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Exogenous neural stem cell transplantation for cerebral ischemia 预览
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作者 Ling-Yi Liao Benson Wui-Man Lau +1 位作者 Dalinda Isabel Sánchez-Vida?a Qiang Gao 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第7期1129-1137,共9页
Cerebral ischemic injury is the main manifestation of stroke,and its incidence in stroke patients is 70–80%.Although ischemic stroke can be treated with tissue-type plasminogen activator,its time window of effectiven... Cerebral ischemic injury is the main manifestation of stroke,and its incidence in stroke patients is 70–80%.Although ischemic stroke can be treated with tissue-type plasminogen activator,its time window of effectiveness is narrow.Therefore,the incidence of paralysis,hypoesthesia,aphasia,dysphagia,and cognitive impairment caused by cerebral ischemia is high.Nerve tissue regeneration can promote the recovery of the aforementioned dysfunction.Neural stem cells can participate in the reconstruction of the damaged nervous system and promote the recovery of nervous function during self-repair of damaged brain tissue.Neural stem cell transplantation for ischemic stroke has been a hot topic for more than 10 years.This review discusses the treatment of ischemic stroke with neural stem cells,as well as the mechanisms of their involvement in stroke treatment. 展开更多
关键词 nerve REGENERATION STEM CELL therapy NEURAL STEM cells CELL transplantation ischemic stroke cerebral ischemia NEUROPLASTICITY functional recovery NEURAL REGENERATION
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Neural-like cells from adipose-derived stem cells for cavernous nerve injury in rats 预览
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作者 Cheng-Cheng Ying1 Mei Yang +3 位作者 Yong Wang Yong-Lian Guo Wan-Li Hu Xin-Min Zheng 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第6期1085-1090,共6页
Although the remaining nerve tissue can regenerate and partly restore erectile function when the cavernous nerve is compressed/severed and function lost,the limited regenerative ability of these nerve tissues often fa... Although the remaining nerve tissue can regenerate and partly restore erectile function when the cavernous nerve is compressed/severed and function lost,the limited regenerative ability of these nerve tissues often fails to meet clinical needs.Adipose-derived stem cells are easy to obtain and culture,and can differentiate into neural cells.Their proliferation rate is easy to control and they may be used to help restore injured cavernous nerve function.Sprague-Dawley male rats(n=45)were equally randomized into three groups:fifteen rats as a sham-operated group,fifteen rats