取RNA转录cDNA后,以多重巢式RT-PCR进行融合基因检测。结果:227例患者中共检出融合基因9... 目的:探讨巢式RT-PCR在急性髓系白血病(AML)融合基因检测中的应用价值。方法:收集2008年1月-2010年1月在我院初治的227例AML患者的骨髓细胞,提取RNA转录cDNA后,以多重巢式RT-PCR进行融合基因检测。结果:227例患者中共检出融合基因95例(41.9%),包括AML1/ETO,CBFβ/MYH11,MLL基因重排,PML/RARα,CBFβ/MYH11,PLZF/RARα,MLL/AF6,BCR/ABL。结论:巢式RT-PCR可以较为快速准确的对融合基因进行检测,为AML的诊断和治疗提供依据。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 巢式RT-PCR 融合基因 WHO分型
牛病毒性腹泻病毒套式RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:9
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作者 祖立闯 王金良 +2 位作者 李娇 魏凤 沈志强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1598-1601,1605共5页
根据GenBank公布的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)全基因组序列,选择保守性比较高的5'非编码区,利用Oli-go6.0软件设计了2对特异性引物,建立了检测BVDV的套式RT-PCR方法。结果表明,该方法重复性好、特异性强、敏感性高,可以准确快速检测出... 根据GenBank公布的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)全基因组序列,选择保守性比较高的5'非编码区,利用Oli-go6.0软件设计了2对特异性引物,建立了检测BVDV的套式RT-PCR方法。结果表明,该方法重复性好、特异性强、敏感性高,可以准确快速检测出极低含量的BVDV,极大地提高了常规RT-PCR检测方法的特异性和敏感性。临床初步应用表明,该方法可用于动物与疫苗生物制品原辅料BVDV的快速低含量检测。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 套式RT-PCR 检测
鸡传染性法氏囊病病毒秦皇岛株的分离鉴定 预览
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作者 鲁改儒 张艳英 孟立根 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第6期 62-65,共4页
将秦皇岛某养鸡场疑似为传染性法氏囊病的病死鸡进行剖检,为了对该疑似病例进行确诊,并进行流行病学研究,经对流免疫电泳,对采集的病料进行病毒的分离,阳性法氏囊病料进行病毒RNA的提取,采用套式RT-PCR对病毒的VP2高变区进行扩增... 将秦皇岛某养鸡场疑似为传染性法氏囊病的病死鸡进行剖检,为了对该疑似病例进行确诊,并进行流行病学研究,经对流免疫电泳,对采集的病料进行病毒的分离,阳性法氏囊病料进行病毒RNA的提取,采用套式RT-PCR对病毒的VP2高变区进行扩增,分析氨基酸序列。结果表明,该分离株为传染性法氏囊病病毒(IBDV),被检毒株与GenBank报道的标准超强毒株OKYM、UK661、DV86同源性高达100%,与V3、V2亲缘关系较近。动物回归试验可使健康鸡100%发病,病死率80%。表该分离株为鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 对流免疫电泳 VP2高变区 套式RT-PCR
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西尼罗病毒套式RT-PCR检测方法的建立 预览
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作者 宋捷 唐泰山 +7 位作者 田玲玲 张常印 雷治海 孙旭辉 陈国强 赵建 王凯民 姜焱 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期 1411-1414,1418,共5页
从GenBank上调取西尼罗病毒的基因序列,经过分析,设计并合成2套套式RT—PCR引物,分别对西尼罗病毒灭活苗进行扩增,结果扩增出与目的片段大小一致的条带,将其克隆入pMD18-T-Vector中,进行序列测定,证实为wNV的基因。建立了套式RT... 从GenBank上调取西尼罗病毒的基因序列,经过分析,设计并合成2套套式RT—PCR引物,分别对西尼罗病毒灭活苗进行扩增,结果扩增出与目的片段大小一致的条带,将其克隆入pMD18-T-Vector中,进行序列测定,证实为wNV的基因。建立了套式RT—PCR检测方法,经各反应奈件的优化后,发现2套nest-PCR引物能分别扩增出85个拷贝和62个拷贝的双链DNA,对乙型脑炎病毒、黄热病毒等11种病毒核酸进行扩增,发现具有良好的特异性,显示建立套式RT-PCR具有高效、快速、特异、灵敏的特点,可用于口岸WNV的检测和监测。 展开更多