as a bilateral nerve crush(BINC)group(with no further intervention),fifteen rats as a BINC with intracavernous injection of one million neural-like cells from adipose-derived stem cells(NAS)(BINC+NAS)group.After 4 weeks,erectile function was assessed by stimulating the cavernous body.The number of myelinated axons in the dorsal cavernous nerve was determined by toluidine blue staining.The area of neuronal nitric oxide synthase-positive fibers in the dorsal penile nerve was measured by immunohistochemical staining.Masson staining was used to analyze the ratio of smooth muscle to collagen in penile tissue.The results demonstrate that maximal intracavernous pressure,the ratio of maximal intracavernous pressure to mean arterial pressure,the numbers of myelinated axons and neuronal nitric oxide synthase-positive fibers in the dorsal penile nerve,and the ratio of smooth muscle to collagen could be increased after cell transplantation.These findings indicate that neural-like cells from adipose-derived stem cells can effectively alleviate cavernous nerve injury and improve erectile function.All animal experiments were approved by the Animal Ethics Committee of Huazhong University of Science and Technology,China(approval No.2017-1925)on September 15,2017. 展开更多
关键词 NERVE REGENERATION adipose-derived NEURAL stem CELLS corpus cavernosum CAVERNOUS NERVE erectile dysfunction radical prostatectomy neurons cell differentiation NEURAL REGENERATION
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法舒地尔干预原代神经干细胞的增殖与分化 预览
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作者 孙婉莹 唐瑛 陈美娟 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第9期1336-1341,共6页
背景:受损大脑和脊髓的自我修复能力有限,寻找促进神经干细胞增殖与分化的潜在治疗剂,对神经系统疾病的干细胞治疗具有重要意义。目的:探讨法舒地尔对原代神经干细胞增殖及分化的影响及其可能机制。方法:体外分离、培养15 d龄胎鼠脑组... 背景:受损大脑和脊髓的自我修复能力有限,寻找促进神经干细胞增殖与分化的潜在治疗剂,对神经系统疾病的干细胞治疗具有重要意义。目的:探讨法舒地尔对原代神经干细胞增殖及分化的影响及其可能机制。方法:体外分离、培养15 d龄胎鼠脑组织获得神经干细胞,免疫荧光检测细胞中Nestin的表达;以不同浓度(50,100,200μmol/L)法舒地尔干预神经干细胞24,48,72 h,MTT检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率;进一步应用凋亡抑制剂、铁死亡抑制剂、自噬抑制剂、坏死抑制剂、凋亡诱导剂、铁死亡诱导剂干预神经干细胞,MTT检测细胞增殖率,生化法检测细胞丙二醛水平;最后,应用200μmol/L法舒地尔干预神经干细胞10 d,Western blot和免疫荧光检测神经干细胞中Nestin、DCX、MAP-2、GFAP蛋白的表达。结果与结论:①分离培养的原代神经干细胞表达Nestin;②随着法舒地尔浓度升高及作用时间延长,神经干细胞的增殖率逐渐增高(P<0.05);③凋亡抑制剂、铁死亡抑制剂可提高神经干细胞的增殖率(P<0.05);④法舒地尔可提高凋亡诱导剂和铁死亡诱导剂干预的神经干细胞的增殖率(P<0.05);⑤法舒地尔和铁死亡抑制剂均能降低神经干细胞中丙二醛水平,铁死亡诱导剂则使神经干细胞中丙二醛水平升高(P<0.05);⑥经法舒地尔处理后,神经干细胞中DCX和GFAP蛋白的表达升高,Nestin的表达降低(P<0.05);⑦结果表明,法舒地尔可通过抑制凋亡与铁死亡提高神经干细胞的存活,并能促进神经干细胞增殖及向神经元样细胞与神经胶质细胞分化。 展开更多
关键词 神经干细胞 法舒地尔 神经干细胞增殖 神经干细胞凋亡 神经元样细胞 铁死亡 神经胶质细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞分化 组织工程
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ICR小鼠神经干细胞的体外培养与鉴定
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作者 孙孟军 郭建美 +3 位作者 周更苏 董泽飞 郑春贵 曹翠丽 《河北医科大学学报》 CAS 2019年第3期258-262,共5页
目的建立一种简便、易行的ICR小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)体外分离培养方法。方法分离胚胎ICR小鼠的脑组织,用无血清培养基悬浮培养;倒置显微镜观察细胞形态;免疫细胞化学染色检测特异性标记物神经上皮干细胞蛋白(巢蛋白,ne... 目的建立一种简便、易行的ICR小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)体外分离培养方法。方法分离胚胎ICR小鼠的脑组织,用无血清培养基悬浮培养;倒置显微镜观察细胞形态;免疫细胞化学染色检测特异性标记物神经上皮干细胞蛋白(巢蛋白,nestin)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(neuronal specific enolase,NSE);CCK8法绘制生长曲线。结果从ICR小鼠胚脑组织分离的细胞,在无血清培养液中以神经球形式扩增,并可经消化后连续传代。生长曲线显示细胞倍增时间为2 d。神经球内nestin阳性细胞率为(72.0±5.5)%。诱导分化后可观察到2种形态的细胞:一种具有长而粗的突起,交织成网,且GFAP阳性;另一种为胞体呈多边形、具有数个细长突起,NSE阳性。结论本方法培养的NSCs纯度高、增殖快,具有多向分化潜能,值得推广应用。 展开更多
关键词 神经干细胞 细胞培养技术 小鼠
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神经干细胞与嗅鞘细胞联合移植对PD大鼠运动及非运动行为的影响 预览
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作者 周囡囡 王友翠 +1 位作者 黄玉菊 谢俊霞 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2019年第1期17-20,24共5页
目的 探讨神经干细胞(NSCs)与嗅鞘细胞(OECs)联合移植对帕金森病(PD)大鼠运动行为及非运动行为的影响。方法 取孕11~12d胎鼠中脑组织培养NSCs并鉴定,取出生1~3d乳鼠嗅球培养OECs并鉴定。采用内侧前脑束与黑质注射6-羟多巴胺(6-OHDA)的... 目的 探讨神经干细胞(NSCs)与嗅鞘细胞(OECs)联合移植对帕金森病(PD)大鼠运动行为及非运动行为的影响。方法 取孕11~12d胎鼠中脑组织培养NSCs并鉴定,取出生1~3d乳鼠嗅球培养OECs并鉴定。采用内侧前脑束与黑质注射6-羟多巴胺(6-OHDA)的方法制备PD大鼠模型。将大鼠随机分为Sham组(生理盐水代替6-OHDA)、PD对照组、NSCs移植组、OECs移植组、NSCs与OECs联合移植组。移植1周后各组进行阿扑吗啡诱导的旋转实验和旷场实验。结果 与PD对照组相比,联合移植组旋转实验中旋转圈速更低(F=23.48,q=3.90,P<0.05),旷场实验中运动距离更长(F=4.59,q=4.16,P<0.05),旷场中心区域活动时间和周围区域活动时间比值也更低(F=3.72,q=4.65,P<0.05);NSCs和OECs单独移植组上述指标与PD对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 胚胎中脑组织来源的NSCs与OECs联合移植可以改善PD大鼠的运动及非运动能力。 展开更多
关键词 帕金森病 神经干细胞 嗅鞘细胞 细胞移植 大鼠
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Drosophila homolog of the intellectual disability-related long-chain acyl-CoA synthetase 4 is required for neuroblast proliferation
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作者 Mingyue Jia Danqing Meng +3 位作者 Mo Chen Tingting Li Yong Q. Zhang Aiyu Yao 《遗传学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第1期5-17,共13页
Mutations in long-chain acyl-CoA synthetase 4 (ACSL4) are associated with non-syndromic X-linked intellectual disability (ID). However, the neural functions of ACSL4 and how loss of ACSL4 leads to ID remain largely un... Mutations in long-chain acyl-CoA synthetase 4 (ACSL4) are associated with non-syndromic X-linked intellectual disability (ID). However, the neural functions of ACSL4 and how loss of ACSL4 leads to ID remain largely unexplored. We report here that mutations in Acsl, the Drosophila ortholog of human ACSL3 and ACSL4, result in developmental defects of the mushroom body (MB), the center of olfactory learning and memory. Specifically, Acsl mutants show fewer MB neuroblasts (Nbs) due to reduced proliferation activity and