关键词 西尼罗病毒 套式RT-PCR 特异性 灵敏度
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用套式RT-PCR检测兰州地区肺炎患儿下呼吸道分泌物中的RSV和HPIV-3 预览 被引量:2
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作者 白慕群 安红 +1 位作者 包红 周旭 《微生物学免疫学进展》 2007年第1期 40-42,共3页
为了调查兰州地区肺炎患儿中RSV和HPIV-3的感染状况,分别在RSV的G蛋白基因的保守序列和HPIV-3的HN基因的保守序列处,设计了套式引物,采用套式RT.PCR的方法检测了60份兰州地区肺炎患儿下呼吸道分泌物样本,结果显示,60份样本中RsV... 为了调查兰州地区肺炎患儿中RSV和HPIV-3的感染状况,分别在RSV的G蛋白基因的保守序列和HPIV-3的HN基因的保守序列处,设计了套式引物,采用套式RT.PCR的方法检测了60份兰州地区肺炎患儿下呼吸道分泌物样本,结果显示,60份样本中RsV阳性为14例(23%),HPW-3阳性为12例(20%)。并分别随机对其中的5份样本的扩增产物进行了基因序列测定,结果5份RSV阳性样本与参考株序列的同源性均大于97%,5份HPIV-3阳性样本与参考株序列的同源性大于97%。表明兰州地区下呼吸道感染患儿中,RSv和HPW-3是常见的 展开更多
关键词 套式RT-PCR 呼吸道合胞病毒 副流感病毒3型 检测
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两种PCR方法检测白纹伊蚊体内登革热2型病毒的比较研究 预览 被引量:2
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作者 段金花 林立丰 +3 位作者 蔡松武 卢文成 易建荣 郑夔 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期 489-491,共3页
目的比较TaqMan MGB探针实时聚合酶链反应(TaqMan MGB Real—time PCR)和巢式反转录聚合酶链反应(巢式RT—PCR)检测白纹伊蚊体内登革热病毒(Dengue virus,DV)的敏感性差异,建立一种敏感、特异、重复性好的DV鉴定方法。方法在实... 目的比较TaqMan MGB探针实时聚合酶链反应(TaqMan MGB Real—time PCR)和巢式反转录聚合酶链反应(巢式RT—PCR)检测白纹伊蚊体内登革热病毒(Dengue virus,DV)的敏感性差异,建立一种敏感、特异、重复性好的DV鉴定方法。方法在实验室使雌性白纹伊蚊人工感染Den-2,在50只/组情况下,设不同的感染蚊虫浓度(只/1000μl),利用TaqMan MGB Real—time PCR和巢式RT—PCR检测,根据荧光信号和电泳判断结果。结果二步法TaqMan MGB Real—time PCR可检测到标本中感染蚊虫的最低浓度为3只/1000μl,一步法TaqMan MGB Real—time PCR和巢式RT~PCR可检测到标本中感染蚊虫的最低浓度为5只/1000μl。结论二步法TaqMan MGB探针检测白纹伊蚊体内的DV敏感度高,特异性好,快速、科学,是白纹伊蚊携带DV指数较理想的监测方法。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 登革热2型病毒 TAQMAN MGB探针 实时聚合酶链反应 巢式反转录聚合酶链反应
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μ型阿片受体的克隆及序列分析 预览
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作者 孙巧玲 陈京 白波 《泰山医学院学报》 2005年第1期 1-3,共3页
目的为实现人μ型阿片受体在哺乳动物细胞中的表达以及研究其生物学特性、下游基因表达及功能研究,克隆了人全长μ型受体cDNA.方法从人脑组织中提取总RNA,通过逆转录巢式PCR,扩增μ受体全长cDNA.克隆至pMD18-T载体中,并进行了酶切、PCR... 目的为实现人μ型阿片受体在哺乳动物细胞中的表达以及研究其生物学特性、下游基因表达及功能研究,克隆了人全长μ型受体cDNA.方法从人脑组织中提取总RNA,通过逆转录巢式PCR,扩增μ受体全长cDNA.克隆至pMD18-T载体中,并进行了酶切、PCR鉴定及测序分析.结果获得大小1229 bp大小的μ受体全长cDNA基因,并构建到载体中,为研究受体信号转导下游基因的表达奠定理论基础.结论利用巢式RT-PCR法成功克隆了的μ受体全长cDNA序列,构建了pT-MD/hμR质粒. 展开更多
关键词 μ型阿片受体cDNA 巢式PCR 重组pT-MD/hμR质粒