premature differentiation. Consistently, these surviving Nbs show reduced expression of cyclin E, a key regulator of the G1-to S-phase cell cycle transition, and nuclear mislocalization of the transcriptional factor Prospero, which is known to repress self-renewal genes and activate differentiating genes. Furthermore, RNA-seq analysis reveals downregulated Nb-and cell-cyclerelated genes and upregulated neuronal differentiation genes in Acsl mutant Nbs. As Drosophila Acsl and human ACSL4 are functionally conserved, our findings provide novel insights into a critical and previously unappreciated role of Acsl in neurogenesis and the pathogenesis of ACSL4-related ID. 展开更多
关键词 ACSL4 DROSOPHILA MUSHROOM body NEUROBLAST Neural stem cell PREMATURE differentiation
短暂性脑缺血对C57BL/6小鼠海马区神经发生的影响
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作者 孙文青 姚子昂 +4 位作者 金毅然 马海滨 牛建国 何仲义 梁雪云 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期175-183,共9页
目的:利用小鼠急性全脑缺血模型观察急性脑缺血对海马神经发生的影响。方法:将C57BL/6雄性小鼠(6~8周)随机分为脑缺血组和假手术组。采用双侧颈动脉结扎法建立短暂性全脑缺血模型;利用HE染色观察脑缺血后不同时间(1周,2周)海马区... 目的:利用小鼠急性全脑缺血模型观察急性脑缺血对海马神经发生的影响。方法:将C57BL/6雄性小鼠(6~8周)随机分为脑缺血组和假手术组。采用双侧颈动脉结扎法建立短暂性全脑缺血模型;利用HE染色观察脑缺血后不同时间(1周,2周)海马区形态学变化;采用免疫组织荧光染色观察缺血后海马区caspase-3表达变化;利用Ed U染色观察缺血3 d、7 d、14 d和28 d后,海马区神经干细胞增殖变化;利用免疫组织荧光染色观察缺血3 d、7 d、14 d和28 d后,海马区nestin、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及少突胶质细胞特异蛋白(OSP)等蛋白表达变化,判断脑缺血对海马区神经干细胞分化的影响。结果:脑缺血7 d后,小鼠海马CA1区神经元数目减少,caspase-3阳性细胞增加(P〈0.05)。海马DG区Ed U阳性细胞数量在第3 d开始增加(P〈0.05),第1周达到峰值(P〈0.05);海马CA1区Ed U阳性细胞数量在缺血后1周开始增加(P〈0.05),缺血2周后逐渐降低。海马DG区nestin、GFAP及OSP阳性细胞数量均在缺血3 d后开始增加(P〈0.05),缺血1周后达到峰值(P〈0.05),2周后逐渐降低。海马CA1区GFAP及OSP阳性细胞数量在缺血3 d后开始增加(P〈0.05),缺血1周后达到峰值(P〈0.05),2周后逐渐降低。结论:脑缺血激活了海马DG区神经干细胞,使干细胞增殖,并向神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞分化,同时逐渐向CA1区迁移。 展开更多
关键词 脑缺血 神经干细胞 神经发生 海马 神经干细胞分化
不同来源神经干细胞移植治疗大鼠脑缺血损伤 预览
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作者 钟波 柳霞 吴伟 《中国组织工程研究》 北大核心 2018年第21期3349-3356,共8页
背景:脑缺血导致神经功能障碍的根本原因是神经元损伤,促进神经元再生是神经功能恢复的关键,而内源性神经干细胞的修复作用有限,外源性神经干细胞移植为脑缺血后组织重构与功能恢复带来希望,但种子细胞的选择仍缺乏系统的比较研究... 背景:脑缺血导致神经功能障碍的根本原因是神经元损伤,促进神经元再生是神经功能恢复的关键,而内源性神经干细胞的修复作用有限,外源性神经干细胞移植为脑缺血后组织重构与功能恢复带来希望,但种子细胞的选择仍缺乏系统的比较研究。目的:比较3种不同来源神经干细胞移植治疗大鼠脑缺血损伤的效果。方法:分离培养SD大鼠脂肪间充质干细胞、骨髓间充质干细胞和皮肤来源的诱导性多能干细胞,在体外进行神经向诱导分化7 d检测神经干细胞的转化率。取脑缺血损伤模型造模成功的100只SD大鼠,随机分为模型组、骨髓间充质干细胞来源组、诱导性多能干细胞来源组、脂肪间充质干细胞来源组和磷酸盐缓冲液组,每组20只,移植相应的细胞悬液或磷酸盐缓冲液;另随机取20只SD大鼠为假手术组,20只SD大鼠为对照组,不进行细胞移植。细胞移植后1周和4周进行各项指标检测。结果与结论:①体外诱导分化7 d后,诱导性多能干细胞来源的神经干细胞的转化率明显高于脂肪间充质干细胞和骨髓间充质干细胞,差异有显著性意义(P 〈 0.01);②移植1周和4周后,移植不同来源神经干细胞的大鼠神经元凋亡数量和脑梗死体积明显小于磷酸盐缓冲液组和模型组(P 〈 0.05),诱导性多能干细胞来源组神经功能缺损评分、脑梗死体积和神经元凋亡数量明显低于脂肪间充质干细胞来源组和骨髓间充质干细胞来源组(P 〈 0.05);③移植4周时,各组大鼠神经功能缺损评分、神经元凋亡数量和脑梗死体积明显低于移植1周(P 〈 0.01);④移植神经干细胞3组大鼠纹状体神经元胞质内尼氏体数量较对照组和假手术组明显增多;⑤研究结果表明,3种来源的神经干细胞均能明显改善神经缺损症状、缩小缺血区域的脑梗死面积、减少神经元变性和凋亡� 展开更多
关键词 神经干细胞 脂肪间充质干细胞 骨髓间充质干细胞 诱导性多能干细胞 缺血性脑卒中 干细胞 间质干细胞 骨髓 脂肪组织 诱导多功能干细胞 细胞分化 脑梗塞 组织工程
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miR-26b对不同分化状态神经干细胞系C17.2向肝细胞生长因子趋化迁移的影响观察 预览
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作者 熊英 汪显耀 +4 位作者 秦臻 田羽 王岚 潘际刚 许键炜 《山东医药》 2018年第43期1-5,共5页
目的 观察微小RNA-26b(miR-26b)对不同分化状态神经干细胞(NSCs)系C17.2向肝细胞生长因子(HGF)趋化迁移的影响。方法 ①HGF刺激下不同分化状态NSCs细胞miR-26b检测 取C17.2细胞,置于含N2和F12的诱导分化培养基中诱导分化。将细胞分为A、... 目的 观察微小RNA-26b(miR-26b)对不同分化状态神经干细胞(NSCs)系C17.2向肝细胞生长因子(HGF)趋化迁移的影响。方法 ①HGF刺激下不同分化状态NSCs细胞miR-26b检测 取C17.2细胞,置于含N2和F12的诱导分化培养基中诱导分化。将细胞分为A、B、C、D组,A、B、C组分别于诱导分化12、24、72 h三个时间点终止诱导分化,D组为诱导分化前的细胞。采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞miR-26b。将诱导分化培养基更换为含25 ng/mL的HGF完全培养基,孵育5 h,每组均设相应对照,予无HGF的完全培养基孵育5 h。检测各组细胞miR-26b。②抑制、过表达miR-26b对C17.2细胞向HGF的趋化迁移的影响 取对数生长期C17.2细胞,分为两组,分别转染miR-26b mimic(促进miR-26b表达)、miR-26b NC(对照),将完全生长培养基更换为含N2和F12的诱导分化培养基,分别于诱导分化0、12、24、72 h时终止诱导分化,采用Transwell实验测算各分化时间细胞的迁移细胞率。取对数生长期C17.2细胞,分为两组,分别转染miR-26b inhibitor(抑制miR-26b表达)、miR-26b乱序对照(ConⅠ),将完全生长培养基更换为含N2和F12的诱导分化培养基,分别于诱导分化0、12、24、72 h时终止诱导分化,采用Transwell实验测算各分化时间细胞的迁移细胞率。结果 A、B、C、D组细胞miR-26b相对表达量分别为1.16±0.07、1.39±0.11、2.30±0.11、1.00±0.03,与D组比较,B、C组胞miR-26b相对表达量升高,P均<0.05。A、B、C、D组HGF处理5 h时细胞miR-26b相对表达量分别为2.02±0.43、2.28±0.35、2.50±0.41、2.21±0.23,A、B、C、D组未经处理细胞miR-26b相对表达量分别为1.21±0.12、1.47±0.21、2.30±0.20、1.00±0.04,与未经处理者比较,HGF处理5 h时A、B、D组细胞miR-26b相对表达量均升高,P均<0.05。与转染NC者比较,分化0、12、24、72 h时转染miR-26b mimic的细胞迁移率均升高(P均<0.05)。与转染ConⅠ者比较,分化0、12、24、72 h时转染miR-26b inhibito 展开更多
关键词 微小RNA 微小RNA-26b 神经干细胞 细胞分化 肝细胞生长因子 细胞趋化 细胞迁移
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体外长期培养的人神经干细胞对大鼠帕金森病模型的药效初探 预览
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作者 陈世明 董文心 +8 位作者 章瑾 宣丹英 顾丰华 毛钟鸣 陈婕美 陈嘉 刘翔 陈鹏翾 赵烨 《中国医药生物技术》 2018年第4期339-343,共5页
目的初步探讨体外长期连续培养的人神经干细胞(hNSCs)对大鼠帕金森病(PD)模型的药效。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射大鼠脑内黑质体部位,毁损黑质多巴胺能神经元建立PD大鼠模型。成模大鼠随机分为对照组、NSC混合、NSC高剂量、NSC... 目的初步探讨体外长期连续培养的人神经干细胞(hNSCs)对大鼠帕金森病(PD)模型的药效。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射大鼠脑内黑质体部位,毁损黑质多巴胺能神经元建立PD大鼠模型。成模大鼠随机分为对照组、NSC混合、NSC高剂量、NSC低剂量四组,行脑内同侧纹状体部位移植hNSCs。行为学实验观察治疗效果,免疫荧光染色鉴定植入纹状体的hNSCs存活和分化情况。结果细胞移植后观测和检查:①NSC高剂量组在移植3个月后,大鼠的单侧旋转症状与移植前比较有显著的改善(P<0.05);NSC低剂量组大鼠旋转症状也有改善,但与移植前比较无显著性差异(P>0.05);NSC混合组大鼠旋转症状明显改善,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。②6-OHDA能明显损伤大鼠脑内黑质部位,使其神经元数量减少;神经干细胞纹状体部位移植后可见移植的干细胞分化为神经元。结论PD模型大鼠纹状体部位移植的hNSCs可分化为神经元,且对PD模型大鼠旋转症状有明显的改善。 展开更多
关键词 神经干细胞 干细胞移植 帕金森病 纹状体 长期连续培养
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胆碱能信号调节脑梗死后自体神经干细胞分化 被引量:1
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作者 王建平 刘贤良 +6 位作者 付晓杰 张帝 鲁争芳 殷椿茂 柯俊吉 满江 李思佳 《实用医学杂志》 北大核心 2018年第6期877-881,884共6页