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套式RT-PCR检测猪繁殖和呼吸综合征病毒的研究 预览 被引量:5
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作者 赵耘 张广州 +2 位作者 秦玉明 宁宜宝 王琴 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期 77-80,共4页
参照ATCC VR-2332株及LV株保守区段设计了3条引物,以此建立了检测猪繁殖和呼吸综合征病毒的套式RT-PCR方法.利用其分别对ATCC VR-2332株、LV株及B13株进行套式RT-PCR,结果从3个不同地区分离的毒株中均能特异性的扩增出相应的片段,大小... 参照ATCC VR-2332株及LV株保守区段设计了3条引物,以此建立了检测猪繁殖和呼吸综合征病毒的套式RT-PCR方法.利用其分别对ATCC VR-2332株、LV株及B13株进行套式RT-PCR,结果从3个不同地区分离的毒株中均能特异性的扩增出相应的片段,大小分别约为430bp(预期片段为430bp)、410bp(预期片段为413bp)及410bp(预期片段为413bp),而3个非PRRSV的病毒(猪瘟病毒、细小病毒及伪狂犬病毒)均未扩增出相应的片段.其敏感性可达到10-2TCID50,比一步法RT-PCR方法敏感性提高了10000倍.本方法的建立使猪繁殖和呼吸综合征病毒的检测更为敏感、快捷及准确. 展开更多
关键词 套式RT-PCR 特异性 敏感性 一步法RT-PCR
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RT—PCR对SARS患者粪便SARS冠状病毒RNA的连续测定及其临床意义 预览 被引量:3
15
作者 任翊 丁惠国 +6 位作者 吴清发 陈唯军 陈东 包志英 杨玲 赵春惠 汪健 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期 368-371,共4页
目的采用RT-PCR方法,观察SARS冠状病毒(SARS-associated coronavirus,SARS-CoV)在SARS患者粪便中的排出状况.方法以2003年5月16日至23日在本院住院的46例临床确诊SARS患者为研究对象,连续留取粪便标本共103份,提取RNA后采用14对SARS-Co... 目的采用RT-PCR方法,观察SARS冠状病毒(SARS-associated coronavirus,SARS-CoV)在SARS患者粪便中的排出状况.方法以2003年5月16日至23日在本院住院的46例临床确诊SARS患者为研究对象,连续留取粪便标本共103份,提取RNA后采用14对SARS-CoV特异性引物,对每份标本同时进行7次套式RT-PCR扩增,只要有1次RT-PCR结果阳性即判定该标本为阳性.结果在46例患者中,有17例(37.0%)患者的粪便SARS-CoV套式RT-PCR扩增结果为阴性,29例(63.0%)为阳性.粪便SARS-CoV RT-PCR结果阳性时SARS患者的病程为(31.76±10.78)d(12~64d),其中最长1例为64d,系2次连续留取的粪便标本均为阳性、每次标本用2个不同引物RT-PCR扩增结果均为阳性.结论SARS-CoV在患者粪便中排出的时间可长达发病后64d,平均32 d,对SARS患者恢复期的消毒隔离应该予以足够的重视. 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 SARS冠状病毒 套式RT-PCR
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RT-PCR应用于SARS的特异性实验室诊断 预览 被引量:3
16
作者 严延生 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第4期 1-3,共3页
本文报告建立套式RT-PCR应用于SARS的检测.同时采集血液、咽拭子及漱口液作为检测标本.结果从福建报告的3例SARS临床诊断病例中检出SARS病毒基因片段,证实其为SARS病毒感染者,未发现其它可疑或观察病例标本中含该基因.因此认为RT-PCR可... 本文报告建立套式RT-PCR应用于SARS的检测.同时采集血液、咽拭子及漱口液作为检测标本.结果从福建报告的3例SARS临床诊断病例中检出SARS病毒基因片段,证实其为SARS病毒感染者,未发现其它可疑或观察病例标本中含该基因.因此认为RT-PCR可用于SARS的特异性实验室诊断. 展开更多
关键词 RT-PCR SARS 实验室诊断 检测
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RT-PCR测定SARS患者粪便及漱口液中SARS CoV RNA及其临床意义 被引量:3
17
作者 任翊 丁惠国 +6 位作者 吴清发 陈唯军 陈东 任珍 杨玲 赵春惠 汪健 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期 930-932,共3页