目的探讨胆碱能信号对内源性神经干细胞(NSC)在脑梗死周围区分化的调节。方法将小鼠随机分为假手术+溶剂组、脑梗死+溶剂组、脑梗死+多奈哌齐组、脑梗死+阿托品组,每组25只。线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。术后1、7、14... 目的探讨胆碱能信号对内源性神经干细胞(NSC)在脑梗死周围区分化的调节。方法将小鼠随机分为假手术+溶剂组、脑梗死+溶剂组、脑梗死+多奈哌齐组、脑梗死+阿托品组,每组25只。线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。术后1、7、14、21 d进行神经功能缺损评分,第3天测脑含水量,第14、28天免疫荧光观察梗死周围区或相应位置NeuN/BrdU、CNPase/BrdU、GFAP/BrdU阳性细胞数。结果小鼠脑梗死后脑含水量增高(P〈0.05),多奈哌齐处理可降低其脑含水量和神经功能缺损评分(P〈0.05);梗死后梗死周围区NeuN/BrdU、CNPase/BrdU、GFAP/BrdU阳性细胞增多(P〈0.05);对比脑梗死+溶剂组、脑梗死+多奈哌齐组NeuN/BrdU、CNPase/BrdU、GFAP/BrdU阳性细胞增多(P〈0.05),脑梗死+阿托品组NeuN/Br-dU、CNPase/BrdU阳性细胞减少(P〈0.05)。结论胆碱能信号促进NSCs在脑梗死周围区向神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞共同分化,减轻脑水肿,促进脑梗死后神经功能恢复。 展开更多
关键词 脑梗死 胆碱能信号 神经干细胞 神经分化
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Notch1在全反式维甲酸诱导的神经干细胞分化中的作用
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作者 徐加明 马爱华 +1 位作者 陈娜 韩波 《山东大学学报:医学版》 北大核心 2018年第10期72-78,85共8页
目的探究Notch1在全反式维甲酸诱导的神经干细胞分化中的作用,揭示其对神经管发育的影响。方法免疫荧光检测神经干细胞标记物--巢蛋白(Nestin)、神经元标记物--神经丝蛋白(NF)、星型胶质细胞标记物--神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及少突... 目的探究Notch1在全反式维甲酸诱导的神经干细胞分化中的作用,揭示其对神经管发育的影响。方法免疫荧光检测神经干细胞标记物--巢蛋白(Nestin)、神经元标记物--神经丝蛋白(NF)、星型胶质细胞标记物--神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及少突胶质细胞标记物--半乳糖脑苷脂(GALC)及Notch1在上述细胞中的分布。Western blotting检测神经干细胞中Notch1、NF、GFAP、GALC分别在普通分化培养基和全反式维甲酸培养基(ATRA)中1、3、5、7 d的含量。神经干细胞分为4组:将普通分化培养基设为A组,普通分化培养基+DMSO组设为B组,普通分化培养基+DMSO+25μmol/Lγ-内分泌酶抑制剂(γSI)组设为C组,普通分化培养基+DMSO+50μmol/LγSI设为D组,Western blotting检测各组细胞中Notch1含量。结果免疫荧光鉴定Nestin、NF、GFAP、GALC呈阳性,且在上述细胞胞膜上及胞质中有Notch1存在。普通分化培养基中Notch1在第5天较第1天明显增加,NF在第5天较第3天明显降低,GFAP与GALC含量在第5天较第1天明显下降。加入ATRA的普通分化培养基中,Notch1在第7天较第1天明显减少,而NF、GFAP、GALC在第7天较第1天明显增加。加入γSI后,Notch1胞内段NICD含量明显降低。结论 Notch1信号通路抑制神经干细胞分化,ATRA通过抑制Notch1促进神经干细胞的分化。 展开更多
关键词 神经管缺陷 全反式维甲酸 NOTCH1 神经干细胞
FAC对体外培养皮质神经干细胞分化率的影响 预览
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作者 焦玲玲 焦倩 +3 位作者 杜希恂 李勇 张培 姜宏 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2018年第2期172-175,179共5页
目的探讨不同浓度柠檬酸铁铵(FAC)对体外培养的大鼠皮质神经干细胞(NSCs)细胞活力和分化率影响。方法体外培养胚胎14-15d的皮质NSCs;应用CCK-8细胞增殖和毒性检测试剂盒检测经FAC处理后NSCs细胞活力的改变,免疫荧光染色检测Nestin、... 目的探讨不同浓度柠檬酸铁铵(FAC)对体外培养的大鼠皮质神经干细胞(NSCs)细胞活力和分化率影响。方法体外培养胚胎14-15d的皮质NSCs;应用CCK-8细胞增殖和毒性检测试剂盒检测经FAC处理后NSCs细胞活力的改变,免疫荧光染色检测Nestin、β-tubulinⅢ和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞,Western Blot检测NSCs的β-tubulinⅢ和GFAP蛋白表达水平。结果分离培养的皮质NSCs能增殖形成神经球,且经分化培养基诱导后可分化为β-tubulinⅢ或GFAP阳性的细胞。不同浓度(10-100 mg/L)的FAC均可降低细胞活力(F=55.86,q=9.154-15.880,P〈0.01)。不同浓度的FAC不影响NSCs的β-tubulinⅢ和GFAP蛋白表达水平(P〉0.05)。结论 FAC可降低皮质NSCs细胞活力,但不影响NSCs向神经元和星形胶质细胞的分化比例。 展开更多
关键词 神经干细胞 细胞活力 细胞分化
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补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞移植后凋亡相关基因表达的影响
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作者 廖亮英 蔡光先 周赛男 《湖南中医杂志》 2018年第4期132-135,共4页
目的:探讨补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞移植后凋亡相关基因Bag-1、Bcl-2表达的影响。方法:选取SD大鼠,复制局灶性脑缺血大鼠模型,按神经功能缺损评分进行分层,随机分为模型组、空白移植组、移植组、补阳传统饮片组、补阳... 目的:探讨补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞移植后凋亡相关基因Bag-1、Bcl-2表达的影响。方法:选取SD大鼠,复制局灶性脑缺血大鼠模型,按神经功能缺损评分进行分层,随机分为模型组、空白移植组、移植组、补阳传统饮片组、补阳超微饮片组,每组15只,分别于细胞移植后7、14、28d观察神经功能评分,采用补阳还五汤超微饮片与传统饮片予以干预,于相应时间点处死大鼠后采用免疫组化法检测凋亡基因Bag-1、Bcl-2的表达。结果:补阳传统饮片组、补阳超微饮片组大鼠神经功能得到明显恢复,Bag-1、Bcl-2蛋白表达上升显著,在各时间点(7、14、28d)与模型组比较差异均有统计学意义(P〈0.01或P〈0.05);补阳超微饮片组促神经功能积分的恢复及上调Bcl-2、Bag-1蛋白表达作用优于补阳传统饮片组,差异有统计学意义(P〈0.01或P〈0.05)。结论:补阳还五汤可促进神经功能的恢复,上调Bag-1、Bcl-2蛋白表达,且超微饮片的作用较传统饮片更加显著。 展开更多
关键词 局灶性脑缺血 神经干细胞 细胞移植 补阳还五汤 BAG-1 Bcl-2 实验研究
miR-124抑制Notch通路促进神经干细胞增殖与分化 预览
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作者 何频 郭富强 《中国组织工程研究》 北大核心 2018年第33期5344-5349,共6页
背景:如何在体外快速而高效的获得大量高纯度神经细胞是目前国内外细胞移植治疗领域所面临的一个巨大挑战和难题。目的:探讨miR-124是否通过调控Notch通路对神经干细胞增殖与分化产生影响。方法:分离胎鼠神经干细胞,利用免疫荧光法进行... 背景:如何在体外快速而高效的获得大量高纯度神经细胞是目前国内外细胞移植治疗领域所面临的一个巨大挑战和难题。目的:探讨miR-124是否通过调控Notch通路对神经干细胞增殖与分化产生影响。方法:分离胎鼠神经干细胞,利用免疫荧光法进行鉴定,采用RT-qPCR法检测神经干细胞分化1,2,4,7 d后miR-124表达情况,利用瞬时转染法分别过表达和干扰miR-124后,采用MTT法和免疫印迹法检测ki-67蛋白表达水平观察细胞增殖情况,采用RT-qPCR法和免疫印迹法检测β-tubulinⅢ表达水平观察细胞分化情况,采用RT-qPCR法检测Notch通路相关蛋白HES1,HEY2和CCND1的mRNA表达。结果与结论:①神经干细胞在向神经细胞分化过程中,miR-124的表达水平显著升高;②过表达miR-124不仅能够促进细胞增殖与分化,同时对Notch通路相关蛋白起到了抑制作用;③抑制miR-124表达起到了与上述相反的作用;④以上结果提示miR-124可能通过抑制Notch通路促进神经干细胞的增殖与分化。 展开更多
关键词 miR-124 神经干细胞 NOTCH 细胞增殖 细胞分化 干细胞 微RNAs 神经干细胞 受体 Notch 细胞增殖 细胞分化 组织工程
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补阳还五汤超微饮片对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞移植后Bcl-2、Bax表达的影响 预览 被引量:1
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作者 廖亮英 蔡光先 周赛男 《湖南中医药大学学报》 CAS 2018年第3期257-260,共4页
目的探讨补阳还五汤超微饮片对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞移植后凋亡相关基因Bcl-2、Bax的影响。方法将SD大鼠80只,雌雄各半,复制局灶性脑缺血大鼠模型,造模后按神经功能缺损评分进行分层,随机分为5组,每组15只,分别于移植后7 d... 目的探讨补阳还五汤超微饮片对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞移植后凋亡相关基因Bcl-2、Bax的影响。方法将SD大鼠80只,雌雄各半,复制局灶性脑缺血大鼠模型,造模后按神经功能缺损评分进行分层,随机分为5组,每组15只,分别于移植后7 d、14 d、28 d进行神经功能评分,采用补阳还五汤超微饮片与传统饮片予以干预,于相应时间点处死大鼠后采用免疫组化法检测凋亡基因Bcl-2、Bax。结果补阳还五汤能显著减轻神经功能缺损,Bcl-2、Bax在各时间点(7 d、14 d、28 d)表达与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),模型加移植加补阳还五汤超微饮片组上调Bcl-2、拮抗Bax表达的作用优于模型加移植加补阳还五汤传统饮片组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论补阳还五汤可调节脑缺血后Bcl-2、Bax的表达,是其促进神经功能恢复的可能机制之一,且超微饮片组的作用较传统饮片组更加显著。 展开更多
关键词 补阳还五汤 局灶性脑缺血 神经干细胞 细胞移植 Bcl-2 Bax
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血清对神经干细胞分化的影响
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作者 刘庆喜 吕丽慧 +3 位作者 孙贺 张金花 马文建 张同存 《中国修复重建外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期223-227,共5页