目的对46例SARS患者206份粪便及漱口液标本,检测SARS CoV,探讨SARS患者恢复期排毒的情况.方法对住院的46例临床确诊SARS病人,留取粪便及同期漱口液各103份,提取RNA后利用14对SARS CoV特异性引物,对每份标本同时进行7次套式RT-PCR扩增,凡... 目的对46例SARS患者206份粪便及漱口液标本,检测SARS CoV,探讨SARS患者恢复期排毒的情况.方法对住院的46例临床确诊SARS病人,留取粪便及同期漱口液各103份,提取RNA后利用14对SARS CoV特异性引物,对每份标本同时进行7次套式RT-PCR扩增,凡1次RT-PCR结果阳性,该标本即判定为阳性.结果103份粪便标本中,63份(61.2%)SARS CoV阴性,40份(38.8%)阳性,阳性者的病程为30.75d±11.27d(12 d~64d).103份漱口液标本中,81份(78.6%)阴性,22份(21.4%)阳性,阳性者的病程为29.82 d±12.46 d(12 d~64d).病程最长64d时粪便及漱口液中依然发现SARS CoV病原学依据.患者同期粪便及漱口液RT-PCR检测结果一致的有61份(59.2%),不一致的有42份(40.8%).结论SARS患者恢复期排毒可长达64d,对SARS患者恢复期的消毒隔离应该得到足够的重视.SARS患者粪便SARS CoV RNA阳性,而同期漱口液SARS CoV RNA阴性,提示SARS CoV可以直接经消化道传播. 展开更多
关键词 RT-PCR 测定 SARS 粪便 漱口液 SARS CoV RNA 非典型肺炎
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白7原核表达载体的构建 预览 被引量:1
18
作者 邱惠 陈勇 韦罗生 《武汉科技大学学报:自然科学版》 CAS 2002年第3期 310-313,共4页
胰岛素样生长因子结合蛋白7(简称IGFBP7)广泛存在于多种正常的组织中,但在相应的肿瘤细胞中的含量极微.试验表明,它在肿瘤发生的不同阶段抑制其生长.采用RT-PCR和Nest-PCR方法,从正常的小鼠脾脏中扩增得到IGFBP7 cDNA片段,测序正确后,... 胰岛素样生长因子结合蛋白7(简称IGFBP7)广泛存在于多种正常的组织中,但在相应的肿瘤细胞中的含量极微.试验表明,它在肿瘤发生的不同阶段抑制其生长.采用RT-PCR和Nest-PCR方法,从正常的小鼠脾脏中扩增得到IGFBP7 cDNA片段,测序正确后,克隆于融合表达载体pRSETC中构建原核表达重组体. 展开更多
关键词 小鼠 原核表达载体 胰岛素样生长因子结合蛋白7 RT-PCR Nest-PCR 载体构建 重组原粒
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鸡传染性法氏囊病病毒核酸A片段RT-PCR扩增及序列测定 预览 被引量:1
19
作者 侯继波 何家惠 +2 位作者 陈溥言 王继春 罗函禄 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期,共3页
本文对鸡传染性法氏囊病毒JS-20株核酸A片段分3段进行巢式RT-PCR扩增,用琼脂糖凝胶电泳从扩增产物中精制回收目的 cDNA片段,核苷酸序列测定平均每个反应测 550bp,每个cDNA片段从两个不同方向进行序列测定... 本文对鸡传染性法氏囊病毒JS-20株核酸A片段分3段进行巢式RT-PCR扩增,用琼脂糖凝胶电泳从扩增产物中精制回收目的 cDNA片段,核苷酸序列测定平均每个反应测 550bp,每个cDNA片段从两个不同方向进行序列测定,以相互验证。将多个测序反应的结果拼接,得到长为 3130bp的核酸序列。 展开更多
关键词 IBDV JS-20 巢式RT-PCR 序列测定
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应用套式PCR分段扩增犬瘟热病毒融合蛋白的全基因 预览 被引量:2
20
作者 李金中 夏咸柱 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期 124-125,共2页
为研究犬瘟热病毒融合蛋白各段功能,根据CDV Onderstepoort弱毒株的融合蛋白基因序列,设计合成了10条寡聚核苷酸引物。对此10条引物进行不同的配对,将1株犬瘟热疫苗弱毒株细胞培养物的总RNA进行了RT-P... 为研究犬瘟热病毒融合蛋白各段功能,根据CDV Onderstepoort弱毒株的融合蛋白基因序列,设计合成了10条寡聚核苷酸引物。对此10条引物进行不同的配对,将1株犬瘟热疫苗弱毒株细胞培养物的总RNA进行了RT-PCR扩增,利用1次PCR扩增得到了7个基因片段,最长的达1669bp,最短的为314bp,应用套式或半套工PCR,扩增得到了能覆盖整个融合蛋白基因的8个片段。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 融合蛋白基因 RT-PCR 套式PCR
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