目的 探讨血清对神经干细胞分化过程的影响。方法 取孕14 d SD大鼠胚胎脑组织,分离培养神经干细胞并传代。取第3代细胞倒置相差显微镜下观察细胞形态,并行巢蛋白(Nestin)免疫细胞化学染色鉴定。将鉴定后的细胞分为A、B、C 3组,各组细... 目的 探讨血清对神经干细胞分化过程的影响。方法 取孕14 d SD大鼠胚胎脑组织,分离培养神经干细胞并传代。取第3代细胞倒置相差显微镜下观察细胞形态,并行巢蛋白(Nestin)免疫细胞化学染色鉴定。将鉴定后的细胞分为A、B、C 3组,各组细胞培养基除FBS浓度不同(分别为5%、1%、0)外,其余成分均一致。培养第8天,行活/死细胞染色观察细胞生长情况;培养第4、8天,行免疫细胞化学染色以及实时荧光定量PCR检测,观察胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、Ⅲ型β神经元微管蛋白(β-Ⅲ Tubulin)表达。结果 经细胞形态及免疫细胞化学染色鉴定培养细胞为神经干细胞。培养第8天,活/死细胞染色示A、B、C组细胞均无死亡现象。免疫细胞化学染色示,培养第4、8天,A、B、C组GFAP蛋白表达随FBS浓度降低而逐渐减弱,但β-Ⅲ Tubulin表达逐渐增强;各组第8天时染色均较第4天时增强。实时荧光定量PCR检测示,培养第4天和第8天3组间GFAP mRNA及β-ⅢTubulin mRNA相对表达量比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 血清能促进神经干细胞向胶质细胞分化,并减缓其向神经元分化速度,且血清浓度越低,该影响越小。 展开更多
关键词 神经干细胞 血清 细胞分化 胶质细胞 神经元 大鼠
神经干细胞微环境在神经再生中的作用
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作者 王珊 李萍萍 +1 位作者 王晓良 彭英 《药学学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期684-690,共7页
神经干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,在特定的条件下可以分化形成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。神经再生参与多种神经系统疾病的恢复,如脑卒中和阿尔茨海默病等。神经再生在成年哺乳动物脑内终身存在,主要... 神经干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,在特定的条件下可以分化形成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。神经再生参与多种神经系统疾病的恢复,如脑卒中和阿尔茨海默病等。神经再生在成年哺乳动物脑内终身存在,主要包括神经干细胞的增殖、迁移、分化及新生神经元整合至神经环路4个阶段。神经干细胞的增殖分化等行为高度依赖于其生长的微环境,即神经干细胞微环境(niche)。神经干细胞niche主要包括:与神经干细胞相邻的支持细胞、细胞因子、细胞外基质和微血管网等。深入了解神经干细胞niche各组分对于神经再生的作用,对于临床神经系统疾病的治疗具有重要意义。本综述将对神经干细胞niche及其与神经干细胞命运调控的关系做简要概述。 展开更多
关键词 微环境 神经再生 神经干细胞 细胞因子 细胞外基质
血清与全反式维甲酸对神经干细胞分化及突起生长的作用差异 预览
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作者 赵海霞 任丽伊 +3 位作者 左璇 李云竹 李淑蓉 苏炳银 《解剖学杂志》 CSCD 2018年第6期667-670,755共5页
目的:比较血清与全反式维甲酸(RA)2种诱导条件对神经干细胞分化及神经元突起生长作用的差异。方法:取E12.5d的胚胎小鼠皮层分离培养得到神经干细胞,然后分别用低浓度2%的血清和1μmol/L RA诱导神经干细胞分化3d和7d,用免疫荧光鉴定神经... 目的:比较血清与全反式维甲酸(RA)2种诱导条件对神经干细胞分化及神经元突起生长作用的差异。方法:取E12.5d的胚胎小鼠皮层分离培养得到神经干细胞,然后分别用低浓度2%的血清和1μmol/L RA诱导神经干细胞分化3d和7d,用免疫荧光鉴定神经干细胞分化特征。结果:RA诱导组中的神经元比例显著高于血清诱导组,长期诱导至7d其仍保持较高的水平,但其星形胶质细胞比例明显低于血清诱导组;随着诱导时间的延长,RA诱导组中神经元突起的长度和数目也都显著长于和高于血清诱导组;另外,血清和RA诱导形成的胶质细胞的形态特征不一致。结论:RA相较于血清更利于诱导神经元的分化以及突起的生长,而血清更利于诱导星形胶质细胞的分化。 展开更多
关键词 神经干细胞 分化 突起生长 血清 全反式维甲酸
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中医药调控Notch信号通路影响神经干细胞增殖分化研究进展
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作者 王俊杰 楼琦 +2 位作者 石巧娟 刘喆 杜月光 《中华中医药学刊》 北大核心 2018年第2期408-411,共4页
神经干细胞具有增殖和分化能力,对于脑内神经再生和修复起到关键作用,受到多条信号通路和各种因素的调控,其中Notch信号通路与神经干细胞的增殖分化关系密切。从中药复方、单味中药有效成分、针刺干预三方面,综合评述基于Notch信号... 神经干细胞具有增殖和分化能力,对于脑内神经再生和修复起到关键作用,受到多条信号通路和各种因素的调控,其中Notch信号通路与神经干细胞的增殖分化关系密切。从中药复方、单味中药有效成分、针刺干预三方面,综合评述基于Notch信号通路的中医药影响神经干细胞增殖分化的基础研究,并对今后的发展趋势进行探讨。 展开更多
关键词 中医药 NOTCH信号通路 神经干细胞 增殖 分化
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